Name: synthesis of functionalized magnetic nanoparticles, their conjugation with the siderophore feroxamine and its evaluation for bacteria detection
Uploaded: 2020-06-16T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Synthesis of Functionalized Magnetic Nanoparticles, Their Conjugation with the Siderophore Feroxamine and its Evaluation for Bacteria Detection at JoVE.com

Les auteurs remercient le professeur Klaus Hantke (Université de Tübingen, Allemagne) d’avoir gentiment fourni les souches d’enteropolitica de Yersinia utilisées dans ce travail. Ces travaux ont été soutenus par des subventions AGL2015-63740-C2-1/2-R et RTI2018-093634-B-C21/C22 (AEI/FEDER, UE) de l’Agence d’État pour la recherche (AEI) d’Espagne, cofinancé par le programme FEDER de l’Union européenne. Les travaux de l’Université de Saint-Jacques-de-Compostelle et de l’Université d’A Coruña ont également été soutenus par des subventions GRC2018/018, GRC2018/039 et ED431E 2018/03 (groupe stratégique CICA-INIBIC) de Xunta de Galicia. Enfin, nous tenons à remercier Nuria Calvo pour sa grande collaboration en faisant la voix-off de ce protocole vidéo.

REMARQUE : Pour les réactions effectuées dans des conditions d’atmosphère inertes, toute la verrerie a été préalablement séchée dans un four à 65 °C, scellée avec un septum en caoutchouc et purgée avec de l’argon trois fois.
1. Synthèse de nanoparticules magnétiques conjuguées à la feroxamine
<ol><li>Synthèse des nanoparticules magnétiques Fe3O4 (MNPs)<ol>
<li>Ajouter 0,5 g de Fe(acac)3 dans un flacon en verre de 20 mL, puis mélanger av...

<ol>
	<li>Pan, Y., Du, X., Zhao, F., Xu, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Magnetic+nanoparticles+for+the+manipulation+of+proteins+and+cells.">Magnetic nanoparticles for the manipulation of proteins and cells.</a> Chemical Society Reviews. 41 (7), 2912-2942 (2012).</li><li>Zheng, T., Nolan, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Siderophore-based+detection+of+Fe(III)+and+microbial+pathogens.">Siderophore-based detection of Fe(III) and microbial pathogens.</a> Metallomics. 4, 866-880 (2012).</li><li>Hider, R. 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N., Lazor, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterisation+of+a-C:H+and+oxygen-containing+Si:C:H+films+by+Raman+spectroscopy+and+XPS.">Characterisation of a-C:H and oxygen-containing Si:C:H films by Raman spectroscopy and XPS.</a> Journal of Solid State Chemistry. 174 (4), 424-430 (2003).</li><li>Gonz&#225;lez, P., Serra, J., Liste, S., Chiussi, S., Le&#243;n, B., P&#233;rez-Amor, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Raman+spectroscopic+study+of+bioactive+silica+based+glasses.">Raman spectroscopic study of bioactive silica based glasses.</a> Journal of Non-Crystalline Solids. 320 (12), 92-99 (2003).</li><li>Veres, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterisation+of+a-C:H+and+oxygen-containing+Si:C:H+films+by+Raman+spectroscopy+and+XPS.">Characterisation of a-C:H and oxygen-containing Si:C:H films by Raman spectroscopy and XPS.</a> Diamond and Related Materials. 14 (3-7), 1051-1056 (2005).</li><li>You, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualization+and+investigation+of+Si-C+covalent+bonding+of+single+carbon+nanotube+grown+on+silicon+substrate.">Visualization and investigation of Si-C covalent bonding of single carbon nanotube grown on silicon substrate.</a> Applied Physics Letters. 93 (10), 103111-103113 (2008).</li><li>Graf, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=XPS+and+NEXAFS+studies+of+aliphatic+and+aromatic+amine+species+on+functionalized+surfaces.">XPS and NEXAFS studies of aliphatic and aromatic amine species on functionalized surfaces.</a> Surface Science. 603 (18), 2849-2860 (2009).</li><li>Michaeli, W., Blomfield, C. J., Short, R. D., Jones, F. R., Alexander, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+study+of+HMDSO/O2+plasma+deposits+using+a+high-sensitivity+and+-energy+resolution+XPS+instrument:+curve+fitting+of+the+Si+2p+core+level.">A study of HMDSO/O2 plasma deposits using a high-sensitivity and -energy resolution XPS instrument: curve fitting of the Si 2p core level.</a> Applied Surface Science. 137 (1-4), 179-183 (2002).</li><li>Liana, A. E., Marquis, C. P., Gunawan, C., Gooding, J. J., Amal, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=T4+bacteriophage+conjugated+magnetic+particles+for+E.+coli+capturing:+Influence+of+bacteriophage+loading,+temperature+and+tryptone.">T4 bacteriophage conjugated magnetic particles for E. coli capturing: Influence of bacteriophage loading, temperature and tryptone.</a> Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. 151, 47-57 (2017).</li><li>Fang, W., Han, C., Zhang, H., Wei, W., Liu, R., Shen, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+amino-functionalized+magnetic+nanoparticles+for+enhancement+of+bacterial+capture+efficiency.">Preparation of amino-functionalized magnetic nanoparticles for enhancement of bacterial capture efficiency.</a> RSC Advances. 6, 67875-67882 (2016).</li><li>Zhan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+removal+of+pathogenic+bacteria+and+viruses+by+multifunctional+amine-modified+magnetic+nanoparticles.">Efficient removal of pathogenic bacteria and viruses by multifunctional amine-modified magnetic nanoparticles.</a> Journal of Hazardous Materials. 274, 115-123 (2014).</li></ol>

Ce protocole décrit la synthèse d’un conjugué entre les nanoparticules magnétiques et la feroxamine de siderophore par liaison covalente. La synthèse de la magnétite a été réalisée à l’aide du protocole rapporté par Pinna et coll.5 suivi d’un revêtement de silice pour protéger le noyau magnétique de la corrosion dans les systèmes aqueux, pour minimiser l’agrégation et pour fournir une surface appropriée pour la fonctionnalisation6. Le processus de ...

Les méthodes de détection des bactéries utilisant MNP sont basées sur la reconnaissance moléculaire des anticorps, des aptamères, de la bioprotéine, des hydrates de carbone conjugués au MNP par la bactérie pathogène1. Compte tenu du fait que les siderophores sont reconnus par des récepteurs spécifiques sur la membrane externe des bactéries, ils pourraient également être liés au MNP pour augmenter leur spécificité2. Les siderophores sont de petites molécules organiques impliquées dans l’absorption de Fe3+ par les bactéries3,4. La préparation des conjugués entre les siderophores et le MNP ainsi que leur évaluation pour la capture et l’isolement des bactéries n’a pas encore été rapportée.
L’une des étapes cruciales de la synthèse des conjugués de nanoparticules magnétiques avec de petites molécules est la sélection du type de lien ou d’interaction entre elles pour s’assurer que la petite molécule est attachée à la surface du MNP. Pour cette raison, la procédure de préparation du conjugué entre les nanoparticules magnétiques et la feroxamine — le siderophore reconnu par Yersinia enterocolitica— a été axée sur la génération d’une surface modifiable du MNP pour permettre de la relier covalent au siderophore par la chimie carbodiimide. Afin d’obtenir une nanoparticule de magnétite uniforme (MNP) et d’améliorer la nucléation et le contrôle de la taille, une réaction de solvolyse avec de l’alcool benzyle a été effectuée dans un bloc thermique sans secouer5. Ensuite, un revêtement de silice a été généré par la méthode Stöber pour conférer la protection et améliorer la stabilité de la suspension des nanoparticules dans les milieux aqueux6. Compte tenu de la structure de la feroxamine, l’introduction de groupes d’amines est nécessaire pour produire des nanoparticules appropriées (MNP@SiO2@NH2) à conjuguer avec le siderophore. Ceci a été réalisé par condensation de (3-aminopropyl)triethoxysilane (APTES) avec les groupes d’alcool présents à la surface des nanoparticules modifiées de silice (MNP@SiO2) utilisant une méthode de sol-gel7.
En parallèle, le complexe de fer feroxamine(III) a été préparé par la complexation de la déféroxamine disponible dans le commerce avec l’acétonate d’acétonate d’acétyl de fer dans la solution aqueuse. N-succinylferoxamine, portant des groupes de succinyl qui agiront comme linkers, a été obtenu par la réaction de la feroxamine avec l’anhydride succinique.
La conjugaison entre MNP@SiO2@NH2 et N-succinylferoxamine pour donner MNP@SiO2@NH@Fa a été effectuée par la chimie carbodiimide en utilisant comme couplage réactifs benzotriazole-1-yl-oxy-tris-(dimethylamino)-phosphonium hexafluorophosphate (BOP) et 1-hydroxybenzotriazole (HOBt) dans un milieu de base doux pour activer le groupe acide terminal dans N-succinylferoxamine8.
Une fois que les MNP ont été caractérisés, nous avons évalué les capacités des nanoparticules magnétiques nues et fonctionnalisées pour capturer le type sauvage (WC-A) et un mutant de Y. enterocolitica manquant de récepteur de feroxamine FoxA (FoxA WC-A 12-8). Les députés ordinaires, les députés fonctionnalisés et les MNP@SiOconjugués 2@NH@Fa ont été autorisés à interagir avec chaque souche Y. enteropolitica. Les agrégats de bactéries conjuguées ont été séparés de la suspension bactérienne par l’application d’un champ magnétique. Les agrégats séparés ont été rincés deux fois avec du phosphate tamponné saline (PBS), re-suspendus dans PBS pour préparer des dilutions en série et puis, ils ont été plaqués pour le comptage des colonies. Ce protocole démontre chaque étape de la synthèse de MNP@SiO2@NH@Fa, la caractérisation structurelle de tous les intermédiaires et du conjugué, et un test de capture de bactérie comme un moyen facile d’évaluer la spécificité du conjugué par rapport aux intermédiaires. 9

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>1-Hydroxybenzotriazole hydrate 
			HOBT</td>
			<td>Acros</td>
			<td>300561000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2,2&#8242;-Bipyridyl</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D216305</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3-Aminopropyltriethoxysilane 99%</td>
			<td>Acros</td>
			<td>151081000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ammonium hydroxide solution 28% NH3</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>338818</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Benzotriazol-1-yloxytris(dimethylamino)-phosphonium hexafluorophosphate BOP Reagent</td>
			<td>Acros</td>
			<td>209800050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Benzyl alcohol</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>822259</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Deferoxamine mesylate salt &#62;92,5% (TLC)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D9533</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol, anhydrous, 96%</td>
			<td>Panreac</td>
			<td>131085</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethyl Acetate, Extra Pure, SLR, Fisher Chemical</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iron(III) acetylacetonate 97%</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>F300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LB Broth (Lennox)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>L3022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N,N-Diisopropylethylamine, 99.5+%, AcroSeal</td>
			<td>Acros</td>
			<td>459591000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N,N-Dimethylformamide, 99.8%, Extra Dry, AcroSeal</td>
			<td>Acros</td>
			<td>326871000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pyridine, 99.5%, Extra Dry, AcroSeal</td>
			<td>Acros</td>
			<td>339421000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sephadex LH-20</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>LH20100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Succinic anhydride &#62;99%</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>239690</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tetraethyl orthosolicate &#62;99,0%</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>86578</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

synthesis of functionalized magnetic nanoparticles, their conjugation with the siderophore feroxamine and its evaluation for bacteria detection

Dans le présent travail, la synthèse des nanoparticules magnétiques, son revêtement avec SiO2, suivi de sa fonctionnalisation amine avec (3-aminopropyl)triethoxysilane (APTES) et sa conjugaison avec la dferoxamine, un siderophore reconnu par Yersinia enterocolitica, en utilisant un succinyl moiety comme un linker sont décrits.
Les nanoparticules magnétiques (MNP) de la magnétite (Fe3O4) ont été préparées par méthode solcothermale et enduites de SiO2 (MNP@SiO2) à l’aide du procédé Stöber suivi d’une fonctionnalisation avec APTES (MNP@SiO2@NH2). Puis, la feroxamine a été conjuguée avec le MNP@SiO2@NH2 par couplage carbodiimide pour donner MNP@SiO2@NH2@Fa. La morphologie et les propriétés du conjugué et des intermédiaires ont été examinées par huit méthodes différentes, y compris la diffraction des rayons X (XRD), la spectroscopie infrarouge à transformation Fourier (FT-IR), la spectroscopie Raman, la spectroscopie photoélectron à rayons X (XPS), la microscopie électronique de transmission (TEM) et la cartographie des rayons X dispersifs d’énergie (EDX). Cette caractérisation exhaustive a confirmé la formation du conjugué. Enfin, afin d’évaluer la capacité et la spécificité des nanoparticules, ils ont été testés dans un test de capture de bactéries à l’aide de Yersinia enterocolitica.

Une caractérisation structurelle exhaustive est effectuée afin de déterminer la morphologie et les propriétés de chaque intermédiaire et le conjugué final. À cette fin, les techniques XRD, FT-IR, Spectroscopie Raman, TGA, TEM, EDX mapping et XPS sont utilisées afin de démontrer la formation du conjugué. Les états d’oxydation des atomes à la surface des nanoparticules acquises par spectroscopie photoélectronique à rayons X (XPS) sont les données les plus pertinentes pour confirmer la formation de liaison...

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Synthesis of Functionalized Magnetic Nanoparticles, Their Conjugation with the Siderophore Feroxamine and its Evaluation for Bacteria Detection

Ce travail décrit des protocoles pour la préparation des nanoparticules magnétiques, son revêtement avec SiO2, suivi de sa fonctionnalisation d’amine avec (3-aminopropyl)triethoxysilane (APTES) et sa conjugaison avec la dferoxamine utilisant une moiety succinyl comme lieneur. Une description structurelle profonde de caractérisation et un test de bactéries de capture utilisant Y. enteropolitica pour toutes les nanoparticules intermédiaires et le conjugué final sont également décrits en détail.

Synthèse des nanoparticules magnétiques fonctionnalisées, leur conjugaison avec la feroxamine de Siderophore et son évaluation pour la détection des bactéries

In the present work, the synthesis of magnetic nanoparticles, its coating with SiO2, followed by its amine functionalization with ...

Les nanoparticules magnétiques sont des outils idéaux pour la science analytique et la nanométique en raison de leurs fortes propriétés magnétiques et de la fonctionnalisation facile de leur surface. Nous rapportons ici la première instance d’un conjugué entre les particules magnétiques fonctionnalisées d’amino de silice et la feroxamine de siderophore avec l’évaluation pour la capture du matériel photogénique. Lesrophores sont de petites molécules organiques qui jouent un rôle clé dans le mécanisme de participation du fer, et elles sont reconnues par des récepteurs membranaires externes spécifiques des bactéries.Cette vidéo affiche, étape par étape, un protocole efficace pour préparer les nanoparticules magnétiques de fer. Ensuite, ils ont été recouverts de silice pour protéger la dispersion et protéger le noyau magnétique. La surface du réacteur résultante a été fonctionnalisée avec des groupes d’amine.Synthèse de nanoparticules magnétiques conjuguées à la feroxamine. Ajouter 0,5 gramme de Fe(acac)3 dans un flacon de verre de 20 mL. Ensuite, mélanger avec un 10 mL d’alcool benzyle.Sonicate ce mélange pendant 2 minutes. Ensuite, transférer dans un bloc chauffant et chauffer à 180 degrés Centigrades pendant 72 heures. Rincer les nanoparticules avec 96% d’éthanol.Et centrifugeuse pendant 30 minutes. Séparez les nanoparticules du supernatant par attraction magnétique, à l’aide d’un aimant au néodymium. Jeter le solvant résiduel.Jeter le surnatant, en alternant avec la sonication, jusqu’à ce que le solvant semble clair. Préparer une suspension de 2 grammes de MNP en 80 millilitres d’isopropanol, ajouter 4 millilitres de 21% d’ammoniac, 7,5 millilitres d’eau distillée, et 0,56 millilitres de TEOS. Chauffer le mélange à 40 degrés Centigrades pendant 2 heures, en remuant continuellement.Puis, sonicate pendant 1 heure. Séparez le MNP avec un aimant, jetez le supernatant, dispersez-le en 30 millilitres d’isopropanol, ajoutez de l’ammoniac, de l’eau distillée et du TEOS, dans le même ordre que décrit précédemment. Chauffer le mélange à 40 degrés Centigrades pendant deux heures en remuant continuellement.Puis, sonicate pendant une heure. Retirez et lavez commodément la barre magnétique de remuer, pour récupérer tout le matériel. Jeter le supernatant et rincer les nanoparticules avec 96% d’éthanol trois fois, en alternance avec la sonication.Sécher les nanoparticules sous vide à température ambiante pendant 12 heures. Rincer 500 milligrammes de la MNP@SIO2 de l’étape précédente avec du diméthylformamide. Sonicate eux et jeter.Suspendre à nouveau les particules dans un flacon à fond rond, remuer à l’aide d’une barre magnétique et ajouter 9 millilitres d’APTES. Remuer le mélange à 60 degrés Centigrades pendant 12 heures. Jeter le supernatant et rincer les nanoparticules avec 96% d’éthanol trois fois, en alternance avec la sonication.Dissoudre 100 mg de déféoxamine, de sel de mesylate et 53,0 milligrammes d’acétytonate de fer dans 5 millilitres d’eau distillée. Remuer le mélange toute la nuit à température ambiante. Lavez le produit résultant trois fois avec 20 millilitres d’acétate d’éthyle dans un entonnoir de séparation.Retirer le solvant organique sous vide. Congeler-sécher la phase aqueuse pour se permettre la feroxamine et un solide rouge. Ajouter 350 milligrammes d’anhydride succinique à une solution de 100 mg de feroxamine en 5 millilitres de pyridine dans un flacon rond de 50 millilitres.Remuer le mélange qui en résulte, à température ambiante, pendant 16 heures. Retirer l’excès de pyridine sous pression réduite. Dissoudre la réaction brute en 3 millilitres de méthanol.Transférer la solution méthanol dans une colonne LH-20 et elute à 0,5 mL/minute. Recueillir la fraction rouge et retirer le méthanol sous vide. Rincer 30 mg de nanoparticules fonctionnalisées à l’amine sèche deux fois avec du DMF et sonifier les nanoparticules dans un flacon Erlenmeyer de 100 millilitres pendant 30 minutes.Préparer une solution de 200 milligrammes de N-succinylferoxamine, 173 milligrammes Benzotriazole 1-yl-oxy-tris-phosphonium hexafluorophosphate BOP, 46 mg 1-hydroxybenzotriazole HOBt et 128,8 milligrammes N, N-diisopropylethylamine DIPEA, en 10 mL de DMF, dans un flacon rond-fond de 50 millilitres. Suspendre les MNP@SiO2@NH2 préalablement rincées dans un 3 millilitres de DMF, sous sonication dans des conditions sèches et sans oxygène. Utilisez l’atmosphère argon.Ajouter, dropwise, mélanger A pour mélanger B.Shake le mélange final, à l’aide d’un shaker orbital, à température ambiante pendant la nuit. Séparez le conjugué résultant de la suspension à l’aide d’un aimant. Analyse bactérienne avec des souches de Y.enterocolitica pour quantifier l’isolement et la capture des bactéries pathogènes avec des nanoparticules.Préparer une suspension de toutes les nanoparticules intermédiaires et le conjugué final dans PBS à 1 mg/mL dans les tubes stériles. Préparez une culture de Y.entorocolitica dans 5 mL de Luria Bertani, LB, bouillon pendant la nuit. Préparez un bouillon de sy trypcase déficient en fer de 5 mL, BST, par l’ajout de 50 microlitres de solution trypcase 2, 2-bipyridyl.Inoculer les 5 millilitres de bouillon TSB déficient en fer avec 50 microlitres de la culture nocturne de Y.enterocolitica. Incuber à 37 degrés Centigrades avec agitation jusqu’à ce qu’un OD600 de 0,5 à 0,8 soit atteint. Prenez un 100 microlitres de la culture de nuit et diluez-le dans un tube contenant 900 microlitres de PBS pour obtenir la première dilution 1/10.Ensuite, préparez une dilution 1/100 de la première dilution en utilisant la même procédure pour obtenir une concentration de cellules bactériennes à 10 à la puissance de 6 unités de formation de colonie par millilitre approximativement. Ajouter 100 microlitres de suspension de nanoparticules et 1 mg/mL à 1 millilitre de la dilution de 1/100 bactéries. Séparez les agrégats de bactéries MNP, en utilisant un aimant, jetez, soigneusement, le surnatant.Rincer les nanoparticules séparées deux fois à l’aide d’un PBS de 1 millimètre à l’aide d’un vortex. Préparez quatre dilutions successives de 1/10 de l’ancienne suspension, jusqu’à un 10 à la puissance de moins 4 dilution. Plaque 10 microlitres de chaque dilution sur les plaques d’agar TS.Photographiez la plaque avec un mériseur de gel en mode epi blanc. Traiter l’image, à l’aide du logiciel pratique, pour amplifier un endroit pour compter le nombre de colonies individuelles. Pour confirmer la formation du lien covalent entre les nanoparticules et le siderophore, nous employons la spectroscopie FT-IR Raman pour surveiller la synthèse, en observant comment de nouvelles bandes apparaissent en accord avec un nouveau groupe fonctionnel à chaque étape.La microscopie TEM et SEM a été utilisée pour observer la morphologie et la taille des particules. Analyse thermogravimétrique pour mesurer la perte de poids due à l’ajout de matières organiques. Et XPS nous permet d’analyser les différents états d’oxydation des atomes à la surface et de confirmer la formation de liaisons covalentes.Enfin, nous avons utilisé tous les intermédiaires sur le conjugué final pour tester sa capacité à capturer les bactéries, afin d’établir leurs propriétés en tant que biocapteur. Ce protocole a été conçu pour tirer parti de la biocompatibilité élevée des nanoparticules de magnétite. Le revêtement avec de la silice améliore la dispersion et protège le noyau magnétique contre la dégradation dans les médias aqueux.Et aussi donner une surface réactive à fonctionnaliser avec des groupes d’amine qui sont nécessaires pour lier covalently un siderophore modifié acide par la chimie du carbodiimide. Dans ce cas, N-succynilferoxamine. La capacité conjuguée de capture des bactéries a été testée et, par conséquent, un faible nombre de colonies a été trouvée, sans différence significative avec les intermédiaires en raison d’une interaction spécifique sur les effets encombrants présentés dans la suspension bactérienne PBS.

Research

JoVE Journal

Chemistry

Microwave-assisted Intramolecular Dehydrogenative Diels-Alder Reactions for the Synthesis of Functionalized Naphthalenes/Solvatochromic Dyes

Assistée par micro-déshydrogénation intramoléculaire de Diels-Alder pour la synthèse des naphtalènes fonctionnalisés / Colorants solvatochromes

Functionalized naphthalenes have applications in a variety of research fields ranging from the synthesis of natural or biologically active molecules to ...

Recherche

Chimie

Anticancer Metal Complexes: Synthesis and Cytotoxicity Evaluation by the MTT Assay

Complexes métalliques anticancéreux: Synthèse et évaluation de la cytotoxicité par le dosage au MTT

Titanium (IV) and vanadium (V) complexes are highly potent anticancer agents. A challenge in their synthesis refers to their hydrolytic instability; ...

Amide Coupling Reaction for the Synthesis of Bispyridine-based Ligands and Their Complexation to Platinum as Dinuclear Anticancer Agents

Amide Réaction de couplage pour la synthèse de ligands à base de bispyridine et leur complexation Platinum comme dinucléaires agents anticancéreux

Amide coupling reactions can be used to synthesize bispyridine-based ligands for use as bridging linkers in multinuclear platinum anticancer drugs. ...

Synthesis and Characterization of Functionalized Metal-organic Frameworks

Cadres de synthèse et la caractérisation de fonctionnalisé métal-organique

Metal-organic frameworks have attracted extraordinary amounts of research attention, as they are attractive candidates for numerous industrial and ...

Synthesis of Indoxyl-glycosides for Detection of Glycosidase Activities

Indoxyl glycosides proved to be valuable and versatile tools for monitoring glycosidase activities. Indoxyls are released by enzymatic hydrolysis and are ...

A Simple Method for the Size Controlled Synthesis of Stable Oligomeric Clusters of Gold Nanoparticles under Ambient Conditions

Une méthode simple pour la Taille synthèse contrôlée de Stable oligomères grappes de nanoparticules d&#39;or dans des conditions ambiantes

Reducing dilute aqueous HAuCl4 with sodium thiocyanate (NaSCN) under alkaline conditions produces 2 to 3 nm diameter nanoparticles. Stable grape-like ...

Preparation of Stable Bicyclic Aziridinium Ions and Their Ring-Opening for the Synthesis of Azaheterocycles

Préparation des Ions Aziridinium bicycliques Stable et leur ouverture pour la synthèse de Azaheterocycles

Bicyclic aziridinium ions were generated by the removal of an appropriate leaving group through internal nucleophilic attack by nitrogen atom in the ...

Bio-inspired Polydopamine Surface Modification of Nanodiamonds and Its Reduction of Silver Nanoparticles

Modification de la Surface de Polydopamine bio-inspirée des Nanodiamonds et sa réduction de nanoparticules d’argent

Surface functionalization of nanodiamonds (NDs) is still challenging due to the diversity of functional groups on the ND surfaces. Here, we demonstrate a ...

Methionine Functionalized Biocompatible Block Copolymers for Targeted Plasmid DNA Delivery

Copolymères de bloc biocompatibles biocompatibles de methionine pour la livraison ciblée de Plasmid d'ADN

Reversible addition-fragmentation chain transfer (RAFT) polymerization integrates the advantages of radical polymerization and living polymerization. This ...

Synthesis and Characterization of Amphiphilic Gold Nanoparticles

Synthèse et caractérisation des nanoparticules d'or amphiphiles

Gold nanoparticles covered with a mixture of 1-octanethiol (OT) and 11-mercapto-1-undecane sulfonic acid (MUS) have been extensively studied because of ...