Name: repeated orotracheal intubation in mice
Uploaded: 2020-03-27T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Repeated Orotracheal Intubation in Mice at JoVE.com

يشكر المؤلفون لوسيا روساس ولورين دوليتل وليزا جوزيف وليندسي فيرغسون على مساعدتهم التقنية ومختبر الجامعة للموارد الحيوانية لدعمهم لرعاية الحيوانات. يتم تمويل هذا العمل من قبل المعاهد القومية للصحة T35OD010977 وR01-HL102469.

وقد وافقت اللجنة المؤسسية لرعاية الحيوانات واستخدامها (IACUC) التابعة لجامعة ولاية أوهايو على جميع الأنشطة الحيوانية الموصوفة هنا، وأجريت في مرافق معتمدة من AAALAC.
1- إعداد الإجراءات
<ol><li>بناء منصة التنبيب. لتحقيق المنحدر منصة مناسبة، استخدم ثلاثة بوصة (7.6 سم) الموثق 3-حلقة. أضعا...

<ol>
	<li>Spoelstra, E. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+and+simple+method+for+endotracheal+intubation+of+mice.">A novel and simple method for endotracheal intubation of mice.</a> Laboratory Animals. 41 (1), 128-135 (2007).</li><li>Rivera, B., Miller, S. R., Brown, E. M., Price, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Novel+Method+for+Endotracheal+Intubation+of+Mice+and+Rats+Used+in+Imaging+Studies.">A Novel Method for Endotracheal Intubation of Mice and Rats Used in Imaging Studies.</a> Contemporary Topics in Laboratory Animal Science. 44 (2), 52-55 (2005).</li><li>Sparrowe, J., Jimenez, M., Rullas, J., Martinez, A. E., Ferrer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Refined+Intratracheal+Intubation+Technique+in+the+Mouse,+Complete+Protocol+Description+for+Lower+Airway+Models.">Refined Intratracheal Intubation Technique in the Mouse, Complete Protocol Description for Lower Airway Models.</a> Global Journal of Animal Scientific Research. 3 (2), 363-369 (2015).</li><li>Deyo, D. J., Wei, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Novel+Method+of+Intubation+and+Ventilation+in+Mice.">A Novel Method of Intubation and Ventilation in Mice.</a> Anesthesia &amp; Analgesia. 88 (2), 179 (1999).</li><li>Vergari, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+method+of+orotracheal+intubation+in+mice.">A new method of orotracheal intubation in mice.</a> European Review for Medical and Pharmacological Sciences. 8 (3), 103-106 (2004).</li><li>Brown, R. H., Walters, D. M., Greenberg, R. S., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+of+endotracheal+intubation+and+pulmonary+functional+assessment+for+repeated+studies+in+mice.">A method of endotracheal intubation and pulmonary functional assessment for repeated studies in mice.</a> Journal of Applied Physiology. 87 (6), 2362-2365 (1999).</li><li>Das, S., MacDonald, K., Chang, H. S., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Simple+Method+of+Mouse+Lung+Intubation.">A Simple Method of Mouse Lung Intubation.</a> Journal of Visualized Experiments. (73), e50318 (2013).</li><li>Limjunyawong, N., Mock, J., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Instillation+and+Fixation+Methods+Useful+in+Mouse+Lung+Cancer+Research.">Instillation and Fixation Methods Useful in Mouse Lung Cancer Research.</a> Journal of Visualized Experiments. (102), e52964 (2015).</li><li>Qin, W., Baran, U., Wang, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lymphatic+response+to+depilation-induced+inflammation+assessed+with+label-free+optical+lymphangiography.">Lymphatic response to depilation-induced inflammation assessed with label-free optical lymphangiography.</a> Lasers in Surgery and Medicine. 47 (8), 669-676 (2015).</li><li>McGovern, T. K., Robichaud, A., Fereydoonzad, L., Schuessler, T. F., Martin, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+Respiratory+System+Mechanics+in+Mice+using+the+Forced+Oscillation+Technique.">Evaluation of Respiratory System Mechanics in Mice using the Forced Oscillation Technique.</a> Journal of Visualized Experiments. (75), e50107 (2013).</li></ol>

التنبيب باستخدام تقنية التصور تراكل عبر الجلد يقدم نهجا المكرر لطريقة شق الجلد القياسية. مع إيلاء اهتمام خاص لعدة خطوات رئيسية، يمكن أن يتحقق التنبيب بسهولة وبسرعة. يجب وضع الحيوان مباشرة في الردورة الظهرية على منصة التنبيب مع الماوس المضمون في تراجع لطيف. وهذا سوف تمتد الحيوان إلى محاذا?...

فأر المختبر هو نموذج الحيوان المشترك لأمراض الجهاز التنفسي البشرية. وهكذا ، هناك العديد من الطرق المنشورة لتنبيب الماوس لغرض غرس العلاجات وقياس ميكانيكا الجهاز التنفسي. معظم الإجراءات الموصوفة تتطلب تصور الجلاوطي من خلال تجويف الفم مع معدات متخصصة مثل منظار الحنجرة أو مصدر ضوء الألياف البصرية1،2، 3،,4،5،6،7.3 ومع ذلك ، يمكن أن يكون هذا صعبًا عندما تكون هناك حاجة إلى قنية كبيرة نسبيًا ، لأنها يمكن أن تحجب وجهة نظر الباحث. وقد عالج ليمجونياوونغ وآخرون8 هذا القلق بطريقة التنبيب التي يتم فيها إجراء شق جلدي صغير على طول خط الوسط في الرقبة البطنية مما يسمح بتصور القصبة الهوائية. بعد الإجراء ، يتم إغلاق الشق بلاصق للأنسجة.
بالنسبة للدراسات التي تتطلب عمليات تنبيب متكررة ، يتطلب التقطيع والإغلاق المتتالي لهذا الموقع إزالة الهوامش الجلدية وصدمة الأنسجة إلى الرقبة البطنية. الغرض من نهج تصور التراشف التراجيدي عبر الجلد للتنبيب عن طريق الفم هو توفير تقنية مكررة وغير باضعة مناسبة خصيصًا لدراسات التنبيب المتكررة وكذلك أحداث تنبيب واحد في الفئران.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>18Gx1 1/4&#34; intravenous catheter, Safelet</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>#14-841-14</td>
			<td>Cannula for intubation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70% ethanol, 10L</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>25467025</td>
			<td>Cleaning cannula</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Abrasive paper (sandpaper)</td>
			<td>Porter-Cable</td>
			<td>74001201</td>
			<td>Cannula preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AnaSed (xylazine sterile solution) injection (100 mg/ml)</td>
			<td>Akorn Animal Health</td>
			<td>NDC# 59399-111-50</td>
			<td>Anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blue labeling tape (0.5 in x 14 yds)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>15966</td>
			<td>Restraint on intubation platform</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Braided silk suture without needle, nonsterile, (3-0)</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td>Item #1007842</td>
			<td>Intubation platform</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Deltaphase Isothermal Pad</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>39DP</td>
			<td>Mouse thermoregulation and recovery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Deltaphase Operating Board</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>39OP</td>
			<td>Mouse recovery (prior to extubation)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Distilled water</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>15230253</td>
			<td>Cleaning mouse following depilation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eye Scissors, angled, sharp/sharp</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>72-8437</td>
			<td>Cannula preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FlexiVent (FX Module 2)</td>
			<td>Scireq</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Record lung function data (not required to perform procedure, used in this study to validate procedure)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze sponges</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>13-761-52</td>
			<td>Hair removal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heavy-Duty 3&#34; 3-Ring View Binders</td>
			<td>Staples</td>
			<td>24690CT</td>
			<td>Intubation platform</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Instat Software</td>
			<td>Graphpad</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Statistical analysis software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin syringe (0.5 cc, U100)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>329461</td>
			<td>Anesthesia administration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine HCl Injection, USP (100 mg/ml)</td>
			<td>Llyod Laoratories</td>
			<td>List No. 4871</td>
			<td>Anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lung inflation bulb</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>72-9083</td>
			<td>Confirm cannula placement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Forceps, Curved, Smooth</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>72-0445</td>
			<td>Retract tongue and create tension on neck for cannula visualization</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nair (hair removal lotion), 9 oz bottle</td>
			<td>Church &#38; Dwight</td>
			<td>42010440</td>
			<td>Hair removal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile saline (0.9%), 10 ml</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>NC9054335</td>
			<td>Anesthesia, cleaning skin following hair removal</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

repeated orotracheal intubation in mice

يصف الأدب عدة طرق لتنبيب الماوس التي تتطلب إما تصور الجلاوطي من خلال تجويف الفم أو شق في الرقبة البطنية لتأكيد مباشر لوضع قنية في القصبة الهوائية. ويمكن أن تشكل الصعوبة النسبية أو صدمة الأنسجة الناجمة عن هذه الإجراءات عائقاً أمام قدرة المحقق على إجراء دراسات طولية. توضح هذه المقالة تقنية يسمح فيها التلاعب الجسدي للفأرة بعد استخدام مزيل الشعر لإزالة الشعر من الرقبة البطنية بالتصور عبر الجلد للالقصبة الهوائية لتنبيب الأوروتراكفيل بغض النظر عن درجة الجلد تصبغ. هذه الطريقة غير ضارة بالموضوع وتتحقق بسهولة مع فهم محدود لتشريح المورين. يسهل هذا النهج المكرر التنبيب المتكرر ، والذي قد يكون ضروريًا لمراقبة تطور المرض أو غرس العلاجات. قد يؤدي استخدام هذه الطريقة إلى تقليل عدد الحيوانات والمهارة التقنية اللازمة لقياس وظائف الرئة في نماذج الماوس من أمراض الجهاز التنفسي.

الرصد التسلسلي لوظيفة الرئة الأساسية تم تنبيب أنثى بالب/ج البالغة من العمر ثمانية عشر أسبوعًا وفئران C57BL/6 البالغة من العمر 10 أسابيع (n = 3 من كل سلالة) باستخدام الطريقة الموصوفة في اليوم 0 و3 و10 و17. بعد التنبيب في كل يوم ، تم توصيل هذا الموضوع بجهاز التنفس الصناعي الميكانيكي المزود ب...

Watch this Scientific Journal Video about Repeated Orotracheal Intubation in Mice at JoVE.com

Repeated Orotracheal Intubation in Mice

الهدف من هذه المقالة هو وصف طريقة مكررة من تنبيب فأرالمختبر. هذه الطريقة غير الغازية ، وبالتالي ، مثالية للدراسات التي تتطلب الرصد التسلسلي لوظيفة الجهاز التنفسي و / أو غرس العلاجات في الرئة.

التنبيب المتكرر للأوتراكشفاء في الفئران

The literature describes several methods for mouse intubation that either require visualization of the glottis through the oral cavity or incision in the ...

سيسمح هذا البروتوكول للباحثين بإجراء قياسات متكررة لوظائف الرئة في الفئران الفردية ، مما يقلل من التباين التجريبي ويقلل عدد الفئران اللازمة لكل تجربة. الميزة الرئيسية لهذا البروتوكول هو أنه لا يتطلب تصور القصبة الهوائية من خلال تجويف الفم أو تشريح الصدمة من الرقبة للانتبان. هذه الطريقة سوف تكون ذات قيمة خاصة للباحثين دراسة أمراض الرئة المزمنة والتقدمية مثل الربو، COPD، انتفاخ الرئة، والتليف الرئوي.إن العرض المرئي لهذا البروتوكول أمر بالغ الأهمية لأن فهم كيفية تحديد القصبة الهوائية من خلال جلد الرقبة البطنية أمر أساسي لهذه الطريقة. إظهار التقنية مع أندرو نيلسون ستكون كيت نولان، طبيبة بيطرية من مختبري. لإنشاء منصة الاحتضان، أضعاف طول 15-20 سم من الحرير 3-0 في نصف وشريط نهايات الخيط إلى أعلى من ثلاثة بوصة ثلاث حلقات الموثق.حدد قنية من الحجم والطول المناسبين وقم بقطع شطبة عند طرف القسطرة. سلاسة سطح القطع مع ورقة جلخ لخلق طرف مدورة وجعل بلطف منحنى طفيف في القنية ما يقرب من سنتيمتر واحد من شطبة. عندما تكون المواد جاهزة، تأكد من عدم وجود استجابة لقرصة إصبع في فأر تخدير وربط القاطعات العليا حول خيط الحرير في الجزء العلوي من سطح الزاوية من المنصة لتعليق الماوس في موقف supine.مرة واحدة يتم وضع الماوس بشكل مباشر في إعادة شغل الظهر، فهم بلطف قاعدة الذيل وتراجع الذيل نحو الجدول. ضع قطعة من الشريط فوق قاعدة الذيل لتأمين الماوس وتطبيق كريم إزالة الشعر على منطقة عنق الرحم البطنية. بعد 30 إلى 45 ثانية، استخدم الشاش الجاف لإزالة الكريم وشطف الجلد بالماء المحلى أو المقطر.باستخدام ملقط في اليد غير المهيمنة، تراجع بلطف اللسان بطريقة تفتح الفم بما فيه الكفاية لإدخال القنية. مع اليد المهيمنة، تقدم القنية في الفم بحيث النهاية التي هي هد إلى الانحناء طفيف هو ضد سقف فم الحيوان. الافراج عن اللسان وشريحة الحافة المسطحة من ملقط مغلقة caudally على طول الرقبة البطنية حتى يتم التوصل إلى مانوبيوم إلى تشريد الغدد اللعابية بشكلٍ ثَمَيَّة وتسطح العضلات التي تغطي القصبة الهوائية.سوف تظهر القصبة الهوائية عبر الجلد كخط أبيض. إذا لزم الأمر، قم بتدوير ملقط في اتجاه القحف مع الحفاظ على التوتر على الجلد في اتجاه السد للتسبب في الغدد اللعابية المشردة بشكل عرضي إلى ذروتها وخلق المزيد من التباين حول القصبة الهوائية. Supinating اليد المهيمنة مع انثناء في وقت واحد من المعصم، وتقدم قنية في حين الصيد في وقت واحد غيض من قعة من القنية.إذا تم وضع القنب بشكل صحيح ، سيتم ملاحظته داخل القصبة الهوائية. لتأكيد الموضع المناسب، قم بتوصيل لمبة تضخم الرئة بالقنية ومراقبة التوسع الصدري مع الاكتئاب المتزامن للجهاز. دون إزاحة القنية، فك بعناية قاطعة الماوس من منصة الاحتضان ونقل الماوس إلى منصة أفقية، ثم نعلق على كانولا إلى محول على جهاز التنفس الصناعي، وبعد تضخم عميق، تهوية الماوس لمدة 60 ثانية قبل قياس مقاومة الجهاز التنفسي.بمجرد اكتمال الإجراء، قم بنقل الماوس إلى منصة دافئة وتوفير التحفيز المستمر عن طريق قرصات إصبع خفيف أو ذيل لتشجيع التنفس التلقائي. مرة واحدة لوحظ التنفس التلقائي، والاستمرار في مراقبة بصريا الحيوان. عندما يعود معدل التنفس إلى وضعها الطبيعي ، قم بإدراك القنية على مستوى المحور وسحب الأنبوب برفق بعيداً عن الماوس حتى تتم إزالة القنية تمامًا من فم الحيوان.مرة واحدة extubated، نقل الماوس إلى قفص الانتعاش نظيفة مع دعم الحرارة مع رصد حتى المتنقلة بالكامل. في هذه التجربة التمثيلية، تم قياس مقاومة الجهاز التنفسي في أيام 0 و 3 و 10 و 17، باستخدام تقنية التذبذب القسري بعد تضخم عميق إلى 25 سنتيمتر من الماء الذي تم احتوذه لمدة خمس و 60 ثانية من التهوية الميكانيكية. لم تلاحظ اختلافات كبيرة في مقاومة التنفس قياسها بين أي من النقاط الزمنية داخل كل سلالة، مما يشير إلى أن عدم وجود زيادة في مقاومة الجهاز التنفسي مع مرور الوقت يشير إلى عدم وجود التهاب كبير وظيفيا المرتبطة الصدمة الانتبيب في الجهاز التنفسي على مدى أربع نقاط زمنية متتالية.ويمكن استخدام هذا الإجراء الضمّن لتوفير الوصول إلى القصبة الهوائية لتركيب مواد تجريبية والرصد التسلسلي لوظيفة الجهاز التنفسي. تسمح هذه التقنية بتقييم وظائف الرئة دون استئصال القصبة الهوائية الغازي ، مما يسهل الرصد في نقاط زمنية متعددة في الأمراض المزمنة والتقدمية داخل نفس الماوس.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Novel Rescue Technique for Difficult Intubation and Difficult Ventilation

تقنية الرواية لانقاذ التنبيب الصعبة والعسيرة التهوية

We describe a novel non surgical technique to maintain oxygenation and ventilation in a case of difficult intubation and difficult ventilation, which ...

Transthoracic Echocardiography in Mice

ضربات القلب عبر الصدر في الفئران

In recent years, murine models have become the primary avenue for studying the molecular mechanisms of cardiac dysfunction resulting from changes in gene ...

Guidelines for Elective Pediatric Fiberoptic Intubation

مبادئ توجيهية لالتنبيب الاختيارية الالياف البصرية للأطفال

Fiberoptic intubation in pediatric patients is often required especially in difficult airways of syndromic patients i.e. Pierre Robin Syndrome. Small ...

Basic Surgical Techniques in the G&ouml;ttingen Minipig: Intubation, Bladder Catheterization, Femoral Vessel Catheterization, and Transcardial Perfusion

Basic Surgical Techniques in the GÃƒÆ’Ã‚Â¶ttingen Minipig: Intubation, Bladder Catheterization, Femoral Vessel Catheterization, and Transcardial Perfusion

التقنيات الجراحية الأساسية في غوتنغن Minipig : التنبيب ، قسطرة المثانة ، الفخذ قسطرة السفينة ، والإرواء Transcardial

The emergence of the G&ouml;ttingen minipig in research of topics such as neuroscience, toxicology, diabetes, obesity, and experimental surgery reflects ...

Endotracheal Intubation in Mice via Direct Laryngoscopy Using an Otoscope

Endotracheal Intubation in Mice via Direct Laryngoscopy Using an Otoscope

التنبيب الرغامي في الفئران<em&gt; عبر</em&gt; تنظير الحنجرة المباشر باستخدام منظار الأذن

Mice, both wildtype and transgenic, are the principal mammalian model in biomedical research currently. Intubation and mechanical ventilation are ...

A Simple Method of Mouse Lung Intubation

طريقة بسيطة لتركيب الانبوبة الرئة ماوس

A  simple procedure to intubate mice for pulmonary function measurements would  have several advantages in longitudinal studies with limited numbers or  ...

Noninvasive Intratracheal Intubation to Study the Pathology and Physiology of Mouse Lung

موسع داخل الرغامى التنبيب لدراسة علم الأمراض وعلم وظائف الأعضاء من الرئة ماوس

The use of a model that mimics the condition of lung diseases in humans is critical for studying the pathophysiology and/or etiology of a particular ...

Carotid Artery Infusions for Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Analysis of Taxanes in Mice

الحقن الشريان السباتي لوأضافا الدوائية وتحليل Taxanes في الفئران

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study ...

Intubation-mediated Intratracheal (IMIT) Instillation: A Noninvasive, Lung-specific Delivery System

Intubation-mediated Intratracheal IMIT Instillation: A Noninvasive, Lung-specific Delivery System

بوساطة التنبيب داخل الرغامى (IMIT) تقطير: وموسع والرئة محدد نظام تسليم

Respiratory disease studies typically involve the use of murine models as surrogate systems. However, there are significant physiologic differences ...

An Improved Method for Rapid Intubation of the Trachea in Mice

افضل طريقة لرابيد تنبيب القصبة الهوائية في الفئران

Despite some anatomical and physiological differences, mouse models continue to be an essential tool for studying human lung disease. Bleomycin toxicity ...