Name: repeated orotracheal intubation in mice
Uploaded: 2020-03-27T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Repeated Orotracheal Intubation in Mice at JoVE.com

Forfatterne takker Lucia Rosas, Lauren Doolittle, Lisa Joseph og Lindsey Ferguson for deres tekniske bistand og University Laboratory Animal Resources for deres dyrepleje støtte. Dette arbejde er finansieret af NIH T35OD010977 og R01-HL102469.

Alle dyreaktiviteter, der er beskrevet her, er blevet godkendt af Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) fra The Ohio State University og blev udført i AAALAC-akkrediterede faciliteter.
1. Forberedelse af proceduren
<ol><li>Konstruere intubation platform. For at opnå den rette perronhældning skal du bruge en 3-binds3-ringbind med 3". Fold en 15−20 cm længde på 3-0 silke eller andet trådmateriale i halve og fastgør enderne af tråden til toppen af den skrå platform med ...

<ol>
	<li>Spoelstra, E. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+and+simple+method+for+endotracheal+intubation+of+mice.">A novel and simple method for endotracheal intubation of mice.</a> Laboratory Animals. 41 (1), 128-135 (2007).</li><li>Rivera, B., Miller, S. R., Brown, E. M., Price, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Novel+Method+for+Endotracheal+Intubation+of+Mice+and+Rats+Used+in+Imaging+Studies.">A Novel Method for Endotracheal Intubation of Mice and Rats Used in Imaging Studies.</a> Contemporary Topics in Laboratory Animal Science. 44 (2), 52-55 (2005).</li><li>Sparrowe, J., Jimenez, M., Rullas, J., Martinez, A. E., Ferrer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Refined+Intratracheal+Intubation+Technique+in+the+Mouse,+Complete+Protocol+Description+for+Lower+Airway+Models.">Refined Intratracheal Intubation Technique in the Mouse, Complete Protocol Description for Lower Airway Models.</a> Global Journal of Animal Scientific Research. 3 (2), 363-369 (2015).</li><li>Deyo, D. J., Wei, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Novel+Method+of+Intubation+and+Ventilation+in+Mice.">A Novel Method of Intubation and Ventilation in Mice.</a> Anesthesia &amp; Analgesia. 88 (2), 179 (1999).</li><li>Vergari, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+method+of+orotracheal+intubation+in+mice.">A new method of orotracheal intubation in mice.</a> European Review for Medical and Pharmacological Sciences. 8 (3), 103-106 (2004).</li><li>Brown, R. H., Walters, D. M., Greenberg, R. S., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+of+endotracheal+intubation+and+pulmonary+functional+assessment+for+repeated+studies+in+mice.">A method of endotracheal intubation and pulmonary functional assessment for repeated studies in mice.</a> Journal of Applied Physiology. 87 (6), 2362-2365 (1999).</li><li>Das, S., MacDonald, K., Chang, H. S., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Simple+Method+of+Mouse+Lung+Intubation.">A Simple Method of Mouse Lung Intubation.</a> Journal of Visualized Experiments. (73), e50318 (2013).</li><li>Limjunyawong, N., Mock, J., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Instillation+and+Fixation+Methods+Useful+in+Mouse+Lung+Cancer+Research.">Instillation and Fixation Methods Useful in Mouse Lung Cancer Research.</a> Journal of Visualized Experiments. (102), e52964 (2015).</li><li>Qin, W., Baran, U., Wang, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lymphatic+response+to+depilation-induced+inflammation+assessed+with+label-free+optical+lymphangiography.">Lymphatic response to depilation-induced inflammation assessed with label-free optical lymphangiography.</a> Lasers in Surgery and Medicine. 47 (8), 669-676 (2015).</li><li>McGovern, T. K., Robichaud, A., Fereydoonzad, L., Schuessler, T. F., Martin, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+Respiratory+System+Mechanics+in+Mice+using+the+Forced+Oscillation+Technique.">Evaluation of Respiratory System Mechanics in Mice using the Forced Oscillation Technique.</a> Journal of Visualized Experiments. (75), e50107 (2013).</li></ol>

Intubation ved hjælp af den transkutane trakeal visualisering teknik tilbyder en raffineret tilgang til standard hud indsnit metode. Med særlig vægt på flere vigtige trin, kan intubation nemt og hurtigt opnås. Dyret skal placeres helt og holdent i rygrecumbency på intubationsplatformen med musen fastgjort i skånsom tilbagetrækning. Dette vil udvide dyret i lodret justering og korrekt positionering til intubation. Desuden bør hårfjerningscremen ikke forblive i kontakt med dyrets hud i længere tid end 30−45 se...

Laboratoriemusen er en almindelig dyremodel for luftvejssygdomme hos mennesker. Således er der flere offentliggjorte metoder til museintubation med henblik på både inddrypning af behandlinger og måling af respiratoriske mekanik. De fleste af de beskrevne procedurer kræver visualisering af glottis gennem mundhulen med specialiseret udstyr såsom laryngoscope eller fiberoptisk lyskilde1,2,3,4,5,6,7. Dette kan dog være svært, når en relativt stor kanyle er påkrævet, da det kan skjule forskerens opfattelse. Limjunyawong et al.8 har behandlet denne bekymring med en metode til intubation, hvor en lille kutan snit er lavet langs midterlinjen af ventrale hals giver mulighed for visualisering af luftrøret. Efter proceduren lukkes snittet med vævsklæbemiddel.
For undersøgelser, der kræver hyppige gentagne intubationer, successive indsnit og lukning af dette websted kræver debridering af hudens margener og væv traumer til ventrale hals. Formålet med den transkutane trakeal visualisering tilgang til oral intubation er at give en raffineret, noninvasive teknik specielt egnet til gentagne intubation undersøgelser samt enkelt intubation begivenheder hos mus.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>18Gx1 1/4&#34; intravenous catheter, Safelet</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>#14-841-14</td>
			<td>Cannula for intubation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70% ethanol, 10L</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>25467025</td>
			<td>Cleaning cannula</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Abrasive paper (sandpaper)</td>
			<td>Porter-Cable</td>
			<td>74001201</td>
			<td>Cannula preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AnaSed (xylazine sterile solution) injection (100 mg/ml)</td>
			<td>Akorn Animal Health</td>
			<td>NDC# 59399-111-50</td>
			<td>Anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blue labeling tape (0.5 in x 14 yds)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>15966</td>
			<td>Restraint on intubation platform</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Braided silk suture without needle, nonsterile, (3-0)</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td>Item #1007842</td>
			<td>Intubation platform</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Deltaphase Isothermal Pad</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>39DP</td>
			<td>Mouse thermoregulation and recovery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Deltaphase Operating Board</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>39OP</td>
			<td>Mouse recovery (prior to extubation)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Distilled water</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>15230253</td>
			<td>Cleaning mouse following depilation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eye Scissors, angled, sharp/sharp</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>72-8437</td>
			<td>Cannula preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FlexiVent (FX Module 2)</td>
			<td>Scireq</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Record lung function data (not required to perform procedure, used in this study to validate procedure)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze sponges</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>13-761-52</td>
			<td>Hair removal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heavy-Duty 3&#34; 3-Ring View Binders</td>
			<td>Staples</td>
			<td>24690CT</td>
			<td>Intubation platform</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Instat Software</td>
			<td>Graphpad</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Statistical analysis software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin syringe (0.5 cc, U100)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>329461</td>
			<td>Anesthesia administration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine HCl Injection, USP (100 mg/ml)</td>
			<td>Llyod Laoratories</td>
			<td>List No. 4871</td>
			<td>Anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lung inflation bulb</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>72-9083</td>
			<td>Confirm cannula placement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Forceps, Curved, Smooth</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>72-0445</td>
			<td>Retract tongue and create tension on neck for cannula visualization</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nair (hair removal lotion), 9 oz bottle</td>
			<td>Church &#38; Dwight</td>
			<td>42010440</td>
			<td>Hair removal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile saline (0.9%), 10 ml</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>NC9054335</td>
			<td>Anesthesia, cleaning skin following hair removal</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

repeated orotracheal intubation in mice

Litteraturen beskriver flere metoder til museintubation, der enten kræver visualisering af glottis gennem mundhulen eller indsnit i ventralhalsen for direkte bekræftelse af kanyle placering i luftrøret. Den relative vanskelighed eller væv traumer induceret til emnet ved sådanne procedurer kan være en hindring for en investigators evne til at udføre langsgående undersøgelser. Denne artikel illustrerer en teknik, hvor fysisk manipulation af musen efter brug af en hårfjerning til at fjerne hår fra ventrale hals tillader transkutan visualisering af luftrøret for orotracheal intubation uanset grad af hud Pigmentering. Denne metode er uskadelig for emnet og let opnås med en begrænset forståelse af murine anatomi. Denne raffinerede fremgangsmåde letter gentagen intubation, som kan være nødvendig for at overvåge udviklingen af sygdom eller inddrypning af behandlinger. Ved hjælp af denne metode kan resultere i en reduktion af antallet af dyr og tekniske færdigheder, der kræves for at måle lungefunktion i musemodeller af luftvejssygdomme.

Seriel overvågning af baseline lungefunktion 18 uger gamle hun-BALB/c og 10 uger gamle C57BL/6-mus (n = 3 af hver stamme) blev intuberet ved hjælp af den beskrevne metode på dag 0, 3, 10 og 17. Efter intubation på hver dag, var emnet forbundet til en mekanisk ventilator forsynet med 100% ilt (Tabel af materialer). Respiratorisk modstand (Rrs) blev målt ved hjælp af den tvungne svingningsteknik i 60 s efter en dyb oppustning til 25 cm H2O holdt i 5 s. Ingen software fe...

Watch this Scientific Journal Video about Repeated Orotracheal Intubation in Mice at JoVE.com

Repeated Orotracheal Intubation in Mice

Målet med denne artikel er at beskrive en raffineret metode til intubation af laboratoriemusen. Metoden er noninvasive og derfor ideel til undersøgelser, der kræver seriel overvågning af respiratorisk funktion og/ eller inddrypning af behandlinger i lungerne.

Gentagen Orotracheal Intubation hos mus

The literature describes several methods for mouse intubation that either require visualization of the glottis through the oral cavity or incision in the ...

Denne protokol vil gøre det muligt for forskere at udføre gentagne målinger af lungefunktionen hos individuelle mus, mindske eksperimentel variation og reducere antallet af mus, der er nødvendige for hvert eksperiment. Den største fordel ved denne protokol er, at det ikke kræver visualisering af luftrøret gennem mundhulen eller traumatisk dissektion af halsen for intubation. Denne metode vil være af særlig værdi for forskere, der studerer kroniske og progressive lungesygdomme som astma, KOL, emfysem, og lungefibrose.Visuel demonstration af denne protokol er kritisk, fordi forstå, hvordan man identificerer luftrøret gennem huden på den ventrale hals er centralt for metoden. Demonstrere teknikken med Andrew Nelson vil være Kate Nolan, en dyrlæge fra mit laboratorium. For at skabe en intubation platform, fold en 15 til 20-centimeter længde på 3-0 silke i halve og tape enderne af tråden til toppen af en tre-tommer tre-ring bindemiddel.Vælg en kanyle af passende størrelse og længde og skær en facet på kateterets distale spids. Glat den afskårne overflade med slibende papir for at skabe en afrundet spids og lav forsigtigt en lille bøjning i kanylen ca. en centimeter fra facett. Når materialerne er klar, bekræfte en manglende reaktion på tå knivspids i en bedøvet mus og krog de øverste fortænder omkring silketråd øverst på den vinklede overflade af platformen til at suspendere musen i liggende position.Når musen er placeret firkantet i dorsal recumbency, forsigtigt gribe bunden af halen og trække halen mod bordet. Placer et stykke tape over bunden af halen for at sikre musen og anvende depilatory creme til ventral-livmoderhalskræft region. Efter 30 til 45 sekunder, bruge tør gaze til at fjerne cremen og grundigt skylle huden med saltvand eller destilleret vand.Brug af snøre i den ikke-dominerende hånd, forsigtigt trække tungen på en måde, der tilstrækkeligt åbner munden for indførelse af kanylen. Med den dominerende hånd, fremme kanylen ind i munden, således at enden, der er distalt for den lille bøje er mod taget af dyrets mund. Slip tungen og skub den flade kant af de lukkede stænt caudally langs ventrale hals, indtil manubrium er nået til sideværts fortrænge spytkirtlerne og til at flade musklen dækker luftrøret.Luftrøret vises transkutanely som en hvid linje. Om nødvendigt rotere stænt i en kraniodorsal retning og samtidig opretholde spændinger på huden i en kaudal retning at forårsage sideomtholdte spytkirtler til at toppe og skabe mere kontrast omkring luftrøret. Supinating den dominerende hånd med samtidig fleksion af håndleddet, fremme kanylen, mens samtidig lystfiskeri den distale spids af kanylen ventrally.Hvis kanylen er korrekt placeret, vil det blive observeret i luftrøret. For at bekræfte en korrekt placering skal du tilslutte en lungeinflationspære til kanylen og observere brystkasseudvidelsen med samtidig depression af enheden. Uden at fortrænge kanylen skal du forsigtigt løsne musens fortænder fra intubationsplatformen og overføre musen til en vandret platform, derefter fastgøres kanylen til adapteren på ventilatoren, og efter en dyb oppustning ventileres musen i 60 sekunder, før respirationsmodstanden måles.Når proceduren er færdig, overføre musen til en opvarmet platform og give konstant stimulation via lys tå eller hale klemmer at tilskynde spontan respiration. Når spontan respiration er observeret, fortsætte med at visuelt overvåge dyret. Når respirationshastigheden vender tilbage til normal, skal du gribe kanylen på hubben og forsigtigt trække røret kranielt og væk fra musen, indtil kanylen er helt fjernet fra dyrets mund.Når den er ekstuberet, overføres musen til et rent genvindingsbur med varmestøtte med overvågning, indtil den er helt ambulant. I dette repræsentative eksperiment blev åndedrætsmodstanden målt på dag 0, 3, 10 og 17 ved hjælp af den tvungne svingningsteknik efter en dyb oppustning til 25 centimeter vand, der blev holdt i fem og 60 sekunders mekanisk ventilation. Der blev ikke observeret signifikante forskelle i den målte respiratoriske resistens mellem nogen af tidspunkterne inden for hver stamme, hvilket tyder på, at fraværet af en stigning i respiratorisk resistens over tid indikerer en mangel på funktionelt signifikant intubation traumerelateret inflammation i åndedrætssystemet over fire på hinanden følgende tidspunkter.Denne intubation procedure kan bruges til at give adgang til luftrøret til installation af eksperimentelle stoffer og seriel overvågning af respiratoriske funktion. Denne teknik gør det muligt at vurdere lungefunktion uden invasiv tracheostomi, hvilket letter overvågningen på flere tidspunkter i kroniske og progressive sygdomme inden for samme mus.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Novel Rescue Technique for Difficult Intubation and Difficult Ventilation

We describe a novel non surgical technique to maintain oxygenation and ventilation in a case of difficult intubation and difficult ventilation, which ...

Transthoracic Echocardiography in Mice

In recent years, murine models have become the primary avenue for studying the molecular mechanisms of cardiac dysfunction resulting from changes in gene ...

Guidelines for Elective Pediatric Fiberoptic Intubation

Fiberoptic intubation in pediatric patients is often required especially in difficult airways of syndromic patients i.e. Pierre Robin Syndrome. Small ...

Basic Surgical Techniques in the G&ouml;ttingen Minipig: Intubation, Bladder Catheterization, Femoral Vessel Catheterization, and Transcardial Perfusion

Basic Surgical Techniques in the GÃƒÆ’Ã‚Â¶ttingen Minipig: Intubation, Bladder Catheterization, Femoral Vessel Catheterization, and Transcardial Perfusion

The emergence of the G&ouml;ttingen minipig in research of topics such as neuroscience, toxicology, diabetes, obesity, and experimental surgery reflects ...

Endotracheal Intubation in Mice via Direct Laryngoscopy Using an Otoscope

Endotracheal Intubation in Mice via Direct Laryngoscopy Using an Otoscope

Endotracheal i mus<em&gt; Via</em&gt; Direkte laryngoskopi Brug af en otoskop

Mice, both wildtype and transgenic, are the principal mammalian model in biomedical research currently. Intubation and mechanical ventilation are ...

A Simple Method of Mouse Lung Intubation

En simpel metode til Mouse Lung Intubation

A  simple procedure to intubate mice for pulmonary function measurements would  have several advantages in longitudinal studies with limited numbers or  ...

Noninvasive Intratracheal Intubation to Study the Pathology and Physiology of Mouse Lung

Noninvasiv Intratracheal Intubation til at studere Patologi og fysiologi Mouse Lung

The use of a model that mimics the condition of lung diseases in humans is critical for studying the pathophysiology and/or etiology of a particular ...

Carotid Artery Infusions for Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Analysis of Taxanes in Mice

Halspulsåren infusioner farmakokinetisk og farmakodynamisk analyse af Taxaner i mus

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study ...

Intubation-mediated Intratracheal (IMIT) Instillation: A Noninvasive, Lung-specific Delivery System

Intubation-mediated Intratracheal IMIT Instillation: A Noninvasive, Lung-specific Delivery System

Intubation-medieret Intratracheal (IMIT) Instillation: en noninvasiv, Lunge-specifik Delivery System

Respiratory disease studies typically involve the use of murine models as surrogate systems. However, there are significant physiologic differences ...

An Improved Method for Rapid Intubation of the Trachea in Mice

En forbedret fremgangsmåde til hurtig intubation af trachea i mus

Despite some anatomical and physiological differences, mouse models continue to be an essential tool for studying human lung disease. Bleomycin toxicity ...