Name: repeated orotracheal intubation in mice
Uploaded: 2020-03-27T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Repeated Orotracheal Intubation in Mice at JoVE.com

Forfatterne takker Lucia Rosas, Lauren Doolittle, Lisa Joseph og Lindsey Ferguson for deres tekniske hjelp og University Laboratory Animal Resources for deres dyrepleiestøtte. Dette arbeidet er finansiert av NIH T35OD010977 og R01-HL102469.

Alle dyreaktiviteter beskrevet her har blitt godkjent av Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) ved Ohio State University og ble utført i AAALAC-akkrediterte fasiliteter.
1. Forberedelse av prosedyre
<ol><li>Konstruer intubasjonsplattformen. For å oppnå riktig plattformhelling, bruk en 3-tommers (7,6 cm) 3-ring bindemiddel. Brett en 15-20 cm lengde på 3-0 silke eller annet trådmateriale i to og fest endene av tråden til toppen av den skråplattformen med tape for å lage e...

<ol>
	<li>Spoelstra, E. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+and+simple+method+for+endotracheal+intubation+of+mice.">A novel and simple method for endotracheal intubation of mice.</a> Laboratory Animals. 41 (1), 128-135 (2007).</li><li>Rivera, B., Miller, S. R., Brown, E. M., Price, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Novel+Method+for+Endotracheal+Intubation+of+Mice+and+Rats+Used+in+Imaging+Studies.">A Novel Method for Endotracheal Intubation of Mice and Rats Used in Imaging Studies.</a> Contemporary Topics in Laboratory Animal Science. 44 (2), 52-55 (2005).</li><li>Sparrowe, J., Jimenez, M., Rullas, J., Martinez, A. E., Ferrer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Refined+Intratracheal+Intubation+Technique+in+the+Mouse,+Complete+Protocol+Description+for+Lower+Airway+Models.">Refined Intratracheal Intubation Technique in the Mouse, Complete Protocol Description for Lower Airway Models.</a> Global Journal of Animal Scientific Research. 3 (2), 363-369 (2015).</li><li>Deyo, D. J., Wei, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Novel+Method+of+Intubation+and+Ventilation+in+Mice.">A Novel Method of Intubation and Ventilation in Mice.</a> Anesthesia &amp; Analgesia. 88 (2), 179 (1999).</li><li>Vergari, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+method+of+orotracheal+intubation+in+mice.">A new method of orotracheal intubation in mice.</a> European Review for Medical and Pharmacological Sciences. 8 (3), 103-106 (2004).</li><li>Brown, R. H., Walters, D. M., Greenberg, R. S., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+of+endotracheal+intubation+and+pulmonary+functional+assessment+for+repeated+studies+in+mice.">A method of endotracheal intubation and pulmonary functional assessment for repeated studies in mice.</a> Journal of Applied Physiology. 87 (6), 2362-2365 (1999).</li><li>Das, S., MacDonald, K., Chang, H. S., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Simple+Method+of+Mouse+Lung+Intubation.">A Simple Method of Mouse Lung Intubation.</a> Journal of Visualized Experiments. (73), e50318 (2013).</li><li>Limjunyawong, N., Mock, J., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Instillation+and+Fixation+Methods+Useful+in+Mouse+Lung+Cancer+Research.">Instillation and Fixation Methods Useful in Mouse Lung Cancer Research.</a> Journal of Visualized Experiments. (102), e52964 (2015).</li><li>Qin, W., Baran, U., Wang, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lymphatic+response+to+depilation-induced+inflammation+assessed+with+label-free+optical+lymphangiography.">Lymphatic response to depilation-induced inflammation assessed with label-free optical lymphangiography.</a> Lasers in Surgery and Medicine. 47 (8), 669-676 (2015).</li><li>McGovern, T. K., Robichaud, A., Fereydoonzad, L., Schuessler, T. F., Martin, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+Respiratory+System+Mechanics+in+Mice+using+the+Forced+Oscillation+Technique.">Evaluation of Respiratory System Mechanics in Mice using the Forced Oscillation Technique.</a> Journal of Visualized Experiments. (75), e50107 (2013).</li></ol>

Intubasjon ved hjelp av transkutan trakealvisualiseringsteknikk gir en raffinert tilnærming til standard hudsnittmetode. Med spesiell oppmerksomhet til flere viktige trinn, kan intubasjon enkelt og raskt oppnås. Dyret må plasseres rett i dorsal recumbency på intubasjonsplattformen med musen sikret i mild tilbaketrekking. Dette vil utvide dyret til vertikal justering og riktig posisjonering for intubasjon. I tillegg bør hårfjerningskremen ikke forbli i kontakt med dyrets hud i mer enn 30–45 s og bør skylles grund...

Laboratoriemusen er en vanlig dyremodell for human luftveissykdom. Dermed er det flere publiserte metoder for musintubasjon med det formål å både dryppe av behandlinger og måling av åndedrettsmekanikk. De fleste av de beskrevne prosedyrene krever visualisering av glottt gjennom munnhulen med spesialisert utstyr som strupeoskop eller fiberoptisk lyskilde1,2,3,4,5,6,7. Dette kan imidlertid være vanskelig når en relativt stor kanyle er nødvendig, da det kan skjule forskerens syn. Limjunyawong et al.8 har adressert denne bekymringen med en metode for intubasjon der et lite kutan snitt er gjort langs midtlinjen i ventralhalsen som tillater visualisering av luftrøret. Etter prosedyren er snittet lukket med vevslim.
For studier som krever hyppige gjentatte intubasjoner, krever påfølgende snitt ing og lukking av dette nettstedet debridement av hudmargene og vevtraumer til ventral halsen. Formålet med transkutan trakealvisualiseringtilnærming til oral intubasjon er å gi en raffinert, ikke-invasiv teknikk som er spesielt egnet for gjentatte intubasjonsstudier samt enkelt intubasjonshendelser hos mus.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>18Gx1 1/4&#34; intravenous catheter, Safelet</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>#14-841-14</td>
			<td>Cannula for intubation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70% ethanol, 10L</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>25467025</td>
			<td>Cleaning cannula</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Abrasive paper (sandpaper)</td>
			<td>Porter-Cable</td>
			<td>74001201</td>
			<td>Cannula preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AnaSed (xylazine sterile solution) injection (100 mg/ml)</td>
			<td>Akorn Animal Health</td>
			<td>NDC# 59399-111-50</td>
			<td>Anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blue labeling tape (0.5 in x 14 yds)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>15966</td>
			<td>Restraint on intubation platform</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Braided silk suture without needle, nonsterile, (3-0)</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td>Item #1007842</td>
			<td>Intubation platform</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Deltaphase Isothermal Pad</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>39DP</td>
			<td>Mouse thermoregulation and recovery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Deltaphase Operating Board</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>39OP</td>
			<td>Mouse recovery (prior to extubation)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Distilled water</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>15230253</td>
			<td>Cleaning mouse following depilation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eye Scissors, angled, sharp/sharp</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>72-8437</td>
			<td>Cannula preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FlexiVent (FX Module 2)</td>
			<td>Scireq</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Record lung function data (not required to perform procedure, used in this study to validate procedure)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze sponges</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>13-761-52</td>
			<td>Hair removal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heavy-Duty 3&#34; 3-Ring View Binders</td>
			<td>Staples</td>
			<td>24690CT</td>
			<td>Intubation platform</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Instat Software</td>
			<td>Graphpad</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Statistical analysis software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin syringe (0.5 cc, U100)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>329461</td>
			<td>Anesthesia administration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine HCl Injection, USP (100 mg/ml)</td>
			<td>Llyod Laoratories</td>
			<td>List No. 4871</td>
			<td>Anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lung inflation bulb</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>72-9083</td>
			<td>Confirm cannula placement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Forceps, Curved, Smooth</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>72-0445</td>
			<td>Retract tongue and create tension on neck for cannula visualization</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nair (hair removal lotion), 9 oz bottle</td>
			<td>Church &#38; Dwight</td>
			<td>42010440</td>
			<td>Hair removal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile saline (0.9%), 10 ml</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>NC9054335</td>
			<td>Anesthesia, cleaning skin following hair removal</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

repeated orotracheal intubation in mice

Litteraturen beskriver flere metoder for musintubasjon som enten krever visualisering av glottt gjennom munnhulen eller snittet i ventralhalsen for direkte bekreftelse av kanyleplassering i luftrøret. Den relative vanskeligheten eller vevstraumet indusert til emnet ved slike prosedyrer kan være et hinder for en undersøkers evne til å utføre langsgående studier. Denne artikkelen illustrerer en teknikk der fysisk manipulering av musen etter bruk av en hårfjerning for å fjerne hår fra ventralhalsen tillater transkutan visualisering av luftrøret for orotrahelbredeintubasjon uavhengig av grad av hud Pigmentering. Denne metoden er uskyldig for motivet og oppnås lett med en begrenset forståelse av murineanatomi. Denne raffinerte tilnærmingen forenkler gjentatt intubasjon, som kan være nødvendig for å overvåke sykdomsprogresjon eller drypping av behandlinger. Bruk av denne metoden kan føre til en reduksjon av antall dyr og tekniske ferdigheter som kreves for å måle lungefunksjon i musemodeller av luftveissykdom.

Seriell overvåking av lungefunksjon ved baseline Atten uker gamle kvinnelige BALB/c og 10 uker gamle C57BL/6 mus (n = 3 av hver stamme) ble intubert ved hjelp av den beskrevne metoden på dag 0, 3, 10 og 17. Etter intubasjon hver dag ble motivet koblet til en mekanisk ventilator som fulgte med 100 % oksygen (Materialtabellen). Respirasjonsresistens (Rrs) ble målt ved hjelp av tvungen oscillasjonsteknikk for 60-tallet etter en dyp inflasjon til 25 cm H2O holdt i 5 s. Ingen...

Watch this Scientific Journal Video about Repeated Orotracheal Intubation in Mice at JoVE.com

Repeated Orotracheal Intubation in Mice

Målet med denne artikkelen er å beskrive en raffinert metode for intubering av laboratoriemusen. Metoden er ikke-invasiv og derfor ideell for studier som krever seriell overvåking av respiratorisk funksjon og / eller instillasjon av behandlinger i lungene.

Gjentatt Orotracheal Intubasjon hos mus

The literature describes several methods for mouse intubation that either require visualization of the glottis through the oral cavity or incision in the ...

Denne protokollen vil tillate forskere å utføre gjentatte målinger av lungefunksjon hos individuelle mus, redusere eksperimentell variasjon og redusere antall mus som trengs for hvert eksperiment. Den største fordelen med denne protokollen er at den ikke krever visualisering av luftrøret gjennom munnhulen eller traumatisk avhandling i nakken for intubasjon. Denne metoden vil være av særlig verdi for forskere som studerer kroniske og progressive lungesykdommer som astma, KOLS, emfysem og lungefibrose.Visuell demonstrasjon av denne protokollen er avgjørende fordi det å forstå hvordan man identifiserer luftrøret gjennom huden på ventralhalsen er sentralt i metoden. Viser teknikken med Andrew Nelson vil være Kate Nolan, en veterinær fra laboratoriet mitt. For å lage en intubasjonsplattform, brett en 15 til 20-centimeter lengde på 3-0 silke i to og tape endene av tråden til toppen av en tre-tommers tre-ring bindemiddel.Velg en kanyle av riktig størrelse og lengde og kutt en skråkant på den distale spissen av kateteret. Glatt den kuttede overflaten med slipende papir for å lage en avrundet spiss og gjør forsiktig en liten bøyning i kanylen omtrent en centimeter fra skråkanten. Når materialene er klare, bekrefter du mangel på respons på tåklemme i en bedøvet mus og hekte de øvre fortennene rundt silketråden på toppen av den vinklede overflaten av plattformen for å suspendere musen i liggende stilling.Når musen er firkantet plassert i dorsal recumbency, forsiktig gripe bunnen av halen og trekke halen mot bordet. Plasser et stykke tape over bunnen av halen for å sikre musen og bruke hårfjerningskrem til ventral-cervical-regionen. Etter 30 til 45 sekunder, bruk tørr gasbind for å fjerne kremen og skyll huden grundig med saltvann eller destillert vann.Ved hjelp av tang i den ikke-dominerende hånden, trekk forsiktig tungen forsiktig tilbake på en måte som tilstrekkelig åpner munnen for innføring av kanylen. Med den dominerende hånden, forskred kanylen inn i munnen slik at enden som er distal til den lille svingen, er mot taket av dyrets munn. Slipp tungen og skyv den flate kanten av de lukkede tangene caudally langs ventral hals til manubrium er nådd for å sideveis fortrenge spyttkjertlene og å flate muskelen som dekker luftrøret.Luftrøret vil vises transkutant som en hvit linje. Roter om nødvendig tangen i kraniodorsal retning samtidig som spenningen på huden opprettholdes i caudal retning for å få de sidegående fordrevne spyttkjertlene til å toppe og skape mer kontrast rundt luftrøret. Supinating den dominerende hånden med samtidig fleksjon av håndleddet, fremme kanylen samtidig fiske den distale spissen av kanylen ventrikt.Hvis kanylen er riktig plassert, vil den bli observert i luftrøret. For å bekrefte en riktig plassering, koble en lungeinflasjonspære til kanylen og observere thoraxekspansjon med samtidig depresjon av enheten. Uten å fortrenge kanylen, forsiktig løsne fortenner av musen fra intubasjonsplattformen og overføre musen til en horisontal plattform, og fest deretter kanylen til adapteren på ventilatoren og, etter en dyp inflasjon, ventiler musen i 60 sekunder før du måler åndedrettsmotstanden.Når prosedyren er fullført, overfør musen til en oppvarmet plattform og gi konstant stimulering via lett tå eller haleklemmer for å oppmuntre til spontan åndedrett. Når spontan respirasjon er observert, fortsett å overvåke dyret visuelt. Når respirasjonshastigheten går tilbake til normal, ta tak i kanylen på nivået av navet og trekk forsiktig røret kranielt og bort fra musen til kanylen er helt fjernet fra dyrets munn.Når ekstubert, overføre musen til en ren utvinning bur med varmestøtte med overvåking til fullt ambulerende. I dette representative eksperimentet ble åndedrettsmotstanden målt på dag 0, 3, 10 og 17, ved hjelp av tvungen svingningsteknikk etter en dyp inflasjon til 25 centimeter vann holdt i fem og 60 sekunder med mekanisk ventilasjon. Ingen signifikante forskjeller i den målte respirasjonsresistensen ble observert mellom noen av tidspunktene innenfor hver stamme, noe som tyder på at fraværet av økt respirasjonsresistens over tid indikerer mangel på funksjonelt signifikant intubasjonstraumerelatert betennelse i luftveiene over fire påfølgende tidspunkter.Denne intubasjonsprosedyren kan brukes til å gi tilgang til luftrøret for installasjon av eksperimentelle stoffer og seriell overvåking av respiratorisk funksjon. Denne teknikken gjør det mulig å vurdering av lungefunksjon uten invasiv trakeostomi, noe som letter overvåkingen på flere tidspunkter i kroniske og progressive sykdommer i samme mus.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Novel Rescue Technique for Difficult Intubation and Difficult Ventilation

We describe a novel non surgical technique to maintain oxygenation and ventilation in a case of difficult intubation and difficult ventilation, which ...

Transthoracic Echocardiography in Mice

In recent years, murine models have become the primary avenue for studying the molecular mechanisms of cardiac dysfunction resulting from changes in gene ...

Guidelines for Elective Pediatric Fiberoptic Intubation

Fiberoptic intubation in pediatric patients is often required especially in difficult airways of syndromic patients i.e. Pierre Robin Syndrome. Small ...

Basic Surgical Techniques in the G&ouml;ttingen Minipig: Intubation, Bladder Catheterization, Femoral Vessel Catheterization, and Transcardial Perfusion

Basic Surgical Techniques in the GÃƒÆ’Ã‚Â¶ttingen Minipig: Intubation, Bladder Catheterization, Femoral Vessel Catheterization, and Transcardial Perfusion

The emergence of the G&ouml;ttingen minipig in research of topics such as neuroscience, toxicology, diabetes, obesity, and experimental surgery reflects ...

Endotracheal Intubation in Mice via Direct Laryngoscopy Using an Otoscope

Endotracheal Intubation in Mice via Direct Laryngoscopy Using an Otoscope

Endotrakeal intubering i Mus<em&gt; Via</em&gt; Direkte Laryngoskopi Bruke en Otoskop

Mice, both wildtype and transgenic, are the principal mammalian model in biomedical research currently. Intubation and mechanical ventilation are ...

A Simple Method of Mouse Lung Intubation

En enkel metode for Mouse Lung Intubasjon

A  simple procedure to intubate mice for pulmonary function measurements would  have several advantages in longitudinal studies with limited numbers or  ...

Noninvasive Intratracheal Intubation to Study the Pathology and Physiology of Mouse Lung

Noninvasive røret Intubering å studere patologi og fysiologi av Mouse Lung

The use of a model that mimics the condition of lung diseases in humans is critical for studying the pathophysiology and/or etiology of a particular ...

Carotid Artery Infusions for Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Analysis of Taxanes in Mice

Carotisar infusjoner for farmakokinetiske og farmakodynamiske Analyse av Taxaner i Mus

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study ...

Intubation-mediated Intratracheal (IMIT) Instillation: A Noninvasive, Lung-specific Delivery System

Intubation-mediated Intratracheal IMIT Instillation: A Noninvasive, Lung-specific Delivery System

Intubasjon-mediert intratrakeal (IMIT) Instillasjon: En Noninvasiv, Lung-spesifikke Delivery System

Respiratory disease studies typically involve the use of murine models as surrogate systems. However, there are significant physiologic differences ...

An Improved Method for Rapid Intubation of the Trachea in Mice

En forbedret fremgangsmåte for Rapid intubering av trakea hos mus

Despite some anatomical and physiological differences, mouse models continue to be an essential tool for studying human lung disease. Bleomycin toxicity ...