Name: microwaving and fluorophore-tyramide for multiplex immunostaining on mouse adrenals &#8722; using unconjugated primary antibodies from the same host species
Uploaded: 2020-02-21T14:00:00
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Questo lavoro è supportato da NIH R00 HD032636.

1. Colorazione con il primo anticorpo
<ol><li>Dewax e reidratato FFPE vetrini con 5 min assegnati a ciascuno dei seguenti passaggi: xilene o reagenti equivalenti 3x, 100% etanolo 2x, 95% etanolo 1x, 70% etanolo 1x, 50% etanolo 1x, e acqua distillata 2x. NOTA: I vetrini devono rimanere umidi a partire da questa fase di reidratazione fino al montaggio nella fase finale.</li>
	<li>Per il recupero dell'antigene opzionale, posizionare i vetrini in 275 mL di soluzione di citrato di sodio bollente (10 mM, pH e 6,0) per 8 m...

<ol>
	<li>Lewis Carl, S. A., Gillete-Ferguson, I., Ferguson, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+indirect+immunofluorescence+procedure+for+staining+the+same+cryosection+with+two+mouse+monoclonal+primary+antibodies.">An indirect immunofluorescence procedure for staining the same cryosection with two mouse monoclonal primary antibodies.</a> Journal of Histochemistry and Cytochemistry. 41 (8), 1273-1278 (1993).</li><li>Lan, H. Y., Mu, W., Nikolic-Paterson, D. J., Atkins, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel,+simple,+reliable,+and+sensitive+method+for+multiple+immunoenzyme+staining:+use+of+microwave+oven+heating+to+block+antibody+crossreactivity+and+retrieve+antigens.">A novel, simple, reliable, and sensitive method for multiple immunoenzyme staining: use of microwave oven heating to block antibody crossreactivity and retrieve antigens.</a> Journal of Histochemistry and Cytochemistry. 43 (1), 97-102 (1995).</li><li>Tornehave, D., Hougaard, D. M., Larsson, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microwaving+for+double+indirect+immunofluorescence+with+primary+antibodies+from+the+same+species+and+for+staining+of+mouse+tissues+with+mouse+monoclonal+antibodies.">Microwaving for double indirect immunofluorescence with primary antibodies from the same species and for staining of mouse tissues with mouse monoclonal antibodies.</a> Histochemistry and Cell Biology. 113 (1), 19-23 (2000).</li><li>Kim, M., Soontornniyomkij, V., Ji, B., Zhou, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=System-wide+immunohistochemical+analysis+of+protein+co-localization.">System-wide immunohistochemical analysis of protein co-localization.</a> PLoS One. 7 (2), e32043 (2012).</li><li>Bolognesi, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiplex+Staining+by+Sequential+Immunostaining+and+Antibody+Removal+on+Routine+Tissue+Sections.">Multiplex Staining by Sequential Immunostaining and Antibody Removal on Routine Tissue Sections.</a> Journal of Histochemistry and Cytochemistry. 65 (8), 431-444 (2017).</li><li>Toth, Z. E., Mezey, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+visualization+of+multiple+antigens+with+tyramide+signal+amplification+using+antibodies+from+the+same+species.">Simultaneous visualization of multiple antigens with tyramide signal amplification using antibodies from the same species.</a> Journal of Histochemistry and Cytochemistry. 55 (6), 545-554 (2007).</li><li>Buchwalow, I., Samoilova, V., Boecker, W., Tiemann, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple+immunolabeling+with+antibodies+from+the+same+host+species+in+combination+with+tyramide+signal+amplification.">Multiple immunolabeling with antibodies from the same host species in combination with tyramide signal amplification.</a> Acta Histochemica. 120 (5), 405-411 (2018).</li><li>Bauer, M., Schilling, N., Spanel-Borowski, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Limitation+of+microwave+treatment+for+double+immunolabelling+with+antibodies+of+the+same+species+and+isotype.">Limitation of microwave treatment for double immunolabelling with antibodies of the same species and isotype.</a> Histochemistry and Cell Biology. 116 (3), 227-232 (2001).</li><li>Pirici, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antibody+elution+method+for+multiple+immunohistochemistry+on+primary+antibodies+raised+in+the+same+species+and+of+the+same+subtype.">Antibody elution method for multiple immunohistochemistry on primary antibodies raised in the same species and of the same subtype.</a> Journal of Histochemistry and Cytochemistry. 57 (6), 567-575 (2009).</li><li>Glass, G., Papin, J. A., Mandell, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SIMPLE:+a+sequential+immunoperoxidase+labeling+and+erasing+method.">SIMPLE: a sequential immunoperoxidase labeling and erasing method.</a> Journal of Histochemistry and Cytochemistry. 57 (10), 899-905 (2009).</li><li>Zhang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fully+automated+5-plex+fluorescent+immunohistochemistry+with+tyramide+signal+amplification+and+same+species+antibodies.">Fully automated 5-plex fluorescent immunohistochemistry with tyramide signal amplification and same species antibodies.</a> Laboratory Investigation. 97 (7), 873-885 (2017).</li><li>Paul, A., Laufer, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endogenous+biotin+as+a+marker+of+adrenocortical+cells+with+steroidogenic+potential.">Endogenous biotin as a marker of adrenocortical cells with steroidogenic potential.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. 336 (1-2), 133-140 (2011).</li><li>Bussolati, G., Gugliotta, P., Volante, M., Pace, M., Papotti, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retrieved+endogenous+biotin:+a+novel+marker+and+a+potential+pitfall+in+diagnostic+immunohistochemistry.">Retrieved endogenous biotin: a novel marker and a potential pitfall in diagnostic immunohistochemistry.</a> Histopathology. 31 (5), 400-407 (1997).</li><li>Wang, H., Pevsner, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+endogenous+biotin+in+various+tissues:+novel+functions+in+the+hippocampus+and+implications+for+its+use+in+avidin-biotin+technology.">Detection of endogenous biotin in various tissues: novel functions in the hippocampus and implications for its use in avidin-biotin technology.</a> Cell and Tissue Research. 296 (3), 511-516 (1999).</li></ol>

L'immunostaining multiplex è utile per esaminare la co-localizzazione cellulare di due o più antigeni. Questa tecnica ampiamente utilizzata fornisce risultati convincenti di co-localizzazione quando gli anticorpi primari sono coniugati con diversi reporter (colorazione diretta). Tuttavia, la colorazione diretta di solito fornisce segnali più deboli rispetto alla colorazione indiretta, che coinvolge anticorpi secondari coniugati per rilevare gli anticorpi primari. Nella colorazione indiretta, un risultato immunostainin...

Nell'immunostaining multiplex, la colorazione diretta che utilizza anticorpi primari coniugati può fornire risultati informativi. Senza l'uso di anticorpi secondari, il metodo di colorazione diretta ha un basso rischio di falsi segnali di co-localizzazione da reattività incrociata degli anticorpi. Tuttavia, i reporter coniugati (fluoroforo, enzimi) o biotina sull'anticorpo primario ne limitano l'uso futuro. In alternativa, l'immunostaining indiretto di solito fornisce segnali più forti utilizzando un anticorpo primario non coniugato con un anticorpo secondario etichettato. Idealmente, gli anticorpi primari non coniugati utilizzati nell'immunostaining multiplex dovrebbero provenire da diverse specie ospiti per evitare la reattività incrociata degli anticorpi. Tuttavia, l'appropriata combinazione di anticorpi primari di diverse specie ospiti non è sempre disponibile.
Sono stati stabiliti diversi metodi per eliminare il rischio che l'anticorpo secondario reagisca con un anticorpo primario indesiderato. Un metodo comune è l'uso di un anticorpo monomerico F(ab) per bloccare eventuali epitopi leganti rimanenti sul primo complesso anticorpo primario prima della colorazione con il secondo anticorpo primario1. Lo stripping anticorpale, che è simile alla striscia e resonera di un foglio di macchia occidentale, rimuove il complesso anticorpale precedentemente macchiato senza spogliare la deposizione di molecole di reporter rilevabili come 3,3'-diaminobenzidine tetraidrocloruro (DAB)2 e la deposizione di tyramide fluorescente3 . Con questo metodo, le molecole reporter in colori diversi possono mostrare un risultato multiplex sulla stessa diapositiva. La colorazione multiplex è anche realizzabile con la completa rimozione degli strati precedentemente depositati di anticorpi e l'allineamento di immagini successivamente acquisite da altri anticorpi4,5. Tutti questi metodi danno risultati affidabili, anche se ogni metodo ha i suoi limiti e richiede procedure complicate o un sistema di imaging speciale.
Il presente protocollo mostra l'applicazione di un metodo di rimozione degli anticorpi con l'uso di buffer comunemente disponibili. Questo protocollo può essere utilizzato per eseguire una colorazione multiplex immunofluorescente su sezioni surrenali con paraffina fissata in forma di forma (FFPE) con due anticorpi primari non etichettati della stessa specie ospite.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Antifade Mounting Medium</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>H-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biotinylated donkey anti-mouse</td>
			<td>JacksonImmuno</td>
			<td>715-066-151</td>
			<td>1:500 dilution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biotinylated donkey anti-rabbit</td>
			<td>JacksonImmuno</td>
			<td>711-066-152</td>
			<td>1:500 dilution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>422801</td>
			<td>2 &#956;g/mL in distilled water</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence microscope</td>
			<td>ECHO</td>
			<td>Revolve 4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Horseradish peroxidase-conjugated streptavidin</td>
			<td>JacksonImmuno</td>
			<td>016-030-084</td>
			<td>1:1000 dilution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microwave oven, 700W</td>
			<td>General Electric</td>
			<td>JEM3072DH1BB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse anti-CYP2F2</td>
			<td>Santa Cruz,</td>
			<td>SC-374540</td>
			<td>1:250 dilution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse anti-TH</td>
			<td>Santa Cruz,</td>
			<td>SC-25269</td>
			<td>1:1000 dilution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal donkey serum</td>
			<td>JacksonImmuno</td>
			<td>017-000-121</td>
			<td>2% serum in PBST</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit anti-20&#945;HSD</td>
			<td>Kerafast,</td>
			<td>EB4002</td>
			<td>1:500 dilution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit anti-3&#946;HSD</td>
			<td>TransGenic,</td>
			<td>KO607</td>
			<td>1:250 dilution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit anti-TH</td>
			<td>NOVUS,</td>
			<td>NB300-109</td>
			<td>1:1000 dilution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit anti-&#946;-catenin</td>
			<td>Abcam,</td>
			<td>ab32572</td>
			<td>1:500 dilution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Streptavidin Horseradish Peroxidase (SA-HRP)</td>
			<td>JacksonImmuno</td>
			<td>016-303-084</td>
			<td>1:1000 dilution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TSA Cy3 Tyramide</td>
			<td>PerkinElmer</td>
			<td>SAT704B001EA</td>
			<td>1:100 dilution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TSA Fluorescein Tyramide</td>
			<td>PerkinElmer</td>
			<td>SAT701001EA</td>
			<td>1:100 dilution</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

microwaving and fluorophore-tyramide for multiplex immunostaining on mouse adrenals &#8722; using unconjugated primary antibodies from the same host species

L'immunostazione è ampiamente utilizzata nella ricerca biomedica per mostrare il modello di espressione cellulare di una data proteina. L'immunostaining multiplex consente l'etichettatura utilizzando più anticorpi primari. Per ridurre al minimo la reattività incrociata degli anticorpi, l'immunostaining multiplex che utilizza la colorazione indiretta richiede anticorpi primari senza etichetta provenienti da diverse specie ospiti. Tuttavia, la combinazione appropriata di diversi anticorpi di specie non è sempre disponibile. Qui, descriviamo un metodo di utilizzo di anticorpi primari non etichettati provenienti dalla stessa specie ospite (ad esempio, in questo caso entrambi gli anticorpi provengono dal coniglio) per l'immunofluorescenza multiplex sulle sezioni surrenali con paraffina fissata a formalina (FFPE). Questo metodo utilizza la stessa procedura e reagenti utilizzati nella fase di recupero dell'antigene per rimuovere l'attività del complesso anticorpale primario precedentemente macchiato. I vetrini sono stati macchiati con il primo anticorpo primario utilizzando un protocollo di immunostaining generale seguito da un passo di legame con un anticorpo secondario biotinylato. Poi, un metodo di sviluppo del segnale avidina-biotina-perossidasi è stato utilizzato con fluoroforo-tiramide come substrato. L'immunoattività del primo complesso di anticorpi primari è stata ridotta attraverso l'immersione in una soluzione di citrato di sodio bollente a microonde per 8 min. La deposizione insolubile fluoroforo-tiramide è rimasta sul campione, il che ha permesso di colorare la diapositiva con altri anticorpi primari. Anche se questo metodo elimina la maggior parte dei segnali falsi positivi, alcuni sfondi da anticorpo reattività incrociata può rimanere. Se i campioni sono arricchiti con biotina endogena, un anticorpo secondario coniugato perossidia può essere utilizzato per sostituire l'anticorpo secondario biotinylato per evitare il falso positivo dalla biotina endogena recuperata.

I risultati sono stati ottenuti da campioni trattati con tutti i passaggi descritti, incluso il passaggio 1.2 di recupero dell'antigene. Tutti gli anticorpi secondari utilizzati qui sono stati biotinylati. Fluorophore-tyramide è stato utilizzato per sviluppare segnali dal primo e dal secondo anticorpo primario. Le immagini sono state catturate utilizzando un microscopio a fluescenza dotato di cubo FITC (per la fluorescenza verde), un cubo TxRED (per Cy3) e un cubo DAPI (per DAPI).
<p...

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Microwaving and Fluorophore-Tyramide for Multiplex Immunostaining on Mouse Adrenals ÃƒÂ¢Ã‹â€ ' Using Unconjugated Primary Antibodies from the Same Host Species

Sono stati stabiliti diversi metodi per l'immunostaining multiplex utilizzando anticorpi primari della stessa specie ospite. Qui, descriviamo l'uso di anticorpi mediati a microonde e di fluoroforo-tiramide per bloccare la reattività incrociata dell'anticorpo durante l'immunostaining multiplex su sezioni adrenali del topo con paraffina fissata in formalina.

Microwaving e Fluorophore-Tyramide per l'immunostainizzazione multiplex sulle intendire del mouse - Utilizzo di anticorpi primari non conformi della stessa specie ospite

Immunostaining is widely used in biomedical research to show the cellular expression pattern of a given protein. Multiplex immunostaining allows labeling ...

L'immunostaining è ampiamente utilizzato nella ricerca biomedica per identificare la posizione di una proteina di interesse. L'immunosocienza multiplex può rilevare più bersagli sullo stesso campione utilizzando anticorpi primari diversi. Il vantaggio di questo metodo è l'uso di tamponi comunemente disponibili per eliminare la reattività incrociata degli anticorpi che consente l'immunostaining utilizzando due o più anticorpi primari non etichettati della stessa specie ospite.A dimostrare la procedura saranno Sophia Zheng, una studentessa laureata, e Qiongxia Lyu, una visiting scholar del mio laboratorio. Prima di macchiare, de-cerare e reidratare diapositive incorporate in paraffina fissa formalina con immersioni di cinque minuti in ogni soluzione come indicato. Dopo la seconda immersione in acqua distillata, posizionare gli scivoli in 275 millilitri di soluzione di citrato di sodio bollente sul fondo di una scatola di punta della pipetta con un coperchio e posizionare la scatola in un forno a microonde da 700 watt al 75% di potenza per otto minuti.Al termine del trattamento, aprire il coperchio e lasciare raffreddare la soluzione a temperatura ambiente prima di lavare gli scivoli con tre lavaggi di cinque minuti di PBST fresco in un barattolo coplin. Per bloccare eventuali siti di rilegatura non specifici, dopo l'ultimo lavaggio scuotere il PBST in eccesso da ogni diapositiva e coprire le diapositive con un volume sufficiente di un'appropriata soluzione di blocco. Dopo 30 minuti a temperatura ambiente in una camera umidificata, agitare la soluzione di blocco in eccesso da ogni diapositiva e aggiungere 250 microlitri del primo anticorpo primario di interesse per ciascun campione.Per evitare che i campioni si asciughino, le diapositive possono essere coperte da un pezzo di pellicola di paraffina. Dopo un'incubazione notturna a quattro gradi Celsius in una camera umidificata, lavare gli scivoli tre volte con PBST fresco per cinque minuti per lavaggio. Scrollarsi di mente il PBST in eccesso, quindi coprire rapidamente ogni diapositiva con 250 microlitri di un'appropriata soluzione anticorpale secondaria per un'incubazione di un'ora in una camera umidificata a temperatura ambiente.Al termine dell'incubazione, lavare gli scivoli tre volte in PBST fresco come dimostrato e aggiungere 250 microlitri di perossidasi di rafano streptavidina appena preparata ad ogni diapositiva. Dopo 30 minuti a temperatura ambiente, lavare gli scivoli tre volte in PBST fresco. Quindi scrollarsi di tagliare l'eccesso di PBST e coprire ogni diapositiva con 250 microlitri di soluzione di fluoroforo-tiramide appena preparata.Un minuto dopo, immergere le diapositive in PBST fresco seguito da tre lavaggi di due minuti in PBST fresco. Dopo l'ultimo lavaggio, applicare alcune gocce di una soluzione da glicerolo a PBS uno a uno sulle sezioni e verificare la presenza di un segnale di fluorescenza mediante microscopia a fluorescenza. Per rimuovere il primo complesso anticorpale, posizionare l'anticorpo etichettato scivola in 275 millilitri di soluzione di citrato di sodio bollente per almeno otto minuti come dimostrato.Al termine del trattamento, aprire il coperchio e lasciare raffreddare la soluzione a temperatura ambiente prima di lavare gli scivoli tre volte con PBST per cinque minuti per lavaggio. Per macchiare per la seconda proteina bersaglio di interesse, dopo aver bloccato per il legame non specifico come dimostrato, etichettare ogni campione con 250 microlitri del secondo anticorpo primario di interesse a quattro gradi Celsius durante la notte. La mattina seguente, lavare gli scivoli tre volte per cinque minuti in PBST fresco per lavaggio prima di coprire ogni diapositiva con 250 microlitri di un'appropriata soluzione anticorpale secondaria per un'incubazione di un'ora a temperatura ambiente.Al termine dell'incubazione, lavare gli scivoli tre volte in PBST fresco come dimostrato e aggiungere 250 microlitri di perossidasi di rafano streptavidina appena preparata ad ogni diapositiva. Per sviluppare il segnale per la seconda proteina bersaglio di interesse, dopo tre lavaggi PBST, trattare le diapositive con il tiramide coniugato al fluoroforo in un diverso spettro di fluorescenza. Per fermare lo sviluppo del segnale di tiroide, immergere le diapositive in PBST.Quindi macchiare i campioni con un colorante nucleare appropriato. Per l'imaging mediante microscopia a fluorescenza, montare ogni scivolo etichettato colorante nucleare con una goccia di un mezzo di montaggio appropriato in un coverslip. Utilizzare l'obiettivo 4X per localizzare il tessuto sullo scivolo.Passare all'obiettivo 10X per l'imaging e regolare il tempo di esposizione a 100-400 millisecondi con la sorgente luminosa tra il 40 e l'80% di intensità. Quindi ottenere immagini in ogni canale senza spostare il palco. Le immagini di ogni canale possono essere unite per formare un'immagine fluorescente multiplex.Senza stripping tra la colorazione del primo e dell'anticorpo secondario, la seconda colorazione per l'idrossilasi tirosina raccoglierà segnali dalla prima proteina bersaglio di interesse con conseguente colorazione di tirosina idrossilasi falsa positiva, ad esempio in questo campione all'interno della corteccia surrenale. Per rimuovere la reattività incrociata dell'anticorpo nella perossidasi del rafano dalla prima immunostaining, è possibile eseguire lo stripping mediato a microonde di un minuto e otto minuti con conseguente doppio risultato di colorazione pulita. Nessun segnale significativo viene captato in campioni di controllo negativi.Lo stripping di otto minuti nel tampone di citrato bollente è anche sufficiente per eliminare la reattività incrociata degli anticorpi per molti anticorpi comunemente usati nella ghiandola surrenale. In alcuni casi, tuttavia, un debole segnale falso positivo è ancora rilevabile e un aumento di 20 minuti al trattamento a microonde potrebbe ancora non rimuovere completamente la reattività incrociata dell'anticorpo. Durante l'imaging a fluorescenza, è importante non spostare lo stadio quando si cambia canale.Tuttavia, potrebbe essere necessario riadattare lo stato attivo per ottenere immagini chiare di ciascun canale. Per ogni canale, assicurarsi di regolare il tempo di esposizione per assicurarsi che i segnali siano esposti in modo appropriato senza pixel o aree sovraesposti nelle immagini. Durante la procedura di colorazione, è importante mantenere i vetrini idratati dalla de-ceretta e le diapositive possono essere spogliate più volte con gli stessi metodi di stripping per consentire la colorazione multiplex.

Research

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Production and Use of Lentivirus to Selectively Transduce Primary Oligodendrocyte Precursor Cells for In Vitro Myelination Assays

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Produzione e l&#39;uso di Lentivirus a celle selettivamente trasdurre primaria Oligodendrocyte precursore<em&gt; In Vitro</em&gt; Saggi mielinizzazione

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