Name: a mouse model of incompletely resected soft tissue sarcoma for testing (neo)adjuvant therapies
Uploaded: 2020-07-28T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Mouse Model of Incompletely Resected Soft Tissue Sarcoma for Testing Neoadjuvant Therapies at JoVE.com

यह काम सारकोमा के लिए सॉक से अनुदान द्वारा समर्थित है! फाउंडेशन, ऑस्ट्रेलियन और न्यूजीलैंड सारकोमा एसोसिएशन, चिल्ड्रन ल्यूकेमिया एंड कैंसर रिसर्च फाउंडेशन और परपेचुअल परोपकार। W.J.L एक साइमन ली फैलोशिप और राष्ट्रीय स्वास्थ्य और चिकित्सा अनुसंधान परिषद से एक अनुसंधान फैलोशिप, और कैंसर परिषद WA द्वारा समर्थित है ।

इन प्रयोगों में इस्तेमाल होने वाले जानवरों को एनिमल रिसोर्स सेंटर (पर्थ, वेस्टर्न ऑस्ट्रेलिया) से प्राप्त किया गया था। हैरी पर्किंस इंस्टीट्यूट ऑफ मेडिकल रिसर्च बायोरिसोर्स नॉर्थ फैसिलिटी (पर्थ, वेस...

<ol>
	<li>Orosco, R. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Positive+Surgical+Margins+in+the+10+Most+Common+Solid+Cancers.">Positive Surgical Margins in the 10 Most Common Solid Cancers.</a> Scientific Reports. 8 (1), 5686 (2018).</li><li>Haas, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perioperative+Management+of+Extremity+Soft+Tissue+Sarcomas.">Perioperative Management of Extremity Soft Tissue Sarcomas.</a> Journal of Clinical Oncology. 36 (2), 118-124 (2018).</li><li>Brennan, M. F., Antonescu, C. R., Moraco, N., Singer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lessons+learned+from+the+study+of+10,000+patients+with+soft+tissue+sarcoma.">Lessons learned from the study of 10,000 patients with soft tissue sarcoma.</a> Annals of Surgery. 260 (3), 416-421 (2014).</li><li>Smith, H. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patterns+of+disease+relapse+in+primary+extremity+soft-tissue+sarcoma.">Patterns of disease relapse in primary extremity soft-tissue sarcoma.</a> British Journal of Surgery. 103 (11), 1487-1496 (2016).</li><li>Uramoto, H., Tanaka, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recurrence+after+surgery+in+patients+with+NSCLC.">Recurrence after surgery in patients with NSCLC.</a> Translational Lung Cancer Research. 3 (4), 242-249 (2014).</li><li>Stojadinovic, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+the+prognostic+significance+of+microscopic+margins+in+2,084+localized+primary+adult+soft+tissue+sarcomas.">Analysis of the prognostic significance of microscopic margins in 2,084 localized primary adult soft tissue sarcomas.</a> Annals of Surgery. 235 (3), 424-434 (2002).</li><li>Krall, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+systemic+response+to+surgery+triggers+the+outgrowth+of+distant+immune-controlled+tumors+in+mouse+models+of+dormancy.">The systemic response to surgery triggers the outgrowth of distant immune-controlled tumors in mouse models of dormancy.</a> Science Translational Medicine. 10 (436), (2018).</li><li>Bakos, O., Lawson, C., Rouleau, S., Tai, L. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combining+surgery+and+immunotherapy:+turning+an+immunosuppressive+effect+into+a+therapeutic+opportunity.">Combining surgery and immunotherapy: turning an immunosuppressive effect into a therapeutic opportunity.</a> Journal for ImmunoTherapy of Cancer. 6 (1), 86 (2018).</li><li>Predina, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+surgical+models+of+postoperative+tumor+recurrence+for+preclinical+adjuvant+therapy+assessment.">Characterization of surgical models of postoperative tumor recurrence for preclinical adjuvant therapy assessment.</a> American Journal of Translational Research. 4 (2), 206-218 (2012).</li><li>Talmadge, J. E., Singh, R. K., Fidler, I. J., Raz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+models+to+evaluate+novel+and+conventional+therapeutic+strategies+for+cancer.">Murine models to evaluate novel and conventional therapeutic strategies for cancer.</a> American Journal of Pathology. 170 (3), 793-804 (2007).</li><li>Khong, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+efficacy+of+tumor+debulking+surgery+is+improved+by+adjuvant+immunotherapy+using+imiquimod+and+anti-CD40.">The efficacy of tumor debulking surgery is improved by adjuvant immunotherapy using imiquimod and anti-CD40.</a> BMC Cancer. 14, 969 (2014).</li><li>Broomfield, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Partial,+but+not+complete,+tumor-debulking+surgery+promotes+protective+antitumor+memory+when+combined+with+chemotherapy+and+adjuvant+immunotherapy.">Partial, but not complete, tumor-debulking surgery promotes protective antitumor memory when combined with chemotherapy and adjuvant immunotherapy.</a> Cancer Research. 65 (17), 7580-7584 (2005).</li><li>Predina, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+positive-margin+resection+model+recreates+the+postsurgical+tumor+microenvironment+and+is+a+reliable+model+for+adjuvant+therapy+evaluation.">A positive-margin resection model recreates the postsurgical tumor microenvironment and is a reliable model for adjuvant therapy evaluation.</a> Cancer Biology &amp; Therapy. 13 (9), 745-755 (2012).</li><li>Tsukamoto, A., Serizawa, K., Sato, R., Yamazaki, J., Inomata, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vital+signs+monitoring+during+injectable+and+inhalant+anesthesia+in+mice.">Vital signs monitoring during injectable and inhalant anesthesia in mice.</a> Experimental Animals. 64 (1), 57-64 (2015).</li><li>Overwijk, W. W., Restifo, N. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=B16+as+a+mouse+model+for+human+melanoma.">B16 as a mouse model for human melanoma.</a> Current Protocols in Immunology. , (2001).</li><li>Predina, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+the+local+tumor+microenvironment+in+recurrent+cancers+may+explain+the+failure+of+vaccines+after+surgery.">Changes in the local tumor microenvironment in recurrent cancers may explain the failure of vaccines after surgery.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 110 (5), E415-E424 (2013).</li><li>Endo, M., Lin, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+margins+in+the+management+of+extremity+soft+tissue+sarcoma.">Surgical margins in the management of extremity soft tissue sarcoma.</a> Chinese Clinical Oncology. 7 (4), 37 (2018).</li><li>Liu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+Efficacy+of+Neoadjuvant+Compared+to+Adjuvant+Immunotherapy+to+Eradicate+Metastatic+Disease.">Improved Efficacy of Neoadjuvant Compared to Adjuvant Immunotherapy to Eradicate Metastatic Disease.</a> Cancer Discovery. 6 (12), 1382-1399 (2016).</li><li>Park, C. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extended+release+of+perioperative+immunotherapy+prevents+tumor+recurrence+and+eliminates+metastases.">Extended release of perioperative immunotherapy prevents tumor recurrence and eliminates metastases.</a> Science Translational Medicine. 10 (433), (2018).</li><li>Tai, L. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mouse+tumor+model+of+surgical+stress+to+explore+the+mechanisms+of+postoperative+immunosuppression+and+evaluate+novel+perioperative+immunotherapies.">A mouse tumor model of surgical stress to explore the mechanisms of postoperative immunosuppression and evaluate novel perioperative immunotherapies.</a> Journal of Visualized Experiments. (85), e51253 (2014).</li><li>Gast, C. E., Shaw, A. K., Wong, M. H., Coussens, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+Procedures+and+Methodology+for+a+Preclinical+Murine+Model+of+De+Novo+Mammary+Cancer+Metastasis.">Surgical Procedures and Methodology for a Preclinical Murine Model of De Novo Mammary Cancer Metastasis.</a> Journal of Visualized Experiments. (125), (2017).</li><li>Qiu, W., Su, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+orthotopic+pancreatic+tumor+mouse+models.">Development of orthotopic pancreatic tumor mouse models.</a> Methods in Molecular Biology. 980, 215-223 (2013).</li><li>Erstad, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+and+heterotopic+murine+models+of+pancreatic+cancer+and+their+different+responses+to+FOLFIRINOX+chemotherapy.">Orthotopic and heterotopic murine models of pancreatic cancer and their different responses to FOLFIRINOX chemotherapy.</a> Disease Models &amp; Mechanisms. 11 (7), (2018).</li></ol>

हम पेरी-ऑपरेटिव उपचारों का परीक्षण करने के लिए नरम ऊतक सारकोमा के अधूरे सर्जिकल रिसेक्शन के माउस मॉडल के लिए एक प्रोटोकॉल प्रदान करते हैं। हमने उपचार के बाद चूहों के बीच घाव भरने के आकलन की अनुमति देने ...

सर्जरी कई ठोस ट्यूमर के लिए मुख्य उपचार विकल्प बनी हुई है1, जिसमें मुलायम ऊतक सारकोमा2,3शामिल हैं । कैंसर सर्जरी तकनीकों में सुधार के बावजूद, और (नव) एडजुवेंट चिकित्सा के साथ संयोजन, प्राथमिक ट्यूमर रेसेक्शन4,,5के बाद अभी भी कैंसर रिलेप्स और मेटास्टेसिस का एक उच्च जोखिम है। नरम ऊतक सारकोमा में, सर्जरी की साइट पर विशेष रूप से लोकोक्षेत्रीय रूप से होते हैं, जिसके परिणामस्वरूप रुग्णता और मृत्यु दर में वृद्धि होती है। नैदानिक सेटिंग में, व्यापक पर्याप्त मार्जिन प्राप्त करना मुश्किल हो सकता है (उदाहरण के लिए, शारीरिक बाधाओं के कारण), जिसके परिणामस्वरूप अधूरा रीसेक्शन और बाद में ट्यूमर पुनरावृत्ति6। सर्जिकल तनाव और घाव भरने की बाद की प्रक्रिया ट्यूमर पुनरावृत्ति 7,8के लिए अनुकूल इम्यूनोसप्रेसिव ट्यूमर माइक्रोएनवायरमेंट बनाने के लिए जानाजाताहै। इसलिए, नरम ऊतक सारकोमा, विशेष रूप से इम्यूनोथेरपी के लिए नए उपचारों की खोज और विकास, आदर्श रूप से सर्जिकल घाव उपचार प्रतिक्रिया को ध्यान में रखना चाहिए।
एडजुवेंट चिकित्सा के लिए अधिकांश प्रीक्लिनिकल अध्ययन शुरू में सर्जिकल तनाव और घाव हीलिंग प्रतिक्रिया9,,10को शामिल किए बिना चमड़े के नीचे सिनेजेनिक या ज़ेनोट्रांसप्लांट माउस मॉडल का उपयोग करके किए जाते हैं। इसलिए, हमने अधूरा सर्जिकल रीसेक्शन को शामिल करते हुए एक सिनेजेनिक चमड़े के नीचे माउस सॉफ्ट टिश्यू सारकोमा मॉडल विकसित किया। WEHI 164 फाइब्रोसारकोमा कोशिकाओं को चमड़े के नीचे टीका लगाया जाता है, और एक बार ट्यूमर स्थापित हो जाने के बाद, हम ट्यूमर बल्क(चित्रा 1A-ई) का 50-75% निकालतेहैं। ट्यूमर लगातार शेष ट्यूमर से फिर से बढ़ता है। यह मॉडल सर्जिकल तनाव और घाव भरने के प्रभाव पर विचार करते हुए एडजुवंत चिकित्सा के परीक्षण के लिए अनुमति देता है। अपूर्ण रिसेक्शन के समान सर्जिकल मॉडलों का उपयोग कई समूहों द्वारा किए गए कई अध्ययनों में किया गया है और यह प्रजनन योग्य और प्रभावी पाया गया है11,12,13.13 यहां, हम इस प्रोटोकॉल का विस्तृत विवरण प्रदान करते हैं।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>26 gauge 0.5 mL insulin syringe</td>
			<td>Becton Dickinson, Australia</td>
			<td>326769</td>
			<td>None</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-Mercaptoethanol</td>
			<td>Life Technologies Australia Pty Ltd</td>
			<td>21985023</td>
			<td>None</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anaestetic gas machine</td>
			<td>Darvall Vet, Australia</td>
			<td>SKU: 2848</td>
			<td>None</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-CTLA-4</td>
			<td>BioXcell, USA</td>
			<td>BE0164</td>
			<td>None</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-PD-1</td>
			<td>BioXcell, USA</td>
			<td>BP0273</td>
			<td>None</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine Hydrochloride Injection, 0.3mg/mL</td>
			<td>RB healthcare UK Limited, UK</td>
			<td>55175</td>
			<td>Prescription order</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chlorhexidine Surgical Scrub 4%</td>
			<td>Perigo Australia, Australia</td>
			<td>CHL01449F(scrub</td>
			<td>None</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine serum</td>
			<td>CellSera, Australia</td>
			<td>AU-FBS-PG</td>
			<td>None</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps Fine 10.5 cm</td>
			<td>Surgical house, Western Australia</td>
			<td>CC74110</td>
			<td>None</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps Fine 12 cm Serrated</td>
			<td>Surgical house, Western Australia</td>
			<td>CC74212</td>
			<td>None</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps Halsted 14 cm</td>
			<td>Surgical house, Western Australia</td>
			<td>CD01114</td>
			<td>None</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating chamber</td>
			<td>Datesand Ltd, UK</td>
			<td>Mini-Thermacage</td>
			<td>None</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES (1M)</td>
			<td>Life Technologies Australia Pty Ltd</td>
			<td>15630080</td>
			<td>None</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Henry Schein Animal Health, Australia</td>
			<td>SKU: 29405</td>
			<td>Prescription order</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lubricating Eye Ointment</td>
			<td>Alcon</td>
			<td>n/a</td>
			<td>None</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/streptomycin 1000X</td>
			<td>Life Technologies Australia Pty Ltd</td>
			<td>15140122</td>
			<td>None</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffered Solution 10x</td>
			<td>Life Technologies Australia Pty Ltd</td>
			<td>70013-032</td>
			<td>None</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reflex 7mm Clips</td>
			<td>Able scientific, Australia</td>
			<td>AS59038</td>
			<td>None</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reflex 7mm Wound Clip Applicator</td>
			<td>Able scientific, Australia</td>
			<td>AS59036</td>
			<td>None</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reflex Wound Clip Remover</td>
			<td>Able scientific, Australia</td>
			<td>AS59037</td>
			<td>None</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rodent Qube Anesthesia Breathing Circuit</td>
			<td>Darvall Vet, Australia</td>
			<td>#7885</td>
			<td>None</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640 Medium + L-glutamine</td>
			<td>Life Technologies Australia Pty Ltd</td>
			<td>21870092</td>
			<td>None</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors Iris STR 11 cm</td>
			<td>Surgical house, Western Australia</td>
			<td>KF3211</td>
			<td>None</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors Iris STR 9 cm</td>
			<td>Surgical house, Western Australia</td>
			<td>JH4209</td>
			<td>None</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small Induction Chamber</td>
			<td>Darvall Vet, Australia</td>
			<td>SKU: 9630</td>
			<td>None</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TrypLE express 1x</td>
			<td>Life Technologies Australia Pty Ltd</td>
			<td>12604-021</td>
			<td>None</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a mouse model of incompletely resected soft tissue sarcoma for testing (neo)adjuvant therapies

सर्जरी अक्सर कई ठोस ट्यूमर के लिए पहला इलाज है। हालांकि, स्थानीय रिलेप्स अक्सर प्राथमिक ट्यूमर रीसेक्शन के बाद होते हैं, एडजुवेंट या नव-एडजुवेंट चिकित्सा के बावजूद। यह तब होता है जब सर्जिकल मार्जिन अपर्याप्त ट्यूमर मुक्त होते हैं, जिसके परिणामस्वरूप अवशिष्ट कैंसर कोशिकाएं होती हैं। जैविक और इम्यूनोलॉजिकल नजरिए से, सर्जरी एक शून्य घटना नहीं है; घाव भरने का वातावरण समर्थक और एंटी-ट्यूमरजनित रास्ते दोनों को प्रेरित करने के लिए जाना जाता है। नतीजतन, स्थानीय पतन को रोकने के उद्देश्य से दवा विकास के लिए प्रीक्लिनिकल मॉडल को सर्जरी के साथ इलाज किए गए रोगियों में नैदानिक सेटिंग्स को मॉडल करने के लिए नए (नव) एडजुवेंट चिकित्सा का परीक्षण करते समय सर्जिकल रिसेक्शन को शामिल करना चाहिए।
यहां, हम WEHI 164 नरम ऊतक सारकोमा के अधूरे सर्जिकल रिसेक्शन के एक माउस मॉडल का वर्णन करते हैं जो घाव भरने की प्रतिक्रिया की स्थापना में (नव) एडजुवेंट उपचारों के परीक्षण की अनुमति देता है। इस मॉडल में, ट्यूमर का 50% या 75% हटा दिया जाता है, जो नैदानिक सेटिंग में सर्जरी के बाद सकल अवशिष्ट रोग को मॉडल करने के लिए सीटू में कुछ कैंसर ऊतकों को पीछे छोड़ देता है। यह मॉडल सर्जरी के संदर्भ में परीक्षण उपचार की अनुमति देता है, जबकि घाव भरने की प्रतिक्रिया पर भी विचार करता है, जो (नव) एडजुवेंट उपचार की प्रभावकारिता को प्रभावित कर सकता है। अपूर्ण सर्जिकल रिसेक्शन के परिणामस्वरूप एडुवेंट थेरेपी के अभाव में सभी चूहों में ट्यूमर का पुन: उत्पन्न पुनर्विकास होता है। चेकपॉइंट नाकाबंदी के साथ एडुवेंट उपचार के परिणामस्वरूप कम ट्यूमर पुनर्विकास होता है। इस प्रकार यह मॉडल डीबुलिंग सर्जरी और उससे जुड़े घाव उपचार प्रतिक्रिया के संदर्भ में उपचारों के परीक्षण के लिए उपयुक्त है और इसे अन्य प्रकार के ठोस कैंसर तक बढ़ाया जा सकता है।

50 मिमी2 के आकार के लिए ट्यूमर विकास आंशिक डेबुल्क के लिए एक आदर्श आकार है। 50 मिमी2 ट्यूमर के अधूरे सर्जिकल रीसेक्शन के परिणामस्वरूप एडजुवेंट इम्यूनोथेरेपी(चित्रा 4ए)</st...

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A Mouse Model of Incompletely Resected Soft Tissue Sarcoma for Testing Neoadjuvant Therapies

इस प्रोटोकॉल में, हम परीक्षण (नव) एडजुवेंट चिकित्सा के लिए नरम ऊतक सारकोमा के अधूरे सर्जिकल रिसेक्शन के माउस मॉडल का वर्णन करते हैं।

परीक्षण के लिए अधूरा पुनः प्राप्त सॉफ्ट टिशू सारकोमा का एक माउस मॉडल (नियो) एडजुवेंट थेरेपी

Surgery is often the first treatment for many solid tumors. However, local relapses frequently occur following primary tumor resection, despite adjuvant ...

इस प्रोटोकॉल का उद्देश्य ट्यूमर डीबुलिंग सर्जरी के बाद अवशिष्ट रोग की नैदानिक सेटिंग की नकल करना है, और इसलिए हमें पोस्टऑपरेटिव घाव भरने के संदर्भ में नए कैंसर उपचारों का परीक्षण करने की अनुमति देता है। इस तकनीक का लाभ यह है कि यह दिए गए घाव की मात्रा और ट्यूमर की मात्रा को रहने की अनुमति देता है। यह तकनीक कैंसर के लिए नए उपचारों की पहचान करने वाले प्रीक्लिनिकल अध्ययनों के लिए विशेष रूप से महत्वपूर्ण है, कि यह स्थानीय रूप से एक उदाहरण है जिसमें से नरम ऊतक सारकोमा है।यह दृश्य प्रदर्शन उलटा तकनीक प्रदर्शित करने के लिए महत्वपूर्ण है, जो हमें त्वचा की ओर से जुड़े ट्यूमर का पर्दाफाश करने की अनुमति देता है। पाठ प्रोटोकॉल में वर्णित चूहों में तैयार कैंसर कोशिकाओं के चमड़े के नीचे टीका के साथ इस प्रक्रिया को शुरू करें। 12 दिन, टीका के बाद, जब ट्यूमर लगभग 50 वर्ग मिलीमीटर के आकार तक पहुंच गए हैं, तो सर्जरी से 30 मिनट पहले गर्दन के स्क्रफ में बुप्रेनोरफिन के 100 माइक्रोलीटर के साथ खुराक चूहों।बेंच कोट के साथ कवर गर्मी पैड के साथ शल्य चिकित्सा क्षेत्र की स्थापना की और संज्ञाहरण के लिए एक नाक शंकु की स्थापना की । स्वच्छ शल्य चिकित्सा उपकरणों की व्यवस्था करें ताकि वे आसान पहुंच के भीतर हों, जिनमें क्लोरहेक्साडीन, झाड़ू, धुंध, आंख जेल, दो घुमावदार संदंश, कैंची, क्लिप एप्लिकेटर, क्लिप रिमूवर और क्लिप रिफिल शामिल हैं। हीटिंग चैंबर को 37 डिग्री सेल्सियस तक गर्म करें और वसूली के लिए एक और हीट पैड स्थापित करें।ध्यान दें कि इस प्रक्रिया के लिए दो लोगों की आवश्यकता होती है। एक सहायक को प्रक्रिया के दौरान माउस की श्वास की बारीकी से निगरानी करनी चाहिए। पाठ प्रोटोकॉल में वर्णित माउस को एनेस्थेटाइज करने के बाद, यह सुनिश्चित करने के लिए एक चुटकी परीक्षण और कॉर्नियल रिफ्लेक्स परीक्षण करें कि सर्जरी शुरू करने से पहले माउस पूरी तरह से एनेस्थेटाइज्ड है।आंखों के सूखापन से बचने के लिए माउस की आंखों को थोड़ी मात्रा में नेत्र जेल से ढक दें। क्लोरहेक्साडीन के साथ सर्जिकल क्षेत्र को स्वैबिंग करके इस सर्जरी की शुरुआत करें। संदंश और कैंची की एक जोड़ी का उपयोग करना पृष्ठीय पक्ष के साथ एक सेंटीमीटर सीधे चीरा बनाते हैं, ट्यूमर से तीन मिलीमीटर दूर ।ट्यूमर को कवर करने वाली त्वचा को सीधे न काटें क्योंकि यह अच्छी तरह से ठीक नहीं होगा। ट्यूमर को काटने के लिए स्केलपेल का उपयोग करने से बचें और टुकड़ों को स्कूप करने के लिए चिमटी का उपयोग करें। चिमटी का उपयोग करना, ट्यूमर और पेरिटोनम के बीच प्रावरणी और चमड़े के नीचे फैटी ऊतक को दूर खींचें।चमड़े के नीचे ट्यूमर सामान्य रूप से त्वचा की ओर से जुड़ा होता है। चिमटी का उपयोग कर ट्यूमर असर पक्ष पर त्वचा को धीरे से पकड़ कर घाव खोलें और ट्यूमर को उलटा करें ताकि यह बाहर दिखाई दे। कैंची की एक जोड़ी का उपयोग करना, आधे से ट्यूमर कैप्सूल को हटाने के लिए काट, ट्यूमर के आधार से खोलने के निकटतम से शुरू ।50% debulk सर्जरी के लिए, ट्यूमर के बीच में कटौती। घुमावदार संदंश का उपयोग ट्यूमर के खंड को हटा दिया जाना है। डेबुल्क क्षेत्र से किसी भी अवशेष को स्कूप करें।75% debulk के लिए, एक 50% ट्यूमर debulk प्रदर्शन से शुरू तो ट्यूमर के आधे शेष 50% में कटौती. घुमावदार संदंश का उपयोग करके ट्यूमर का 25% तक स्कूप करें। सर्जिकल साइट को बंद करने के लिए, शेष ट्यूमर को त्वचा के नीचे वापस रखें और संदंश का उपयोग करें, त्वचा को एक साथ खींचें और घाव के साथ त्वचा को लाइन करें।घाव के किनारे से पांच मिलीमीटर त्वचा को एक साथ रखें और दाईं ओर शुरू होने वाले घाव को बंद करने के लिए सर्जिकल क्लिप का उपयोग करें, संदंश के निकटतम। कोई अंतर्निहित ऊतक उजागर किया जाता है सुनिश्चित करने के लिए जरूरत के रूप में कई क्लिप लागू होते हैं । आम तौर पर, तीन से चार क्लिप क्लिप के बीच दो मिलीमीटर अंतराल के साथ लागू होते हैं।चूहों को गर्म हीटिंग कक्ष में डालकर ठीक होने दें। माउस के पिंजरे को हीट पैड पर रखें। हीटिंग कक्ष में चूहों की निगरानी करें जब तक कि वे एनेस्थेटिक से बरामद न हो जाएं।फिर, चूहों को वापस पिंजरे में रखें, पिंजरे को एक और 10 मिनट के लिए हीट पैड पर छोड़ दें जब तक कि चूहे अधिक सक्रिय न हो जाएं। चूहों को गीला और मुलायम भोजन दें। वसूली के लिए सर्जरी के एक घंटे बाद चूहों की निगरानी करें।दिन के अंत में और अगले सुबह चूहों की निगरानी करें और यह सुनिश्चित करें कि क्लिप जगह में रहें। ब्याज के उपचार के आधार पर, किसी भी समय आगमन या नियोएडजुवेंट थेरेपी के साथ चूहों का इलाज करें। उदाहरण के लिए, टीका लगाने के बाद 15 दिन में एंटी-सीटीएलए-4 इंट्रापेरिटोनली की 100 माइक्रोग्राम की एक खुराक के साथ चूहों का इलाज करें।वैकल्पिक रूप से, चूहों को 200 माइक्रोग्राम एंटी-पीडी-1 इंट्रापेरिटोनेली की तीन खुराकों के साथ दिन, 15, 17 और 19 टीका के बाद इलाज करें। 50 वर्ग मिलीमीटर ट्यूमर का अधूरा सर्जिकल रीसेक्शन, बिंदीदार रेखा द्वारा यहां इंगित किया गया है कि एडजुवेंट इम्यूनोथेरेपी के अभाव में ट्यूमर के 100% प्रजनन योग्य पुनर्विकास में परिणाम होता है। इसलिए, 50 वर्ग मिलीमीटर के आकार में ट्यूमर विकास आंशिक डेबुल्क के लिए एक आदर्श आकार है।मॉडल तो चेकपॉइंट मॉड्यूल, साइटोटॉक्सिक टी लिंफोसाइट संबद्ध प्रोटीन चार और प्रोग्राम मौत रिसेप्टर एक के खिलाफ एंटीबॉडी का उपयोग कर adjuvant इम्यूनोथेरपी का परीक्षण करने के लिए इस्तेमाल किया गया था । एंटी-सीटीएलए-4 के साथ चूहों का उपचार, 80% की इलाज दर के परिणामस्वरूप, जबकि एंटी-पीडी-1 के साथ चूहों के उपचार के परिणामस्वरूप 25% की इलाज दर हुई एंटी-पीडी-1 के साथ प्रतिक्रिया प्रतिक्रिया दर को और बेहतर बनाने के लिए इसे उपन्यास संयोजनों का परीक्षण करने का अवसर प्रदान करती है। ऐसे में जरूरी है कि बाकी ट्यूमर त्वचा से जुड़ा रहता है, नहीं तो ब्लड सप्लाई कट जाएगी और ट्यूमर गल-माना हो जाएगा।इस प्रक्रिया के बाद, ट्यूमर का विश्लेषण विभिन्न तरीकों से किया जा सकता है, जैसे कि प्रवाह साइटोमेट्री यह आकलन करने के लिए कि सर्जरी ट्यूमर घुसपैठ कोशिकाओं को कैसे प्रभावित करती है। इस माउस मॉडल ने हमें यह पता लगाने की अनुमति दी है कि घाव भरने से कैंसर इम्यूनोथेरपी पर क्या प्रभाव पड़ता है।

Research

JoVE Journal

Medicine

A Mouse Model of Incompletely Resected Soft Tissue Sarcoma for Testing (Neo)adjuvant Therapies

Use of Animal Model of Sepsis to Evaluate Novel Herbal Therapies

पूति के पशु मॉडल का उपयोग करने के लिए उपन्यास हर्बल चिकित्सा मूल्यांकन

Sepsis refers to a systemic inflammatory response syndrome resulting from a microbial infection. It has been routinely simulated in animals by several ...

Clinical Testing and Spinal Cord Removal in a Mouse Model for Amyotrophic Lateral Sclerosis (ALS)

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नैदानिक ​​और Amyotrophic पार्श्व स्केलेरोसिस के लिए एक माउस मॉडल (ए एल एस) में स्पाइनल कॉर्ड को हटाने परीक्षण

Amyotrophic lateral sclerosis (ALS) is a fatal neurodegenerative disorder resulting in progressive degeneration of motoneurons. Peak of onset is around 60 ...

Surgical Technique for Spinal Cord Delivery of Therapies: Demonstration of Procedure in Gottingen Minipigs

चिकित्सा की रीढ़ की हड्डी की डिलिवरी के लिए सर्जिकल तकनीक: प्रक्रिया की Gottingen Minipigs में प्रदर्शन

This is a  compact visual description of a combination of surgical technique and device  for the  delivery of (gene and cell) therapies into the spinal ...

The In ovo CAM-assay as a Xenograft Model for Sarcoma

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<em&gt; ओवो में</emसारकोमा के लिए एक Xenograftmodel रूप&gt; सीएएम परख

Sarcoma is a very rare disease that is heterogeneous in nature, all hampering the development of new therapies. Sarcoma patients are ideal candidates for ...

Subretinal Transplantation of MACS Purified Photoreceptor Precursor Cells into the Adult Mouse Retina

वयस्क माउस रेटिना में एमएएसएस शुद्ध फोटोरिसेप्टर अग्रदूत कोशिकाओं का उपरेटिनल प्रत्यारोपण

Vision impairment and blindness due to the loss of the light-sensing cells of the retina, i.e. photoreceptors, represents the main reason for disability ...

Implantation of Inferior Vena Cava Interposition Graft in Mouse Model

माउस मॉडल में अवर रग Cava क्षेपक भ्रष्टाचार के आरोपण

Biodegradable scaffolds seeded with bone marrow mononuclear cells (BMCs) are often used for reconstructive surgery to treat congenital cardiac anomalies. ...

Transplantation of Pulmonary Valve Using a Mouse Model of Heterotopic Heart Transplantation

Heterotopic हृदय प्रत्यारोपण के एक माउस मॉडल का उपयोग पल्मोनरी वाल्व के प्रत्यारोपण

Tissue engineered heart valves, especially decellularized valves, are starting to gain momentum in clinical use of reconstructive surgery with mixed ...

Evaluation of the Efficacy of the H. pylori Protein HP-NAP as a Therapeutic Tool for Treatment of Bladder Cancer in an Orthotopic Murine Model

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की प्रभावकारिता का मूल्यांकन<em&gt; एच। पाइलोरी</emएक Orthotopic के murine मॉडल में मूत्राशय के कैंसर के इलाज के लिए एक चिकित्सीय उपकरण के रूप&gt; प्रोटीन हिमाचल प्रदेश झपकी

Bladder cancer is one of the most common malignancies of the urogenital tract. Intravesical injection of Bacillus Calmette-Gu&#233;rin (BCG) is the gold ...

A Mouse Model for Laser-induced Choroidal Neovascularization

लेजर प्रेरित Choroidal neovascularization के लिए एक माउस मॉडल

The mouse laser-induced choroidal neovascularization (CNV) model has been a crucial mainstay model for neovascular age-related macular degeneration (AMD) ...

A Mouse Model of Orthopedic Surgery to Study Postoperative Cognitive Dysfunction and Tissue Regeneration

पश्चात संज्ञानात्मक रोग और ऊतक पुनर्जनन अध्ययन करने के लिए आर्थोपेडिक सर्जरी के एक माउस मॉडल

Surgery is commonly used to improve and maintain quality of life. Unfortunately, in vulnerable patients such as the elderly, complications may occur and ...