Name: generation of oligodendrocytes and oligodendrocyte-conditioned medium for co-culture experiments
Uploaded: 2020-02-09T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Generation of Oligodendrocytes and Oligodendrocyte-Conditioned Medium for Co-Culture Experiments at JoVE.com

लेखक पांडुलिपि संपादन में अपनी बुद्धिमान सलाह के लिए रेमी रोन्ज़ानो का शुक्रिया अदा करना चाहते हैं। इस काम को आईसीएम, INSERM, एनएसएफ को ARSEP फाउंडेशन ग्रांट और बोवेट-लाब्रुयेरे मूल्य द्वारा वित्त पोषित किया गया था।

इस प्रयोग में चूहों की देखभाल और उपयोग संस्थागत नीतियों और दिशानिर्देशों (यूपीएमसी, INSERM, और यूरोपीय समुदाय परिषद के निर्देश 86/609/EEC) के अनुरूप है । निम्नलिखित प्रोटोकॉल 12 पिल्ले के एक मानक कूड़े के लिए स्था?...

<ol>
	<li>Zalc, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+acquisition+of+myelin:+a+success+story.">The acquisition of myelin: a success story.</a> Novartis Foundation Symposium. 276, 15-21 (2006).</li><li>Habermacher, C., Angulo, M. C., Benamer, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glutamate+versus+GABA+in+neuron-oligodendroglia+communication.">Glutamate versus GABA in neuron-oligodendroglia communication.</a> Glia. 67 (11), 2092-2106 (2019).</li><li>Sherman, D. L., Brophy, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+axon+ensheathment+and+myelin+growth.">Mechanisms of axon ensheathment and myelin growth.</a> Nature Reviews. Neuroscience. 6 (9), 683-690 (2005).</li><li>Freeman, S. A., Desmazi&#232;res, A., Fricker, D., Lubetzki, C., Sol-Foulon, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+sodium+channel+clustering+and+its+influence+on+axonal+impulse+conduction.">Mechanisms of sodium channel clustering and its influence on axonal impulse conduction.</a> Cellular and molecular life sciences: CMLS. 73 (4), 723-735 (2016).</li><li>Lee, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oligodendroglia+metabolically+support+axons+and+contribute+to+neurodegeneration.">Oligodendroglia metabolically support axons and contribute to neurodegeneration.</a> Nature. 487 (7408), 443-448 (2012).</li><li>Nave, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myelination+and+the+trophic+support+of+long+axons.">Myelination and the trophic support of long axons.</a> Nature Reviews. Neuroscience. 11 (4), 275-283 (2010).</li><li>Monje, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myelin+Plasticity+and+Nervous+System+Function.">Myelin Plasticity and Nervous System Function.</a> Annual Review of Neuroscience. 41, 61-76 (2018).</li><li>Birey, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+and+Stress-Induced+Loss+of+NG2+Glia+Triggers+Emergence+of+Depressive-like+Behaviors+through+Reduced+Secretion+of+FGF2.">Genetic and Stress-Induced Loss of NG2 Glia Triggers Emergence of Depressive-like Behaviors through Reduced Secretion of FGF2.</a> Neuron. 88 (5), 941-956 (2015).</li><li>Fr&#252;hbeis, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurotransmitter-triggered+transfer+of+exosomes+mediates+oligodendrocyte-neuron+communication.">Neurotransmitter-triggered transfer of exosomes mediates oligodendrocyte-neuron communication.</a> PLoS Biology. 11 (7), e1001604 (2013).</li><li>Jang, M., Gould, E., Xu, J., Kim, E. J., Kim, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oligodendrocytes+regulate+presynaptic+properties+and+neurotransmission+through+BDNF+signaling+in+the+mouse+brainstem.">Oligodendrocytes regulate presynaptic properties and neurotransmission through BDNF signaling in the mouse brainstem.</a> eLife. 8, (2019).</li><li>Sakry, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oligodendrocyte+precursor+cells+modulate+the+neuronal+network+by+activity-dependent+ectodomain+cleavage+of+glial+NG2.">Oligodendrocyte precursor cells modulate the neuronal network by activity-dependent ectodomain cleavage of glial NG2.</a> PLoS Biology. 12 (11), e1001993 (2014).</li><li>Sakry, D., Yigit, H., Dimou, L., Trotter, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oligodendrocyte+precursor+cells+synthesize+neuromodulatory+factors.">Oligodendrocyte precursor cells synthesize neuromodulatory factors.</a> PloS One. 10 (5), e0127222 (2015).</li><li>Stadelmann, C., Timmler, S., Barrantes-Freer, A., Simons, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myelin+in+the+Central+Nervous+System:+Structure,+Function,+and+Pathology.">Myelin in the Central Nervous System: Structure, Function, and Pathology.</a> Physiological Reviews. 99 (3), 1381-1431 (2019).</li><li>Freeman, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acceleration+of+conduction+velocity+linked+to+clustering+of+nodal+components+precedes+myelination.">Acceleration of conduction velocity linked to clustering of nodal components precedes myelination.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 112 (3), E321-E328 (2015).</li><li>Baumann, N., Pham-Dinh, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biology+of+oligodendrocyte+and+myelin+in+the+mammalian+central+nervous+system.">Biology of oligodendrocyte and myelin in the mammalian central nervous system.</a> Physiological Reviews. 81 (2), 871-927 (2001).</li><li>McCarthy, K. D., de Vellis, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+separate+astroglial+and+oligodendroglial+cell+cultures+from+rat+cerebral+tissue.">Preparation of separate astroglial and oligodendroglial cell cultures from rat cerebral tissue.</a> The Journal of Cell Biology. 85 (3), 890-902 (1980).</li><li>Dean, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strain-specific+differences+in+perinatal+rodent+oligodendrocyte+lineage+progression+and+its+correlation+with+human.">Strain-specific differences in perinatal rodent oligodendrocyte lineage progression and its correlation with human.</a> Developmental Neuroscience. 33 (3-4), 251-260 (2011).</li><li>Domingues, H. S., Portugal, C. C., Socodato, R., Relvas, J. B., Astrocyte, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oligodendrocyte,+Astrocyte,+and+Microglia+Crosstalk+in+Myelin+Development,+Damage,+and+Repair.">Oligodendrocyte, Astrocyte, and Microglia Crosstalk in Myelin Development, Damage, and Repair.</a> Frontiers in Cell and Developmental Biology. 4, 71 (2016).</li><li>Klinghoffer, R. A., Hamilton, T. G., Hoch, R., Soriano, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+allelic+series+at+the+PDGFalphaR+locus+indicates+unequal+contributions+of+distinct+signaling+pathways+during+development.">An allelic series at the PDGFalphaR locus indicates unequal contributions of distinct signaling pathways during development.</a> Developmental Cell. 2 (1), 103-113 (2002).</li><li>Spassky, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+early+steps+of+oligodendrogenesis:+insights+from+the+study+of+the+plp+lineage+in+the+brain+of+chicks+and+rodents.">The early steps of oligodendrogenesis: insights from the study of the plp lineage in the brain of chicks and rodents.</a> Developmental Neuroscience. 23 (4-5), 318-326 (2001).</li><li>Moyon, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Demyelination+Causes+Adult+CNS+Progenitors+to+Revert+to+an+Immature+State+and+Express+Immune+Cues+That+Support+Their+Migration.">Demyelination Causes Adult CNS Progenitors to Revert to an Immature State and Express Immune Cues That Support Their Migration.</a> Journal of Neuroscience. 35 (1), 4-20 (2015).</li><li>Gardner, A., Jukkola, P., Gu, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myelination+of+rodent+hippocampal+neurons+in+culture.">Myelination of rodent hippocampal neurons in culture.</a> Nature Protocols. 7 (10), 1774-1782 (2012).</li><li>Thetiot, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+alternative+mechanism+of+early+nodal+clustering+and+myelination+onset+in+GABAergic+neurons+of+the+central+nervous+system.">An alternative mechanism of early nodal clustering and myelination onset in GABAergic neurons of the central nervous system.</a> bioRxiv. , 763573 (2019).</li><li>Dubessy, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+a+Contactin+multi-molecular+complex+secreted+by+oligodendrocytes+in+nodal+protein+clustering+in+the+CNS.">Role of a Contactin multi-molecular complex secreted by oligodendrocytes in nodal protein clustering in the CNS.</a> Glia. 67 (12), 2248-2263 (2019).</li><li>Barateiro, A., Fernandes, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+oligodendrocyte+lineage+progression:+in+vitro+models+of+proliferation,+differentiation+and+myelination.">Temporal oligodendrocyte lineage progression: in vitro models of proliferation, differentiation and myelination.</a> Biochimica Et Biophysica Acta. 1843 (9), 1917-1929 (2014).</li><li>Thetiot, M., Ronzano, R., Aigrot, M. S., Lubetzki, C., Desmazi&#232;res, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+and+Immunostaining+of+Myelinating+Organotypic+Cerebellar+Slice+Cultures.">Preparation and Immunostaining of Myelinating Organotypic Cerebellar Slice Cultures.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (145), (2019).</li><li>Mannioui, A., Zalc, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conditional+Demyelination+and+Remyelination+in+a+Transgenic+Xenopus+laevis.">Conditional Demyelination and Remyelination in a Transgenic Xenopus laevis.</a> Methods in Molecular Biology (Clifton, N.J.). 1936, 239-248 (2019).</li></ol>

यहां, हम मिश्रित ग्लियल संस्कृतियों से अत्यधिक समृद्ध ओलिगोडेड्रोग्लिसियल वंश कोशिका संस्कृतियों को प्राप्त करने के लिए एक विस्तृत प्रोटोकॉल प्रदान करते हैं, जो पहले प्रकाशित विधि16से अनुक...

ओलिगोडेन्ट्रोसाइट्स (ओएलएस) केंद्रीय तंत्रिका तंत्र (सीएनएस) की ग्लियल कोशिकाएं हैं जो एक्सोन के चारों ओर माइलिन लपेटन उत्पन्न करती हैं। ओएलएस ओलिगोडेन्रोसाइट अग्रदूत कोशिकाओं (ओपीसी) से उत्पन्न होता है जो भ्रूण सीएनएस के वेंट्रिकुलर क्षेत्रों के भीतर पैदा होता है और फिर पूरी तरह से परिपक्व ओएलएस (यानी, मायलिन बनाने वाली कोशिकाओं)1में स्थानांतरित और अंतर करता है। प्रारंभिक विकास के दौरान ओपीसी प्रचुर मात्रा में होते हैं, लेकिन वयस्क मस्तिष्क में भी बने रहते हैं जहां वे प्रमुख प्रोलिफेरेटिव सेल जनसंख्या2का प्रतिनिधित्व करते हैं। एक एकल राजभाषा गैर-उत्तेजनीय वर्गों (यानी, इंटरनोड्स) में कई एक्सोन को जोड़ता है, और प्रत्येक मायलिन लूप का किनारा पैरानोडल डोमेन बनाने वाले एक्सॉन को देता है जो माइलिन1,3के इन्सुलेट गुणों के लिए महत्वपूर्ण है। बीच में पैरानोड्स छोटे अमीलिनेट अंतराल होते हैं जिन्हें रैनविएर के नोड्स कहा जाता है। ये नोड्स वोल्टेज-गेटेड सोडियम चैनलों (एनएवी) से समृद्ध हैं, जिससे नमकीन चालन4के माध्यम से कार्रवाई क्षमता के उत्थान और तेजी से प्रचार की अनुमति मिल जाती है। इस कड़ी बातचीत से ओएलएस5,6से लैक्टेट के न्यूरोनल तेज के माध्यम से एक्सोनल एनर्जी सपोर्ट भी मिल ता है .
ओलिगोडेंड्रोग्लियाल वंश कोशिकाओं की परिपक्वता और माइलेनेशन प्रक्रिया को न्यूरॉन्स7के साथ उनकी बातचीत द्वारा कसकर विनियमित किया जाता है । दरअसल, ओल और ओपीसी, ने एनजी2 कोशिकाओं का भी नाम लिया, न्यूरोट्रांसमीटर के लिए रिसेप्टर्स की एक सरणी व्यक्त की, और उत्तेजक और निरोधात्मक न्यूरॉन्स से इनपुट प्राप्त कर सकते हैं, जिससे उन्हें न्यूरोनल गतिविधि को समझने की अनुमति मिलती है जो उनके प्रसार को ट्रिगर कर सकती है और/या myelinating कोशिकाओं में अंतर2। बदले में, ओपीसी/ओएलएस माइक्रोवेसिकल्स और प्रोटीन को बाह्य स्थान में स्रावित करते हैं जो अकेले या सहक्रियात्मक रूप से न्यूरोमोडुलेटिव और न्यूरोप्रोटेक्टिव कार्योंमें 8,9,10,11,12में मध्यस्थता करते हैं । हालांकि, ओलिगोडेंड्रोगियल वंश कोशिकाओं और न्यूरॉन्स के बीच बातचीत के कई तरीकों को नियंत्रित करने वाले आणविक तंत्र को अभी पूरी तरह से समझमें नहीं आ रहा है।
इसके अलावा, कई सीएनएस रोग स्थितियों में, ओएलएस मुख्य रूप से प्रभावित होते हैं, इस प्रकार न्यूरॉन्स के साथ उनकी बातचीत को परेशान करते हैं। उदाहरण के लिए, मल्टीपल स्क्लेरोसिस (एमएस) में, न्यूरोलॉजिकल डिसफंक्शन सीएनएस में फोकल डिमायनेशन के कारण होता है, ओएलएस हानि के माध्यमिक होते हैं जो अक्षीय क्षति और संबंधित विकलांगता संचय का कारण बन सकते हैं। Remyelination जगह ले जा सकते हैं, हालांकि ज्यादातर मामलों में अपर्याप्त13। पिछले दशक में प्रगति, इम्यूनोथेरपी के विकास के कारण, पतन दर को कम किया है, लेकिन remyelination को बढ़ावा देने के लिए एक अपूरित जरूरत की तारीख बनी हुई है । इस प्रकार, ओएलएस भूमिका, कार्यों और प्रभावों की बेहतर समझ सीएनएस स्थितियों के व्यापक स्पेक्ट्रम के लिए नए उपचारों के विकास के लिए विशेष रुचि है।
यहां, हम ओएलएस शुद्धि और संस्कृति के तरीकों का वर्णन करते हैं। यह उनके विकास और जीव विज्ञान को विनियमित करने वाले आंतरिक तंत्रों की सटीक जांच में सक्षम बनाता है। इसके अलावा, इस तरह की अत्यधिक समृद्ध ओल संस्कृतियां ओलिगोडेनरोसाइट-वातानुकूलित माध्यम (ओसीएम) के उत्पादन की अनुमति देती हैं, जिसे न्यूरोनल फिजियोलॉजी और कनेक्टिविटी पर ओएलएस-स्रावित कारकों के प्रभाव में अंतर्दृष्टि प्राप्त करने के लिए शुद्ध न्यूरॉन संस्कृतियों में जोड़ा जा सकता है। इसके अलावा, हम वर्णन कैसे एक इन विट्रो सह संस्कृति प्रणाली को लागू करने के लिए जहां शुद्ध ओलिगोडेंट्रोसाइट्स और न्यूरॉन्स एक साथ संयुक्त कर रहे हैं, विनियमन तंत्र को संबोधित करने की अनुमति (पुनः) myelination ।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>5-fluorodeoxyuridine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>F0503</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27 supplement</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>17504044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-(+)-Glucose solution</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G8769</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNase (Deoxyribonuclease I)</td>
			<td>Worthington</td>
			<td>LS002139</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s Modified Eagle Medium</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>31966021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol 100%</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>32221-M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol 70%</td>
			<td>VWR Chemicals</td>
			<td>83801.360</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Calf Serum</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>10082147</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-cysteine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C7352</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neurobasal</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>21103049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Papain</td>
			<td>Worthington</td>
			<td>LS003126</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>15140122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffered Saline without calcium and magnesium</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>A1285601</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyethylenimine(PEI)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P3143</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tetraborate decahydrate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>B9876</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>Sigma</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Uridine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>U3750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bottenstein-Sato (BS) media</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>apo-Transferrin human</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T1147</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BSA (Bovine Serum Albumin)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A4161</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s Modified Eagle Medium</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>31966021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>I5500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PDGF</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>AF-100-13A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>15140122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Progesterone</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P8783</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Putrescine dihydrochloride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P5780</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium selenite</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S5261</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T3 (3,3&#39;,5-Triiodo-L-thyronine sodium salt)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T6397</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T4 (L-Thyroxine)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T1775</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Co-culture media</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>apo-Transferrin human</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T1147</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27 supplement</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>17504044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biotin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>B4639</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BSA (Bovine Serum Albumin)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A4161</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ceruloplasmin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>239799</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s Modified Eagle Medium</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>31966021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrocortisone</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H4001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>I5500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-Acetyl-L-cysteine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A8199</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neurobasal</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>21103049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>15140122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Progesterone</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P8783</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Putrescin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P5780</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant Human CNTF</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>450-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium selenite</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S5261</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T3 (3,3&#39;,5-Triiodo-L-thyronine sodium salt)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T6397</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vitamin B12</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>V6629</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tools</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.22 &#181;m filter</td>
			<td>Sartorius</td>
			<td>514-7010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL syringe</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>1611127</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100 mm Petri dish</td>
			<td>Dutscher</td>
			<td>193100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 mL tube</td>
			<td>Corning Life Science</td>
			<td>734-1867</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 mL tube</td>
			<td>Corning Life Science</td>
			<td>734-1869</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>60 mm Petri dish</td>
			<td>Dutscher</td>
			<td>067003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70 &#181;m filter</td>
			<td>Miltenyi Biotec</td>
			<td>130-095-823</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Binocular microscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>SZX7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11152-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>91150-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large surgical scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14008-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel</td>
			<td>Swann-morton</td>
			<td>233-5528</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shaker</td>
			<td>Infors HT</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small surgical scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>91460-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small surgical spoon</td>
			<td>Bar Naor Ltd</td>
			<td>BN2706</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T150 cm2 flask with filter cap</td>
			<td>Dutscher</td>
			<td>190151</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>P2 Wistar rat</td>
			<td>Janvier</td>
			<td>RjHAn:WI</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

generation of oligodendrocytes and oligodendrocyte-conditioned medium for co-culture experiments

केंद्रीय तंत्रिका तंत्र में, ओलिगोडेन्ट्रोसाइट्स एक्सॉन माइलिनेशन में अपनी भूमिका के लिए अच्छी तरह से जाना जाता है, जो नमकीन चालन के माध्यम से कार्रवाई क्षमता के प्रचार को तेज करता है। इसके अलावा, रिपोर्टों की बढ़ती संख्या से पता चलता है कि ओलिगोडेन्ट्रोसाइट्स माइलेनेशन से परे न्यूरॉन्स के साथ बातचीत करते हैं, विशेष रूप से घुलनशील कारकों के स्राव के माध्यम से। यहां, हम एक विस्तृत प्रोटोकॉल पेश करते हैं जो ग्लियल सेल संस्कृतियों से ओलिगोडेड्रोग्लिअल वंश कोशिकाओं की शुद्धि की अनुमति देता है जिसमें एस्ट्रोसाइट्स और माइक्रोग्लियल कोशिकाएं भी होती हैं। विधि 37 डिग्री सेल्सियस पर रात भर मिलाते हुए पर निर्भर करती है, जो ओवरलाइंग ओलिगोडेंड्रोग्लिल कोशिकाओं और माइक्रोग्लियल कोशिकाओं की चयनात्मक टुकड़ी और अंतर आसंजन द्वारा माइक्रोग्लिया का उन्मूलन करने की अनुमति देती है। इसके बाद हम ओलिगोडेन्रोसाइट्स की संस्कृति और ओलिगोडेन्ट्रोसाइट-वातानुकूलित माध्यम (ओसीएम) के उत्पादन का वर्णन करते हैं । हम ओलिगोडेन्रोसाइट-न्यूरॉन इंटरैक्शन का अध्ययन करते हुए सह-संस्कृति प्रयोगों में शुद्ध हिप्पोकैम्पस न्यूरॉन्स के अलावा ओसीएम उपचार या ओलिगोडेन्ट्रोसाइट्स के काइनेटिक्स भी प्रदान करते हैं।

इस प्रोटोकॉल में ओएल वंश कोशिकाओं को एस्ट्रोसाइट्स और माइक्रोग्लिया को मिलाकर ग्लियाल संस्कृतियों से शुद्ध किया जाता है। ओएल संस्कृतियों की शुद्धता और फेनोटाइपिक परीक्षा का आकलन ग्लिय...

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Generation of Oligodendrocytes and Oligodendrocyte-Conditioned Medium for Co-Culture Experiments

इसके साथ, हम ओलिगोडेन्रोसाइट्स की शुद्धि और ओलिगोडेन्ट्रोसाइट-वातानुकूलित माध्यम के उत्पादन के लिए एक कुशल विधि प्रदर्शित करते हैं जिसका उपयोग सह-संस्कृति प्रयोगों के लिए किया जा सकता है।

सह-संस्कृति प्रयोगों के लिए ओलिगोडेन्रोसाइट्स और ओलिगोडेन्ट्रोसाइट-वातानुकूलित माध्यम की पीढ़ी

In the central nervous system, oligodendrocytes are well-known for their role in axon myelination, that accelerates the propagation of action potentials ...

हम अल्पाधिकार वंश कोशिकाओं शुद्धि और संस्कृति की एक कुशल विधि का वर्णन करते हैं। यह ओलिगोडेन्ड्रोसाइट्स भेदभाव और माइलियनेशन प्रक्रिया के दौरान न्यूरॉन्स के साथ उनकी बातचीत को नियंत्रित करने वाले आणविक तंत्र को संबोधित करने की अनुमति देता है। यह झटकों तकनीक महंगी नहीं है और ओलिगोडेन्ड्रोसाइट्स की उच्च मात्रा प्राप्त करने के लिए इष्टतम है।ऐसी संस्कृतियां न्यूरॉन्स के साथ ओलिगोडेन्ड्रोसाइटे-वातानुकूलित माध्यम और ओलिगोडेन्ड्रोसाइट्स की सह-संस्कृतियों के उत्पादन की अनुमति देती हैं। मल्टीपल स्क्लेरोसिस केंद्रीय तंत्रिका तंत्र में फोकल डी-माइलिनेशन के कारण होने वाली बीमारी है, जो ओलिगोडेन्ड्रोसाइट्स हानि के माध्यम से है। ओलिगोडेन्ड्रोसाइट्स संस्कृति बेहतर समझने के लिए एक उपकरण प्रदान करता है कि पुनर्-myelination को कैसे बढ़ावा दिया जाए।केवल ओलिगोडेन्ड्रोग्लियाल सेल संस्कृति ओलिगोडेन्ड्रोसाइट्स के विकास और जीव विज्ञान को विनियमित करने वाले आंतरिक तंत्रों में अंतर्दृष्टि प्रदान कर सकती है। न्यूरॉन्स के साथ सह-संस्कृतिएं न्यूरोनल फिजियोलॉजी पर उनके प्रभावों में अंतर्दृष्टि प्राप्त करने की अनुमति देती हैं। शुरू करने के लिए, आंखों के स्तर पर जानवर के सिर को बनाए रखने के लिए घुमावदार संदंश का उपयोग करें।खोपड़ी के आधार पर एक छोटा सा चीरा बनाने के लिए छोटे सर्जिकल कैंची का उपयोग करें और मस्तिष्क मिडलाइन के बाद खोपड़ी को काटें। मिडलाइन से खोपड़ी के दो हिस्सों को धीरे-धीरे छीलने के लिए संदंश का उपयोग करें। सिर गुहा से मस्तिष्क को हटाने के लिए एक छोटे सर्जिकल चम्मच का उपयोग करें।बर्फ पर बर्फ ठंडे पीबीएस ग्लूकोज युक्त 60 मिलीमीटर पेट्री डिश में मस्तिष्क रखो। एक स्टीरियो माइक्रोस्कोप के नीचे देखते हुए, मस्तिष्क गोलार्द्धों से सेरिबैलम, मस्तिष्क स्टेम और घ्राण बल्ब को हटाने के लिए ठीक संदंश का उपयोग करें। दो मस्तिष्क गोलार्द्धों को अलग करने के लिए ठीक संदंश का उपयोग करें।मेनिंग्स को छीलने के लिए बारीक संदंश का प्रयोग करें। सेरेब्रल कोर्टिस को बर्फ पर 60 मिलीमीटर पेट्री डिश में डाल दें। एक लैमिनार फ्लो हुड में, सेरेब्रल कॉर्टिस को बारीक काटने के लिए एक तेज स्केलपेल का उपयोग करें।कीमा बनाया हुआ ऊतक एंजाइम पाचन माध्यम युक्त एक 50 मिलीलीटर ट्यूब में स्थानांतरित करें। 5% कार्बन डाइऑक्साइड के तहत 37 डिग्री सेल्सियस पर एक आर्द्रीकृत इनक्यूबेटर में 30 मिनट के लिए इनक्यूबेट। उसके बाद, एंजाइम पाचन माध्यम को धीरे-धीरे हटाने के लिए एक पिपेट का उपयोग करें, जबकि यह सुनिश्चित करें कि कॉर्टिकल ऊतक ट्यूब के नीचे रहता है।डीएमईएम 10% भ्रूण बछड़े सीरम का एक मिलीलीटर जोड़ने और धीरे-धीरे ऊतक को ट्रिट करने के लिए P1000 माइक्रोपिपेट का उपयोग करें। कॉर्टिकल टिश्यू को 50 मिलीलीटर ट्यूब में फिल्टर करने के लिए 70-माइक्रोन फिल्टर और एक मिलीलीटर सिरिंज के पिस्टन का उपयोग करें। डीएमईएम 10% भ्रूण बछड़े सीरम के साथ कई बार 50-मिलीलीटर ट्यूब की भीतरी ट्यूब दीवार पर अवशिष्ट ऊतक कुल्ला।डीएमईएम 10% भ्रूण बछड़े सीरम के साथ 50 मिलीलीटर ट्यूब भरें। कमरे के तापमान पर पांच मिनट के लिए 423 बार जी पर सेंट्रलाइज। ध्यान से सुपरनैंट को हटा दें और डीएमईएम 10% भ्रूण बछड़े सीरम के दो मिलीलीटर के साथ सेल पेलेट को फिर से खर्च करें।धीरे-धीरे पी1000 माइक्रोपिपेट के साथ सेल पेलेट को ट्रिट करें और फिर पी 200 माइक्रोपिपेट के साथ। डीएमईएम 10% भ्रूण बछड़े सीरम की उचित मात्रा के साथ सेल निलंबन को पतला करें। प्लेट एक टी पर सेल निलंबन के पांच मिलीलीटर-१५० कुप्पी एक बार 10 के घनत्व पर प्रति वर्ग सेंटीमीटर पांचवीं कोशिकाओं के लिए ।प्रत्येक टी-150 फ्लास्क में 20 मिलीलीटर गर्म डीएमईएम 10% भ्रूण बछड़ा सीरम जोड़ें। 5% कार्बन डाइऑक्साइड के तहत 37 डिग्री सेल्सियस पर एक आर्द्रीकृत इनक्यूबेटर में इनक्यूबेट। 250 आरपीएम और 37 डिग्री सेल्सियस पर रात भर नमूना मिलाने के बाद, मुख्य रूप से ओलिगोडेन्ड्रोसाइट वंश कोशिकाओं वाले फ्लास्क में सुपरनैंट की कटाई करें, लेकिन कुछ माइक्रोग्लियल कोशिकाएं भी, और इसे गैर-लेपित 100 मिलीमीटर पेट्री व्यंजनों पर प्लेट करें।पेट्री व्यंजनों को 15 मिनट के लिए आर्द्रीकृत इनक्यूबेटर में 37 डिग्री सेल्सियस और 5% कार्बन डाइऑक्साइड पर इनक्यूबेट करें। यह डिश की सतह पर अंतर तेजी से आसंजन के माध्यम से माइक्रोग्लियल कोशिकाओं को हटाने की अनुमति देता है। इस बीच, प्रत्येक टी-१५० फ्लास्क को 25 मिलीलीटर गर्म, हौसले से तैयार संस्कृति माध्यम और एक आर्द्रीकृत इनक्यूबेटर में 5% कार्बन डाइऑक्साइड के तहत ३७ डिग्री सेल्सियस पर दूसरे मिलाते हुए तक भरें ।इसके बाद, अवशिष्ट माइक्रोग्लियल कोशिकाओं के आसंजन की अनुमति देने के लिए पेट्री व्यंजनों से नए गैर-लेपित 100 मिलीमीटर पेट्री व्यंजनों में सुपरनैंट स्थानांतरित करें। पेट्री व्यंजनों को 5% कार्बन डाइऑक्साइड के तहत 37 सेल्सियस पर आर्द्रीकृत इनक्यूबेटर में 15 मिनट के लिए इनक्यूबेट करें। हर दो पेट्री व्यंजनों से सुपरनैट को हटा दें, जिसमें गैर-अनुयायी ओलिगोडेन्ड्रोसाइट वंश कोशिकाएं होती हैं, और इसे 50-मिलीलीटर ट्यूब में स्थानांतरित कर दें।माइक्रोग्लिया के साथ चढ़ाया पेट्री व्यंजन त्यागें। 423 बार जी पर पांच मिनट के लिए ट्यूबों अपकेंद्रित्र। ध्यान से सुपरनैंट को हटा दें और बोटेंस्टीन-सातो माध्यम के एक मिलीलीटर के साथ सेल पेलेट को फिर से खर्च करें।एक आम 50-मिलीलीटर ट्यूब में सभी छर्रों पूल और बॉटेनस्टीन-सातो माध्यम के साथ सेल घनत्व के आधार पर 20 या 30 मिलीलीटर करने के लिए मात्रा समायोजित करें। सेल निलंबन के 10 मिलीलीटर के साथ दो या तीन प्रीकोटेड 100 मिलीमीटर पेट्री व्यंजन प्लेट करें। 5% कार्बन डाइऑक्साइड के तहत 37 डिग्री सेल्सियस पर एक आर्द्रीकृत इनक्यूबेटर में इनक्यूबेट।दो घंटे बाद, बोटेंस्टीन-सातो माध्यम के सभी ताज़ा द्वारा पेट्री व्यंजनों से मलबे को साफ करें। मध्यम में दो दिनों के लिए एक आर्द्रीकृत इनक्यूबेटर में 5% कार्बन डाइऑक्साइड के तहत ३७ डिग्री सेल्सियस पर इनक्यूबेट । दो दिनों के बाद, एक माइक्रोस्कोप के तहत संस्कृति की जांच करें।एक लैमिनार फ्लो हुड में, बाँझ परिस्थितियों में, 10 मिलीलीटर गर्म एमपीबी-27 कम माध्यम के साथ संस्कृति माध्यम को नवीनीकृत करें। 5% कार्बन डाइऑक्साइड के तहत 37 डिग्री सेल्सियस पर एक आर्द्रीकृत इनक्यूबेटर में दो दिनों के लिए इनक्यूबेट। ओसीएम की फसल के लिए, ओलिगोडेन्ड्रोसाइट्स स्रावित कारकों वाले सुपरनेटेंट एकत्र करें।फिल्टर 0.22-माइक्रोन फिल्टर का उपयोग करके ओसीएम को स्टरलाइज करें। इस प्रोटोकॉल में, ओलिगोडेन्ड्रोसाइट वंश कोशिकाओं को एस्ट्रोसाइट्स और माइक्रोग्लिया से मिलाते हुए ग्लियल संस्कृतियों से शुद्ध किया गया था। विभिन्न मार्कर की अभिव्यक्ति के विश्लेषण से पता चला है कि ओलिगोडेन्ड्रोसाइट संस्कृतियां ज्यादातर 90 प्लस या शून्य से 4% O4 सकारात्मक कोशिकाओं के साथ पूर्व-ओलिगोडेनड्रोसाइट थीं, 85 प्लस या माइनस 7% एनजी 2 पॉजिटिव कोशिकाएं, और पीएलपी पॉजिटिव कोशिकाओं के 4.7 प्लस या माइनस 2.1%, जबकि 7.2 प्लस या माइनस 2.5% कोशिकाएं जीएफएपी पॉजिटिव एस्ट्रोसाइट्स थीं।ऐसी संस्कृतियों से उत्पादित ओसीएम को हिप्पोकैम्पल न्यूरॉन संस्कृतियों को शुद्ध करने के लिए विट्रो में तीन दिनों में जोड़ा गया था। यह उपचार नोटल प्रोटीन के क्लस्टरिंग को बढ़ावा देता है। हिप्पोकैम्पल न्यूरॉन्स के Myelination विट्रो में 14 दिनों में ओलिगोडेन्ड्रोक्टी के अलावा के माध्यम से अध्ययन किया गया।विट्रो में 20 से 24 दिनों तक, मायलिन बेसिक प्रोटीन जैसे मायलिन मार्कर के इम्यूनो स्टेनिंग ने मायलिन सेगमेंट और रैनवियर के नोड्स के विज़ुअलाइज़ेशन की अनुमति दी। मेनिंग्स हटाने के लिए कोर पीबीएस महत्वपूर्ण है। ओलिगोडेन्ड्रोक्टायस व्यवहार्यता और पिपेट के साथ लागू प्रवाह की ताकत को साकार करने के लिए तेज समाशोधन महत्वपूर्ण है।ओलिगोडेन्ड्रोसाइट-वातानुकूलित माध्यम को न्यूरोनल फिजियोलॉजी पर ओलिगोडेन्ड्रोसाइट्स स्रावित कारकों के प्रभाव में अंतर्दृष्टि प्राप्त करने के लिए न्यूरोनल संस्कृतियों में जोड़ा जा सकता है। न्यूरॉन्स के साथ ओलिगोडेन्ड्रोक्टीस की सह-संस्कृतियों को भी माइलेशन प्रक्रिया का अध्ययन करने के लिए किया जा सकता है।

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Bilaminar Co-culture of Primary Rat Cortical Neurons and Glia

प्राथमिक चूहा cortical न्यूरॉन्स और Glia Bilaminar सह संस्कृति

This video will guide you through the process of culturing rat cortical neurons in the presence of a glial feeder layer, a system known as a bilaminar or ...

A Functional Motor Unit in the Culture Dish: Co-culture of Spinal Cord Explants and Muscle Cells

संस्कृति डिश में एक कार्यात्मक मोटर यूनिट: स्पाइनल कॉर्ड explants और मांसपेशियों की कोशिकाओं के सह संस्कृति

Human primary muscle cells cultured  aneurally in monolayer rarely contract spontaneously because, in the absence of  a nerve component, cell ...

Imaging Analysis of Neuron to Glia Interaction in Microfluidic Culture Platform (MCP)-based Neuronal Axon and Glia Co-culture System

Imaging Analysis of Neuron to Glia Interaction in Microfluidic Culture Platform MCP-based Neuronal Axon and Glia Co-culture System

इमेजिंग न्यूरॉन Microfluidic संस्कृति प्लेटफार्म में Glia सहभागिता (MCP) आधारित Neuronal Axon और Glia प्रणाली सह संस्कृति विश्लेषण

Proper  neuron to glia interaction is critical to physiological function of the central  nervous system (CNS). This bidirectional communication is ...

Inhibitory Synapse Formation in a Co-culture Model Incorporating GABAergic Medium Spiny Neurons and HEK293 Cells Stably Expressing GABAA Receptors

Inhibitory Synapse Formation in a Co-culture Model Incorporating GABAergic Medium Spiny Neurons and HEK293 Cells Stably Expressing GABAA Receptors

एक सह संस्कृति मॉडल शामिल GABAergic मध्यम काँटेदार न्यूरॉन्स और HEK293 कोशिकाओं में निरोधात्मक synapse गठन stably गाबा जताते<sub&gt; एक</sub&gt; रिसेप्टर्स

Inhibitory neurons act in the central nervous system to regulate the dynamics and spatio-temporal co-ordination of neuronal networks. GABA ...

Dorsal Root Ganglia Neurons and Differentiated Adipose-derived Stem Cells: An In Vitro Co-culture Model to Study Peripheral Nerve Regeneration

Dorsal Root Ganglia Neurons and Differentiated Adipose-derived Stem Cells: An In Vitro Co-culture Model to Study Peripheral Nerve Regeneration

रूट ganglia न्यूरॉन्स और विभेदित वसा व्युत्पन्न स्टेम सेल पृष्ठीय: एक<em&gt; इन विट्रो</em&gt; सह संस्कृति मॉडल परिधीय तंत्रिका पुनर्जनन अध्ययन करने के लिए

Dorsal root ganglia (DRG) neurons, located in the intervertebral foramina of the spinal column, can be used to create an in vitro system facilitating the ...

Analysis of Developing Tooth Germ Innervation Using Microfluidic Co-culture Devices

Microfluidic सह संस्कृति उपकरणों का प्रयोग करना टूथ रोगाणु INNERVATION विकास का विश्लेषण

Innervation plays a key role in the development, homeostasis and regeneration of organs and tissues. However, the mechanisms underlying these phenomena ...

Isolation and Culture of Rodent Microglia to Promote a Dynamic Ramified Morphology in Serum-free Medium

अलगाव और कुतर Microglia की संस्कृति सीरम मुक्त माध्यम में एक गतिशील Ramified आकृति विज्ञान को बढ़ावा देने के लिए

Microglia represent 5 - 10% of all central nervous system (CNS) cells and are increasingly drawing attention due to their contributions during ...

Rapid and Specific Immunomagnetic Isolation of Mouse Primary Oligodendrocytes

माउस प्राथमिक Oligodendrocytes के तीव्र और विशिष्ट Immunomagnetic अलगाव

The efficient and robust isolation and culture of primary oligodendrocytes (OLs) is a valuable tool for the in vitro study of the development of ...

Conducting Hyperscanning Experiments with Functional Near-Infrared Spectroscopy

कार्यात्मक निकट अवरक्त स्पेक्ट्रोस्कोपी के साथ Hyperscanning प्रयोगों का आयोजन

Concurrent brain recordings of two or more interacting persons, an approach termed hyperscanning, are gaining increasing importance for our understanding ...

Lipid Bilayer Experiments with Contact Bubble Bilayers for Patch-Clampers

लिपिड Bilayer प्रयोगों के साथ संपर्क बुलबुला Bilayers के लिए पैच-clampers

Lipid bilayers provide a unique experimental platform for functional studies of ion channels, allowing the examination of channel-membrane interactions ...