Name: laser-induced brain injury in the motor cortex of rats
Uploaded: 2020-09-26T12:30:00
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Vorremmo ringraziare il Dipartimento di Anestesiologia del Centro Medico universitario di Soroka e il personale di laboratorio dell'Università Ben-Gurion del Negev per il loro aiuto nelle prestazioni di questo esperimento.

La seguente procedura è stata condotta secondo gli orientamenti dell'uso degli animali sperimentali della Comunità europea. Gli esperimenti sono stati approvati anche dal Comitato per la cura degli animali presso l'Università Ben-Gurion del Negev.
1. Selezione e preparazione degli animali
<ol><li>Selezionare 65 ratti maschio Sprague-Dawley del peso di 300 a 350 g senza patologia overt per questa procedura. Le dimensioni più piccole pongono difficoltà tecniche per la procedura MCAO.</li>...

<ol>
	<li>World Health Organization. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+health+estimates:+deaths+by+cause,+age,+sex+and+country,+2000-2012.">Global health estimates: deaths by cause, age, sex and country, 2000-2012.</a> World Health Organization. 9, (2014).</li><li>Meadows, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+models+of+focal+and+multifocal+cerebral+ischemia:+a+review.">Experimental models of focal and multifocal cerebral ischemia: a review.</a> Reviews in the Neurosciences. 29, 661-674 (2018).</li><li>Durukan, A., Strbian, D., Tatlisumak, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+of+ischemic+stroke:+a+useful+tool+for+stroke+drug+development.">Rodent models of ischemic stroke: a useful tool for stroke drug development.</a> Current Pharmaceutical Designs. 14, 359-370 (2008).</li><li>Fluri, F., Schuhmann, M. K., Kleinschnitz, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+ischemic+stroke+and+their+application+in+clinical+research.">Animal models of ischemic stroke and their application in clinical research.</a> Drug Design, Development and Therapy. 9, 3445-3454 (2015).</li><li>Li, F., Omae, T., Fisher, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+hyperthermia+and+its+mechanism+in+the+intraluminal+suture+middle+cerebral+artery+occlusion+model+of+rats.">Spontaneous hyperthermia and its mechanism in the intraluminal suture middle cerebral artery occlusion model of rats.</a> Stroke. 30, 2464-2470 (1999).</li><li>Boyko, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+experimental+model+of+focal+ischemia+using+an+internal+carotid+artery+approach.">An experimental model of focal ischemia using an internal carotid artery approach.</a> Journal of Neuroscience Methods. 193, 246-253 (2010).</li><li>Zhao, Q., Memezawa, H., Smith, M. L., Siesjo, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperthermia+complicates+middle+cerebral+artery+occlusion+induced+by+an+intraluminal+filament.">Hyperthermia complicates middle cerebral artery occlusion induced by an intraluminal filament.</a> Brain Research. 649, 253-259 (1994).</li><li>Braeuninger, S., Kleinschnitz, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+of+focal+cerebral+ischemia:+procedural+pitfalls+and+translational+problems.">Rodent models of focal cerebral ischemia: procedural pitfalls and translational problems.</a> Experimental and Translational Stroke Medicine. 1, 8 (2009).</li><li>Choi, B. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurobehavioural+deficits+correlate+with+the+cerebral+infarction+volume+of+stroke+animals:+a+comparative+study+on+ischaemia-reperfusion+and+photothrombosis+models.">Neurobehavioural deficits correlate with the cerebral infarction volume of stroke animals: a comparative study on ischaemia-reperfusion and photothrombosis models.</a> Environmental Toxicology and Pharmacology. 33, 60-69 (2012).</li><li>Boyko, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+Alternative+Model+of+Laser-Induced+Stroke+in+the+Motor+Cortex+of+Rats.">An Alternative Model of Laser-Induced Stroke in the Motor Cortex of Rats.</a> Biological Procedure Online. 21, 9 (2019).</li><li>Bleilevens, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+anesthesia+and+cerebral+blood+flow+on+neuronal+injury+in+a+rat+middle+cerebral+artery+occlusion+(MCAO)+model.">Effect of anesthesia and cerebral blood flow on neuronal injury in a rat middle cerebral artery occlusion (MCAO) model.</a> Experimental Brain Research. 224, 155-164 (2013).</li><li>Kuts, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Middle+Cerebral+Artery+Occlusion+Technique+for+Inducing+Post-stroke+Depression+in+Rats.">A Middle Cerebral Artery Occlusion Technique for Inducing Post-stroke Depression in Rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (147), e58875 (2019).</li><li>Boyko, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphological+and+neuro-behavioral+parallels+in+the+rat+model+of+stroke.">Morphological and neuro-behavioral parallels in the rat model of stroke.</a> Behavioural Brain Research. 223, 17-23 (2011).</li></ol>

È giusto supporre che la tecnica laser sia minimamente invasiva, dato che non si sono verificati decessi o SAH nel gruppo laser. La principale causa di morte e SAH è il danno ai vasi sanguigni che porta ad un'elevazione della pressione intraranziale (ICP), come mostrato nelle tecniche MCAOoriginali 10. L'assenza di morte e SAH nel gruppo laser è probabilmente dovuta agli effetti specifici dei laser: non hanno un impatto diretto sui vasi sanguigni e possono indurre la coagulazione in caso di per...

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/60928">Laser-Induced Brain Injury in the Motor Cortex of Rats</a>. The Authors section was updated.
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Dmitri Frank
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Erratum: Laser-Induced Brain Injury in the Motor Cortex of Rats

A livello globale, l'ictus è la seconda causa di morte e la terza causa di disabilità1. L'ictus porta anche a gravi disabilità, spesso richiedendo cure supplementari da parte del personale medico e dei parenti. C'è, quindi, la necessità di comprendere le complicazioni associate al disturbo e migliorare il potenziale per risultati più positivi.
L'uso di modelli animali è il primo passo per comprendere le malattie. Per garantire i migliori risultati di ricerca, un modello tipico includerebbe una tecnica semplice, convenienza, elevata riproducibilità e variabilità minima. I determinanti nei modelli di ictus ischemico includono il volume dell'edema cerebrale, le dimensioni dell'infarto, l'entità della rottura tra la barriera eno- cervello (BBB) e il danno funzionale generalmente valutato tramite il punteggio di gravitàneurologica 2.
La tecnica di induzione del ictus più utilizzata nei modelli di roditore occlude l'arteria cerebrale centrale (MCA) transitoriamente opermanentemente 3. Questa tecnica produce un modello di tratto simile a quelli degli esseri umani: ha una penobra che circonda l'area accarezzata, è altamente riproducibile e regola la durata dell'ischemia e la reperfusione4. Tuttavia, il metodo MCAO presenta alcune complicazioni. La tecnica è soggetta a emorragie intratracranali e lesioni alla retina ipsilaterale con una disfunzione della corteccia visiva e dell'ipertermia comune che spesso portano a ulteriori esiti5,6,7. Altre limitazioni includono alte variazioni nell'ictus indotto (derivante dalla probabile estensione dell'ischemia alle regioni indesiderate, come la regione dell'arteria carotide esterna), l'occlusione insufficiente dell'MCA e la rifusione prematura. Inoltre, ratti di diverse varietà e dimensioni presentano vari volumi infarto8. Oltre a tutti gli svantaggi menzionati, il modello MCAO non può indurre piccoli tratti isolati nelle aree cerebrali profonde, perché è limitato tecnicamente in termini di requisito di dimensioni minime del vaso per la cateterizzazione. Ciò rende ancora più critica la necessità di un modello alternativo. Un altro metodo, la fotothrombosis, fornisce una possibile alternativa alle procedure MCAO ma non migliora l'efficienza9. Questa tecnica si rivolge alla corsa con la luce e offre alcuni miglioramenti sui modelli precedenti. Tuttavia, la fotothrombosi richiede una craniotomia invasiva associata a compicationssecondari 9.
Alla luce delle carenze delineate, il protocollo qui presentato fornisce una tecnica laser alternativa in grado di indurre lesioni cerebrali nei roditori. Il meccanismo d'azione della tecnica laser si basa sugli effetti fototermici del laser impartiti sui tessuti viventi, che porta all'assorbimento dei fasci di luce da parte dei tessuti del corpo e alla loro conversione in calore. I vantaggi dell'utilizzo di una tecnica laser sono la sua sicurezza e facilità di manipolazione. La capacità di un laser di produrre calore per fermare il sanguinamento lo rende molto importante in medicina, mentre la sua capacità di amplificare diversi raggi in un dato punto di incontro assicura che i laser evitino di distruggere tessuti sani che si erge nel modo del punto didestinazione 10. Il raggio laser utilizzato in questo protocollo può passare attraverso un basso mezzo liquido, come l'osso, senza emettere la sua energia e/o causando alcuna distruzione. Una volta che raggiunge un mezzo liquido elevato, come i tessuti cerebrali, utilizza la sua energia per distruggere i tessuti bersaglio. La tecnica, quindi, può indurre lesioni cerebrali solo nell'area appropriata del cervello.
La tecnica qui presentata ha mostrato un'enorme quantità di capacità di regolare i suoi livelli di irradiazione, producendo le variazioni scelte di lesioni cerebrali previste fin dall'inizio. A differenza dell'MCAO originale che colpisce sia la corteccia che lo striato, la tecnica laser è stata in grado di regolare l'impatto della lesione cerebrale, inducendo lesioni solo sulla corteccia motoria prevista. In questo caso, viene fornito il protocollo di lesione cerebrale indotta dal laser e un riepilogo dei risultati rappresentativi per la procedura eseguita sulla corteccia cerebrale dei ratti.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:667px;" width="666">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride</td>
			<td style="width:123px;">SIGMA - ALDRICH</td>
			<td style="width:161px;">298-96-4</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">50% trichloroacetic acid</td>
			<td style="width:123px;">SIGMA - ALDRICH</td>
			<td style="width:161px;">76-03-9</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Brain &#38; Tissue Matrices</td>
			<td style="width:123px;">SIGMA - ALDRICH</td>
			<td>15013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Cannula Venflon 22 G</td>
			<td style="width:123px;">KD-FIX</td>
			<td style="width:161px;">1.83604E+11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Centrifuge Sigma 2-16P</td>
			<td style="width:123px;">SIGMA - ALDRICH</td>
			<td style="width:161px;">Sigma 2-16P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Compact Analytical Balances</td>
			<td style="width:123px;">SIGMA - ALDRICH</td>
			<td style="width:161px;">HR-AZ/HR-A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Digital Weighing Scale</td>
			<td style="width:123px;">SIGMA - ALDRICH</td>
			<td style="width:161px;">Rs 4,000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Dissecting scissors</td>
			<td style="width:123px;">SIGMA - ALDRICH</td>
			<td style="width:161px;">Z265969</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Eppendorf pipette</td>
			<td style="width:123px;">SIGMA - ALDRICH</td>
			<td style="width:161px;">Z683884</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Eppendorf Tube</td>
			<td style="width:123px;">SIGMA - ALDRICH</td>
			<td>EP0030119460</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Ethanol 96 %</td>
			<td style="width:123px;">ROMICAL</td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td>Flammable Liquid</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Evans Blue 2%</td>
			<td style="width:123px;">SIGMA - ALDRICH</td>
			<td style="width:161px;">314-13-6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Fluorescence detector</td>
			<td style="width:123px;">Tecan, M&#228;nnedorf Switzerland</td>
			<td style="width:161px;">model Infinite 200 PRO multimode reader</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Heater with thermometer</td>
			<td>Heatingpad-1</td>
			<td>Model: HEATINGPAD-1/2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Infusion Cuff</td>
			<td style="width:123px;">ABN</td>
			<td style="width:161px;">IC-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Isofluran, USP 100%</td>
			<td style="width:123px;">Piramamal Critical Care, Inc</td>
			<td style="width:161px;">NDC 66794-017</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Multiset</td>
			<td style="width:123px;">TEVA MEDICAL</td>
			<td style="width:161px;">998702</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Olympus BX 40 microscope</td>
			<td style="width:123px;">Olympus</td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Optical scanner</td>
			<td style="width:123px;">Canon</td>
			<td style="width:161px;">Cano Scan 4200F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Petri dishes</td>
			<td style="width:123px;">SIGMA - ALDRICH</td>
			<td style="width:161px;">P5606</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Scalpel blades 11</td>
			<td style="width:123px;">SIGMA - ALDRICH</td>
			<td style="width:161px;">S2771</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Sharplan 3000 Nd:YAG (neodymium-doped yttrium aluminum garnet) laser machine</td>
			<td style="width:123px;">Laser Industries Ltd</td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Stereotaxic head holder</td>
			<td style="width:123px;">KOPF</td>
			<td style="width:161px;">900LS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Sterile Syringe 2 ml</td>
			<td style="width:123px;">Braun</td>
			<td>4606027V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Syringe-needle 27 G</td>
			<td style="width:123px;">Braun</td>
			<td style="width:161px;">305620</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

laser-induced brain injury in the motor cortex of rats

Una tecnica comune per indurre l'ictus nei modelli sperimentali di roditore coinvolge l'occlusione transitoria (spesso indicata come MCAO-t) o permanente (designata come MCAO-p) dell'arteria cerebrale centrale (MCA) utilizzando un catetere. Questa tecnica generalmente accettata, tuttavia, ha alcune limitazioni, limitando così il suo uso esteso. L'induzione dell'ictus con questo metodo è spesso caratterizzata da un'elevata variabilità nella localizzazione e nelle dimensioni dell'area ischemica, da eventi periodici di emorragia e da alti tassi di mortalità. Inoltre, il completamento di una qualsiasi delle procedure transitorie o permanenti richiede competenze e spesso dura circa 30 minuti. In questo protocollo viene presentata una tecnica di irradiazione laser che può servire come metodo alternativo per indurre e studiare le lesioni cerebrali nei modelli di roditori.
Rispetto ai ratti nei gruppi di controllo e MCAO, la lesione cerebrale per induzione laser ha mostrato una ridotta variabilità nella temperatura corporea, volume infarto, edema cerebrale, emorragia intraranziale e mortalità. Inoltre, l'uso di una lesione indotta dal laser ha causato danni ai tessuti cerebrali solo nella corteccia motoria a differenza degli esperimenti MCAO in cui si osserva la distruzione sia della corteccia motoria che dei tessuti striatale.
I risultati di questa indagine suggeriscono che l'irradiazione laser potrebbe servire come tecnica alternativa ed efficace per indurre lesioni cerebrali nella corteccia motoria. Il metodo riduce anche il tempo necessario per completare la procedura e non richiede gestori esperti.

Nessun decessi o SAH sono stati registrati nei gruppi di controllo o sperimentali (Tabella 1). Il gruppo MCAO aveva un tasso del 20% sia di mortalità che di SAH.
Anche i cambiamenti relativi della temperatura corporea nei ratti di entrambi i gruppi erano simili, nonostante una differenza nella variabilità di entrambi i gruppi (tabella 1).
C'era un SIgnificativamente peggiore NSS sia nel laser (16 x 1,1) che in MCAO (20 x 1,5) mode...

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Laser-Induced Brain Injury in the Motor Cortex of Rats

Il protocollo qui presentato mostra una tecnica per creare un modello di lesioni cerebrali da roditore. Il metodo qui descritto utilizza l'irradiazione laser e si rivolge alla corteccia motoria.

Lesione cerebrale indotta dal laser nella Corteccia Motoria dei Ratti

A common technique for inducing stroke in experimental rodent models involves the transient (often denoted as MCAO-t) or permanent (designated as MCAO-p) ...

Il nostro protocollo fornisce una nuova metodologia per creare lesioni cerebrali traumatiche nei ratti utilizzando l'irradiazione laser per creare un impatto di messa a fuoco nella corteccia motoria. Il vantaggio principale di questa tecnica sono la bassa variabilità nell'area infaribile, i bassi tassi di mortalità e la relativa semplicità della procedura che non richiede gestori esperti. A dimostrare la procedura sarà Dmitry Natanel, ricercatore del nostro laboratorio.Per eseguire una lesione cerebrale indotta dal laser, assegna prima ratti Sprague Dawley da 20,300 a 350 grammi nel gruppo laser e 20 al gruppo di controllo gestito da Sham. Dopo aver confermato una mancanza di risposta al riflesso di astinenza, posizionare un topo su un riscaldatore regolato per la temperatura rettale e utilizzare un rasoio per rimuovere abbastanza capelli dal sito della lesione con un margine privo di capelli di circa due centimetri intorno all'incisione. Disinfettare la pelle esposta con il 70% di etanolo e posizionare il ratto in posizione prona in un portacapo stereotassico.Fai un'incisione di tre centimetri per consentire il riflesso laterale del cuoio capelluto per esporre l'area tra bregma e lambda. Tenendo un laser Nd:YAG con lunghezza d'onda di picco di 1064 nanometri a una distanza di due millimetri dal cranio, somministrare 50 joule per 10 punti con una durata dell'impulso di un secondo all'area esposta del cranio sopra l'emisfero destro. Dopo che la lesione laser è stata consegnata, rimuovere il topo dal dispositivo e chiudere il cuoio capelluto con 3-0 suture chirurgiche di seta.Quindi, posizionare il topo nella sua gabbia con il monitoraggio fino alla piena rimo clemenza. 24 ore dopo la procedura, utilizzare un sistema di punteggio di 43 punti per valutare il punteggio di gravità neurologica. Testare gli animali alla ricerca di deficit neurologici, disturbi comportamentali, attività di bilanciamento del fascio e riflessi e assegnare punteggi più alti per disabilità più gravi.Dopo la valutazione, raccogliere il cervello da ogni animale sperimentale e controllare l'animale secondo protocolli standard. Per valutare il volume dell'infarto cerebrale, sezionare il cervello raccolto in sei fette coronali spesse sei millimetri e incubare ogni fetta in 0,05%TTC per 30 minuti a 37 gradi Celsius. Dopo la colorazione, scansiona queste fette con uno scanner ottico con una risoluzione di 1600 x 1600 punti per pollice.Le aree non macchiate delle fette cerebrali fisse sono definite infasate. Per valutare l'incidenza della rottura della barriera epatica, 24 ore dopo la lesione indotta dal laser caricare una siringa con colorante blu 2%Evans diluito in quattro millilitri per chilogrammo di soluzione salina e consegnare la soluzione per via endovenosa ai ratti feriti e controllare i ratti attraverso la vena della coda cannulata. Lasciare circolare la soluzione per un'ora prima di utilizzare pincet chirurgici e forbici per aprire il petto del primo animale.Perfondere il cuore esposto con una salina raffreddata dello 0,9% attraverso il ventricolo sinistro a 110 millimetri di mercurio di pressione fino a quando non si osserva un liquido di profusione incolore dall'atrio destro. Quindi, raccogliere il cervello e ottenere due fette caudali rostrali millimetri. Separare le fette cerebrali sinistra dalle fette cerebrali destra per consentire la valutazione separata degli emisferi feriti e non feriti e pesare i campioni.Omogeneizzare i campioni utilizzando una malta e un pestello e incubare i campioni di tessuto nel 50% di acido tricloroacetico per 24 ore. Il giorno dopo, centrifuga i campioni omogeneizzati di tessuto cerebrale per 20 minuti a 10.000 volte G e temperatura ambiente e mescola un millilitro del supernatante con 1,5 millilitri di 96% di etanolo a uno o tre rapporti. Quindi, usa un rivelatore di fluorescenza a un'eccitazione di 620 nanometri e la lunghezza d'onda di emissione di 680 nanometri per valutare la rottura della barriera epatica.Come osservato dall'analisi istologica, la colorazione blu evans può essere utilizzata per rivelare l'incidenza di lesioni cerebrali negli animali modello laser e MCAO. In questa analisi rappresentativa non sono stati registrati decessi o emorragie subaracnoidi nei gruppi di controllo o sperimentali, e il gruppo MCAO aveva un tasso del 20% sia di mortalità che di emorragia subaracnoidea. Anche le variazioni relative della temperatura corporea nei ratti di entrambi i gruppi erano simili, nonostante una differenza nella variabilità di entrambi i gruppi.I punteggi di gravità neurologica erano significativamente peggiori sia nei modelli laser che MCAO rispetto al gruppo di controllo gestito da Sham. La lesione cerebrale indotta dal laser causò anche un significativo aumento del volume infarto nell'emisfero bersaglio rispetto al gruppo di controllo gestito da Sham. Tuttavia, il volume infarto del modello laser era inferiore rispetto agli animali feriti dalla tecnica MCAO.Non è stata osservata alcuna differenza nell'edema cerebrale tra il modello di lesione cerebrale indotta dal laser e il gruppo di controllo gestito da Sham. Tuttavia, c'era una differenza significativa nell'edema cerebrale tra il modello laser e i gruppi feriti MCAO. Rispetto al gruppo di controllo gestito da Sham, la lesione cerebrale indotta dal laser e le tecniche MCAO hanno entrambi causato un aumento significativo della rottura della barriera epatica nell'emisfero non ferito e bersaglio.Durante il tentativo di questo modello, ricordarsi di indirizzare con precisione l'area della corteccia motoria e di standardizzare l'energia, il numero di punti irradiati e il tempo totale di esposizione. Seguendo questa procedura, è possibile eseguire un'ampia pletora di test comportamentali, come beam walking, Froedert e altre valutazioni.

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In Vivo Single-Molecule Tracking at the Drosophila Presynaptic Motor Nerve Terminal

In Vivo Singola molecola Tracking al terminale presinaptico nervo motore Drosophila

An increasing number of super-resolution microscopy techniques are helping to uncover the mechanisms that govern the nanoscale cellular world. ...

Combined Transcranial Magnetic Stimulation and Electroencephalography of the Dorsolateral Prefrontal Cortex

Stimolazione magnetica transcranica combinata e l'elettroencefalografia della corteccia prefrontale dorsolaterale

Transcranial magnetic stimulation (TMS) is a non-invasive method that produces neural excitation in the cortex by means of brief, time-varying magnetic ...

Evaluation of Hemisphere Lateralization with Bilateral Local Field Potential Recording in Secondary Motor Cortex of Mice

Valutazione della lateralizzazione dell'emisfero con la registrazione del potenziale sul campo locale bilaterale nella corteccia motoria secondaria dei topi

This article demonstrates complete, detailed procedures for both in vivo bilateral recording and analysis of local field potential (LFP) in the cortical ...

Investigating Alterations in Caecum Microbiota After Traumatic Brain Injury in Mice

Indagare sulle alterazioni nel caecum Microbiota dopo una lesione cerebrale traumatica nei topi

Increasing evidence shows that the microbiota-gut-brain axis plays an important role in the pathogenesis of brain diseases. Several studies also ...

Non-Invasive Modulation and Robotic Mapping of Motor Cortex in the Developing Brain

Modulazione non invasiva e mappatura robotica della Corteccia motoria nel cervello in via di sviluppo

Mapping the motor cortex with transcranial magnetic stimulation (TMS) has potential to interrogate motor cortex physiology and plasticity but carries ...