Name: laser-induced brain injury in the motor cortex of rats
Uploaded: 2020-09-26T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Laser-Induced Brain Injury in the Motor Cortex of Rats at JoVE.com

Vi vill tacka Institutionen för anestesiologi av Soroka University Medical Center och laboratoriet personal Ben-Gurion University of the Negev för deras hjälp i utförandet av detta experiment.

Följande förfarande genomfördes enligt riktlinjerna för användning av försöksdjur i Europeiska gemenskapen. Experimenten godkändes också av djurvårdskommittén vid Ben-Gurion University of the Negev.
1. Val och beredning av djur
<ol><li>Välj 65 manliga Sprague-Dawley råttor som väger 300 till 350 g med någon overt patologi för detta förfarande. Den mindre storleken medför tekniska svårigheter för MCAO-förfarandet.</li>
	<li>Tilldela 3 råttor per bur och låt dem anpassa ...

<ol>
	<li>World Health Organization. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+health+estimates:+deaths+by+cause,+age,+sex+and+country,+2000-2012.">Global health estimates: deaths by cause, age, sex and country, 2000-2012.</a> World Health Organization. 9, (2014).</li><li>Meadows, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+models+of+focal+and+multifocal+cerebral+ischemia:+a+review.">Experimental models of focal and multifocal cerebral ischemia: a review.</a> Reviews in the Neurosciences. 29, 661-674 (2018).</li><li>Durukan, A., Strbian, D., Tatlisumak, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+of+ischemic+stroke:+a+useful+tool+for+stroke+drug+development.">Rodent models of ischemic stroke: a useful tool for stroke drug development.</a> Current Pharmaceutical Designs. 14, 359-370 (2008).</li><li>Fluri, F., Schuhmann, M. K., Kleinschnitz, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+ischemic+stroke+and+their+application+in+clinical+research.">Animal models of ischemic stroke and their application in clinical research.</a> Drug Design, Development and Therapy. 9, 3445-3454 (2015).</li><li>Li, F., Omae, T., Fisher, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+hyperthermia+and+its+mechanism+in+the+intraluminal+suture+middle+cerebral+artery+occlusion+model+of+rats.">Spontaneous hyperthermia and its mechanism in the intraluminal suture middle cerebral artery occlusion model of rats.</a> Stroke. 30, 2464-2470 (1999).</li><li>Boyko, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+experimental+model+of+focal+ischemia+using+an+internal+carotid+artery+approach.">An experimental model of focal ischemia using an internal carotid artery approach.</a> Journal of Neuroscience Methods. 193, 246-253 (2010).</li><li>Zhao, Q., Memezawa, H., Smith, M. L., Siesjo, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperthermia+complicates+middle+cerebral+artery+occlusion+induced+by+an+intraluminal+filament.">Hyperthermia complicates middle cerebral artery occlusion induced by an intraluminal filament.</a> Brain Research. 649, 253-259 (1994).</li><li>Braeuninger, S., Kleinschnitz, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+of+focal+cerebral+ischemia:+procedural+pitfalls+and+translational+problems.">Rodent models of focal cerebral ischemia: procedural pitfalls and translational problems.</a> Experimental and Translational Stroke Medicine. 1, 8 (2009).</li><li>Choi, B. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurobehavioural+deficits+correlate+with+the+cerebral+infarction+volume+of+stroke+animals:+a+comparative+study+on+ischaemia-reperfusion+and+photothrombosis+models.">Neurobehavioural deficits correlate with the cerebral infarction volume of stroke animals: a comparative study on ischaemia-reperfusion and photothrombosis models.</a> Environmental Toxicology and Pharmacology. 33, 60-69 (2012).</li><li>Boyko, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+Alternative+Model+of+Laser-Induced+Stroke+in+the+Motor+Cortex+of+Rats.">An Alternative Model of Laser-Induced Stroke in the Motor Cortex of Rats.</a> Biological Procedure Online. 21, 9 (2019).</li><li>Bleilevens, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+anesthesia+and+cerebral+blood+flow+on+neuronal+injury+in+a+rat+middle+cerebral+artery+occlusion+(MCAO)+model.">Effect of anesthesia and cerebral blood flow on neuronal injury in a rat middle cerebral artery occlusion (MCAO) model.</a> Experimental Brain Research. 224, 155-164 (2013).</li><li>Kuts, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Middle+Cerebral+Artery+Occlusion+Technique+for+Inducing+Post-stroke+Depression+in+Rats.">A Middle Cerebral Artery Occlusion Technique for Inducing Post-stroke Depression in Rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (147), e58875 (2019).</li><li>Boyko, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphological+and+neuro-behavioral+parallels+in+the+rat+model+of+stroke.">Morphological and neuro-behavioral parallels in the rat model of stroke.</a> Behavioural Brain Research. 223, 17-23 (2011).</li></ol>

Det är rimligt att anta att lasertekniken är minimalt invasiv, med tanke på att inga dödsfall eller SAH inträffade i lasergruppen. Den primära dödsorsaken och SAH är den skada på blodkärl som leder till en förhöjning av intrakraniellt tryck (ICP), som visas i de ursprungliga MCAO-teknikerna10. Frånvaron av dödsfall och SAH i lasergruppen beror sannolikt på de särskilda effekterna av lasrar: de har inte direkt påverkan på blodkärlen och kan framkalla koagulation vid läckage. Lå...

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/60928">Laser-Induced Brain Injury in the Motor Cortex of Rats</a>. The Authors section was updated.
One of the author names was updated from:
Dmitri Frank
to
Dmitry Frank

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/60928">Laser-Induced Brain Injury in the Motor Cortex of Rats</a>. The Authors section was updated.

Erratum: Laser-Induced Brain Injury in the Motor Cortex of Rats

Globalt är stroke den näst vanligaste dödsorsaken och den tredje vanligaste orsaken till funktionshinder1. Stroke leder också till svår funktionsnedsättning, ofta kräver extra vård från medicinsk personal och släktingar. Det finns därför ett behov av att förstå de komplikationer som är förknippade med sjukdomen och förbättra risken för mer positiva resultat.
Användningen av djurmodeller är det första steget för att förstå sjukdomar. För att säkerställa bästa forskningsresultat, en typisk modell skulle innehålla en enkel teknik, överkomliga priser, hög reproducerbarhet, och minimal variation. De avgörande faktorerna i ischemisk stroke modeller inkluderar hjärnan ödem volym, infarct storlek, omfattningen av blod - hjärnbarriären (BBB) uppdelning, och funktionsförsämring allmänt utvärderas via neurologisk svårighetsgrad poäng2.
Den mest använda stroke induktionstekniken i gnagare modeller occludes den mellersta cerebrala artären (MCA) transiently eller permanent3. Denna teknik ger ett slag modell som liknar de hos människor: det har en penumbra som omger linjerade området, är mycket reproducerbara, och reglerar ischemi varaktighet och reperfusion4. Icke desto mindre har MCAO-metoden vissa komplikationer. Tekniken är benägen att intrakraniell blödning och skada på ipsilateral näthinnan med en dysfunktion av den visuella cortex och gemensamma hypertermi som ofta leder till ytterligare resultat5,6,7. Andra begränsningar inkluderar höga variationer i inducerad stroke (som härrör från den troliga förlängningen av ischemi till oavsiktliga regioner, som den yttre halspulsådern regionen), otillräcklig ocklusion av MCA, och för tidig reperfusion. Också, råttor av olika stammar och storlekar uppvisar olika infarct volymer8. Förutom alla de nämnda nackdelarna, kan MCAO-modellen inte framkalla små isolerade stroke i djupa hjärnområden, eftersom det är begränsat tekniskt när det gäller dess krav på minsta kärlstorlek för kateterisering. Detta gör behovet av en alternativ modell desto mer kritiskt. En annan metod, photothrombosis, ger ett möjligt alternativ till MCAO förfaranden men inte förbättra på effektiviteten9. Denna teknik riktar stroke med ljus och erbjuder vissa förbättringar på de tidigare modellerna. Emellertid kräver photothrombosis en invasiv craniotomy som är associerad med sekundära compications9.
Mot bakgrund av skisserade brister ger det protokoll som presenteras här en kapabel alternativ laserteknik för att inducera hjärnskada hos gnagare. Laserteknikens verkningsmekanism bygger på laserns fototermiska effekter som förmedlas på levande vävnader, vilket leder till att ljusstrålarna upptags upptag av kroppsvävnader och att de förvandlingen till värme. Fördelarna med att använda en laserteknik är dess säkerhet och enkel manipulation. En laser förmåga att producera värme för att stoppa blödning gör det mycket viktigt inom medicinen, medan dess förmåga att förstärka olika strålar vid en given meet point säkerställer att lasrar undvika att förstöra friska vävnader som står i vägen för målet punkt10. Laserstrålen som används i detta protokoll kan passera genom ett låg flytande medium, såsom ben, utan att avge sin energi och / eller orsakar någon förstörelse. När den når ett högt flytande medium, såsom hjärnvävnader, den använder upp sin energi för att förstöra målet vävnader. Tekniken, därför, kan framkalla hjärnskada endast i lämpligt område i hjärnan.
Tekniken presenteras här visade en enorm mängd förmåga att reglera sina nivåer av bestrålning, producerar de valda variationerna av hjärnskada avsedd från början. Till skillnad från den ursprungliga MCAO som påverkar både cortex och striatum, lasertekniken kunde reglera effekterna av hjärnskada, inducera skada endast på den avsedda motor cortex. Häri tillhandahålls laser-inducerad hjärnan skada protokollet och en sammanfattning av representativa resultat för förfarandet utförs på hjärnbarken hos råttor.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:667px;" width="666">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride</td>
			<td style="width:123px;">SIGMA - ALDRICH</td>
			<td style="width:161px;">298-96-4</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">50% trichloroacetic acid</td>
			<td style="width:123px;">SIGMA - ALDRICH</td>
			<td style="width:161px;">76-03-9</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Brain &#38; Tissue Matrices</td>
			<td style="width:123px;">SIGMA - ALDRICH</td>
			<td>15013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Cannula Venflon 22 G</td>
			<td style="width:123px;">KD-FIX</td>
			<td style="width:161px;">1.83604E+11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Centrifuge Sigma 2-16P</td>
			<td style="width:123px;">SIGMA - ALDRICH</td>
			<td style="width:161px;">Sigma 2-16P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Compact Analytical Balances</td>
			<td style="width:123px;">SIGMA - ALDRICH</td>
			<td style="width:161px;">HR-AZ/HR-A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Digital Weighing Scale</td>
			<td style="width:123px;">SIGMA - ALDRICH</td>
			<td style="width:161px;">Rs 4,000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Dissecting scissors</td>
			<td style="width:123px;">SIGMA - ALDRICH</td>
			<td style="width:161px;">Z265969</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Eppendorf pipette</td>
			<td style="width:123px;">SIGMA - ALDRICH</td>
			<td style="width:161px;">Z683884</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Eppendorf Tube</td>
			<td style="width:123px;">SIGMA - ALDRICH</td>
			<td>EP0030119460</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Ethanol 96 %</td>
			<td style="width:123px;">ROMICAL</td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td>Flammable Liquid</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Evans Blue 2%</td>
			<td style="width:123px;">SIGMA - ALDRICH</td>
			<td style="width:161px;">314-13-6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Fluorescence detector</td>
			<td style="width:123px;">Tecan, M&#228;nnedorf Switzerland</td>
			<td style="width:161px;">model Infinite 200 PRO multimode reader</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Heater with thermometer</td>
			<td>Heatingpad-1</td>
			<td>Model: HEATINGPAD-1/2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Infusion Cuff</td>
			<td style="width:123px;">ABN</td>
			<td style="width:161px;">IC-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Isofluran, USP 100%</td>
			<td style="width:123px;">Piramamal Critical Care, Inc</td>
			<td style="width:161px;">NDC 66794-017</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Multiset</td>
			<td style="width:123px;">TEVA MEDICAL</td>
			<td style="width:161px;">998702</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Olympus BX 40 microscope</td>
			<td style="width:123px;">Olympus</td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Optical scanner</td>
			<td style="width:123px;">Canon</td>
			<td style="width:161px;">Cano Scan 4200F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Petri dishes</td>
			<td style="width:123px;">SIGMA - ALDRICH</td>
			<td style="width:161px;">P5606</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Scalpel blades 11</td>
			<td style="width:123px;">SIGMA - ALDRICH</td>
			<td style="width:161px;">S2771</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Sharplan 3000 Nd:YAG (neodymium-doped yttrium aluminum garnet) laser machine</td>
			<td style="width:123px;">Laser Industries Ltd</td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Stereotaxic head holder</td>
			<td style="width:123px;">KOPF</td>
			<td style="width:161px;">900LS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:216px;">Sterile Syringe 2 ml</td>
			<td style="width:123px;">Braun</td>
			<td>4606027V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Syringe-needle 27 G</td>
			<td style="width:123px;">Braun</td>
			<td style="width:161px;">305620</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

laser-induced brain injury in the motor cortex of rats

En vanlig teknik för att inducera stroke i experimentella gnagare modeller innebär den övergående (ofta betecknas som MCAO-t) eller permanent (betecknas som MCAO-p) ocklusion av den mellersta cerebral artär (MCA) med hjälp av en kateter. Denna allmänt accepterade teknik har dock vissa begränsningar, och begränsar därmed dess omfattande användning. Stroke induktion av denna metod kännetecknas ofta av hög variation i lokalisering och storlek av det ischemiska området, periodiska förekomster av blödning, och höga dödstal. Också, den framgångsrika slutförandet av någon av de övergående eller permanenta förfaranden kräver expertis och ofta varar i ca 30 minuter. I detta protokoll presenteras en laserbestrålningsteknik som kan tjäna som en alternativ metod för att inducera och studera hjärnskada i gnagaremodeller.
När jämfört med råttor i kontroll och MCAO grupper, hjärnan skada genom laserinduktion visade minskad variabilitet i kroppstemperatur, infarct volym, hjärnan ödem, intrakraniell blödning, och dödlighet. Vidare orsakade användningen av en laser-inducerad skada skador på hjärnvävnaderna endast i motor cortex till skillnad från i MCAO experiment där förstörelse av både motor cortex och striatal vävnader observeras.
Resultaten från denna undersökning tyder på att laser bestrålning skulle kunna fungera som en alternativ och effektiv teknik för att inducera hjärnan skada i motor cortex. Metoden förkortar också tiden för att slutföra proceduren och kräver inte experthanterare.

Inga dödsfall eller SAH registrerades i vare sig kontroll- eller experimentgrupperna (tabell 1). MCAO-gruppen hade en 20% av både dödlighet och SAH.
De relativa kroppstemperaturförändringarna hos råttorna i båda grupperna var också likartade, trots en skillnad i variabiliteten hos båda grupperna (tabell 1).
Det fanns en betydligt sämre NSS i både laser (16 ± 1.1) och MCAO (20 ± 1.5) modeller, jämfört med den skenstyrd...

Watch this Scientific Journal Video about Laser-Induced Brain Injury in the Motor Cortex of Rats at JoVE.com

Laser-Induced Brain Injury in the Motor Cortex of Rats

Protokollet som presenteras här visar en teknik för att skapa en gnagare modell av hjärnskada. Den metod som beskrivs här använder laser bestrålning och mål motor cortex.

Laser-inducerad hjärnskada i motor cortex av råttor

A common technique for inducing stroke in experimental rodent models involves the transient (often denoted as MCAO-t) or permanent (designated as MCAO-p) ...

Vårt protokoll ger en ny metod för att skapa traumatisk hjärnskada hos råttor med hjälp av laserbestrålning för att skapa en fokuspåverkan i motorbarken. Den största fördelen med denna teknik är den låga variationen i infarct område, den låga dödligheten, och den relativa enkelheten i förfarandet som inte kräver experthanterare. Demonstrerar proceduren blir Dmitry Natanel, en forskare från vårt laboratorium.För att utföra en laser-inducerad hjärnskada, först tilldela 20, 300 till 350 gram Sprague Dawley råttor i lasergruppen och 20 till kontroll Sham-drivna gruppen. Efter att ha bekräftat en brist på svar på tillbakadragande reflex, placera en råtta på en rektal temperatur reglerad värmedyna och använda en rakapparat för att ta bort tillräckligt med hår från skadestället med en cirka två centimeter hårfri marginal runt snittet. Desinficera den exponerade huden med 70%etanol och placera råttan i utsatt position i en stereotaxisk huvudhållare.Gör en tre centimeter snitt för att tillåta lateral reflektion av hårbotten för att exponera området mellan bregma och lambda. Hålla en Nd:YAG laser med topp våglängd på 1064 nanometer på två millimeters avstånd från skallen, administrera 50 joule gånger 10 punkter med en sekund puls varaktighet till det utsatta området av skallen ovanför den högra hjärnhalvan. Efter att laserskadan har levererats, ta bort råttan från enheten och stäng hårbotten med 3-0 siden kirurgiska suturer.Sedan, placera råttan i sin bur med övervakning tills full recumbency. 24 timmar efter ingreppet, använd ett 43 poängsystem för att utvärdera den neurologiska svårighetsgraden poängen. Testa djuren för neurologiska underskott, beteendestörningar, strålbalanseringsuppgift och reflexer och tilldela högre poäng för svårare funktionshinder.Efter bedömningen skördar man hjärnorna från varje försöks- och kontrolldjur enligt standardprotokoll. För att bedöma hjärnan infarct volym, avsnitt de skördade hjärnorna i sex två millimeter tjocka koronalskivor och inkubera varje skiva i 0,05%TTC i 30 minuter vid 37 grader Celsius. Efter färgning, skanna detta segment med en optisk scanner med en 1600 med 1600 punkter per tum upplösning.De obefläckade områdena i de fasta hjärnskivorna definieras som infarcted. För att utvärdera förekomsten av brott på blodhjärnbarriären, 24 timmar efter att lasern inducerat skada ladda en spruta med 2%Evans blå färgämne utspädd i fyra milliliter per kilo saltlösning och leverera lösningen intravenöst till skadade och kontroll råttor via den kanylerade svansvenen. Låt lösningen cirkulera i en timme innan du använder kirurgiska pincets och sax för att öppna bröstet på det första djuret.Genomsyra det exponerade hjärtat med kyld 0,9%koksaltlösning via vänster kammare vid 110 millimeter kvicksilver av tryck tills en färglös profusionsvätska observeras från höger förmak. Därefter skörda hjärnan och få två millimeter rostrala caudal skivor. Separera den vänstra hjärnan skivor från höger hjärna skivor för att möjliggöra utvärdering av de skadade och icke-skadade halvklot separat, och väga proverna.Homogenisera proverna med hjälp av en mortel och mortelstöt och inkubera vävnadsproverna i 50%triklorättiksyra i 24 timmar. Nästa dag, centrifugera den homogeniserade hjärnvävnad prover för 20 minuter vid 10, 000 gånger G och rumstemperatur, och blanda en milliliter av supernatanten med 1,5 milliliter av 96%etanol vid ett till tre förhållande. Använd sedan en fluorescensdetektor vid en 620 nanometerexcitation och 680 nanometerutsläppsvåglängden för att bedöma blodhjärnbarriären brott.Som observerats av histologisk analys, Evans blå färgning kan användas för att avslöja förekomsten av hjärnskada vid laser och MCAO modell djur. I denna representativa analys inga dödsfall eller subarachnoid blödningar registrerades i antingen kontroll eller experimentella grupper, och MCAO gruppen hade en 20%-frekvensen av både dödlighet och subarachnoid blödning. Den relativa kroppstemperaturen förändringar i råttorna från båda grupperna var också liknande, trots en skillnad i variabiliteten av båda grupperna.Den neurologiska svårighetsgrad poängen var betydligt sämre i både laser och MCAO modeller jämfört med Sham-drivs kontrollgruppen. Laser-inducerad till hjärnan skada orsakade också en betydande ökning av infarct volym vid målet halvklotet jämfört med Sham-drivna kontrollgruppen. Lasermodellens infarktvolym var dock mindre jämfört med de djur som skadades av MCAO-tekniken.Ingen skillnad i hjärnan ödem observerades mellan laser-inducerad hjärnan skada modellen och Sham-drivs kontrollgruppen. Det fanns dock en betydande skillnad i hjärnan ödem mellan laser modellen och MCAO skadade grupper. Jämfört med den Sham-drivna kontrollgruppen orsakade den laserinducerade hjärnskadan och MCAO-teknikerna båda en betydande ökning av blodhjärnbarriärens brott vid de icke-skadade och målhalvorna.Medan du försöker denna modell, kom ihåg att exakt rikta motor cortex området och att standardisera energi, antalet punkter som bestrålas, och den totala utläggningstiden. Efter denna procedur kan en bred uppsjö av beteendetester, såsom balkvandring, Froedert och andra utvärderingar utföras.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Live Imaging of Mitosis in the Developing Mouse Embryonic Cortex

Live avbildning av Mitos i utvecklings Mouse embryonala Cortex

Although of short duration, mitosis is a complex and dynamic multi-step process fundamental for development of organs including the brain. In the ...

An Ex Vivo Laser-induced Spinal Cord Injury Model to Assess Mechanisms of Axonal Degeneration in Real-time

An Ex Vivo Laser-induced Spinal Cord Injury Model to Assess Mechanisms of Axonal Degeneration in Real-time

En<em&gt; Ex vivo</em&gt; Laser-inducerad ryggmärgsskada modell för bedömning Mekanismer axonal degeneration i realtid

Injured CNS axons fail to regenerate and often retract away from the injury site. Axons spared from the initial injury may later undergo secondary axonal ...

Effects of Transcranial Alternating Current Stimulation on the Primary Motor Cortex by Online Combined Approach with Transcranial Magnetic Stimulation

Effekterna av transkraniell växelström stimulering på primära motoriska Cortex av Online kombinerat tillvägagångssätt med transkraniell magnetisk stimulering

Transcranial Alternating Current Stimulation (tACS) is a neuromodulatory technique able to act through sinusoidal electrical waveforms in a specific ...

Imaging Neural Activity in the Primary Somatosensory Cortex Using Thy1-GCaMP6s Transgenic Mice

Imaging Neural Activity in the Primary Somatosensory Cortex Using Thy1-GCaMP6s Transgenic Mice

Imaging Neural aktivitet i den primära somatosensoriska Cortex med Thy1-GCaMP6s transgena möss

The mammalian brain exhibits marked symmetry across the sagittal plane. However, detailed description of neural dynamics in symmetric brain regions in ...

In Vivo Single-Molecule Tracking at the Drosophila Presynaptic Motor Nerve Terminal

In Vivo Single-Molecule Tracking at the Drosophila Presynaptic Motor Nerve Terminal

In Vivo Singel-molekyl spårning i Drosophila presynaptiska Motor nerv terminalen

An increasing number of super-resolution microscopy techniques are helping to uncover the mechanisms that govern the nanoscale cellular world. ...

Combined Transcranial Magnetic Stimulation and Electroencephalography of the Dorsolateral Prefrontal Cortex

Kombinerade transkraniell magnetisk stimulering och elektroencefalografi av dorsolaterala prefrontala Cortex

Transcranial magnetic stimulation (TMS) is a non-invasive method that produces neural excitation in the cortex by means of brief, time-varying magnetic ...

Evaluation of Hemisphere Lateralization with Bilateral Local Field Potential Recording in Secondary Motor Cortex of Mice

Utvärdering av halvklot lateralization med bilateral lokal sätter in potentiell inspelning i sekundär motorisk cortex av möss

This article demonstrates complete, detailed procedures for both in vivo bilateral recording and analysis of local field potential (LFP) in the cortical ...

Investigating Alterations in Caecum Microbiota After Traumatic Brain Injury in Mice

Undersöka förändringar i Caecum Microbiota efter traumatisk hjärnskada hos möss

Increasing evidence shows that the microbiota-gut-brain axis plays an important role in the pathogenesis of brain diseases. Several studies also ...

Non-Invasive Modulation and Robotic Mapping of Motor Cortex in the Developing Brain

Icke-invasiv modulering och robot kartläggning av motoriska cortex i hjärnans utveckling

Mapping the motor cortex with transcranial magnetic stimulation (TMS) has potential to interrogate motor cortex physiology and plasticity but carries ...