Name: a rabbit venous interposition model mimicking revascularization surgery using vein grafts to assess intimal hyperplasia under arterial blood pressure
Uploaded: 2020-05-15T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Rabbit Venous Interposition Model Mimicking Revascularization Surgery using Vein Grafts to Assess Intimal Hyperplasia under Arterial Blood Pressure at JoVE.

Dette arbejde blev støttet af forskningsbevillinger fra Ministeriet for Uddannelse, Kultur, Sport, Videnskab og Teknologi, Japan (25462136).

BEMÆRK: Alle kirurgiske forsøg på dyr skal udføres i overensstemmelse med vejledningen for pleje og brug af forsøgsdyr (www.nap.edu/catalog/5140.html) eller andre relevante etiske retningslinjer. Protokollerne bør godkendes af dyrevelfærdsudvalget på den relevante institution, inden de fortsætter.
1. Tilberedning af dyr
<ol><li>Køb mandlige japanske hvide kaniner (eller kaniner med tilsvarende kropsstørrelse) vejer 2,7-3,0 kg.</li>
	<li>Akklimatisere kaninerne i 1 uge i en 12 time...

<ol>
	<li>Causes of death, 2000-2016, Global Health Estimates (GHE). World Health Organization (WHO) Available from: <a target="_blank" href="https://www.who.int/healthinfo/global_burden_disease/estimates/en/">https://www.who.int/healthinfo/global_burden_disease/estimates/en/</a> (2019)</li><li>Benjamin, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+Disease+and+Stroke+Statistics-2019+Update:+A+Report+From+the+American+Heart+Association.">Heart Disease and Stroke Statistics-2019 Update: A Report From the American Heart Association.</a> Circulation. 139 (10), 56 (2019).</li><li>Norgren, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inter-Society+Consensus+for+the+Management+of+Peripheral+Arterial+Disease+(TASC+II).">Inter-Society Consensus for the Management of Peripheral Arterial Disease (TASC II).</a> Journal of Vascular Surgery. 45, 5-67 (2007).</li><li>Caliskan, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Saphenous+vein+grafts+in+contemporary+coronary+artery+bypass+graft+surgery.">Saphenous vein grafts in contemporary coronary artery bypass graft surgery.</a> Nature Reviews: Cardiology. , (2020).</li><li>Goldman, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+patency+of+saphenous+vein+and+left+internal+mammary+artery+grafts+after+coronary+artery+bypass+surgery:+results+from+a+Department+of+Veterans+Affairs+Cooperative+Study.">Long-term patency of saphenous vein and left internal mammary artery grafts after coronary artery bypass surgery: results from a Department of Veterans Affairs Cooperative Study.</a> Journal of the American College of Cardiology. 44 (11), 2149-2156 (2004).</li><li>Muto, A., Model, L., Ziegler, K., Eghbalieh, S. D., Dardik, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+vein+graft+adaptation+to+the+arterial+circulation:+insights+into+the+neointimal+algorithm+and+management+strategies.">Mechanisms of vein graft adaptation to the arterial circulation: insights into the neointimal algorithm and management strategies.</a> Circulation Journal. 74 (8), 1501-1512 (2010).</li><li>Motwani, J. G., Topol, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aortocoronary+saphenous+vein+graft+disease:+pathogenesis,+predisposition,+and+prevention.">Aortocoronary saphenous vein graft disease: pathogenesis, predisposition, and prevention.</a> Circulation. 97 (9), 916-931 (1998).</li><li>Schachner, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacologic+inhibition+of+vein+graft+neointimal+hyperplasia.">Pharmacologic inhibition of vein graft neointimal hyperplasia.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 131 (5), 1065-1072 (2006).</li><li>Kulik, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Secondary+prevention+after+coronary+artery+graft+surgery:+a+scientific+statement+from+the+American+Heart+Association.">Secondary prevention after coronary artery graft surgery: a scientific statement from the American Heart Association.</a> Circulation. 131 (10), 927-964 (2015).</li><li>Gerhard-Herman, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=2016+AHA/ACC+Guideline+on+the+Management+of+Patients+With+Lower+Extremity+Peripheral+Artery+Disease:+Executive+Summary:+A+Report+of+the+American+College+of+Cardiology/American+Heart+Association+Task+Force+on+Clinical+Practice+Guidelines.">2016 AHA/ACC Guideline on the Management of Patients With Lower Extremity Peripheral Artery Disease: Executive Summary: A Report of the American College of Cardiology/American Heart Association Task Force on Clinical Practice Guidelines.</a> Circulation. 135 (12), 686-725 (2017).</li><li>Aboyans, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=2017+ESC+Guidelines+on+the+Diagnosis+and+Treatment+of+Peripheral+Arterial+Diseases,+in+collaboration+with+the+European+Society+for+Vascular+Surgery+(ESVS):+Document+covering+atherosclerotic+disease+of+extracranial+carotid+and+vertebral,+mesenteric,+renal,+upper+and+lower+extremity+arteries+Endorsed+by:+the+European+Stroke+Organization+(ESO)+The+Task+Force+for+the+Diagnosis+and+Treatment+of+Peripheral+Arterial+Diseases+of+the+European+Society+of+Cardiology+(ESC)+and+of+the+European+Society+for+Vascular+Surgery+(ESVS).">2017 ESC Guidelines on the Diagnosis and Treatment of Peripheral Arterial Diseases, in collaboration with the European Society for Vascular Surgery (ESVS): Document covering atherosclerotic disease of extracranial carotid and vertebral, mesenteric, renal, upper and lower extremity arteries Endorsed by: the European Stroke Organization (ESO) The Task Force for the Diagnosis and Treatment of Peripheral Arterial Diseases of the European Society of Cardiology (ESC) and of the European Society for Vascular Surgery (ESVS).</a> European Heart Journal. 39 (9), 763-816 (2018).</li><li>Neumann, F. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=2018+ESC/EACTS+Guidelines+on+myocardial+revascularization.">2018 ESC/EACTS Guidelines on myocardial revascularization.</a> European Heart Journal. 40 (2), 87-165 (2019).</li><li>Alexander, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+and+safety+of+edifoligide,+an+E2F+transcription+factor+decoy,+for+prevention+of+vein+graft+failure+following+coronary+artery+bypass+graft+surgery:+PREVENT+IV:+a+randomized+controlled+trial.">Efficacy and safety of edifoligide, an E2F transcription factor decoy, for prevention of vein graft failure following coronary artery bypass graft surgery: PREVENT IV: a randomized controlled trial.</a> Journal of the American Medical Association. 294 (19), 2446-2454 (2005).</li><li>Carrel, A., Guthrie, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uniterminal+and+biterminal+venous+transplantations.">Uniterminal and biterminal venous transplantations.</a> Surgery, Gynecology and Obstetrics. 2 (3), 266-286 (1906).</li><li>Nabatoff, R. A., Touroff, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+maximal-size+vein+graft+feasible+in+the+replacement+of+experimental+aortic+defects,+long+term+observations+concerning+the+function+and+ultimate+fate+of+the+graft.">The maximal-size vein graft feasible in the replacement of experimental aortic defects, long term observations concerning the function and ultimate fate of the graft.</a> Bulletin of the New York Academy of Medicine. 28 (9), 616 (1952).</li><li>Kanar, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+vascular+grafts.+I.+The+effects+of+dicetyl+phosphate+on+venous+autografts+implanted+in+the+thoracic+aorta+of+growing+pigs:+a+preliminary+report.">Experimental vascular grafts. I. The effects of dicetyl phosphate on venous autografts implanted in the thoracic aorta of growing pigs: a preliminary report.</a> Annals of Surgery. 138 (1), 73-81 (1953).</li><li>Jones, T. I., Dale, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Study+of+peripheral+autogenous+vein+grafts.">Study of peripheral autogenous vein grafts.</a> AMA Archives of Surgery. 76 (2), 294-306 (1958).</li><li>Stehbens, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+production+of+aneurysms+by+microvascular+surgery+in+rabbits.">Experimental production of aneurysms by microvascular surgery in rabbits.</a> Vascular Surgery. 7 (3), 165-175 (1973).</li><li>Bannister, C. M., Mundy, L. A., Mundy, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fate+of+small+diameter+cervical+veins+grafted+into+the+common+carotid+arteries+of+growing+rabbits.">Fate of small diameter cervical veins grafted into the common carotid arteries of growing rabbits.</a> Journal of Neurosurgery. 46 (1), 72-77 (1977).</li><li>Bergmann, M., Walther, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrastructural+changes+of+venous+autologous+bypass+grafts+in+rabbits:+correlation+of+patency+and+development.">Ultrastructural changes of venous autologous bypass grafts in rabbits: correlation of patency and development.</a> Basic Research in Cardiology. 77 (6), 682-694 (1982).</li><li>Murday, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intimal+hyperplasia+in+arterial+autogenous+vein+grafts:+a+new+animal+model.">Intimal hyperplasia in arterial autogenous vein grafts: a new animal model.</a> Cardiovascular Research. 17 (8), 446-451 (1983).</li><li>Quist, W. C., LoGerfo, F. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevention+of+smooth+muscle+cell+phenotypic+modulation+in+vein+grafts:+a+histomorphometric.">Prevention of smooth muscle cell phenotypic modulation in vein grafts: a histomorphometric.</a> Journal of Vascular Surgery. 16 (2), 225-231 (1992).</li><li>Davies, M. G., Dalen, H., Svendsen, E., Hagan, P. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+perioperative+catheter+injury+on+the+long-term+vein+graft+function+and+morphology.">Influence of perioperative catheter injury on the long-term vein graft function and morphology.</a> Journal of Surgical Research. 66 (2), 109-114 (1996).</li><li>Davies, M. G., Dalen, H., Svendsen, E., Hagan, P. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Balloon+catheter+injury+and+vein+graft+morphology+and+function.">Balloon catheter injury and vein graft morphology and function.</a> Annals of Vascular Surgery. 10 (5), 429-442 (1996).</li><li>Jiang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+vein+grat+model:+adaptation+to+differential+flow+environments.">A novel vein grat model: adaptation to differential flow environments.</a> American Journal of Physiology Heart and Circulatory Physiology. 286 (1), 240-245 (2004).</li><li>Ohnaka, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+microRNA-145+to+prevent+vein+graft+disease+in+rabbits+by+regulation+of+smooth+muscle+cell+phenotype.">Effect of microRNA-145 to prevent vein graft disease in rabbits by regulation of smooth muscle cell phenotype.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 148 (2), 676-682 (2014).</li><li>Nishio, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicroRNA-145-loaded+poly(lactic-co-glycolic+acid)+nanoparticles+attenuate+venous+intimal+hyperplasia+in+a+rabbit+model.">MicroRNA-145-loaded poly(lactic-co-glycolic acid) nanoparticles attenuate venous intimal hyperplasia in a rabbit model.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 157 (6), 2242-2251 (2019).</li><li>Ohno, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accelerated+reendothelialization+with+suppressed+thrombogenic+property+and+neointimal+hyperplasia+of+rabbit+jugular+vein+grafts+by+adenovirus-mediated+gene+transfer+of+C-type+natriuretic+peptide.">Accelerated reendothelialization with suppressed thrombogenic property and neointimal hyperplasia of rabbit jugular vein grafts by adenovirus-mediated gene transfer of C-type natriuretic peptide.</a> Circulation. 105 (14), 1623-1626 (2002).</li><li>Osgood, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+vein+graft+preparation+promotes+cellular+dysfunction,+oxydative+stress,+and+intimal+hyperplasia+in+human+saphenous+vein.">Surgical vein graft preparation promotes cellular dysfunction, oxydative stress, and intimal hyperplasia in human saphenous vein.</a> Journal of Vascular Surgery. 60 (1), 202-211 (2014).</li><li>Shintani, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraoperative+transfection+of+vein+grafts+with+the+NFkappaB+decoy+in+a+canine+aortocoronary+bypass+model:+a+strategy+to+attenuate+intimal+hyperplasia.">Intraoperative transfection of vein grafts with the NFkappaB decoy in a canine aortocoronary bypass model: a strategy to attenuate intimal hyperplasia.</a> Annals of Thoracic Surgery. 74 (4), 1132-1137 (2002).</li><li>Petrofski, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+delivery+to+aortocoronary+saphenous+vein+grafts+in+a+large+animal+model+of+intimal+hyperplasia.">Gene delivery to aortocoronary saphenous vein grafts in a large animal model of intimal hyperplasia.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 127 (1), 27-33 (2004).</li><li>Steger, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neointimal+hyperplasia+in+a+porcine+model+of+vein+graft+disease:+comparison+between+organ+culture+and+coronary+artery+bypass+grafting.">Neointimal hyperplasia in a porcine model of vein graft disease: comparison between organ culture and coronary artery bypass grafting.</a> European Surgery. 43 (3), 174-180 (2011).</li><li>Thim, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oversized+vein+grafts+develop+advanced+atherosclerosis+in+hypercholesterolemic+minipigs.">Oversized vein grafts develop advanced atherosclerosis in hypercholesterolemic minipigs.</a> BMC Cardiovascular Disorders. 12 (24), (2012).</li><li>Zou, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+venous+bypass+graft+arteriosclerosis.">Mouse model of venous bypass graft arteriosclerosis.</a> American Journal of Pathology. 153 (4), 1301-1310 (1998).</li><li>de Vries, M. R., Simons, K. H., Jukema, J. W., Braun, J., Quax, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vein+graft+failure:+from+pathophysiology+to+clinical+outcomes.">Vein graft failure: from pathophysiology to clinical outcomes.</a> Nature Reviews Cardiology. 13 (8), 451-470 (2016).</li><li>Dietrich, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+development+of+vein+graft+atheroma+in+ApoE-deficient+mice.">Rapid development of vein graft atheroma in ApoE-deficient mice.</a> American Journal of Pathology. 157 (2), 659-669 (2000).</li><li>Kumar, A., Lindner, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Remodeling+with+neointima+formation+in+the+mouse+carotid+artery+after+cessation+of+blood+flow.">Remodeling with neointima formation in the mouse carotid artery after cessation of blood flow.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 17 (10), 2238-2244 (1997).</li><li>Lindner, V., Fingerie, J., Reidy, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+arterial+injury.">Mouse model of arterial injury.</a> Circulation Research. 73 (5), 792-796 (1993).</li><li>Moroi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interaction+of+genetic+deficiency+of+endothelial+nitric+oxide,+gender,+and+pregnancy+in+vascular+response+to+injury+in+mice.">Interaction of genetic deficiency of endothelial nitric oxide, gender, and pregnancy in vascular response to injury in mice.</a> Journal of Clinical Investigation. 101 (6), 1225-1232 (1998).</li></ol>

Denne protokol er designet til at give en eksperimentel platform til at teste forskellige molekylære eller genetiske interventioner for VSMCs at kontrollere fænotype fra proliferativ til kontraktile tilstand og efterfølgende dæmpe udviklingen af venøs intimal hyperplasi in vivo. Ved hjælp af denne model, vi med succes forberedt intimal hyperplasi på 2 uger efter operationen (Figur 1A) og angivet det terapeutiske potentiale af microRNA-145 til at kontrollere VSMC fænotype<sup class="x...

Antallet af patienter, der oplever iskæmiske sygdomme på grund af åreforkalkning er stigende på verdensplan1. På trods af de nuværende fremskridt inden for medicinske og kirurgiske behandlinger for hjerte-kar-sygdomme, iskæmisk hjertesygdomme, såsom myokardieinfarkt, fortsat en væsentlig årsag til sygelighed og dødelighed2. Desuden fremkalder perifere arterielle sygdomme karakteriseret ved nedsat blodgennemstrømning til lemmerne kritisk ekstremitetiskæmi, hvor ca. 40% af patienterne mister deres ben inden for 6 måneder efter diagnosen, og dødeligheden er op til 20%3.
Revaskularisering operationer, såsom koronararterie bypass podning (CABG) og bypass kirurgi for perifere arterier, er store terapeutiske muligheder for iskæmisk eitreiske sygdomme. Formålet med disse operationer er at give en ny blod vej til at give tilstrækkelig blodgennemstrømning mod det distale sted for stenotiske eller okkluderede læsioner af aterosklerotiske arterier. Selv in situ arterielle grafts, såsom interne thorax arterier for CABG, foretrækkes som bypass grafts på grund af den forventede længere patency, vene grafts, såsom autologe saphenous vener, er almindeligt anvendt på grund af den højere tilgængelighed og tilgængelighed4. Det svage punkt i venetransplantater er den dårlige patency sats i forhold til arterietransplantatet5 på grund af accelereret intimal hyperplasi, når de udsættes for arterielt tryk, hvilket fører til venetransplantat sygdom6.
Venetransplantat sygdom udvikler sig gennem følgende tre trin: 1) trombose; 2) intimhyperplasi; og 3) åreforkalkning7. For at løse venegraft sygdom, en masse grundforskning er blevet gennemført8. Hidtil, ingen farmakologisk strategi bortset fra antiplatelet og lipid-sænkende behandlinger anbefales til sekundær forebyggelse efter koronar eller perifer revaskularisering operationer i de seneste retningslinjer9,10,11,12. For at overvinde venetransplantatsygdommen, især timal hyperplasi, er det derfor nødvendigt at etablere en relevant forsøgsplatform til yderligere undersøgelser.
Intimal hyperplasi er et adaptivt fænomen, der opstår som reaktion på ændringen i omgivelserne, hvor vaskulære glatte muskelceller (VSMCs) formere sig, ophobes, og generere ekstracellulære matrix i intima. Derfor præsenterer det et fundament for graft atheroma7. I hyperplastiske intima, VSMCs bære spredning, og produktion snarere end sammentrækning, kaldes "fænotypiske forandring"8. Det er et vigtigt forskningsmål at kontrollere fænotypen af VSMCs af venetransplantater for at forebygge venetransplantat sygdom, og talrige grundlæggende undersøgelser er blevet gennemført om dette emne8. Men, en randomiseret kontrolleret klinisk undersøgelse, der havde til formål at opnå farmakologisk kontrol af VSMC fænotype viste begrænsede resultater13. Yderligere, der er ingen standardiserede behandlinger for at forhindre intimal hyperplasi. Mere grundforskning, herunder dyremodelundersøgelser, er nødvendig.
For at fremme forskning på dette område, er det afgørende at etablere en dyremodel, der opsummerer venetransplantater under arterielt blodtryk, så en langsigtet, postoperativ observation. Carrel et al. etableret en hunde model for implantation af den eksterne halspulsåren i halspulsåren14. Der er anvendt en række venetransplantater til at undersøge de fysiologiske og patologiske virkninger af ændringer i arteriel blodtryk, herunder den ringere vena cava indpodet i brystkassen eller abdominal aorta, eller saphenous vene indpodet i lårpulsåren15,16,17. Disse modeller blev bygget i større dyr, såsom svin eller hunde, der er egnet til at efterligne en venetransplantat sygdom i et klinisk tilfælde. Men, etablering af et dyr model, der kan fremstilles uden særlige kirurgiske teknikker og til en lavere pris ville være ideelt for forskere, der forsøger at udvikle en ny terapeutisk strategi for at dæmpe intimal hyperplasi gennem VSMC fænotype kontrol in vivo. I første omgang blev interposition af halspulsåren i halspulsåren i en kanin indført inden for neurokirurgi18,19. Derefter blev det anvendt til forskning i intimal hyperplasi20,21. Den oprindelige model består af venøs interposition alene, hvilket sparer tid. Desuden viste en efterfølgende undersøgelse, at præparatet af en venetransplantat også påvirkede den intimalhyperplasi22. Davies et al. evaluerede effekten af ballonkateterskade på intimal hyperplasi i en kaninvenøs interposition model23,24. Selv om ballonkateterskade ud over veneinterposition var mere relevant for en klinisk indstilling, ønskede man også en mere reproducerbar model. Jiang et al. undersøgte således virkningen af differensflowmiljøer på intimhyperplasi og etablerede en distalegrenligationsom en reproducerbar model25. Men de anvendte en manchet teknik på tidspunktet for vene transplantat interposition, der synes forskellig fra håndsyet anastomose i den kliniske indstilling. I denne protokol rapporterer vi en reproducerbar, klinisk relevant og bredt tilgængelig procedure til fremstilling af en kaninvenøs interposition model til vurdering af intimal hyperplasi under arterielt blodtryk.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>10% Povidone-iodine solution</td>
			<td>Nakakita</td>
			<td>872612</td>
			<td>Surgical expendables</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-0 VICRYL Plus</td>
			<td>Johnson and Johnson</td>
			<td>VCP316H</td>
			<td>Surgical expendables</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 Silk suture</td>
			<td>Alfresa pharma</td>
			<td>GA04SB</td>
			<td>Surgical expendables</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>8-0 polypropylene suture</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>8741H</td>
			<td>Surgical expendables</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cefazorin sodium</td>
			<td>Nichi-Iko Pharmaceutical</td>
			<td>6132401D3196</td>
			<td>Antibiotics</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fogarty Catheter (2Fr)</td>
			<td>Edwards Lifesciences LLC</td>
			<td>E-060-2F</td>
			<td>Surgical expendables</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin</td>
			<td>Nipro</td>
			<td>873334</td>
			<td>Anticoagulant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intravenous catheter (20G)</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>SR-OT2051C</td>
			<td>Surgical expendables</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Fujifilm</td>
			<td>095-06573</td>
			<td>Anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lidocaine hydrochloride</td>
			<td>MP Biomedicals</td>
			<td>193917</td>
			<td>Anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pentobarbital sodium</td>
			<td>Tokyo Chemical Industry</td>
			<td>P0776</td>
			<td>Anesthesia</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a rabbit venous interposition model mimicking revascularization surgery using vein grafts to assess intimal hyperplasia under arterial blood pressure

Selv om venetransplantater har været almindeligt anvendt som autologe grafts i revaskularisering operationer for iskæmisk eidømmelse, den langsigtede patency forbliver dårlig på grund af accelerationen af intimal hyperplasi på grund af eksponering for arteriel blodtryk. Denne protokol er designet til etablering af eksperimentel venøs intimal hyperplasi ved interposing kanin halspulsårer til ipsilaterale halspulsårer. Protokollen kræver ikke kirurgiske procedurer dybt inde i kroppen stammen og omfanget af snittet er begrænset, hvilket er mindre invasivt for dyrene, så langvarig observation efter implantation. Denne enkle procedure gør det muligt for forskere at undersøge strategier til at dæmpe udviklingen af intimal hyperplasi af de implanterede venetransplantater. Ved hjælp af denne protokol rapporterede vi virkningerne transduktion af microRNA-145 (miR-145), som er kendt for at kontrollere fænotype af vaskulære glatte muskelceller (VSMCs) fra proliferering til kontraktile tilstand, i høstede venetransplantater. Vi bekræftede dæmpningen af intimal hyperplasi af venetransplantater ved at transducing miR-145 før implantation kirurgi gennem fænotype ændring af VSMC'er. Her rapporterer vi en mindre invasiv eksperimentel platform til at undersøge de strategier, der kan bruges til at dæmpe intimal hyperplasi af venetransplantater i revaskularisering operationer.

Figur 1A viser et repræsentativt billede af vellykket intimhyperplasi 2 uger efter venøs interposition kirurgi (øverste panel). Det nederste panel viser de terapeutiske virkninger af mikroRNA-145-belastet poly (mælkesyre-co-glykolsyre) nanopartikler, der svækket den intimal hyperplasi (lavere panel). Figur 1B viser sammenligningen af intimhyperplasi mellem kontrolgruppen ved hjælp af fosfatbufferet saltvandskontrol (PBS), kontrol mikroRNA (Cont-miR) og mic...

Watch this Scientific Journal Video about A Rabbit Venous Interposition Model Mimicking Revascularization Surgery using Vein Grafts to Assess Intimal Hyperplasia under Arterial Blood Pressure at JoVE.

A Rabbit Venous Interposition Model Mimicking Revascularization Surgery using Vein Grafts to Assess Intimal Hyperplasia under Arterial Blood Pressure

Den nuværende protokol har til formål at eksperimentelt skabe venøs intimal hyperplasi ved at udsætte vener til arteriel blodtryk for at udvikle strategier til at dæmpe venøs intimal hyperplasi efter revaskularisering kirurgi ved hjælp af vene transplantater.

En kanin venøs interposition model efterligne revaskularisering Kirurgi ved hjælp af vene transplantater til at vurdere intimal hyperplasi under arteriel blodtryk

Although vein grafts have been commonly used as autologous grafts in revascularization surgeries for ischemic diseases, the long-term patency remains poor ...

Vores protokol giver en nem, omkostningseffektiv, reproducerbar og klinisk relevant model for forskere inden for venøs intimal hyperplasi. Vores protokol er økonomisk, klinisk og teknisk afbalanceret. Derfor anbefales det stærkt til forskere, der ønsker at anvende deres in vitro-resultater på en in vivo-indstilling.Vi mener, at vores protokol kan anvendes på en større dyremodel for udvikling af nye behandlingsstrategier i iskæmisk hjerte og sygdomme i undereksemiteterne. Vores protokol er primært relevant for området for hjerte-kar-kirurgi. Men, Det kan også bruges til at løse degenerative ændringer i arteriovenøse fistler hos patienter med slutstadiet nyresygdom.Efter lokalbedøvelse, og profylaktisk antibiotisk smertestillende administration, desinficere operationsstedet med 10% povidone-jod. Og lav en 50 til 60 millimeter snit med en kirurgisk skalpel i livmoderhalskræft region af bedøvet mandlige japanske hvide kanin. Stumpt dissekere det subkutane væv og fascia at udsætte en 20 til 30 millimeter segment af halspulsåren.Og brug 4-0 silkesuturer til at late alle grenene af den eksponerede vene. Placer en 2-0 silke sutur omkring de interne og eksterne halspulsårer og gøre en en millimeter snit i venøse væggen af den distale side af venen. Indsæt et 2-fransk ballonkateter fra snittet mod den proksimale side af venen.Og ligate 2-0 silke sutur på de distale steder i halspulsårerne. Puste ballonen med 200 mikroliter af luft. Og brug ballonen til at affee intima af venen tre gange for endotel eksfoliering.Efter den tredje passage, ligate den proksimale ende af venen og skær venen på det distale sted. Derefter indsætte en 20 gauge intravenøs kateter i den høstede vene fra den distale til den proksimale retning, og skær venen på det proksimale sted. At interpose halspulsåren med høsten halspulsåren, udsætte en 20 til 30 millimeter segment af ipsilateral halspulsåren.Og adskille arterien omhyggeligt fra den nærliggende vene og nerve. Ligate alle grene af den eksponerede vene med 4-0 silke sutur. Og intravenøst administrere 200 internationale enheder pr kg heparin natrium.Klem de proksimale og distale ender af arterien med kirurgiske gummi klemmer. Og skær arterien mellem klemmerne. Injicer normalt saltvand i den indsævrede halspulsåre proksimalt og distally at distend arterien.Og placere høsten vene nær arterien til anastomose fartøjet i en omvendt end-to-end mode. For at anastomose den proksimale ende af venen til den distale ende af arterien, placere to anker sting af 8-0 polypropylen på stedet og det modsatte sted. Tilføj sting på oversiden af anastomoselinjen mellem ankersømmene.Vend arterien og venetransplantatet på hovedet. Og tilsæt sting på den resterende del af anastomose linje. Dernæst fjerne intravenøs kateter fra venen og klemme venetransplantatet proksimalt.Declamp halspulsåren distally. Og observere, om venetransplantatet udvider sig gradvist. Brug af 8-0 polypropylen afbrudt suturer, anastomose den distale ende af venen til den proksimale ende af arterien.Og declamp arterien for at kontrollere for blødning fra anastomose steder. Endelig ligate den interne halspulsåren med en 4-0 silke sutur til at simulere en dårlig afstrømning tilstand og for at lette intimal hyperplasi. Rengør derefter såret med saltvand.Luk snittet med 3-0 polyglactin 910 i lag. Og lad kaninen til fuldt ud at komme sig med overvågning, før du returnerer dyret til sit hjem bur. I dette repræsentative billede, en vellykket intimal hyperplasi på 2 uger efter venøs interposition kirurgi kan observeres.Her kan de terapeutiske virkninger af microRNA-145 indlæst poly (mælkesyre-co-glykolsyre) nanopartikler på intimal hyperplasi morfologi observeres. Behandling med mikroRNA'er fyldt med poly (lactic-co-glykolsyre)nanopartikler resulterer i en betydelig dæmpning af intimhyperplasi. Desuden afslører immunstaining for Ki-67, en celleprolifererende markør, færre Ki-67-positive celler inden for mikroRNA-145 behandlede gruppe, der angiver en fænotypeændring i de vaskulære glatte muskelceller fra den umodne proliferative tilstand til den modne kontraktile tilstand.Hovedformålet med vores protokol er at opnå patency af den implanterede transplantat. Det er også vigtigt at bekræfte, at transplantatet udvider sig efter deklamation af halspulsåren.

Research

JoVE Journal

Medicine

Microsurgical Venous Pouch Arterial-Bifurcation Aneurysms in the Rabbit Model: Technical Aspects

For ruptured human cerebral aneurysms endovascular embolization has become an equivalent alternative to aneurysm clipping.1 However, large clinical trials ...

Electrolytic Inferior Vena Cava Model (EIM) of Venous Thrombosis

Electrolytic Inferior Vena Cava Model EIM of Venous Thrombosis

Animal models serve a vital role in deep venous thrombosis (DVT) research in order to study thrombus formation, thrombus resolution and to test potential ...

Femoral Arterial and Venous Catheterization for Blood Sampling, Drug Administration and Conscious Blood Pressure and Heart Rate Measurements

Femoral arteriel og venøs kateterisation for blodprøvetagning, Drug Administration og bevidst blodtryk og puls Målinger

In multiple fields of study, access to the circulatory system in laboratory studies is necessary. Pharmacological studies in rats using chronically ...

Training a Sophisticated Microsurgical Technique: Interposition of External Jugular Vein Graft in the Common Carotid Artery in Rats

Træning en Sofistikeret Microsurgical Teknik: indskydning af ydre halsvene Graft i den fælles halspulsåre i rotter

Neointimal hyperplasia is one the primary causes of stenosis in arterialized veins that are of great importance in arterial coronary bypass surgery, in ...

Adult Mouse Venous Hypertension Model: Common Carotid Artery to External Jugular Vein Anastomosis.

Voksen Mouse Venøs Hypertension Model: carotis communis til eksterne halsvene anastomose.

The understanding of the pathophysiology of brain arteriovenous malformations and arteriovenous fistulas has improved thanks to animal models. A rat model ...

Vein Interposition Model: A Suitable Model to Study Bypass Graft Patency

Vein indskydning Model: En passende model til at studere Bypass Graft Åbenhed

Bypass grafting is an established treatment method for coronary artery disease. Graft patency continues to be the Achilles heel of saphenous vein grafts. ...

Using the Sleeve Technique in a Mouse Model of Aortic Transplantation - An Instructional Video

Ved hjælp af ærmet teknik i en musemodel af aorta Transplantation - en instruktions Video

Orthotopic aortic transplantation using the sleeve technique reduces injury to the aorta with failure rate of only 10-20%. The time to anastomose the ...

A Chronic Cardiac Ischemia Model in Swine Using an Ameroid Constrictor

En kronisk hjerte iskæmi Model i svin ved hjælp af en Ameroid kvælerslange

Cardiovascular disease remains the number one cause of mortality in the United States. There are numerous approaches to treating these diseases, but ...

A Rabbit Model of Durable Transgene Expression in Jugular Vein to Common Carotid Artery Interposition Grafts

En kanin Model af holdbare transgen udtryk i halsfedt til fælles halspulsåren Interposition Grafts

Vein graft bypass surgery is a common treatment for occlusive arterial disease; however, long-term success is limited by graft failure due to thrombosis, ...

Murine Model of Central Venous Stenosis using Aortocaval Fistula with an Outflow Stenosis

Murine model af central venøs stenose ved hjælp af aortocaval fistel med en udstrømning stenose

Central venous stenosis is an important entity contributing to arteriovenous fistula (AVF) failure. A murine AVF model was modified to create a partial ...