Name: a rabbit venous interposition model mimicking revascularization surgery using vein grafts to assess intimal hyperplasia under arterial blood pressure
Uploaded: 2020-05-15T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Rabbit Venous Interposition Model Mimicking Revascularization Surgery using Vein Grafts to Assess Intimal Hyperplasia under Arterial Blood Pressure at JoVE.

この研究は、文部科学省(25462136)の研究助成金によって支援されました。

注:動物に対して行われるすべての外科的処置は、実験動物のケアと使用ガイド(www.nap.edu/catalog/5140.html)またはその他の適切な倫理指針に従って行われるべきである。議定書は、先に進む前に、適切な機関で動物福祉委員会によって承認されるべきです。
1. 動物の準備
<ol><li>2.7~3.0kgの雄の白いウサギ(または体の大きさのウサギ)を購入してください。</li>
	<li>12時間の明暗?...

<ol>
	<li>Causes of death, 2000-2016, Global Health Estimates (GHE). World Health Organization (WHO) Available from: <a target="_blank" href="https://www.who.int/healthinfo/global_burden_disease/estimates/en/">https://www.who.int/healthinfo/global_burden_disease/estimates/en/</a> (2019)</li><li>Benjamin, E. 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D., Dardik, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+vein+graft+adaptation+to+the+arterial+circulation:+insights+into+the+neointimal+algorithm+and+management+strategies.">Mechanisms of vein graft adaptation to the arterial circulation: insights into the neointimal algorithm and management strategies.</a> Circulation Journal. 74 (8), 1501-1512 (2010).</li><li>Motwani, J. G., Topol, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aortocoronary+saphenous+vein+graft+disease:+pathogenesis,+predisposition,+and+prevention.">Aortocoronary saphenous vein graft disease: pathogenesis, predisposition, and prevention.</a> Circulation. 97 (9), 916-931 (1998).</li><li>Schachner, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacologic+inhibition+of+vein+graft+neointimal+hyperplasia.">Pharmacologic inhibition of vein graft neointimal hyperplasia.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 131 (5), 1065-1072 (2006).</li><li>Kulik, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Secondary+prevention+after+coronary+artery+graft+surgery:+a+scientific+statement+from+the+American+Heart+Association.">Secondary prevention after coronary artery graft surgery: a scientific statement from the American Heart Association.</a> Circulation. 131 (10), 927-964 (2015).</li><li>Gerhard-Herman, M. 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J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=2018+ESC/EACTS+Guidelines+on+myocardial+revascularization.">2018 ESC/EACTS Guidelines on myocardial revascularization.</a> European Heart Journal. 40 (2), 87-165 (2019).</li><li>Alexander, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+and+safety+of+edifoligide,+an+E2F+transcription+factor+decoy,+for+prevention+of+vein+graft+failure+following+coronary+artery+bypass+graft+surgery:+PREVENT+IV:+a+randomized+controlled+trial.">Efficacy and safety of edifoligide, an E2F transcription factor decoy, for prevention of vein graft failure following coronary artery bypass graft surgery: PREVENT IV: a randomized controlled trial.</a> Journal of the American Medical Association. 294 (19), 2446-2454 (2005).</li><li>Carrel, A., Guthrie, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uniterminal+and+biterminal+venous+transplantations.">Uniterminal and biterminal venous transplantations.</a> Surgery, Gynecology and Obstetrics. 2 (3), 266-286 (1906).</li><li>Nabatoff, R. A., Touroff, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+maximal-size+vein+graft+feasible+in+the+replacement+of+experimental+aortic+defects,+long+term+observations+concerning+the+function+and+ultimate+fate+of+the+graft.">The maximal-size vein graft feasible in the replacement of experimental aortic defects, long term observations concerning the function and ultimate fate of the graft.</a> Bulletin of the New York Academy of Medicine. 28 (9), 616 (1952).</li><li>Kanar, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+vascular+grafts.+I.+The+effects+of+dicetyl+phosphate+on+venous+autografts+implanted+in+the+thoracic+aorta+of+growing+pigs:+a+preliminary+report.">Experimental vascular grafts. I. The effects of dicetyl phosphate on venous autografts implanted in the thoracic aorta of growing pigs: a preliminary report.</a> Annals of Surgery. 138 (1), 73-81 (1953).</li><li>Jones, T. I., Dale, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Study+of+peripheral+autogenous+vein+grafts.">Study of peripheral autogenous vein grafts.</a> AMA Archives of Surgery. 76 (2), 294-306 (1958).</li><li>Stehbens, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+production+of+aneurysms+by+microvascular+surgery+in+rabbits.">Experimental production of aneurysms by microvascular surgery in rabbits.</a> Vascular Surgery. 7 (3), 165-175 (1973).</li><li>Bannister, C. M., Mundy, L. A., Mundy, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fate+of+small+diameter+cervical+veins+grafted+into+the+common+carotid+arteries+of+growing+rabbits.">Fate of small diameter cervical veins grafted into the common carotid arteries of growing rabbits.</a> Journal of Neurosurgery. 46 (1), 72-77 (1977).</li><li>Bergmann, M., Walther, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrastructural+changes+of+venous+autologous+bypass+grafts+in+rabbits:+correlation+of+patency+and+development.">Ultrastructural changes of venous autologous bypass grafts in rabbits: correlation of patency and development.</a> Basic Research in Cardiology. 77 (6), 682-694 (1982).</li><li>Murday, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intimal+hyperplasia+in+arterial+autogenous+vein+grafts:+a+new+animal+model.">Intimal hyperplasia in arterial autogenous vein grafts: a new animal model.</a> Cardiovascular Research. 17 (8), 446-451 (1983).</li><li>Quist, W. C., LoGerfo, F. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevention+of+smooth+muscle+cell+phenotypic+modulation+in+vein+grafts:+a+histomorphometric.">Prevention of smooth muscle cell phenotypic modulation in vein grafts: a histomorphometric.</a> Journal of Vascular Surgery. 16 (2), 225-231 (1992).</li><li>Davies, M. G., Dalen, H., Svendsen, E., Hagan, P. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+perioperative+catheter+injury+on+the+long-term+vein+graft+function+and+morphology.">Influence of perioperative catheter injury on the long-term vein graft function and morphology.</a> Journal of Surgical Research. 66 (2), 109-114 (1996).</li><li>Davies, M. G., Dalen, H., Svendsen, E., Hagan, P. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Balloon+catheter+injury+and+vein+graft+morphology+and+function.">Balloon catheter injury and vein graft morphology and function.</a> Annals of Vascular Surgery. 10 (5), 429-442 (1996).</li><li>Jiang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+vein+grat+model:+adaptation+to+differential+flow+environments.">A novel vein grat model: adaptation to differential flow environments.</a> American Journal of Physiology Heart and Circulatory Physiology. 286 (1), 240-245 (2004).</li><li>Ohnaka, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+microRNA-145+to+prevent+vein+graft+disease+in+rabbits+by+regulation+of+smooth+muscle+cell+phenotype.">Effect of microRNA-145 to prevent vein graft disease in rabbits by regulation of smooth muscle cell phenotype.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 148 (2), 676-682 (2014).</li><li>Nishio, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicroRNA-145-loaded+poly(lactic-co-glycolic+acid)+nanoparticles+attenuate+venous+intimal+hyperplasia+in+a+rabbit+model.">MicroRNA-145-loaded poly(lactic-co-glycolic acid) nanoparticles attenuate venous intimal hyperplasia in a rabbit model.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 157 (6), 2242-2251 (2019).</li><li>Ohno, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accelerated+reendothelialization+with+suppressed+thrombogenic+property+and+neointimal+hyperplasia+of+rabbit+jugular+vein+grafts+by+adenovirus-mediated+gene+transfer+of+C-type+natriuretic+peptide.">Accelerated reendothelialization with suppressed thrombogenic property and neointimal hyperplasia of rabbit jugular vein grafts by adenovirus-mediated gene transfer of C-type natriuretic peptide.</a> Circulation. 105 (14), 1623-1626 (2002).</li><li>Osgood, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+vein+graft+preparation+promotes+cellular+dysfunction,+oxydative+stress,+and+intimal+hyperplasia+in+human+saphenous+vein.">Surgical vein graft preparation promotes cellular dysfunction, oxydative stress, and intimal hyperplasia in human saphenous vein.</a> Journal of Vascular Surgery. 60 (1), 202-211 (2014).</li><li>Shintani, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraoperative+transfection+of+vein+grafts+with+the+NFkappaB+decoy+in+a+canine+aortocoronary+bypass+model:+a+strategy+to+attenuate+intimal+hyperplasia.">Intraoperative transfection of vein grafts with the NFkappaB decoy in a canine aortocoronary bypass model: a strategy to attenuate intimal hyperplasia.</a> Annals of Thoracic Surgery. 74 (4), 1132-1137 (2002).</li><li>Petrofski, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+delivery+to+aortocoronary+saphenous+vein+grafts+in+a+large+animal+model+of+intimal+hyperplasia.">Gene delivery to aortocoronary saphenous vein grafts in a large animal model of intimal hyperplasia.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 127 (1), 27-33 (2004).</li><li>Steger, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neointimal+hyperplasia+in+a+porcine+model+of+vein+graft+disease:+comparison+between+organ+culture+and+coronary+artery+bypass+grafting.">Neointimal hyperplasia in a porcine model of vein graft disease: comparison between organ culture and coronary artery bypass grafting.</a> European Surgery. 43 (3), 174-180 (2011).</li><li>Thim, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oversized+vein+grafts+develop+advanced+atherosclerosis+in+hypercholesterolemic+minipigs.">Oversized vein grafts develop advanced atherosclerosis in hypercholesterolemic minipigs.</a> BMC Cardiovascular Disorders. 12 (24), (2012).</li><li>Zou, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+venous+bypass+graft+arteriosclerosis.">Mouse model of venous bypass graft arteriosclerosis.</a> American Journal of Pathology. 153 (4), 1301-1310 (1998).</li><li>de Vries, M. R., Simons, K. H., Jukema, J. W., Braun, J., Quax, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vein+graft+failure:+from+pathophysiology+to+clinical+outcomes.">Vein graft failure: from pathophysiology to clinical outcomes.</a> Nature Reviews Cardiology. 13 (8), 451-470 (2016).</li><li>Dietrich, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+development+of+vein+graft+atheroma+in+ApoE-deficient+mice.">Rapid development of vein graft atheroma in ApoE-deficient mice.</a> American Journal of Pathology. 157 (2), 659-669 (2000).</li><li>Kumar, A., Lindner, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Remodeling+with+neointima+formation+in+the+mouse+carotid+artery+after+cessation+of+blood+flow.">Remodeling with neointima formation in the mouse carotid artery after cessation of blood flow.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 17 (10), 2238-2244 (1997).</li><li>Lindner, V., Fingerie, J., Reidy, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+arterial+injury.">Mouse model of arterial injury.</a> Circulation Research. 73 (5), 792-796 (1993).</li><li>Moroi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interaction+of+genetic+deficiency+of+endothelial+nitric+oxide,+gender,+and+pregnancy+in+vascular+response+to+injury+in+mice.">Interaction of genetic deficiency of endothelial nitric oxide, gender, and pregnancy in vascular response to injury in mice.</a> Journal of Clinical Investigation. 101 (6), 1225-1232 (1998).</li></ol>

本プロトコルは、VSMCが増殖から収縮状態に至る表現型を制御し、その後生体内における静脈内外皮過形成の進行を減衰させる様々な分子または遺伝的介入を試験する実験プラットフォームを提供するように設計されている。このモデルを用いて、手術後2週間(図1A)での内膜過形成の調製に成功し、VSMC表現型26,27を制御するマイクロRNA-145の治療可能性を...

アテローム性動脈硬化症による虚血性疾患を経験する患者の数は、世界的に増加しています1.心血管疾患に対する医学的および外科的療法における現在の進歩にもかかわらず、心筋梗塞などの虚血性心疾患は、罹患率および死亡率の主な原因である2。さらに、四肢への血流の減少を特徴とする末梢動脈疾患は、重篤な四肢虚血を誘発し、患者の約40%が診断後6ヶ月以内に足を失い、死亡率は20%3まで3である。
冠動脈バイパス移植(CABG)や末梢動脈バイパス手術などの再血管形成手術は、虚血性疾患の主要な治療選択肢です。これらの手術の目的は、アテローム硬化性動脈のステノスティックまたは閉塞性病変の遠位部位に向かう十分な血流を提供する新しい血液経路を提供することにある。CABGの内部胸部動脈のような静脈動脈移植片では、より長い開存性が予想されるためバイパス移植片として好ましいが、自家伏状静脈のような静脈移植片は、より高いアクセシビリティおよび入手可能性のために一般的に使用される4。静脈移植片の弱点は、動脈圧を受けると動脈移植片5の加速による動脈移植片5に比べて貧しい開腸率であり、これは静脈移植片疾患6に至る。
静脈移植性疾患は、次の3つのステップを経て発症する:1)血栓症;2)内皮過形成;そして3)アテローム性動脈硬化症7.静脈移植性疾患に対処するために、多くの基礎研究が行われている。これまでのところ、最近の,ガイドライン,99、10、11、12では、冠動脈または末梢血管新生手術後の二次予防のために、抗血小板および脂質低下療法以外の薬理学的戦略は推奨されていない。,1112したがって、静脈移植症、特にインティマル過形成を克服するためには、さらなる研究のための関連実験プラットフォームの確立が必要である。
インティタル過形成は、血管平滑筋細胞(VSMC)が増殖し、蓄積し、インティマで細胞外マトリックスを生成する周囲の変化に応じて起こる適応現象である。その結果、移植片アテローム7の基礎を提示する。超塑性インティマでは、VSMCは増殖を有し、収縮ではなく生産を「形ノチの変化」8と呼んだ。静脈移植片病を予防するために静脈移植片のVSMCの表現型を制御する主要な研究目標であり、このトピック8に関して数多くの基礎研究が行われている。しかし、VSMC表現型の薬理学的制御を達成することを目的とした無作為化制御臨床研究は、限定的な結果を示した13.さらに、内膜過形成を予防するための標準化された治療法はありません。動物モデル研究を含む、より多くの基礎研究が必要である。
この分野の研究を進めるためには、動脈血圧下で静脈移植片を再現し、長期の術後観察を可能にする動物モデルを確立することが重要です。Carrelら. 頸動脈14に外部頸静脈を移植するイヌモデルを確立した。この後、胸部または腹部大動脈に生着した下胸部カバ、または大腿動脈15、16、17に生まれた下胸静脈を含む動脈血圧の変化の生理学的および病理学的影響を調べるため、16,17種々の静脈移植片が採用されている。これらのモデルは、臨床症例における静脈移植性疾患を模倣するのに適した豚や犬などのより大きな動物で構築された。しかし、特別な外科技術なしで、より低コストで調製できる動物モデルの確立は、生体内のVSMC表現型制御を通じて内膜過形成を減衰するための新しい治療戦略を開発しようとする研究者にとって理想的であろう。当初、ウサギの頸動脈への頸静脈の介入が脳神経外科18,19,19の分野で導入された。その後、内皮過形成20,21,21に関する研究に応用した。初期モデルは静脈間の差付けだけで構成されているため、時間を節約できます。さらに、その後の研究は、静脈移植片の調製が内膜過形成22にも影響を及ら示したことを実証した。Davies et al. ウサギ静脈間位モデル23,24,24における気球カテーテル損傷が内皮過形成に及ぼす影響を評価した。静脈間付きに加えてバルーンカテーテル損傷は臨床現場に対してより関連性が高かったが、より再現性のあるモデルも望まれていた。このように、江ららは、微分流動環境が内膜過形成に及ぼす影響を調べ、再現可能なモデル25として遠位枝結紮手順を確立した。しかし、彼らは臨床現場で手縫い吻合とは異なるように見える静脈移植片の介在時にカフ技術を採用した。本プロトコルでは、動脈血圧下での内膜過形成を評価するためのウサギ静脈間質モデルの調製に関する再現性、臨床的に関連する、広く利用可能な手順を報告する。

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>10% Povidone-iodine solution</td>
			<td>Nakakita</td>
			<td>872612</td>
			<td>Surgical expendables</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-0 VICRYL Plus</td>
			<td>Johnson and Johnson</td>
			<td>VCP316H</td>
			<td>Surgical expendables</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 Silk suture</td>
			<td>Alfresa pharma</td>
			<td>GA04SB</td>
			<td>Surgical expendables</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>8-0 polypropylene suture</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>8741H</td>
			<td>Surgical expendables</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cefazorin sodium</td>
			<td>Nichi-Iko Pharmaceutical</td>
			<td>6132401D3196</td>
			<td>Antibiotics</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fogarty Catheter (2Fr)</td>
			<td>Edwards Lifesciences LLC</td>
			<td>E-060-2F</td>
			<td>Surgical expendables</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin</td>
			<td>Nipro</td>
			<td>873334</td>
			<td>Anticoagulant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intravenous catheter (20G)</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>SR-OT2051C</td>
			<td>Surgical expendables</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Fujifilm</td>
			<td>095-06573</td>
			<td>Anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lidocaine hydrochloride</td>
			<td>MP Biomedicals</td>
			<td>193917</td>
			<td>Anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pentobarbital sodium</td>
			<td>Tokyo Chemical Industry</td>
			<td>P0776</td>
			<td>Anesthesia</td>
		</tr>
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a rabbit venous interposition model mimicking revascularization surgery using vein grafts to assess intimal hyperplasia under arterial blood pressure

静脈移植片は虚血性疾患の再血管形成手術で一般的に自己移植片として使用されてきたが、動脈血圧への暴露による腸内過形成の加速のために、長期の開腸は依然として貧弱である。本プロトコルは、ウサギ頸静脈を周頸動脈に介在させることにより実験的静脈内膜過形成を確立するために設計されている。このプロトコルは、体幹の深部に外科的処置を必要とせず、切開の程度は限られており、これは動物にとって侵襲性が低く、移植後の長期観察を可能にする。この簡単な手順は、研究者が移植された静脈移植片の内膜過形成の進行を減衰するための戦略を調査することを可能にする。このプロトコルを用いて、増殖から収縮状態への血管平滑筋細胞(VSMC)の表現型を制御し、採取した静脈移植片に及ぼすマイクロRNA-145(miR-145)の効果を報告した。VSMCsの表現型変化を通じて移植手術前にmiR-145をトランスデューシングすることにより、静脈移植片の内膜過形成の減衰を確認した。ここでは、血管新生手術における静脈移植片の内膜過形成を減衰させるために使用できる戦略を調査するための、より侵襲性の低い実験プラットフォームを報告する。

図1Aは静脈間間術後2週での正常な内膜過形成の代表的な画像(上パネル)を示す。下側のパネルは、内膜過形成を減衰させたマイクロRNA-145装填ポリ(乳酸-コグリコール酸)ナノ粒子(下部パネル)の治療効果を示す。図1Bは、リン酸緩衝食塩水制御(PBS)、コントロールマイクロRNA(Cont-miR)、およびマイクロRNA-145(miR-145)群を用いた対照群間の内皮過形成の比?...

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A Rabbit Venous Interposition Model Mimicking Revascularization Surgery using Vein Grafts to Assess Intimal Hyperplasia under Arterial Blood Pressure

本プロトコルは、静脈移植片を用いた血管形成手術後の静脈内膜過形成を減衰させる戦略を開発するための動脈血圧に静脈を与えることによって、静脈内膜過形成を実験的に作り出すことを目的とする。

静脈移植を用いた血管形成術を模したウサギ静脈間位置モデルによる動脈血圧下の内膜過形成の評価

Although vein grafts have been commonly used as autologous grafts in revascularization surgeries for ischemic diseases, the long-term patency remains poor ...

当社のプロトコルは、静脈内膜過形成の分野の研究者に、簡単で費用対効果の高い、再現性のある臨床関連モデルを提供します。当社のプロトコルは、経済的、臨床的、技術的にバランスが取れています。したがって、インビボ設定にインビトロの結果を適用したい研究者に強くお勧めします。私たちは、虚血性心疾患および下肢疾患における新しい治療戦略の開発のために、より大きな動物モデルにプロトコルを適用できると考えています。私たちのプロトコルは、主に心血管外科の分野に関連しています。しかし、末期腎疾患の患者における動静脈瘻の変性変化に対処するためにも使用され得る。局所麻酔薬、および予防用抗生物質鎮痛投与後、10%ポビトンヨウ素で手術部位を消毒する。そして、麻酔を受けた雄の日本の白いウサギの頸部領域に外科メスで50〜60ミリメートルの切開を行います。皮下組織と筋膜を鈍く解剖し、頸静脈の20〜30ミリメートルのセグメントを露出させる。そして、露出した静脈のすべての枝をリゲートするために4-0シルク縫合糸を使用してください。内側と外部の頸静脈の周りに2-0シルク縫合糸を置き、静脈の遠位側の静脈壁に1ミリメートルの切開を行います。切り傷から静脈の近位側に向かって2フランス風のバルーンカテーテルを挿入します。そして、頸静脈の遠位部位に2-0シルク縫合糸をリゲートします。気球を200マイクロリットルの空気で膨らませる。そして、バルーンを使用して、内皮剥離のために静脈のインティマを3回否定します。3回目の通過後、静脈の近位端をリゲートし、遠位部位で静脈を切断する。次に、遠位から近位方向に収穫された静脈に20ゲージの静脈内カテーテルを挿入し、近位部位で静脈を切断する。頸動脈を収穫頸静脈と介在させるために、20〜30ミリメートルの周頸動脈のセグメントを露出させる。そして、近くの静脈と神経から慎重に動脈を分離します。露出した静脈のすべての枝を4-0シルク縫合糸でリゲートします。そして、静脈内投与 200 ヘパリンナトリウムのキログラム当たり国際単位.外科用ゴムクランプで動脈の近位および遠位端を締め付けます。そして、クランプ間の動脈を切断します。切開頸動脈に正常な生理液を近位に注入し、遠位で動脈を遠位に注入する。そして、逆エンドツーエンドの方法で血管を吻合するために動脈の近くに収穫静脈を置きます。静脈の近位端を動脈の遠位端まで吻合するには、8-0のアンカーステッチを2つ置きます。サイトと反対側のサイトでポリプロピレン。アンカーステッチの間の吻合線の上側をステッチします。動脈と静脈の移植片を逆さまにします。そして、吻合ラインの残りの部分にステッチを追加します。次に静脈から静脈内カテーテルを取り出し、静脈移植片を近位にクランプする。頸動脈を遠位に落とす。そして、静脈移植片が徐々に拡大するかどうかを観察する。8-0 を使用するポリプロピレンは縫合糸を中断し、動脈の近位端まで静脈の遠位端を吻合する。そして、吻鼻炎部位からの出血をチェックするために動脈を取り除く。最後に、4-0シルク縫合糸で内部頸動脈をリゲートして、不十分な流出状態をシミュレートし、内耳肥大症を促進します。その後、生理死して傷をきれいにします。3-0ポリグラクチン910で層を切開します。そして、ウサギは、その家のケージに動物を返す前に、監視で完全に回復することができます。この代表的な画像では、静脈間位置手術後2週間で正常な内膜過形成が観察できる。ここで、インティマル過形成形態に対するマイクロRNA-145装填ポリ(乳酸-コグリコール酸)ナノ粒子の治療効果が観察できる。実際、多発性(乳酸-コグリコール酸)ナノ粒子を装填したマイクロRNAによる治療は、内膜過形成の著しい減衰をもたらす。さらに、細胞増殖マーカーであるKi-67の免疫染色は、未熟な増殖状態から成熟した収縮状態への血管平滑筋細胞の表現型変化を示すmicroRNA-145処置群内のKi-67陽性細胞の数が少ないことを明らかにしている。私たちのプロトコルの主な目標は、移植された移植片の愛を達成することです。また、頸動脈を脱クランプした後に移植片が膨張することを確認することも重要である。

Research

JoVE Journal

Medicine

Microsurgical Venous Pouch Arterial-Bifurcation Aneurysms in the Rabbit Model: Technical Aspects

ウサギモデルにおける顕微静脈ポーチ動脈 - 分岐瘤：技術的側面

For ruptured human cerebral aneurysms endovascular embolization has become an equivalent alternative to aneurysm clipping.1 However, large clinical trials ...

Electrolytic Inferior Vena Cava Model (EIM) of Venous Thrombosis

Electrolytic Inferior Vena Cava Model EIM of Venous Thrombosis

静脈血栓症の電解下大静脈モデル（EIM）

Animal models serve a vital role in deep venous thrombosis (DVT) research in order to study thrombus formation, thrombus resolution and to test potential ...

Femoral Arterial and Venous Catheterization for Blood Sampling, Drug Administration and Conscious Blood Pressure and Heart Rate Measurements

血液サンプリング、医薬品の管理と意識血圧および心拍数測定のための大腿動脈および静脈カテーテル

In multiple fields of study, access to the circulatory system in laboratory studies is necessary. Pharmacological studies in rats using chronically ...

Training a Sophisticated Microsurgical Technique: Interposition of External Jugular Vein Graft in the Common Carotid Artery in Rats

ラットの総頚動脈で外頚静脈グラフトの介在：洗練された顕微鏡下手術の訓練

Neointimal hyperplasia is one the primary causes of stenosis in arterialized veins that are of great importance in arterial coronary bypass surgery, in ...

Adult Mouse Venous Hypertension Model: Common Carotid Artery to External Jugular Vein Anastomosis.

成体マウス静脈性高血圧モデル：外頸静脈吻合部の総頸動脈。

The understanding of the pathophysiology of brain arteriovenous malformations and arteriovenous fistulas has improved thanks to animal models. A rat model ...

Vein Interposition Model: A Suitable Model to Study Bypass Graft Patency

静脈介在モデル：バイパスグラフト開存を研究するための適切なモデル

Bypass grafting is an established treatment method for coronary artery disease. Graft patency continues to be the Achilles heel of saphenous vein grafts. ...

Using the Sleeve Technique in a Mouse Model of Aortic Transplantation - An Instructional Video

大動脈弁移植 - 教則ビデオのマウスモデルでスリーブを用いた

Orthotopic aortic transplantation using the sleeve technique reduces injury to the aorta with failure rate of only 10-20%. The time to anastomose the ...

A Chronic Cardiac Ischemia Model in Swine Using an Ameroid Constrictor

アメロイド収縮を使用して豚の慢性心筋虚血モデル

Cardiovascular disease remains the number one cause of mortality in the United States. There are numerous approaches to treating these diseases, but ...

A Rabbit Model of Durable Transgene Expression in Jugular Vein to Common Carotid Artery Interposition Grafts

耐久性のある遺伝子発現により一般的な頚動脈移植に頸静脈の家兎モデル

Vein graft bypass surgery is a common treatment for occlusive arterial disease; however, long-term success is limited by graft failure due to thrombosis, ...

Murine Model of Central Venous Stenosis using Aortocaval Fistula with an Outflow Stenosis

流出狭窄を伴う大軌道瘻を用した中枢静脈狭窄のマウスモデル

Central venous stenosis is an important entity contributing to arteriovenous fistula (AVF) failure. A murine AVF model was modified to create a partial ...