Name: a rabbit venous interposition model mimicking revascularization surgery using vein grafts to assess intimal hyperplasia under arterial blood pressure
Uploaded: 2020-05-15T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Rabbit Venous Interposition Model Mimicking Revascularization Surgery using Vein Grafts to Assess Intimal Hyperplasia under Arterial Blood Pressure at JoVE.

Este trabalho foi apoiado por bolsas de pesquisa do Ministério da Educação, Cultura, Esportes, Ciência e Tecnologia do Japão (25462136).

NOTA: Todos os procedimentos cirúrgicos realizados em animais devem ser realizados de acordo com o Guia de Cuidado e Uso de Animais de Laboratório (www.nap.edu/catalog/5140.html) ou outras diretrizes éticas adequadas. Os protocolos devem ser aprovados pela comissão de bem-estar animal na instituição apropriada antes de prosseguir.
1. Preparação de animais
<ol><li>Compre coelhos brancos japoneses machos (ou coelhos com tamanho equivalente do corpo) pesando 2,7-3,0 kg.</li>
	<li>Aclima...

<ol>
	<li>Causes of death, 2000-2016, Global Health Estimates (GHE). World Health Organization (WHO) Available from: <a target="_blank" href="https://www.who.int/healthinfo/global_burden_disease/estimates/en/">https://www.who.int/healthinfo/global_burden_disease/estimates/en/</a> (2019)</li><li>Benjamin, E. 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E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fate+of+small+diameter+cervical+veins+grafted+into+the+common+carotid+arteries+of+growing+rabbits.">Fate of small diameter cervical veins grafted into the common carotid arteries of growing rabbits.</a> Journal of Neurosurgery. 46 (1), 72-77 (1977).</li><li>Bergmann, M., Walther, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrastructural+changes+of+venous+autologous+bypass+grafts+in+rabbits:+correlation+of+patency+and+development.">Ultrastructural changes of venous autologous bypass grafts in rabbits: correlation of patency and development.</a> Basic Research in Cardiology. 77 (6), 682-694 (1982).</li><li>Murday, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intimal+hyperplasia+in+arterial+autogenous+vein+grafts:+a+new+animal+model.">Intimal hyperplasia in arterial autogenous vein grafts: a new animal model.</a> Cardiovascular Research. 17 (8), 446-451 (1983).</li><li>Quist, W. C., LoGerfo, F. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevention+of+smooth+muscle+cell+phenotypic+modulation+in+vein+grafts:+a+histomorphometric.">Prevention of smooth muscle cell phenotypic modulation in vein grafts: a histomorphometric.</a> Journal of Vascular Surgery. 16 (2), 225-231 (1992).</li><li>Davies, M. G., Dalen, H., Svendsen, E., Hagan, P. 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O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Balloon+catheter+injury+and+vein+graft+morphology+and+function.">Balloon catheter injury and vein graft morphology and function.</a> Annals of Vascular Surgery. 10 (5), 429-442 (1996).</li><li>Jiang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+vein+grat+model:+adaptation+to+differential+flow+environments.">A novel vein grat model: adaptation to differential flow environments.</a> American Journal of Physiology Heart and Circulatory Physiology. 286 (1), 240-245 (2004).</li><li>Ohnaka, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+microRNA-145+to+prevent+vein+graft+disease+in+rabbits+by+regulation+of+smooth+muscle+cell+phenotype.">Effect of microRNA-145 to prevent vein graft disease in rabbits by regulation of smooth muscle cell phenotype.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 148 (2), 676-682 (2014).</li><li>Nishio, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicroRNA-145-loaded+poly(lactic-co-glycolic+acid)+nanoparticles+attenuate+venous+intimal+hyperplasia+in+a+rabbit+model.">MicroRNA-145-loaded poly(lactic-co-glycolic acid) nanoparticles attenuate venous intimal hyperplasia in a rabbit model.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 157 (6), 2242-2251 (2019).</li><li>Ohno, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accelerated+reendothelialization+with+suppressed+thrombogenic+property+and+neointimal+hyperplasia+of+rabbit+jugular+vein+grafts+by+adenovirus-mediated+gene+transfer+of+C-type+natriuretic+peptide.">Accelerated reendothelialization with suppressed thrombogenic property and neointimal hyperplasia of rabbit jugular vein grafts by adenovirus-mediated gene transfer of C-type natriuretic peptide.</a> Circulation. 105 (14), 1623-1626 (2002).</li><li>Osgood, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+vein+graft+preparation+promotes+cellular+dysfunction,+oxydative+stress,+and+intimal+hyperplasia+in+human+saphenous+vein.">Surgical vein graft preparation promotes cellular dysfunction, oxydative stress, and intimal hyperplasia in human saphenous vein.</a> Journal of Vascular Surgery. 60 (1), 202-211 (2014).</li><li>Shintani, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraoperative+transfection+of+vein+grafts+with+the+NFkappaB+decoy+in+a+canine+aortocoronary+bypass+model:+a+strategy+to+attenuate+intimal+hyperplasia.">Intraoperative transfection of vein grafts with the NFkappaB decoy in a canine aortocoronary bypass model: a strategy to attenuate intimal hyperplasia.</a> Annals of Thoracic Surgery. 74 (4), 1132-1137 (2002).</li><li>Petrofski, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+delivery+to+aortocoronary+saphenous+vein+grafts+in+a+large+animal+model+of+intimal+hyperplasia.">Gene delivery to aortocoronary saphenous vein grafts in a large animal model of intimal hyperplasia.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 127 (1), 27-33 (2004).</li><li>Steger, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neointimal+hyperplasia+in+a+porcine+model+of+vein+graft+disease:+comparison+between+organ+culture+and+coronary+artery+bypass+grafting.">Neointimal hyperplasia in a porcine model of vein graft disease: comparison between organ culture and coronary artery bypass grafting.</a> European Surgery. 43 (3), 174-180 (2011).</li><li>Thim, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oversized+vein+grafts+develop+advanced+atherosclerosis+in+hypercholesterolemic+minipigs.">Oversized vein grafts develop advanced atherosclerosis in hypercholesterolemic minipigs.</a> BMC Cardiovascular Disorders. 12 (24), (2012).</li><li>Zou, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+venous+bypass+graft+arteriosclerosis.">Mouse model of venous bypass graft arteriosclerosis.</a> American Journal of Pathology. 153 (4), 1301-1310 (1998).</li><li>de Vries, M. R., Simons, K. H., Jukema, J. W., Braun, J., Quax, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vein+graft+failure:+from+pathophysiology+to+clinical+outcomes.">Vein graft failure: from pathophysiology to clinical outcomes.</a> Nature Reviews Cardiology. 13 (8), 451-470 (2016).</li><li>Dietrich, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+development+of+vein+graft+atheroma+in+ApoE-deficient+mice.">Rapid development of vein graft atheroma in ApoE-deficient mice.</a> American Journal of Pathology. 157 (2), 659-669 (2000).</li><li>Kumar, A., Lindner, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Remodeling+with+neointima+formation+in+the+mouse+carotid+artery+after+cessation+of+blood+flow.">Remodeling with neointima formation in the mouse carotid artery after cessation of blood flow.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 17 (10), 2238-2244 (1997).</li><li>Lindner, V., Fingerie, J., Reidy, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+arterial+injury.">Mouse model of arterial injury.</a> Circulation Research. 73 (5), 792-796 (1993).</li><li>Moroi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interaction+of+genetic+deficiency+of+endothelial+nitric+oxide,+gender,+and+pregnancy+in+vascular+response+to+injury+in+mice.">Interaction of genetic deficiency of endothelial nitric oxide, gender, and pregnancy in vascular response to injury in mice.</a> Journal of Clinical Investigation. 101 (6), 1225-1232 (1998).</li></ol>

O presente protocolo foi projetado para fornecer uma plataforma experimental para testar várias intervenções moleculares ou genéticas para VSMCs para controlar o fenótipo do estado proliferativo para o estado contrátil e, posteriormente, atenuar a progressão da hiperplasia intimal venosa in vivo. Utilizando este modelo, preparamos com sucesso a hiperplasia intimal 2 semanas após a cirurgia (Figura 1A) e indicamos o potencial terapêutico do microRNA-145 para controlar o fenótipo VSM...

O número de pacientes que sofrem de doenças isquêmicas devido à aterosclerose está aumentando em todo o mundo1. Apesar dos atuais avanços em terapias médicas e cirúrgicas para doenças cardiovasculares, as doenças isquêmicas do coração, como o infarto do miocárdio, continuam sendo uma das principais causas de morbidade e mortalidade2. Além disso, as doenças arteriais periféricas caracterizadas pela redução do fluxo sanguíneo para os membros induzem isquemia crítica aos membros, onde aproximadamente 40% dos pacientes perdem as pernas dentro de 6 meses após o diagnóstico, e a taxa de mortalidade é de até 20%3.
Cirurgias de revascularização, como enxerto de bypass da artéria coronária (CABG) e cirurgia de bypass para artérias periféricas, são as principais opções terapêuticas para doenças isquêmicas. O objetivo dessas cirurgias é fornecer uma nova via sanguínea para fornecer fluxo sanguíneo suficiente em direção ao local distal das lesões estenóticas ou ocluídas das artérias ateroscleróticas. Embora enxertos arteriais in situ, como artérias torácicas internas para CABG, sejam preferidos como enxertos de bypass devido à paciência mais longa esperada, enxertos venosos, como veias saphenous autólogas, são comumente utilizados devido à maior acessibilidade e disponibilidade4. O ponto fraco dos enxertos venosos é a baixa taxa de patency em comparação com a dos enxertos de artéria5 devido à hiperplasia intimal acelerada quando submetida à pressão arterial, o que leva à doença do enxerto venoso6.
A doença do enxerto venoso desenvolve-se através dos seguintes três passos: 1) trombose; 2) hiperplasia intimal; e 3) aterosclerose7. Para enfrentar a doença do enxerto venoso, muitas pesquisas básicas têm sido realizadas8. Até agora, nenhuma estratégia farmacológica além de terapias antiplaquetárias e de redução de lipídios são recomendadas para prevenção secundária após cirurgias de revascularização coronariana ou periférica nas diretrizes recentes9,,10,11,12. Assim, para superar a doença do enxerto venoso, especialmente a hiperplasia intimal, é necessário o estabelecimento de uma plataforma experimental relevante para novos estudos.
A hiperplasia intimal é um fenômeno adaptativo que ocorre em resposta à mudança no ambiente, onde as células musculares lisas vasculares (VSMCs) proliferam, se acumulam e geram matriz extracelular no intima. Consequentemente, apresenta uma base para o ateroroma de enxerto7. No hiperplástico intima, os VSMCs suportam a proliferação, e a produção em vez de contração, denominada "mudança phenotípica"8. É um dos principais alvos de pesquisa para controlar o fenótipo dos VSMCs dos enxertos venosos para prevenir a doença do enxerto venoso, e inúmeros estudos básicos têm sido realizados sobre este tema8. No entanto, um estudo clínico controlado randomizado que teve como objetivo alcançar o controle farmacológico do fenótipo VSMC mostrou resultados limitados13. Além disso, não há terapias padronizadas para prevenir hiperplasia intimal. Mais pesquisas básicas, incluindo estudos de modeloanimal, são necessárias.
Para promover pesquisas nesse campo, é fundamental estabelecer um modelo animal que recapitula enxertos venosos sob pressão arterial, permitindo uma observação pós-operatória de longo prazo. Carrel et al. estabeleceram um modelo canino de implantação da veia jugular externa na artéria carótida14. Tem sido utilizada uma variedade de enxertos venosos para investigar os efeitos fisiológicos e patológicos das alterações na pressão arterial, incluindo a veia cava inferior enxertada na aorta torácica ou abdominal, ou a veia safena enenxertada na artéria femoral15,16,17. Esses modelos foram construídos em animais maiores, como porcos ou cães, que são adequados para imitar uma doença do enxerto venoso em um caso clínico. No entanto, o estabelecimento de um modelo animal que possa ser preparado sem técnicas cirúrgicas especiais e a um custo menor seria ideal para pesquisadores que tentam desenvolver uma nova estratégia terapêutica para atenuar a hiperplasia intimal através do controle do fenótipo VSMC in vivo. Inicialmente, foi introduzida a interposição da veia jugular na artéria carótida em um coelho no campo da neurocirurgia18,19. Posteriormente, foi aplicada a pesquisas sobre hiperplasia intimal20,21. O modelo inicial consiste apenas na interposição venosa, economizando tempo. Além disso, um estudo subsequente demonstrou que a preparação de um enxerto venoso também afetou a hiperplasia intimal22. Davies et al. avaliaram o efeito da lesão do cateter de balão na hiperplasia intimal em uma interposição venosa de coelho modelo23,24. Embora a lesão do cateter de balão, além da interposição venosa, tenha sido mais relevante para um ambiente clínico, também foi desejado um modelo mais reprodutível. Assim, Jiang et al. examinaram o impacto dos ambientes de fluxo diferencial na hiperplasia intimal e estabeleceram um procedimento de ligadura de ramo distal como um modelo reprodutível25. No entanto, eles utilizaram uma técnica de punho no momento da interposição do enxerto venoso que parece diferente da anastomose costurada à mão no ambiente clínico. No presente protocolo, relatamos um procedimento reprodutível, clinicamente relevante e amplamente disponível para a preparação de um modelo de interposição venosa de coelho para avaliar a hiperplasia intimal sob pressão arterial.

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	<tbody>
		<tr>
			<td>10% Povidone-iodine solution</td>
			<td>Nakakita</td>
			<td>872612</td>
			<td>Surgical expendables</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-0 VICRYL Plus</td>
			<td>Johnson and Johnson</td>
			<td>VCP316H</td>
			<td>Surgical expendables</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 Silk suture</td>
			<td>Alfresa pharma</td>
			<td>GA04SB</td>
			<td>Surgical expendables</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>8-0 polypropylene suture</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>8741H</td>
			<td>Surgical expendables</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cefazorin sodium</td>
			<td>Nichi-Iko Pharmaceutical</td>
			<td>6132401D3196</td>
			<td>Antibiotics</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fogarty Catheter (2Fr)</td>
			<td>Edwards Lifesciences LLC</td>
			<td>E-060-2F</td>
			<td>Surgical expendables</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin</td>
			<td>Nipro</td>
			<td>873334</td>
			<td>Anticoagulant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intravenous catheter (20G)</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>SR-OT2051C</td>
			<td>Surgical expendables</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Fujifilm</td>
			<td>095-06573</td>
			<td>Anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lidocaine hydrochloride</td>
			<td>MP Biomedicals</td>
			<td>193917</td>
			<td>Anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pentobarbital sodium</td>
			<td>Tokyo Chemical Industry</td>
			<td>P0776</td>
			<td>Anesthesia</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a rabbit venous interposition model mimicking revascularization surgery using vein grafts to assess intimal hyperplasia under arterial blood pressure

Embora enxertos venosos tenham sido comumente usados como enxertos autólogos em cirurgias de revascularização para doenças isquêmicas, a patência a longo prazo permanece pobre devido à aceleração da hiperplasia intimal devido à exposição à pressão arterial. O presente protocolo é projetado para o estabelecimento de hiperplasia intimal venosa experimental interpondo veias jugulares de coelho às artérias carótidas ipsilaterais. O protocolo não requer procedimentos cirúrgicos profundos no tronco do corpo e a extensão da incisão é limitada, o que é menos invasivo para os animais, permitindo a observação a longo prazo após a implantação. Este procedimento simples permite aos pesquisadores investigar estratégias para atenuar a progressão da hiperplasia intimal dos enxertos venosos implantados. Utilizando este protocolo, reportamos os efeitos da transdução de microRNA-145 (miR-145), que é conhecida por controlar o fenótipo das células musculares lisas vasculares (VSMCs) do estado proliferativo ao estado contrátil, em enxertos venosos colhidos. Confirmamos a atenuação da hiperplasia intimal dos enxertos venosos através da transdução de miR-145 antes da cirurgia de implantação através da mudança do fenótipo dos VSMCs. Aqui relatamos uma plataforma experimental menos invasiva para investigar as estratégias que podem ser usadas para atenuar a hiperplasia intimal de enxertos venosos em cirurgias de revascularização.

A Figura 1A mostra uma imagem representativa de hiperplasia intimal bem sucedida em 2 semanas após a cirurgia de interposição venosa (painel superior). O painel inferior mostra os efeitos terapêuticos de nanopartículas poli(ácido cogólico- lacótico-co-glicólico) microRNA-145 que atenuaram a hiperplasia intimal (painel inferior). A Figura 1B mostra a comparação da hiperplasia intimal entre o grupo controle utilizando os grupos de controle de solução ...

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A Rabbit Venous Interposition Model Mimicking Revascularization Surgery using Vein Grafts to Assess Intimal Hyperplasia under Arterial Blood Pressure

O presente protocolo visa criar experimentalmente hiperplasia intimal venosa submetendo veias à pressão arterial arterial para o desenvolvimento de estratégias para atenuar a hiperplasia intimal venosa após cirurgia de revascularização usando enxertos venosos.

Um modelo de interposição venosa de coelho imitando cirurgia de revascularização usando enxertos de veia para avaliar hiperplasia intimal sob pressão arterial

Although vein grafts have been commonly used as autologous grafts in revascularization surgeries for ischemic diseases, the long-term patency remains poor ...

Nosso protocolo fornece um modelo fácil, econômico, reprodutível e clínico relevante para pesquisadores no campo da hiperplasia intimal venosa. Nosso protocolo é economicamente, clinicamente e tecnicamente equilibrado. Portanto, é altamente recomendado para pesquisadores que desejam aplicar seus resultados in vitro a um ambiente in vivo.Acreditamos que nosso protocolo pode ser aplicado a um modelo animal maior para o desenvolvimento de novas estratégias de tratamento em doenças isquêmicas do coração e extremidades inferiores. Nosso protocolo é principalmente relevante para o campo da cirurgia cardiovascular. No entanto, também pode ser usado para lidar com alterações degenerativas nas fístulas arteriovenosas em pacientes com doença renal em estágio terminal.Após anestésico local, e administração analgésico de antibióticos profiláticos, desinfete o local cirúrgico com 10% de povidona-iodo. E faça uma incisão de 50 a 60 milímetros com um bisturi cirúrgico na região cervical do coelho branco japonês anestoetizado. Dissecar sem rodeios os tecidos subcutâneos e a fáscia para expor um segmento de 20 a 30 milímetros da veia jugular.E use suturas de seda 4-0 para ligar todos os ramos da veia exposta. Coloque uma sutura de seda 2-0 ao redor das veias jugulares internas e externas e faça uma incisão de um milímetro na parede venosa do lado distal da veia. Insira um cateter de balão 2-francês do corte em direção ao lado proximal da veia.E ligadurar a sutura de seda 2-0 nos locais distais das veias jugulares. Infle o balão com 200 microliters de ar. E use o balão para desnudar a intima da veia três vezes para esfoliação endotelial.Após a terceira passagem, liga a extremidade proximal da veia e corte a veia no local distal. Em seguida, insira um cateter intravenoso de 20 bitolas na veia colhida do distal para a direção proximal, e corte a veia no local proximal. Para interpor a artéria carótida com a veia jugular da colheita, exponha um segmento de 20 a 30 milímetros da artéria carótida ipsilateral.E separe a artéria cuidadosamente da veia e nervo próximos. Ligate todos os ramos da veia exposta com sutura de seda 4-0. E administre por via intravenosa 200 Unidades Internacionais por quilograma de sódio heparina.Fixar as extremidades proximal e distal da artéria com grampos de borracha cirúrgicos. E corte a artéria entre os grampos. Injete soro fisiológico normal na artéria carótida incisada proximicamente e distally para distend a artéria.E coloque a veia de colheita perto da artéria para anastomose o vaso de uma forma invertida de ponta a ponta. Para anastomose a extremidade proximal da veia até a extremidade distal da artéria, coloque dois pontos de âncora de 8-0 polipropileno no local e no local oposto. Adicione pontos na parte superior da linha de anastomose entre os pontos de âncora.Vire a artéria e o enxerto de veia de cabeça para baixo. E adicione pontos na parte restante da linha de anastomose. Em seguida, remova o cateter intravenoso da veia e fixe o enxerto venoso proximicamente.Declamp a artéria carótida distally. E observe se o enxerto venoso se expande gradualmente. Usando 8-0 polipropileno interrompeu suturas, anastomose a extremidade distal da veia até a extremidade proximal da artéria.E declamp a artéria para verificar o sangramento dos locais de anastomose. Por fim, liga a artéria carótida interna com uma sutura de seda 4-0 para simular uma condição de escoamento ruim e facilitar a hiperplasia intimal. Em seguida, limpe a ferida com soro fisiológico.Feche a incisão com 3-0 poliglactina 910 em camadas. E permitir que o coelho se recupere totalmente com o monitoramento antes de devolver o animal à sua gaiola. Nesta imagem representativa, pode-se observar uma hiperplasia intimal bem sucedida às 2 semanas após a cirurgia de interposição venosa.Aqui, podem ser observados os efeitos terapêuticos das nanopartículas poli(ácido clicíclico-coglicólico) carregadas na morfologia da hiperplasia intimal. De fato, o tratamento com microRNAs carregadas com nanopartículas poli (ácido láctico-coglicólico)resulta em atenuação significativa da hiperplasia intimal. Além disso, a imunostaining para Ki-67, um marcador proliferativo celular, revela menos células Ki-67 positivas dentro do grupo tratado microRNA-145 indicando uma alteração de fenótipo nas células musculares lisas vasculares do estado proliferativo imaturo para o estado contraítil maduro.O principal objetivo do nosso protocolo é alcançar a patência do enxerto implantado. Também é importante confirmar que o enxerto se expande após a declamagem da artéria carótida.

Research

JoVE Journal

Medicine

Microsurgical Venous Pouch Arterial-Bifurcation Aneurysms in the Rabbit Model: Technical Aspects

Microcirúrgica venoso Bolsa Bifurcação Arterial-aneurismas no Modelo de Coelho: Aspectos Técnicos

For ruptured human cerebral aneurysms endovascular embolization has become an equivalent alternative to aneurysm clipping.1 However, large clinical trials ...

Medicina

Electrolytic Inferior Vena Cava Model (EIM) of Venous Thrombosis

Electrolytic Inferior Vena Cava Model EIM of Venous Thrombosis

Eletrolítico Veia Cava Inferior Model (EIM) de trombose venosa

Animal models serve a vital role in deep venous thrombosis (DVT) research in order to study thrombus formation, thrombus resolution and to test potential ...

Femoral Arterial and Venous Catheterization for Blood Sampling, Drug Administration and Conscious Blood Pressure and Heart Rate Measurements

Cateterismo arterial e venoso femoral para coleta de sangue, Drug Administration e Pressão Arterial Consciente e Medidas de freqüência cardíaca

In multiple fields of study, access to the circulatory system in laboratory studies is necessary. Pharmacological studies in rats using chronically ...

Training a Sophisticated Microsurgical Technique: Interposition of External Jugular Vein Graft in the Common Carotid Artery in Rats

Treinar um técnica microcirúrgica sofisticado: Interposição de enxerto de veia jugular externa na artéria carótida comum em ratos

Neointimal hyperplasia is one the primary causes of stenosis in arterialized veins that are of great importance in arterial coronary bypass surgery, in ...

Adult Mouse Venous Hypertension Model: Common Carotid Artery to External Jugular Vein Anastomosis.

Adulto Rato venoso Hipertensão Modelo: artéria carótida comum para External Jugular Vein anastomose.

The understanding of the pathophysiology of brain arteriovenous malformations and arteriovenous fistulas has improved thanks to animal models. A rat model ...

Vein Interposition Model: A Suitable Model to Study Bypass Graft Patency

Veia Interposição Modelo: Um modelo adequado para estudar Bypass Graft Perviedade

Bypass grafting is an established treatment method for coronary artery disease. Graft patency continues to be the Achilles heel of saphenous vein grafts. ...

Using the Sleeve Technique in a Mouse Model of Aortic Transplantation - An Instructional Video

Usando a técnica de manga em um modelo do rato da transplantação da aorta - um vídeo instrutivo

Orthotopic aortic transplantation using the sleeve technique reduces injury to the aorta with failure rate of only 10-20%. The time to anastomose the ...

A Chronic Cardiac Ischemia Model in Swine Using an Ameroid Constrictor

Um modelo de isquemia cardíaca crônica em suínos, usando um Ameroid Constrictor

Cardiovascular disease remains the number one cause of mortality in the United States. There are numerous approaches to treating these diseases, but ...

A Rabbit Model of Durable Transgene Expression in Jugular Vein to Common Carotid Artery Interposition Grafts

Um modelo de coelho da expressão do Transgene durável na veia Jugular para enxertos de interposição da artéria carótida comum

Vein graft bypass surgery is a common treatment for occlusive arterial disease; however, long-term success is limited by graft failure due to thrombosis, ...

Murine Model of Central Venous Stenosis using Aortocaval Fistula with an Outflow Stenosis

Modelo murino de estenose venosa central usando fístula Aortocaval com estenose de saída

Central venous stenosis is an important entity contributing to arteriovenous fistula (AVF) failure. A murine AVF model was modified to create a partial ...