Name: retinal vascular reactivity as assessed by optical coherence tomography angiography
Uploaded: 2020-03-26T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Retinal Vascular Reactivity as Assessed by Optical Coherence Tomography Angiography at JoVE.com

Detta arbete stöddes av NIH K08EY027006, R01EY030564, UH3NS100614, Forskningsanslag från Carl Zeiss Meditec Inc (Dublin, CA) och Obegränsad avdelning finansiering från forskning för att förhindra blindhet (New York, NY).

Denna studie godkändes av University of Southern California Institutional Review Board och följde grundsatserna i Helsingforsdeklarationen.
1. Installation av apparater för gas ej återakande
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60948/60948fig1v2.jpg"> Figur 1: Diagram över apparater som inte återuppstår. Den fullständiga installationen har delats upp i tre separata enheter beroende på ...

Den metod som just beskrivits är det fullständiga protokollet för en gasandning provokation experiment som möjliggör mätning av ett försöksperson rvr i en kontrollerad miljö vid specifika tidpunkter utan ändringar i OCTA bildbehandling enhet och minimal obehag eller risk för ämnet. Denna inställning beskrivs på ett sätt som möjliggör enkla ändringar för att passa behoven hos forskaren. Den kan rymma ytterligare slangar för att passa olika klinikrum och vissa element såsom interna slangar eller armbå...

Den metaboliska efterfrågan på näthinnan är beroende av en tillräcklig och konstant tillförsel av syre som tillhandahålls av ett välreglerat system av arterioler, kapillärer och venules1. Flera studier har visat att funktionen av större kaliber mänskliga näthinnekärl kan bedömas in vivo med olikafysiologiska 2,,3,,4,,5 och farmakologiska6,7 stimuli. Dessutom är onormal funktion i detta kärlsystem vanligt vid retinal vaskulär sjukdomar såsom diabetesretinopati där retinal vaskulär reaktivitet (RVR) har visat sig vara försvagad även i dess tidigaste steg8,9 genom både gas provokation9 och flimrande ljus experiment5,,10,11. Retinal vaskulära riskfaktorer såsom rökning har också korrelerats med nedsatt RVR12 och näthinneblodflöde13. Dessa fynd är viktiga eftersom de kliniska symptomen på retinal kärlsjukdom förekommer relativt sent i sjukdomsprocessen och bevisade tidiga kliniska markörer för sjukdomen saknar14. Således kan bedöma RVR ge användbara åtgärder för vaskulär integritet för tidig bedömning av avvikelser som kan initiera eller förvärra retinal degenerativa sjukdomar.
Tidigare RVR-experiment har vanligtvis förlitat sig på enheter som en laser blodflödesmätare9 eller fundus kameror utrustade med speciella filter15 för retinal bild förvärv. Dessa tekniker är dock optimerade för fartyg med större diameter som arterioler16 och venules15, som inte är där gas, mikronäringsämnen och molekylärt utbyte förekommer. En nyare studie kunde kvantifiera RVR av kapillärer med hjälp av adaptiv optik imaging17, men trots den förbättrade rumsliga upplösningen, dessa bilder har en mindre fältstorlek och är inte FDA godkänt för klinisk användning18.
Den senaste tidens tillkomsten av optisk kohens tomografi angiografi (OCTA) har gett en FDA godkänd, noninvasive och dyeless angiographic metod för att bedöma kapillär nivå förändringar hos mänskliga patienter och försökspersoner in vivo. OCTA är allmänt accepterat i klinisk praxis som ett effektivt verktyg för att bedöma försämring i kapillärperfusion vid retinal vaskulär sjukdomar såsom diabetesretinopati19, retinal venous ocklusioner20, vaskulit21 och många andra22. OCTA ger därför ett utmärkt tillfälle för utvärdering av kapillär nivå förändringar, som kan ha betydande rumsliga och tidsmässiga heterogenitet23 samt patologiskt förändringar, i en klinisk miljö. Vår grupp visade nyligen att OCTA kan användas för att kvantifiera lyhördheten hos näthinnekärl på kapillärnivå2 till fysiologiska förändringar i inspirerat syre, vilket är en retinal vasokonstrictive stimulans16,,24, och koldioxid, vilket är en retinal vasodilaterande stimulans3,,5.
Målet med denna artikel är att beskriva ett protokoll som gör det möjligt för läsaren att bedöma retinal vaskulär reaktivitet av de mindre arteriolerna och kapillärbädden med OCTA. Metoderna är anpassade från de som presenteras i Lu et al.25 som beskrev mätningen av cerebrovaskulär reaktivitet med magnetisk resonanstomografi. Även om de nuvarande metoderna har utvecklats och använts under OCTA imaging2,är de tillämpliga på andra retinal imaging enheter med relativt enkla och uppenbara ändringar.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>5% CO2 gas [5% CO2, 21% O2, 74% N2] (Compressed)</td>
			<td>Institution Dependent (Praxair)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bacdown Disinfectant Detergent</td>
			<td>Decon Labs</td>
			<td>8001</td>
			<td>https://deconlabs.com/products/disinfectant-bdd/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clean-Bor Tubes (35 mm Inner Diameter)</td>
			<td>Vacumed</td>
			<td>1011-108</td>
			<td>http://www.vacumed.com/zcom/product/Product.do?compid=27&#38;skuid=1197</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cuff adapter for Douglas bag filling</td>
			<td>Vacumed</td>
			<td>22254</td>
			<td>http://www.vacumed.com/zcom/product/Product.do?compid=27&#38;prodid=343</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Douglas bag (200-liter capacity)</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>500942</td>
			<td>https://www.harvardapparatus.com/douglas-bag.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Elbow Joint (Inner Diameter 19mm/ Outer Diameter 22 mm), Modified in House</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fingertip Pulse Oximeter (Pro-Series)</td>
			<td>CMS</td>
			<td>CMS 500DL</td>
			<td>https://www.walmart.com/ip/Pro-Series-CMS-500DL-Fingertip-Pulse-Oximeter-Blood-Oxygen-Saturation-Monitor-with-silicon-cover-batteries-and-lanyard/479049154</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gas Delivery Tube (22 mm Inner Diameter) Modified in House</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gas filling tube (1/8&#34; for compressed gas)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrogen Peroxide Cleaner Disinfectant Wipes</td>
			<td>Clorox Healthcare</td>
			<td>30824</td>
			<td>https://www.cloroxpro.com/products/clorox-healthcare/hydrogen-peroxide-cleaner-disinfectants/?gclid=EAIaIQobChMIk-KG4vi15QIVcRh9Ch0NNwLPEAAYASAAEgJIa_D_BwE&#38;gclsrc=aw.ds</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lubricant Eye Drops</td>
			<td>Refresh</td>
			<td>Refresh Plus</td>
			<td>https://www.refreshbrand.com/Products/refresh-plus</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Manual Directional Control Valves: Three-Way T-Shape Stopcock Type (Inner Diameter 28.6 mm, Outer Diameter 35 mm)</td>
			<td>Hans Rudolph</td>
			<td>2100C Series</td>
			<td>www.rudolphkc.com</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical O2 (Compressed)</td>
			<td>Institution Dependent</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouth piece (Silicone, Model #9061)</td>
			<td>Hans Rudolph</td>
			<td>602076</td>
			<td>www.rudolphkc.com</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OCTA Imaging Device (PLEX Elite 9000)</td>
			<td>Carl Zeiss Meditec, Dublin, CA, USA</td>
			<td></td>
			<td>https://www.zeiss.com/meditec/int/product-portfolio/optical-coherence-tomography-devices/plex-elite-9000-swept-source-oct.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenylephrine Hydrochloride Ophthalmic Solution, USP 2.5%</td>
			<td>Paragon Bioteck, Inc</td>
			<td>NDC 42702-102-15</td>
			<td>https://paragonbioteck.com/products/diagnostics/phenylephrine-hydrochloride-ophthalmic-solution-usp-2-5/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic Nose Clip Sterile Foam CS100</td>
			<td>Sklar Sterile</td>
			<td>96-2951</td>
			<td>https://www.sklarcorp.com/disposables/plastic/plastic-nose-clip-sterile-foam-box-of-100.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Proparacaine Hydrochloride Ophthalmic Solution, USP .5%</td>
			<td>Bausch + Lomb</td>
			<td>NDC 24208-730-06</td>
			<td>https://www.bausch.com/ecp/our-products/rx-pharmaceuticals/generics</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Regulator (tank dependent- 5% CO2: Fisherbrand Mulitstage Gas Cylinder Regulators)</td>
			<td>Genstar Technologies Company</td>
			<td>10575150</td>
			<td>https://www.fishersci.com/shop/products/fisherbrand-multistage-cylinder-regulators-22/10575150?keyword=true</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Regulator (tank dependent- Oxygen: Fisherbrand Multistage Gas Cylinder Regulators)</td>
			<td>Genstar Technologies Company</td>
			<td>10575145</td>
			<td>https://www.fishersci.com/shop/products/fisherbrand-multistage-cylinder-regulators-22/10575145?keyword=true</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rubber Tubing (Inner diameter 19 mm, Outer diameter 27 mm), Made in House</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sealing tape- Parafilm Wrap (2&#34; Wide)</td>
			<td>Cole Parmer</td>
			<td>PM992</td>
			<td>https://www.coleparmer.com/i/parafilm-pm992-wrap-2-wide-250-ft-roll/0672050?PubID=VV&#38;persist=True&#38;ip=no&#38;gclid=EAIaIQobChMInY3vqomz5QIVfyCtBh1VSg64EAAYASAAEgJ9n_D_BwE</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Alcohol Prep Pads</td>
			<td>Medline</td>
			<td>MDS090670</td>
			<td>https://www.medline.com/product/Sterile-Alcohol-Prep-Pads/Swab-Pads/Z05-PF03816</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tropicamide Ophthalmic Solution, USP 1%</td>
			<td>Akorn</td>
			<td>NDC 17478-102-12</td>
			<td>http://www.akorn.com/prod_detail.php?ndc=17478-102-12</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tubing Adapter, Made in House</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Two-way non-rebreathing valve (2600 Series- Inner Diameter 28.6 mm, Outer Diameter 35 mm)</td>
			<td>Hans Rudolph</td>
			<td>2600 Series, UM-112078</td>
			<td>www.rudolphkc.com</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

retinal vascular reactivity as assessed by optical coherence tomography angiography

Den vaskulära tillförseln till näthinnan har visat sig dynamiskt anpassa sig genom vasoconstriction och vasodilatation för att tillgodose de metaboliska kraven i näthinnan. Denna process, kallad retinal vaskulär reaktivitet (RVR), medieras av neurovaskulär koppling, som är nedsatt mycket tidigt i retinal vaskulära sjukdomar såsom diabetesretinopati. Därför kan en kliniskt genomförbar metod för bedömning av vaskulär funktion vara av betydande intresse för både forskning och kliniska inställningar. Nyligen har in vivo imaging av retinal vasculature på kapillärnivå möjliggjorts av FDA godkännande av optisk koherens tomografi angiografi (OCTA), en noninvasive, minimal risk och dyeless angiografi metod med kapillär nivå upplösning. Samtidigt har fysiologiska och patologiska förändringar i RVR visats av flera utredare. Den metod som visas i detta manuskript är utformad för att undersöka RVR med OCTA utan behov av ändringar av de kliniska avbildningsprocedurerna eller enheten. Det visar realtid bildbehandling av näthinnan och retinal vasculature under exponering för hypercapnic eller hyperoxic villkor. Tentamen utförs enkelt med två anställda på under 30 min med minimalt ämnesbehedning eller risk. Denna metod kan anpassas till andra oftalmiska bildåtergivningsenheter och användningsområdena kan variera beroende på gasblandningens och patientpopulationens sammansättning. En styrka av denna metod är att det möjliggör en undersökning av retinal vaskulär funktion på kapillärnivå hos försökspersoner in vivo. Begränsningar av denna metod är till stor del de octa och andra retinal imaging metoder inklusive imaging artefakter och ett begränsat dynamiskt omfång. De resultat som erhålls från metoden är OCT och OCTA bilder av näthinnan. Dessa bilder är mottagliga för alla analyser som är möjliga på kommersiellt tillgängliga OCT eller OCTA-enheter. Den allmänna metoden kan dock anpassas till alla former av oftalmisk avbildning.

Utgången från detta experiment består av de manuella avläsningarna från pulsoximetern, den tidpunkt som anges för gasexponering eller OCTA-skanning och de råa OCTA-bilddata. En OCTA-bild består av OCT B-skanningar och dekorrelationssignalen som är associerad med varje B-skanning. Dataparametrarna anges av enhetens specifikationer. En svept källa laserplattform OCTA maskin med en central våglängd på 1040-1060 nm användes. Bilderna ger en tvärgående upplösning på 20 μm och optisk axiell upplösning på 6...

Watch this Scientific Journal Video about Retinal Vascular Reactivity as Assessed by Optical Coherence Tomography Angiography at JoVE.com

Retinal Vascular Reactivity as Assessed by Optical Coherence Tomography Angiography

Denna artikel beskriver en metod för att mäta retinal vasculature reaktivitet in vivo med försökspersoner med hjälp av en gas andning provokation teknik för att leverera vasoactive stimuli samtidigt förvärva retinal bilder.

Retinal Vaskulär reaktivitet som bedöms av optisk koherens Tomography Angiography

The vascular supply to the retina has been shown to dynamically adapt through vasoconstriction and vasodilation to accommodate the metabolic demands of ...

ROCTA-baserad bedömning av retinal Vaskulär reaktivitet kommer att göra det möjligt för forskare och kliniker att undersöka retinal vaskulär funktion på kapillärnivå på ett noninvasive och säkert sätt. Eftersom OCTA är en FDA-godkänd bildbehandling modalitet, vår teknik kan vara tillämplig i framtida kliniska prövningar som en slutpunkt mått på retinal kapillär funktion. Ett ämnes retinal versicular reaktivitet återspeglar sannolikt deras retinal vaskulär integritet innan kliniskt synliga tecken på skador är uppenbara, och ger därför en tidig bedömning av retinal vaskulär patologi.Gasen leverans apparaten kan enkelt anpassas till de flesta typer av oftalmisk bildbehandling enheter och används i ett brett spektrum av samtyckande vuxna, ämne populationer, och näthinnans kärlsjukdomar. Visar förfarandet med Dr.Ashimatey kommer att Elizabeth Corona, ett labb oftalmisk service specialist, och Sam Kushner-Lenhoff, en läkarstudent i mitt laboratorium. För att montera apparaten, använd först en adapter för att ansluta Douglas-påsen till det rena borrröret.Anslut sedan det rena borrröret till trevägsventilen vid den trevägsventilens selektiva inloppsport. Denna kombination kommer att kallas luftstyrenheten. Därefter använder en lämplig adapter för att passa en in-house gummirör i munnen porten av nonrebreathing ventil.För in armbågsleden i den andra änden av slangen. Anslut armbågsfogen till gasleveransslangen. Denna inställning kommer att kallas nonrebreathing unit.Använd in-house gummislang i lämpliga adaptrar för att ansluta luftstyrenheten vid trevägsventilens utloppsport till nonrebreathing-enheten vid inloppsporten på den tvåvägs nonrebreathing ventilen. Nu, wrap tätning band runt eventuella lösa anslutningar i gasen nonrebreathing apparaten för att säkerställa en hermetiska passform. Slutför uppställningen genom att ansluta den öppna änden av gasleveransslangen till ett sterilt munstycke.Hela gasleveransuppställningen kan ses här. Innan experimentet påbörjas, desinficera OCTA-huvudet och hakan vilar med en spritsudd. Placera en pulsoximeter på motivets finger och börja övervaka syremättnadsnivåerna och pulsen.Justera höjden på OCTA-uppställningen så att motivet lätt kan vila hakan på hakans vila utan att överanstränga eller böja nacken. Seunda gasen leveransrör med munstycket fastsättning genom huvudet och hakan vila, med munstycket mot motivet. Sätt in munstycket i försökspersonens mun och uppmuntra ämnet att öva andning genom nonrebreathing setup för att uppnå förtrogenhet med apparaten.Instruera motivet att ta djupa andetag för att underlätta gasutbyte och placera näsklämman på motivet för att säkerställa att de andas genom munstycket. Växla trevägsventilen till lämplig kanal vid behov. Ett rumsluftstyrningsbastest utförs här, så ventilen förblir i konfiguration två.Och notera tiden som början på en gasinandning. Noggrant tid början av bilden förvärvet, som bilder som erhållits före en minut av gasexponering kanske inte har haft tillräckligt med tid för att återspegla den nya gas provokation skick. Har motivet placera hakan på sidan av hakan resten mittemot ögat avbildas och flytta huvudet framåt tills pannan är i stadig kontakt med huvudstödet.Med motivet vänd framåt och fixering på målet i mitten av sin uppfattning, centrera skanningen observerats i iris syn på live-bilden och använda vänster och höger pilar för att flytta hakan vila tills iris kommer i fokus. Efter att ha bekräftat att földdoppen är centrerad i OTC-skanningen, skaffa en bild. Skanningen kommer vanligtvis att pågå i flera sekunder.Visa OCTA-bilden efter genomsökningens slutförande för att bekräfta att den har en tillräcklig kvalitet och välj Spara, eller skanna om ögat på lämpligt sätt. När inga fler skanningar av ögat med denna gasblandning behövs, låt motivet luta sig tillbaka från maskinen och ta bort nosklämman och munstycket. Medan motivet tar en paus, fyll Douglas påse med önskad luftblandning och sedan ställa trevägsventilen till konfiguration två.Upprepa proceduren som just visat, men kom ihåg att vrida trevägsventilen vid lämplig tidpunkt. När alla bilder har förvärvats, kasta disponibel delar av installationen och använda en alkohol svabb för att torka av huvudet och hakan vila. Torka av ämnesstolen, OCTA-bordet och OCTA-handtagen med en desinfektionstork för att avlägsna eventuellt vandrande saliv och koppla bort inställningen i dess baskomponenter.För att tömma Douglas väska, rulla påsen från den distala änden mot inloppshamnen ansluten till trevägsventilen och förvara påsen på en lämplig plats för framtida hämtning. Fyll därefter en behållare som är tillräckligt stor för att dränka gasleveransslangen med ett lämpligt utspädda och välblandat rengöringsmedelsdeficerande medel och blötlägg den tvåvägsfria andningsventilen, armbågsleden, in-house gummislangar och slangadaptrar i desinfektionsbadet. Efter minst 10 minuter, skölj noggrant alla material med vatten och lufttorka dem på en pappershandduk på en ren bänkskiva.Lägg sedan alla de torkade delarna i lager till nästa analys. Horisontella B-skanningar observeras ofta på OCTA-enheten. När korrekt justeras och ses som en 2-D in-face-bild, dessa B-skanningar kommer att utgöra en OCTA angiogram.Octa-angiogrammet är det som exporteras från enheten och används för bildanalys. För att kvantifiera dessa data på ett sätt som möjliggör jämförelser mellan försökspersoner och mellan olika förhållanden kan ett mått som kärlskeletttätheten beräknas från en skelettiserad OCTA-bild. En värmekarta över dessa skeletterade bilder kan sedan användas för att kvalitativt visa förändringen i fartygets densitet.Det är viktigt att förklara förfarandet grundligt för ämnet. Låt dem öva på att andas genom testapparaten så att de kan ställa några frågor om det behövs. Alla retinal eller okulär bildbehandling förfarande kan lätt anpassas för att möjliggöra retinal vaskulär reaktivitet mätningar som vår.Denna metod kan också tillämpas på någon sjukdomsprocess som kan påverka vaskulär funktion i ögat. Övervaka motivet och deras vitala tecken noga och stoppa experimentet om du har några problem eller observera några tecken på nöd.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

An Isolated Retinal Preparation to Record Light Response from Genetically Labeled Retinal Ganglion Cells

En isolerad näthinnan förberedelse till Record Ljus Svar från Genetiskt Märkta Retinal ganglion celler

The first steps in vertebrate vision take place when light stimulates the rod and cone photoreceptors of the retina 1.  This information is then ...

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

Transfektion av Mouse retinal ganglion celler genom att In vivo Elektroporation

The targeting and refinement of RGC projections to the midbrain is a popular and powerful model system for studying how precise patterns of neural ...

Thinned-skull Cortical Window Technique for In Vivo Optical Coherence Tomography Imaging

Thinned-skull Cortical Window Technique for In Vivo Optical Coherence Tomography Imaging

Förtunnas-skalle Kortikal fönster Teknik för<em&gt; In Vivo</em&gt; Optisk koherens tomografi Imaging

Optical coherence tomography (OCT) is a biomedical imaging technique  with high spatial-temporal resolution. With its minimally invasive approach OCT  has ...

Micron-scale Resolution Optical Tomography of Entire Mouse Brains with Confocal Light Sheet Microscopy

Micron-skala Upplösning Optisk Tomography för hela musen hjärnor med Confocal Ljus Sheet mikroskopi

Understanding the architecture of mammalian  brain at single-cell resolution is one of the key issues of neuroscience.  However, mapping neuronal soma and ...

Monitoring Astrocyte Reactivity and Proliferation in Vitro Under Ischemic-Like Conditions

Monitoring Astrocyte Reactivity and Proliferation in Vitro Under Ischemic-Like Conditions

Övervakning Astrocyten reaktivitet och spridning in Vitro ischemisk-liknande villkor

Ischemic stroke is a complex brain injury caused by a thrombus or embolus obstructing blood flow to parts of the brain. This leads to deprivation of ...

A Protocol for Measuring Cue Reactivity in a Rat Model of Cocaine Use Disorder

Ett protokoll för mätning av Cue reaktivitet i en råtta modell av kokain användning sjukdom

Cocaine use disorder (CUD) follows a trajectory of repetitive self-administration during which previously neutral stimuli gain incentive value. Cue ...

Optical Coherence Tomography: Imaging Mouse Retinal Ganglion Cells In Vivo

Optical Coherence Tomography: Imaging Mouse Retinal Ganglion Cells In Vivo

Optisk koherenstomografi: Imaging mus Retinal Ganglion celler In Vivo

Structural changes in the retina are common manifestations of ophthalmic diseases. Optical coherence tomography (OCT) enables their identification in ...

Using Optical Coherence Tomography and Optokinetic Response As Structural and Functional Visual System Readouts in Mice and Rats

Med optisk koherenstomografi och Optokinetic svar som strukturella och funktionella visuella systemet avläsning på möss och råttor

Optical coherence tomography (OCT) is a fast, non-invasive, interferometric technique allowing high-resolution retinal imaging. It is an ideal tool for ...

Coculture of Axotomized Rat Retinal Ganglion Neurons with Olfactory Ensheathing Glia, as an In Vitro Model of Adult Axonal Regeneration

Kokultur av axotomerade rått retinal ganglion nervceller med lukt ensheathing Glia, som en in vitro modell av vuxna axonal regenerering

Olfactory ensheathing glia (OEG) cells are localized all the way from the olfactory mucosa to and into the olfactory nerve layer (ONL) of the olfactory ...