Name: sucrose preference and novelty-induced hypophagia tests in rats using an automated food intake monitoring system
Uploaded: 2020-05-08T13:00:00
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Este trabajo fue apoyado por la financiación de la Fundación Alemana de Investigación (STE 1765/3-2) y Charité University Funding (UFF 89/441-176, A.S.).

El cuidado de los animales y los procedimientos experimentales siguieron las directrices específicas de ética institucional y fueron aprobados por la autoridad estatal para la investigación animal.
1. Funcionamiento del sistema de monitoreo automatizado
NOTA: Al utilizar el sistema de monitoreo automatizado, es crucial documentar cada acción en el cuadro de comentarios incluido en el software inmediatamente antes de la acción. La descripción se debe escribir en ...

<ol>
	<li>. Depression Available from: <a target="_blank" href="https://www.who.int/health-topics/depression">https://www.who.int/health-topics/depression</a> (2018)</li><li>Reddy, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Depression:+the+disorder+and+the+burden.">Depression: the disorder and the burden.</a> Indian Journal of Psychological Medicine. 32 (1), 1-2 (2010).</li><li>Cryan, J. F., Mombereau, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+search+of+a+depressed+mouse:+utility+of+models+for+studying+depression-related+behavior+in+genetically+modified+mice.">In search of a depressed mouse: utility of models for studying depression-related behavior in genetically modified mice.</a> Molecular Psychiatry. 9 (4), 326-357 (2004).</li><li>Overstreet, D. 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F., Mombereau, C., Vassout, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+tail+suspension+test+as+a+model+for+assessing+antidepressant+activity:+review+of+pharmacological+and+genetic+studies+in+mice.">The tail suspension test as a model for assessing antidepressant activity: review of pharmacological and genetic studies in mice.</a> Neuroscience and Biobehavioral Review. 29 (4-5), 571-625 (2005).</li><li>Can, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+tail+suspension+test.">The tail suspension test.</a> Journal of Visualized Experiments. (59), e3769 (2012).</li><li>Chadman, K. K., Yang, M., Crawley, J. 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La preferencia de sacarosa y las pruebas de hipofagia inducidas por la novedad son dos técnicas establecidas para evaluar la anhedonia en ratas. Su combinación con el sistema automatizado de monitoreo de la ingesta de alimentos permite un análisis más detallado en ratas sin perturbaciones y reduce la medición errónea.
La incidencia de errores se ve reducida por diferentes enfoques. En primer lugar, para solucionar el error que se produce debido a derrames, el espacio entre la tolva de al...

En promedio, el 4,4% de la población mundial está afectada por la depresión. Estos representan 322 millones de personas en todo el mundo, un 18% más en comparación con hace diez años1. Según estimaciones de la Organización Mundial de la Salud, la depresión será la segunda en el ranking de Años de Vida Ajustados por Discapacidad en 20202. Para abordar la creciente prevalencia de trastornos afectivos y establecer nuevas estrategias de intervención, es necesario seguir estudiando este comportamiento. Antes y además del examen en humanos, son necesarios estudios en animales.
Se han establecido varios modelos para estudiar los componentes del comportamiento depresivo (es decir, prueba de natación forzada, prueba de suspensión de cola, prueba de preferencia de sacarosa e hipofagia inducida por la novedad)3,4. La prueba de preferencia de sacarosa (SPT) y la hipofagia inducida por la novedad (NIH) pueden detectar un comportamiento similar a la depresión en animales. Estas pruebas en sí mismas no inducen un estado de depresión en los roedores, pero representan cambios agudos en el comportamiento. Tanto el SPT como el NIH evalúan un rasgo característico de la depresión conocido como anhedonia, que es la pérdida de interés en lo siguiente: actividades gratificantes, actividades que alguna vez fueron disfrutadas por el individuo5,y un aspecto del complejo fenómeno de procesamiento y responder a la recompensa6. Ambas pruebas estudian la respuesta a un estímulo gratificante en forma de alimentos agradables. El grado de consumo sirve como parámetro suplente para la anhedonia7,8,9.
El valor de los ensayos que investigan la anhedonia depende en gran medida de la determinación precisa del consumo resultante de la medición precisa del peso de la sustancia. Convencionalmente, esta medición se realiza manualmente una vez antes y una vez después de la prueba. Sin embargo, esto es propenso a mediciones erróneas por varias razones. Primero, los roedores tienden a acumular alimentos, lo que significa que retiran los alimentos sin consumirlos inmediatamente y luego los esconden en un lugar seguro. Por lo tanto, esta pérdida de alimentos puede incluirse en el cálculo del consumo total. En segundo lugar, las ratas derraman alimentos y agua, lo que resulta en pérdida de peso sin consumo respectivo. En tercer lugar, la pérdida involuntaria de líquido se produce debido a la manipulación de las botellas mediante la inserción y remoción de las jaulas.
En un enfoque para reducir estas fuentes de error, combinamos las dos pruebas comunes que evalúan la anhedonia (SPT3,4 y NIH9)con la medición de la ingesta de alimentos y agua utilizando un sistema automatizado de monitoreo de la ingesta de alimentos y líquidos. Este procedimiento permite una investigación precisa del consumo de sustancias agradables, así como proporciona información sobre la experiencia del placer en ratas como una característica de comportamiento similar a la depresión. Los errores mencionados anteriormente asociados con la medición manual se reducen mediante el uso de diferentes enfoques, que se ilustran más adelante con más detalle.
Para proporcionar información sobre la microestructura, el sistema automatizado de monitorización de la ingesta utilizado en este protocolo10 pesa los alimentos (±0,01 g) cada segundo. Por lo tanto, un peso estable se documenta como "no comer", y un peso inestable como "comer". Un "combate" se define como un cambio en el peso estable antes y después de un evento. Una comida consiste en uno o más combates y su tamaño mínimo en ratas se definió como 0.01 g. Una comida se separa de otra comida en ratas por 15 min (valor estandarizado). Por lo tanto, la ingesta de alimentos se considera una comida cuando los episodios ocurrieron dentro de 15 min y el cambio de peso es igual o mayor que 0.01 g. Los parámetros de las comidas evaluados en este protocolo incluyen la duración de la comida, el tiempo dedicado a las comidas, el tamaño de la pelea, la duración de la pelea, el tiempo dedicado a los combates, la latencia al primer combate y el número de combates.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Assembly LH Cage Mount - RAT-FOOD - includes Stainless cage mount, hopper, blocker, coupling</td>
			<td>Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA</td>
			<td>BCMPRF01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Assembly LH Cage Mount unplugged - RAT - FOOD includes stainless steel cage mount, hopper, blocker, unplugged adapter, coupling</td>
			<td>Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA</td>
			<td>BCMUPRF01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cage w/ 2 openings - RAT - costum modified cage - includes cage top and standard water bottle</td>
			<td>Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA</td>
			<td>BCR02</td>
			<td>single housing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Data collection Laptop Windows - Configured w/ BioDAQ Software</td>
			<td>Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA</td>
			<td>BLT003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>enrichment (plastic tubes, gnawing wood)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>distributed by the animal facility</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HoneyMaid Graham Cracker Crumbs</td>
			<td>Nabisco, East Hanover, NJ, USA</td>
			<td>ASIN: B01COWTA98</td>
			<td>palatable snack for NIH test</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>low vibration polymer rack</td>
			<td>Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA</td>
			<td>BRACKR</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>male Sprague Dawley rats</td>
			<td>Envigo</td>
			<td>Order Code: 002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Model #2210 32x Port BioDAQ Central Controller - includes cables, and calibration kit</td>
			<td>Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA</td>
			<td>BCC32_03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peripheral sensor Controller - includes cable</td>
			<td>Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA</td>
			<td>BPSC01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SigmaStat 3.1</td>
			<td>Systat Software, San Jose, CA, USA</td>
			<td></td>
			<td>statistical analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless steel blocker</td>
			<td>Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA</td>
			<td>BBLKR</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>standard rodent diet with 10 kcal% fat</td>
			<td>Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA</td>
			<td>D12450B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sucrose powder</td>
			<td>Roth</td>
			<td>4621.1</td>
			<td>for SPT</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

sucrose preference and novelty-induced hypophagia tests in rats using an automated food intake monitoring system

La prevalencia y la incidencia de trastornos depresivos están aumentando en todo el mundo, afectando a unos 322 millones de individuos, subrayando la necesidad de estudios conductuales en modelos animales. En este protocolo, para estudiar el comportamiento anhedónico y similar a la depresión en ratas, la preferencia de sacarosa establecida y las pruebas de hipofagia inducidas por la novedad se combinan con un sistema automatizado de monitoreo de la ingesta de alimentos y líquidos. Antes de las pruebas, en el paradigma de preferencia de sacarosa, las ratas macho se entrenan durante al menos 2 días para consumir una solución de sacarosa además del agua del grifo. Durante el examen, las ratas se exponen de nuevo al agua y a la solución de sacarosa. El sistema automatizado registra el consumo cada segundo. La relación entre sacarosa y la ingesta total de agua (relación de preferencia de sacarosa) es un parámetro suplente de la anhedonia. En la prueba de hipofagia inducida por la novedad, las ratas macho pasan por un período de entrenamiento en el que están expuestas a un aperitivo apetecible. Durante el entrenamiento, los roedores muestran una ingesta estable de refrigerios basales. El día de la prueba, los animales son transferidos de jaulas caseras a una jaula fresca y vacía que representa un nuevo entorno desconocido con acceso a la conocida tentempié apetecible. El sistema automatizado registra la ingesta total y su microestructura subyacente (por ejemplo, latencia para acercarse a la merienda), proporcionando información sobre los comportamientos anhedónicos y ansiosos. La combinación de estos paradigmas con un sistema de medición automatizado proporciona información más detallada, junto con una mayor precisión al reducir los errores de medición. Sin embargo, las pruebas utilizan parámetros suplentes y solo representan la depresión y la anhedonia de manera indirecta.

Para probar la distribución de datos, se utilizó la prueba Kolmogorov-Smirnov. Se utilizaron pruebas T cuando los datos se distribuyeron normalmente y se utilizó la prueba Mann-Whitney-U, si no. ANOVA unidireccional seguido de la prueba post-hoc de Tukey se utilizó para la comparación de varios grupos normalmente distribuida. ANOVA unidireccional seguido de la prueba de comparación múltiple de Dunn se utilizó en casos de distribución no normal. Las diferencias entre grupos se consideraron significativas cuando <...

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Sucrose Preference and Novelty-Induced Hypophagia Tests in Rats using an Automated Food Intake Monitoring System

Aquí se presenta un protocolo para estudiar el comportamiento anhedónico y similar a la depresión en ratas. Combina dos métodos de comportamiento bien establecidos, la preferencia de sacarosa y las pruebas de hipofagia inducidas por la novedad, con un sistema automatizado de monitoreo de ingesta de alimentos y líquidos, para investigar indirectamente el comportamiento de los roedores utilizando parámetros suplentes.

Pruebas de hipofagia inducida por la sacarosa y la novedad en ratas utilizando un sistema automatizado de monitoreo de la ingesta de alimentos

The prevalence and incidence of depressive disorders are rising worldwide, affecting about 322 million individuals, underlining the need for behavioral ...

Las pruebas de hipofagia inducidas por la sacarosa y la novedad son técnicas establecidas para evaluar la anhedonia. Su combinación con el sistema automatizado de monitorización de la ingesta, permite un análisis detallado con alta precisión. Este protocolo reduce la incidencia de errores, integrando derrames en el análisis de datos evitando el harding y reduciendo la pérdida involuntaria de fluidos.Además, el protocolo permite evaluar la microestructura de admisión. Esta técnica tiene como objetivo satisfacer la necesidad de pruebas válidas, detectando anhedonia en roedores. Considerando la creciente prevalencia de trastornos depresivos.También se puede utilizar para estudiar los efectos antidepresivos de los medicamentos. Cuando se utiliza el Sistema Automatizado de Monitoreo de Admisión, es importante recordar, que necesita ser mantenido y limpiado correctamente sobre una base diaria, con el fin de proporcionar datos precisos. Para llevar a cabo el entrenamiento, cierre todas las puertas y retire el recipiente de alimentos y la botella de agua, de las microbalanzas.Coloque los alimentos prepesados en la parte superior de la jaula y documente su peso diariamente. Llene una botella de agua limpia con unos 100 mililitros de agua y colóquela de nuevo en la tolva. Llene una segunda botella con 100 mililitros de solución de sacarosa 1% recién hecha y colóquela en la tolva.Asegúrese de marcar las botellas y documentar sus ubicaciones. Documente el inicio de la capacitación en el sistema de monitoreo y abra todas las puertas. Deje las puertas abiertas durante 24 horas, lo que resulta en ad libido máximo a ambas botellas.A continuación, documente el final del entrenamiento y cierre las puertas. Prepare la solución de sacarosa fresca todos los días y asegúrese de limpiar y rellenar las botellas cada 24 horas. Cambiar la posición de las botellas para evitar la habituación.Llevar a cabo el entrenamiento durante al menos 48 horas. Sólo proceder con las pruebas, Cuando las relaciones de preferencia de sacarosa alcanzan aproximadamente uno. 24 horas antes de la prueba, retire el frasco con la solución de sacarosa, de modo que la rata tenga acceso a la comida estándar y al agua solamente.Antes de la prueba, prepare una botella fresca llena de agua del grifo y otra llena de 1% de sacarosa. Cierren todas las puertas. Retire el recipiente de alimentos de la tolva y reemplácelo con las botellas preparadas de agua y sacarosa.A continuación, documente el inicio de la prueba en el sistema de monitoreo y abra todas las puertas. Deja las puertas abiertas durante 60 minutos. A continuación, documente el final de la prueba y ciérrelas.Para prepararse para el período de entrenamiento, cierre todas las puertas y retire la tolva con la comida estándar. Llene una tolva fresca con un aperitivo agradable, insertando las galletas cuidadosamente para evitar que se desmorone. A continuación, coloque la tolva en el soporte de la jaula en la parte superior del microbalance.Documentar el inicio del entrenamiento en el sistema de monitoreo y abrir las puertas durante 30 minutos para que la rata tenga ad libitum máximos a la merienda y el agua. Después de 30 minutos, documente el final del entrenamiento y cierre las puertas. A continuación, reemplace la merienda por la comida estándar.Repita el entrenamiento diariamente hasta que se logre una línea de base estable de la ingesta de refrigerios agradables y no difiera estadísticamente entre los días de entrenamiento. Cuando esté listo para realizar la prueba, prepare una jaula recién limpiada vacía sin ropa de cama ni enriquecimiento y adjúntela al sistema automatizado de monitoreo de la ingesta de alimentos. Coloque una tolva con una botella de agua del grifo y una tolva con un aperitivo agradable en los soportes de la jaula.Retire la rata de la jaula de casa y colóquela en la jaula novedosa. Abre las puertas durante 30 minutos. Asegúrese de documentar el inicio y el final de las pruebas.Cuando haya terminado, vuelva a colocar la rata en su jaula de origen. Una prueba de preferencia de sacarosa administrada a ocho ratas, mostró un aumento en el consumo de sacarosa y una disminución en la ingesta de agua durante el período de prueba. La relación de preferencias de sacarosa aumentó de un promedio de 0,8 en el primer día a 0,99 en el segundo día.La microestructura de la ingesta de sacarosa se evaluó automáticamente utilizando el sistema de monitoreo. El tamaño de la comida, la duración de la comida, el número de comidas y otros nueve parámetros se midieron automáticamente. Para demostrar las ventajas de utilizar el Sistema Automatizado de Monitoreo de Admisiones, se compararon las mediciones automatizadas con las obtenidas, utilizando evaluaciones manuales convencionales.Todas las mediciones eran diferentes entre grupos. Posiblemente debido a mediciones o derrames erróneamente altos cuando se evalúan manualmente. Durante el período de entrenamiento para la prueba de hipofagia inducida por la novedad, la ingesta general de los aperitivos apetecibles aumentó constantemente, lo que indica una adaptación durante los dos primeros a tres días.Del mismo modo, el tamaño de la comida tendía hacia un aumento entre los días de entrenamiento, mientras que la duración de la comida no. El día de la prueba, las ratas ingenuas expuestas a la merienda y un ambiente novedoso, mostraron una ingesta apetecible de alrededor de un gramo. También se evaluaron automáticamente otros parámetros de la microestructura de la ingesta de alimentos, como la duración de las comidas, el tiempo dedicado a las comidas y la latencia hasta la primera pelea.Al realizar este protocolo, documente todos los procedimientos, en una sección común del software de monitoreo, para ahorrar el tiempo del principio y el final de cada sesión. Documente siempre qué sustancia se coloca en qué equilibrio. Dado que este método no está asociado con el estrés, la tarea se puede repetir después de un tiempo adecuado de entrenamiento entre las pruebas.Después de establecer esta técnica se utilizó para explorar características anedónicas, de diferentes Neuropéptidos y animales inalterados, ampliando el conocimiento de sus funciones.

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