Name: an immunological model for heterotopic heart and cardiac muscle cell transplantation in rats
Uploaded: 2020-05-08T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An Immunological Model for Heterotopic Heart and Cardiac Muscle Cell Transplantation in Rats at JoVE.com

نريد أن نشكر بريتا تراوتفيغ وكورينا لوببرت وإنغريد ميدر على التزامهم.

وقد أجريت جميع التجارب على الحيوانات وفقا للمبادئ التوجيهية للمجلس المحلي لاستعراض الحيوانات الأخلاقية التابع للسلطات الإقليمية لحماية المستهلك وسلامة الأغذية في ساكسونيا السفلى (LAVES، أولدنبورغ، ألمانيا) بالموافقة على الـ IDs 12/0768 و 17/2472.
1. القلب explantation والتسريب
<p class="jove_co...

<ol>
	<li>Abbott, C. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Technique+for+Heart+Transplantation+In+the+Rat.">A Technique for Heart Transplantation In the Rat.</a> Archives of Surgery. 89 (4), 645-652 (1964).</li><li>Tomita, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+homotransplantation+in+the+rat.">Heart homotransplantation in the rat.</a> Sapporo igaku zasshi. The Sapporo Medical Journal. 30 (4), 165-183 (1966).</li><li>Ono, K., Lindsey, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+technique+of+heart+transplantation+in+rats.">Improved technique of heart transplantation in rats.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 57 (2), 225-229 (1969).</li><li>Wen, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+technique+for+a+new+working+heterotopic+heart+transplantation+model+in+rats.">A simple technique for a new working heterotopic heart transplantation model in rats.</a> Transplantation Proceedings. 45 (6), 2522-2526 (2013).</li><li>Benke, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterotopic+abdominal+rat+heart+transplantation+as+a+model+to+investigate+volume+dependency+of+myocardial+remodeling.">Heterotopic abdominal rat heart transplantation as a model to investigate volume dependency of myocardial remodeling.</a> Transplantation. 101 (3), 498-505 (2017).</li><li>Kearns, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+Heterotopic+Abdominal+Heart/Single-lung+Transplantation+in+a+Volume-loaded+Configuration.">Rat Heterotopic Abdominal Heart/Single-lung Transplantation in a Volume-loaded Configuration.</a> Journal of Visualized Experiments. (99), 52418 (2015).</li><li>Ibrahim, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterotopic+abdominal+heart+transplantation+in+rats+for+functional+studies+of+ventricular+unloading.">Heterotopic abdominal heart transplantation in rats for functional studies of ventricular unloading.</a> The Journal of Surgical Research. 179 (1), e31-e39 (2013).</li><li>Liu, F., Kang, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterotopic+heart+transplantation+in+mice.">Heterotopic heart transplantation in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (6), 238 (2007).</li><li>Lu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+simplified+volume-loaded+heterotopic+rabbit+heart+transplant+model+with+improved+techniques+and+a+standard+operating+procedure.">A new simplified volume-loaded heterotopic rabbit heart transplant model with improved techniques and a standard operating procedure.</a> Journal of Thoracic Disease. 7 (4), 653-661 (2015).</li><li>Kitahara, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterotopic+transplantation+of+a+decellularized+and+recellularized+whole+porcine+heart.">Heterotopic transplantation of a decellularized and recellularized whole porcine heart.</a> Interactive Cardiovascular and Thoracic Surgery. 22 (5), 571-579 (2016).</li><li>Kadner, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterotopic+heart+transplantation:+experimental+development+and+clinical+experience.">Heterotopic heart transplantation: experimental development and clinical experience.</a> European Journal of Cardiothoracic Surgery. 17 (4), 474-481 (2000).</li><li>Zin&#246;cker, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+reconstitution+and+graft-versus-host+reactions+in+rat+models+of+allogeneic+hematopoietic+cell+transplantation.">Immune reconstitution and graft-versus-host reactions in rat models of allogeneic hematopoietic cell transplantation.</a> Frontiers in Immunology. 3 (NOV), 1-12 (2012).</li><li>Klempnauer, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+control+of+rat+heart+allograft+rejection:+effect+of+different+MHC+and+non-MHC+incompatibilities.">Genetic control of rat heart allograft rejection: effect of different MHC and non-MHC incompatibilities.</a> Immunogenetics. 30, 81-88 (1989).</li><li>Huang, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+manipulations+in+the+rat:+Progress+and+prospects.">Genetic manipulations in the rat: Progress and prospects.</a> Current Opinion in Nephrology and Hypertension. 20 (4), 391-399 (2011).</li><li>Gordon, C. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulse+doppler+and+M-mode+to+assess+viability+of+cardiac+allografts+using+heterotopic+femoral+heart+transplantation+in+rats.">Pulse doppler and M-mode to assess viability of cardiac allografts using heterotopic femoral heart transplantation in rats.</a> Microsurgery. 27 (4), 240-244 (2007).</li><li>Gordon, C. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+modified+technique+for+heterotopic+femoral+heart+transplantation+in+rats.">A new modified technique for heterotopic femoral heart transplantation in rats.</a> The Journal of Surgical Research. 139 (2), 157-163 (2007).</li><li>Ma, Y., Wang, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+2+heterotopic+heart+transplant+techniques+in+rats:+cervical+and+abdominal+heart.">Comparison of 2 heterotopic heart transplant techniques in rats: cervical and abdominal heart.</a> Experimental and Clinical Transplantation. 9 (2), 128-133 (2011).</li><li>Bektas, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+effect+of+donor-specific+blood+transfusions+after+kidney,+heart,+pancreas,+and+skin+transplantation+in+major+histocompatibility+complex-incompatible+rats.">Differential effect of donor-specific blood transfusions after kidney, heart, pancreas, and skin transplantation in major histocompatibility complex-incompatible rats.</a> Transfusion. 37 (2), 226-230 (1997).</li><li>Saiho, K. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+allograft+acceptance+induced+by+single+dose+anti-leukocyte+common+antigen+(RT7)+antibody+in+the+rat.">Long-term allograft acceptance induced by single dose anti-leukocyte common antigen (RT7) antibody in the rat.</a> Transplantation. 71 (8), 1124-1131 (2001).</li><li>Bektas, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+transfers+infectious+immunologic+tolerance+in+MHC-incompatible+heart+transplantation+in+rats.">Blood transfers infectious immunologic tolerance in MHC-incompatible heart transplantation in rats.</a> Journal of Heart and Lung Transplantation. 24 (5), 614-617 (2005).</li><li>J&#228;ger, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sirolimus+promotes+tolerance+for+donor+and+recipient+antigens+after+MHC+class+II+disparate+bone+marrow+transplantation+in+rats.">Sirolimus promotes tolerance for donor and recipient antigens after MHC class II disparate bone marrow transplantation in rats.</a> Experimental Hematology. 35 (1), 164-170 (2007).</li><li>Timrott, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+allogeneic+bone+marrow+cells+in+view+of+residual+alloreactivity:+Sirolimus+but+not+cyclosporine+evolves+tolerogenic+properties.">Application of allogeneic bone marrow cells in view of residual alloreactivity: Sirolimus but not cyclosporine evolves tolerogenic properties.</a> PLoS ONE. 10 (4), 1-16 (2015).</li><li>Hadamitzky, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Memory-updating+abrogates+extinction+of+learned+immunosuppression.">Memory-updating abrogates extinction of learned immunosuppression.</a> Brain, Behavior, and Immunity. 52, 40-48 (2016).</li><li>Beetz, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recipient+natural+killer+cells+alter+the+course+of+rejection+of+allogeneic+heart+grafts+in+rats.">Recipient natural killer cells alter the course of rejection of allogeneic heart grafts in rats.</a> Plos One. 14 (8), e0220546 (2019).</li><li>Hirschburger, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nicotine+Attenuates+Macrophage+Infiltration+in+Rat+Lung+Allografts.">Nicotine Attenuates Macrophage Infiltration in Rat Lung Allografts.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 28 (5), 493-500 (2009).</li><li>Ruzza, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterotopic+heart+transplantation+in+rats:+improved+anesthetic+and+surgical+technique.">Heterotopic heart transplantation in rats: improved anesthetic and surgical technique.</a> Transplantation Proceedings. 42 (9), 3828-3832 (2010).</li><li>Wang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simplified+technique+for+heart+transplantation+in+rats:+abdominal+vessel+branch-sparing+and+modified+venotomy.">A simplified technique for heart transplantation in rats: abdominal vessel branch-sparing and modified venotomy.</a> Microsurgery. 26 (6), 470-472 (2006).</li><li>Wang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+modified+method+for+heterotopic+mouse+heart+transplantion.">A modified method for heterotopic mouse heart transplantion.</a> Journal of Visualized Experiments. (88), (2014).</li><li>Al-Amran, F. G., Shahkolahi, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Total+arterial+anastomosis+heterotopic+heart+transplantation+model.">Total arterial anastomosis heterotopic heart transplantation model.</a> Transplantation Proceedings. 45 (2), 625-629 (2013).</li><li>Hoerstrup, S. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modified+technique+for+heterotopic+rat+heart+transplantation+under+cardioplegic+arrest.">Modified technique for heterotopic rat heart transplantation under cardioplegic arrest.</a> Journal of Investigative Surgery. 13 (2), 73-77 (2000).</li><li>Fry, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+vascular+endothelial+changes+associated+with+increased+blood+velocity+gradients.">Acute vascular endothelial changes associated with increased blood velocity gradients.</a> Circulation Research. 22 (2), 165-197 (1968).</li><li>Ahmadi, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+Rat+Kidney+Transplantation:+A+Novel+and+Simplified+Surgical+Approach.">Orthotopic Rat Kidney Transplantation: A Novel and Simplified Surgical Approach.</a> Journal of Visualized Experiments. (147), (2019).</li><li>Schmid, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Successful+heterotopic+heart+transplantation+in+rat.">Successful heterotopic heart transplantation in rat.</a> Microsurgery. 15 (4), 279-281 (1994).</li><li>Shan, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+modified+technique+for+heterotopic+heart+transplantation+in+rats.">A modified technique for heterotopic heart transplantation in rats.</a> Journal of Surgical Research. 164 (1), 155-161 (2010).</li><li>Moris, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+liver-induced+tolerance.">Mechanisms of liver-induced tolerance.</a> Current Opinion in Organ Transplantation. 22 (1), 71-78 (2017).</li><li>Bickerstaff, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+renal+allografts:+spontaneous+acceptance+is+associated+with+regulated+T+cell-mediated+immunity.">Murine renal allografts: spontaneous acceptance is associated with regulated T cell-mediated immunity.</a> Journal of Immunology. 167 (9), 4821-4827 (2001).</li><li>Mottram, P. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrocardiographic+monitoring+of+cardiac+transplants+in+mice.">Electrocardiographic monitoring of cardiac transplants in mice.</a> Cardiovascular Research. 22 (5), 315-321 (1988).</li><li>Torre-Amione, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Decreased+expression+of+tumor+necrosis+factor-&#945;+in+failing+human+myocardium+after+mechanical+circulatory+support:+A+potential+mechanism+for+cardiac+recovery.">Decreased expression of tumor necrosis factor-&#945; in failing human myocardium after mechanical circulatory support: A potential mechanism for cardiac recovery.</a> Circulation. 100 (11), 1189-1193 (1999).</li><li>Goldstein, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circulatory+resuscitation+with+left+ventricular+assist+device+support+reduces+interleukins+6+and+8+levels.">Circulatory resuscitation with left ventricular assist device support reduces interleukins 6 and 8 levels.</a> The Annals of Thoracic Surgery. 63 (4), 971-974 (1997).</li><li>Tang-Quan, K. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-volume-loaded+heart+provides+a+more+relevant+heterotopic+transplantation+model.">Non-volume-loaded heart provides a more relevant heterotopic transplantation model.</a> Transplant Immunology. 23 (1-2), 65-70 (2010).</li><li>Lakhal-Naouar, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcutaneous+immunization+using+SLA+or+rLACK+skews+the+immune+response+towards+a+Th1+profile+but+fails+to+protect+BALB/c+mice+against+a+Leishmania+major+challenge.">Transcutaneous immunization using SLA or rLACK skews the immune response towards a Th1 profile but fails to protect BALB/c mice against a Leishmania major challenge.</a> Vaccine. 37 (3), 516-523 (2019).</li><li>Sousa-Batista, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+and+safe+single-dose+treatment+of+cutaneous+leishmaniasis+with+implantable+amphotericin+B-loaded+microparticles.">Novel and safe single-dose treatment of cutaneous leishmaniasis with implantable amphotericin B-loaded microparticles.</a> International Journal for Parasitology: Drugs and Drug Resistance. , (2019).</li></ol>

تعتمد الطريقة الموصوفة سابقًا لزراعة القلب الغيرتوب في الفئران بشكل رئيسي على وصف Ono و Lindsey في عام 19693. ومنذ ذلك الحين، أدخلت عدة تعديلات على أنواع مختلفة مما أدى إلى تنوع واسع في هذا النموذج. الجمع بين العديد من هذه التعديلات وإدخال تجربتنا الخاصة الناتجة عن أكثر من 30 عاما من إ?...

زرع القلب الهيتروتوبي هو نموذج تجريبي يستخدم بشكل متكرر للتحقيقات المختلفة المتعلقة بتحمل زراعة الأعضاء ، ورفض allograft الحاد والمزمن ، وإصابة نقص التروية وإعادة التروية ، وتضخم الآلة أو إعادة عرض القلب. من بين مزايا أخرى ، يمكن مراقبة وظيفة الكسب غير المشروع بشكل غير جراحي عن طريق الجس والفشل في الكسب غير المشروع لا يؤدي إلى ضعف حيوي للمتلقي على النقيض من الأعضاء الأخرى ، مثل الكلى أو الكبد.
في عام 1964، وصف أبوت وآخرون في البداية زرع قلب البطن التغايري في الفئران1. في وقت لاحق، في عام 1966، وصفت تقنية من طرف إلى طرف لanastomoses من قبل توميتا وآخرون2. تم الإبلاغ عن الأساس للنموذج المستخدم حاليا من قبل اونو وليندسي في عام 19693. خلال العقود الماضية، تم نشر العديد من التعديلات لإنشاء أنواع مختلفة من الطعوم القلب البطيني تفريغ، محملة جزئيا أو محملة بما في ذلك الجمع بين غير النوبة زرع القلب والرئة4،5،6. بالنسبة للتحليلات المناعية، يتم إجراء زراعة ترقيع القلب غير المحملة بالحجم الأكثر شيوعًا. في هذه الحالة، تدفق الدم يدخل إلى الوراء الشريان الأورطا الصاعد المانحة وبالتالي الشرايين التاجية. يحدث الصرف الوريدي على طول الجيوب الأنفية التاجية في الأذين الأيمن والبطين(الشكل 1A-B). لذلك ، يتم استبعاد البطين الأيسر من تدفق الدم ، بصرف النظر عن الكميات الهامشية من الدم من الأوردة البسية. وهذا أيضا يجعل من نموذج مفيد لدراسة الآليات الفيزيولوجية المرضية خلال البطين الأيسر مساعدة الجهاز العلاج7.
وقد أجريت زراعة القلب الهيتروبية في أنواع مختلفة بما في ذلك الفئران والأرانب والخنازير وحتى تم استخدامها كجهاز مساعدة أحادي أو ثنائي في البشر8,9,10,11. لا يزال الجرذ يمثل الحيوان التجريبي الشعبي لنماذج زراعة الأعضاء ، خاصة وأن أوقات البقاء على قيد الحياة للكسب غير المشروع لتركيبات سلالات الفئران المختلفة كانت محددة بشكل جيد في الماضي وعدد كبير من الكواشف المناعية يمكن الوصول إليها12،13. على عكس الفئران ، الفئران هي أكبر مما يجعل الجراحة والوصول إلى الأنسجة اللمفاوية للتحليلات المناعية أكثر جدوى12. وعلاوة على ذلك، فإن إدخال تكنولوجيات الاستنساخ التجاري في الفئران في السنوات الأخيرة سيؤدي على الأرجح إلى الاهتمام المتكرر بنماذج الفئران التجريبية14.
بشكل عام ، يمكن توصيل طعوم القلب الغيرية بالأوعية المتلقية إما عن طريق إجراء انستوموز عنق الرحم أو البطن. ومع ذلك، تشير بعض الدراسات إلى أن الأناستوموسيس الفخذي يسهل تحسين الرصد بسبب الوصول الأفضل للملامسة اليدوية أو تخطيط صدى القلب وإعادة النظر في الصدى، وبالتالي يسمح بالكشف بشكل أكثر دقة عن فشل الكسب غير المشروع15،16.
وقد ثبت أنه لا يوجد فرق فيما يتعلق بوقت العملية ومعدل المضاعفات والنتيجة ووقت البقاء على قيد الحياة الكسب غير المشروع بين كل من تقنيات anastomosis17. ومن الواضح أن توافر عدد كاف من الغدد الليمفاوية المستنزفة يجب أن يذكر كفائدة من الانسطوموسات العنقية. ومع ذلك، هناك حاجة إلى فترات تدريب أطول. في المقابل ، فإن أنسح البطن أقل تعقيدًا وقيمة بنفس القدر للتحقيقات المناعية ، خاصة عندما يقترن بنتائج طريقة جديدة لحقن خلايا عضلة القلب المتعددة الألياف واستئصال الغدد الليمفاوية اللاحقة في عنق الرحم. مزيج من كلا النموذجين يقدم مجموعة واسعة من التحليلات المناعية بعد التدخل.
البروتوكول التالي يشير إلى التشغيل في أزواج من الجراحين من أجل تقليل وقت نقص التروية. ومع ذلك، يمكن إجراء جميع التجارب من قبل شخص واحد. يتم عرض إعداد الأدوات والمواد لزراعة القلب وزرع في الشكل 2A-B.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anesthesia device (including isoflurane vaporizer)</td>
			<td>Summit Anesthesia Solutions</td>
			<td>No Catalog Number available</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cannula (27 G)</td>
			<td>BD Microlance</td>
			<td>302200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carprofen</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td>Rimadyl 50 mg/mL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cellstar Tubes (15 mL)</td>
			<td>GreinerBioOne</td>
			<td>188271</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell strainer (40 &#181;m)</td>
			<td>BD Falcon</td>
			<td>2271680</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase Type CLSII</td>
			<td>Biochrome</td>
			<td>C2-22</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Compresses 5x5 cm</td>
			<td>Fuhrmann</td>
			<td>31501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Compresses 7.5x7.5 cm</td>
			<td>Fuhrmann</td>
			<td>31505</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton swabs</td>
			<td>Heinz Herenz Medizinalbedarf</td>
			<td>1032128</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dexpathenol (5 %)</td>
			<td>Bayer</td>
			<td>&#34;Bepanthen&#34;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPBS BioWhittaker</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>17-512F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>Aesculap BD557R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>Aesculap BD313R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>Aesculap BD35</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating mat</td>
			<td>Gaymar Industries</td>
			<td>&#34;T/Pump&#34;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemostatic gauze</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>Tabotamp</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin-Natrium 25 000 I.E.</td>
			<td>Ratiopharm</td>
			<td>No Catalog Number available</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isofluran CP</td>
			<td>CP-Pharma</td>
			<td>No Catalog Number available</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large-pored sieve (stainless steel)</td>
			<td>Forschungswerkst&#228;tten Hannover Medical School</td>
			<td>No Catalog Number available</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lidocaine</td>
			<td>Astra Zeneca</td>
			<td>2 % Xylocain</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metamizol-Natrium</td>
			<td>Ratiopharma</td>
			<td>Novaminsulfon 500 mg/mL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro forceps</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>Aesculap BD3361</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro needle holder</td>
			<td>Codman, Johnson &#38; Johnson Medical</td>
			<td>Codmann 80-2003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro needle holder</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>Aesculap BD336R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro needle holder</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>Aesculap FD241R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro scissors</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>Aesculap FD101R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro scissors</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>Aesculap FM471R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holder</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>Aesculap BM221R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/Streptomycin/Glutamine (100x)</td>
			<td>PAA</td>
			<td>P11-010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peripheral venous catheter (18 G)</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>4268334B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peripheral venous catheter (22 G)</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>4268091B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Probe pointed scissors</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>Aesculap BC030R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Retractors</td>
			<td>Forschungswerkst&#228;tten Hannover Medical School</td>
			<td>No Catalog Number available</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI culture medium</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>BE12-702F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline solution (NaCl 0.9 %)</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>No Catalog Number available</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>Aesculap BC414</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical microscope</td>
			<td>Carl-Zeiss</td>
			<td>OPMI-MDM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sutures (anastomoses)</td>
			<td>Catgut</td>
			<td>Mariderm 8-0 monofil</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sutures (ligature)</td>
			<td>Resorba</td>
			<td>Silk 5-0 polyfil</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sutures (skin, fascia)</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>Mersilene 3-0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe (1 mL)</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>9166017V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe (10 mL)</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>4606108V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe (20 mL)</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>4606205V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vascular clamp</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>Aesculap FB708R</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an immunological model for heterotopic heart and cardiac muscle cell transplantation in rats

كانت زراعة القلب الهيتروبية في الفئران نموذجًا شائعالاستخدام للدراسات المناعية المتنوعة لأكثر من 50 عامًا. وقد أُبلغ عن عدة تعديلات منذ الوصف الأول في عام 1964. بعد 30 عامًا من إجراء زراعة القلب الغيرية في الفئران ، طورنا نهجًا جراحيًا مبسطًا ، والذي يمكن تعليمه وإجراؤه بسهولة دون مزيد من التدريب الجراحي أو الخلفية.
After dissection of the ascending aorta and the pulmonary artery and ligation of superior and inferior caval and pulmonary veins, the donor heart is harvested and subsequently perfused with ice-cold saline solution supplemented with heparin. بعد لقط وتقنين الأوعية البطن المتلقية، المتبرع يصعد الشريان الأورطا والشريان الرئوي هي anastomosed إلى الشريان الأورطا البطن المتلقي والوريد الوريد افينا السفلي، على التوالي، وذلك باستخدام غرز الجري المستمر.
اعتمادا على مجموعات مختلفة بين المانحين والمتلقي، يسمح هذا النموذج بتحليل الرفض الحاد أو المزمن للالوجرافات. ومما يعزز الأهمية المناعية لهذا النموذج من خلال نهج جديد من حقن داخل الأذن من خلايا عضلة القلب الحيوية والتحليل اللاحق لاستنزاف الأنسجة اللمفاوية عنق الرحم.

في الماضي ، تم معالجة القضايا المناعية المختلفة على أساس النموذج ، الذي تم التحقق من صحته في مجموعة العمل بأكثر من 500 عملية زرع بنسبة بقاء تزيد عن 95٪13،18،19,،20،21،22<su...

Watch this Scientific Journal Video about An Immunological Model for Heterotopic Heart and Cardiac Muscle Cell Transplantation in Rats at JoVE.com

An Immunological Model for Heterotopic Heart and Cardiac Muscle Cell Transplantation in Rats

نحن نصف نموذجًا لزراعة قلب البطن غير المعوثي في الفئران ، مما يعني تعديلات على الاستراتيجيات الحالية ، مما يؤدي إلى نهج جراحي مبسط. بالإضافة إلى ذلك، نحن نصف نموذج الرفض الجديد عن طريق الحقن داخل الأذن لخلايا عضلة القلب الحيوية، مما يسمح بإجراء المزيد من التحليلات المناعية لعملية زرع في الفئران.

نموذج مناعي لزرع خلايا القلب الهيترولوجي وخلايا عضلة القلب في الفئران

Heterotopic heart transplantation in rats has been a commonly used model for diverse immunological studies for more than 50 years. Several modifications ...

نماذج زرع أدوات قيمة للبحوث المناعية التي تتطلب في كثير من الأحيان الخبرة الجراحية. هنا، نقدم نهجاً مجدياً لزرع خلايا عضلة القلب والقلب غير المغاير في الفئران. من خلال تسليط الضوء على جميع الخطوات الحاسمة لنموذجنا وتبسيطها، يجب أن يكون الباحثون الذين ليس لهم خلفية جراحية قادرين على إتقان هذا النموذج في فترة زمنية معقولة.كلا النموذجين زرع تقديم رؤى قيمة في آليات التسامح والرفض ويمكن تطبيقها في مختلف الأنواع. لدينا الكثير من الخبرة في تدريس هذا النموذج للأفراد دون تدريب جراحي مسبق. بعد تعلم الخطوات الحاسمة، ونحن المشورة الصبر والممارسة الكافية مع الحيوانات المتوفى.لتكريس القلب المانحة، بعد التأكد من عدم وجود استجابة لدواسة منعكس في تخدير سبعة إلى 22 أسبوع الجرذان المانحة الحيوان، وتطبيق مواد التشحيم العين واستخدام مقصات الميكانيكية لإزالة الفراء البطن والصدر. وضع الفئران في موقف supine على قاعدة التدفئة وإصلاح الأطراف في قاعدة الجدول العملية مع عصابات مرنة. تطهير الجلد المكشوف مع 70٪ الإيثانول وإجراء عملية استئصال البطن المتوسطة.إدراج الداورس في شق واستخدام مسحات القطن تعقيم لتعبئة الأمعاء إلى الجانب الأيسر من المانحة لفضح الوريد السفلي كافا. بعد ذلك ، ثقب الوريد السفلي الكافا للسماح للحقن الوريدي من 500 وحدة دولية من الهيبارين المذابة في ملليلتر واحد من محلول ملحي متساوي التوتر الجليدي البارد. وقف النزيف في موقع ثقب بعد تراجع إبرة عن طريق ضغط الضوء باستخدام مسحة القطن.اِنز الحجاب الحاجز، وأؤدي عملية thor جانبية جانبية من المانحين، ثم قم بزك جدار الصدر. إزالة الميكروبيوم والعصب المبهم عن طريق إعداد حادة باستخدام اثنين من أصحاب الإبرة الدقيقة. بالنسبة للاستئصال، قم بتحويل الأوعية البطنية وأدخل الفرع الحاد لمقص مدبب في الجيب التاجي.استخدم ضغطًا لتشريح الشريان الأورطي الصاعد والشريان الرئوي بقدر الإمكان تحت جر القلب السدي الفاتح. وضع واحد 5-0 رباط حول الأجوف الوريدي العلوي والأدنى والأوردة الرئوية وتشديد الأربطة خطوة الحكمة كما dorsally ممكن. قطع الأنسجة الظهرية إلى الرباط واستخراج القلب.لزرع القلب explanted، استخدم قنية قياس 18 من القسطرة الوريدية لطرد 30 ملليلتر من الجليد الباردة، محلول ملحي متساوي التوتر تكملها 1000 وحدة دولية من الهيبارين من خلال الشريان الأورطي الصاعد والشريان الرئوي قبل وضع القلب في أنبوب 15 ملليلتر من محلول ملحي على الجليد. بعد إعداد 10 إلى 14 أسبوع من العمر فئران المتلقي كما أظهرت للتو، تعبئة الأمعاء إلى الجانب الأيسر العلوي من المتلقي على ضغط دافئ، وطيب. وضبط المجهر الجراحي أو بديل كاف.بعد تعبئة الاثني عشر وjejunum القريبة، على التوالي، وذلك باستخدام التكبير الكامل من خمسة إلى سبعة، واستخدام مسحات القطن وتشريح حادة لفضح الشريان الأورطي البطني وفينا الكافا السفلية. باستخدام اثنين من أصحاب الإبر الصغيرة لرفع الأوعية البطن دون إصابة الأوردة القطنية، ووضع المشبك الوعائي كولي على الأوعية. استخدام 30 إلى 45 درجة مقوسة 27 قنية قياس لثقب الأوعية البطنية.واستخدام مقص بوتس لتكبير موقع الثقب إلى شق طولي يطابق حجم تجويف الأوعية المانحة. لإزالة الجلطات ومنع تجلط بعد الجراحة ، قم بضخ الأوعية المالحة ووضع الكسب غير المشروع في الموقع. باستخدام اثنين من مقاطعة بسيطة 8-0 الغرز أحادية الخيوط غير القابلة للرُب، وإصلاح الشريان الأورطي الصاعد للمتبرع إلى الشريان الأورطي البطني للمتلقي في زوايا القحفية والقوية من الشق الطولي.إلى أنستوموز الشريان الأورطي التصاعدي للمتبرع مع الشريان الأورطي البطني للمستلم وضع الكسب غير المشروع إلى يمين الأوعية المتلقية أثناء تنفيذ النصف الأول من انستوموزيه مع تشغيل 8-0 خياطة أحادية النقّاد. ثم ضع الكسب غير المشروع على يسار الأوعية المتلقية وقم بتنفيذ النصف الثاني من مرض الاستئصال. إصلاح الشريان الرئوي المانحة إلى الكافا الوريدي السفلي بطريقة مماثلة مع عقدتين زاوية في زوايا الجمجمة وcaudal.بعد تثبيت السفينة المانحة مع عقدة في كل زاوية، ووضع غرزة من الخارج إلى داخل السفينة لتشغيل anastomosis داخل الجامة للنصف الأول من مرض الاستئصال. قبل أن خياطة أسفل، وضع غرزة أخرى من الداخل إلى الخارج. لمنع الانسداد المحيطي بعد الانتهاء من النصف الثاني من انستومسيس، طرد الانستموم مع المالحة قبل تشديد عقدة النصف الثاني من osistomosis.ضع شاشًا سحيفي حول كل من أنستوبوسس وأطلق بعناية المشبك الوعائي كولي للسماح بإعادة ضخ الكسب غير المشروع. إدارة أي نزيف مع ضغط الضوء وتعقيم مسحات القطن. بعد حوالي 60 ثانية، يجب أن يبدأ القلب في النبض.استبدال بعناية الأمعاء وإغلاق اللفافة البطنية والجلد مع فصل مستمر 3-0 خياطة تشغيل بولي. في الوقت التجريبي المناسب، حصاد قلب الفئران المانحة كما هو موضح واستخدام مشرط معقمة أو مقص معقمة لتمزيق القلب إلى ثلاثة أجزاء من ثلاثة ملليمترات. هضم القطع في 20 ملليلتر من متوسطة الثقافة تكمل مع 0.5 ملليغرام لكل ملليلتر من الكولاجيناز لمدة 30 دقيقة في 37 درجة مئوية.في نهاية عملية الهضم، إضافة الأنسجة إلى منخل كبير المسام، في حين إزالة المتوسطة الثقافة. إضافة خمسة إلى 10 ملليلتر من محلول ملحي متساوي التوتر والضغط الطين الأنسجة من خلال منخل. وبعد الطرد المركزي تعليق الخلية مرتين، ارشحه من خلال مصفاة خلية ميكرومتر 40.شطف مصفاة مع خمسة إلى 10 ملليلتر من محلول ملحي متساوي التوتر لجمع أي خلايا المتبقية. وبعد الطرد المركزي، إعادة تعليق خلايا القلب الفئران المعزولة في محلول ملحي بتركيز من خمسة أضعاف 10 إلى الخلايا الخامسة لكل ملليلتر. تحميل حقنة ملليلتر واحد مع حل الخلية ووضع الحيوان المتلقي تخدير في موقف الجانبي مع الأذن المستهدفة التي تواجه.إصلاح الأذن مع الاصبع وشريط على الوجهين، واستخدام 27 القنب قياس لحقن تحت الجلد 20 ميكرولترات من حل خلايا عضلة القلب على مقربة من الأوعية الشعرية البصرية في أذن المتلقي. بعد فترة الملاحظة التجريبية المناسبة، استخراج العقد اللمفاوية عنق الرحم استنزاف وإجراء التحليلات المناسبة المصب من الفائدة. نجت عمليات زرع الزرع السينوجينية لمدة تصل إلى 100 يوم دون علامات فشل الكسب غير المشروع.يمكن أن يؤدي مزيج المانحين المتلقين المحددين إلى سرعات مختلفة من رفض زراعة القلب غير المتغايرة. تكشف أقسام التبريد من القلوب المرفوضة عن زيادة تسلل الخلايا المناعية، في حين أن الطعوم السينيجينية خالية إلى حد كبير من الخلايا المناعية. استئصال الرحم اللمفاوي وإعادة تحفيز فحوصات من استنزاف الخلايا الليمفاوية العقدة بعد حقن الخلايا عضلة القلب عن طريق الفم يكشف عن استجابات مناعية واضحة سلالة محددة تجاه الأنسجة القلبية غير المتغايرة في متلقي زرع الحساسية، مما يبرر المزيد من التحليلات المناعية مثل التنميط السيتوكين.التعامل مع الأوعية بعناية عند إدخال واستخراج الإبرة. لا تضع الكثير من الاهتمام على الغرز لمنع تضيق. لا تضع الكثير من الغرز لكل التهاب في الدم.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Murine Model of CD40-activation of B cells

الفئران نموذج تفعيل CD40 - B من الخلايا

Research on B cells has shown that CD40 activation improves their antigen presentation capacity. When stimulated with interleukin-4 and CD40 ligand ...

Orthotopic Hind-Limb Transplantation in Rats

مثلي هند زرع الأطراف الاصطناعية في الفئران

Composite tissue allotransplantation (CTA) now represents a valid therapeutic option after the loss of a hand, forearm or digits and has become a novel ...

An Ex vivo Model of an Oligodendrocyte-directed T-Cell Attack in Acute Brain Slices

An Ex vivo Model of an Oligodendrocyte-directed T-Cell Attack in Acute Brain Slices

ل<em&gt; السابقين فيفو</em&gt; نموذج لهجوم T-خلية الموجه دبقية قليلة التغصن في الدماغ الحادة شرائح

Death of oligodendrocytes accompanied by destruction of neurons and axons are typical histopathological findings in cortical and subcortical grey matter ...

Assessing Bacterial Invasion of Cardiac Cells in Culture and Heart Colonization in Infected Mice Using Listeria monocytogenes

Assessing Bacterial Invasion of Cardiac Cells in Culture and Heart Colonization in Infected Mice Using Listeria monocytogenes

تقييم الغزو البكتيري لخلايا القلب في الثقافة والاستعمار القلب في الفئران المصابة باستخدام monocytogenes الليستيريا

Listeria monocytogenes is a Gram-positive facultative intracellular pathogen that is capable of causing serious invasive infections in immunocompromised ...

Normal and Malignant Muscle Cell Transplantation into Immune Compromised Adult Zebrafish

طبيعي والخبيثة زرع العضلات خلية إلى المناعي للخطر اسماك الزرد الكبار

Zebrafish have become a powerful tool for assessing development, regeneration, and cancer. More recently, allograft cell transplantation protocols have ...

An Endothelial Planar Cell Model for Imaging Immunological Synapse Dynamics

نموذج الخلايا البطانية مستو التصوير المناعية سنبس حيوية

Adaptive immunity is regulated by dynamic interactions between T cells and antigen presenting cells (&#39;APCs&#39;) referred to as &#39;immunological ...

Establishment of a High-throughput Setup for Screening Small Molecules That Modulate c-di-GMP Signaling in Pseudomonas aeruginosa

Establishment of a High-throughput Setup for Screening Small Molecules That Modulate c-di-GMP Signaling in Pseudomonas aeruginosa

إنشاء إعداد إنتاجية عالية لفحص الجزيئات الصغيرة التي تعدل ج-دي-GMP في اشارة<em&gt; الزائفة الزنجارية</em

Bacterial resistance to traditional antibiotics has driven research attempts to identify new drug targets in recently discovered regulatory pathways. ...

Isolation and Identification of Extravascular Immune Cells of the Heart

عزل وتحديد الخلايا المناعية اكسترافاسكولار للقلب

The immune system is an essential component of a healthy heart. The myocardium is home to a rich population of different immune cell subsets with ...

Optimization of the Cuff Technique for Murine Heart Transplantation

تحسين تقنية الكفة لزراعة القلب مورين

Murine cardiac transplantation has been performed for more than 40 years. With advancements in microsurgery, certain new techniques have been used to ...

Visualization of SARS-CoV-2 using Immuno RNA-Fluorescence In Situ Hybridization

تصور سارس-CoV-2 باستخدام الحمض النووي الريبي المناعي-فلورسينس في التهجين في الموقع

This manuscript provides a protocol for in situ hybridization chain reaction (HCR) coupled with immunofluorescence to visualize severe acute respiratory ...