Name: an immunological model for heterotopic heart and cardiac muscle cell transplantation in rats
Uploaded: 2020-05-08T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An Immunological Model for Heterotopic Heart and Cardiac Muscle Cell Transplantation in Rats at JoVE.com

브리타 트라우테비히, 코린나 뢰버트, 잉그리드 메더의 헌신에 감사드립니다.

모든 동물 체험은 니더작센(LAVES, 올덴부르크, 독일)의 소비자 보호 및 식품 안전을 위해 지역 당국의 지역 윤리 동물 검토 위원회의 지침에 따라 수행되었으며, 승인 된 IDs 12/0768 및 17/2472.
1. 심장 박식 및 관류
참고: 접목 기증자로서, 7-22주 령의 나이에 암컷 또는 수컷 쥐가 사용되었다.
<ol><li>이소플루란 흡입으로 기증자 쥐를 마취시요(5%에서 유도,O2...

<ol>
	<li>Abbott, C. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Technique+for+Heart+Transplantation+In+the+Rat.">A Technique for Heart Transplantation In the Rat.</a> Archives of Surgery. 89 (4), 645-652 (1964).</li><li>Tomita, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+homotransplantation+in+the+rat.">Heart homotransplantation in the rat.</a> Sapporo igaku zasshi. The Sapporo Medical Journal. 30 (4), 165-183 (1966).</li><li>Ono, K., Lindsey, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+technique+of+heart+transplantation+in+rats.">Improved technique of heart transplantation in rats.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 57 (2), 225-229 (1969).</li><li>Wen, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+technique+for+a+new+working+heterotopic+heart+transplantation+model+in+rats.">A simple technique for a new working heterotopic heart transplantation model in rats.</a> Transplantation Proceedings. 45 (6), 2522-2526 (2013).</li><li>Benke, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterotopic+abdominal+rat+heart+transplantation+as+a+model+to+investigate+volume+dependency+of+myocardial+remodeling.">Heterotopic abdominal rat heart transplantation as a model to investigate volume dependency of myocardial remodeling.</a> Transplantation. 101 (3), 498-505 (2017).</li><li>Kearns, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+Heterotopic+Abdominal+Heart/Single-lung+Transplantation+in+a+Volume-loaded+Configuration.">Rat Heterotopic Abdominal Heart/Single-lung Transplantation in a Volume-loaded Configuration.</a> Journal of Visualized Experiments. (99), 52418 (2015).</li><li>Ibrahim, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterotopic+abdominal+heart+transplantation+in+rats+for+functional+studies+of+ventricular+unloading.">Heterotopic abdominal heart transplantation in rats for functional studies of ventricular unloading.</a> The Journal of Surgical Research. 179 (1), e31-e39 (2013).</li><li>Liu, F., Kang, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterotopic+heart+transplantation+in+mice.">Heterotopic heart transplantation in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (6), 238 (2007).</li><li>Lu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+simplified+volume-loaded+heterotopic+rabbit+heart+transplant+model+with+improved+techniques+and+a+standard+operating+procedure.">A new simplified volume-loaded heterotopic rabbit heart transplant model with improved techniques and a standard operating procedure.</a> Journal of Thoracic Disease. 7 (4), 653-661 (2015).</li><li>Kitahara, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterotopic+transplantation+of+a+decellularized+and+recellularized+whole+porcine+heart.">Heterotopic transplantation of a decellularized and recellularized whole porcine heart.</a> Interactive Cardiovascular and Thoracic Surgery. 22 (5), 571-579 (2016).</li><li>Kadner, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterotopic+heart+transplantation:+experimental+development+and+clinical+experience.">Heterotopic heart transplantation: experimental development and clinical experience.</a> European Journal of Cardiothoracic Surgery. 17 (4), 474-481 (2000).</li><li>Zin&#246;cker, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+reconstitution+and+graft-versus-host+reactions+in+rat+models+of+allogeneic+hematopoietic+cell+transplantation.">Immune reconstitution and graft-versus-host reactions in rat models of allogeneic hematopoietic cell transplantation.</a> Frontiers in Immunology. 3 (NOV), 1-12 (2012).</li><li>Klempnauer, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+control+of+rat+heart+allograft+rejection:+effect+of+different+MHC+and+non-MHC+incompatibilities.">Genetic control of rat heart allograft rejection: effect of different MHC and non-MHC incompatibilities.</a> Immunogenetics. 30, 81-88 (1989).</li><li>Huang, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+manipulations+in+the+rat:+Progress+and+prospects.">Genetic manipulations in the rat: Progress and prospects.</a> Current Opinion in Nephrology and Hypertension. 20 (4), 391-399 (2011).</li><li>Gordon, C. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulse+doppler+and+M-mode+to+assess+viability+of+cardiac+allografts+using+heterotopic+femoral+heart+transplantation+in+rats.">Pulse doppler and M-mode to assess viability of cardiac allografts using heterotopic femoral heart transplantation in rats.</a> Microsurgery. 27 (4), 240-244 (2007).</li><li>Gordon, C. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+modified+technique+for+heterotopic+femoral+heart+transplantation+in+rats.">A new modified technique for heterotopic femoral heart transplantation in rats.</a> The Journal of Surgical Research. 139 (2), 157-163 (2007).</li><li>Ma, Y., Wang, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+2+heterotopic+heart+transplant+techniques+in+rats:+cervical+and+abdominal+heart.">Comparison of 2 heterotopic heart transplant techniques in rats: cervical and abdominal heart.</a> Experimental and Clinical Transplantation. 9 (2), 128-133 (2011).</li><li>Bektas, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+effect+of+donor-specific+blood+transfusions+after+kidney,+heart,+pancreas,+and+skin+transplantation+in+major+histocompatibility+complex-incompatible+rats.">Differential effect of donor-specific blood transfusions after kidney, heart, pancreas, and skin transplantation in major histocompatibility complex-incompatible rats.</a> Transfusion. 37 (2), 226-230 (1997).</li><li>Saiho, K. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+allograft+acceptance+induced+by+single+dose+anti-leukocyte+common+antigen+(RT7)+antibody+in+the+rat.">Long-term allograft acceptance induced by single dose anti-leukocyte common antigen (RT7) antibody in the rat.</a> Transplantation. 71 (8), 1124-1131 (2001).</li><li>Bektas, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+transfers+infectious+immunologic+tolerance+in+MHC-incompatible+heart+transplantation+in+rats.">Blood transfers infectious immunologic tolerance in MHC-incompatible heart transplantation in rats.</a> Journal of Heart and Lung Transplantation. 24 (5), 614-617 (2005).</li><li>J&#228;ger, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sirolimus+promotes+tolerance+for+donor+and+recipient+antigens+after+MHC+class+II+disparate+bone+marrow+transplantation+in+rats.">Sirolimus promotes tolerance for donor and recipient antigens after MHC class II disparate bone marrow transplantation in rats.</a> Experimental Hematology. 35 (1), 164-170 (2007).</li><li>Timrott, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+allogeneic+bone+marrow+cells+in+view+of+residual+alloreactivity:+Sirolimus+but+not+cyclosporine+evolves+tolerogenic+properties.">Application of allogeneic bone marrow cells in view of residual alloreactivity: Sirolimus but not cyclosporine evolves tolerogenic properties.</a> PLoS ONE. 10 (4), 1-16 (2015).</li><li>Hadamitzky, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Memory-updating+abrogates+extinction+of+learned+immunosuppression.">Memory-updating abrogates extinction of learned immunosuppression.</a> Brain, Behavior, and Immunity. 52, 40-48 (2016).</li><li>Beetz, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recipient+natural+killer+cells+alter+the+course+of+rejection+of+allogeneic+heart+grafts+in+rats.">Recipient natural killer cells alter the course of rejection of allogeneic heart grafts in rats.</a> Plos One. 14 (8), e0220546 (2019).</li><li>Hirschburger, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nicotine+Attenuates+Macrophage+Infiltration+in+Rat+Lung+Allografts.">Nicotine Attenuates Macrophage Infiltration in Rat Lung Allografts.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 28 (5), 493-500 (2009).</li><li>Ruzza, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterotopic+heart+transplantation+in+rats:+improved+anesthetic+and+surgical+technique.">Heterotopic heart transplantation in rats: improved anesthetic and surgical technique.</a> Transplantation Proceedings. 42 (9), 3828-3832 (2010).</li><li>Wang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simplified+technique+for+heart+transplantation+in+rats:+abdominal+vessel+branch-sparing+and+modified+venotomy.">A simplified technique for heart transplantation in rats: abdominal vessel branch-sparing and modified venotomy.</a> Microsurgery. 26 (6), 470-472 (2006).</li><li>Wang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+modified+method+for+heterotopic+mouse+heart+transplantion.">A modified method for heterotopic mouse heart transplantion.</a> Journal of Visualized Experiments. (88), (2014).</li><li>Al-Amran, F. G., Shahkolahi, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Total+arterial+anastomosis+heterotopic+heart+transplantation+model.">Total arterial anastomosis heterotopic heart transplantation model.</a> Transplantation Proceedings. 45 (2), 625-629 (2013).</li><li>Hoerstrup, S. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modified+technique+for+heterotopic+rat+heart+transplantation+under+cardioplegic+arrest.">Modified technique for heterotopic rat heart transplantation under cardioplegic arrest.</a> Journal of Investigative Surgery. 13 (2), 73-77 (2000).</li><li>Fry, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+vascular+endothelial+changes+associated+with+increased+blood+velocity+gradients.">Acute vascular endothelial changes associated with increased blood velocity gradients.</a> Circulation Research. 22 (2), 165-197 (1968).</li><li>Ahmadi, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+Rat+Kidney+Transplantation:+A+Novel+and+Simplified+Surgical+Approach.">Orthotopic Rat Kidney Transplantation: A Novel and Simplified Surgical Approach.</a> Journal of Visualized Experiments. (147), (2019).</li><li>Schmid, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Successful+heterotopic+heart+transplantation+in+rat.">Successful heterotopic heart transplantation in rat.</a> Microsurgery. 15 (4), 279-281 (1994).</li><li>Shan, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+modified+technique+for+heterotopic+heart+transplantation+in+rats.">A modified technique for heterotopic heart transplantation in rats.</a> Journal of Surgical Research. 164 (1), 155-161 (2010).</li><li>Moris, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+liver-induced+tolerance.">Mechanisms of liver-induced tolerance.</a> Current Opinion in Organ Transplantation. 22 (1), 71-78 (2017).</li><li>Bickerstaff, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+renal+allografts:+spontaneous+acceptance+is+associated+with+regulated+T+cell-mediated+immunity.">Murine renal allografts: spontaneous acceptance is associated with regulated T cell-mediated immunity.</a> Journal of Immunology. 167 (9), 4821-4827 (2001).</li><li>Mottram, P. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrocardiographic+monitoring+of+cardiac+transplants+in+mice.">Electrocardiographic monitoring of cardiac transplants in mice.</a> Cardiovascular Research. 22 (5), 315-321 (1988).</li><li>Torre-Amione, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Decreased+expression+of+tumor+necrosis+factor-&#945;+in+failing+human+myocardium+after+mechanical+circulatory+support:+A+potential+mechanism+for+cardiac+recovery.">Decreased expression of tumor necrosis factor-&#945; in failing human myocardium after mechanical circulatory support: A potential mechanism for cardiac recovery.</a> Circulation. 100 (11), 1189-1193 (1999).</li><li>Goldstein, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circulatory+resuscitation+with+left+ventricular+assist+device+support+reduces+interleukins+6+and+8+levels.">Circulatory resuscitation with left ventricular assist device support reduces interleukins 6 and 8 levels.</a> The Annals of Thoracic Surgery. 63 (4), 971-974 (1997).</li><li>Tang-Quan, K. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-volume-loaded+heart+provides+a+more+relevant+heterotopic+transplantation+model.">Non-volume-loaded heart provides a more relevant heterotopic transplantation model.</a> Transplant Immunology. 23 (1-2), 65-70 (2010).</li><li>Lakhal-Naouar, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcutaneous+immunization+using+SLA+or+rLACK+skews+the+immune+response+towards+a+Th1+profile+but+fails+to+protect+BALB/c+mice+against+a+Leishmania+major+challenge.">Transcutaneous immunization using SLA or rLACK skews the immune response towards a Th1 profile but fails to protect BALB/c mice against a Leishmania major challenge.</a> Vaccine. 37 (3), 516-523 (2019).</li><li>Sousa-Batista, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+and+safe+single-dose+treatment+of+cutaneous+leishmaniasis+with+implantable+amphotericin+B-loaded+microparticles.">Novel and safe single-dose treatment of cutaneous leishmaniasis with implantable amphotericin B-loaded microparticles.</a> International Journal for Parasitology: Drugs and Drug Resistance. , (2019).</li></ol>

앞서 설명한 쥐의 이종성 심장 이식 방법은 주로 1969년 오노와3린지의 설명에 기초한다 3. 그 이후로, 이 모형의 넓은 다양성으로 이끌어 내는 각종 종에서 몇몇 수정이 소개되었습니다. 이러한 수정의 몇 가지를 결합하고 실험실에서 이종 성 심장 이식을 수행의 30 년 이상에서 발생하는 우리 자신의 경험을 소개, 우리는 긴 훈련 기간이나 수술 배경을 필요로하지 않는 가능한 수?...

이종성 심장 이식은 이식 허용 오차, 급성 및 만성 동종 이식 거부, 허혈 재관류 손상, 기계 관류 또는 심장 리모델링에 관한 다양한 조사를 위해 자주 사용되는 실험 모델입니다. 다른 장점 들 중에서도, 이식 기능은 촉진및 이식 실패에 의해 비침습적으로 모니터링될 수 있으며 신장이나 간과 같은 다른 장기와 달리 수용자의 중요한 손상을 유발하지 않는다.
에서 1964, Abbott 외. 처음에 쥐에 이종 성 복 부 심장 이식 설명1. 나중에, 1966년에, 해부학을 위한 종단 간 기술은 Tomita 등2에의해 기술되었습니다. 현재 사용되는 모델의 기초는 1969 년 오노와 린지에 의해보고되었다3. 지난 수십 년 동안, 결합된 이종성 심폐 이식4,,5,,6을포함하여 언로드, 부분적으로 로드되거나 로드된 좌심실 심장 이식의 다른 모형을 만들기 위하여 몇몇 수정이 간행되었습니다. 면역학 분석을 위해 비부적 부하 심장 이식 이식이 가장 일반적으로 수행됩니다. 이 경우, 혈류는 기증자가 대동맥을 상승하고 이어서 관상 동맥으로 역행하게 들어간다. 정맥 배수는 관상 동맥 부비동을 따라 오른쪽 심방과 심실로 발생합니다(그림 1A-B). 따라서 좌심실은 테베시안 정맥에서 혈액의 한계 양을 제외하고 혈류에서 제외됩니다. 이것은 또한 좌심실 보조 장치 치료 동안 병리 생리학적 메커니즘을 연구하기 위한 유용한 모형7.
이종성 심장 이식은 마우스, 토끼, 돼지 등 다양한 종에서 수행되어 왔으며 심지어 인간8,9,10,,11에서단일 또는 쌍심실 보조 장치로 사용되어 왔다.9, 쥐는 여전히 이식 모델에 대한 인기 있는 실험 동물을 나타내며, 특히 상이한 쥐 균주 조합에 대한 이식 편이식 생존 시간이 과거에 잘 정의되어 왔기 때문에 많은 수의 면역학적 시약이 접근가능12,,13. 마우스와는 달리, 쥐는 면역학적 분석을 위한 림프 조직에 더 큰 만들기 수술 및 접근이 더 실현 가능한12입니다. 더욱이, 최근 래트에서 상업적 복제 기술의 도입은 실험적인 쥐모델(14)에대한 반복적인 관심을 유도할 가능성이 크다.
일반적으로, 이종성 심장 이식편은 자궁 경부 또는 복부 해부학을 수행함으로써 수용자 혈관에 부착될 수 있다. 그러나, 몇몇 연구 결과는 대퇴문 해부학이 수동 촉진 또는 경피 심초음파에 대한 더 나은 접근 때문에 향상한 감시를 용이하게 하고 이렇게 접목 실패의 더 정확한 검출을 허용한다는 것을건의합니다 15,,16.
동작 시간, 합병증 비율, 결과 및 이식편 생존 시간에 관한 차이가 없는 것으로 나타났다17. 분명히, 충분한 수의 배수 림프절의 가용성은 자궁 경부 해부학의 이점으로 언급되어야합니다. 그러나, 더 긴 훈련 기간이 필요합니다. 대조적으로, 복부 문합은 면역 학적 조사를 위해 덜 복잡하고 동등하게 가치가 있습니다, 특히 알로겐성 심장 근육 세포및 후속 자궁 경부 림프절 절제술의 귀 내 주사의 새로운 방법의 결과와 결합 될 때. 두 모델의 조합은 개입 후 면역 학적 분석의 광범위한 스펙트럼을 제공합니다.
다음 프로토콜은 허혈 시간을 줄이기 위해 외과 의사의 쌍으로 작동을 말합니다. 그러나, 모든 실험은 한 사람에 의해 수행 될 수있다. 심장 박식 및 이식을 위한 기기 및 재료의 설정은 그림 2A-B에표시됩니다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anesthesia device (including isoflurane vaporizer)</td>
			<td>Summit Anesthesia Solutions</td>
			<td>No Catalog Number available</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cannula (27 G)</td>
			<td>BD Microlance</td>
			<td>302200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carprofen</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td>Rimadyl 50 mg/mL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cellstar Tubes (15 mL)</td>
			<td>GreinerBioOne</td>
			<td>188271</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell strainer (40 &#181;m)</td>
			<td>BD Falcon</td>
			<td>2271680</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase Type CLSII</td>
			<td>Biochrome</td>
			<td>C2-22</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Compresses 5x5 cm</td>
			<td>Fuhrmann</td>
			<td>31501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Compresses 7.5x7.5 cm</td>
			<td>Fuhrmann</td>
			<td>31505</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton swabs</td>
			<td>Heinz Herenz Medizinalbedarf</td>
			<td>1032128</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dexpathenol (5 %)</td>
			<td>Bayer</td>
			<td>&#34;Bepanthen&#34;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPBS BioWhittaker</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>17-512F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>Aesculap BD557R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>Aesculap BD313R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>Aesculap BD35</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating mat</td>
			<td>Gaymar Industries</td>
			<td>&#34;T/Pump&#34;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemostatic gauze</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>Tabotamp</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin-Natrium 25 000 I.E.</td>
			<td>Ratiopharm</td>
			<td>No Catalog Number available</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isofluran CP</td>
			<td>CP-Pharma</td>
			<td>No Catalog Number available</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large-pored sieve (stainless steel)</td>
			<td>Forschungswerkst&#228;tten Hannover Medical School</td>
			<td>No Catalog Number available</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lidocaine</td>
			<td>Astra Zeneca</td>
			<td>2 % Xylocain</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metamizol-Natrium</td>
			<td>Ratiopharma</td>
			<td>Novaminsulfon 500 mg/mL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro forceps</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>Aesculap BD3361</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro needle holder</td>
			<td>Codman, Johnson &#38; Johnson Medical</td>
			<td>Codmann 80-2003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro needle holder</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>Aesculap BD336R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro needle holder</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>Aesculap FD241R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro scissors</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>Aesculap FD101R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro scissors</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>Aesculap FM471R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holder</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>Aesculap BM221R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/Streptomycin/Glutamine (100x)</td>
			<td>PAA</td>
			<td>P11-010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peripheral venous catheter (18 G)</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>4268334B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peripheral venous catheter (22 G)</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>4268091B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Probe pointed scissors</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>Aesculap BC030R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Retractors</td>
			<td>Forschungswerkst&#228;tten Hannover Medical School</td>
			<td>No Catalog Number available</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI culture medium</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>BE12-702F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline solution (NaCl 0.9 %)</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>No Catalog Number available</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>Aesculap BC414</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical microscope</td>
			<td>Carl-Zeiss</td>
			<td>OPMI-MDM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sutures (anastomoses)</td>
			<td>Catgut</td>
			<td>Mariderm 8-0 monofil</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sutures (ligature)</td>
			<td>Resorba</td>
			<td>Silk 5-0 polyfil</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sutures (skin, fascia)</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>Mersilene 3-0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe (1 mL)</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>9166017V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe (10 mL)</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>4606108V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe (20 mL)</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>4606205V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vascular clamp</td>
			<td>B. Braun</td>
			<td>Aesculap FB708R</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an immunological model for heterotopic heart and cardiac muscle cell transplantation in rats

쥐에서의 이종성 심장 이식은 50년 이상 다양한 면역학적 연구에 일반적으로 사용되는 모델이었다. 1964년 첫 번째 설명 이후 몇 가지 수정 사항이 보고되었습니다. 쥐에서 이종성 심장 이식을 수행 30 년 후, 우리는 쉽게 가르치고 추가 수술 훈련이나 배경없이 수행 할 수있는 단순화 된 수술 접근 방식을 개발했다.
오름차순 대동맥과 우수하고 열등한 기병 및 폐 정맥의 폐 동맥 및 결찰을 해부한 후, 기증자 심장을 수확하고 이어서 헤파린으로 보충 된 얼음 차가운 식염수 용액으로 관류합니다. 수용인 복부 혈관을 클램핑하고 절개한 후, 기증자는 오름차순 대동맥과 폐 동맥을 각각 연속 적인 실행 봉합사를 사용하여 수용자 복부 대동맥 및 열등한 정맥에 해부학됩니다.
다른 기증자-수령인 조합에 따라, 이 모형은 동종 이식의 급성 또는 만성 거부의 분석을 허용합니다. 이 모형의 면역학 중요성은 중요한 심장 근육 세포의 귀 주입의 새로운 접근 및 배수 자궁 경관 림프조직의 후속 분석에 의해 더욱 강화됩니다.

과거에는 다른 면역학 적 문제가 모델에 기초하여 해결되었으며, 이는 95% 이상의 생존율을 가진 500개 이상의 이식에 의해 작업 군에서 검증되었으며,13,,18,,19,,20,21, 22,,,,23,,24....

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An Immunological Model for Heterotopic Heart and Cardiac Muscle Cell Transplantation in Rats

우리는 쥐에 있는 이종 성 복부 심혼 이식의 모형을 기술합니다, 현재 전략의 수정을 암시하는, 이는 단순화한 외과 접근으로 이끌어 내는. 추가적으로, 우리는 쥐에 있는 추가 이식 면역학 분석을 허용하는 중요한 심장 근육 세포의 귀 주입에 의하여 새로운 거부 모델을 기술합니다.

쥐에 있는 이종 심혼 및 심장 근육 세포 이식을 위한 면역학 모형

Heterotopic heart transplantation in rats has been a commonly used model for diverse immunological studies for more than 50 years. Several modifications ...

이식 모델은 종종 외과 전문 지식이 필요한 면역 학적 연구를위한 귀중한 도구입니다. 여기에서, 우리는 쥐에 있는 이성애 심혼 및 심장 근육 세포 이식을 위한 실행 가능한 접근을 제시합니다. 우리의 모형의 모든 중요한 단계를 강조하고 단순화함으로써, 외과 배경이 없는 연구원은 적당한 시간 안에 이 모형을 마스터할 수 있어야 합니다.두 이식 모델은 허용 오차 및 거부 메커니즘에 대한 귀중한 통찰력을 제공하며 다양한 종에 적용 될 수 있습니다. 우리는 사전 수술 훈련없이 개인에게이 모델을 가르치는 경험이 많이 있습니다. 중요한 단계를 배운 후, 우리는 죽은 동물과 인내와 충분한 연습을 조언한다.기증자 심장 절제의 경우, 마취 된 7 - 22 주 된 쥐 기증자 동물에서 페달 반사에 대한 반응의 부족을 확인 한 후, 눈 윤활유를 적용하고 복부와 흉부 모피를 제거하기 위해 기계 클리퍼를 사용합니다. 가열 베이스에 쥐를 배치하고 탄성 밴드와 수술 테이블의 베이스에 사지를 고정합니다. 노출된 피부를 70%에탄올로 소독하고 중앙분리대를 수행합니다.개절에 리트랙터를 삽입하고 멸균 된 면봉을 사용하여 기증자의 왼쪽에 내장을 동원하여 열등한 베나 카바를 노출시하십시오. 다음으로 열등한 베나 카바를 천자에 맞아 얼음-차가운 동위 원소식 용액의 1밀리리터에 용해된 500개의 국제 헤파린 유닛을 정맥 주사할 수 있습니다. 면 봉면을 사용하여 가벼운 압축에 의해 바늘 을 철회 한 후 천공 부위에서 출혈을 중지합니다.다이어프램을 절개하고, 기증자의 양쪽에 측면 흉부 절제술을 수행하고 흉부 벽을 고정시하십시오. 두 개의 마이크로 바늘 홀더를 사용하여 무딘 준비로 심낭과 골신경을 제거하십시오. 멸종의 경우 복부 혈관을 횡단하고 프로브 뾰족한 가위의 무딘 가지를 횡회 회복 부비동에 삽입합니다.압축을 사용하여 심장의 가벼운 소달 견인하에서 가능한 한 해부하는 오름차순 대동맥과 폐 동맥을 해부하십시오. 우수하고 열등한 베나 카바와 폐 정맥 주위에 단일 5-0 합자를 배치하고 가능한 한 dorsally로 합자 단계적 조여. 조직 등갈을 합자에 세게 하고 심장을 추출합니다.각질된 심장을 견딜 수 있도록 정맥 카테터의 18게이지 캐뉼라를 사용하여 얼음 냉기, 동상 풍삭용 액약 30밀리리터를 1000개의 국제 헤파린 유닛으로 보충한 후 15밀리리터의 식염수 용액에 심장을 배치하십시오. 방금 입증 된 대로 10 에서 14 주 된 받는 사람 쥐를 준비 한 후, 따뜻하고 젖은 압축에 받는 사람의 왼쪽 상단에 내장을 동원. 그리고 외과 현미경 또는 충분한 대안을 조정합니다.각각 십이지장과 근위 제주눔을 동원한 후, 5~7개의 완전한 배율을 사용하여 면봉과 무딘 해부를 사용하여 복부 대동맥과 열등한 베나 카바를 노출한다. 두 개의 마이크로 바늘 홀더를 사용하여 요추 정맥을 손상시키지 않고 복부 혈관을 상승시키고 쿨리 혈관 클램프를 용기에 놓습니다. 30~45도 아치형 27도 게이지 캐뉼라를 사용하여 복부 혈관에 구멍을 뚫습니다.그리고 포츠 가위를 사용하여 구멍 부위를 기증자 혈관의 루멘 크기와 일치하는 세로 절개로 확대합니다. 혈전을 제거하고 수술 후 혈전증을 방지하기 위해 식염수로 혈관을 인퓨전하고 접목을 정분에 넣습니다. 간단한 중단 8-0 두 가지 사용 모노필라멘트 비 리설주 봉합사, 세로 절개의 두개골과 caudal 모서리에 받는 사람 복부 대동맥에 기증자 상승 대동맥을 고정.기증자의 승천 대동맥을 받는 사람의 복부 대동맥을 마취하기 위해 8-0으로 마취의 전반을 수행하면서 수신자 혈관의 오른쪽에 접목을 배치합니다. 모노필라멘트 봉합사. 그런 다음 접목을 받는 선박의 왼쪽에 놓고 해부학의 후반을 수행합니다. 기증자 폐 동맥을 두개골과 caudal 모서리에 두 개의 코너 매듭과 유사한 방식으로 열등한 베나 카바에 고정하십시오.각 구석에 매듭으로 기증자 혈관을 고정 한 후, 해부학의 전반부에 대한 내반 빈민가를 실행하기 위해 선박의 내부에 외부에서 스티치를 배치합니다. 봉합사를 묶기 전에 안쪽에서 바깥쪽으로 다른 스티치를 놓습니다. 해부학의 후반을 마친 후 주변 색전증을 방지하기 위해, 해부학의 후반의 매듭을 조이기 전에 식염수로 해부학을 플러시.마취제 주위에 혈전성 거즈를 놓고 쿨리 혈관 클램프를 조심스럽게 방출하여 이식 재퍼퓨전을 허용합니다. 가벼운 압축 및 살균 된 면봉으로 출혈을 관리하십시오. 약 60초 후에 심장이 뛰기 시작해야합니다.조심스럽게 내장을 교체하고 복부 근막과 피부를 별도의 연속 3-0 폴리필라멘트 실행 봉합사로 닫습니다. 적절한 실험 시점에서, 입증된 대로 기증자 쥐 심장을 수확하고 멸균 메스 또는 멸균 가위를 사용하여 심장을 3mm 크기의 조각으로 분쇄합니다. 콜라게나아제 밀리리터당 0.5밀리그램으로 보충된 배양 배지 의 20 밀리리터에서 37도에서 30분간 소화합니다.소화의 끝에서, 배양 배지를 제거하면서, 큰 포공 체에 조직을 추가합니다. 이소토닉 식염수 용액의 5 ~10 밀리리터를 추가하고 체를 통해 조직 슬러리를 변형시. 그리고 세포 현탁액을 두 번 원심 분리 한 후 40 마이크로 미터 세포 여과기를 통해 필터링하십시오.남은 세포를 수집하기 위해 이소토닉 식염수 용액의 5~10밀리리터로 여과기를 헹구세요. 그리고 원심분리 후, 밀리리터당 5회 10분의 5의 농도에서 식염수 용액에서 고립된 쥐 심장 세포를 재중단한다. 셀 용액으로 1 밀리리터 주사기를 적재하고 마취된 받는 동물을 측면 위치에 배치하여 대상 귀가 위로 향합니다.손가락과 양면 테이프로 귀를 고정하고 27 게이지 캐뉼라를 사용하여 시각적 모세관 용기에 가까운 20 마이크로리터의 심장 근육 세포 용액을 받는 사람의 귀에 피하합니다. 적절한 실험 관찰 기간 후, 배수 자궁 경부 림프절을 추출하고 관심의 적절한 다운스트림 분석을 수행한다. Syngenic 이식은 이식 실패의 표시 없이 100 일까지 살아남았습니다.특정 기증자-받는 사람 조합 이종성 심장 이식 거부의 다른 속도 귀착될 수 있습니다. 거부 된 마음의 Cryostat 섹션은 면역 효과세포의 침투증가를 드러내고, 시너지 이식은 면역 세포가 크게 자유롭습니다. 경부 림프절 절제술 및 구강 심장 근육 세포 주입 후 림프절 세포를 배출의 재 자극 분석은 동종 이식 받는 사람에 이성화 심장 조직에 대한 고유 변형 특정 면역 반응을 밝혀, 사이토카인 프로파일링과 같은 추가 면역 학적 분석을 보증.바늘을 삽입하고 추출할 때 혈관을 조심스럽게 처리하십시오. 협착을 방지하기 위해 봉합사에 너무 많은 주의를 기울이지 마십시오. 각 해부학에 너무 많은 바늘을 두지 마십시오.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Murine Model of CD40-activation of B cells

B 세포의 CD40 - 정품 인증 Murine 모델

Research on B cells has shown that CD40 activation improves their antigen presentation capacity. When stimulated with interleukin-4 and CD40 ligand ...

연구

면역학 및 감염병학

Orthotopic Hind-Limb Transplantation in Rats

쥐에서 Orthotopic 힌드 - 림브 이식

Composite tissue allotransplantation (CTA) now represents a valid therapeutic option after the loss of a hand, forearm or digits and has become a novel ...

An Ex vivo Model of an Oligodendrocyte-directed T-Cell Attack in Acute Brain Slices

An Ex vivo Model of an Oligodendrocyte-directed T-Cell Attack in Acute Brain Slices

<em&gt; 생체 내</em&gt; 급성 뇌 조각의 희소 돌기 아교 세포 지시 T 세포 공격의 모델

Death of oligodendrocytes accompanied by destruction of neurons and axons are typical histopathological findings in cortical and subcortical grey matter ...

Assessing Bacterial Invasion of Cardiac Cells in Culture and Heart Colonization in Infected Mice Using Listeria monocytogenes

Assessing Bacterial Invasion of Cardiac Cells in Culture and Heart Colonization in Infected Mice Using Listeria monocytogenes

리스테리아 단세포 유전자를 사용하여 감염된 마우스에 있는 문화와 심혼 식민지에 있는 심장 세포의 세균성 침략 평가

Listeria monocytogenes is a Gram-positive facultative intracellular pathogen that is capable of causing serious invasive infections in immunocompromised ...

Normal and Malignant Muscle Cell Transplantation into Immune Compromised Adult Zebrafish

면역이 저하 된 성인 Zebrafish의에 정상 및 악성 근육 세포 이식

Zebrafish have become a powerful tool for assessing development, regeneration, and cancer. More recently, allograft cell transplantation protocols have ...

An Endothelial Planar Cell Model for Imaging Immunological Synapse Dynamics

이미징 면역 시냅스 역학에 대한 내피 평면 셀 모델

Adaptive immunity is regulated by dynamic interactions between T cells and antigen presenting cells (&#39;APCs&#39;) referred to as &#39;immunological ...

Establishment of a High-throughput Setup for Screening Small Molecules That Modulate c-di-GMP Signaling in Pseudomonas aeruginosa

Establishment of a High-throughput Setup for Screening Small Molecules That Modulate c-di-GMP Signaling in Pseudomonas aeruginosa

변조 C 디 GMP가에서 시그널링 그건 작은 분자를 스크리닝하기위한 높은 처리량 설정 구축<em&gt; 녹농균</em

Bacterial resistance to traditional antibiotics has driven research attempts to identify new drug targets in recently discovered regulatory pathways. ...

Isolation and Identification of Extravascular Immune Cells of the Heart

절연 및 심장의 Extravascular 면역 세포의 식별

The immune system is an essential component of a healthy heart. The myocardium is home to a rich population of different immune cell subsets with ...

Optimization of the Cuff Technique for Murine Heart Transplantation

뮤린 심장 이식을 위한 커프 기술의 최적화

Murine cardiac transplantation has been performed for more than 40 years. With advancements in microsurgery, certain new techniques have been used to ...

Visualization of SARS-CoV-2 using Immuno RNA-Fluorescence In Situ Hybridization

시투 혼성화에서 면역 RNA-형광을 이용한 SARS-CoV-2의 시각화

This manuscript provides a protocol for in situ hybridization chain reaction (HCR) coupled with immunofluorescence to visualize severe acute respiratory ...