Name: high-frequency ultrasound echocardiography to assess zebrafish cardiac function
Uploaded: 2020-03-12T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about High-Frequency Ultrasound Echocardiography to Assess Zebrafish Cardiac Function at JoVE.com

نشكر دعم فريد روبرتس التقني وتنقيحه للمخطوطة.

تمت الموافقة على جميع الإجراءات التي تنطوي على حمار وحشي من قبل لجنة رعاية الحيوانات المؤسسية والاستخدام وهي متوافقة مع قانون رعاية الحيوان في وزارة الزراعة الأميركية.
1- الإعداد التجريبي
<ol><li>
إعداد النظام الأساسي للحصول على الصور
	<ol>
<li>باستخدام مقص صغير أو مشرط ...

<ol>
	<li>Santoriello, C., Zon, L. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hooked!+Modeling+human+disease+in+zebrafish.">Hooked! Modeling human disease in zebrafish.</a> Journal of Clinical Investigation. 122 (7), 2337-2343 (2012).</li><li>Verkerk, A. O., Remme, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish:+a+novel+research+tool+for+cardiac+(patho)electrophysiology+and+ion+channel+disorders.">Zebrafish: a novel research tool for cardiac (patho)electrophysiology and ion channel disorders.</a> Frontiers in Physiology. 3, 255 (2012).</li><li>Bakkers, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+as+a+model+to+study+cardiac+development+and+human+cardiac+disease.">Zebrafish as a model to study cardiac development and human cardiac disease.</a> Cardiovascular research. 91 (2), 279-288 (2011).</li><li>Poon, K. L., Brand, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+zebrafish+model+system+in+cardiovascular+research:+A+tiny+fish+with+mighty+prospects.">The zebrafish model system in cardiovascular research: A tiny fish with mighty prospects.</a> Global Cardiology Science and Practise. 2013 (1), 9-28 (2013).</li><li>Jopling, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+heart+regeneration+occurs+by+cardiomyocyte+dedifferentiation+and+proliferation.">Zebrafish heart regeneration occurs by cardiomyocyte dedifferentiation and proliferation.</a> Nature. 464 (7288), 606-609 (2010).</li><li>Mishra, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+model+of+amyloid+light+chain+cardiotoxicity:+regeneration+versus+degeneration.">Zebrafish model of amyloid light chain cardiotoxicity: regeneration versus degeneration.</a> American Journal of Physiology Heart Circulatory Physiology. 316 (5), H1158-H1166 (2019).</li><li>Shin, J. T., Pomerantsev, E. V., Mably, J. D., MacRae, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+cardiovascular+function+confirms+functional+orthology+of+myocardial+contractility+pathways+in+zebrafish.">High-resolution cardiovascular function confirms functional orthology of myocardial contractility pathways in zebrafish.</a> Physiologycal Genomics. 42 (2), 300-309 (2010).</li><li>Mishra, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+amyloidogenic+light+chain+proteins+result+in+cardiac+dysfunction,+cell+death,+and+early+mortality+in+zebrafish.">Human amyloidogenic light chain proteins result in cardiac dysfunction, cell death, and early mortality in zebrafish.</a> American Journal of Physiology Heart Circulatory Physiology. 305 (1), H95-H103 (2013).</li><li>Ernens, I., Lumley, A. I., Devaux, Y., Wagner, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+Coronary+Ultrasound+Imaging+to+Evaluate+Ventricular+Function+in+Adult+Zebrafish.">Use of Coronary Ultrasound Imaging to Evaluate Ventricular Function in Adult Zebrafish.</a> Zebrafish. 13 (6), 477-480 (2016).</li><li>Gonz&#225;lez-Rosa, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+Echocardiography+Reveals+Reestablishment+of+Ventricular+Pumping+Efficiency+and+Partial+Ventricular+Wall+Motion+Recovery+upon+Ventricular+Cryoinjury+in+the+Zebrafish.">Use of Echocardiography Reveals Reestablishment of Ventricular Pumping Efficiency and Partial Ventricular Wall Motion Recovery upon Ventricular Cryoinjury in the Zebrafish.</a> PLoS One. 9 (12), (2014).</li><li>Huang, C. C., Su, T. H., Shih, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+tissue+Doppler+imaging+of+the+zebrafish+heart+during+its+regeneration.">High-resolution tissue Doppler imaging of the zebrafish heart during its regeneration.</a> Zebrafish. 12 (1), 48-57 (2015).</li><li>Kang, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-frequency+dual+mode+pulsed+wave+Doppler+imaging+for+monitoring+the+functional+regeneration+of+adult+zebrafish+hearts.">High-frequency dual mode pulsed wave Doppler imaging for monitoring the functional regeneration of adult zebrafish hearts.</a> Journal of the Royal Society Interface. 12 (103), (2015).</li><li>Lee, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemodynamics+and+ventricular+function+in+a+zebrafish+model+of+injury+and+repair.">Hemodynamics and ventricular function in a zebrafish model of injury and repair.</a> Zebrafish. 11 (5), 447-454 (2014).</li><li>Sun, L., Lien, C. L., Xu, X., Shung, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+Vivo+Cardiac+Imaging+of+Adult+Zebrafish+Using+High+Frequency+Ultrasound+(45-75+MHz).">In Vivo Cardiac Imaging of Adult Zebrafish Using High Frequency Ultrasound (45-75 MHz).</a> Ultrasound in Medicine and Biology. 34 (1), 31-39 (2008).</li><li>Wang, L. W., Kesteven, S. H., Huttner, I. G., Feneley, M. P., Fatkin, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-Frequency+Echocardiography-+Transformative+Clinical+and+Research+Applications+in+Humans,+Mice,+and+Zebrafish.">High-Frequency Echocardiography- Transformative Clinical and Research Applications in Humans, Mice, and Zebrafish.</a> Circulation Journal. 82 (3), 620-628 (2018).</li><li>Wang, L. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardized+echocardiographic+assessment+of+cardiac+function+in+normal+adult+zebrafish+and+heart+disease+models.">Standardized echocardiographic assessment of cardiac function in normal adult zebrafish and heart disease models.</a> Disease Models &amp; Mechanisms. 10 (1), 63 (2017).</li><li>Lee, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+Assessment+of+Cardiac+Responses+of+Adult+Zebrafish+(Danio+rerio)+to+Acute+and+Chronic+Temperature+Change+Using+High-Resolution+Echocardiography.">Functional Assessment of Cardiac Responses of Adult Zebrafish (Danio rerio) to Acute and Chronic Temperature Change Using High-Resolution Echocardiography.</a> PLOS ONE. 11 (1), e0145163 (2016).</li><li>Genge, C. E., et al., Nilius, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Reviews of Physiology, Biochemistry and Pharmacology. 171, 99-136 (2016).</li></ol>

نحن نصف طريقة منهجية لتصوير صدى القلب وتقييم وظيفة القلب في سمك الحمار الوحشي الكبار. تخطيط صدى القلب هو الأسلوب الوحيد المتاح غير الغازية والأكثر قوة لتصوير القلب الأسماك البالغة الحية والتحليل الوظيفي، وأنها أصبحت شعبية متزايدة في أبحاث القلب والأوعية الدموية حمار وحشي. مقدار الوقت ال...

وحمار وحشي(Danio rerio)هو نموذج الفقاريات راسخة لدراسات عمليات التنمية والأمراض البشرية1. وللحمار الوحشي تشابه وراثي كبير مع البشر (70%)، وقابلية للحصول على السمية الوراثية، وخصوبة عالية، وشفافية بصرية أثناء التطور الجنيني، مما يسمح بالتحليل البصري المباشر للأعضاء والأنسجة، بما في ذلك القلب. على الرغم من وجود الأذين واحد فقط والبطين واحد، وقلب حمار وحشي(الشكل 1)يشبه من الناحية الفسيولوجية إلى قلوب الثدييات أربع غرف. الأهم من ذلك ، فإن معدل ضربات القلب حمار وحشي ، ومورفولوجيا تخطيط القلب ، وشكل العمل المحتمل تشبه تلك التي من البشر أكثر من أنواع المورين2. وقد جعلت هذه الميزات حمار وحشي نموذجا ممتازا لأبحاث القلب والأوعية الدموية وقدمت رؤى رئيسية في تطور القلب3،4، تجديد5، والظروف المرضية1،3،4، بما في ذلك تصلب الشرايين ، اعتلال عضلة القلب ، عدم انتظام ضربات القلب ، أمراض القلب الخلقية ، وسلسلة الأميلويد الضوئية السمية القلبية1،4،6. وقد تم تقييم وظيفة القلب ممكن خلال المرحلة الجنينية (1 أيام بعد الإخصاب) من خلال تحليل الفيديو المباشر باستخدام المجهر الفيديو عالية السرعة7،8. ومع ذلك، تفقد سمك الحمار الوحشي شفافيتها خارج المرحلة الجنينية، مما يحد من التقييمات الوظيفية للقلوب الناضجة العادية وأمراض القلب المتأخرة. للتغلب على هذا القيد ، تم استخدام تخطيط صدى القلب بنجاح كبديل تصويري عالي الدقة وفي الوقت الحقيقي وغير باضع لتقييم وظيفة قلب الحمار الوحشي البالغ9،10،11،12،13،14،15.
في حمار وحشي، يقع القلب ventrally في تجويف الصدر الخلفي مباشرة إلى الخياشيم مع الأذين تقع الظهر إلى البطين. يجمع الأذين الدم الوريدي من الوريد الالجيوب الأنفية وينقلها إلى البطين حيث يتم ضخه إلى الشرايين اللمبية(الشكل 1). هنا، نصف بروتوكول فسيولوجية تحت الماء لتقييم وظيفة القلب في سمك الحمار الوحشي البالغ عن طريق تخطيط صدى القلب غير الغازيباستخدام مسبار الموجات فوق الصوتية الصفيف الخطي مع تردد مركز 50 ميغاهرتز للتصوير B-الوضع بدقة 30 ميكرومتر. منذ الموجات فوق الصوتية يمكن السفر بسهولة من خلال المياه، والحفاظ على القرب بين الأسماك ومسبار المسح تحت الماء يوفر ما يكفي من سطح الاتصال للكشف عن القلب مع عدم الحاجة إلى هلام الموجات فوق الصوتية وعموما أقل إرهاقا للأسماك. على الرغم من أن تم الإبلاغ عن أنظمة تخطيط صدى صدى الحمار الوحشي البديلة من قبل العديد من المؤلفين9،12،13، هنا نقدم الإعداد العام والأكثر استخدامًا الذي ينطبق على الموجات فوق الصوتية عالية التردد في الحيوانات.
تسمح هذه الطريقة بالتصوير عالي الدقة لقلب سمك الحمار الوحشي البالغ ، وتتبع هياكل القلب ، وقياس سرعات الذروة من قياسات تدفق الدم دوبلر. نظهر موثوقية في القياس الكمي الجسمي للمعلمات الانقباضي والانبساطي الهامة، مثل كسر القذف (EF)، وتغيير المنطقة الكسرية (FAC)، وتدفق الدم البطيني وسرعات التدفق، ومعدل ضربات القلب (HR)، وناتج القلب (CO). نحن نساهم في إنشاء مجموعة موثوقة من المعلمات القلبية والوظائف والأبعاد الصحية للبالغين العاديين للسماح بإجراء تقييم أكثر دقة للحالات المرضية. عموما، ونحن نقدم طريقة قوية لتقييم وظيفة القلب في حمار وحشي، والتي أثبتت مفيدة للغاية6في إنشاء والتحقق من صحة نماذج أمراض القلب حمار وحشي6،16،إصابة القلب والانتعاش10،,13،وتجديد11،,12،ويمكن استخدامها كذلك لتقييم الأدوية المحتملة.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Double sided tape</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fish net</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass container - 100 inch high</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High frequency transducer</td>
			<td>Fujifilm/VisualSonics</td>
			<td>MX700</td>
			<td>Band width 29-71 MHz, Centre transmit 50 MHz, Axial resolution 30 &#181;m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic teaspoon</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel or scissors</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small fish tanks</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sponge (kitchen sponge)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transfer pipets (graduated 3 mL)</td>
			<td>Samco Scientific</td>
			<td>212</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tricaine (MS-222)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A5040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vevo 3100 Imaging system and imaging station</td>
			<td>Fujifilm/VisualSonics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vevo LAB sofware v 1.7.1</td>
			<td>Fujifilm/VisualSonics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

high-frequency ultrasound echocardiography to assess zebrafish cardiac function

أصبح حمار وحشي(Danio rerio)كائنًا نموذجيًا شائعًا جدًا في أبحاث القلب والأوعية الدموية ، بما في ذلك أمراض القلب البشري ، ويرجع ذلك إلى حد كبير إلى شفافيته الجنينية ، وقابلية النقل الجينية ، ووسائل الراحة للدراسات السريعة عالية الإنتاجية. ومع ذلك ، فإن فقدان الشفافية يحد من تحليل وظائف القلب في مرحلة البالغين ، مما يعقد نمذجة أمراض القلب المرتبطة بالعمر. للتغلب على هذه القيود ، يظهر تصوير صدى القلب بالموجات فوق الصوتية عالي التردد في سمك الحمار الوحشي كخيار قابل للتطبيق. هنا، نقدم بروتوكول مفصل لتقييم وظيفة القلب في سمك الحمار الوحشي الكبار عن طريق تخطيط صدى القلب غير الغازية باستخدام الموجات فوق الصوتية عالية التردد. تسمح الطريقة بتصور وتحليل بُعد قلب الحمار الوحشي وقياس المعلمات الوظيفية الهامة ، بما في ذلك معدل ضربات القلب وحجم السكتة الدماغية والإخراج القلبي وجزء القذف. في هذه الطريقة ، يتم تم ّت ّ تَدْوّر السمكَ وتبقى تحت الماء، ويمكن استردادها بعد العملية. على الرغم من أن الموجات فوق الصوتية عالية التردد هي تقنية مكلفة ، يمكن استخدام نفس منصة التصوير لأنواع مختلفة (على سبيل المثال ، المورين وسمك الحمار الوحشي) عن طريق تكييف محولات مختلفة. تصوير صدى القلب حمار وحشي هو طريقة قوية لفينوبة القلب، مفيدة في التحقق من صحة وتوصيف نماذج الأمراض، وخاصة الأمراض في وقت متأخر من ظهور; شاشات المخدرات؛ ودراسات من إصابة القلب، والانتعاش، والقدرة على التجديد.

يسمح البروتوكول الموصوف بقياس الأبعاد القلبية المهمة والمعلمات الوظيفية ، على غرار التقنية المستخدمة في تخطيط صدى القلب البشري والحيواني. تسمح صور B-Mode بتتبع الجدار الداخلي البطيني في الانقباض والانانبساط(الشكل 5)والحصول على بيانات الأبعاد ، مثل أبعاد ا...

Watch this Scientific Journal Video about High-Frequency Ultrasound Echocardiography to Assess Zebrafish Cardiac Function at JoVE.com

High-Frequency Ultrasound Echocardiography to Assess Zebrafish Cardiac Function

نحن نصف بروتوكول لتقييم مورفولوجيا القلب ووظيفة في حمار وحشي بالغ باستخدام تخطيط صدى القلب عالي التردد. تسمح الطريقة بتصور القلب والقياس الكمي اللاحق للمعلمات الوظيفية ، مثل معدل ضربات القلب (HR) ، وناتج القلب (CO) ، وتغيير المنطقة الكسرية (FAC) ، وجزء القذف (EF) ، وتدفق الدم وسرعات التدفق إلى الخارج.

تصوير صدى القلب بالموجات فوق الصوتية عالي التردد لتقييم وظيفة القلب في زيبرافيش

The zebrafish (Danio rerio) has become a very popular model organism in cardiovascular research, including human cardiac diseases, largely due to its ...

يسمح البروتوكول بتمثيل وتحليل غير باضع وعالي الدقة لوظيفة قلب سمك الحمار الوحشي البالغ. يمكن استخدام هذه الطريقة للتحقق من نماذج أمراض القلب للبالغين وشاشات الأدوية المحتملة. تسمح هذه التقنية بالتمركز السريع للأسماك للتصوير الصحيح الذي يوفر نتائج دقيقة وقابلة للتكرار.ومن غير باضع وتنفيذها تحت الماء الذي يسمح الانتعاش السريع للأسماك. لإعداد منصة للحصول على صورة، واستخدام مقص صغير أو مشرط لجعل شق على اسفنجة في موقف 12:00. ضع الإسفنج في وعاء زجاجي.باستخدام الشريط على الوجهين، الصق الحاوية الزجاجية التي تحتوي على الإسفنج على منصة الموجات فوق الصوتية. تأكد من أن الحاوية الزجاجية في وسط المنصة ومتعلقة بقوة. إمالة المنصة إلى الأمام حوالي 30 درجة باستخدام مقبض الباب على الجانب الأيسر من حامل المنصة.ملء حاوية زجاجية مع ما يقرب من 200 ملليلتر من المياه نظام الأسماك التي تحتوي على 0.2 ملليغرام لكل ملليلتر tricaine الميثان. إدراج محول داخل حامل ميكرومانيبولاتور على محطة السكك الحديدية العاملة تحويل درجة من محول نحو المشغل. الحفاظ على مجموعة موازية للأرض مع الجانب العامل الطولي فيما يتعلق المرحلة.اترك مساحة كافية على كلا الجانبين 10 سنتيمترات لنظام سكة حديد محولات الان متصل للتحرك على طول محاور x و ص. تسجيل الدخول إلى برنامج التحكم واختيار الماوس الأوعية الدموية الصغيرة. إنشاء دراسة جديدة فضلا عن سلسلة جديدة لكل المستحثة في الدراسة.اضغط على زر الدراسة الجديد الموجود في الجانب الأيسر السفلي من الشاشة على صفحة المتصفح. يبدأ العرض في وضع B. باستخدام شبكة السمك، نقل الأسماك إلى خزان صغير يحتوي على المياه النظام مع 0.2 ملليغرام لكل ملليلتر من tricaine.انتظر حتى يتم تخدير السمك بالكامل بدون حركة أو عدم استجابة للمس. بلطف وبسرعة نقل الأسماك في وعاء زجاجي مع الاسفنج في شق التي أجريت سابقا مع الجانب البطني من الأسماك التي تواجه ما يصل. خفض بلطف محول باستخدام مقبض على نظام السكك الحديدية وضعه طوليا وإغلاق الجانب البطني من الأسماك مع درجة من محول التي تواجه المشغل.اترك 2 إلى 3 ملليمترات من إزالة من الأسماك. ضبط منصة فيما يتعلق محول باستخدام ميكرومانبولاتور في جميع المحاور الثلاثة حتى يتم تصور قلب السمك. بعد ترجمة القلب مباشرة، حدد أو البقاء في وضع B والحد من الحقل عن طريق التكبير في تحقيق نظرة فاحصة على القلب.إذا لزم الأمر، تحسين جودة أو التباين من الصورة عن طريق تعيين النطاق الديناميكي إلى 45 إلى 50 ديسيبل. انتقل إلى عناصر تحكم الوضع B في خيار المزيد من عناصر التحكم ثم احفظ التغيير إلى إعدادات مسبقة لوضع. وضع الضغط المسبقة لوضع لتحديد الصورة الأمثل اقتناء الإعداد في كل مرة قبل البدء في صورة سلسلة جديدة.التقاط العديد من الصور كما هو مرغوب في الطائرة محور طويل. بعد ذلك، التحول إلى دوبلر اللون للكشف عن تدفق الدم والحيازة. باستخدام شاشة اللمس، ضع الربع فوق الصمام الاتوري والطرني وتوطين التدفق الذي يتميز بإشارة اللون الأحمر.قم بتقليل مساحة الربع قدر الإمكان لزيادة معدل الإطار. تنشيط نبض موجة دوبلر التحرك إلى عينة سرعة تدفق الدم البطين. ضع بوابة حجم العينة في مركز الصمام الاتريوفيني الكشف عن السرعة القصوى للتدفق.إشارة اللون الأحمر يصبح أكثر اصفر. ضبط زاوية موجة النبض على الشاشة باستخدام الأصابع بحيث محاذاة مع اتجاه تدفق الدم. اضغط على بدء أو تحديث لبدء أخذ العينات سرعة الدم المتدفقة إلى البطين.تحديد سرعة تدفق عن طريق وضع رباعي دوبلر اللون عند تقاطع بين البطين وبلص وتوطين تدفق. هذا هو المميز من قبل إشارة اللون الأزرق. ضع بوابة حجم العينة مباشرة قبل تقاطع لمبة البطين واضبط خط تصحيح الزاوية ليتناسب مع اتجاه تدفق الدم.ضبط خط الأساس رفعه في لوحة سرعة التدفق من أجل الكشف عن تماما وتتبع قمم إشارة. بمجرد اكتمال عملية الحصول على الصورة، استخدم ملعقة صغيرة ونقل الأسماك إلى مياه مهيّنة منتظمة خالية من الترايكايين واترك الأسماك تتعافى. للمساعدة في الانتعاش، وبخ المياه مرارا وتكرارا على الخياشيم باستخدام ماصة نقل لتعزيز تهوية لنقل المياه والأكسجين.وعادة ما يستغرق 30 ثانية إلى دقيقتين لاستئناف حركة الخياشيم والسباحة. افتح برنامج تحليل الصور. حدد صورة وانقر على أيقونة معالجة الصور.ضبط سطوع الصورة وتباينها للسماح بالتصور الواضح للجدران البطينية أو نمط تدفق الدم. باستخدام صورة الوضع B، افتح القائمة المنسدلة من خيار المحور الطويل على قياسات حزمة القلب. حدد LV تتبع وتتبع الجدار الداخلي البطيني في systole وdiastole للحصول على منطقة البطين في systole والزابسة وحجم الانبساطي ونهاية حجم الانقباضي.في هذه الدراسة، سمحت الصور ب-الوضع لتتبع الجدار الداخلي البطيني في systole وdiastole والحصول على البيانات الأبعاد مثل أبعاد الغرفة والجدار. كما تم الحصول على بيانات وظيفية مثل معدل ضربات القلب وحجم السكتة الدماغية، وإخراج القلب وكذلك معلمات وظيفة البطين الانقباضي بما في ذلك تغيير المنطقة الكسرية وكسر الطرد. كما وفرت القياسات على مستوى الصمام البطيني باستخدام صور وضع دوبلر اللون تدفق البطين وسرعات الدم الخارجة.استنادا إلى صورة دوبلر موجة النبض، ولدت قيمة معدل ضربات القلب عن طريق تتبع ثلاث قمم متتالية تدفق الأبهر. أهم شيء هو وضع منصة الموجات فوق الصوتية والأسماك بشكل صحيح للتصوير الدقيق وتقليل تعرض الأسماك إلى tricaine. وتشمل الطرق الإضافية لدعم هذا الإجراء تخطيط القلب للأسماك للكشف السريع عن خلل القلب مثل عدم انتظام ضربات القلب أو أساليب علم الأنسجة لتقييم بنية أنسجة القلب أو موت الخلايا.هذه التقنيات تسمح بتقييم وظيفة القلب حمار وحشي وإنشاء نمط ظاهري القلب في نماذج أمراض القلب حمار وحشي. كما أنه يسمح لاختبار أدوية جديدة، ودراسة إصابات القلب والقدرة على التجدد. Tricaine MS-222 هو الجلد والعين، ومهيجة الجهاز التنفسي.عند إعداد حل tricaine، يجب أن تشمل معدات الحماية قناع الغبار، درع العين والقفازات.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Generation of Murine Cardiac Pacemaker Cell Aggregates Based on ES-Cell-Programming in Combination with Myh6-Promoter-Selection

جيل من الفئران القلب منظم ضربات القلب المجاميع خلية استنادا ES-الخلوي البرمجة في الجمع مع Myh6-المروج-اختيار

Treatment of the &#8220;sick sinus syndrome&#8221; is based on artificial pacemakers. These bear hazards such as battery failure and infections. Moreover, ...

Contrast Imaging in Mouse Embryos Using High-frequency Ultrasound

التباين التصوير في أجنة الفئران عن طريق الموجات فوق الصوتية عالية التردد

Ultrasound contrast-enhanced imaging can convey essential quantitative information regarding tissue vascularity and perfusion and, in targeted ...

Using Touch-evoked Response and Locomotion Assays to Assess Muscle Performance and Function in Zebrafish

عن طريق الاستجابة أثار اللمس والحركة فحوصات لتقييم أداء العضلات وظيفة في الزرد

Zebrafish muscle development is highly conserved with mammalian systems making them an excellent model to study muscle function and disease. Many ...

Building Finite Element Models to Investigate Zebrafish Jaw Biomechanics

بناء نماذج العناصر المحدودة المعنية بالتحقيق في الزرد الفك الميكانيكا الحيوية

Skeletal morphogenesis occurs through tightly regulated cell behaviors during development; many cell types alter their behavior in response to mechanical ...

Acute and Chronic Models of Hyperglycemia in Zebrafish: A Method to Assess the Impact of Hyperglycemia on Neurogenesis and the Biodistribution of Radiolabeled Molecules

نماذج الحادة والمزمنة من ارتفاع السكر في الدم في الزرد: وهناك طريقة لتقييم تأثير ارتفاع السكر في الدم على الخلايا العصبية و بيوديستريبوتيون من راديولابيلد الجزيئات

Hyperglycemia is a major health issue that leads to cardiovascular and cerebral dysfunction. For instance, it is associated with increased neurological ...

A Novel Use of Three-dimensional High-frequency Ultrasonography for Early Pregnancy Characterization in the Mouse

استخدام الموجات فوق الصوتية عالية التردد ثلاثي الأبعاد رواية لتوصيف الحمل المبكر في الماوس

High-frequency ultrasonography (HFUS) is a common method to non-invasively monitor the real-time development of the human fetus in utero. The mouse is ...

Fetal Mouse Cardiovascular Imaging Using a High-frequency Ultrasound (30/45MHZ) System

Fetal Mouse Cardiovascular Imaging Using a High-frequency Ultrasound 30/45MHZ System

القلب والأوعية الدموية التصوير باستخدام نظام الموجات فوق الصوتية عالية التردد (MHZ 30/45) الجنينية الماوس

Congenital heart defects (CHDs) are the most common cause of childhood morbidity and early mortality. Prenatal detection&#160;of the underlying molecular ...

High Frequency Ultrasound for the Analysis of Fetal and Placental Development In Vivo

High Frequency Ultrasound for the Analysis of Fetal and Placental Development In Vivo

الموجات فوق الصوتية عالية التردد لتحليل وضع الجنين والمشيمة في فيفو

Ultrasound imaging is a widespread method used to detect organ anomalies and tumors in human and animal tissues. The method is non-invasive, harmless, and ...

A Direct and Simple Method to Assess Drosophila melanogaster's Viability from Embryo to Adult

A Direct and Simple Method to Assess Drosophila melanogaster's Viability from Embryo to Adult

طريقة مباشرة وبسيطة لتقييم قدرة دروسوفيلا ميلانوغاسترعلى البقاء من الجنين إلى الكبار

In Drosophila melanogaster, viability assays are used to determine the fitness of certain genetic backgrounds. Allelic variations can result in partial or ...

Whole-Mount In Situ Hybridization in Zebrafish Embryos and Tube Formation Assay in iPSC-ECs to Study the Role of Endoglin in Vascular Development

التهجين الكامل في الموقع في أجنة حمار وحشي وأنبوب تشكيل اساي في iPSC-ECs لدراسة دور Endoglin في التنمية الوعائية

Vascular development is determined by the sequential expression of specific genes, which can be studied by performing in situ hybridization assays in ...