Name: high-frequency ultrasound echocardiography to assess zebrafish cardiac function
Uploaded: 2020-03-12T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about High-Frequency Ultrasound Echocardiography to Assess Zebrafish Cardiac Function at JoVE.com

Vi takker Fred Roberts' tekniske støtte og revision af manuskriptet.

Alle procedurer, der involverer zebrafisk blev godkendt af vores institutionelle Animal Care and Use Udvalg og er i overensstemmelse med USDA Animal Welfare Act.
1. Eksperimentel opsætning
<ol><li>
Opsætning af platformen til billedanskaffelse
	<ol>
<li>Ved hjælp af små saks eller en skalpel gøre et snit på en svamp på 12:00 position til at holde fiskunder scanning. Svampen anbringes i en glasbeholder (figur 2A). BEMÆ...

<ol>
	<li>Santoriello, C., Zon, L. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hooked!+Modeling+human+disease+in+zebrafish.">Hooked! Modeling human disease in zebrafish.</a> Journal of Clinical Investigation. 122 (7), 2337-2343 (2012).</li><li>Verkerk, A. O., Remme, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish:+a+novel+research+tool+for+cardiac+(patho)electrophysiology+and+ion+channel+disorders.">Zebrafish: a novel research tool for cardiac (patho)electrophysiology and ion channel disorders.</a> Frontiers in Physiology. 3, 255 (2012).</li><li>Bakkers, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+as+a+model+to+study+cardiac+development+and+human+cardiac+disease.">Zebrafish as a model to study cardiac development and human cardiac disease.</a> Cardiovascular research. 91 (2), 279-288 (2011).</li><li>Poon, K. L., Brand, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+zebrafish+model+system+in+cardiovascular+research:+A+tiny+fish+with+mighty+prospects.">The zebrafish model system in cardiovascular research: A tiny fish with mighty prospects.</a> Global Cardiology Science and Practise. 2013 (1), 9-28 (2013).</li><li>Jopling, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+heart+regeneration+occurs+by+cardiomyocyte+dedifferentiation+and+proliferation.">Zebrafish heart regeneration occurs by cardiomyocyte dedifferentiation and proliferation.</a> Nature. 464 (7288), 606-609 (2010).</li><li>Mishra, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+model+of+amyloid+light+chain+cardiotoxicity:+regeneration+versus+degeneration.">Zebrafish model of amyloid light chain cardiotoxicity: regeneration versus degeneration.</a> American Journal of Physiology Heart Circulatory Physiology. 316 (5), H1158-H1166 (2019).</li><li>Shin, J. T., Pomerantsev, E. V., Mably, J. D., MacRae, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+cardiovascular+function+confirms+functional+orthology+of+myocardial+contractility+pathways+in+zebrafish.">High-resolution cardiovascular function confirms functional orthology of myocardial contractility pathways in zebrafish.</a> Physiologycal Genomics. 42 (2), 300-309 (2010).</li><li>Mishra, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+amyloidogenic+light+chain+proteins+result+in+cardiac+dysfunction,+cell+death,+and+early+mortality+in+zebrafish.">Human amyloidogenic light chain proteins result in cardiac dysfunction, cell death, and early mortality in zebrafish.</a> American Journal of Physiology Heart Circulatory Physiology. 305 (1), H95-H103 (2013).</li><li>Ernens, I., Lumley, A. I., Devaux, Y., Wagner, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+Coronary+Ultrasound+Imaging+to+Evaluate+Ventricular+Function+in+Adult+Zebrafish.">Use of Coronary Ultrasound Imaging to Evaluate Ventricular Function in Adult Zebrafish.</a> Zebrafish. 13 (6), 477-480 (2016).</li><li>Gonz&#225;lez-Rosa, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+Echocardiography+Reveals+Reestablishment+of+Ventricular+Pumping+Efficiency+and+Partial+Ventricular+Wall+Motion+Recovery+upon+Ventricular+Cryoinjury+in+the+Zebrafish.">Use of Echocardiography Reveals Reestablishment of Ventricular Pumping Efficiency and Partial Ventricular Wall Motion Recovery upon Ventricular Cryoinjury in the Zebrafish.</a> PLoS One. 9 (12), (2014).</li><li>Huang, C. C., Su, T. H., Shih, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+tissue+Doppler+imaging+of+the+zebrafish+heart+during+its+regeneration.">High-resolution tissue Doppler imaging of the zebrafish heart during its regeneration.</a> Zebrafish. 12 (1), 48-57 (2015).</li><li>Kang, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-frequency+dual+mode+pulsed+wave+Doppler+imaging+for+monitoring+the+functional+regeneration+of+adult+zebrafish+hearts.">High-frequency dual mode pulsed wave Doppler imaging for monitoring the functional regeneration of adult zebrafish hearts.</a> Journal of the Royal Society Interface. 12 (103), (2015).</li><li>Lee, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemodynamics+and+ventricular+function+in+a+zebrafish+model+of+injury+and+repair.">Hemodynamics and ventricular function in a zebrafish model of injury and repair.</a> Zebrafish. 11 (5), 447-454 (2014).</li><li>Sun, L., Lien, C. L., Xu, X., Shung, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+Vivo+Cardiac+Imaging+of+Adult+Zebrafish+Using+High+Frequency+Ultrasound+(45-75+MHz).">In Vivo Cardiac Imaging of Adult Zebrafish Using High Frequency Ultrasound (45-75 MHz).</a> Ultrasound in Medicine and Biology. 34 (1), 31-39 (2008).</li><li>Wang, L. W., Kesteven, S. H., Huttner, I. G., Feneley, M. P., Fatkin, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-Frequency+Echocardiography-+Transformative+Clinical+and+Research+Applications+in+Humans,+Mice,+and+Zebrafish.">High-Frequency Echocardiography- Transformative Clinical and Research Applications in Humans, Mice, and Zebrafish.</a> Circulation Journal. 82 (3), 620-628 (2018).</li><li>Wang, L. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardized+echocardiographic+assessment+of+cardiac+function+in+normal+adult+zebrafish+and+heart+disease+models.">Standardized echocardiographic assessment of cardiac function in normal adult zebrafish and heart disease models.</a> Disease Models &amp; Mechanisms. 10 (1), 63 (2017).</li><li>Lee, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+Assessment+of+Cardiac+Responses+of+Adult+Zebrafish+(Danio+rerio)+to+Acute+and+Chronic+Temperature+Change+Using+High-Resolution+Echocardiography.">Functional Assessment of Cardiac Responses of Adult Zebrafish (Danio rerio) to Acute and Chronic Temperature Change Using High-Resolution Echocardiography.</a> PLOS ONE. 11 (1), e0145163 (2016).</li><li>Genge, C. E., et al., Nilius, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Reviews of Physiology, Biochemistry and Pharmacology. 171, 99-136 (2016).</li></ol>

Vi beskriver en systematisk metode til ekkokardiografisk billeddannelse og vurdering af hjertefunktion hos voksne zebrafisk. Ekkokardiografi er den eneste tilgængelige ikke-invasive og mest robuste metode til levende voksne fisk hjertebilleddannelse og funktionel analyse, og det bliver stadig mere populær i zebrafisk hjerte-kar-forskning. Den tid, der er behov for, er kort og giver mulighed for høj-throughput og langsgående undersøgelser. Der er imidlertid betydelige forskelle i den anvendte metode og dataanalysen. ...

Zebrafisken (Danio rerio) er en veletableret hvirveldyrmodel for undersøgelser af udviklingsprocesser og sygdomme hos mennesker1. Zebrafisk har høj genetisk lighed med mennesker (70%), genetisk tractability, høj frugtbarhed, og optisk gennemsigtighed under embryonale udvikling, som giver mulighed for direkte visuel analyse af organer og væv, herunder hjertet. På trods af kun at have et atrium og en ventrikel, zebrafisk hjerte (Figur 1) er fysiologisk ligner pattedyr fire-chambered hjerter. Vigtigere er det, zebrafisk puls, elektrokardiogram morfologi, og handling potentielle form ligner dem af mennesker mere end murine arter2. Disse funktioner har gjort zebrafisk en fremragende model for hjerte-kar-forskning og har givet stor indsigt i hjerteudvikling3,4, regenerering5, og patologiske betingelser1,,3,,4, herunder åreforkalkning, kardiomyopatier, arytmier, medfødte hjertesygdomme, og amyloid lyskæde kardiotoksicitet1,4,6. Vurdering af hjertefunktion har været mulig i fosterstadiet (1 dage efter befrugtning) gennem direkte videoanalyse ved hjælp af højhastighedsvideomikroskopi7,8. Zebrafisk mister dog deres gennemsigtighed ud over fosterstadiet, hvilket begrænser funktionelle evalueringer af normale modne hjerter og sene hjertesygdomme. For at overvinde denne begrænsning er ekkokardiografi med succes blevet anvendt som et a-løsningsalternativ i realtid , noninvasive imaging til vurdering af voksne zebrafiskhjertefunktion9,10,11,12,13,14,15.
I zebrafisk, er hjertet placeret ventrally i brysthulen umiddelbart efter gællerne med atrium placeret dorsal til hjertetrikel. Atriet indsamler venøs blod fra sinus venosus og overfører det til hjertekammer, hvor det er yderligere pumpes til bulbus arteriosus (Figur 1). Her beskriver vi en fysiologisk, undersøisk protokol til vurdering af hjertefunktion hos voksne zebrafisk ved ikke-invasiv ekkokardiografi ved hjælp af en lineær array ultralydssonde med en centerfrekvens på 50 MHz for B-tilstandsbilleddannelse ved en opløsning på 30 μm. Da ultralydbølger nemt kan rejse gennem vand, giver det at holde nærhed mellem fisken og scanningsonden under vandet nok kontaktflade til hjertedetektering uden behov for ultralydsgel og er generelt mindre stressende for fisken. Selv om alternative zebrafisk ekkokardiografi systemer blev rapporteret af flere forfattere9,12,13, her præsenterer vi den generelle og mest almindeligt anvendte setup, der gælder for højfrekvente ultralyd hos dyr.
Metoden giver mulighed for høj opløsning billeddannelse af den voksne zebrafisk hjerte, sporing af hjertestrukturer, og kvantificering af peak-hastigheder fra Doppler blodgennemstrømning målinger. Vi viser pålidelig in vivo-kvantificering af vigtige systoliske og diastoliske parametre, såsom udslyngningsfraktion (EF), fraktioneret områdeændring (FAC), ventrikulær blodindstrømning og udstrømningshastigheder, puls (HR) og hjerteoutput (CO). Vi bidrager til at etablere et pålideligt udvalg af normale raske voksne zebrafisk hjertefunktionelle og dimensionelle parametre for at muliggøre en mere præcis evaluering af patologiske tilstande. Samlet set tilbyder vi en robust metode til at vurdere hjertefunktion hos zebrafisk, som har vist sig yderst nyttig til at etablere og validere zebrafisk hjertesygdom modeller6,16, hjerteskade og nyttiggørelse10,13, og regenerering11,12, og kan yderligere bruges til at vurdere potentielle lægemidler.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Double sided tape</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fish net</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass container - 100 inch high</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High frequency transducer</td>
			<td>Fujifilm/VisualSonics</td>
			<td>MX700</td>
			<td>Band width 29-71 MHz, Centre transmit 50 MHz, Axial resolution 30 &#181;m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic teaspoon</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel or scissors</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small fish tanks</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sponge (kitchen sponge)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transfer pipets (graduated 3 mL)</td>
			<td>Samco Scientific</td>
			<td>212</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tricaine (MS-222)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A5040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vevo 3100 Imaging system and imaging station</td>
			<td>Fujifilm/VisualSonics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vevo LAB sofware v 1.7.1</td>
			<td>Fujifilm/VisualSonics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

high-frequency ultrasound echocardiography to assess zebrafish cardiac function

Zebrafisken (Danio rerio) er blevet en meget populær model organisme i hjerte-kar-forskning, herunder menneskelige hjertesygdomme, hovedsagelig på grund af sin embryonale gennemsigtighed, genetiske tractability, og faciliteter til hurtige, høj-throughput undersøgelser. Men tabet af gennemsigtighed begrænser hjertefunktionsanalyse på voksenstadiet, hvilket komplicerer modelleringen af aldersrelaterede hjertesygdomme. For at overvinde sådanne begrænsninger, højfrekvente ultralyd ekkokardiografi i zebrafisk er ved at opstå som en farbar vej. Her præsenterer vi en detaljeret protokol til vurdering af hjertefunktion hos voksne zebrafisk ved ikke-invasiv ekkokardiografi ved hjælp af højfrekvent ultralyd. Metoden giver mulighed for visualisering og analyse af zebrafisk hjertedimension og kvantificering af vigtige funktionelle parametre, herunder puls, slagtilfælde volumen, hjerte-output, og udslyngning fraktion. Ved denne metode, fiskene er bestøvet og holdes under vandet og kan inddrives efter proceduren. Selvom højfrekvent ultralyd er en dyr teknologi, kan den samme billeddannelsesplatform bruges til forskellige arter (f.eks. murine og zebrafisk) ved at tilpasse forskellige transducers. Zebrafisk ekkokardiografi er en robust metode til hjertefænotypebestemmelse, nyttig i validering og karakterisering af sygdomsmodeller, især sene debut sygdomme; narkotika skærme; undersøgelser af hjerteskade, restitution og regenerativ kapacitet.

Den beskrevne protokol giver mulighed for måling af vigtige hjertedimensionelle og funktionelle parametre, svarende til den teknik, der anvendes i human- og dyreekkokardiografi. B-mode billederne giver mulighed for sporing af ventrikulær indre væg i systoli og diastol (Figur 5) og opnåelse af dimensionelle data, såsom kammer og væg dimensioner, og funktionelle data, såsom puls, slagtilfælde volumen, og hjerteoutput samt parametre for ventrikulær syst...

Watch this Scientific Journal Video about High-Frequency Ultrasound Echocardiography to Assess Zebrafish Cardiac Function at JoVE.com

High-Frequency Ultrasound Echocardiography to Assess Zebrafish Cardiac Function

Vi beskriver en protokol til vurdering af hjertemorfologi og funktion hos voksne zebrafisk ved hjælp af højfrekvent ekkokardiografi. Metoden gør det muligt at visualiseringe hjertet og efterfølgende kvantificering af funktionelle parametre, såsom puls (HR), hjerteoutput (CO), fraktioneret områdeændring (FAC), udslyngningsfraktion (EF) og blodindstrømnings- og udstrømningshastigheder.

Højfrekvent ultralyd ekkokardiografi til vurdering zebrafisk hjertefunktion

The zebrafish (Danio rerio) has become a very popular model organism in cardiovascular research, including human cardiac diseases, largely due to its ...

Protokollen tillader noninvasive og høj opløsning repræsentation og analyse af voksne zebrafisk hjertefunktion. Denne metode kan bruges til validering af voksne hjertesygdomme modeller og potentielle narkotika skærme. Denne teknik gør det muligt hurtigt at placere fisken for korrekt billeddannelse, hvilket giver nøjagtige og reproducerbare resultater.Det er noninvasive og udføres under vandet, som giver mulighed for hurtig genopretning af fisken. For at oprette platformen for billedet erhvervelse, skal du bruge små saks eller en skalpel til at foretage et snit på en svamp på 12 klokken position. Læg svampen i en glasbeholder.Ved hjælp af dobbeltsidet tape anbringes glasbeholderen, der indeholder svampen på ultralydsplatformen. Sørg for, at glasbeholderen er i midten af platformen og sidder godt fast. Vip platformen ca. 30 grader ved hjælp af knappen på venstre side af platformsholderen.Glasbeholderen fyldes med ca. 200 milliliter vand i fiskesystemet, der indeholder 0,2 mg pr. milliliter tricainmetansulfonat. Sæt transduceren i mikromanipulatorholderen på arbejdsbanestationen, der drejer transducerens hak mod operatøren. Hold arrayet parallelt med jorden med arbejdssiden i længderetningen med hensyn til scenen.Lad plads nok omkring 10 centimeter på begge sider for den nu tilsluttede transducer jernbanesystem til at bevæge sig langs x og y-akser. Log ind på kontrol-softwaren og vælg musen små vaskulære. Opret en ny undersøgelse samt en ny serie for hvert dyr induceret i undersøgelsen.Tryk på den nye studieknap nederst til venstre på skærmen på browsersiden. Visningen starter i B-tilstand. Ved hjælp af et fiskenet overføres fisken til en lille tank, der indeholder systemvand med 0,2 mg pr. milliliter tricain.Vent, indtil fisken er fuldt bedøvet uden bevægelse eller ingen reaktion på berøring. Forsigtigt og hurtigt overføre fisken i glasbeholderen med svampen i det tidligere gjort snit med ventrale side af fisken vender opad. Sænk forsigtigt transduceren ved hjælp af håndtaget på skinnesystemet, der placerer den i længderetningen, og luk fiskenes ventrale side med transducerens hak mod operatøren.Lad to til tre millimeter af clearance fra fisken. Juster platformen i forhold til transduceren ved hjælp af mikromanipulatoren i alle tre akser, indtil fiskehjertet visualiseres. Umiddelbart efter lokalisering af hjertet, skal du vælge eller blive i B-mode og reducere feltet ved at zoome ind for at opnå et nærmere kig på hjertet.Hvis det er nødvendigt, skal du forbedre billedets kvalitet eller kontrast ved at indstille det dynamiske område til 45 til 50 decibel. Gå til kontrolelementet B-tilstand i indstillingen Flere kontrolelementer, og gem efterfølgende forudindstillingerne for ændring af tilstand. Tryk på forudindstillinger i tilstand for at vælge indstillingen for optimeret billedoptagelse hver gang, før du begynder at afbilde en ny serie.Tag så mange billeder som ønsket i det lange akseplan. Dernæst skifte til farve Doppler for blodgennemstrømning opdagelse og erhvervelse. Brug berøringsskærmen til at placere kvadranten oven på den atrioventricular ventil og lokalisere tilstrømningen, som udmærker sig ved det røde farvesignal.Reducer kvadrantområdet så meget som muligt for at øge billedhastigheden. Aktiver pulsbølgen Doppler flyttes til prøve ventrikel blod indløbshastighed. Prøvevolumenporten anbringes midt på den atrioventrikulære ventil for at detektere den maksimale strømningshastighed.Det røde farvesignal bliver mere gulligt. Juster pulsbølgevinklen på skærmen med fingrene, så den flugter med retningen af blodtilstrømningen. Tryk på start eller opdatering for at begynde at prøve hastigheden af blodet flyder ind i hjertekammer.Bestem udstrømningshastigheden ved at placere farven Doppler kvadrant ved krydset mellem hjertekammer og bulbus og lokalisere strømmen. Dette er kendetegnet ved en blå farve signal. Placer prøvevolumenporten lige før ventrile bulbus-krydset, og juster vinkelkorrektionslinjen, så den passer til blodgennemstrømningens retning.Juster grundlinjen hæve det i flow hastighed panel for at helt opdage og spore signaltoppe. Så snart billedet erhvervelse er færdig, skal du bruge en teskefuld og overføre fisken i regelmæssigsystem beædte vand fri for tricain og lad fiskene komme sig. For at hjælpe opsving, sprøjte vand gentagne gange over gællerne ved hjælp af en overførsel pipette til at fremme befrugtning af vand og ilt overførsel.Det tager normalt 30 sekunder til to minutter at genoptage gællebevægelse og svømning. Åbn billedanalysesoftwaren. Vælg et billede, og klik på ikonet for billedbehandling.Juster billedets lysstyrke og kontrast for at muliggøre klar visualisering af ventrikulære vægge eller blodgennemstrømningsmønster. Ved hjælp af B-mode-billedet skal du åbne rullelisten fra den parasternale lange akseindstilling på hjertepakkemålingerne. Vælg LV spor og spore ventrikel indre væg ved systole og diastole at opnå ventrikelområdet i systole og diastole og diastolisk volumen og ende systolisk volumen.I denne undersøgelse, B-mode billeder tilladt for sporing af ventrikel indre væg i systole og diastole og opnåelse af dimensionelle data såsom kammer og væg dimensioner. Funktionelle data blev også opnået såsom puls, slagtilfælde volumen, og hjerteoutput samt parametre for ventrikel systolisk funktion, herunder fraktioneret område ændring og udslyngning fraktion. Målinger på niveau med atrioventrikulær ventil ved hjælp af farve Doppler mode billeder også givet ventrikel tilstrømning og udstrømning blodhastigheder.Baseret på pulsbølgen Doppler billede, en puls værdi blev genereret ved at spore tre på hinanden følgende aorta flow toppe. Det vigtigste er at placere ultralydsplatformen og fiskene korrekt for nøjagtig billeddannelse og for at minimere fiskeeksponeringen for tricain. Yderligere metoder til at støtte denne procedure omfatter fisk elektrokardiogram til hurtig påvisning af hjerte dysfunktion som arytmier eller histologi metoder til at evaluere hjertevæv struktur eller celledød.Disse teknikker gør det muligt at evaluere zebrafisk hjertefunktion og etablere en hjertefenotype i zebrafisk hjertesygdom modeller. Det gør det også muligt at teste nye lægemidler, studere hjerteskade og regenerativ kapacitet. Tricaine MS-222 er en hud, øje, og respiratorisk irriterende.Ved tilberedning af tricainopløsning bør beskyttelsesudstyr omfatte en støvmaske, øjenskærm og handsker.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Generation of Murine Cardiac Pacemaker Cell Aggregates Based on ES-Cell-Programming in Combination with Myh6-Promoter-Selection

Generation af murine pacemaker celleaggregater Baseret på ES-celle-programmering i kombination med Myh6-Promotor-Selection

Treatment of the &#8220;sick sinus syndrome&#8221; is based on artificial pacemakers. These bear hazards such as battery failure and infections. Moreover, ...

Contrast Imaging in Mouse Embryos Using High-frequency Ultrasound

Kontrast Imaging i museembryoer Brug højfrekvent ultralyd

Ultrasound contrast-enhanced imaging can convey essential quantitative information regarding tissue vascularity and perfusion and, in targeted ...

Using Touch-evoked Response and Locomotion Assays to Assess Muscle Performance and Function in Zebrafish

Brug Touch-fremkaldt reaktion og Locomotion Analyser til Vurdere Muskel Ydeevne og funktion i zebrafisk

Zebrafish muscle development is highly conserved with mammalian systems making them an excellent model to study muscle function and disease. Many ...

Building Finite Element Models to Investigate Zebrafish Jaw Biomechanics

Opbygning Finite Element Modeller til undersøgelse Zebrafisk Jaw Biomekanik

Skeletal morphogenesis occurs through tightly regulated cell behaviors during development; many cell types alter their behavior in response to mechanical ...

Acute and Chronic Models of Hyperglycemia in Zebrafish: A Method to Assess the Impact of Hyperglycemia on Neurogenesis and the Biodistribution of Radiolabeled Molecules

Akutte og kroniske modeller af hyperglykæmi i zebrafisk: En metode til vurdering af virkningen af ​​hyperglykæmi på neurogenese og biodistribution af radiomærkede molekyler

Hyperglycemia is a major health issue that leads to cardiovascular and cerebral dysfunction. For instance, it is associated with increased neurological ...

A Novel Use of Three-dimensional High-frequency Ultrasonography for Early Pregnancy Characterization in the Mouse

En roman brug af tre-dimensionelle høj frekvens ultralyd for tidlig graviditet karakterisering i mus

High-frequency ultrasonography (HFUS) is a common method to non-invasively monitor the real-time development of the human fetus in utero. The mouse is ...

Fetal Mouse Cardiovascular Imaging Using a High-frequency Ultrasound (30/45MHZ) System

Fetal Mouse Cardiovascular Imaging Using a High-frequency Ultrasound 30/45MHZ System

Føtal mus kardiovaskulære Imaging ved hjælp af en høj frekvens ultralyd (30 / 45MHZ)

Congenital heart defects (CHDs) are the most common cause of childhood morbidity and early mortality. Prenatal detection&#160;of the underlying molecular ...

High Frequency Ultrasound for the Analysis of Fetal and Placental Development In Vivo

High Frequency Ultrasound for the Analysis of Fetal and Placental Development In Vivo

Høj frekvens ultralyd til analyse af føtal og placenta udvikling In Vivo

Ultrasound imaging is a widespread method used to detect organ anomalies and tumors in human and animal tissues. The method is non-invasive, harmless, and ...

A Direct and Simple Method to Assess Drosophila melanogaster's Viability from Embryo to Adult

A Direct and Simple Method to Assess Drosophila melanogaster's Viability from Embryo to Adult

En direkte og enkel metode til at vurdere Drosophila melanogasterslevedygtighed fra embryo til voksen

In Drosophila melanogaster, viability assays are used to determine the fitness of certain genetic backgrounds. Allelic variations can result in partial or ...

Whole-Mount In Situ Hybridization in Zebrafish Embryos and Tube Formation Assay in iPSC-ECs to Study the Role of Endoglin in Vascular Development

Whole-Mount In Situ Hybridization i Zebrafish Embryoner og Tube Formation Assay i iPSC-ECs at studere den rolle, Endoglin i vaskulær udvikling

Vascular development is determined by the sequential expression of specific genes, which can be studied by performing in situ hybridization assays in ...