Name: high-frequency ultrasound echocardiography to assess zebrafish cardiac function
Uploaded: 2020-03-12T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about High-Frequency Ultrasound Echocardiography to Assess Zebrafish Cardiac Function at JoVE.com

Wij danken Fred Roberts' technische ondersteuning en herziening van het manuscript.

Alle procedures met zebravissen zijn goedgekeurd door ons Comité voor institutionele dierenverzorging en -gebruik en voldoen aan de USDA Animal Welfare Act.
1. Experimentele opzet
<ol><li>
Het opzetten van het platform voor beeldverwerving
	<ol>
<li>Met behulp van kleine schaar of een scalpel maken een incisie op een spons op de 12 uur positie om de vis te houden tijdens het scannen. Plaats de spons in een glazen container (figuur 2A</s...

<ol>
	<li>Santoriello, C., Zon, L. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hooked!+Modeling+human+disease+in+zebrafish.">Hooked! Modeling human disease in zebrafish.</a> Journal of Clinical Investigation. 122 (7), 2337-2343 (2012).</li><li>Verkerk, A. O., Remme, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish:+a+novel+research+tool+for+cardiac+(patho)electrophysiology+and+ion+channel+disorders.">Zebrafish: a novel research tool for cardiac (patho)electrophysiology and ion channel disorders.</a> Frontiers in Physiology. 3, 255 (2012).</li><li>Bakkers, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+as+a+model+to+study+cardiac+development+and+human+cardiac+disease.">Zebrafish as a model to study cardiac development and human cardiac disease.</a> Cardiovascular research. 91 (2), 279-288 (2011).</li><li>Poon, K. L., Brand, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+zebrafish+model+system+in+cardiovascular+research:+A+tiny+fish+with+mighty+prospects.">The zebrafish model system in cardiovascular research: A tiny fish with mighty prospects.</a> Global Cardiology Science and Practise. 2013 (1), 9-28 (2013).</li><li>Jopling, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+heart+regeneration+occurs+by+cardiomyocyte+dedifferentiation+and+proliferation.">Zebrafish heart regeneration occurs by cardiomyocyte dedifferentiation and proliferation.</a> Nature. 464 (7288), 606-609 (2010).</li><li>Mishra, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+model+of+amyloid+light+chain+cardiotoxicity:+regeneration+versus+degeneration.">Zebrafish model of amyloid light chain cardiotoxicity: regeneration versus degeneration.</a> American Journal of Physiology Heart Circulatory Physiology. 316 (5), H1158-H1166 (2019).</li><li>Shin, J. T., Pomerantsev, E. V., Mably, J. D., MacRae, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+cardiovascular+function+confirms+functional+orthology+of+myocardial+contractility+pathways+in+zebrafish.">High-resolution cardiovascular function confirms functional orthology of myocardial contractility pathways in zebrafish.</a> Physiologycal Genomics. 42 (2), 300-309 (2010).</li><li>Mishra, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+amyloidogenic+light+chain+proteins+result+in+cardiac+dysfunction,+cell+death,+and+early+mortality+in+zebrafish.">Human amyloidogenic light chain proteins result in cardiac dysfunction, cell death, and early mortality in zebrafish.</a> American Journal of Physiology Heart Circulatory Physiology. 305 (1), H95-H103 (2013).</li><li>Ernens, I., Lumley, A. I., Devaux, Y., Wagner, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+Coronary+Ultrasound+Imaging+to+Evaluate+Ventricular+Function+in+Adult+Zebrafish.">Use of Coronary Ultrasound Imaging to Evaluate Ventricular Function in Adult Zebrafish.</a> Zebrafish. 13 (6), 477-480 (2016).</li><li>Gonz&#225;lez-Rosa, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+Echocardiography+Reveals+Reestablishment+of+Ventricular+Pumping+Efficiency+and+Partial+Ventricular+Wall+Motion+Recovery+upon+Ventricular+Cryoinjury+in+the+Zebrafish.">Use of Echocardiography Reveals Reestablishment of Ventricular Pumping Efficiency and Partial Ventricular Wall Motion Recovery upon Ventricular Cryoinjury in the Zebrafish.</a> PLoS One. 9 (12), (2014).</li><li>Huang, C. C., Su, T. H., Shih, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+tissue+Doppler+imaging+of+the+zebrafish+heart+during+its+regeneration.">High-resolution tissue Doppler imaging of the zebrafish heart during its regeneration.</a> Zebrafish. 12 (1), 48-57 (2015).</li><li>Kang, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-frequency+dual+mode+pulsed+wave+Doppler+imaging+for+monitoring+the+functional+regeneration+of+adult+zebrafish+hearts.">High-frequency dual mode pulsed wave Doppler imaging for monitoring the functional regeneration of adult zebrafish hearts.</a> Journal of the Royal Society Interface. 12 (103), (2015).</li><li>Lee, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemodynamics+and+ventricular+function+in+a+zebrafish+model+of+injury+and+repair.">Hemodynamics and ventricular function in a zebrafish model of injury and repair.</a> Zebrafish. 11 (5), 447-454 (2014).</li><li>Sun, L., Lien, C. L., Xu, X., Shung, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+Vivo+Cardiac+Imaging+of+Adult+Zebrafish+Using+High+Frequency+Ultrasound+(45-75+MHz).">In Vivo Cardiac Imaging of Adult Zebrafish Using High Frequency Ultrasound (45-75 MHz).</a> Ultrasound in Medicine and Biology. 34 (1), 31-39 (2008).</li><li>Wang, L. W., Kesteven, S. H., Huttner, I. G., Feneley, M. P., Fatkin, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-Frequency+Echocardiography-+Transformative+Clinical+and+Research+Applications+in+Humans,+Mice,+and+Zebrafish.">High-Frequency Echocardiography- Transformative Clinical and Research Applications in Humans, Mice, and Zebrafish.</a> Circulation Journal. 82 (3), 620-628 (2018).</li><li>Wang, L. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardized+echocardiographic+assessment+of+cardiac+function+in+normal+adult+zebrafish+and+heart+disease+models.">Standardized echocardiographic assessment of cardiac function in normal adult zebrafish and heart disease models.</a> Disease Models &amp; Mechanisms. 10 (1), 63 (2017).</li><li>Lee, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+Assessment+of+Cardiac+Responses+of+Adult+Zebrafish+(Danio+rerio)+to+Acute+and+Chronic+Temperature+Change+Using+High-Resolution+Echocardiography.">Functional Assessment of Cardiac Responses of Adult Zebrafish (Danio rerio) to Acute and Chronic Temperature Change Using High-Resolution Echocardiography.</a> PLOS ONE. 11 (1), e0145163 (2016).</li><li>Genge, C. E., et al., Nilius, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Reviews of Physiology, Biochemistry and Pharmacology. 171, 99-136 (2016).</li></ol>

We beschrijven een systematische methode voor echocardiografische beeldvorming en beoordeling van de hartfunctie bij volwassen zebravissen. Echocardiografie is de enige beschikbare niet-invasieve en meest robuuste methode voor levende volwassen vissen cardiale beeldvorming en functionele analyse, en het wordt steeds populairder in zebravissen cardiovasculair onderzoek. De benodigde tijd is kort en maakt een hoge doorvoer en longitudinale studies mogelijk. Er is echter een aanzienlijke variatie in de gebruikte methodologi...

De zebravis(Danio rerio) is een gevestigd eikmodel voor studies naar ontwikkelingsprocessen en menselijke ziekten1. Zebravissen hebben een hoge genetische gelijkenis met de mens (70%), genetische traktatabiliteit, hoge vruchtbaarheid, en optische transparantie tijdens de embryonale ontwikkeling, die het mogelijk maakt directe visuele analyse van organen en weefsels, met inbegrip van het hart. Ondanks het feit dat slechts een atrium en een ventrikel, de zebravissen hart (Figuur 1) is fysiologisch vergelijkbaar met zoogdier vier-kamerharten. Belangrijk is dat de zebravis hartslag, elektrocardiogram morfologie, en actie potentiële vorm lijken op die van de mens meer dan murine soorten2. Deze kenmerken hebben zebravissen een uitstekend model voor cardiovasculair onderzoek en hebben belangrijke5inzichten in hartontwikkeling43,,4 , regeneratie 5 , en pathologische aandoeningen1,3,4, met inbegrip van aderverkalking, cardiomyopathies, hartritmestoornissen, aangeboren hartziekten, en amyloïde lichtketen cardiotoxiciteit1,4,6. Beoordeling van de hartfunctie is mogelijk geweest tijdens de embryonale fase (1-daagse na bevruchting) door middel van directe video-analyse met behulp van high-speed video microscopie7,8. Zebravissen verliezen echter hun transparantie na het embryonale stadium, waardoor functionele evaluaties van normale volwassen harten en late hartaandoeningen worden beperkt. Om deze beperking te overwinnen, echocardiografie is met succes gebruikt als een hoge resolutie, real-time, niet-invasieve beeldvorming alternatief voor de evaluatie van volwassen zebravissen hartfunctie9,10,11,12,13,14,15.
Bij zebravis bevindt het hart zich ventrally in de borstholte onmiddellijk achterstelijk aan de kieuwen met het atrium gelegen rugspier aan de ventrikel. Het atrium verzamelt veneuze bloed uit de sinus venosus en brengt het over naar de ventrikel waar het verder wordt gepompt naar de bulbus arteriosus (Figuur 1). Hier beschrijven we een fysiologisch, onderwaterprotocol om de cardiale functie bij volwassen zebravissen te beoordelen aan de hand van niet-invasieve echocardiografie met behulp van een lineaire array echografiesonde met een middenfrequentie van 50 MHz voor B-modus beeldvorming met een resolutie van 30 μm. Aangezien ultrasone golven gemakkelijk door water kunnen reizen, biedt het houden van de nabijheid tussen de vissen en de scansonde onderwater genoeg contactoppervlak voor hartdetectie zonder behoefte aan ultrasone gel en is over het algemeen minder belastend voor de vissen. Hoewel alternatieve zebravissen echocardiografie systemen werden gemeld door verschillende auteurs9,12,13, hier presenteren we de algemene en meest gebruikte setup die van toepassing is op hoge frequentie echografie bij dieren.
De methode maakt hoge resolutie beeldvorming van de volwassen zebravissen hart, het traceren van hartstructuren, en kwantificering van piek-snelheden van Doppler bloedstroom metingen. We tonen betrouwbare in vivo kwantificering van belangrijke systolische en diastolische parameters, zoals uitwerpfractie (EF), fractionele gebiedsverandering (FAC), ventriculaire bloedinstroom en uitstroomsnelheden, hartslag (HR) en cardiale output (CO). We dragen bij aan het vaststellen van een betrouwbaar scala aan normale gezonde volwassen zebravissen cardiale functionele en dimensionale parameters om een meer nauwkeurige evaluatie van pathologische toestanden mogelijk te maken. Over het algemeen bieden we een robuuste methode om de hartfunctie bij zebravissen te beoordelen, die zeer nuttig is gebleken bij het vaststellen en valideren van zebravissen hart-en vaatziekten modellen6,,16,hartletsel en herstel10,13, en regeneratie11,12, en kan verder worden gebruikt om potentiële geneesmiddelen te evalueren.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Double sided tape</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fish net</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass container - 100 inch high</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High frequency transducer</td>
			<td>Fujifilm/VisualSonics</td>
			<td>MX700</td>
			<td>Band width 29-71 MHz, Centre transmit 50 MHz, Axial resolution 30 &#181;m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic teaspoon</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel or scissors</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small fish tanks</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sponge (kitchen sponge)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transfer pipets (graduated 3 mL)</td>
			<td>Samco Scientific</td>
			<td>212</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tricaine (MS-222)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A5040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vevo 3100 Imaging system and imaging station</td>
			<td>Fujifilm/VisualSonics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vevo LAB sofware v 1.7.1</td>
			<td>Fujifilm/VisualSonics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

high-frequency ultrasound echocardiography to assess zebrafish cardiac function

De zebravis (Danio rerio) is uitgegroeid tot een zeer populair model organisme in cardiovasculair onderzoek, met inbegrip van menselijke hartziekten, grotendeels te wijten aan de embryonale transparantie, genetische traktaat, en voorzieningen om snelle, high-throughput studies. Echter, het verlies van transparantie beperkt hartfunctie analyse in het volwassen stadium, die modellering van leeftijd-gerelateerde hartaandoeningen bemoeilijkt. Om dergelijke beperkingen te overwinnen, high-frequency echografie echocardiografie bij zebravissen is in opkomst als een haalbare optie. Hier presenteren we een gedetailleerd protocol om de hartfunctie bij volwassen zebravissen te beoordelen aan de hand van niet-invasieve echocardiografie met behulp van hoogfrequente echografie. De methode maakt visualisatie en analyse van zebravissen hartdimensie en kwantificering van belangrijke functionele parameters, met inbegrip van hartslag, slag volume, cardiale output, en uitwerping fractie. Bij deze methode worden de vissen verdoofd en onder water gehouden en kunnen ze na de procedure worden teruggewonnen. Hoewel hoogfrequente echografie een dure technologie is, kan hetzelfde beeldvormingsplatform worden gebruikt voor verschillende soorten (bijvoorbeeld murine en zebravissen) door verschillende transducers aan te passen. Zebravis echocardiografie is een robuuste methode voor cardiale fenotypering, nuttig bij de validatie en karakterisering van ziektemodellen, met name late-onset ziekten; drugsschermen; en studies van hartletsel, herstel en regeneratieve capaciteit.

Het beschreven protocol maakt het mogelijk om belangrijke cardiale en functionele parameters te meten, analoog aan de techniek die wordt gebruikt in de echocardiografie tussen mens en dier. De Beelden van de B-Modus maken het mogelijk om ventriculaire binnenwand in systole en diastole (figuur 5) te traceren en dimensionale gegevens te verkrijgen, zoals kamer- en wandafmetingen, en functionele gegevens, zoals hartslag, slagvolume en cardiale output, evenals pa...

Watch this Scientific Journal Video about High-Frequency Ultrasound Echocardiography to Assess Zebrafish Cardiac Function at JoVE.com

High-Frequency Ultrasound Echocardiography to Assess Zebrafish Cardiac Function

We beschrijven een protocol om hartmorfologie en functie bij volwassen zebravissen te beoordelen met behulp van hoogfrequente echocardiografie. De methode maakt visualisatie van het hart en de daaropvolgende kwantificering van functionele parameters mogelijk, zoals hartslag (HR), hartoutput (CO), fractionele gebiedsverandering (FAC), uitwerpfractie (EF) en bloedinstroom en uitstroomsnelheden.

High-Frequency Ultrasound Echocardiography om zebravissen cardiale functie te beoordelen

The zebrafish (Danio rerio) has become a very popular model organism in cardiovascular research, including human cardiac diseases, largely due to its ...

Het protocol maakt niet-invasieve en hoge resolutie representatie en analyse van volwassen zebravis hartfunctie. Deze methode kan worden gebruikt voor de validatie van volwassen hart-en vaatziekten modellen en potentiële drug schermen. Deze techniek maakt een snelle positionering van de vis mogelijk voor een correcte beeldvorming die nauwkeurige en reproduceerbare resultaten oplevert.Het is niet invasief en uitgevoerd onder water die het mogelijk maakt de snelle terugwinning van de vis. Om het platform voor beeldverwerving op te zetten, gebruikt u een kleine schaar of een scalpel om een incisie te maken op een spons op de positie van 12 uur. Plaats de spons in een glazen container.Met behulp van dubbelzijdige tape, breng de glazen container met de spons op de echografie platform. Zorg ervoor dat de glazen container zich in het midden van het platform bevindt en stevig bevestigd. Kantel het platform ongeveer 30 graden naar voren met behulp van de knop aan de linkerkant van de platformhouder.Vul de glascontainer met ongeveer 200 milliliter vissysteemwater dat 0,2 milligram per milliliter tricaine methaanfonaat bevat. Plaats de transducer in de micromanipulatorhouder op het werkende station en draai de inkeping van de transducer naar de operator. Houd de array parallel aan de grond met de werkende zijde longitudinale met betrekking tot het podium.Laat aan beide zijden voldoende ruimte over 10 centimeter voor het nu aangesloten transducerrailsysteem om langs de x- en y-assen te bewegen. Log in op de besturingssoftware en kies muiskleervasculair. Maak een nieuwe studie en een nieuwe serie voor elk dier geïnduceerd in de studie.Druk op de nieuwe studieknop linksonder op het scherm op de browserpagina. De weergave begint in de B-modus. Breng de vis met behulp van een visnet in een kleine tank met systeemwater met 0,2 milligram per milliliter tricaine.Wacht tot de vis volledig verdoofd is zonder beweging of reactie op aanraking. Breng de vis voorzichtig en snel met de spons in de eerder gemaakte incisie met de ventrale kant van de vis naar boven. Laat de transducer voorzichtig zakken met behulp van het handvat op het railsysteem en plaats deze in de lengterichting en sluit de ventrale kant van de vis met de inkeping van de transducer die naar de bediener wordt gericht.Laat twee tot drie millimeter van de ruimte van de vis. Pas het platform aan op de transducer met behulp van de micromanipulator in alle drie de assen totdat het vishart is gevisualiseerd. Direct na het lokaliseren van het hart, selecteren of verblijf in B-modus en het veld te verminderen door in te zoomen om een kijkje op het hart te bereiken.Verbeter indien nodig de kwaliteit of het contrast van de afbeelding door het dynamisch bereik in te stellen op 45 tot 50 decibel. Ga naar de besturingselementen in de B-modus in de optie meer besturingselementen en sla vervolgens de voorinstellingen voor de modus wijzigen op. Tik op voorinstellingen in de modus om telkens de geoptimaliseerde instelling voor het verkrijgen van afbeeldingen te selecteren voordat u een nieuwe reeks begint te beelden.Neem zoveel foto's als gewenst in het lange as vlak. Schakel vervolgens over naar kleur Doppler voor bloedstroomdetectie en -acquisitie. Plaats met behulp van het touchscreen het kwadrant bovenop de atrioventriculaire klep en lokaliseer de instroom die zich onderscheidt door het rode kleurensignaal.Verklein het kwadrantgebied zoveel mogelijk om de framerate te verhogen. Activeer de pulsgolf Doppler bewegen naar het monster ventriculaire bloedinstroom snelheid. Plaats de monstervolumepoort in het midden van de atrioventriculaire klep om de maximale stroomsnelheid te detecteren.Het rode kleurensignaal wordt geliger. Pas de pulsgolfhoek op het scherm aan met vingers, zodat deze wordt uitgelijnd met de richting van de bloedinstroom. Druk op start of update om te beginnen met de bemonstering van de snelheid van het bloed stroomt in de ventrikel.Bepaal de uitstroomsnelheid door het kleur Doppler kwadrant op de kruising tussen de ventrikel en de bulbus te plaatsen en de stroom te lokaliseren. Dit onderscheidt zich door een blauw kleurensignaal. Plaats de monstervolumepoort vlak voor de verbinding met de ventrikel bulbus en pas de hoekcorrectielijn aan de richting van de bloedstroom aan.Pas de basislijn aan in het stroomsnelheidspaneel om de signaalpieken volledig te detecteren en te traceren. Zodra de beeldaanwinst is voltooid, gebruik een theelepel en breng de vis in regelmatig systeem bespeed water vrij van tricaine en laat de vis herstellen. Om te helpen bij het herstel, spuit water herhaaldelijk over de kieuwen met behulp van een overdracht pipet om beatting van het water en zuurstof overdracht te bevorderen.Het duurt meestal 30 seconden tot twee minuten om kieuwbeweging en zwemmen te hervatten. Open de software voor beeldanalyse. Selecteer een afbeelding en klik op het pictogram voor het verwerken van afbeeldingen.Pas de helderheid en het contrast van de afbeelding aan om een duidelijke visualisatie van ventriculaire wanden of bloedstroompatroon mogelijk te maken. Open met de afbeelding in de B-modus de vervolgkeuzelijst vanaf de optie parasternale lange as op de metingen van het hartpakket. Selecteer LV-sporen en traceer de ventriculaire binnenwand op systole en diastole om het ventriculaire gebied in systole en diastole en diastolisch volume te verkrijgen en het systolische volume te beëindigen.In deze studie, de B-modus beelden toegestaan voor het traceren van ventriculaire binnenwand in systole en diastole en het verkrijgen van dimensionale gegevens zoals kamer en muur afmetingen. Functionele gegevens werden ook verkregen, zoals hartslag, slagvolume en cardiale output, evenals parameters van ventriculaire systolische functie, waaronder fractionele gebiedsverandering en uitwerpfractie. Metingen op het niveau van de atrioventriculaire klep met behulp van kleur Doppler modus beelden ook voorzien ventriculaire instroom en uitstroom bloedsnelheden.Op basis van de pulsgolf Doppler beeld, een hartslag waarde werd gegenereerd door het traceren van drie opeenvolgende aorta stroom pieken. Het belangrijkste is om de echografie platform en de vis correct te positioneren voor nauwkeurige beeldvorming en om de blootstelling van vissen aan tricaine te minimaliseren. Aanvullende methoden ter ondersteuning van deze procedure zijn vis elektrocardiogram voor snelle detectie van hartdisfunctie zoals hartritmestoornissen of histologie methoden om hartweefsel structuur of celdood te evalueren.Deze technieken maken evaluatie van zebravis hartfunctie en het vaststellen van een cardiale fenotype in zebravis hart-en vaatziekten modellen. Het maakt het ook mogelijk om nieuwe geneesmiddelen te testen, hartletsel en regeneratieve capaciteit te bestuderen. Tricaine MS-222 is een huid-, oog- en ademhalingsirriterende stof.Bij het bereiden van tricaine-oplossing moet de beschermingsmiddelen een stofmasker, oogschild en handschoenen bevatten.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Generation of Murine Cardiac Pacemaker Cell Aggregates Based on ES-Cell-Programming in Combination with Myh6-Promoter-Selection

Generatie van muizen pacemaker celaggregaten Gebaseerd op ES-Cell-programmering in combinatie met Myh6-Promoter-Selection

Treatment of the &#8220;sick sinus syndrome&#8221; is based on artificial pacemakers. These bear hazards such as battery failure and infections. Moreover, ...

Contrast Imaging in Mouse Embryos Using High-frequency Ultrasound

Contrast Imaging in muis embryo&#39;s met behulp van hoge-frequentie Ultrasound

Ultrasound contrast-enhanced imaging can convey essential quantitative information regarding tissue vascularity and perfusion and, in targeted ...

Using Touch-evoked Response and Locomotion Assays to Assess Muscle Performance and Function in Zebrafish

Met behulp van Touch-opgeroepen Response en Locomotion Testen om Muscle Prestaties en functie in zebravis Assess

Zebrafish muscle development is highly conserved with mammalian systems making them an excellent model to study muscle function and disease. Many ...

Building Finite Element Models to Investigate Zebrafish Jaw Biomechanics

Het bouwen van Finite Element modellen te onderzoeken zebravis Jaw biomechanica

Skeletal morphogenesis occurs through tightly regulated cell behaviors during development; many cell types alter their behavior in response to mechanical ...

Acute and Chronic Models of Hyperglycemia in Zebrafish: A Method to Assess the Impact of Hyperglycemia on Neurogenesis and the Biodistribution of Radiolabeled Molecules

Acute en chronische modellen van hyperglycemie bij zebravis: een methode om de impact van hyperglycemie op neurogenese te beoordelen en de biodistributie van radiolabelde moleculen

Hyperglycemia is a major health issue that leads to cardiovascular and cerebral dysfunction. For instance, it is associated with increased neurological ...

A Novel Use of Three-dimensional High-frequency Ultrasonography for Early Pregnancy Characterization in the Mouse

Een roman gebruik van driedimensionale hoogfrequente Ultrasonografie voor vroege zwangerschap karakterisering in de muis

High-frequency ultrasonography (HFUS) is a common method to non-invasively monitor the real-time development of the human fetus in utero. The mouse is ...

Fetal Mouse Cardiovascular Imaging Using a High-frequency Ultrasound (30/45MHZ) System

Fetal Mouse Cardiovascular Imaging Using a High-frequency Ultrasound 30/45MHZ System

Foetale muis cardiovasculaire Imaging met behulp van een systeem van hoge-frequentie echografie (30 / 45MHZ)

Congenital heart defects (CHDs) are the most common cause of childhood morbidity and early mortality. Prenatal detection&#160;of the underlying molecular ...

High Frequency Ultrasound for the Analysis of Fetal and Placental Development In Vivo

High Frequency Ultrasound for the Analysis of Fetal and Placental Development In Vivo

Hoge frequentie echografie voor de analyse van de ontwikkeling van de foetus en placenta In Vivo

Ultrasound imaging is a widespread method used to detect organ anomalies and tumors in human and animal tissues. The method is non-invasive, harmless, and ...

A Direct and Simple Method to Assess Drosophila melanogaster's Viability from Embryo to Adult

A Direct and Simple Method to Assess Drosophila melanogaster's Viability from Embryo to Adult

Een directe en eenvoudige methode om de levensvatbaarheid van Drosophila melanogasterte beoordelen van embryo tot volwassene

In Drosophila melanogaster, viability assays are used to determine the fitness of certain genetic backgrounds. Allelic variations can result in partial or ...

Whole-Mount In Situ Hybridization in Zebrafish Embryos and Tube Formation Assay in iPSC-ECs to Study the Role of Endoglin in Vascular Development

Whole-Mount In Situ Hybridisatie in Zebrafish Embryo's en Tube Formation Assay in iPSC-ECs om de rol van Endoglin in vasculaire ontwikkeling te bestuderen

Vascular development is determined by the sequential expression of specific genes, which can be studied by performing in situ hybridization assays in ...