Name: high-frequency ultrasound echocardiography to assess zebrafish cardiac function
Uploaded: 2020-03-12T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about High-Frequency Ultrasound Echocardiography to Assess Zebrafish Cardiac Function at JoVE.com

Agradecemos o apoio técnico de Fred Roberts e a revisão do manuscrito.

Todos os procedimentos envolvendo zebrafish foram aprovados pelo nosso Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais e estão em conformidade com a Lei de Bem-Estar Animal do USDA.
1. Configuração experimental
<ol><li>
Configuração da plataforma para aquisição de imagens
	<ol>
<li>Usando uma tesoura pequena ou um bisturi faça uma incisão em uma esponja na posição das 12 horas para segurar o peixe durante a varredura. Coloque a esponja em um recipiente de vidro...

<ol>
	<li>Santoriello, C., Zon, L. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hooked!+Modeling+human+disease+in+zebrafish.">Hooked! Modeling human disease in zebrafish.</a> Journal of Clinical Investigation. 122 (7), 2337-2343 (2012).</li><li>Verkerk, A. O., Remme, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish:+a+novel+research+tool+for+cardiac+(patho)electrophysiology+and+ion+channel+disorders.">Zebrafish: a novel research tool for cardiac (patho)electrophysiology and ion channel disorders.</a> Frontiers in Physiology. 3, 255 (2012).</li><li>Bakkers, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+as+a+model+to+study+cardiac+development+and+human+cardiac+disease.">Zebrafish as a model to study cardiac development and human cardiac disease.</a> Cardiovascular research. 91 (2), 279-288 (2011).</li><li>Poon, K. L., Brand, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+zebrafish+model+system+in+cardiovascular+research:+A+tiny+fish+with+mighty+prospects.">The zebrafish model system in cardiovascular research: A tiny fish with mighty prospects.</a> Global Cardiology Science and Practise. 2013 (1), 9-28 (2013).</li><li>Jopling, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+heart+regeneration+occurs+by+cardiomyocyte+dedifferentiation+and+proliferation.">Zebrafish heart regeneration occurs by cardiomyocyte dedifferentiation and proliferation.</a> Nature. 464 (7288), 606-609 (2010).</li><li>Mishra, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+model+of+amyloid+light+chain+cardiotoxicity:+regeneration+versus+degeneration.">Zebrafish model of amyloid light chain cardiotoxicity: regeneration versus degeneration.</a> American Journal of Physiology Heart Circulatory Physiology. 316 (5), H1158-H1166 (2019).</li><li>Shin, J. T., Pomerantsev, E. V., Mably, J. D., MacRae, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+cardiovascular+function+confirms+functional+orthology+of+myocardial+contractility+pathways+in+zebrafish.">High-resolution cardiovascular function confirms functional orthology of myocardial contractility pathways in zebrafish.</a> Physiologycal Genomics. 42 (2), 300-309 (2010).</li><li>Mishra, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+amyloidogenic+light+chain+proteins+result+in+cardiac+dysfunction,+cell+death,+and+early+mortality+in+zebrafish.">Human amyloidogenic light chain proteins result in cardiac dysfunction, cell death, and early mortality in zebrafish.</a> American Journal of Physiology Heart Circulatory Physiology. 305 (1), H95-H103 (2013).</li><li>Ernens, I., Lumley, A. I., Devaux, Y., Wagner, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+Coronary+Ultrasound+Imaging+to+Evaluate+Ventricular+Function+in+Adult+Zebrafish.">Use of Coronary Ultrasound Imaging to Evaluate Ventricular Function in Adult Zebrafish.</a> Zebrafish. 13 (6), 477-480 (2016).</li><li>Gonz&#225;lez-Rosa, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+Echocardiography+Reveals+Reestablishment+of+Ventricular+Pumping+Efficiency+and+Partial+Ventricular+Wall+Motion+Recovery+upon+Ventricular+Cryoinjury+in+the+Zebrafish.">Use of Echocardiography Reveals Reestablishment of Ventricular Pumping Efficiency and Partial Ventricular Wall Motion Recovery upon Ventricular Cryoinjury in the Zebrafish.</a> PLoS One. 9 (12), (2014).</li><li>Huang, C. C., Su, T. H., Shih, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+tissue+Doppler+imaging+of+the+zebrafish+heart+during+its+regeneration.">High-resolution tissue Doppler imaging of the zebrafish heart during its regeneration.</a> Zebrafish. 12 (1), 48-57 (2015).</li><li>Kang, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-frequency+dual+mode+pulsed+wave+Doppler+imaging+for+monitoring+the+functional+regeneration+of+adult+zebrafish+hearts.">High-frequency dual mode pulsed wave Doppler imaging for monitoring the functional regeneration of adult zebrafish hearts.</a> Journal of the Royal Society Interface. 12 (103), (2015).</li><li>Lee, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemodynamics+and+ventricular+function+in+a+zebrafish+model+of+injury+and+repair.">Hemodynamics and ventricular function in a zebrafish model of injury and repair.</a> Zebrafish. 11 (5), 447-454 (2014).</li><li>Sun, L., Lien, C. L., Xu, X., Shung, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+Vivo+Cardiac+Imaging+of+Adult+Zebrafish+Using+High+Frequency+Ultrasound+(45-75+MHz).">In Vivo Cardiac Imaging of Adult Zebrafish Using High Frequency Ultrasound (45-75 MHz).</a> Ultrasound in Medicine and Biology. 34 (1), 31-39 (2008).</li><li>Wang, L. W., Kesteven, S. H., Huttner, I. G., Feneley, M. P., Fatkin, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-Frequency+Echocardiography-+Transformative+Clinical+and+Research+Applications+in+Humans,+Mice,+and+Zebrafish.">High-Frequency Echocardiography- Transformative Clinical and Research Applications in Humans, Mice, and Zebrafish.</a> Circulation Journal. 82 (3), 620-628 (2018).</li><li>Wang, L. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardized+echocardiographic+assessment+of+cardiac+function+in+normal+adult+zebrafish+and+heart+disease+models.">Standardized echocardiographic assessment of cardiac function in normal adult zebrafish and heart disease models.</a> Disease Models &amp; Mechanisms. 10 (1), 63 (2017).</li><li>Lee, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+Assessment+of+Cardiac+Responses+of+Adult+Zebrafish+(Danio+rerio)+to+Acute+and+Chronic+Temperature+Change+Using+High-Resolution+Echocardiography.">Functional Assessment of Cardiac Responses of Adult Zebrafish (Danio rerio) to Acute and Chronic Temperature Change Using High-Resolution Echocardiography.</a> PLOS ONE. 11 (1), e0145163 (2016).</li><li>Genge, C. E., et al., Nilius, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Reviews of Physiology, Biochemistry and Pharmacology. 171, 99-136 (2016).</li></ol>

Descrevemos um método sistemático para a imagem ecocardiográfica e avaliação da função cardíaca em zebrafish adultos. A ecocardiografia é o único método não invasivo e mais robusto disponível para imagem cardíaca de peixe adulto vivo e análise funcional, e está se tornando cada vez mais popular na pesquisa cardiovascular de zebrafish. O tempo necessário é curto e permite estudos longitudinais de alta duração e de alta duração. No entanto, há uma variação considerável na metodologia empregada e n...

O zebrafish (Danio rerio) é um modelo de vertebrados bem estabelecido para estudos de processos de desenvolvimento e doenças humanas1. Os zebrafish têm alta similaridade genética aos seres humanos (70%), trabilidade genética, alta fecundidade e transparência óptica durante o desenvolvimento embrionário, o que permite a análise visual direta de órgãos e tecidos, incluindo o coração. Apesar de ter apenas um átrio e um ventrículo, o coração de zebrafish (Figura 1) é fisiologicamente semelhante aos corações de quatro câmaras dos mamíferos. É importante ressaltar que a freqüência cardíaca do zebrafish, a morfologia eletrocardiograma e a forma potencial de ação se assemelham às dos seres humanos mais do que as espécies de murina2. Essas características tornaram o zebrafish um excelente modelo para a pesquisa cardiovascular e forneceram grandes insights sobre o desenvolvimento cardíaco3,4, regeneração5, e condições patológicas1,3,4, incluindo arteriosclerose, cardiomiopatias, arritmias, doenças cardíacas congênitas e cardiotoxicidade da cadeia de luz amilóide1,4,6. A avaliação da função cardíaca tem sido possível durante o estágio embrionário (1 dias após a fertilização) por meio da análise direta de vídeo utilizando microscopia de vídeo de alta velocidade7,8. No entanto, os zebrafish perdem sua transparência além do estágio embrionário, limitando avaliações funcionais de corações maduros normais e condições cardíacas de início tardio. Para superar essa limitação, a ecocardiografia tem sido empregada com sucesso como uma alternativa de imagem não invasiva de alta resolução, em tempo real e não invasiva para avaliar a função cardíaca do zebrafish adulto9,,10,,11,,12,,13,14,15.
Em zebrafish, o coração está localizado ventralmente na cavidade torácica imediatamente posterior às brânquias com o átrio localizado dorsal ao ventrículo. O átrio coleta sangue venoso do venoso sinusal e transfere-o para o ventrículo onde é ainda mais bombeado para o bulbo arterioso(Figura 1). Aqui, descrevemos um protocolo fisiológico, subaquático, para avaliar a função cardíaca em zebrafish adultos por ecocardiografia não invasiva usando uma sonda de ultrassom de matriz linear com uma freqüência central de 50 MHz para imagem de modo B em uma resolução de 30 μm. Uma vez que as ondas de ultrassom podem facilmente viajar através da água, manter a proximidade entre o peixe e a sonda de varredura debaixo d'água fornece superfície de contato suficiente para detecção cardíaca sem necessidade de gel de ultrassom e é no geral menos estressante para o peixe. Embora sistemas alternativos de ecocardiografia de zebrafish tenham sido relatados por vários autores9,12,13, aqui apresentamos a configuração geral e mais comumente utilizada que se aplica ao ultrassom de alta frequência em animais.
O método permite imagens de alta resolução do coração de zebrafish adulto, rastreamento de estruturas cardíacas e quantificação de velocidades de pico das medidas de fluxo sanguíneo Doppler. Mostramos quantificação in vivo confiável de parâmetros sistólicos e diastólicos importantes, como fração de ejeção (EF), mudança de área fracionada (FAC), fluxo de sangue ventricular e velocidades de saída, freqüência cardíaca (HR) e saída cardíaca (CO). Contribuímos para estabelecer uma gama confiável de parâmetros funcionais e dimensionais cardíacos adultos saudáveis e saudáveis para permitir uma avaliação mais precisa dos estados patológicos. No geral, fornecemos um método robusto para avaliar a função cardíaca em zebrafish, que tem se mostrado extremamente útil no estabelecimento e validação de doenças cardíacas zebrafishmodelos 6,16, lesão cardíaca e recuperação10,13, e regeneração11,12, e pode ser usado ainda para avaliar drogas potenciais.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Double sided tape</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fish net</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass container - 100 inch high</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High frequency transducer</td>
			<td>Fujifilm/VisualSonics</td>
			<td>MX700</td>
			<td>Band width 29-71 MHz, Centre transmit 50 MHz, Axial resolution 30 &#181;m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic teaspoon</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel or scissors</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small fish tanks</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sponge (kitchen sponge)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transfer pipets (graduated 3 mL)</td>
			<td>Samco Scientific</td>
			<td>212</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tricaine (MS-222)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A5040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vevo 3100 Imaging system and imaging station</td>
			<td>Fujifilm/VisualSonics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vevo LAB sofware v 1.7.1</td>
			<td>Fujifilm/VisualSonics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

high-frequency ultrasound echocardiography to assess zebrafish cardiac function

O zebrafish (Danio rerio) tornou-se um organismo modelo muito popular em pesquisas cardiovasculares, incluindo doenças cardíacas humanas, em grande parte devido à sua transparência embrionária, trabilidade genética e amenidade a estudos rápidos e de alto nível. No entanto, a perda de transparência limita a análise da função cardíaca na fase adulta, o que complica a modelagem das condições cardíacas relacionadas à idade. Para superar tais limitações, a ecocardiografia de ultrassom de alta frequência em zebrafish está emergindo como uma opção viável. Aqui, apresentamos um protocolo detalhado para avaliar a função cardíaca em zebrafish adultos por ecocardiografia não invasiva usando ultrassom de alta frequência. O método permite a visualização e análise da dimensão cardíaca do zebrafish e a quantificação de parâmetros funcionais importantes, incluindo freqüência cardíaca, volume de derrame, saída cardíaca e fração de ejeção. Neste método, os peixes são anestesiados e mantidos debaixo d'água e podem ser recuperados após o procedimento. Embora o ultrassom de alta frequência seja uma tecnologia cara, a mesma plataforma de imagem pode ser usada para diferentes espécies (por exemplo, murina e zebrafish) adaptando diferentes transdutores. A ecocardiografia do zebrafish é um método robusto para fenotipagem cardíaca, útil na validação e caracterização de modelos de doenças, particularmente doenças de início tardio; telas de drogas; e estudos de lesão cardíaca, recuperação e capacidade regenerativa.

O protocolo descrito permite a medição de importantes parâmetros cardíacos dimensionais e funcionais, análogos à técnica utilizada na ecocardiografia humana e animal. As imagens do Modo B permitem o rastreamento da parede interna ventricular em sístole e diastole(Figura 5) e a obtenção de dados dimensionais, como dimensões de câmara e parede, e dados funcionais, como freqüência cardíaca, volume de derrame e saída cardíaca, bem como parâmetro...

Watch this Scientific Journal Video about High-Frequency Ultrasound Echocardiography to Assess Zebrafish Cardiac Function at JoVE.com

High-Frequency Ultrasound Echocardiography to Assess Zebrafish Cardiac Function

Descrevemos um protocolo para avaliar a morfologia cardíaca e a função em zebrafish adultos usando ecocardiografia de alta frequência. O método permite a visualização do coração e posterior quantificação de parâmetros funcionais, como freqüência cardíaca (HR), saída cardíaca (CO), mudança de área fracionada (FAC), fração de ejeção (EF), e velocidades de fluxo e fluxo sanguíneo.

Ecocardiografia de ultrassom de alta frequência para avaliar a função cardíaca de zebrafish

The zebrafish (Danio rerio) has become a very popular model organism in cardiovascular research, including human cardiac diseases, largely due to its ...

O protocolo permite representação e análise não invasivas e de alta resolução da função cardíaca do zebrafish adulto. Este método pode ser usado para validação de modelos de doenças cardíacas adultas e potenciais telas de drogas. Esta técnica permite o posicionamento rápido do peixe para uma imagem correta, proporcionando resultados precisos e reprodutíveis.Não é invasivo e realizado debaixo d'água que permite a rápida recuperação dos peixes. Para configurar a plataforma para aquisição de imagens, use uma tesoura pequena ou um bisturi para fazer uma incisão em uma esponja na posição das 12 horas. Coloque a esponja em um recipiente de vidro.Usando fita dupla face, afixe o recipiente de vidro contendo a esponja na plataforma de ultrassom. Certifique-se de que o recipiente de vidro está no centro da plataforma e firmemente preso. Incline a plataforma para a frente cerca de 30 graus usando o botão no lado esquerdo do suporte da plataforma.Encha o recipiente de vidro com aproximadamente 200 mililitros de água do sistema de peixe contendo 0,2 miligramas por mililitro tricaine metanosulfonato. Insira o transdutor dentro do suporte do micromanipulador na estação ferroviária de trabalho girando o entalhe do transdutor em direção ao operador. Mantenha a matriz paralela ao solo com o lado de trabalho longitudinal em relação ao palco.Deixe espaço suficiente cerca de 10 centímetros em ambos os lados para o sistema ferroviário transdutor agora conectado se mover ao longo dos eixos x e y. Faça login no software de controle e escolha o mouse pequeno vascular. Crie um novo estudo, bem como uma nova série para cada animal induzido no estudo.Pressione o novo botão de estudo localizado no lado inferior esquerdo da tela na página do navegador. A exibição começa no modo B. Usando uma rede de peixe, transfira o peixe para um pequeno tanque contendo água do sistema com 0,2 miligramas por mililitro de tricaine.Aguarde até que o peixe esteja totalmente anestesiado sem movimento ou sem resposta ao toque. Transfira suave e rapidamente o peixe para o recipiente de vidro com a esponja para a incisão anteriormente feita com o lado ventral do peixe voltado para cima. Abaixe suavemente o transdutor usando a alça do sistema ferroviário colocando-o longitudinalmente e feche o lado ventral do peixe com o entalhe do transdutor voltado para o operador.Deixe de dois a três milímetros de folga do peixe. Ajuste a plataforma em relação ao transdutor usando o micromanipulador nos três eixos até que o coração do peixe seja visualizado. Imediatamente após a localização do coração, selecione ou permaneça no modo B e reduza o campo ampliando para conseguir um olhar mais atento ao coração.Se necessário, melhore a qualidade ou contraste da imagem, definindo o alcance dinâmico para 45 a 50 decibéis. Vá para os controles do modo B na opção mais controles e, posteriormente, salve a alteração para predefinições de modo. Toque em predefinições de modo para selecionar a configuração otimizada de aquisição de imagem todas as vezes antes de começar a imagem de uma nova série.Pegue quantas imagens desejarem no plano do eixo longo. Em seguida, mude para doppler cor para detecção e aquisição de fluxo sanguíneo. Usando a tela sensível ao toque, posicione o quadrante em cima da válvula atrioventricular e localize o fluxo que se distingue pelo sinal de cor vermelha.Reduza a área do quadrante o máximo possível para aumentar a taxa de quadros. Ative a onda de pulso que Doppler se move para amostrar a velocidade de entrada de sangue ventricular. Posicione o portão de volume da amostra no centro da válvula atrioventricular para detectar a velocidade máxima de fluxo.O sinal de cor vermelha fica mais amarelado. Ajuste o ângulo de onda de pulso na tela usando os dedos para que ele se alinhe com a direção do fluxo sanguíneo. Pressione o início ou a atualização para começar a amostragem da velocidade do sangue que flui para o ventrículo.Determine a velocidade de saída colocando o quadrante Doppler colorido na junção entre o ventrículo e o bulbo e localize o fluxo. Isso é distinguido por um sinal de cor azul. Posicione o portão de volume da amostra logo antes da junção do bulbo ventrículo e ajuste a linha de correção do ângulo para combinar com a direção do fluxo sanguíneo.Ajuste a linha de base elevando-a no painel de velocidade de fluxo, a fim de detectar e rastrear completamente os picos de sinal. Assim que a aquisição da imagem estiver completa, use uma colher de chá e transfira o peixe para o sistema regular de água aerada livre de tricaine e deixe o peixe se recuperar. Para ajudar na recuperação, esguiche água repetidamente sobre as brânquias usando uma pipeta de transferência para promover a aeração da transferência de água e oxigênio.Geralmente leva de 30 segundos a dois minutos para retomar o movimento da brânquia e a natação. Abra o software de análise de imagens. Selecione uma imagem e clique no ícone de processamento de imagem.Ajuste o brilho e o contraste da imagem para permitir uma visualização clara das paredes ventriculares ou do padrão de fluxo sanguíneo. Usando a imagem do modo B, abra a lista suspensa a partir da opção de eixo longo parasténal nas medidas do pacote cardíaco. Selecione o traço de LV e trace a parede interna ventricular na sistóstole e na diastole para obter a área ventricular em sistósseo e diastole e volume diastólico e volume sistólico final.Neste estudo, as imagens do modo B permitiram o rastreamento da parede interna ventricular em sístole e diastole e obtenção de dados dimensionais, como dimensões de câmara e parede. Também foram obtidos dados funcionais, como frequência cardíaca, volume de derrame e saída cardíaca, bem como parâmetros de função sistólica ventricular, incluindo alteração fracionária de área e fração de ejeção. As medições ao nível da válvula atrioventricular usando imagens do modo Doppler coloridas também forneceram velocidades de fluxo ventricular e fluxo sanguíneo.Com base na imagem doPpler da onda de pulso, um valor de frequência cardíaca foi gerado traçando três picos de fluxo aórtico consecutivos. O mais importante é posicionar a plataforma de ultrassom e o peixe corretamente para imagens precisas e minimizar a exposição dos peixes à tricaine. Métodos adicionais para apoiar este procedimento incluem eletrocardiograma de peixe para detecção rápida de disfunção cardíaca como arritmias ou métodos de histologia para avaliar a estrutura do tecido cardíaco ou morte celular.Essas técnicas permitem a avaliação da função cardíaca dos zebrafish e estabelecem um fenótipo cardíaco em modelos de doenças cardíacas de zebrafish. Também permite testar novas drogas, estudar lesões cardíacas e capacidade regenerativa. Tricaine MS-222 é uma pele, olho e irritante respiratório.Ao preparar a solução tricaine, os equipamentos de proteção devem incluir uma máscara de poeira, escudo ocular e luvas.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Generation of Murine Cardiac Pacemaker Cell Aggregates Based on ES-Cell-Programming in Combination with Myh6-Promoter-Selection

Geração de Murino Marcapasso Cardíaco Agregados célula com base na ES-Cell-Programação em combinação com Myh6-Promotor-Seleção

Treatment of the &#8220;sick sinus syndrome&#8221; is based on artificial pacemakers. These bear hazards such as battery failure and infections. Moreover, ...

Biologia do Desenvolvimento

Contrast Imaging in Mouse Embryos Using High-frequency Ultrasound

Imagem Contraste em embriões de camundongos Usando de alta freqüência ultra-som

Ultrasound contrast-enhanced imaging can convey essential quantitative information regarding tissue vascularity and perfusion and, in targeted ...

Using Touch-evoked Response and Locomotion Assays to Assess Muscle Performance and Function in Zebrafish

Usando resposta ao toque evocadas e locomoção Os ensaios para avaliar o desempenho muscular e funcional de Zebrafish

Zebrafish muscle development is highly conserved with mammalian systems making them an excellent model to study muscle function and disease. Many ...

Building Finite Element Models to Investigate Zebrafish Jaw Biomechanics

Construindo Modelos de Elementos Finitos para investigar Zebrafish Jaw Biomecânica

Skeletal morphogenesis occurs through tightly regulated cell behaviors during development; many cell types alter their behavior in response to mechanical ...

Acute and Chronic Models of Hyperglycemia in Zebrafish: A Method to Assess the Impact of Hyperglycemia on Neurogenesis and the Biodistribution of Radiolabeled Molecules

Modelos agudos e crônicos de hiperglicemia no peixe-zebra: um método para avaliar o impacto da hiperglicemia na neurogênese e a biodisponibilidade das moléculas radiomarcadas

Hyperglycemia is a major health issue that leads to cardiovascular and cerebral dysfunction. For instance, it is associated with increased neurological ...

A Novel Use of Three-dimensional High-frequency Ultrasonography for Early Pregnancy Characterization in the Mouse

Um novo uso da ultra-sonografia tridimensional de alta frequência para caracterização de gravidez precoce no Mouse

High-frequency ultrasonography (HFUS) is a common method to non-invasively monitor the real-time development of the human fetus in utero. The mouse is ...

Fetal Mouse Cardiovascular Imaging Using a High-frequency Ultrasound (30/45MHZ) System

Fetal Mouse Cardiovascular Imaging Using a High-frequency Ultrasound 30/45MHZ System

Imagem cardiovascular fetal de camundongo usando um sistema de ultrassom de alta frequência (30/45MHZ)

Congenital heart defects (CHDs) are the most common cause of childhood morbidity and early mortality. Prenatal detection&#160;of the underlying molecular ...

High Frequency Ultrasound for the Analysis of Fetal and Placental Development In Vivo

High Frequency Ultrasound for the Analysis of Fetal and Placental Development In Vivo

Ultra-som de alta frequência para a análise do desenvolvimento Fetal e placentário na Vivo

Ultrasound imaging is a widespread method used to detect organ anomalies and tumors in human and animal tissues. The method is non-invasive, harmless, and ...

A Direct and Simple Method to Assess Drosophila melanogaster's Viability from Embryo to Adult

A Direct and Simple Method to Assess Drosophila melanogaster's Viability from Embryo to Adult

Um método direto e simples para avaliar a viabilidade da Drosophila melanogasterdo embrião ao adulto

In Drosophila melanogaster, viability assays are used to determine the fitness of certain genetic backgrounds. Allelic variations can result in partial or ...

Whole-Mount In Situ Hybridization in Zebrafish Embryos and Tube Formation Assay in iPSC-ECs to Study the Role of Endoglin in Vascular Development

Hibridização em Embriões de Zebrafish e Ensaio de Formação de Tubos em iPSC-CEs para estudar o papel da endoglina no desenvolvimento vascular

Vascular development is determined by the sequential expression of specific genes, which can be studied by performing in situ hybridization assays in ...