Name: high-frequency ultrasound echocardiography to assess zebrafish cardiac function
Uploaded: 2020-03-12T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about High-Frequency Ultrasound Echocardiography to Assess Zebrafish Cardiac Function at JoVE.com

Vi tackar Fred Roberts tekniska stöd och revidering av manuskriptet.

Alla förfaranden som involverar zebrafisk godkändes av vår kommitté för institutionsvård och användning av djur och bruk och är i enlighet med LAGEN om djurskydd.
1. Experimentell upplägg
<ol><li>
Ställa in plattformen för bildförvärv
	<ol>
<li>Med hjälp av små saxar eller en skalpell gör ett snitt på en svamp vid 12-tiden position för att hålla fisken under skanning. Placera svampen i en glasbehållare (figur 2A</stro...

<ol>
	<li>Santoriello, C., Zon, L. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hooked!+Modeling+human+disease+in+zebrafish.">Hooked! Modeling human disease in zebrafish.</a> Journal of Clinical Investigation. 122 (7), 2337-2343 (2012).</li><li>Verkerk, A. O., Remme, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish:+a+novel+research+tool+for+cardiac+(patho)electrophysiology+and+ion+channel+disorders.">Zebrafish: a novel research tool for cardiac (patho)electrophysiology and ion channel disorders.</a> Frontiers in Physiology. 3, 255 (2012).</li><li>Bakkers, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+as+a+model+to+study+cardiac+development+and+human+cardiac+disease.">Zebrafish as a model to study cardiac development and human cardiac disease.</a> Cardiovascular research. 91 (2), 279-288 (2011).</li><li>Poon, K. L., Brand, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+zebrafish+model+system+in+cardiovascular+research:+A+tiny+fish+with+mighty+prospects.">The zebrafish model system in cardiovascular research: A tiny fish with mighty prospects.</a> Global Cardiology Science and Practise. 2013 (1), 9-28 (2013).</li><li>Jopling, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+heart+regeneration+occurs+by+cardiomyocyte+dedifferentiation+and+proliferation.">Zebrafish heart regeneration occurs by cardiomyocyte dedifferentiation and proliferation.</a> Nature. 464 (7288), 606-609 (2010).</li><li>Mishra, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+model+of+amyloid+light+chain+cardiotoxicity:+regeneration+versus+degeneration.">Zebrafish model of amyloid light chain cardiotoxicity: regeneration versus degeneration.</a> American Journal of Physiology Heart Circulatory Physiology. 316 (5), H1158-H1166 (2019).</li><li>Shin, J. T., Pomerantsev, E. V., Mably, J. D., MacRae, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+cardiovascular+function+confirms+functional+orthology+of+myocardial+contractility+pathways+in+zebrafish.">High-resolution cardiovascular function confirms functional orthology of myocardial contractility pathways in zebrafish.</a> Physiologycal Genomics. 42 (2), 300-309 (2010).</li><li>Mishra, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+amyloidogenic+light+chain+proteins+result+in+cardiac+dysfunction,+cell+death,+and+early+mortality+in+zebrafish.">Human amyloidogenic light chain proteins result in cardiac dysfunction, cell death, and early mortality in zebrafish.</a> American Journal of Physiology Heart Circulatory Physiology. 305 (1), H95-H103 (2013).</li><li>Ernens, I., Lumley, A. I., Devaux, Y., Wagner, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+Coronary+Ultrasound+Imaging+to+Evaluate+Ventricular+Function+in+Adult+Zebrafish.">Use of Coronary Ultrasound Imaging to Evaluate Ventricular Function in Adult Zebrafish.</a> Zebrafish. 13 (6), 477-480 (2016).</li><li>Gonz&#225;lez-Rosa, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+Echocardiography+Reveals+Reestablishment+of+Ventricular+Pumping+Efficiency+and+Partial+Ventricular+Wall+Motion+Recovery+upon+Ventricular+Cryoinjury+in+the+Zebrafish.">Use of Echocardiography Reveals Reestablishment of Ventricular Pumping Efficiency and Partial Ventricular Wall Motion Recovery upon Ventricular Cryoinjury in the Zebrafish.</a> PLoS One. 9 (12), (2014).</li><li>Huang, C. C., Su, T. H., Shih, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+tissue+Doppler+imaging+of+the+zebrafish+heart+during+its+regeneration.">High-resolution tissue Doppler imaging of the zebrafish heart during its regeneration.</a> Zebrafish. 12 (1), 48-57 (2015).</li><li>Kang, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-frequency+dual+mode+pulsed+wave+Doppler+imaging+for+monitoring+the+functional+regeneration+of+adult+zebrafish+hearts.">High-frequency dual mode pulsed wave Doppler imaging for monitoring the functional regeneration of adult zebrafish hearts.</a> Journal of the Royal Society Interface. 12 (103), (2015).</li><li>Lee, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemodynamics+and+ventricular+function+in+a+zebrafish+model+of+injury+and+repair.">Hemodynamics and ventricular function in a zebrafish model of injury and repair.</a> Zebrafish. 11 (5), 447-454 (2014).</li><li>Sun, L., Lien, C. L., Xu, X., Shung, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+Vivo+Cardiac+Imaging+of+Adult+Zebrafish+Using+High+Frequency+Ultrasound+(45-75+MHz).">In Vivo Cardiac Imaging of Adult Zebrafish Using High Frequency Ultrasound (45-75 MHz).</a> Ultrasound in Medicine and Biology. 34 (1), 31-39 (2008).</li><li>Wang, L. W., Kesteven, S. H., Huttner, I. G., Feneley, M. P., Fatkin, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-Frequency+Echocardiography-+Transformative+Clinical+and+Research+Applications+in+Humans,+Mice,+and+Zebrafish.">High-Frequency Echocardiography- Transformative Clinical and Research Applications in Humans, Mice, and Zebrafish.</a> Circulation Journal. 82 (3), 620-628 (2018).</li><li>Wang, L. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardized+echocardiographic+assessment+of+cardiac+function+in+normal+adult+zebrafish+and+heart+disease+models.">Standardized echocardiographic assessment of cardiac function in normal adult zebrafish and heart disease models.</a> Disease Models &amp; Mechanisms. 10 (1), 63 (2017).</li><li>Lee, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+Assessment+of+Cardiac+Responses+of+Adult+Zebrafish+(Danio+rerio)+to+Acute+and+Chronic+Temperature+Change+Using+High-Resolution+Echocardiography.">Functional Assessment of Cardiac Responses of Adult Zebrafish (Danio rerio) to Acute and Chronic Temperature Change Using High-Resolution Echocardiography.</a> PLOS ONE. 11 (1), e0145163 (2016).</li><li>Genge, C. E., et al., Nilius, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Reviews of Physiology, Biochemistry and Pharmacology. 171, 99-136 (2016).</li></ol>

Vi beskriver en systematisk metod för ekokardiografisk avbildning och bedömning av hjärtfunktion hos vuxna zebrafiskar. Ekokardiografi är den enda tillgängliga icke-invasiva och mest robusta metoden för levande vuxna fisk hjärt avbildning och funktionell analys, och det blir allt populärare i zebrafisk kardiovaskulär forskning. Den tid som behövs är kort och möjliggör höggenomströmning och longitudinella studier. Det finns dock stora skillnader i den metod som används och dataanalys. Standardisering av ze...

Zebrafisken (Danio rerio) är en väletablerad ryggradsdjursmodell för studier av utvecklingsprocesser och mänskliga sjukdomar1. Zebrafisk har hög genetisk likhet med människor (70%), genetisk tractabilitet, hög fruktbarhet och optisk transparens under embryonal utveckling, vilket möjliggör direkt visuell analys av organ och vävnader, inklusive hjärtat. Trots att zebrafiskhjärtat (figur 1)bara har ett atrium och en kammare, är det fysiologiskt liknar däggdjursfyra kaminerade hjärtan. Viktigt, zebrafisk puls, elektrokardiogram morfologi, och åtgärder potential form liknar människors mer än murine arter2. Dessa funktioner har gjort zebrafisk en utmärkt modell för kardiovaskulär forskning och har gett stora insikter i hjärtutveckling3,4,förnyelse5, och patologiskt villkor31,,3,4, inklusive åderförkalkning, kardiomyopatier, arytmier, medfödda hjärtsjukdomar, och amyloid ljuskedja kardiotoxicitet1,4,,6. Bedömning av hjärtfunktionen har varit möjlig under det embryonala stadiet (1 dagar efter befruktning) genom direkt videoanalys med hjälp av höghastighetsvideomikroskopi7,8. Zebrafisk förlorar dock sin transparens bortom det embryonala stadiet, vilket begränsar funktionella utvärderingar av normala mogna hjärtan och sent debuten hjärtproblem. För att övervinna denna begränsning, ekokardiografi har framgångsrikt använts som en högupplöst, realtid, noninvasive imaging alternativ för att utvärdera vuxna zebrafisk hjärtfunktion9,10,,11,12,13,14,15.
I zebrafiskar ligger hjärtat ventrally i brösthålan omedelbart i bakre hand till gälarna med atriumet som ligger ryggmot ventrikeln. Atriumet samlar venöst blod från sinus venosus och överför det till ventrikeln där det pumpas vidare till bulbus arteriosus (figur 1). Här beskriver vi ett fysiologiskt, under vattnet, protokoll för att bedöma hjärtfunktionen hos vuxna zebrafiskar med icke-invasiv ekokardiografi med hjälp av en linjär matrisultraljudssond med en mittfrekvens på 50 MHz för B-lägesavbildning med en upplösning på 30 μm. Eftersom ultraljudsvågor lätt kan färdas genom vatten, hålla nära närheten mellan fisken och skanningssonden under vattnet ger tillräckligt med kontaktyta för hjärtdetektering utan behov av ultraljud gel och är totalt sett mindre stressande för fisken. Även alternativa zebrafisk ekokardiografi system rapporterades av flera författare9,12,13, här presenterar vi den allmänna och vanligaste installationen som gäller för högfrekventultraljud hos djur.
Metoden möjliggör högupplöst avbildning av det vuxna zebrafiskhjärtat, spårning av hjärtstrukturer och kvantifiering av topphastigheter från Dopplerblodflödesmätningar. Vi visar tillförlitlig in vivo kvantifiering av viktiga systoliska och diastoliska parametrar, såsom utmatningfraktion (EF), fraktionerad områdesförändring (FAC), ventrikulärt blodflöde och utflödeshastigheter, hjärtfrekvens (HR) och hjärtminutvolym (CO). Vi bidrar till att etablera ett tillförlitligt utbud av normala friska vuxna zebrafiskar hjärt funktionella och dimensionella parametrar för att möjliggöra en mer exakt utvärdering av patologiskt tillstånd. Sammantaget ger vi en robust metod för att bedöma hjärtfunktionen hos zebrafisk, som har visat sig vara mycket användbar för att etablera och validera zebrafisk hjärtsjukdommodeller66,16,hjärtskada och återhämtning10,,13,och förnyelse11,,12,och kan användas ytterligare för att utvärdera potentiella läkemedel.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Double sided tape</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fish net</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass container - 100 inch high</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High frequency transducer</td>
			<td>Fujifilm/VisualSonics</td>
			<td>MX700</td>
			<td>Band width 29-71 MHz, Centre transmit 50 MHz, Axial resolution 30 &#181;m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic teaspoon</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel or scissors</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small fish tanks</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sponge (kitchen sponge)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transfer pipets (graduated 3 mL)</td>
			<td>Samco Scientific</td>
			<td>212</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tricaine (MS-222)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A5040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vevo 3100 Imaging system and imaging station</td>
			<td>Fujifilm/VisualSonics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vevo LAB sofware v 1.7.1</td>
			<td>Fujifilm/VisualSonics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

high-frequency ultrasound echocardiography to assess zebrafish cardiac function

Zebrafisken (Danio rerio) har blivit en mycket populär modellorganism inom kardiovaskulär forskning, inklusive mänskliga hjärtsjukdomar, till stor del på grund av dess embryonala öppenhet, genetiska tractability och bekvämligheter till snabba, höggenomströmningsstudier. Förlusten av öppenhet begränsar dock hjärtfunktionsanalysen i vuxenstadiet, vilket komplicerar modelleringen av åldersrelaterade hjärtproblem. För att övervinna sådana begränsningar, högfrekvent ultraljud ekokardiografi i zebrafisk växer fram som ett hållbart alternativ. Här presenterar vi ett detaljerat protokoll för att bedöma hjärtfunktionen hos vuxna zebrafiskar med icke-invasiv ekokardiografi med högfrekvent ultraljud. Metoden möjliggör visualisering och analys av zebrafisk hjärta dimension och kvantifiering av viktiga funktionella parametrar, inklusive puls, stroke volym, hjärtminut, och utmatning fraktion. I denna metod snarasseder och hålls under vattnet och kan återvinnas efter ingreppet. Även om högfrekvent ultraljud är en dyr teknik, kan samma bildplattform användas för olika arter (t.ex. murine och zebrafisk) genom att anpassa olika givare. Zebrafisk ekokardiografi är en robust metod för hjärt fenotypning, användbar i validering och karakterisering av sjukdomsmodeller, särskilt sena sjukdomar; drogskärmar; studier av hjärtskada, återhämtning och regenerativ kapacitet.

Det beskrivna protokollet möjliggör mätning av viktiga hjärtdimensionella och funktionella parametrar, analoga med den teknik som används i human- och djurekokardiografi. B-lägesbilderna möjliggör spårning av Ventrikulärt inre vägg i systole och diastole(figur 5)och erhålla dimensionsdata, såsom kammar- och väggdimensioner, och funktionella data, såsom puls, linjevolym och hjärtutgång samt parametrar för ventrikulärt systolisk funktion, så...

Watch this Scientific Journal Video about High-Frequency Ultrasound Echocardiography to Assess Zebrafish Cardiac Function at JoVE.com

High-Frequency Ultrasound Echocardiography to Assess Zebrafish Cardiac Function

Vi beskriver ett protokoll för att bedöma hjärtmorfologi och funktion hos vuxna zebrafiskar med högfrekvent ekokardiografi. Metoden möjliggör visualisering av hjärtat och efterföljande kvantifiering av funktionella parametrar, såsom puls (HR), hjärtutgång (CO), fraktionerad områdeförändring (FAC), utmatningsfraktion (EF) och blodflödeoch utflödeshastigheter.

Högfrekvent ultraljud ekokardiografi för att bedöma zebrafisk hjärtfunktion

The zebrafish (Danio rerio) has become a very popular model organism in cardiovascular research, including human cardiac diseases, largely due to its ...

Protokollet tillåter noninvasive och högupplöst representation och analys av vuxna zebrafish hjärtfunktion. Denna metod kan användas för validering av vuxna hjärtsjukdomar modeller och potentiella drog skärmar. Denna teknik möjliggör snabb positionering av fisken för korrekt bildåtergivning ger korrekta och reproducerbara resultat.Det är noninvasive och utförs under vattnet vilket möjliggör snabb återhämtning av fisken. För att ställa in plattformen för bild förvärv, använd små saxar eller en skalpell för att göra ett snitt på en svamp vid 12 klockan position. Placera svampen i en glasbehållare.Med hjälp av dubbelsidig tejp, fäst glasbehållaren som innehåller svampen på ultraljudsplattformen. Se till att glasbehållaren står i mitten av plattformen och sitter stadigt fast. Luta plattformen framåt ca 30 grader med hjälp av vredet på vänster sida av plattformshållaren.Fyll glasbehållaren med cirka 200 milliliter fisksystemvatten som innehåller 0,2 milligram per milliliter trikainmetansulfonat. Sätt in givaren inom mikromanipulatorhållaren på den arbetande skenstationen som vrider givarens skåra mot operatören. Håll arrayen parallell med marken med arbetssidan i längsled med avseende på scenen.Lämna tillräckligt med utrymme ca 10 centimeter på båda sidor för den nu anslutna givaren järnvägssystemet att röra sig längs x och y-axlar. Logga in på kontrollprogramvaran och välj mus liten vaskulär. Skapa en ny studie samt en ny serie för varje djur som induceras i studien.Tryck på den nya studieknappen som finns längst ned till vänster på skärmen på webbläsarsidan. Vyn startar i B-läge. Med hjälp av ett fisknät, överföra fisken till en liten tank som innehåller systemvatten med 0,2 milligram per milliliter trikain.Vänta tills fisken är helt sövd utan rörelse eller inget svar på beröring. Försiktigt och snabbt överföra fisken i glasbehållaren med svampen i det tidigare gjorda snittet med den ventrala sidan av fisken vänd uppåt. Sänk försiktigt ner givaren med hjälp av handtaget på skensystemet som placerar den i längsled och stäng fiskens ventrala sida med skåran på givaren vänd mot operatören.Lämna två till tre millimeters fria från fisken. Justera plattformen i avseende på givaren med hjälp av mikromanipulatorn i alla tre axlarna tills fiskhjärtat visualiseras. Omedelbart efter att ha lokaliserat hjärtat väljer du eller stannar i B-läge och minskar fältet genom att zooma in för att uppnå en närmare titt på hjärtat.Om det behövs, höj kvaliteten eller kontrasten på bilden genom att ställa in det dynamiska omfånget till 45 till 50 decibel. Gå till B-lägeskontrollerna i alternativet fler kontroller och spara därefter ändringen till lägesförinställningar. Tryck på lägesförinställningar för att välja den optimerade inställningen för bildanskaffning varje gång innan du börjar avbilda en ny serie.Ta så många bilder som önskas i den långa axeln planet. Därefter byter du till färg Doppler för blodflödesdetektering och förvärv. Med hjälp av pekskärmen, placera kvadranten ovanpå atrioventrikulära ventilen och lokalisera inflödet som utmärker sig genom den röda färgsignalen.Minska kvadrantområdet så mycket som möjligt för att öka bildrutefrekvensen. Aktivera pulsvågen Doppler flytta till prov ventrikulärt blod inflödeshastighet. Placera provvolymporten i mitten av atrioventricularventilen för att upptäcka den maximala flödeshastigheten.Den röda färgsignalen blir mer gulaktig. Justera pulsvågsvinkeln på skärmen med hjälp av fingrarna så att den ligger i linje med blodinflödets riktning. Tryck på start eller uppdatering för att börja provtagning av hastigheten på blod som strömmar in i ventrikeln.Bestäm utflödeshastigheten genom att placera färgen Dopplerkvadranten vid korsningen mellan ventrikeln och bulbusen och lokalisera flödet. Detta utmärker sig genom en blå färgsignal. Placera provvolymporten precis före ventrikelglöduskorsningen och justera vinkelkorrigeringslinjen så att den matchar blodflödets riktning.Justera baslinjen höja den i flödeshastighet panelen för att helt upptäcka och spåra signaltoppar. Så snart bilden förvärvet är klar, använda en tesked och överföra fisken i vanliga systemet luftat vatten fri från trikain och låt fisken återhämta sig. För att hjälpa till att återhämta, spruta vatten upprepade gånger över gälarna med hjälp av en överföringspipett för att främja aeration av vatten- och syreöverföringen.Det tar vanligtvis 30 sekunder till två minuter att återuppta gälrörelsen och simningen. Öppna bildanalysprogramvaran. Välj en bild och klicka på bildbehandlingsikonen.Justera ljusstyrka och kontrast i bilden för att möjliggöra tydlig visualisering av ventrikulära väggar eller blodflödesmönster. Med hjälp av B-lägesbilden öppnar du dropdown-listan från alternativet parasternal lång axel på hjärtpaketsmätningarna. Välj LV-spår och spåra den ventrikulära innerväggen vid systole och diastole för att erhålla det ventrikulära området i systole och diastole och diastolisk volym och slutsystolisk volym.I denna studie, B-mode bilder tillåtet för spårning av ventrikulära innervägg i systole och diastole och erhålla av dimensionella data såsom kammare och vägg dimensioner. Funktionella data erhölls också såsom hjärtfrekvens, stroke volym och hjärt-utgång samt parametrar för Ventrikulärt systoliskt funktion inklusive fraktionerad område förändring och ejection fraktion. Mätningar på nivån för atrioventricular ventilen med hjälp av färg Doppler läge bilder också som ventrikulärt inflöde och utflöde blod hastigheter.Baserat på pulsvågen Doppler bilden, en puls värde genererades genom att spåra tre på varandra följande aorta flöde toppar. Det viktigaste är att placera ultraljudsplattformen och fisken korrekt för noggrann avbildning och att minimera fiskexponeringen för trikain. Ytterligare metoder för att stödja detta förfarande inkluderar fisk elektrokardiogram för snabb upptäckt av hjärtat dysfunktion som arytmier eller histologi metoder för att utvärdera hjärtvävnad struktur eller celldöd.Dessa tekniker möjliggör utvärdering av zebrafish hjärtfunktion och upprätta en hjärt fenotyp i zebrafish hjärtsjukdom modeller. Det gör det också möjligt att testa nya läkemedel, studera hjärtskada och regenerativ kapacitet. Tricaine MS-222 är en hud, öga, och andningsirriterande.Vid beredning av trikainlösning bör skyddsutrustning innehålla en dammmask, ögonsköld och handskar.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Generation of Murine Cardiac Pacemaker Cell Aggregates Based on ES-Cell-Programming in Combination with Myh6-Promoter-Selection

Generation av murina hjärtstimulator cellaggregat Baserat på ES-cell-programmering i kombination med Myh6-promotor-Val

Treatment of the &#8220;sick sinus syndrome&#8221; is based on artificial pacemakers. These bear hazards such as battery failure and infections. Moreover, ...

Contrast Imaging in Mouse Embryos Using High-frequency Ultrasound

Contrast Imaging i musembryon Använda Högfrekvent Ultraljud

Ultrasound contrast-enhanced imaging can convey essential quantitative information regarding tissue vascularity and perfusion and, in targeted ...

Using Touch-evoked Response and Locomotion Assays to Assess Muscle Performance and Function in Zebrafish

Användning av anslags-framkallat svar och Locomotion Analyser för att bedöma muskel prestanda och funktion i Zebrafish

Zebrafish muscle development is highly conserved with mammalian systems making them an excellent model to study muscle function and disease. Many ...

Building Finite Element Models to Investigate Zebrafish Jaw Biomechanics

Att bygga Finita Element Modeller för att undersöka Zebrafish Jaw biomekanik

Skeletal morphogenesis occurs through tightly regulated cell behaviors during development; many cell types alter their behavior in response to mechanical ...

Acute and Chronic Models of Hyperglycemia in Zebrafish: A Method to Assess the Impact of Hyperglycemia on Neurogenesis and the Biodistribution of Radiolabeled Molecules

Akuta och kroniska modeller av hyperglykemi i sebrafisk: En metod för att bedöma effekterna av hyperglykemi på neurogenes och biodistribution av radiomärkta molekyler

Hyperglycemia is a major health issue that leads to cardiovascular and cerebral dysfunction. For instance, it is associated with increased neurological ...

A Novel Use of Three-dimensional High-frequency Ultrasonography for Early Pregnancy Characterization in the Mouse

En ny användning av tredimensionella högfrekvent ultraljud för tidig graviditet karakterisering i musen

High-frequency ultrasonography (HFUS) is a common method to non-invasively monitor the real-time development of the human fetus in utero. The mouse is ...

Fetal Mouse Cardiovascular Imaging Using a High-frequency Ultrasound (30/45MHZ) System

Fetal Mouse Cardiovascular Imaging Using a High-frequency Ultrasound 30/45MHZ System

Fostrets mus hjärt Imaging använder ett högfrekvent ultraljud (30 / 45MHZ)

Congenital heart defects (CHDs) are the most common cause of childhood morbidity and early mortality. Prenatal detection&#160;of the underlying molecular ...

High Frequency Ultrasound for the Analysis of Fetal and Placental Development In Vivo

High Frequency Ultrasound for the Analysis of Fetal and Placental Development In Vivo

Hög frekvens ultraljud för analys av foster och placenta utveckling In Vivo

Ultrasound imaging is a widespread method used to detect organ anomalies and tumors in human and animal tissues. The method is non-invasive, harmless, and ...

A Direct and Simple Method to Assess Drosophila melanogaster's Viability from Embryo to Adult

A Direct and Simple Method to Assess Drosophila melanogaster's Viability from Embryo to Adult

En direkt och enkel metod för att bedöma Drosophila melanogasterlönsamhet från embryo till vuxen

In Drosophila melanogaster, viability assays are used to determine the fitness of certain genetic backgrounds. Allelic variations can result in partial or ...

Whole-Mount In Situ Hybridization in Zebrafish Embryos and Tube Formation Assay in iPSC-ECs to Study the Role of Endoglin in Vascular Development

Helmonterad in situ-hybridisering i Zebrafish Embryon och Tube Formation Assay i iPSC-ECs att studera rollen av Endoglin i vaskulär utveckling

Vascular development is determined by the sequential expression of specific genes, which can be studied by performing in situ hybridization assays in ...