Name: high-frequency ultrasound echocardiography to assess zebrafish cardiac function
Uploaded: 2020-03-12T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about High-Frequency Ultrasound Echocardiography to Assess Zebrafish Cardiac Function at JoVE.com

Fred Roberts'ın teknik desteğine ve el yazmasının revizyonuna teşekkür ederiz.

Zebra balığı ile ilgili tüm prosedürler Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylanmıştır ve USDA Hayvan Refahı Yasası'na uygun olarak uygulanmaktadır.
1. Deneysel kurulum
<ol><li>
Görüntü edinimi için platform ayarlama
	<ol>
<li>Küçük makas veya neşter kullanarak tarama sırasında balık tutmak için saat 12 konumunda bir sünger üzerinde bir kesi yapmak. Süngeri cam bir kapta yerleştirin (Şekil 2<st...

<ol>
	<li>Santoriello, C., Zon, L. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hooked!+Modeling+human+disease+in+zebrafish.">Hooked! Modeling human disease in zebrafish.</a> Journal of Clinical Investigation. 122 (7), 2337-2343 (2012).</li><li>Verkerk, A. O., Remme, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish:+a+novel+research+tool+for+cardiac+(patho)electrophysiology+and+ion+channel+disorders.">Zebrafish: a novel research tool for cardiac (patho)electrophysiology and ion channel disorders.</a> Frontiers in Physiology. 3, 255 (2012).</li><li>Bakkers, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+as+a+model+to+study+cardiac+development+and+human+cardiac+disease.">Zebrafish as a model to study cardiac development and human cardiac disease.</a> Cardiovascular research. 91 (2), 279-288 (2011).</li><li>Poon, K. L., Brand, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+zebrafish+model+system+in+cardiovascular+research:+A+tiny+fish+with+mighty+prospects.">The zebrafish model system in cardiovascular research: A tiny fish with mighty prospects.</a> Global Cardiology Science and Practise. 2013 (1), 9-28 (2013).</li><li>Jopling, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+heart+regeneration+occurs+by+cardiomyocyte+dedifferentiation+and+proliferation.">Zebrafish heart regeneration occurs by cardiomyocyte dedifferentiation and proliferation.</a> Nature. 464 (7288), 606-609 (2010).</li><li>Mishra, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+model+of+amyloid+light+chain+cardiotoxicity:+regeneration+versus+degeneration.">Zebrafish model of amyloid light chain cardiotoxicity: regeneration versus degeneration.</a> American Journal of Physiology Heart Circulatory Physiology. 316 (5), H1158-H1166 (2019).</li><li>Shin, J. T., Pomerantsev, E. V., Mably, J. D., MacRae, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+cardiovascular+function+confirms+functional+orthology+of+myocardial+contractility+pathways+in+zebrafish.">High-resolution cardiovascular function confirms functional orthology of myocardial contractility pathways in zebrafish.</a> Physiologycal Genomics. 42 (2), 300-309 (2010).</li><li>Mishra, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+amyloidogenic+light+chain+proteins+result+in+cardiac+dysfunction,+cell+death,+and+early+mortality+in+zebrafish.">Human amyloidogenic light chain proteins result in cardiac dysfunction, cell death, and early mortality in zebrafish.</a> American Journal of Physiology Heart Circulatory Physiology. 305 (1), H95-H103 (2013).</li><li>Ernens, I., Lumley, A. I., Devaux, Y., Wagner, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+Coronary+Ultrasound+Imaging+to+Evaluate+Ventricular+Function+in+Adult+Zebrafish.">Use of Coronary Ultrasound Imaging to Evaluate Ventricular Function in Adult Zebrafish.</a> Zebrafish. 13 (6), 477-480 (2016).</li><li>Gonz&#225;lez-Rosa, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+Echocardiography+Reveals+Reestablishment+of+Ventricular+Pumping+Efficiency+and+Partial+Ventricular+Wall+Motion+Recovery+upon+Ventricular+Cryoinjury+in+the+Zebrafish.">Use of Echocardiography Reveals Reestablishment of Ventricular Pumping Efficiency and Partial Ventricular Wall Motion Recovery upon Ventricular Cryoinjury in the Zebrafish.</a> PLoS One. 9 (12), (2014).</li><li>Huang, C. C., Su, T. H., Shih, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+tissue+Doppler+imaging+of+the+zebrafish+heart+during+its+regeneration.">High-resolution tissue Doppler imaging of the zebrafish heart during its regeneration.</a> Zebrafish. 12 (1), 48-57 (2015).</li><li>Kang, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-frequency+dual+mode+pulsed+wave+Doppler+imaging+for+monitoring+the+functional+regeneration+of+adult+zebrafish+hearts.">High-frequency dual mode pulsed wave Doppler imaging for monitoring the functional regeneration of adult zebrafish hearts.</a> Journal of the Royal Society Interface. 12 (103), (2015).</li><li>Lee, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemodynamics+and+ventricular+function+in+a+zebrafish+model+of+injury+and+repair.">Hemodynamics and ventricular function in a zebrafish model of injury and repair.</a> Zebrafish. 11 (5), 447-454 (2014).</li><li>Sun, L., Lien, C. L., Xu, X., Shung, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+Vivo+Cardiac+Imaging+of+Adult+Zebrafish+Using+High+Frequency+Ultrasound+(45-75+MHz).">In Vivo Cardiac Imaging of Adult Zebrafish Using High Frequency Ultrasound (45-75 MHz).</a> Ultrasound in Medicine and Biology. 34 (1), 31-39 (2008).</li><li>Wang, L. W., Kesteven, S. H., Huttner, I. G., Feneley, M. P., Fatkin, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-Frequency+Echocardiography-+Transformative+Clinical+and+Research+Applications+in+Humans,+Mice,+and+Zebrafish.">High-Frequency Echocardiography- Transformative Clinical and Research Applications in Humans, Mice, and Zebrafish.</a> Circulation Journal. 82 (3), 620-628 (2018).</li><li>Wang, L. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardized+echocardiographic+assessment+of+cardiac+function+in+normal+adult+zebrafish+and+heart+disease+models.">Standardized echocardiographic assessment of cardiac function in normal adult zebrafish and heart disease models.</a> Disease Models &amp; Mechanisms. 10 (1), 63 (2017).</li><li>Lee, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+Assessment+of+Cardiac+Responses+of+Adult+Zebrafish+(Danio+rerio)+to+Acute+and+Chronic+Temperature+Change+Using+High-Resolution+Echocardiography.">Functional Assessment of Cardiac Responses of Adult Zebrafish (Danio rerio) to Acute and Chronic Temperature Change Using High-Resolution Echocardiography.</a> PLOS ONE. 11 (1), e0145163 (2016).</li><li>Genge, C. E., et al., Nilius, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Reviews of Physiology, Biochemistry and Pharmacology. 171, 99-136 (2016).</li></ol>

Erişkin zebra balıklarında ekokardiyografik görüntüleme ve kardiyak fonksiyonun değerlendirilmesi için sistematik bir yöntem tanımladık. Ekokardiyografi canlı erişkin balık kardiyak görüntüleme ve fonksiyonel analiz için mevcut tek non-invaziv ve en sağlam yöntemdir, ve zebrabalığı kardiyovasküler araştırmalarda giderek daha popüler hale gelmektedir. İhtiyaç duyulan süre kısadır ve yüksek iş ve boylamsal çalışmalara olanak sağlar. Ancak, kullanılan metodoloji ve veri analizinde öne...

Zebra balığı(Danio rerio)gelişimsel süreçler ve insan hastalıkları çalışmaları için iyi kurulmuş omurgalı modeli1. Zebra balıkları insanlara göre yüksek genetik benzerliğe sahiptir (%70), genetik sistemlenebilirlik, yüksek fecundity, ve embriyonik gelişim sırasında optik şeffaflık, hangi organ ve dokuların doğrudan görsel analizi sağlar, kalp de dahil olmak üzere. Sadece bir atriyum ve bir ventrikülolmasına rağmen, zebra balığı kalbi(Şekil 1)fizyolojik olarak memeli dört odalı kalplere benzer. Daha da önemlisi, zebrabalığı kalp hızı, elektrokardiyogram morfolojisi ve eylem potansiyeli şekli insanların daha fazla murinetürleri2 benzer. Bu özellikler zebra balığı kardiyovasküler araştırma için mükemmel bir model yaptık ve kardiyak gelişim içine önemli anlayışlar sağlamıştır3,4, rejenerasyon5, ve patolojik koşullar1,3,4, arterioskleroz dahil, kardiyomiyopatiler, aritmiler, konjenital kalp hastalıkları, ve amiloid Hafif zincir kardiyotoksisite1,4,6. Kardiyak fonksiyonun değerlendirilmesi embriyonik evre de (1 gün sonrası döllenme) yüksek hızlı video mikroskopi7,8kullanarak doğrudan video analizi ile mümkün olmuştur. Ancak, zebra balığı normal olgun kalplerin fonksiyonel değerlendirmelerini ve geç başlangıçlı kalp koşullarını sınırlayarak embriyonik evrenin ötesinde saydamlığını kaybederler. Bu sınırlamayı aşmak için, ekokardiyografi yetişkin zebrabalığı kalp fonksiyonu,9,10,11,12,13,14,15değerlendirmek için yüksek çözünürlüklü, gerçek zamanlı, noninvaziv görüntüleme alternatifi olarak başarıyla kullanılmıştır.10
Zebra balığında kalp, ventriküle kadar bulunan atriyum ile solungaçların hemen posterior torasik kavitede ventrally bulunur. Atriyum sinüs venöz venöz venöz venöz venöz kan toplar ve daha bulbus arteriosus pompalanır ventrikül aktarır (Şekil 1). Burada, 30 μm çözünürlükte B-mod görüntüleme için 50 MHz'lik merkez frekansı olan doğrusal dizili ultrason probu kullanılarak erişkin zebrabalıklarında kardiyak fonksiyonu nanvaziv olmayan ekokardiyografi ile değerlendirmek için fizyolojik, sualtı protokolünü tanımlıyoruz. Ultrason dalgaları kolayca su ile seyahat edebilirsiniz bu yana, balık ve tarama sonda su altında arasında yakın tutmak ultrason jel gerek kalmadan kalp tespiti için yeterli temas yüzeyi sağlar ve balık için genel olarak daha az stresli. Alternatif zebra balığı ekokardiyografi sistemleri çeşitli yazarlar tarafından rapor olmasına rağmen9,12,13, Burada hayvanlarda yüksek frekanslı ultrason için geçerlidir genel ve en sık kullanılan kurulum salıyoruz.
Bu yöntem, yetişkin zebrabalığı kalbinin yüksek çözünürlüklü görüntülenmesine, kardiyak yapıların izlenmesine ve Doppler kan akımı ölçümlerinden pik hızların ölçülmesine olanak sağlar. Ejeksiyon fraksiyonu (EF), fraksiyonel alan değişimi (FAC), ventriküler kan giriş ve çıkış hızları, kalp hızı (HR) ve kardiyak debi (CO) gibi önemli sistolik ve diyastolik parametrelerin in vivo nicel olarak güvenilir olarak ölçülmesini göstermekteyiz. Patolojik durumların daha hassas bir şekilde değerlendirilmesine olanak sağlamak için güvenilir bir dizi normal sağlıklı yetişkin zebrabalığı kardiyak fonksiyonel ve boyutsal parametrelerin oluşturulmasına katkıda bulunuyoruz. Genel olarak, zebra balığı kalp fonksiyonlarını değerlendirmek için sağlam bir yöntem saðlamak için sağlam bir yöntem saðlamak, zebrafish kalp hastalığı modelleri kurulması ve doğrulanmasında son derece yararlı olduğu kanıtlanmıştır6,16, kalp yaralanması ve kurtarma10,13, ve rejenerasyon 11,12, ve daha fazla potansiyel ilaçları değerlendirmek için kullanılabilir.12

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Double sided tape</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fish net</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass container - 100 inch high</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High frequency transducer</td>
			<td>Fujifilm/VisualSonics</td>
			<td>MX700</td>
			<td>Band width 29-71 MHz, Centre transmit 50 MHz, Axial resolution 30 &#181;m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic teaspoon</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel or scissors</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small fish tanks</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sponge (kitchen sponge)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transfer pipets (graduated 3 mL)</td>
			<td>Samco Scientific</td>
			<td>212</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tricaine (MS-222)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A5040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vevo 3100 Imaging system and imaging station</td>
			<td>Fujifilm/VisualSonics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vevo LAB sofware v 1.7.1</td>
			<td>Fujifilm/VisualSonics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

high-frequency ultrasound echocardiography to assess zebrafish cardiac function

Zebra balığı(Danio rerio)kardiyovasküler araştırmalarda çok popüler bir model organizma haline gelmiştir, insan kalp hastalıkları da dahil olmak üzere, büyük ölçüde embriyonik şeffaflık nedeniyle, genetik straktör, ve hızlı, yüksek iş yapma çalışmaları için uygunluk. Ancak, şeffaflık kaybı yetişkin aşamasında kalp fonksiyon analizi sınırlar, hangi yaşa bağlı kalp koşullarının modelleme karmaşıklaştırır. Bu tür sınırlamaları aşmak için, zebra balığında yüksek frekanslı ultrason ekokardiyografi uygun bir seçenek olarak ortaya çıkmaktadır. Burada erişkin zebra balıklarında kardiyak fonksiyonu yüksek frekanslı ultrason kullanarak non-invaziv ekokardiyografi ile değerlendirmek için ayrıntılı bir protokol sayılmaktadır. Bu yöntem zebrabalığı kalp boyutunun görüntülenmesi ve analizini ve kalp hızı, inme hacmi, kardiyak çıkış ve ejeksiyon fraksiyonu gibi önemli fonksiyonel parametrelerin ölçülmesine olanak sağlar. Bu yöntemde balıklar anestezi edilir ve su altında tutulur ve işlemden sonra geri kazanılabilir. Yüksek frekanslı ultrason pahalı bir teknoloji olmasına rağmen, aynı görüntüleme platformu farklı türler için kullanılabilir (örneğin, murine ve zebrabalığı) farklı dönüştürücüler adapte ederek. Zebrabalığı ekokardiyografisi, özellikle geç başlangıçlı hastalıklar olmak üzere hastalık modellerinin doğrulanmasında ve karakterizasyonunda yararlı olan kardiyak fenotipleme için sağlam bir yöntemdir; uyuşturucu ekranları; ve kalp hasarı, iyileşme ve rejeneratif kapasite çalışmaları.

Açıklanan protokol, insan ve hayvan ekokardiyografisinde kullanılan tekniğe benzer şekilde önemli kardiyak boyutlu ve fonksiyonel parametrelerin ölçülmesine olanak sağlar. B-Mode görüntüleri, ventriküler iç duvarın siston ve diyastole(Şekil 5)olarak izlenmesine ve oda ve duvar boyutları gibi boyutsal verilerin ve kalp hızı, inme hacmi ve kardiyak debi gibi fonksiyonel verilerin yanı sıra kesirli alan değişimi ve ejeksiyon fraksiyonu gi...

Watch this Scientific Journal Video about High-Frequency Ultrasound Echocardiography to Assess Zebrafish Cardiac Function at JoVE.com

High-Frequency Ultrasound Echocardiography to Assess Zebrafish Cardiac Function

Erişkin zebra balıklarında yüksek frekanslı ekokardiyografi kullanarak kalp morfolojisini ve işlevini değerlendirmek için bir protokol tanımladık. Bu yöntem kalbin görüntülenmesine ve kalp hızı (HR), kardiyak debi (CO), fraksiyonel alan değişimi (FAC), ejeksiyon fraksiyonu (EF) ve kan giriş ve çıkış hızları gibi fonksiyonel parametrelerin daha sonra ölçülmesine olanak sağlar.

Zebrafish Kardiyak Fonksiyondeğerlendirmek için Yüksek Frekanslı Ultrason Ekokardiyografi

The zebrafish (Danio rerio) has become a very popular model organism in cardiovascular research, including human cardiac diseases, largely due to its ...

Protokol, erişkin zebrabalığı kalp fonksiyonunun noninvaziv ve yüksek çözünürlüklü temsili ve analizine olanak tanır. Bu yöntem yetişkin kalp hastalığı modelleri ve potansiyel ilaç ekranlarının doğrulanması için kullanılabilir. Bu teknik, doğru görüntüleme için balığın hızlı konumlandırılmasına izin vererek doğru ve tekrarlanabilir sonuçlar sağlar.Bu noninvaziv ve balık hızlı kurtarma sağlayan sualtı yapılır. Görüntü edinme için platform kurmak için, saat 12 konumundaki bir süngerüzerinde kesi yapmak için küçük makas veya neşter kullanın. Bir cam kap ta sünger yerleştirin.Çift taraflı bant kullanarak, ultrason platformunda sünger içeren cam kabı yapıştırın. Cam kabın platformun merkezinde olduğundan ve sıkıca bağlı olduğundan emin olun. Platform tutucunun sol tarafındaki ahzıkullanarak platformu yaklaşık 30 derece öne doğru yatırın.Cam kabı, mililitre triain metansülfonat başına 0,2 miligram içeren yaklaşık 200 mililitre balık sistemi suyu ile doldurun. Transdüseri çalışan ray istasyonuna mikromanipülatör tutucunun içine yerleştirin ve transdüserin çifeniyi operatöre doğru çevirin. Sahne ile ilgili olarak çalışma tarafı uzunlamasına ile yere paralel dizi tutun.X ve y-eksenleri boyunca hareket etmek için şimdi bağlı transdüser raylı sistem için her iki tarafta yaklaşık 10 santimetre yer bırakın. Kontrol yazılımına giriş yapın ve fareküçük damar seçin. Çalışmada indüklenen her hayvan için yeni bir çalışma yanı sıra yeni bir dizi oluşturun.Tarayıcı sayfasında ekranın sol alt tarafında bulunan yeni çalışma düğmesine basın. Görünüm B modunda başlar. Bir balık ağı kullanarak, tricaine mililitre başına 0,2 miligram ile sistem suyu içeren küçük bir tankiçine balık aktarın.Balık tamamen hiçbir hareket veya dokunmaya yanıt ile anestezi kadar bekleyin. Yavaşça ve hızlı bir şekilde yukarı bakan balık ventral tarafı ile daha önce yapılmış kesi içine sünger ile cam konteyner içine balık aktarın. Raylı sistemüzerindeki sapı kullanarak transdüseri yavaşça indirin ve balığın ventral tarafını operatöre bakacak kadar transdüserin çentikiyle kapatın.Balıktan 2-3 milimetre açıklık bırakın. Balığın kalbi görselleşene kadar her üç eksendeki mikromanipülörü kullanarak platformu dönüştürücüye göre ayarlayın. Kalbi lokalize ettikten hemen sonra, B modunda kalın ve kalbe daha yakından bakmak için yakınlaştırarak alanı küçültün.Gerekirse, dinamik aralığı 45-50 desibel olarak ayarlayarak görüntünün kalitesini veya kontrastını artırın. Daha fazla denetim seçeneğinde B modu denetimlerine gidin ve daha sonra değişikliği mod hazır ayarlarına kaydedin. Yeni bir seri resmine başlamadan önce her seferinde en iyi duruma getirilmiş görüntü edinme ayarını seçmek için mod hazır ayarlarına dokunun.Uzun eksen düzleminde istediğiniz kadar görüntü alın. Sonra, kan akışı algılama ve edinimi için renk Doppler geçiş. Dokunmatik ekranı kullanarak, çeyreği atriyoventriküler valfin üzerine yerleştirin ve kırmızı renk sinyali ile ayırt edilen girişi yerelleştirin.Kare hızını artırmak için mümkün olduğunca çeyrek alanını azaltın. Nabız dalgadoppler hareket örnek ventriküler kan giriş hızı etkinleştirin. Maksimum akış hızını algılamak için örnek hacim kapısını atriyoventriküler valfin ortasına yerleştirin.Kırmızı renk sinyali daha sarımsı olur. Kan girişinin yönü ile hizalanır böylece parmakları kullanarak ekranda nabız dalga açısı ayarlayın. Ventriküle akan kanın hızını örneklemeye başlamak için başlat veya güncelleyin.Ventrikül ve bulbus arasındaki kavşakta renk Doppler çeyreği yerleştirerek çıkış hızını belirleyin ve akışı yerelleştirin. Bu mavi renk sinyali ile ayırt edilir. Örnek hacim kapısını ventrikül bulbus kavşağından hemen önce yerleştirin ve açı düzeltme çizgisini kan akışının yönüyle eşleşecek şekilde ayarlayın.Sinyal tepelerini tamamen algılamak ve izlemek için akış hızı panelinde anaçizgiyi yükselterek ayarlayın. En kısa sürede görüntü edinimi tamamlandığında, bir çay kaşığı kullanın ve düzenli sistem triaine ücretsiz havalandırılmış su içine balık aktarın ve balık kurtarmak sağlar. Kurtarma yardımcı olmak için, su ve oksijen transferi havalandırma teşvik etmek için bir transfer pipet kullanarak solungaçları üzerinde tekrar tekrar su fışkırtmak.Genellikle solungaç hareketi ve yüzme devam etmek için iki dakika 30 saniye sürer. Görüntü analizi yazılımını açın. Bir resim seçin ve resim işleme simgesine tıklayın.Ventriküler duvarların veya kan akış deseninin net bir şekilde görüntülenmesi için görüntünün parlaklığını ve kontrastını ayarlayın. B modu görüntüsünü kullanarak, kardiyak paket ölçümlerinde parasternal uzun eksen seçeneğinden açılır listeyi açın. Systole ve diastole ve diyastolik hacim ve son sistolik hacim ve son sistolik hacim ventriküler alan elde etmek için sisstole ve diastole de ventriküler iç duvar izlemek LV iz seçin.Bu çalışmada, B-mod görüntüleri systole ve diastole ve oda ve duvar boyutları gibi boyutsal verilerin elde ve ventriküler iç duvarın izlenmesi için izin verdi. Kalp hızı, inme hacmi ve kardiyak debi gibi fonksiyonel verilerin yanı sıra fraksiyonel alan değişimi ve ejeksiyon fraksiyonu gibi ventriküler sistolik fonksiyon parametreleri de elde edildi. Renkli Doppler modu görüntüleri kullanarak atriyoventriküler kapak düzeyinde ölçümler de ventriküler giriş ve çıkış kan hızları sağladı.Nabız dalga Doppler görüntü dayanarak, bir kalp hızı değeri üç ardışık aort akış zirveleri izleyerek oluşturuldu. En önemli şey doğru görüntüleme için ultrason platformu ve balık doğru konumlandırmak ve trikalin balık maruziyetini en aza indirmek tir. Bu prosedürü desteklemek için ek yöntemler aritmiler veya histoloji yöntemleri kalp dokusu yapısı veya hücre ölümü değerlendirmek için kalp disfonksiyonu hızlı tespiti için balık elektrokardiyogram içerir.Bu teknikler zebrabalığı kalp fonksiyonunun değerlendirilmesine olanak sağlar ve zebrabalığı kalp hastalığı modellerinde kardiyak fenotip ilerler. Ayrıca yeni ilaçlar test etmek için izin verir, çalışma kalp hasarı ve rejeneratif kapasite. Tricaine MS-222 bir deri, göz ve solunum tahriş edici.Trikain çözeltisi hazırlanırken koruyucu ekipmanlar bir toz maskesi, göz kalkanı ve eldiven içermelidir.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Generation of Murine Cardiac Pacemaker Cell Aggregates Based on ES-Cell-Programming in Combination with Myh6-Promoter-Selection

Myh6-Promotörle Seçim ile kombinasyonu ES-Hücre-Programlama dayanarak Kemirgen Kardiyak Kalp Pili Hücre Agregaların Üretimi

Treatment of the &#8220;sick sinus syndrome&#8221; is based on artificial pacemakers. These bear hazards such as battery failure and infections. Moreover, ...

Contrast Imaging in Mouse Embryos Using High-frequency Ultrasound

Yüksek frekanslı Ultrason Kullanımı Fare Embriyolar Kontrast Görüntüleme

Ultrasound contrast-enhanced imaging can convey essential quantitative information regarding tissue vascularity and perfusion and, in targeted ...

Using Touch-evoked Response and Locomotion Assays to Assess Muscle Performance and Function in Zebrafish

Dokunmatik uyarılmış Yanıt ve Hareket Deneyleri kullanarak Zebra balığı kas Performans ve fonksiyonunu değerlendirmek için

Zebrafish muscle development is highly conserved with mammalian systems making them an excellent model to study muscle function and disease. Many ...

Building Finite Element Models to Investigate Zebrafish Jaw Biomechanics

Zebra balığı Çeneli Biyomekanik Araştırma Sonlu Elemanlar Modelleri Bina

Skeletal morphogenesis occurs through tightly regulated cell behaviors during development; many cell types alter their behavior in response to mechanical ...

Acute and Chronic Models of Hyperglycemia in Zebrafish: A Method to Assess the Impact of Hyperglycemia on Neurogenesis and the Biodistribution of Radiolabeled Molecules

Zebra basımında Akut ve Kronik Hiperglisemi Modelleri: Hipergliseminin Nörogenez Üzerindeki Etkisini ve Radyoaktif Etiketli Moleküllerin Biyo Dağılımını Değerlendiren Bir Yöntem

Hyperglycemia is a major health issue that leads to cardiovascular and cerebral dysfunction. For instance, it is associated with increased neurological ...

A Novel Use of Three-dimensional High-frequency Ultrasonography for Early Pregnancy Characterization in the Mouse

Üç boyutlu yüksek frekanslı Ultrasonografi romanı kullanımı için fare erken gebelik karakterizasyonu

High-frequency ultrasonography (HFUS) is a common method to non-invasively monitor the real-time development of the human fetus in utero. The mouse is ...

Fetal Mouse Cardiovascular Imaging Using a High-frequency Ultrasound (30/45MHZ) System

Fetal Mouse Cardiovascular Imaging Using a High-frequency Ultrasound 30/45MHZ System

Fetal fare bir yüksek frekans ultrason (30/45 MHZ) sistemi kullanarak Imaging kardiyovasküler

Congenital heart defects (CHDs) are the most common cause of childhood morbidity and early mortality. Prenatal detection&#160;of the underlying molecular ...

High Frequency Ultrasound for the Analysis of Fetal and Placental Development In Vivo

High Frequency Ultrasound for the Analysis of Fetal and Placental Development In Vivo

Yüksek frekans ultrason Fetal ve plasental geliştirme Vivo içinde analizi için

Ultrasound imaging is a widespread method used to detect organ anomalies and tumors in human and animal tissues. The method is non-invasive, harmless, and ...

A Direct and Simple Method to Assess Drosophila melanogaster's Viability from Embryo to Adult

A Direct and Simple Method to Assess Drosophila melanogaster's Viability from Embryo to Adult

Drosophila Melanogaster'In Embriyodan Yetişkine Canlılığını Değerlendirmek Için Doğrudan ve Basit Bir Yöntem

In Drosophila melanogaster, viability assays are used to determine the fitness of certain genetic backgrounds. Allelic variations can result in partial or ...

Whole-Mount In Situ Hybridization in Zebrafish Embryos and Tube Formation Assay in iPSC-ECs to Study the Role of Endoglin in Vascular Development

Zebrabalığı Embriyolarında Situ Hibridizasyon ve IPSC-EC'lerde Tüp Oluşumu Nda Endoglin'in Vasküler Gelişimdeki Rolünü İncelemek İçin Tam Montaj

Vascular development is determined by the sequential expression of specific genes, which can be studied by performing in situ hybridization assays in ...