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•
08:56 min
May 5th, 2020
DOI :
10.3791/60982-v
Chapters
0:04
Introduction
0:49
Dissection/Gonad Extrusion
2:46
Fixation/Blocking
4:14
Primary Antibody Incubation and PLA Probe (Secondary Antibody) Incubation
5:21
Ligation
6:09
Amplification and Final Washes
6:45
Coverslip Mounting
7:15
Results: Germlines Following Co-immunostaining or PLA
8:10
Conclusion
Transcript
近接ライゲーションアッセイを使用すると、その場でタンパク質とタンパク質の相互作用を検出し、相互作用の空間的および時間的パターンを明らかにすることができます。この技術は、C.elegans開発の調節に関する重要な質問に答えるのに役立ちます。この技術は、FRETやBiFCなどの他の技術の複雑さなしにタンパク質相互作用を検出するための同等の感度を提供します。
生殖腺を解放するためにワームを解剖したことがない人は、このステップに苦労するかもしれません。ワームを解剖する練習をし、PLAに
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Summary
このプロトコルは、C.エレガンス生殖細胞リンにおけるその場でのタンパク質相互作用をプローブするための近接ライゲーションアッセイの使用を実証する。
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