Name: a 3d spheroid model for glioblastoma
Uploaded: 2020-04-09T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A 3D Spheroid Model for Glioblastoma at JoVE.com

Dit werk werd ondersteund door Transcan 2017, ARC 2017, Ligue Contre le Cancer (Comité de la Gironde et de la Charente-Maritime). Joris Guyon is een ontvanger van de beurs van het Toulouse University Hospital (CHU Toulouse).

Geïnformeerde schriftelijke toestemming werd verkregen van alle patiënten (van het Haukeland Ziekenhuis, Bergen, Noorwegen volgens de lokale ethische commissie regelgeving). Ons protocol volgt de richtlijnen van de ethische commissie voor onderzoek van onze instelling.
1. Generatie van uniforme grootte tumor sferoïden
OPMERKING: Stam-achtige cellen worden gekweekt in neurobasaal medium aangevuld met B27 supplement, heparine, FGF-2, penicilline, en streptomycine, zo...

<ol>
	<li>Pelissier, F. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-related+dysfunction+in+mechanotransduction+impairs+differentiation+of+human+mammary+epithelial+progenitors.">Age-related dysfunction in mechanotransduction impairs differentiation of human mammary epithelial progenitors.</a> Cell Reports. 7, 1926-1939 (2014).</li><li>Ishiguro, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor-derived+spheroids:+Relevance+to+cancer+stem+cells+and+clinical+applications.">Tumor-derived spheroids: Relevance to cancer stem cells and clinical applications.</a> Cancer Science. 108, 283-289 (2017).</li><li>Sutherland, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+and+environment+interactions+in+tumor+microregions:+the+multicell+spheroid+model.">Cell and environment interactions in tumor microregions: the multicell spheroid model.</a> Science. 240, 177-184 (1988).</li><li>Desoize, B., Jardillier, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multicellular+resistance:+a+paradigm+for+clinical+resistance?.">Multicellular resistance: a paradigm for clinical resistance?.</a> Critical Reviews in Oncology/Hematology. 36, 193-207 (2000).</li><li>Corbet, C., Feron, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumour+acidosis:+from+the+passenger+to+the+driver's+seat.">Tumour acidosis: from the passenger to the driver's seat.</a> Nature Reviews Cancer. 17, 577-593 (2017).</li><li>Hirschhaeuser, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multicellular+tumor+spheroids:+an+underestimated+tool+is+catching+up+again.">Multicellular tumor spheroids: an underestimated tool is catching up again.</a> Journal of Biotechnology. 148, 3-15 (2010).</li><li>Berens, E. B., Holy, J. M., Riegel, A. T., Wellstein, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Cancer+Cell+Spheroid+Assay+to+Assess+Invasion+in+a+3D+Setting.">A Cancer Cell Spheroid Assay to Assess Invasion in a 3D Setting.</a> Journal of Visualized Experiments. (105), e53409 (2015).</li><li>Cavaco, A. C. M., Eble, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+3D+Spheroid+Model+as+a+More+Physiological+System+for+Cancer-Associated+Fibroblasts+Differentiation+and+Invasion+In+Vitro+Studies.">A 3D Spheroid Model as a More Physiological System for Cancer-Associated Fibroblasts Differentiation and Invasion In Vitro Studies.</a> Journal of Visualized Experiments. (150), e60122 (2019).</li><li>Boye, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+CXCR3/LRP1+cross-talk+in+the+invasion+of+primary+brain+tumors.">The role of CXCR3/LRP1 cross-talk in the invasion of primary brain tumors.</a> Nature Communications. 8, 1571 (2017).</li><li>Dejeans, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autocrine+control+of+glioma+cells+adhesion+and+migration+through+IRE1alpha-mediated+cleavage+of+SPARC+mRNA.">Autocrine control of glioma cells adhesion and migration through IRE1alpha-mediated cleavage of SPARC mRNA.</a> Journal of Cell Science. 125, 4278-4287 (2012).</li><li>Golembieski, W. A., Ge, S., Nelson, K., Mikkelsen, T., Rempel, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+SPARC+expression+promotes+U87+glioblastoma+invasion+in+vitro.">Increased SPARC expression promotes U87 glioblastoma invasion in vitro.</a> International Journal of Developmental Neuroscience. 17, 463-472 (1999).</li><li>Daubon, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deciphering+the+complex+role+of+thrombospondin-1+in+glioblastoma+development.">Deciphering the complex role of thrombospondin-1 in glioblastoma development.</a> Nature Communications. 10, 1146 (2019).</li><li>Friedl, P., Wolf, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tube+travel:+the+role+of+proteases+in+individual+and+collective+cancer+cell+invasion.">Tube travel: the role of proteases in individual and collective cancer cell invasion.</a> Cancer Research. 68, 7247-7249 (2008).</li><li>Das, A., Monteiro, M., Barai, A., Kumar, S., Sen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MMP+proteolytic+activity+regulates+cancer+invasiveness+by+modulating+integrins.">MMP proteolytic activity regulates cancer invasiveness by modulating integrins.</a> Scientific Reports. 7, 14219 (2017).</li><li>Schaeffer, D., Somarelli, J. A., Hanna, G., Palmer, G. M., Garcia-Blanco, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+migration+and+invasion+uncoupled:+increased+migration+is+not+an+inexorable+consequence+of+epithelial-to-mesenchymal+transition.">Cellular migration and invasion uncoupled: increased migration is not an inexorable consequence of epithelial-to-mesenchymal transition.</a> Molecular and Cellular Biology. 34, 3486-3499 (2014).</li><li>de Gooijer, M. C., Guillen Navarro, M., Bernards, R., Wurdinger, T., van Tellingen, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+Experimenter's+Guide+to+Glioblastoma+Invasion+Pathways.">An Experimenter's Guide to Glioblastoma Invasion Pathways.</a> Trends in Molecular Medicine. 24, 763-780 (2018).</li><li>Daubon, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+invasive+proteome+of+glioblastoma+revealed+by+laser-capture+microdissection.">The invasive proteome of glioblastoma revealed by laser-capture microdissection.</a> Neuro-Oncology Advances. 1 (1), vdz029 (2019).</li></ol>

Tumor sferoïde testen zijn goed aangepast aan tumor kenmerken met inbegrip van proliferatie, invasie, en migratie, evenals celdood en drug reactie te bestuderen. Kankercellen dringen de 3D-matrix de vorming van een invasieve microtumor, zoals te zien in figuur 4B, C. Tijdens het invasieve proces kunnen matrix metalloproteinasen (MMP) matrices rondom tumorcellen13verteren , en MMP-remmers (bijvoorbeeld GM6001 of Rebimastat) de celinvasie schaden, maar...

In de meeste studies met behulp van primaire of commercieel beschikbare cellijnen, tests worden uitgevoerd op cellen geteeld op plastic oppervlakken als monolayer culturen. Het beheren van celcultuur in 2D betekent nadelen, omdat het geen in vivo 3D-celomgeving nabootst. In 2D-culturen is het hele celoppervlak direct in contact met het medium, waardoor de celgroei verandert en de beschikbaarheid van geneesmiddelen wordt gewijzigd. Bovendien activeert het niet-fysiologische kunststofoppervlak celdifferentiatie1. Driedimensionale cultuurmodellen zijn ontwikkeld om deze moeilijkheden te overwinnen. Ze hebben het voordeel van het nabootsen van de meercellige architectuur en heterogeniteit van tumoren2, en dus kan worden beschouwd als een meer relevant model voor vaste tumoren3. De complexe morfologie van sferoïden draagt bij aan een betere evaluatie van medicijnpenetrantie en resistentie4. De tumor heterogeniteit in de sferoïde beïnvloedt de verspreiding van zuurstof en voedingsstoffen, en de reactie op farmacologische middelen (Figuur 1A). Verspreiding van zuurstof wordt gewijzigd wanneer de sferoïde grootte 300 μm bereikt, wat leidt tot een hypoxische omgeving in het midden van de sferoïde (Figuur 1A, C). Metabolieten zijn ook minder penetrerendoor de cellagen en compenserende metabole reacties vinden plaats5. Wanneer de diameter van de sferoïde toeneemt, kunnen necrotische kernen worden waargenomen, waardoor verdere nabootsing van kenmerken die bij veel vaste vormen van kanker worden gevonden, waaronder het agressieve hersenkankerglioblastoom (GBM)6.
Verschillende 2D of 3D invasie testen voor glioblastoom zijn gemeld in de literatuur7,8. Tweedimensionale testen zijn voornamelijk voor het bestuderen van invasie in een horizontaal vlak op een dunne matrixlaag of in een Boyden kamer test9. Driedimensionale tests zijn beschreven met 3D sferoïde culturen met behulp van klassieke glioblastoom cellijnen10. Meer complexe varianten worden vertegenwoordigd door invasie van hersenorganoïden door tumorsferoïden in confrontatieculturen11. Het is echter nog steeds belangrijk om een gebruiksvriendelijke en reproduceerbare test te ontwikkelen die voor elk laboratorium beschikbaar is. We hebben een protocol ontwikkeld om glioblastoom stamcellen-achtige cellen te genereren uit patiëntmonsters. De kwantificering van deze tests is gemakkelijk beheersbaar en vereist alleen open-access online software. Kortom, tumorstukjes worden in kleine stukjes gesneden en enzymatisch verteerd. Enkele cellen afkomstig van de spijsvertering worden gekweekt in neurobasaal medium. Na 4-7 dagen vormen sferoïde structuren zich spontaan. Bij intracraniale implantatie in muizenmodellen vormen ze tumoren die een necrotische kern vertonen die wordt omringd door pseudo-palisadecellen12. Dit lijkt sterk op de kenmerken van GBM-patiënten.
In dit artikel beschrijven we ons protocol om sferoïden te produceren uit een bepaald aantal cellen om reproduceerbaarheid te garanderen. Hiervoor kunnen twee complementaire matrices worden gebruikt: Matrigel en collageen type I. Matrigel is verrijkt met groeifactoren en bootst het basale basale membraan van zoogdieren na dat nodig is voor celhechting en migratie. Aan de andere kant, collageen type I, een structureel element van stroma, is de meest voorkomende fibrillaire extracellulaire matrix en wordt gebruikt in cel invasie testen. Hierin illustreren we ons GBM sferoïde model door migratie- en proliferatietesten uit te voeren. Analyse werd niet alleen gedaan op vaste tijdpunten, maar ook door het monitoren van sferoïde expansie en celbeweging door live beeldvorming. Bovendien werd elektronenmicroscopie gedaan om morfologische details te visualiseren.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>96 well round-bottom plate</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>08-772-212</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Accutase</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>A11105-01</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C, sphere dissociation enzyme</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>12587</td>
			<td>Stored at -20 &#176;C, defrost before use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Basic Fibroblast Growth Factor</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>100-18B</td>
			<td>Stored at -20 &#176;C, defrost before use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Countess Cell Counting Chamber Slides</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>C10283</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPBS 10X</td>
			<td>Pan Biotech</td>
			<td>P04-53-500</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fiji software</td>
			<td>ImageJ</td>
			<td></td>
			<td>Used to analyze pictures</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flask 75 cm2</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>10497302</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Matrigel</td>
			<td>Corning</td>
			<td>354230</td>
			<td>Stored at -20 &#176;C, diluted to a final concentration of 0.2 mg/mL in cold NBM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methylcellulose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M0512</td>
			<td>Diluted in NBM for a 2% final concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NBM</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>21103-049</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neurobasal medium</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>21103049</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin - Streptomycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140-122</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan blue 0.4%</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>T10282</td>
			<td>Used to cell counting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Type I Collagen</td>
			<td>Corning</td>
			<td>354236</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a 3d spheroid model for glioblastoma

Tweedimensionale (2D) celculturen bootsen in vivo tumorgroei niet naar tevredenheid na. Daarom werden driedimensionale (3D) cultuursferoïde modellen ontwikkeld. Deze modellen kunnen bijzonder belangrijk zijn op het gebied van neuro-oncologie. Inderdaad, hersentumoren hebben de neiging om de gezonde hersenomgeving binnen te dringen. We beschrijven hierin een ideale 3D glioblastoom sferoïde-gebaseerde test die we ontwikkelden om tumorinvasie te bestuderen. Wij bieden alle technische details en analytische tools om deze test succesvol uit te voeren.

Sferoïden werden voorbereid zoals beschreven in de protocollen sectie en waarnemingen werden gedaan met betrekking tot migratie, invasie, proliferatie, en microscopie. Om hypoxie in verschillende gebieden van de bolvormige structuur te meten, werd carboxische anhydrase IX-kleuring gebruikt voor het bepalen van hypoxische activiteit(figuur 1A-C). Meer CAIX-positieve cellen werden waargenomen in het sferoïde centrum (Figu...

Watch this Scientific Journal Video about A 3D Spheroid Model for Glioblastoma at JoVE.com

A 3D Spheroid Model for Glioblastoma

Hier beschrijven we een gebruiksvriendelijke invasietest voor glioblastoom. Deze test is geschikt voor glioblastoom stamcellen-achtige cellen. Een Fiji macro voor eenvoudige kwantificering van invasie, migratie en proliferatie wordt ook beschreven.

Een 3D Spheroid Model voor Glioblastoom

Two-dimensional (2D) cell cultures do not mimic in vivo tumor growth satisfactorily. Therefore, three-dimensional (3D) culture spheroid models were ...

Tweedimensionale celculturen bootsen de tumorgroei niet voldoende na. Om te verbeteren, zijn 3D-procedures ontwikkeld met behulp van sferoïden. Onze 3D glioblastoom sferoïde-gebaseerde test is bijzonder geschikt om hersentumor invasie te onderzoeken in de gezonde hersentumor omgeving.Driedimensionale cultuurmodellen kunnen worden gebruikt om een meercellige architectuur, heterogeniteit en metabole toestand van tumoren samen te vatten, waardoor een strengere evaluatie van de effecten van geneesmiddelen mogelijk is. Zorg ervoor dat u de onderkant van de put niet aanraakt of de supernatant volledig verwijdert, de gel op ijs houdt en de cellen snel aan de gel toevoegt. Om gelijkmatig formaat tumor sferoïden te genereren, eerst wassen de tumorcel cultuur van belang met vijf milliliter PBS en de behandeling van de cellen met 0,5 tot een milliliter van dissociatie enzym.Na vijf minuten bij 37 graden Celsius, stop de reactie met vier tot 4,5 milliliter PBS en breng de vrijstaande cellen over in een 15 milliliter conische buis met 10 milliliter volledig groeimedium. Na het tellen, resuspend de cellen op een een keer 10 tot de zesde cellen per acht milliliter van volledige groeimedium aangevuld met twee milliliter van 2%methylcellulose concentratie en breng de schorsing naar een steriele systeem container. Voeg vervolgens 100 microliter cellen toe aan elke put van een 96-put ronde bodemplaat en plaats de plaat in een 37 graden Celsius 5%koolstofdioxide incubator gedurende drie tot vier dagen.Om een invasietest uit te voeren, wanneer de tumorcellen uniform formaat sferoïden hebben gevormd, breng elke celstructuur in een 500 microliter buis en was de sferoïden eenmaal met 200 microliter van PBS. Breng na de tweede wasbeurt de sferoïden voorzichtig over in 100 microliter vers bereide collageenmatrix en voeg elke sferoïde suspensie toe aan het midden van elke put van een platte bodem van 96-put plaat. Voeg na een incubatie van 30 minuten bij 37 graden Celsius 100 microliters van volledig groeimedium toe bovenop de gel in elke put.Zorg ervoor dat alle sferoïden in het midden van elke put voor de beste beeldvorming van de tumorcel invasie. Om een migratietest uit te voeren, wanneer de tumorcellen uniform formaat sferoïden hebben gevormd, bestrijk een zes-put plaat met 0,2 milligram per milliliter Matrigel in groeimedium gedurende 30 minuten bij 37 graden Celsius. Verwijder aan het einde van de incubatie de Matrigel en voeg twee milliliter volledig groeimedium toe aan elke put.Breng de sferoïden van de ronde bodemplaat in 50 microlitervolumes over in individuele putten van de zes-putplaat en plaats de plaat 24 uur in de celkweek incubator. De volgende dag, vlek de sferoïden met 10 nanogram per milliliter hoechst gedurende 30 minuten op 37 graden Celsius. Voor beeldverwerving na een invasie of migratietest, plaats de plaat op het stadium van een Brightfield confocale microscoop uitgerust met een videocamera en verkrijg beelden over de aangewezen experimentele periode.Als u de afbeeldingen op een semi-geautomatiseerde manier wilt analyseren, importeert u de afbeeldingen in Fiji en klikt u op Plug-ins, macro's, interactieve tolk. Kopieer en plak de aangepaste paarse lus. Houd de paarse zinnen en voeg de groene zinnen van belang als dat nodig is.Als u vervolgens het gebied van elke sferoïde wilt meten, klikt u op Analyseren en meten. Om hypoxie in verschillende gebieden van de bolvormige structuur te meten, kan carbonische anhydrase IX-kleuring worden gebruikt om de hypoxische activiteit te bepalen. In deze representatieve analyse werden meer koolstofzuuranhydrase IX-positieve cellen waargenomen in het sferoïde centrum.Hypoxische cellen in de sferoïde kern hebben de neiging om meer glycolytisch dan de cellen rond de kern. Mitochondriën kunnen worden afgebeeld door elektronenmicroscopie voor verdere analyse. De sferoïde diameter is direct gecorreleerd aan de dichtheid van de cellen die deel uitmaken van de 3D-celstructuur en Fiji macro's kunnen worden gebruikt om de proliferatie, invasie of migratie van de cellen in elke sferoïde of migratie van de cellen binnen elke sferoïde te kwantificeren.Verhogingen van de sferoïde kern weerspiegelen de stimulatie van celproliferatie. Na de remming van complexe I van de mitochondriale ademhalingsketen, wordt de overgrote meerderheid van de ATP-productie in de mitochondriën aangetast door de proliferatie na 72 uur met 20% te verminderen. Waterstofchloride behandeling verbetert collageen type I invasie over een periode van 24 uur, maar vermindert het migratiegebied van de sferoïden 1,5 keer in vergelijking met de controle onbehandelde sferoïden.Zoals beoordeeld door live imaging, de sferoïden tonen een hoge interne dynamiek en bewegen snel. De grootte van de sferoïden moet relatief uniform zijn en zorg moet worden genomen om de sferoïden te manipuleren naar het midden van de putten voor de beste beeldvorming resultaten. Deze methode kan ook worden gebruikt om tumorcelproliferatie, migratie en dood te onderzoeken, evenals de expressie van extracellulaire matrix, celreceptoren of intracellulaire eiwitten van belang.De sferoïden kunnen ook worden ingekapseld en het effect van verhoogde celoppervlak spanning kan worden onderzocht bij verwijdering van de capsules.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Coculture Assays to Study Macrophage and Microglia Stimulation of Glioblastoma Invasion

Coculture Testen om te studeren macrofagen en microglia Stimulatie van glioblastoma Invasion

Glioblastoma multiforme (grade IV glioma) is a very aggressive human cancer with a median survival of 1 year post diagnosis. Despite the increased ...

PET and MRI Guided Irradiation of a Glioblastoma Rat Model Using a Micro-irradiator

PET en MRI geleide bestraling van een Glioblastoma Rat-Model met behulp van een Micro-irradiator

For decades, small animal radiation research was mostly performed using fairly crude experimental setups applying simple single-beam techniques without ...

Therapy Testing in a Spheroid-based 3D Cell Culture Model for Head and Neck Squamous Cell Carcinoma

Therapie testen in een sferoïde gebaseerde 3D cel cultuur Model voor hoofd en nek plaveiselcelcarcinoom

Current treatment options for advanced and recurrent head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) enclose radiation and chemo-radiation approaches with ...

Fluorescence Molecular Tomography for In Vivo Imaging of Glioblastoma Xenografts

Fluorescence Molecular Tomography for In Vivo Imaging of Glioblastoma Xenografts

Fluorescentie moleculaire tomografie voor In Vivo Imaging van Glioblastoma Xenografts

Tumorigenicity is the capability of cancer cells to form a tumor mass. A widely used approach to determine if the cells are tumorigenic is by injecting ...

A 3D Organotypic Melanoma Spheroid Skin Model

Een 3D Organotypic melanoom sferoïde huidmodel

Malignant transformation of melanocytes, the pigment cells of human skin, causes formation of melanoma, a highly aggressive cancer with increased ...

Identification, Histological Characterization, and Dissection of Mouse Prostate Lobes for In Vitro 3D Spheroid Culture Models

Identificatie en karakterisering van het histologische dissectie van de prostaat lobben van de muis voor In Vitro 3D sferoïde cultuur modellen

Genetically engineered mouse models (GEMMs) serve as effective pre-clinical models for investigating most types of human cancers, including prostate ...

A Spheroid Killing Assay by CAR T Cells

Een sferoïde doden Assay door auto T cellen

Immunotherapy has become a field of growing interest in the fight against cancer otherwise untreatable. Among all immunotherapeutic methods, chimeric ...

Assessing Cell Viability and Death in 3D Spheroid Cultures of Cancer Cells

Beoordeling van de levensvatbaarheid van cellen en de dood in 3D sferoïde culturen van kankercellen

Three-dimensional spheroids of cancer cells are important tools for both cancer drug screens and for gaining mechanistic insight into cancer cell biology. ...

A 3D Spheroid Model as a More Physiological System for Cancer-Associated Fibroblasts Differentiation and Invasion In Vitro Studies

Een 3D-Spheroid-model als een fysiologisch systeem voor de differentiatie van kanker-geassocieerde fibroblasten en invasies in vitro studies

Defining the ideal model for an in vitro study is essential, mainly if studying physiological processes such as differentiation of cells. In the tumor ...

Characterization of the Effects of Migrastatic Inhibitors on 3D Tumor Spheroid Invasion by High-resolution Confocal Microscopy

Karakterisering van de effecten van migraine remmers op de invasie van 3D-tumor Spheroid door confocale microscopie met hoge resolutie

Drug discovery and development in cancer research is increasingly being based on drug screens in a 3D format. Novel inhibitors targeting the migratory and ...