Name: a 3d spheroid model for glioblastoma
Uploaded: 2020-04-09T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A 3D Spheroid Model for Glioblastoma at JoVE.com

Este trabajo fue apoyado por Transcan 2017, ARC 2017, Ligue Contre le Cancer (Comité de la Gironde et de la Charente-Maritime). Joris Guyon es becario del Hospital Universitario de Toulouse (CHU Toulouse).

Se obtuvo el consentimiento por escrito informado de todos los pacientes (del Hospital Haukeland, Bergen, Noruega de acuerdo con las regulaciones del comité de ética local). Nuestro protocolo sigue las pautas del comité de ética de investigación humana de nuestra institución.
1. Generación de esferoides tumorales de tamaño uniforme
NOTA: Las células similares al tallo se cultivan en medio neurobasal complementado con suplemento B27, heparina, FGF-2, penicilin...

<ol>
	<li>Pelissier, F. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-related+dysfunction+in+mechanotransduction+impairs+differentiation+of+human+mammary+epithelial+progenitors.">Age-related dysfunction in mechanotransduction impairs differentiation of human mammary epithelial progenitors.</a> Cell Reports. 7, 1926-1939 (2014).</li><li>Ishiguro, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor-derived+spheroids:+Relevance+to+cancer+stem+cells+and+clinical+applications.">Tumor-derived spheroids: Relevance to cancer stem cells and clinical applications.</a> Cancer Science. 108, 283-289 (2017).</li><li>Sutherland, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+and+environment+interactions+in+tumor+microregions:+the+multicell+spheroid+model.">Cell and environment interactions in tumor microregions: the multicell spheroid model.</a> Science. 240, 177-184 (1988).</li><li>Desoize, B., Jardillier, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multicellular+resistance:+a+paradigm+for+clinical+resistance?.">Multicellular resistance: a paradigm for clinical resistance?.</a> Critical Reviews in Oncology/Hematology. 36, 193-207 (2000).</li><li>Corbet, C., Feron, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumour+acidosis:+from+the+passenger+to+the+driver's+seat.">Tumour acidosis: from the passenger to the driver's seat.</a> Nature Reviews Cancer. 17, 577-593 (2017).</li><li>Hirschhaeuser, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multicellular+tumor+spheroids:+an+underestimated+tool+is+catching+up+again.">Multicellular tumor spheroids: an underestimated tool is catching up again.</a> Journal of Biotechnology. 148, 3-15 (2010).</li><li>Berens, E. B., Holy, J. M., Riegel, A. T., Wellstein, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Cancer+Cell+Spheroid+Assay+to+Assess+Invasion+in+a+3D+Setting.">A Cancer Cell Spheroid Assay to Assess Invasion in a 3D Setting.</a> Journal of Visualized Experiments. (105), e53409 (2015).</li><li>Cavaco, A. C. M., Eble, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+3D+Spheroid+Model+as+a+More+Physiological+System+for+Cancer-Associated+Fibroblasts+Differentiation+and+Invasion+In+Vitro+Studies.">A 3D Spheroid Model as a More Physiological System for Cancer-Associated Fibroblasts Differentiation and Invasion In Vitro Studies.</a> Journal of Visualized Experiments. (150), e60122 (2019).</li><li>Boye, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+CXCR3/LRP1+cross-talk+in+the+invasion+of+primary+brain+tumors.">The role of CXCR3/LRP1 cross-talk in the invasion of primary brain tumors.</a> Nature Communications. 8, 1571 (2017).</li><li>Dejeans, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autocrine+control+of+glioma+cells+adhesion+and+migration+through+IRE1alpha-mediated+cleavage+of+SPARC+mRNA.">Autocrine control of glioma cells adhesion and migration through IRE1alpha-mediated cleavage of SPARC mRNA.</a> Journal of Cell Science. 125, 4278-4287 (2012).</li><li>Golembieski, W. A., Ge, S., Nelson, K., Mikkelsen, T., Rempel, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+SPARC+expression+promotes+U87+glioblastoma+invasion+in+vitro.">Increased SPARC expression promotes U87 glioblastoma invasion in vitro.</a> International Journal of Developmental Neuroscience. 17, 463-472 (1999).</li><li>Daubon, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deciphering+the+complex+role+of+thrombospondin-1+in+glioblastoma+development.">Deciphering the complex role of thrombospondin-1 in glioblastoma development.</a> Nature Communications. 10, 1146 (2019).</li><li>Friedl, P., Wolf, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tube+travel:+the+role+of+proteases+in+individual+and+collective+cancer+cell+invasion.">Tube travel: the role of proteases in individual and collective cancer cell invasion.</a> Cancer Research. 68, 7247-7249 (2008).</li><li>Das, A., Monteiro, M., Barai, A., Kumar, S., Sen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MMP+proteolytic+activity+regulates+cancer+invasiveness+by+modulating+integrins.">MMP proteolytic activity regulates cancer invasiveness by modulating integrins.</a> Scientific Reports. 7, 14219 (2017).</li><li>Schaeffer, D., Somarelli, J. A., Hanna, G., Palmer, G. M., Garcia-Blanco, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+migration+and+invasion+uncoupled:+increased+migration+is+not+an+inexorable+consequence+of+epithelial-to-mesenchymal+transition.">Cellular migration and invasion uncoupled: increased migration is not an inexorable consequence of epithelial-to-mesenchymal transition.</a> Molecular and Cellular Biology. 34, 3486-3499 (2014).</li><li>de Gooijer, M. C., Guillen Navarro, M., Bernards, R., Wurdinger, T., van Tellingen, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+Experimenter's+Guide+to+Glioblastoma+Invasion+Pathways.">An Experimenter's Guide to Glioblastoma Invasion Pathways.</a> Trends in Molecular Medicine. 24, 763-780 (2018).</li><li>Daubon, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+invasive+proteome+of+glioblastoma+revealed+by+laser-capture+microdissection.">The invasive proteome of glioblastoma revealed by laser-capture microdissection.</a> Neuro-Oncology Advances. 1 (1), vdz029 (2019).</li></ol>

Los ensayos con esferoides tumorales están bien adaptados para estudiar las características tumorales, incluida la proliferación, la invasión y la migración, así como la muerte celular y la respuesta a las drogas. Las células cancerosas invaden la matriz 3D formando un microtumor invasivo, como se ve en la Figura 4B,C. Durante el proceso invasivo, las matrices de digestión de la matriz de metaloproteinasas (MMP) que rodean las células tumorales13</...

En la mayoría de los estudios que utilizan líneas celulares primarias o disponibles comercialmente, los ensayos se realizan en células cultivadas en superficies plásticas como cultivos monocapa. La gestión del cultivo celular en 2D representa desventajas, ya que no imita un entorno de células 3D in vivo. En los cultivos 2D, toda la superficie celular está directamente en contacto con el medio, alterando el crecimiento celular y modificando la disponibilidad de medicamentos. Además, la superficie de plástico no fisiológico desencadena la diferenciación celular1. Se han desarrollado modelos de cultivo tridimensionalparados para superar estas dificultades. Tienen la ventaja de imitar la arquitectura multicelular y la heterogeneidad de los tumores2,por lo que podrían considerarse un modelo más relevante para los tumores sólidos3. La compleja morfología de los esferoides contribuye a evaluar mejor la penetración y resistencia a los fármacos4. La heterogeneidad tumoral en el esferoide afecta a la difusión de oxígeno y nutrientes, y la respuesta a los agentes farmacológicos(Figura 1A). La difusión del oxígeno se altera cuando el tamaño de los esferoides alcanza los 300 m, induciendo un ambiente hipoxico en el centro del esferoide(Figura 1A,C). Los metabolitos también son menos penetrantes a través de las capas celulares y las reacciones metabólicas compensatorias tienen lugar5. Cuando aumenta el diámetro de la esferoide, se pueden observar núcleos necróticos, imitando aún más las características encontradas en muchos cánceres sólidos, incluyendo el glioblastoma agresivo del cáncer cerebral (GBM)6.
Varios ensayos de invasión 2D o 3D para el glioblastoma se han divulgado en la literatura7,8. Los ensayos bidimensionales son principalmente para estudiar la invasión en un plano horizontal en una capa de matriz delgada o en un ensayo de cámara Boyden9. Los ensayos tridimensionales se han descrito con cultivos de esferoides 3D utilizando líneas celulares clásicas de glioblastoma10. Variantes más complejas están representadas por la invasión de organoides cerebrales por esferoides tumorales en las culturas de confrontación11. Sin embargo, sigue siendo importante desarrollar un ensayo fácil de usar y reproducible disponible para cualquier laboratorio. Hemos desarrollado un protocolo para generar células similares a glioblastoma a partir de muestras de pacientes. La cuantificación de estos ensayos es fácilmente manejable y sólo requiere software en línea de acceso abierto. Brevemente, las piezas tumorales se cortan en trozos pequeños y se digieren enzimáticamente. Las células individuales derivadas de la digestión se cultivan en medio neurobasal. Después de 4-7 días, las estructuras esferoides se forman espontáneamente. Tras la implantación intracraneal en modelos de ratones, forman tumores que exhiben un núcleo necrótico rodeado de células pseudo-palisading12. Esto se asemeja mucho a las características encontradas en los pacientes con GBM.
En este artículo, describimos nuestro protocolo para producir esferoides a partir de un número determinado de celdas para garantizar la reproducibilidad. Para ello se pueden utilizar dos matrices complementarias: Matrigel y colágeno tipo I. Matrigel se enriquece en factores de crecimiento e imita la membrana basal de mamíferos necesaria para la unión celular y la migración. Por otro lado, el colágeno tipo I, un elemento estructural del estroma, es la matriz extracelular fibrilar más común y se utiliza en ensayos de invasión celular. Aquí, ilustramos nuestro modelo de esferoides GBM mediante la realización de ensayos de migración y proliferación. El análisis se realizó no sólo en puntos de tiempo fijos, sino también mediante el monitoreo de la expansión del esferoide y el movimiento celular mediante imágenes en vivo. Además, la microscopía electrónica se realizó para visualizar detalles morfológicos.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>96 well round-bottom plate</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>08-772-212</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Accutase</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>A11105-01</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C, sphere dissociation enzyme</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>12587</td>
			<td>Stored at -20 &#176;C, defrost before use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Basic Fibroblast Growth Factor</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>100-18B</td>
			<td>Stored at -20 &#176;C, defrost before use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Countess Cell Counting Chamber Slides</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>C10283</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPBS 10X</td>
			<td>Pan Biotech</td>
			<td>P04-53-500</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fiji software</td>
			<td>ImageJ</td>
			<td></td>
			<td>Used to analyze pictures</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flask 75 cm2</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>10497302</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Matrigel</td>
			<td>Corning</td>
			<td>354230</td>
			<td>Stored at -20 &#176;C, diluted to a final concentration of 0.2 mg/mL in cold NBM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methylcellulose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M0512</td>
			<td>Diluted in NBM for a 2% final concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NBM</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>21103-049</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neurobasal medium</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>21103049</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin - Streptomycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140-122</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan blue 0.4%</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>T10282</td>
			<td>Used to cell counting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Type I Collagen</td>
			<td>Corning</td>
			<td>354236</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a 3d spheroid model for glioblastoma

Los cultivos celulares bidimensionales (2D) no imitan satisfactoriamente el crecimiento tumoral in vivo. Por lo tanto, se desarrollaron modelos de esferoides de cultivo tridimensionales (3D). Estos modelos pueden ser particularmente importantes en el campo de la neurooncología. De hecho, los tumores cerebrales tienen la tendencia a invadir el ambiente cerebral sano. Aquí describimos un ensayo ideal basado en esferoides de glioblastoma 3D que desarrollamos para estudiar la invasión tumoral. Proporcionamos todos los detalles técnicos y herramientas analíticas para realizar con éxito este ensayo.

Los esferoides se prepararon como se describe en la sección de protocolos y se hicieron observaciones con respecto a la migración, invasión, proliferación y microscopía. Para medir la hipoxia en áreas distintas de la estructura esférica, se utilizó la tinción de anhidrasa IX carboxínica para determinar la actividad hipoxica(Figura 1A-C). Se observaron más células CAIX positivas en el centro esferoide(Figura 1<...

Watch this Scientific Journal Video about A 3D Spheroid Model for Glioblastoma at JoVE.com

A 3D Spheroid Model for Glioblastoma

Aquí, describimos un ensayo de invasión fácil de usar para el glioblastoma. Este ensayo es adecuado para células similares al glioblastoma similares a un tallo. También se describe una macro de Fiji para cuantificar fácilmente la invasión, la migración y la proliferación.

Un modelo de esferoides 3D para Glioblastoma

Two-dimensional (2D) cell cultures do not mimic in vivo tumor growth satisfactorily. Therefore, three-dimensional (3D) culture spheroid models were ...

Los cultivos celulares bidimensionales no imitan adecuadamente el crecimiento tumoral in vivo. Para mejorar, se han desarrollado procedimientos 3D utilizando esferoides. Nuestro ensayo basado en el esferoide de glioblastoma 3D es particularmente adecuado para investigar la invasión de tumores cerebrales en el entorno saludable del tumor cerebral.Los modelos de cultivo tridimensionales se pueden utilizar para recapitular una arquitectura multicelular, heterogeneidad y estado metabólico de los tumores, lo que permite una evaluación más rigurosa de los efectos farmacológicos. Asegúrese de no tocar la parte inferior del pozo o quitar completamente el sobrenadante, para mantener el gel en hielo, y para agregar las células al gel rápidamente. Para generar esferoides tumorales de tamaño uniforme, primero lave el cultivo celular tumoral de interés con cinco mililitros de PBS y trate las células con 0,5 a un mililitro de enzima de disociación.Después de cinco minutos a 37 grados celsius, detenga la reacción con cuatro a 4,5 mililitros de PBS y transfiera las células separadas en un tubo cónico de 15 mililitros que contenga 10 mililitros de medio de crecimiento completo. Después de contar, resuspender las células en un uno por 10 a la sexta célula por ocho mililitros de medio de crecimiento completo complementado con dos mililitros de 2%concentración de metilcelulosa y transferir la suspensión a un contenedor de sistema estéril. Luego agregue 100 microlitros de células a cada pozo de una placa inferior redonda de 96 pozos y coloque la placa en una incubadora de dióxido de carbono de 37 grados Celsius 5% durante tres a cuatro días.Para realizar un ensayo de invasión, cuando las células tumorales se hayan formado esferoides de tamaño uniforme, transfiera cada estructura celular a un tubo de 500 microlitros y lave los esferoides una vez con 200 microlitros de PBS. Después del segundo lavado, transfiera los esferoides cuidadosamente en 100 microlitros de matriz de colágeno recién preparada y agregue cada suspensión de esferoides en el centro de cada pozo de una placa plana inferior de 96 pozos. Después de una incubación de 30 minutos a 37 grados Celsius, agregue 100 microlitros de medio de crecimiento completo en la parte superior del gel en cada pocóyo.Asegúrese de colocar todos los esferoides en el centro de cada pozo para obtener las mejores imágenes de la invasión de células tumorales. Para realizar un ensayo de migración, cuando las células tumorales se han formado esferoides de tamaño uniforme, recubrir una placa de seis pozos con 0,2 miligramos por mililitro de Matrigel en medio de crecimiento durante 30 minutos a 37 grados centígrados. Al final de la incubación, retire el Matrigel y añada dos mililitros de medio de crecimiento completo a cada pocóyo.Transfiera los esferoides de la placa inferior redonda en volúmenes de 50 microlitros en pozos individuales de la placa de seis pozos y coloque la placa en la incubadora de cultivo celular durante 24 horas. Al día siguiente, mancha los esferoides con 10 nanogramos por mililitro de Hoechst durante 30 minutos a 37 grados Centígrados. Para la adquisición de imágenes después de un ensayo de invasión o migración, coloque la placa en el escenario de un microscopio confocal Brightfield equipado con una cámara de video y obtenga imágenes durante el período experimental adecuado.Para analizar las imágenes de forma semiautomática, importe las imágenes a Fiji y haga clic en Plugins, Macros, Interactive Interpreter. Copie y pegue el bucle púrpura adaptado. Mantenga las oraciones púrpuras y agregue las oraciones verdes de interés según sea necesario.A continuación, para medir el área de cada esferoide, haga clic en Analizar y medir. Para medir la hipoxia en áreas distintas de la estructura esférica, se puede utilizar la tinción de anhidrasa IX carbónica para determinar la actividad hipoxica. En este análisis representativo, se observaron más células positivas de anhidrasa carbónica IX en el centro esferoide.Las células hipoxiicas ubicadas en el núcleo esferoide tienden a ser más glucolíticas que las células que rodean el núcleo. Las mitocondrias se pueden obtener mediante microscopía electrónica para su posterior análisis. El diámetro del esferoide está directamente correlacionado con la densidad de las células que componen la estructura celular 3D y las macros de Fiji se pueden utilizar para cuantificar la proliferación, invasión o migración de las células dentro de cada esferoide o migración de las células dentro de cada esferoide.Los aumentos en el núcleo esferoide reflejan la estimulación de la proliferación celular. Tras la inhibición del complejo I de la cadena respiratoria mitocondrial, la gran mayoría de la producción de ATP en las mitocondrias se ve comprometida reduciendo la proliferación en un 20%después de 72 horas. El tratamiento del cloruro de hidrógeno mejora la invasión del colágeno tipo I durante un período de 24 horas, pero reduce el área migratoria de los esferoides 1,5 veces en comparación con el control de los esferoides no tratados.Según lo evaluado por imágenes en vivo, los esferoides demuestran una alta dinámica interna y se mueven rápidamente. El tamaño de los esferoides debe ser relativamente uniforme y se debe tener cuidado de manipular los esferoides al centro de los pozos para obtener los mejores resultados de imagen. Este método también se puede utilizar para investigar la proliferación de células tumorales, migración y muerte, así como la expresión de matriz extracelular, receptores celulares o proteínas intracelulares de interés.Los esferoides también pueden encapsularse y el efecto del aumento de la tensión de la superficie celular se puede investigar al retirar las cápsulas.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Coculture Assays to Study Macrophage and Microglia Stimulation of Glioblastoma Invasion

Cocultivo Los ensayos para Estudiar macrófagos y microglia Estimulación de Glioblastoma Invasion

Glioblastoma multiforme (grade IV glioma) is a very aggressive human cancer with a median survival of 1 year post diagnosis. Despite the increased ...

Investigación

Investigación sobre el cáncer

PET and MRI Guided Irradiation of a Glioblastoma Rat Model Using a Micro-irradiator

PET y resonancia magnética guiada por irradiación de un modelo de rata de Glioblastoma usando un Micro-irradiador

For decades, small animal radiation research was mostly performed using fairly crude experimental setups applying simple single-beam techniques without ...

Therapy Testing in a Spheroid-based 3D Cell Culture Model for Head and Neck Squamous Cell Carcinoma

Terapia de prueba en un modelo de cultivo celular 3D basado en el esferoide para cabeza y cuello de células escamosas

Current treatment options for advanced and recurrent head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) enclose radiation and chemo-radiation approaches with ...

Fluorescence Molecular Tomography for In Vivo Imaging of Glioblastoma Xenografts

Fluorescence Molecular Tomography for In Vivo Imaging of Glioblastoma Xenografts

Tomografía Molecular de la fluorescencia para obtener imágenes In Vivo de xenoinjertos de Glioblastoma

Tumorigenicity is the capability of cancer cells to form a tumor mass. A widely used approach to determine if the cells are tumorigenic is by injecting ...

A 3D Organotypic Melanoma Spheroid Skin Model

Un modelo de piel Organotypic Melanoma 3D esferoide

Malignant transformation of melanocytes, the pigment cells of human skin, causes formation of melanoma, a highly aggressive cancer with increased ...

Identification, Histological Characterization, and Dissection of Mouse Prostate Lobes for In Vitro 3D Spheroid Culture Models

Identificación, caracterización histológica y disección de ratón próstata lóbulos para modelos In Vitro esferoide 3D cultura

Genetically engineered mouse models (GEMMs) serve as effective pre-clinical models for investigating most types of human cancers, including prostate ...

A Spheroid Killing Assay by CAR T Cells

Un ensayo de la matanza de esferoide por las células de T automóvil

Immunotherapy has become a field of growing interest in the fight against cancer otherwise untreatable. Among all immunotherapeutic methods, chimeric ...

Assessing Cell Viability and Death in 3D Spheroid Cultures of Cancer Cells

Evaluación de la viabilidad celular y la muerte en cultivos esferoides 3D de células cancerosas

Three-dimensional spheroids of cancer cells are important tools for both cancer drug screens and for gaining mechanistic insight into cancer cell biology. ...

A 3D Spheroid Model as a More Physiological System for Cancer-Associated Fibroblasts Differentiation and Invasion In Vitro Studies

Un modelo de esferoides 3D como un sistema más fisiológico para la diferenciación de fibroblastos asociados al cáncer y estudios de invasión in Vitro

Defining the ideal model for an in vitro study is essential, mainly if studying physiological processes such as differentiation of cells. In the tumor ...

Characterization of the Effects of Migrastatic Inhibitors on 3D Tumor Spheroid Invasion by High-resolution Confocal Microscopy

Caracterización de los efectos de los inhibidores migratorios en la invasión de esferoides de tumores 3D por microscopía confocal de alta resolución

Drug discovery and development in cancer research is increasingly being based on drug screens in a 3D format. Novel inhibitors targeting the migratory and ...