Name: measurements of physiological stress responses in c. elegans
Uploaded: 2020-05-21T13:30:00
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R.BZ। EMBO दीर्घकालिक फैलोशिप और लैरी एल हिलब्लोम फाउंडेशन द्वारा समर्थित है। आरएचएस को नेशनल इंस्टीट्यूट ऑफ एजिंग (एनआईए) और ग्लेन फाउंडेशन फॉर मेडिकल रिसर्च पोस्टडॉक्टोरल फेलोशिप के माध्यम से अनुदान 5F32AG032023-02 द्वारा समर्थित है । A.F. एनआईए के माध्यम से अनुदान F32AG051355 द्वारा समर्थित है । एच.के.जी. को नेशनल साइंस फाउंडेशन ग्रेजुएट रिसर्च फेलोशिप प्रोग्राम के माध्यम से अनुदान DGE1752814 द्वारा समर्थित किया जाता है। एम.जी.एम. एनआईए के माध्यम से 1F31AG060660-01 द्वारा समर्थित है। ईस्वी थॉमस और स्टेसी सिबेल फाउंडेशन, हावर्ड ह्यूजेस मेडिकल इंस्टीट्यूट, और 4R01AG042679-04 और 5R01AG055891-02 एनआईए से, और 5R01ES021667-09 NIEHS से समर्थित है । हम महत्वपूर्ण तकनीकी सहायता के लिए लैरी जो, मेलिसा सांचेज, नामे केलेट और एनेल एस्क्विवेल का शुक्रिया अदा करते हैं । हम उपभेदों के लिए मोरिमोटो लैब और सीजीसी (अनुसंधान बुनियादी ढांचे के कार्यक्रम P40 OD010440 के NIH कार्यालय द्वारा वित्त पोषित) का शुक्रिया अदा करते हैं।

1. तापमान और OP50 बनाम HT115 की मानक वृद्धि की स्थिति
<ol><li>मानक वृद्धि और विस्तार<ol>
<li>परिवेश के तापमान (~ 22-25 डिग्री सेल्सियस) पर 24-48 घंटे के लिए एलबी(टेबल 1)या पसंद के समकक्ष मीडिया में OP50 की संस्कृति बढ़ाएं। कम?...

यहां, सी एलिगेंसमें सेलुलर तनाव प्रतिक्रियाओं से पूछताछ करने के तरीकों, फ्लोरोसेंट ट्रांसक्रिप्शनल रिपोर्टर्स और शारीरिक तनाव अस्तित्व परख ों का उपयोग करके वर्णित हैं। संवाददाताओं सभी GFP बढ़ते स...

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Antimycin A</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A8674</td>
			<td>for mitochondrial stress</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bacto Peptone</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>DF0118072</td>
			<td>for NGM plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Difco granulated agar</td>
			<td>VWR</td>
			<td>90000-782</td>
			<td>for NGM plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium chloride dihydrate</td>
			<td>VWR</td>
			<td>97061-904</td>
			<td>for NGM plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbenicillin</td>
			<td>BioPioneer</td>
			<td>C0051-25</td>
			<td>for RNAi</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cholesterol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>57-88-5</td>
			<td>for NGM plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>COPAS Biosorter</td>
			<td>Union Biometrica</td>
			<td>350-5000-000</td>
			<td>equipped with a 488 nm light source.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>COPAS Cleaning Solution</td>
			<td>Union Biometrica</td>
			<td>300-5072-000</td>
			<td>to use with COPAS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>COPAS Sheath Solution</td>
			<td>Union Biometrica</td>
			<td>300-5070-100</td>
			<td>to use with COPAS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMSO</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>472301</td>
			<td>solvent for drugs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IPTG dioxane free</td>
			<td>Denville Scientific</td>
			<td>CI8280-4</td>
			<td>for RNAi</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LB Broth Miller</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP1426500</td>
			<td>for LB</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>M205FA stereoscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>10450040</td>
			<td>equipped with a Leica DFC3000G monochromatic CCD camera, standard Leica GFP filter (ex 395-455, EM 480 LP), and LAS X software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium sulfate heptahydrate</td>
			<td>VWR</td>
			<td>EM-MX0070-3</td>
			<td>for NGM plates, M9</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraquat</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>36541</td>
			<td>for oxidative/mitochondrial stress</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Chloride</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>P217-500</td>
			<td>for bleach soluton</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium phosphate dibasic</td>
			<td>VWR</td>
			<td>EM-PX1570-2</td>
			<td>for NGM plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium phosphate monobasic</td>
			<td>VWR</td>
			<td>EM-PX1565-5</td>
			<td>for M9</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Revolve</td>
			<td>ECHO</td>
			<td>75990-514</td>
			<td>equipped with an Olympus 4x Plan Fluorite NA 0.13 objective lens, standard Olympus FITC filter (ex 470/40; em 525/50; DM 560), and an iPad Pro for camera and to drive ECHO software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Azide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>71289-50G</td>
			<td>for imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Chloride</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>SX0420-5</td>
			<td>for NGM plates, M9</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium phosphate dibasic</td>
			<td>VWR</td>
			<td>71003-472</td>
			<td>for M9</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tert-butyl hydroperoxide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>458139</td>
			<td>for oxidative stress</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tetracycline hydrochloride</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T7660-5G</td>
			<td>for RNAi</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tunicamycin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T7765-50MG</td>
			<td>for ER stress</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

measurements of physiological stress responses in c. elegans

जीवअक्सर उतार-चढ़ाव वाले वातावरण और इंट्राकोशियलर होमोस्टोसिस में परिवर्तन के संपर्क में आते हैं, जिससे उनके प्रोटेम और फिजियोलॉजी पर हानिकारक प्रभाव पड़ सकते हैं। इस प्रकार, जीवों ने क्षति की मरम्मत और होमोस्टोसिस को बनाए रखने के लिए समर्पित लक्षित और विशिष्ट तनाव प्रतिक्रियाएं विकसित की हैं। इन तंत्रों में एंडोप्लाज्मिक रेटिकुलम (यूपीआरईआर),माइटोकॉन्ड्रिया (यूपीआरएमटी),हीट शॉक रिस्पांस (एचएसआर), और ऑक्सीडेटिव स्ट्रेस रिस्पांस (ऑक्सएसआर) की सामने आई प्रोटीन प्रतिक्रिया शामिल है । यहां प्रस्तुत प्रोटोकॉल इन रास्तों की सक्रियता और सूत्रकृमि, सी एलिगेंस में उनके शारीरिक परिणामों का पता लगाने और विशेषता के तरीकों का वर्णन करते हैं। सबसे पहले, मार्ग-विशिष्ट फ्लोरोसेंट ट्रांसक्रिप्शनल रिपोर्टर्स का उपयोग तेजी से सेलुलर लक्षण वर्णन, दवा स्क्रीनिंग, या बड़े पैमाने पर आनुवंशिक स्क्रीनिंग (जैसे, आरएनएआई या उत्परिवर्ती पुस्तकालयों) के लिए वर्णित है। इसके अलावा, पूरक, मजबूत शारीरिक परखों का वर्णन किया गया है, जिसका उपयोग विशिष्ट तनावों के लिए जानवरों की संवेदनशीलता का सीधे आकलन करने के लिए किया जा सकता है, जो प्रतिलेखन संवाददाताओं के कार्यात्मक सत्यापन के रूप में कार्य करते हैं। एक साथ, ये विधियां आंतरिक और बाहरी प्रोटेओटॉक्सिक क्षोभ के सेलुलर और शारीरिक प्रभावों के तेजी से लक्षण वर्णन के लिए अनुमति देती हैं।

तनाव प्रतिक्रियाओं की सक्रियता को मापने के लिए प्रतिलेखन संवाददाताओं का उपयोग करना यहां, फ्लोरोसेंट ट्रांसक्रिप्शनिक रिपोर्टर्स का उपयोग किया जाता है, जो सी एलिगेंसमें अधिक?...

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Measurements of Physiological Stress Responses in C. Elegans

यहां, हम फ्लोरोसेंट ट्रांसक्रिप्शनल रिपोर्टर्स की सक्रियता को मापने और शारीरिक तनाव के प्रति संवेदनशीलता को परसकर निमाटोड सी एलिगेंस में सेलुलर प्रोटेओटॉक्सिक तनाव प्रतिक्रियाओं की विशेषता है।

सी. एलिगेंस में शारीरिक तनाव प्रतिक्रियाओं के माप

Organisms are often exposed to fluctuating environments and changes in intracellular homeostasis, which can have detrimental effects on their proteome and ...

Research

JoVE Journal

Biology

Measurements of Physiological Stress Responses in C. Elegans

Generation of Stable Transgenic C. elegans Using Microinjection

स्थिर ट्रांसजेनिक सी. Microinjection का उपयोग एलिगेंस पीढ़ी

Transgenic Caenorhabditis elegans can be readily created via microinjection of a DNA plasmid solution into the gonad 1.  The plasmid DNA rearranges to ...

Monitoring Plant Hormones During Stress Responses

तनाव प्रतिक्रियाएँ के दौरान संयंत्र हार्मोन निगरानी

Plant hormones and related signaling compounds play an important role in the regulation of plant responses to various environmental stimuli and stresses. ...

Generation of Transgenic C. elegans by Biolistic Transformation

Generation of Transgenic C. elegans by Biolistic Transformation

ट्रांसजेनिक का सृजन सी. एलिगेंस Biolistic परिवर्तन द्वारा

The number of laboratories using the free living nematode C. elegans is rapidly growing. The popularity of this biological model is attributed to a rapid ...

RNAi Screening to Identify Postembryonic Phenotypes in C. elegans

RNAi Screening to Identify Postembryonic Phenotypes in C. elegans

आरएनएआई स्क्रीनिंग में Postembryonic phenotypes पहचानें सी. एलिगेंस</em

C. elegans has proven to be a valuable model system for the discovery and functional characterization of many genes and gene pathways1. More sophisticated ...

Linking Predation Risk, Herbivore Physiological Stress and Microbial Decomposition of Plant Litter

शिकार जोखिम, herbivore शारीरिक तनाव और संयंत्र कूड़े के माइक्रोबियल अपघटन जोड़ने

The quantity and quality of detritus entering the soil  determines the rate of decomposition by microbial communities as well as  recycle rates of ...

C. elegans Chemotaxis Assay

C. elegans Chemotaxis Assay

एलिगेंस Chemotaxis परख

Many organisms use chemotaxis to seek out food sources, avoid noxious substances, and find mates.  Caenorhabditis elegans has impressive chemotaxis ...

Antibody Staining in C. Elegans Using &quot;Freeze-Cracking&quot;

Antibody Staining in C. Elegans Using "Freeze-Cracking"

एंटीबॉडी धुंधला में<em&gt; सी. एलिगेंस</em&gt; &quot;रुक क्रैकिंग&quot; का प्रयोग

To stain C.  elegans with antibodies, the relatively impermeable cuticle must be  bypassed by chemical or mechanical methods.  "Freeze-cracking" is one ...

An Anoxia-starvation Model for Ischemia/Reperfusion in C. elegans

An Anoxia-starvation Model for Ischemia/Reperfusion in C. elegans

Ischemia / reperfusion में के लिए एक अनॉक्सिता भुखमरी मॉडल<em&gt; सी. एलिगेंस</em

Protocols for anoxia/starvation in the genetic model organism C. elegans simulate ischemia/reperfusion. Worms are separated from bacterial food and placed ...

Methods for Skin Wounding and Assays for Wound Responses in C. elegans

Methods for Skin Wounding and Assays for Wound Responses in C. elegans

में घाव प्रतिक्रियाएँ त्वचा लोग घायल हो गए के लिए तरीके और assays<em&gt; सी। एलिगेंस</em

The C. elegans epidermis and cuticle form a simple yet sophisticated skin layer that can repair localized damage resulting from wounding. Studies of wound ...

Methods to Assess Subcellular Compartments of Muscle in C. elegans

Methods to Assess Subcellular Compartments of Muscle in C. elegans

तरीके में पेशी के subcellular डिब्बों का आकलन करने के लिए<em&gt; सी. एलिगेंस</em

Muscle is a dynamic tissue that responds to changes in nutrition, exercise, and disease state. The loss of muscle mass and function with disease and age ...