Name: induction of leptomeningeal cells modification via intracisternal injection
Uploaded: 2020-05-07T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Induction of Leptomeningeal Cells Modification Via Intracisternal Injection at JoVE.com

Deze studie werd ondersteund door subsidies van de Zweedse Onderzoeksraad, de Swedish Cancer Society, de Zweedse Stichting voor Strategisch Onderzoek, Knut en Alice Wallenbergs Stiftelse en het Strategic Research Programme in Stem Cells and Regenerative Medicine van Karolinska Institutet (StratRegen).

De hierbij voorgestelde chirurgische procedures werden goedgekeurd door Stockholms Norra Djurförsöksetiska Nämnd en uitgevoerd in overeenstemming met de specificaties van het onderzoeksinstituut (Karolinska Instituut, Zweden).
LET OP: Intracisternalinjectie kan flexibel worden aangepast voor meerdere onderzoeksdoeleinden. We presenteren hieronder een procedure die is ontwikkeld om leptomeningealcellen efficiënt te labelen voor fate mapping op basis van injectie van endoxif...

<ol>
	<li>Vanlandewijck, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+molecular+atlas+of+cell+types+and+zonation+in+the+brain+vasculature.">A molecular atlas of cell types and zonation in the brain vasculature.</a> Nature. 554 (7693), 475-480 (2018).</li><li>Whish, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+inner+CSF-brain+barrier:+developmentally+controlled+access+to+the+brain+via+intercellular+junctions.">The inner CSF-brain barrier: developmentally controlled access to the brain via intercellular junctions.</a> Frontiers in Neuroscience. 9, 16 (2015).</li><li>Weller, R. O., Sharp, M. M., Christodoulides, M., Carare, R. O., Mollgard, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+meninges+as+barriers+and+facilitators+for+the+movement+of+fluid,+cells+and+pathogens+related+to+the+rodent+and+human+CNS.">The meninges as barriers and facilitators for the movement of fluid, cells and pathogens related to the rodent and human CNS.</a> Acta Neuropathologica. 135 (3), 363-385 (2018).</li><li>Choe, Y., Siegenthaler, J. A., Pleasure, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+cascade+of+morphogenic+signaling+initiated+by+the+meninges+controls+corpus+callosum+formation.">A cascade of morphogenic signaling initiated by the meninges controls corpus callosum formation.</a> Neuron. 73 (4), 698-712 (2012).</li><li>Siegenthaler, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retinoic+acid+from+the+meninges+regulates+cortical+neuron+generation.">Retinoic acid from the meninges regulates cortical neuron generation.</a> Cell. 139 (3), 597-609 (2009).</li><li>Bifari, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurogenic+Radial+Glia-like+Cells+in+Meninges+Migrate+and+Differentiate+into+Functionally+Integrated+Neurons+in+the+Neonatal+Cortex.">Neurogenic Radial Glia-like Cells in Meninges Migrate and Differentiate into Functionally Integrated Neurons in the Neonatal Cortex.</a> Cell Stem Cell. 20 (3), 360-373 (2017).</li><li>De Bock, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+angle+on+blood-CNS+interfaces:+a+role+for+connexins?.">A new angle on blood-CNS interfaces: a role for connexins?.</a> FEBS Letters. 588 (8), 1259-1270 (2014).</li><li>Ramos, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cisterna+Magna+Injection+in+Rats+to+Study+Glymphatic+Function.">Cisterna Magna Injection in Rats to Study Glymphatic Function.</a> Methods in Molecular Biology. 1938, 97-104 (2019).</li><li>Xavier, A. L. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cannula+Implantation+into+the+Cisterna+Magna+of+Rodents.">Cannula Implantation into the Cisterna Magna of Rodents.</a> Journal of Visualized Experiments. (135), (2018).</li><li>Iliff, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+paravascular+pathway+facilitates+CSF+flow+through+the+brain+parenchyma+and+the+clearance+of+interstitial+solutes,+including+amyloid+beta.">A paravascular pathway facilitates CSF flow through the brain parenchyma and the clearance of interstitial solutes, including amyloid beta.</a> Science Translational Medicine. 4 (147), (2012).</li><li>Coureuil, M., Lecuyer, H., Bourdoulous, S., Nassif, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+journey+into+the+brain:+insight+into+how+bacterial+pathogens+cross+blood-brain+barriers.">A journey into the brain: insight into how bacterial pathogens cross blood-brain barriers.</a> Nature Reviews Microbiology. 15 (3), 149-159 (2017).</li><li>Madisen, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transgenic+mice+for+intersectional+targeting+of+neural+sensors+and+effectors+with+high+specificity+and+performance.">Transgenic mice for intersectional targeting of neural sensors and effectors with high specificity and performance.</a> Neuron. 85 (5), 942-958 (2015).</li><li>Slezak, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transgenic+mice+for+conditional+gene+manipulation+in+astroglial+cells.">Transgenic mice for conditional gene manipulation in astroglial cells.</a> Glia. 55 (15), 1565-1576 (2007).</li><li>Hardy, S. J., Christodoulides, M., Weller, R. O., Heckels, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interactions+of+Neisseria+meningitidis+with+cells+of+the+human+meninges.">Interactions of Neisseria meningitidis with cells of the human meninges.</a> Molecular Microbiology. 36 (4), 817-829 (2000).</li><li>Colicchio, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+meningococcal+ABC-Type+L-glutamate+transporter+GltT+is+necessary+for+the+development+of+experimental+meningitis+in+mice.">The meningococcal ABC-Type L-glutamate transporter GltT is necessary for the development of experimental meningitis in mice.</a> Infection and Immunity. 77 (9), 3578-3587 (2009).</li><li>Ricci, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+matrix+metalloproteinases+attenuates+brain+damage+in+experimental+meningococcal+meningitis.">Inhibition of matrix metalloproteinases attenuates brain damage in experimental meningococcal meningitis.</a> BMC Infectious Diseases. 14, 726 (2014).</li></ol>

Het hier geschetste protocol presenteert een eenvoudige en reproduceerbare procedure om leptomeningealcellen te labelen voor het in kaart brengen van het lot. We gebruiken intracisternalinjectie van endoxifen, een actieve metaboliet van Tamoxifen, om expressie van tdTomato fluorescerende reporter in Cx30-CreER te induceren; R26R-tdTomato muizen12,13.
In vergelijking met andere protocollen die worden gebruikt voor het verkrijgen van toe...

Leptomeningealcellen zijn een fibroblast-achtige populatie van cellen georganiseerd in een dunne laag die de hersenen overlegt en genen uitdrukt die betrokken zijn bij collageencrosslinking (bijvoorbeeld Dcn en Lum), en bij de oprichting van een hersen-meningeale barrière (bijvoorbeeld Cldn11)1,2. Leptomeningeale cellen zijn betrokken bij een breed scala van fysiologische functies, van strikte controle over de cerebrospinale vloeistof drainage3 tot begeleiding van neurale voorouders in de zich ontwikkelende hersenen4,5. Een recente studie heeft ook voorgesteld dat leptomeninges in de pasgeborene kan haven radiale glia-achtige cellen die migreren naar de hersenen parenchyma en ontwikkelen tot functionele corticale neuronen6.
Leptomeningealcellen bevinden zich in de nabijheid van oppervlakteastrocyten en delen met hen, evenals andere parenchymale astroglia, expressie van connexin-30 (Cx30)7. De onderstaande chirurgische procedure maakt een wijdverbreide en specifieke etikettering van deze meningealecellen mogelijk via een eenmalige levering van endoxifen in de cisterna magna van transgene muizen die tdTomato in Cx30+ cellen voorwaardelijk uitdrukken (d.w.z. met behulp van een CreER-loxP-systeem voor het in kaart brengen van het lot). Endoxifen is een actieve metaboliet van Tamoxifen en induceert recombinatie van CreER-uitdrukkende cellen op dezelfde manier als Tamoxifen doet. Het is echter de aanbevolen oplossing voor actuele toepassing, omdat het oplost in 5-10% DMSO, in plaats van hoge concentraties ethanol. Bovendien kruist endoxifen niet de hersen-meningeale barrière, waardoor een specifieke recombinatie van leptomeningeale cellen mogelijk wordt, zonder etikettering van de onderliggende Cx30+ astrogliale populatie (zie representatieve resultaten).
De hier gepresenteerde techniek is gericht op het handmatig en veilig injecteren van de verbinding in het hersenvocht, via directe toegang tot de cisterna magna. In tegenstelling tot andere, meer invasieve procedures die craniotomie vereisen, maakt deze aanpak het mogelijk om verbindingen te bezielen zonder schade aan de schedel of het brein parenchyma te veroorzaken. Het wordt dus niet geassocieerd met de inductie van ontstekingsreacties veroorzaakt door activering van parenchymale gliacellen. Net als bij andere injectiestrategieën beschreven vóór8,9,10, is de huidige aanpak gebaseerd op de chirurgische blootstelling van het atlanto-occipital dural membraan dat de cisterna magna bedekt, na een stompe dissectie van de overlopende nekspieren. Echter, in tegenstelling tot andere procedures, raden we het gebruik van een naald gebogen aan de punt, die kan worden gestabiliseerd tegen het occipital bot tijdens toediening. Dit voorkomt het risico dat de naald te diep doordringt en het onderliggende cerebellum en medulla beschadigt.
Deze chirurgische ingreep is compatibel met afstammingsonderzoeken die gericht zijn op het in kaart brengen van veranderingen in celidentiteiten en migratieroutes via haakjeslagen. Het kan ook worden aangepast aan genetische ablatiestudies die van plan zijn de rol van leptomeningealcellen in gezondheid en ziekte te onderzoeken, zoals hun bijdrage aan corticale ontwikkeling5 of de verspreiding van bacteriële meningitis3,11. Ten slotte kan het worden gebruikt om cerebrospinale vloeistof beweging te volgen in combinatie met de levering van fluorescerende tracers in wildtype dieren.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anesthesia unit</td>
			<td>Univentor 410</td>
			<td>8323102</td>
			<td>Complete of vaporizer, chamber, and tubing that connects to chamber and mouse head holder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia (Isoflurane)</td>
			<td>Baxter Medical AB</td>
			<td>000890</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>PVP1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carprofen</td>
			<td>Orion Pharma AB</td>
			<td>014920</td>
			<td>Commercial name Rymadil</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cyanoacrylate glue</td>
			<td>Carl Roth</td>
			<td>0258.1</td>
			<td>Use silk 5-0 sutures, in alternative</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medbond Tissue Glue</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>50479</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMSO</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D2650</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Endoxifen</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>E8284</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol 70%</td>
			<td>Histolab</td>
			<td>01370</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hamilton syringe (30G beveled needle)</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td>80300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lidocaine</td>
			<td>Aspen Nordic</td>
			<td>520455</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse head holder</td>
			<td>Narishige International</td>
			<td>SGM-4</td>
			<td>With mouth piece for inhalational anhestetics. Alternatively, use a stereotactic frame</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>15009-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shaver</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>GT420</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile absorption spears</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18105-01</td>
			<td>Sterile cotton swabs are also a good option</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical separator</td>
			<td>World Precision Instrument</td>
			<td>501897</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezers</td>
			<td>Dumont</td>
			<td>11251-35</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Viscotears</td>
			<td>Bausch&#38;Lomb Nordic AB</td>
			<td>541760</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

induction of leptomeningeal cells modification via intracisternal injection

Het hier beschreven protocol beschrijft hoe u veilig en handmatig oplossingen injecteren via de cisterna magna terwijl het risico op schade aan de onderliggende parenchyma wordt geëlimineerd. Eerder gepubliceerde protocollen raden het gebruik van rechte naalden die moeten worden verlaagd tot een maximum van 1-2 mm van het dural oppervlak. De plotselinge daling van de weerstand zodra het durale membraan is doorboord, maakt het moeilijk om de naald in een stabiele positie te houden. Onze methode, in plaats daarvan, maakt gebruik van een naald gebogen op de punt die kan worden gestabiliseerd tegen het occipital bot van de schedel, waardoor de spuit niet in het weefsel doordringt na perforatie van het durale membraan. De procedure is eenvoudig, reproduceerbaar en veroorzaakt geen langdurig ongemak bij de geopereerde dieren. We beschrijven de intracisternal injectiestrategie in de context van genetische fate mapping van vasculaire leptomeningealcellen. Dezelfde techniek kan bovendien worden gebruikt om een breed scala van onderzoeksvragen aan te pakken, zoals het onderzoeken van de rol van leptomeninges in neuroontwikkeling en de verspreiding van bacteriële meningitis, door genetische ablatie van genen putatief betrokken bij deze verschijnselen. Bovendien kan de procedure worden gecombineerd met een geautomatiseerd infusiesysteem voor een constante levering en worden gebruikt voor het volgen van cerebrospinale vloeistofbeweging via injectie van fluorescerende gelabelde moleculen.

Intracisternal injectie van endoxifen in transgene muizen uitdrukken CreER onder de Cx30 promotor13 en een ondoordringbare fluorescerende verslaggever zorgt voor een specifieke recombinatie van leptomeningeal cellen zonder etikettering van de naburige Cx30-uitdrukkende oppervlak en parenchymale astrocyten in de cortex (Figuur 1). Om toegang te krijgen tot de cisterna magna, wordt het verdoofde dier geplaatst met zijn lichaam en zijn ho...

Watch this Scientific Journal Video about Induction of Leptomeningeal Cells Modification Via Intracisternal Injection at JoVE.com

Induction of Leptomeningeal Cells Modification Via Intracisternal Injection

We beschrijven een intracisternalinjectie die een naald gebruikt die aan de punt is gebogen en die kan worden gestabiliseerd aan de schedel, waardoor het risico op schade aan de onderliggende parenchyma wordt geëlimineerd. De aanpak kan worden gebruikt voor genetische lot mapping en manipulaties van leptomeningealcellen en voor het bijhouden van cerebrospinale vloeistof beweging.

Inductie van Leptomeningeal Cellen Wijziging Via Intracisternal Injectie

The protocol outlined here describes how to safely and manually inject solutions through the cisterna magna while eliminating the risk of damage to the ...

Onze chirurgische ingreep maakt het mogelijk specifieke genbewerking van leptomeningeale cellen om hun functie te bestuderen in vele fysiologische en pathologische aandoeningen zoals neuroontwikkeling en de verspreiding van bacteriële meningitis. Om schade tijdens de intracisternale levering van endoxifen te minimaliseren, gebruiken we een gebogen naald die tegen de staartrand van de schedel kan worden bevestigd om te voorkomen dat het dieper in het weefsel doordringt. De procedure kan worden gebruikt om de rol van genen die leptomeningeal cellen uitdrukken sonde door verlies en winst van functie-experimenten.Het kan ook worden aangenomen om de cerebrospinale vloeistofstroom te volgen. Visuele demonstratie van deze methode zal zorgen voor een succesvolle identificatie van de injectieplaats voor intracisternale injectie en inzicht in hoe de naald tegen het occipitaal bot te beveiligen. Begin met het voorbereiden van een Hamilton spuit met een 30 meter schuine naald voor injectie.Gebruik tangen om de naald te buigen tot 30 graden drie millimeter van de tip. Vervolgens verdunen endoxifen in 10%DMSO tot een concentratie van 1 milligram per milliliter en de spuit bijvullen. Verdoof het dier in de isoflurane kamer.Stel vervolgens de hoofdhouder van de muis zo in dat het mondstuk ongeveer onder een hoek van 30 graden van het oppervlak van de chirurgische tafel staat en bevestig het hoofd van het dier op de houder. Om de toegankelijkheid van de cisterna magna te verbeteren, plaatst u het lichaam van het dier op ongeveer 30 graden van het oppervlak van de tafel met het hoofd naar beneden gekanteld, waardoor een hoek van 120 graden met de rest van het lichaam wordt bepaald en de achterkant van de nek wordt verlengd om de toegang tot de cisterna magna te vergemakkelijken. Zodra het dier goed is gepositioneerd, breng oogheelkundige zalf, scheer de achterkant van zijn nek, en ontsmet het gebied met alcohol doekjes en Betadine.Gebruik chirurgische schaar om een middellijn incisie te maken vanaf het niveau van het occipitale bot en zich naar achteren uit te breiden. Scheid voorzichtig het oppervlakkige bindweefsel en de nekspieren door zijwaarts van de middellijn te trekken met fijne tip pincet die het oermembraan boven de magna van de stedelingen zal blootstellen. Plaats een kleine chirurgische separator om visualisatie van de cisterna magna gedurende de hele procedure mogelijk te maken.Identificeer het staarteind van het occipitale bot en steek de eerder gebogen naald er onmiddellijk onder. Zodra de dura is geperforeerd, laat de gebogen punt van de naald onder het oppervlak doordringen door de spuit voorzichtig omhoog en parallel aan het lichaam van het dier te trekken, wat een betere stabiliteit garandeert. Injecteer de verbinding langzaam om interferentie met de natuurlijke stroming van hersenvocht te voorkomen.Na de injectie, laat de naald rusten binnen voor een minuut, dan voorzichtig te verwijderen met behulp van fijne tip tangen. Sluit de huid met een paar druppels cyanoacrylaatlijm en breng lokale verdoving aan op de injectieplaats. Haal het dier van de houder en leg het in een schone kooi op een verwarmingskussen.Zorg er dan voor om het dier te controleren totdat het weer bij bewustzijn komt. Intracisternale injectie van endoxifen in transgene muizen uitdrukken CreER onder de Cx30 promotor, een inducible fluorescente reporter zorgt voor een specifieke recombinatie van leptomeningeal cellen zonder etikettering van de naburige Cx30 uitdrukken oppervlak astrocyten en parenchymale astrocyten in de cortex. Dit injectieprotocol maakt gebruik van de fysiologische beweging van het hersenvocht, zodat de endoxifen-oplossing over de subarachnoïdale ruimte wordt verdeeld om leptomeningeale cellen efficiënt te combineren die de refactorische bollen, cortex en cerebellum overlayen.De oplossing gaat niet over de hersenvliesbarrière of komt in contact met astrogliale cellen van de parenchyma in tegenstelling tot systemische toediening via orale gavage. Recombinatie van leptomeningeale cellen na intracisternale injectie werd geïdentificeerd door Pdgfr-alpha reactiviteit, terwijl het oppervlak en parenchymale astrocyten uitdrukken Gfap bleef niet gelabeld. Bij een poging tot dit experiment is het belangrijk om de injectieplaats te vinden voor intracisternale levering.Deze visuele demonstratie biedt de technische knowhow om de procedure uit te voeren en tegelijkertijd het risico op beschadiging van het neurale weefsel eronder te minimaliseren. Genablatiestudies kunnen met deze techniek worden uitgevoerd om de rol van leptomeningeale cellen in corticogenese en regulatie van hersenvochtvorming te onderzoeken en om extra plaatsen te identificeren voor de verspreiding van bacteriën in de subarachnoïdale ruimte.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Live-cell Imaging of Sensory Organ Precursor Cells in Intact Drosophila Pupae

Live-cell Imaging of Sensory Organ Precursor Cells in Intact Drosophila Pupae

Live-cell imaging van zintuig voorloper cellen in Intact Drosophila Poppen

Since the discovery of Green Fluorescent Protein (GFP), there has been a revolutionary change in the use of live-cell imaging as a tool for understanding ...

Efficient Derivation of Human Neuronal Progenitors and Neurons from Pluripotent Human Embryonic Stem Cells with Small Molecule Induction

Efficiënte Afleiding van de Mens Neuronale voorouders en neuronen van pluripotente menselijke embryonale stamcellen met op kleine moleculen Inductie

There is a large unfulfilled need for a clinically-suitable human neuronal cell source for repair or regeneration of the damaged central nervous system ...

Expansion of Embryonic and Adult Neural Stem Cells by In Utero Electroporation or Viral Stereotaxic Injection

Expansion of Embryonic and Adult Neural Stem Cells by In Utero Electroporation or Viral Stereotaxic Injection

Uitbreiding van embryonale en adulte neurale stamcellen door<em&gt; In Utero</em&gt; Electroporation of Viral stereotactische injectie

Somatic stem cells can divide to generate additional stem cells (expansion) or more differentiated cell types (differentiation), which is fundamental for ...

Designing, Packaging, and Delivery of High Titer CRISPR Retro and Lentiviruses via Stereotaxic Injection

Ontwerpen, Verpakkingen en Levering van hoge titer CRISPR Retro en Lentivirussen via Stereotaxische Injection

Replication defective lentiviruses or retroviruses are capable of stably integrating transgenes into the genome of an infected host cell. This technique ...

An Alternative and Validated Injection Method for Accessing the Subretinal Space via a Transcleral Posterior Approach

An Alternative and Validated Injection Method for Accessing the Subretinal Space via a Transcleral Posterior Approach

Een alternatief en gevalideerd injectiemethode voor toegang tot de Subretinal Space<i&gt; via</i&gt; Een Transcleral Posterior Approach

Subretinal injections have been successfully used in both humans and rodents to deliver therapeutic interventions of proteins, viral agents, and cells to ...

In Vivo Direct Reprogramming of Resident Glial Cells into Interneurons by Intracerebral Injection of Viral Vectors

In vivo directe herprogrammering van ingezeten gliacellen in interneuronen door intracerebrale injectie van virale vectoren

Converting resident glia in the brain into functional and subtype-specific neurons in vivo provides a step forward towards the development of alternative ...

Brain Death Induction in Mice Using Intra-Arterial Blood Pressure Monitoring and Ventilation via Tracheostomy

Brain Death Inductie bij muizen met behulp van intra-arteriële bloeddruk monitoring en ventilatie via tracheostomie

While both living donation and donation after circulatory death provide alternative opportunities for organ transplantation, donation after donor brain ...

Shuttle Box Assay as an Associative Learning Tool for Cognitive Assessment in Learning and Memory Studies using Adult Zebrafish

Shuttle Box Assay als een associatief leermiddel voor cognitieve beoordeling bij leer- en geheugenstudies met behulp van volwassen zebravissen

Cognitive deficits, including impaired learning and memory, are a primary symptom of various developmental and age-related neurodegenerative diseases and ...

Organotypic Cultures of Adult Human Cortex as an Ex vivo Model for Human Stem Cell Transplantation and Validation

Organotypic Cultures of Adult Human Cortex as an Ex vivo Model for Human Stem Cell Transplantation and Validation

Organotypische culturen van volwassen menselijke cortex als een ex vivo model voor menselijke stamceltransplantatie en validatie

Neurodegenerative disorders are common and heterogeneous in terms of their symptoms and cellular affectation, making their study complicated due to the ...