Name: a modified two kidney one clip mouse model of renin regulation in renal artery stenosis
Uploaded: 2020-10-26T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Modified Two Kidney One Clip Mouse Model of Renin Regulation in Renal Artery Stenosis at JoVE.com

Forskningen stöddes av NHLBI Research Scientist Development Grant (1K01HL135461-01) till JAG. Tack till David Carmona-Berrio och Isabel Adarve-Rengifo för deras tekniska hjälp.

Möss inhystes och vårdades vid Vanderbilt University Medical Center (VUMC) Division of Animal Care enligt riktlinjerna från National Institutes of Health (NIH) och Guide for the Care and Use of Laboratory Animals, US Department of Health and Human Services. Alla djurförsök godkändes av VUMC Institutional Animal Care and Use Committee innan försöken påbörjades.
1. Beredning och dissektion av djur
<ol><li>Slå på värmedynans groning och vattenpump ca 30 min innan operationen påbö...

<ol>
	<li>Kashyap, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blockade+of+CCR2+reduces+macrophage+influx+and+development+of+chronic+renal+damage+in+murine+renovascular+hypertension.">Blockade of CCR2 reduces macrophage influx and development of chronic renal damage in murine renovascular hypertension.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 310 (5), 372-384 (2016).</li><li>Wang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+inflammatory+biomarkers+after+renal+revascularization+in+atherosclerotic+renal+artery+stenosis.">Changes in inflammatory biomarkers after renal revascularization in atherosclerotic renal artery stenosis.</a> Nephrology Dialysis Transplantation. 31 (9), 1437-1443 (2016).</li><li>Yerram, P., Karuparthi, P. R., Chaudhary, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathogenesis+and+management+of+renovascular+hypertension+and+ischemic+nephropathy.">Pathogenesis and management of renovascular hypertension and ischemic nephropathy.</a> Minerva Urologica e Nefrologica. 64 (1), 63-72 (2012).</li><li>Covic, A., Gusbeth-Tatomir, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+the+renin-angiotensin-aldosterone+system+in+renal+artery+stenosis,+renovascular+hypertension,+and+ischemic+nephropathy:+diagnostic+implications.">The role of the renin-angiotensin-aldosterone system in renal artery stenosis, renovascular hypertension, and ischemic nephropathy: diagnostic implications.</a> Progress in Cardiovascular Diseases. 52 (3), 204-208 (2009).</li><li>Barreras, A., Gurk-Turner, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiotensin+II+receptor+blockers.">Angiotensin II receptor blockers.</a> Proceedings. 16 (1), 123-126 (2003).</li><li>Sica, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiotensin-converting+enzyme+inhibitors+side+effects--physiologic+and+non-physiologic+considerations.">Angiotensin-converting enzyme inhibitors side effects--physiologic and non-physiologic considerations.</a> Journal of Clinical Hypertension. 6 (7), 410-416 (2004).</li><li>Hill, R. D., Vaidya, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiotensin+II+Receptor+Blockers+(ARB,+ARb).">Angiotensin II Receptor Blockers (ARB, ARb).</a> StatPearls. , (2019).</li><li>Durante, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+the+renin-angiotensin-aldosterone+system+in+the+pathogenesis+of+atherosclerosis.">Role of the renin-angiotensin-aldosterone system in the pathogenesis of atherosclerosis.</a> Current Pharmaceutical Design. 18 (7), 981-1004 (2012).</li><li>Chen, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasma+reactive+carbonyl+species:+Potential+risk+factor+for+hypertension.">Plasma reactive carbonyl species: Potential risk factor for hypertension.</a> Free Radical Research. 45 (5), 568-574 (2011).</li><li>Zhang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiotensin+receptor+blockade+has+protective+effects+on+the+poststenotic+porcine+kidney.">Angiotensin receptor blockade has protective effects on the poststenotic porcine kidney.</a> Kidney International. 84 (4), 767-775 (2013).</li><li>Zou, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+scattered+tubular-like+cells+confer+protective+effects+in+the+stenotic+murine+kidney+mediated+by+release+of+extracellular+vesicles.">Renal scattered tubular-like cells confer protective effects in the stenotic murine kidney mediated by release of extracellular vesicles.</a> Scientific Reports. 8 (1), 1263 (2018).</li><li>Kinra, M., Mudgal, J., Arora, D., Nampoothiri, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+insight+into+the+role+of+cyclooxygenase+and+lipooxygenase+pathway+in+renal+ischemia.">An insight into the role of cyclooxygenase and lipooxygenase pathway in renal ischemia.</a> European Review for Medical and Pharmacological Sciences. 21 (21), 5017-5020 (2017).</li><li>Cavalcanti, C. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+PDE5+Restores+Depressed+Baroreflex+Sensitivity+in+Renovascular+Hypertensive+Rats.">Inhibition of PDE5 Restores Depressed Baroreflex Sensitivity in Renovascular Hypertensive Rats.</a> Frontiers in Physiology. 7, 15 (2016).</li><li>Dias, A. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sildenafil+ameliorates+oxidative+stress+and+DNA+damage+in+the+stenotic+kidneys+in+mice+with+renovascular+hypertension.">Sildenafil ameliorates oxidative stress and DNA damage in the stenotic kidneys in mice with renovascular hypertension.</a> Journal of Translational Medicine. 12, 35 (2014).</li><li>Lerman, L. O., Chade, A. R., Sica, V., Napoli, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+hypertension:+an+overview.">Animal models of hypertension: an overview.</a> Journal of Laboratory and Clinical Medicine. 146 (3), 160-173 (2005).</li><li>Reckelhoff, J. F., Romero, D. G., Yanes Cardozo, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex,+Oxidative+Stress,+and+Hypertension:+Insights+From+Animal+Models.">Sex, Oxidative Stress, and Hypertension: Insights From Animal Models.</a> Physiology (Bethesda). 34 (3), 178-188 (2019).</li><li>Goldblatt, H., Lynch, J., Hanzal, R. F., Summerville, W. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+on+Experimental+Hypertension+:+I.+The+Production+of+Persistent+Elevation+of+Systolic+Blood+Pressure+by+Means+of+Renal+Ischemia.">Studies on Experimental Hypertension : I. The Production of Persistent Elevation of Systolic Blood Pressure by Means of Renal Ischemia.</a> Journal of Experimental Medicine. 59 (3), 347-379 (1934).</li><li>Gollan, F., Richardson, E., Goldblatt, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypertension+in+the+systemic+blood+of+animals+with+experimental+renal+hypertension.">Hypertension in the systemic blood of animals with experimental renal hypertension.</a> Journal of Experimental Medicine. 88 (4), 389-400 (1948).</li><li>Lewis, H. A., Goldblatt, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+on+Experimental+Hypertension:+XVIII.+Experimental+Observations+on+the+Humoral+Mechanism+of+Hypertension.">Studies on Experimental Hypertension: XVIII. Experimental Observations on the Humoral Mechanism of Hypertension.</a> Bulletin of the New York Academy of Medicine. 18 (7), 459-487 (1942).</li><li>Warner, G. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+deficiency+of+Smad3+protects+the+kidneys+from+atrophy+and+interstitial+fibrosis+in+2K1C+hypertension.">Genetic deficiency of Smad3 protects the kidneys from atrophy and interstitial fibrosis in 2K1C hypertension.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 302 (11), 1455-1464 (2012).</li><li>Lorenz, J. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renovascular+hypertension+using+a+modified+two-kidney,+one-clip+approach+in+mice+is+not+dependent+on+the+alpha1+or+alpha2+Na-K-ATPase+ouabain-binding+site.">Renovascular hypertension using a modified two-kidney, one-clip approach in mice is not dependent on the alpha1 or alpha2 Na-K-ATPase ouabain-binding site.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 301 (3), 615-621 (2011).</li><li>Ebina, K., Iwabuchi, T., Suzuki, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Histological+change+in+permanently+clipped+or+ligated+cerebral+arterial+wall.+Part+II:+Autopsy+cases+of+aneurysmal+neck+clipping.">Histological change in permanently clipped or ligated cerebral arterial wall. Part II: Autopsy cases of aneurysmal neck clipping.</a> Acta Neurochirurgica. 66 (1-2), 23-42 (1982).</li><li>Saleem, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sox6:+A+new+modulator+of+renin+expression+during+physiological+conditions.">Sox6: A new modulator of renin expression during physiological conditions.</a> bioRxiv. , (2019).</li><li>Saleem, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sox6+as+a+new+modulator+of+renin+expression+in+the+kidney.">Sox6 as a new modulator of renin expression in the kidney.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. , (2019).</li><li>Chade, A. R., Williams, M. L., Engel, J., Guise, E., Harvey, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+translational+model+of+chronic+kidney+disease+in+swine.">A translational model of chronic kidney disease in swine.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 315 (2), 364-373 (2018).</li><li>Xue, Y., Xu, Z., Chen, H., Gan, W., Chong, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low-energy+shock+wave+preconditioning+reduces+renal+ischemic+reperfusion+injury+caused+by+renal+artery+occlusion.">Low-energy shock wave preconditioning reduces renal ischemic reperfusion injury caused by renal artery occlusion.</a> Acta Cir&#250;rgica Brasileira. 32 (7), 550-558 (2017).</li><li>Lalanne, A., Beaudeux, J. L., Bernard, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NGAL:+a+biomarker+of+acute+and+chronic+renal+dysfunction.">NGAL: a biomarker of acute and chronic renal dysfunction.</a> Annales de Biologie Clinique. 69 (6), 629-636 (2011).</li><li>Bolignano, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+gelatinase-associated+lipocalin+(NGAL)+as+a+marker+of+kidney+damage.">Neutrophil gelatinase-associated lipocalin (NGAL) as a marker of kidney damage.</a> American Journal of Kidney Diseases. 52 (3), 595-605 (2008).</li><li>Kashyap, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+renal+atrophy+in+murine+2+kidney+1+clip+hypertension+is+strain+independent.">Development of renal atrophy in murine 2 kidney 1 clip hypertension is strain independent.</a> Research in Veterinary Science. 107, 171-177 (2016).</li><li>Anderson, W. P., Woods, R. L., Kline, R. L., Korner, P. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+haemodynamic+responses+to+unilateral+renal+artery+stenosis+in+conscious+dogs.">Acute haemodynamic responses to unilateral renal artery stenosis in conscious dogs.</a> Clinical and Experimental Pharmacology and Physiology. 12 (3), 305-309 (1985).</li><li>Imanishi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Critical+degree+of+renal+arterial+stenosis+that+causes+hypertension+in+dogs.">Critical degree of renal arterial stenosis that causes hypertension in dogs.</a> Angiology. 43 (10), 833-842 (1992).</li><li>Ziecina, R., Abramczyk, P., Lisiecka, A., Papierski, K., Przybylski, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adrenal-renal+portal+circulation+contributes+to+decrease+in+renal+blood+flow+after+renal+artery+stenosis+in+rats.">Adrenal-renal portal circulation contributes to decrease in renal blood flow after renal artery stenosis in rats.</a> Journal of Physiology and Pharmacology. 49 (4), 553-560 (1998).</li><li>Johnson, J. A., Ichikawa, S., Kurz, K. D., Fowler, W. L., Payne, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pressor+responses+to+vasopressin+in+rabbits+with+3-day+renal+artery+stenosis.">Pressor responses to vasopressin in rabbits with 3-day renal artery stenosis.</a> American Journal of Physiology. 240 (6), 862-867 (1981).</li><li>Eirin, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+glomerular+filtration+rate+after+renal+revascularization+correlate+with+microvascular+hemodynamics+and+inflammation+in+Swine+renal+artery+stenosis.">Changes in glomerular filtration rate after renal revascularization correlate with microvascular hemodynamics and inflammation in Swine renal artery stenosis.</a> Circulation: Cardiovascular Interventions. 5 (5), 720-728 (2012).</li><li>Ma, Z., Jin, X., He, L., Wang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CXCL16+regulates+renal+injury+and+fibrosis+in+experimental+renal+artery+stenosis.">CXCL16 regulates renal injury and fibrosis in experimental renal artery stenosis.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory. 311 (3), 815-821 (2016).</li><li>Cheng, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+analysis+of+signaling+pathways+activated+in+a+murine+model+of+two-kidney,+one-clip+hypertension.">Temporal analysis of signaling pathways activated in a murine model of two-kidney, one-clip hypertension.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 297 (4), 1055-1068 (2009).</li><li>Wiesel, P., Mazzolai, L., Nussberger, J., Pedrazzini, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two-kidney,+one+clip+and+one-kidney,+one+clip+hypertension+in+mice.">Two-kidney, one clip and one-kidney, one clip hypertension in mice.</a> Hypertension. 29 (4), 1025-1030 (1997).</li><li>Johns, C., Gavras, I., Handy, D. E., Salomao, A., Gavras, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Models+of+experimental+hypertension+in+mice.">Models of experimental hypertension in mice.</a> Hypertension. 28 (6), 1064-1069 (1996).</li></ol>

Njurartärstenos är en viktig orsak till sekundär eller resistent hypertoni och njurskada 1,29. Goldblatt-modellen med två njurar (2K1C) har använts för att studera RAStenos-inducerad renovaskulär hypertoni 1,17,18,19. Ett antal tidigare studier med olika djurmodeller har visat att stenos i njurartären är en stark stimulator fö...

Njurartärstenos (RAStenosis) är ett svårlöst problem som drabbar cirka 6% av personer över 65 år och hos upp till 40% av personer med kranskärlssjukdomeller perifer kärlsjukdom 1,2. Nuvarande behandlingar för sjukdomen är begränsade; Därför finns det ett kritiskt behov av att utveckla nya terapier för att behandla renovaskulär hypertoni eller resistent hypertoni inducerad av RAStenosis. Renin angiotensin aldosteron system (RAAS) är den viktigaste vägen som är involverad i patogenesen av RAStenosis inducerad hypertoni eller renovaskulär hypertoni 3,4. Kända terapier riktade mot RAAS, såsom ACE-hämmare eller angiotensinreceptorblockerare, lindrar högt blodtryck, men behöver noggrant undersökas för njursvikt och hyperkalemi 5,6,7. Renin katalyserar det hastighetsbegränsande steget i RAAS; det omvandlar angiotensinogen till angiotensin I. Vid ateroskleros orsakar plackbildning förträngning av njurartären som driver reninsekretion, vilket resulterar i renovaskulär hypertoni och njurskada8. Ett antal studier har rapporterat ökade nivåer av oxidativ stress under renovaskulär hypertoni hos människor, vilket bekräftades med de två njure ett klipp (2K1C) mössmodellen samt andra hypertensiva djurmodeller 2,9,10,11,12,13,14,15,16 . Den molekylära mekanismen för reninuttryckskontroll under RAStenosinducerad renovaskulär hypertoni är inte väl förstådd och motiverar ytterligare undersökning.
Experimentella djurmodeller som på ett tillförlitligt och reproducerbart sätt rekapitulerar RAStenos är viktiga för att belysa de cellulära och molekylära mekanismerna för reninuttryckskontroll för utveckling av nya terapier. 2K1C-musmodellen är en väletablerad experimentell modell för att studera patogenesen av renovaskulär hypertoni17,18,19,20. Denna modell genereras av förträngning av njurartären med hjälp av ett klipp 17,20,21, vilket ger njurartärocklusion som resulterar i en ökning av reninuttryck och hypertoni17,19,20,21. Det finns dock inga tekniska rapporter tillgängliga, som beskriver en steg för steg-procedur för att generera njurartärstenos i djurmodeller.
Konventionella U-formade silverklämmor, polyuretanrör och andra klämmor har använts för att begränsa njurartären för att inducera njurartärstenos. Vissa studier har visat att klippets design och material är avgörande för att få tillförlitliga och reproducerbara data med 2K1C-djurmodellen. Enligt Lorenz et al., användningen av konventionella U-designade silverklipp inducerar en låg framgångsgrad för högt blodtryck (40-60%)21. På grund av klämdesignen pressas njurartären i sidled, vilket utlöser några förträngningar och större sannolikhet att lossna från njurartären. Silverformbarhet och duktilitet kan tillåta förändringar i klämbredder; Därför orsakar olika högt blodtrycksnivåer bland möss. Silverdioxider på klämman kan orsaka perivaskulär inflammation, intimal proliferation och vävnadsgranulering, vilket förändrar njurartärdiametern22. På grund av variationen i nivåerna av högt blodtryck som erhållits med det konventionella U-designsilverklämman har Warner et al. och Lorenz et al. framgångsrikt använt en rundare polyuretanslang för att initiera njurartärstenos hos möss, vilket genererar en mer tillförlitlig och konsekvent induktion av de två njurarna ett klipp djurmodell20,21.
I denna rapport beskriver vi ett kirurgiskt protokoll för att generera experimentell RAStenos hos möss, med hjälp av polyuretanslangen för att begränsa njurartären. Manschetten med rund design av polyuretan är ett mer reproducerbart, pålitligt och billigt klipp för att generera stenos i musen. Målet med denna experimentella modell är att studera och definiera den molekylära och cellulära mekanismen för reninuttryckskontroll under njurartärstenos. Vi bekräftade framgången för RAStenosis mössmodell genom att mäta reninuttryck och njurskademarkör neutrofil gelatinasassocierad lipocalin (N-GAL).

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Diet Gel</td>
			<td>Clear H2O</td>
			<td>Diet-Gel 76A</td>
			<td>Surgery recovery diet</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EMC Heated Hard pad</td>
			<td>Hallowell</td>
			<td>000A2788B</td>
			<td>Heating pads were used to keep mice warm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethilon Nylon Suture</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>662G</td>
			<td>4-0 (1.5 metric), This suture was used to close the peritoneum, and skin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethilon Nylon Suture</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>2815 G</td>
			<td>8-0 (0.4 metric), This suture was used to close cuff to tie and constrict the artery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Germinator 500</td>
			<td>Braintree Scientific Inc.</td>
			<td>GER 5287</td>
			<td>Sterilize surgical tools between surgeries</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketoprofen</td>
			<td>Zoetis</td>
			<td>Ketofen</td>
			<td>Painkiller</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyurethane</td>
			<td>Braintree Scientific Inc.</td>
			<td>MRE-025</td>
			<td>This tube was used to initiate stenosis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Povidone-iodine antiseptic swabsticks</td>
			<td>Medline</td>
			<td>MDS093901</td>
			<td>It was applied after hair removal and surgery on the skin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reflex 7 Clip Applier</td>
			<td>Roboz Surgical Instrument Co</td>
			<td>204-1000</td>
			<td>This clip applier was used to apply clip in case one or more sutures went off</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile towel drapes</td>
			<td>Dynarex</td>
			<td>4410</td>
			<td>It was used as a bedsheet for mice during surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triple antibiotic ointment</td>
			<td>Medi-First</td>
			<td>22312</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water pump</td>
			<td>Stryker</td>
			<td>T/pump Professionals</td>
			<td>Used to warm and circulate water in the heating hard pad to keep mice warm during and post-surgery</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a modified two kidney one clip mouse model of renin regulation in renal artery stenosis

Njurartärstenos är ett vanligt tillstånd hos patienter med kranskärlssjukdom eller perifer kärlsjukdom där renin angiotensin aldosteronsystemet (RAAS) är överaktiverat. I detta sammanhang finns det en förträngning av njurartärerna som stimulerar en ökning av uttrycket och frisättningen av renin, det hastighetsbegränsande proteaset i RAAS. Den resulterande ökningen av reninuttryck är en känd drivkraft för renovaskulär hypertoni, ofta förknippad med njurskada och organskador. Således finns det ett stort intresse för att utveckla nya behandlingar för detta tillstånd. Den molekylära och cellulära mekanismen för reninkontroll vid njurartärstenos är inte helt förstådd och motiverar ytterligare undersökning. För att inducera njurartärstenos hos möss utvecklades en modifierad 2 njure 1 klipp (2K1C) Goldblatt-musmodell. Den högra njuren stenoserades hos vilda möss och skenopererade möss användes som kontroll. Efter njurartärstenos bestämde vi reninuttryck och njurskada. Njurar skördades och färska kortiker användes för att bestämma protein- och mRNA-uttryck av renin. Denna djurmodell är reproducerbar och kan användas för att studera patofysiologiska svar, molekylära och cellulära vägar som är involverade i renovaskulär hypertoni och njurskada.

Njurartärförträngning ökar reninuttrycket i den stenoserade njuren medan den undertrycker uttrycket i den kontralaterala njuren. De två njurarna ett klipp (2K1C) eller Goldblatt modell av stenos inducerar ökat reninuttryck och njurskada. Detta är erkänt som den bästa representativa modellen för ensidig njurartärstenos hos människor.
Uttryck av renin och prorenin (föregångare till renin) mättes med hjälp av immunoblotting. Data visar att renin- och proreninuttrycket ökade i de...

Watch this Scientific Journal Video about A Modified Two Kidney One Clip Mouse Model of Renin Regulation in Renal Artery Stenosis at JoVE.com

A Modified Two Kidney One Clip Mouse Model of Renin Regulation in Renal Artery Stenosis

En modifierad 2 njure 1 clip (2K1C) Goldblatt musmodell utvecklades med hjälp av polyuretanslangar för att initiera njurartärstenos, vilket inducerar en ökning av reninuttryck och njurskada. Här beskriver vi en detaljerad procedur för att förbereda och placera manschetten på njurartären för att generera en reproducerbar och konsekvent 2K1C-musmodell.

En modifierad tvånjure en klippmusmodell av reninreglering vid njurartärstenos

Renal artery stenosis is a common condition in patients with coronary or peripheral vascular disease where the renin angiotensin aldosterone system (RAAS) ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Use of a Hanging-weight System for Isolated Renal Artery Occlusion

Användning av en hängande vikt System för isolerade Renal artärocklusion

In hospitalized patients, over 50% of cases of acute kidney injury (AKI) are caused by renal ischemia 1-3. A recent study of hospitalized patients ...

Mouse Model of Middle Cerebral Artery Occlusion

Musmodell av Middle Cerebral artärocklusion

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the ...

Modified Technique for Coronary Artery Ligation in Mice

Ändrad Teknik för kransartärligering hos möss

Myocardial infarction (MI) is one of the most important causes of mortality in humans1-3. In order to improve morbidity and mortality in patients with MI ...

Assessment of Vascular Function in Patients With Chronic Kidney Disease

Bedömning av kärlfunktionen hos patienter med kronisk njursjukdom

Patients with chronic kidney disease (CKD) have significantly increased risk of cardiovascular disease (CVD) compared to the general population, and this ...

Renal Ischaemia Reperfusion Injury: A Mouse Model of Injury and Regeneration

Renal Ischemi Reperfusionsskada: En musmodell av skada och Regeneration

Renal ischaemia reperfusion injury (IRI) is a common cause of acute kidney injury (AKI) in patients and occlusion of renal blood flow is unavoidable ...

Murine Kidney Transplant Technique

Murin njurtransplantation Teknik

The first mouse kidney transplant technique was published in 19731 by the Russell laboratory. Although it took some years for other labs to become ...

Mouse Model for Pancreas Transplantation Using a Modified Cuff Technique

Musmodell för bukspottkörteln Transplantation med en modifierad manschetten teknik

Mouse models have several advantages in transplantation research, including easy handling, a variety of genetically well-defined strains, and the ...

Assessment of Kidney Function in Mouse Models of Glomerular Disease

Bedömning av njurfunktion i musmodeller av glomerulär sjukdom

The use of murine models to mimic human kidney disease is becoming increasingly common. Our research is focused on the assessment of glomerular function ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Isometrisk kontraktilitet mätning av mus mesenterica artär med Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

An Efficient Sieving Method to Isolate Intact Glomeruli from Adult Rat Kidney

En effektiv siktning metod att isolera intakt Glomeruli från vuxen råtta njure

Preservation of glomerular structure and function is pivotal in the prevention of glomerulonephritis, a category of kidney disease characterized by ...