Name: a planarian motility assay to gauge the biomodulating properties of natural products
Uploaded: 2020-05-30T14:00:00
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लेखक संस्थागत उन्नति के कार्यालय को स्वीकार करना चाहते हैं, और इस काम का समर्थन करने के लिए एक प्रकाशन अनुदान के लिए मॉरिसविले कॉलेज फाउंडेशन, साथ ही साथ SUNY मॉरिसविले कॉलेजिएट साइंस एंड टेक्नोलॉजी एंट्री प्रोग्राम (सीएसटीईपी) को उनकी चल रही सहायता और SUNY मॉरिसविले में स्नातक अनुसंधान के समर्थन के लिए। हम वर्णित तकनीक पर उपयोगी टिप्पणियों के लिए सोफिया हचेन्स को भी धन्यवाद देना चाहते हैं।

1. प्लानेरियन पशुपालन
<ol><li>यदि आवश्यक हो तो जैविक आपूर्ति कंपनी या जंगली-पकड़े गए से खरीदे गए प्लानरियंस का उपयोग करें। इस प्रोटोकॉल में उपयोग किए जाने वाले प्लैनेरियन डुगेसिया टिग्रिनाहैं, जैसा कि ...

<ol>
	<li>Moustakas, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guarana+provides+additional+stimulation+over+caffeine+alone+in+the+planarian+model.">Guarana provides additional stimulation over caffeine alone in the planarian model.</a> PloS One. 10 (4), 0123310 (2015).</li><li>Raffa, R. B., Valdez, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cocaine+withdrawal+in+Planaria.">Cocaine withdrawal in Planaria.</a> European Journal of Pharmacology. 430 (1), 143-145 (2001).</li><li>Raffa, R. B., Holland, L. J., Schulingkamp, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+assessment+of+dopamine+D2+antagonist+activity+using+invertebrate+(Planaria)+locomotion+as+a+functional+endpoint.">Quantitative assessment of dopamine D2 antagonist activity using invertebrate (Planaria) locomotion as a functional endpoint.</a> Journal of Pharmacology and Toxicological Methods. 45 (3), 223-226 (2001).</li><li>Thum&#233;, I. S., Frizzo, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sertraline+induces+toxicity+and+behavioral+alternations+in+planarians.">Sertraline induces toxicity and behavioral alternations in planarians.</a> Biomedical Research International. 2017, 5792621 (2017).</li><li>Aggarwal, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+a+novel+allosteric+modulator+of+the+human+dopamine+transporter.">Identification of a novel allosteric modulator of the human dopamine transporter.</a> ACS Chemical Neuroscience. 10 (8), 3718-3730 (2019).</li><li>Zhang, C., Tallarida, C. S., Raffa, R. B., Rawls, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sucrose+produces+withdrawal+and+dompamine-sensitive+reinforcing+effects+in+planarians.">Sucrose produces withdrawal and dompamine-sensitive reinforcing effects in planarians.</a> Physiology &amp; Behavior. , 8-13 (2013).</li><li>Zewde, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PLDT+(planarian+light/dark+test):+an+invertebrate+assay+to+quantify+defensive+responding+and+study+anxiety-like+effects.">PLDT (planarian light/dark test): an invertebrate assay to quantify defensive responding and study anxiety-like effects.</a> Journal of Neuroscience Methods. 293, 284-288 (2018).</li><li>Risse, B., Otto, N., Berh, D., Jiang, X., Kl&#228;mbt, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FIM+Imaging+and+FIMtrack:+two+new+tools+allowing+high-throughput+and+cost+effective+locomotion+analysis.">FIM Imaging and FIMtrack: two new tools allowing high-throughput and cost effective locomotion analysis.</a> Journal of Visualized Experiments. (94), e52207 (2014).</li><li>Inoue, T., Hoshino, H., Yamashita, T., Shimoyama, S., Agata, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Planarian+shows+decision-making+behavior+in+response+to+multiple+stimuli+by+integrative+brain+function.">Planarian shows decision-making behavior in response to multiple stimuli by integrative brain function.</a> Zoological Letters. 1, 7 (2015).</li><li>Hastrom, D., Cochet-Escartin, O., Zhang, S., Khuu, C., Collins, E. M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Freshwater+planarians+as+an+alternative+animal+model+for+neurotoxicology.">Freshwater planarians as an alternative animal model for neurotoxicology.</a> Toxicological Sciences. 147 (1), 270-285 (2015).</li><li>Risse, B., Berh, D., Otto, N., Kl&#228;mbt, C., Jiang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FIMtrack:+an+open+source+tracking+and+locomotion+analysis+software+for+small+animals.">FIMtrack: an open source tracking and locomotion analysis software for small animals.</a> PLoS One Computational Biology. 13 (5), 100553 (2017).</li><li>Pag&#225;n, O. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Planaria:+an+animal+model+that+integrates+development,+regeneration+and+pharmacology.">Planaria: an animal model that integrates development, regeneration and pharmacology.</a> International Journal of Developmental Biology. 61, 519-529 (2017).</li><li>Palladini, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+pharmacological+study+of+cocaine+activity+in+planaria.">A pharmacological study of cocaine activity in planaria.</a> Comparative Biochemistry and Physiology. 115 (1), 41-45 (1996).</li><li>Buttarelli, F. R., Pellicano, C., Pontieri, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuropharmacology+and+behavior+in+planarians:+translation+to+mammals.">Neuropharmacology and behavior in planarians: translation to mammals.</a> Comparative Biochemistry and Physiology Part C. Toxicology &amp; Pharmacology. 147 (4), 399-408 (2008).</li><li>Nishimura, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+glutamic+acid+decarboxylase+gene+and+distribution+of+GABAergeric+nervous+system+in+the+planarian+Dugesia+japonica.">Identification of glutamic acid decarboxylase gene and distribution of GABAergeric nervous system in the planarian Dugesia japonica.</a> Neuroscience. 153 (4), 1103-1114 (2008).</li><li>Raffa, R. B., Rawls, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> A model for drug action and abuse. , (2008).</li><li>Hall, F., Morita, M., Best, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=neoplastic+transformation+in+the+planarian:+I+cocarcinogenesis+and+histopathology.">neoplastic transformation in the planarian: I cocarcinogenesis and histopathology.</a> The Journal of Experimental Zoology. 240 (2), 211-227 (1986).</li><li>Voura, E. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Planarians+as+models+of+cadmium-induced+neoplasia+provide+measurable+benchmarks+for+mechanistic+studies.">Planarians as models of cadmium-induced neoplasia provide measurable benchmarks for mechanistic studies.</a> Ecotoxicology and Environmental Safety. 142, 544-554 (2017).</li><li>Van Roten, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+carcinogenic+trigger+to+study+the+function+of+tumor+suppressor+genes+in+Schmedtea+mediterranea.">A carcinogenic trigger to study the function of tumor suppressor genes in Schmedtea mediterranea.</a> Disease Models and Mechanisms. 11 (9), 032573 (2018).</li><li>Mason, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemo-klino-kinesis+in+planarian+food+location.">Chemo-klino-kinesis in planarian food location.</a> Animal Behaviour. 23 (2), 460-469 (1975).</li><li>Van Huizen, A. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Weak+magnetic+fields+alter+stem+cell-mediated+growth.">Weak magnetic fields alter stem cell-mediated growth.</a> Science Advances. 5 (1), 7201 (2019).</li><li>Brown, H. M., Ogden, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+electrical+response+of+the+planarian+ocellus.">The electrical response of the planarian ocellus.</a> Journal of General Physiology. 51 (2), 255-260 (1968).</li><li>Inoue, T., Yamashita, T., Agata, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thermosensory+signaling+by+TRPM+is+processed+by+brain+serotonergic+neurons+to+produce+planarian+thermotaxis.">Thermosensory signaling by TRPM is processed by brain serotonergic neurons to produce planarian thermotaxis.</a> The Journal of Neuroscience. 34 (47), 15701-15714 (2014).</li><li>Byrne, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+ethanol+on+negative+phototaxis+and+motility+in+brown+planarians+(Dugesia+tigrina).">Effects of ethanol on negative phototaxis and motility in brown planarians (Dugesia tigrina).</a> Neuroscience Letters. 685, 102-108 (2018).</li><li>de Sousa, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcriptomic+analysis+of+planarians+under+simulated+microgravity+or+8g+demonstrates+that+alteration+of+gravity+induces+genomic+and+cellular+alterations+that+could+facilitate+tumoral+transformation.">Transcriptomic analysis of planarians under simulated microgravity or 8g demonstrates that alteration of gravity induces genomic and cellular alterations that could facilitate tumoral transformation.</a> International Journal of Molecular Sciences. 20 (3), 720 (2019).</li><li>Best, J. B., Rubinstein, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maze+learning+and+associated+behavior+in+planaria.">Maze learning and associated behavior in planaria.</a> Journal of Comparative and Physiological Psychology. 55, 560-566 (1962).</li><li>Shomrat, T., Levin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+automated+training+paradigm+reveals+long-term+memory+in+planarians+and+its+persistence+through+head+regeneration.">An automated training paradigm reveals long-term memory in planarians and its persistence through head regeneration.</a> The Journal Experimental Biology. 216, 3799-3810 (2013).</li><li>Robarts-Galbraith, R. H., Newmark, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+organ+trail:+insights+into+organ+regeneration+in+the+planarian.">On the organ trail: insights into organ regeneration in the planarian.</a> Current Opinion in Genetics &amp; Development. 32, 37-46 (2015).</li><li>Ivancovic, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Model+systems+for+regeneration:+planarians.">Model systems for regeneration: planarians.</a> Development. 146 (17), 167684 (2019).</li><li>Herath, S., Lobo, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cross-inhibition+of+Turing+patterns+explains+the+self-organized+regulatory+mechanism+of+planarian+fission.">Cross-inhibition of Turing patterns explains the self-organized regulatory mechanism of planarian fission.</a> Journal of Theoretical Biology. 485, 110042 (2019).</li><li>Itoh, M. T., Shinozawa, T., Sumi, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circadian+rhythms+of+melatonin-synthesizing+enzyme+activities+and+melatonin+levels+in+planarians.">Circadian rhythms of melatonin-synthesizing enzyme activities and melatonin levels in planarians.</a> Brain Research. 830 (1), 165-173 (1999).</li><li>Itoh, M. T., Igarashi, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circadian+rhythm+of+serotonin+levels+in+planarians.">Circadian rhythm of serotonin levels in planarians.</a> Neuroreports. 11 (3), 473-476 (2000).</li><li>Hinrichsen, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photosensitivity+and+motility+in+planarian+Schmedtea+mediterranea+vary+diurnally.">Photosensitivity and motility in planarian Schmedtea mediterranea vary diurnally.</a> Chronobiology International. 36 (12), 1789-1793 (2019).</li><li>Raffa, R. B., Desai, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Description+and+quantification+of+cocaine+withdrawal+signs+in+planaria.">Description and quantification of cocaine withdrawal signs in planaria.</a> Brain Research. 1032 (1-2), 200-202 (2005).</li><li>Pag&#225;n, O. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+cembranoid+from+tobacco+prevents+the+expression+of+induced+withdrawal+behavior+in+planarian+worms.">A cembranoid from tobacco prevents the expression of induced withdrawal behavior in planarian worms.</a> European Journal of Pharmacology. 615 (1-3), 118-124 (2009).</li><li>Rawls, S. M., Patil, T., Yuvasheva, E., Raffa, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=First+evidence+that+drugs+of+abuse+produce+behavioral+sensitization+and+cross-sensitization+in+planarians.">First evidence that drugs of abuse produce behavioral sensitization and cross-sensitization in planarians.</a> Behavioural Pharmacology. 21 (4), 301-313 (2010).</li><li>Venturini, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+pharmacological+study+of+dopaminergic+receptors+in+planaria.">A pharmacological study of dopaminergic receptors in planaria.</a> Neuropharmacology. 28 (12), 1377-1382 (1989).</li><li>Ouyang, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+effects+of+Spenda,+Equal+and+sucrose:+Clues+from+planarians+on+sweeteners.">Behavioral effects of Spenda, Equal and sucrose: Clues from planarians on sweeteners.</a> Neuroscience Letters. 636, 213-217 (2017).</li><li>Pag&#225;n, O. R., Montgomery, E., Deats, S., Bach, D., Baker, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+of+nicotine-induced,+curare-sensitive,+behavior+in+planarians.">Evidence of nicotine-induced, curare-sensitive, behavior in planarians.</a> Neurochemical Research. 40 (10), 2087-2090 (2015).</li><li>Shibata, N., Agata, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RNA+interference+in+planarians:+feeding+and+injection+of+synthetic+dsRNA.">RNA interference in planarians: feeding and injection of synthetic dsRNA.</a> Methods in Molecular Biology. 1774, 455-466 (2018).</li><li>Pag&#225;n, O. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversal+of+cocaine-induced+planarian+behavior+by+parthenolide+and+related+sesquiterpene+lactones.">Reversal of cocaine-induced planarian behavior by parthenolide and related sesquiterpene lactones.</a> Pharmacology Biochemistry and Behavior. 89 (2), 160-170 (2008).</li><li>Vouga, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stereochemistry+and+neuropharmacology+of+a+'bath+salt'+cathinone:+S-enantiomer+of+mephedrone+reduces+cocaine-induced+reward+and+withdrawal+in+invertebrates.">Stereochemistry and neuropharmacology of a 'bath salt' cathinone: S-enantiomer of mephedrone reduces cocaine-induced reward and withdrawal in invertebrates.</a> Neuropharmacology. 91, 109-116 (2015).</li><li>Chan, J. D., Marchant, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacological+and+functional+genetic+assays+to+manipulate+regeneration+of+the+planarian+Dugesia+japonica.">Pharmacological and functional genetic assays to manipulate regeneration of the planarian Dugesia japonica.</a> Journal of Visualized Experiments. (54), e3058 (2011).</li></ol>

प्राकृतिक उत्पादों के उत्तेजक और वापसी प्रभावों को निर्धारित करने के लिए एक सीधा और सुलभ प्लैनेरियन गतिशीलता परख का वर्णन किया गया है। एक व्यवहार मॉडल के रूप में विभिन्न प्रयोगकर्ताओं के बीच टिप्पणि...

वर्णित प्रोटोकॉल प्राकृतिक पदार्थों के जैव-गतिशीलता का आकलन करने का साधन प्रदान करने के लिए प्लैनेरियन मोटिविटी का उपयोग करता है। यह विशेष रूप से यह निर्धारित करने के लिए अनुकूलित किया गया था कि क्या ये पदार्थ उत्तेजक के रूप में कार्य करते हैं, और यदि वे तब एक औसत दर्जे का निकासी व्यवहार 1 से जुड़ेथे। इस परख, जिसे प्लानेरियन लोकोमोटर वेग (पीएलएमवी) परीक्षण के रूप में जाना जाता है, का उपयोग सबसे पहले ज्ञात औषधीयएजेंटों 2, 3,का परीक्षण करने के लिए कियाजाताथा। इस प्लैनेरियन मोटिवेशन आधारित परख के आवेदन की लोकप्रियता बढ़ी है और इसे प्राकृतिक उत्पादों के अलावा अन्य पदार्थों में रुचि रखने वाली विभिन्न प्रयोगशालाओं द्वारा अपनाया गया है4,,5। इस परख के लिए, एक प्लैनेरियन को एक पेट्री डिश में रखा जाता है जिसमें स्प्रिंग वॉटर या स्प्रिंग वॉटर होता है जिसमें घुले हुए बायोमॉडुलेटर होते हैं । क्योंकि पकवान ही ग्राफ कागज पर रखा गया है, ग्रिड लाइनों की संख्या समय के साथ जानवर द्वारा पार के रूप में यह कंटेनर के बारे में चलता है प्रत्येक हालत में आंदोलन की दर निर्धारित करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है । प्रकाश/अंधेरे परीक्षण, अन्यथा वातानुकूलित स्थान वरीयता परीक्षण (सीपीपी) के रूप में जाना जाता है, प्लानेरियन गतिशीलता की निगरानी के विषय पर एक और भिन्नता है, और आकलन करता है कि जानवर कितनी जल्दी प्रतिक्रिया देते हैं और एक अंधेरे वातावरण में स्थानांतरित हो जाते हैं6,,7। कंप्यूटर प्रोग्राम और सेंटर ऑफ मास (कॉम) ट्रैकिंग 8 ,,9,,10, 11का उपयोग करके प्लैनेरियन आंदोलनों की वीडियो ट्रैकिंग का विश्लेषण भी किया जासकताहै।8,
इस तरह के अध्ययनों के लिए एक पशु मॉडल के रूप में प्लैनेरियन का उपयोग करना अन्य जानवरों पर कई फायदे प्रदान करता है जिसमें प्रयोगकर्ता आसानी से परख वातावरण को नियंत्रित कर सकता है। विशेष रूप से, प्रयोग से पहले प्लैनेरियन भूखे अन्य पोषण या औषधीय एजेंटों के संपर्क को रोक सकते हैं जो अन्यथा परिणामों को चकित कर सकते हैं, और जांच के तहत विशिष्ट बायोमॉडुलेटर को सीधे संस्कृति के पानी में जोड़कर प्लैनेरियन से पेश किया जा सकता है, जिससे एक्सपोजर का मानकीकरण हो सकता है। चूंकि प्लैनेरियन में तंत्रिका तंत्र और न्यूरोट्रांसमीटर होते हैं जो 'उच्च-क्रम' जानवरों की याद ताजा करते हैं, इसलिए इन जानवरों की फिजियोलॉजी और प्रयोगात्मक प्रतिक्रियाओं को न्यूरोमस्कुलर उत्तेजनाओं के लिए जैविक रूप से अन्य जीवों12,13, 14,,15, 16,के लिए प्रासंगिक मानाजाताहै।,14, इसके अलावा, क्योंकि प्लैनेरियन प्रयोगशाला में बनाए रखने के लिए अपेक्षाकृत सस्ती और सरल हैं, वे कई जांचकर्ताओं के लिए एक सुलभ जैविक मॉडल प्रदान करते हैं।
एक प्रयोगात्मक जानवर के रूप में, प्लैनेरियन अध्ययन की एक विस्तृत श्रृंखला के लिए उपयुक्त हैं। उदाहरण के लिए, हमारा समूह, साथ ही अन्य जांचकर्ता ट्यूमरजीनेसिस17, 18,,19का अध्ययन करने के लिए प्लैनेरियन का उपयोगकरते19हैं। प्लानेरियन रासायनिक, थर्मल, गुरुत्वाकर्षण, विद्युत, फोटो और चुंबकीय उत्तेजनाओं के लिए कई प्रतिक्रिया व्यवहार भी प्रदर्शित करते हैं जिन्होंने अन्य परख प्रणालियों का आधार बनाया है। इनमें से कुछ प्रभावों का उपयोग इन जंतुओं में सीखने और स्मृति का अध्ययन करने के लिए किया गया है ,20,21,22,23,24,25,26,27. वर्तमान में साहित्य में प्लानेरियन मॉडल का प्राथमिक उपयोग प्लैनेरियन प्लेरिपोटेंट स्टेम सेल की गतिविधि पर केंद्रित है, जिसे नियोब्लास्ट कहा जाता है, और28,29,,30के उत्थान में उनकी भूमिका।, इस प्रकार, यहां वर्णित मॉडल को अपनाने से अन्य प्लैनेरियन-आधारित परख का उपयोग करके आगे के अध्ययन की अनुमति दी गई है ताकि प्राकृतिक उत्पादों और अन्य बायोमोडुलेटर्स जीव को प्रभावित करने के तरीके की व्यापक समझ प्रदान की जा सके।

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Bottled Water - 1 Gal.</td>
			<td>Poland Spring</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Spring water for planarian culture and to prepare solutions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brown Planaria (Dugesia tigrina)</td>
			<td>Carolina Biological Supply Company</td>
			<td>132954</td>
			<td>Brown planaria living (other species are acceptable)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flat Paintbrush</td>
			<td>Royal Crafter&#39;s Choice</td>
			<td>9159</td>
			<td>Flat watercolor paintbrushes for cleaning planarian culture containers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Petri Dish - 10 cm</td>
			<td>Kimax</td>
			<td>N/A</td>
			<td>10 cm diameter (glass) Petri dishes for pLmV assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Petri Dish - 5 cm</td>
			<td>Kimax</td>
			<td>N/A</td>
			<td>5 cm and Petri dishes for rinsing planarians during withdrawal experiments and for stimulant habituation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Grid Paper</td>
			<td>Any</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Standard 0.5 cm grid paper for pLmV assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>iPEVO Visualizer (software)</td>
			<td>iPEVO</td>
			<td>https://www.ipevo.com/software/visualizer</td>
			<td>Document camera software for video capture and recording</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metalware Set with Support Stand and Retort Ring</td>
			<td>Any</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Standard chemistry lab ring stand to hold a cell phone camera if used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Organic Egg</td>
			<td>Any</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Organic egg or beef liver for feeding planarains</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polycarbonate Bottle w/ Screw-on Cap - 10 mL</td>
			<td>Beckman</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Plastic vials to hold 5 to 10 mL volumes for stimulant habituation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Round Storage Container - 10 cm</td>
			<td>Ziploc</td>
			<td>N/A</td>
			<td>10 cm Round food storage containers for approximately 90 planarians or fewer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Round Water Paint Brush</td>
			<td>LOEW-Cornell</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Small round watercolor paint brushes (numbers 3 to 6) - soft</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transfer Pipette</td>
			<td>Any</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Wide bore (5 mL) plastic transfer pipettes to move planarians</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>USB Document Camera</td>
			<td>iPEVO</td>
			<td>CDVU-06IP</td>
			<td>Document camera (or other camera or cell phone camera)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a planarian motility assay to gauge the biomodulating properties of natural products

प्राकृतिक उत्पादों के उत्तेजक और निकासी गुणों का अध्ययन करने के लिए गैर-परजीवी प्लैनेरियन, डुगेसिया टिग्रिना,एक मुक्त रहने वाले जलीय फ्लैटवार्म का उपयोग करने का एक सीधा, नियंत्रणीय साधन वर्णित है। प्लैनेरियन फिजियोलॉजी के अनूठे पहलुओं से लाभान्वित होने वाले प्रायोगिक परख को घाव भरने, उत्थान और ट्यूमरजीनेसिस पर अध्ययन करने के लिए लागू किया गया है। इसके अलावा, क्योंकि planarians पर्यावरण उत्तेजनाओं की एक किस्म के प्रति संवेदनशीलता का प्रदर्शन और सीखने और वातानुकूलित प्रतिक्रियाओं के विकास में सक्षम हैं, वे व्यवहार सीखने और स्मृति की जांच अध्ययन में इस्तेमाल किया जा सकता है । प्लैनेरियन के पास एक बुनियादी द्विपक्षीय समरूपता और एक केंद्रीय तंत्रिका तंत्र होता है जो न्यूरोमस्कुलर बायोमोडुलेटर के प्रभावों की जांच करने वाले अध्ययनों के लिए उत्तरदायी न्यूरोट्रांसमीटर सिस्टम का उपयोग करता है। नतीजतन, पदार्थ की लत और वापसी की जांच करने के लिए प्लैनेरियन आंदोलन और गतिशीलता की निगरानी करने वाली प्रायोगिक प्रणालियां विकसित की गई हैं । चूंकि प्लैनेरियन मोटिविटी उत्तेजनाओं के प्रभाव की निगरानी करने के लिए एक संवेदनशील, आसानी से मानकीकृत गतिशीलता परख प्रणाली की क्षमता प्रदान करती है, इसलिए प्लैनेरियन लोकोमोटर वेग (पीएलएमवी) परीक्षण को समय के साथ जानवरों द्वारा पार की गई ग्रिड लाइनों की संख्या के निर्धारण के माध्यम से प्लानेरियन द्वारा उत्तेजना और निकासी व्यवहार दोनों की निगरानी के लिए अनुकूलित किया गया था। यहां तकनीक और उसके आवेदन का प्रदर्शन कर के समझाया जाता है।

प्रयोगशाला की स्थापना और pLmV परख चलाने के लिए कार्यक्षेत्र की तैयारी प्रयोग शुरू होने से पहले पूरा किया जाना चाहिए । इसमें आदत कंटेनर की तैयारी, जरूरत पड़ने पर कंटेनर कुल्ला (वापसी प्रयोगों के लिए), टुकड?...

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A Planarian Motility Assay to Gauge the Biomodulating Properties of Natural Products

अकेले वसंत पानी में जानवरों के आंदोलन की तुलना में प्राकृतिक उत्पादों के उत्तेजक और निकासी गुणों को मापने के लिए प्लैनेरियन मोटिविटी का उपयोग किया जाता है।

प्राकृतिक उत्पादों के बायोमोड्यूलिंग गुणों को मापने के लिए एक प्लैनेरियन मोटिविटी परख

A straightforward, controllable means of using the non-parasitic planarian, Dugesia tigrina, a free-living aquatic flatworm, to study the stimulant and ...

प्लानेरियन लोकोमोटर वेग टेस्ट विभिन्न जैविक संशोधित एजेंटों के लिए उत्तेजक और संभावित निकासी प्रभावों का जल्दी से आकलन करने का एक साधन है जो गतिशीलता को प्रभावित कर सकता है। यह निबंध आसानी से नियंत्रित किया जाता है और यहां तक कि सबसे बुनियादी शोध सेटिंग्स में विश्वसनीय व्यवहार डेटा उत्पन्न करने के लिए एक सीधी और सुलभ विधि प्रदान करता है। चूंकि प्लैनेरियन तंत्रिका तंत्र में एक केंद्रीकृत प्रारंभिक मस्तिष्क, एक द्विपक्षीय समरूपता और अनुरूप न्यूरोट्रांसमीटर सिस्टम होता है, इसलिए इन जीवों का उपयोग करके व्यवहार अध्ययन संभावित कशेरुकी प्रतिक्रियाओं में प्रीक्लीनिकल अंतर्दृष्टि प्रदान करते हैं।प्रयोगों को संबंधित जैविक तंत्र में अंतर्दृष्टि प्रदान करने के लिए शारीरिक मार्ग संशोधक, दवाओं या यहां तक कि आनुवंशिक रूप से संशोधित प्लैनेरियन से और अधिक प्रभावित किया जा सकता है। प्लानेरियन होना महत्वपूर्ण है ताकि कंटेनरों के बीच स्थानांतरण उन पर जोर न दें और प्रयोगशाला सदस्यों के बीच ग्रिड लाइन घटता को मानकीकृत करें। सबसे अच्छा तरीका है इस व्यवहार निबंध प्रयोग से लगातार परिणाम प्राप्त करने के लिए, कैसे अनुभवी उपयोगकर्ताओं को उन्हें प्रदर्शन देखकर है.एक प्लैनेरियन संस्कृति स्थापित करने के बाद, एक से दो घंटे के लिए कटे कार्बनिक उबले अंडे या मिश्रित कार्बनिक बीफ जिगर के सप्ताह के शेड्यूल में नियमित रूप से दो बार कीड़े विज्ञापन लिबिटम को खिलाएं। खिलाने के बाद, कंटेनर से किसी भी गंदे पानी को हटा दें और किसी भी खाद्य मलबे और कीचड़ को एक कागज तौलिया में कंटेनर का पालन करने के लिए स्थानांतरित करने के लिए एक फ्लैट वाटरकलर पेंट ब्रश का उपयोग करें। प्लैनेरियन को उखाड़ फेंकने और कीड़े को एक साफ कंटेनर में decamp करने के लिए ताजा वसंत पानी और कोमल घूमता या आंदोलन का उपयोग करें।नए पकवान में अपने स्थानांतरण की सुविधा के लिए और ध्यान से हस्तांतरण पानी को कम करने के लिए पुराने कंटेनर का पालन शेष किसी भी planarians के तहत एक व्यापक बोर Pipette टिप स्लाइड । फिर, नए कंटेनर में प्लैनेरियन को ताजे झरने के पानी से ढक दें। प्लैनेरियन लोकोमोटर वेग टेस्ट करने के लिए, सबसे पहले यह सुनिश्चित करें कि पांच से 10 दिनों के भूखे प्लैनियन पूरी तरह से पूर्ण और वर्णक सिर और पूंछ के साथ बनते हैं।यदि planarians तैयार कर रहे है जगह एक साफ 10 सेंटीमीटर व्यास पेट्री पकवान पूर्व के एक टुकड़े पर-टुकड़े ग्रिड कागज के एक टुकड़े पर ०.५ सेंटीमीटर वर्ग प्रति प्रयोगात्मक समूह के साथ और नियंत्रण समूह या वसंत पानी के 20 मिलीलीटर प्राकृतिक उत्पाद की उचित एकाग्रता युक्त के लिए 20 मिलीलीटर जोड़ें प्रत्येक पकवान के लिए परीक्षण किया जा रहा है । तैयार लोकोमोटर वेग उत्तेजना पकवान के ऊपर एक कैमरा स्थिति और एक उचित आकार की आदत कंटेनर के लिए प्रयोगात्मक यौगिक की उचित एकाग्रता युक्त मिलावटी वसंत पानी या वसंत पानी के पांच से 10 मिलीलीटर जोड़ें । इसके बाद, संस्कृति कंटेनर से एक प्लैनेरियन को तैयार आदत कंटेनर में धीरे-धीरे स्थानांतरित करने के लिए एक छोटे से साफ पानी के रंग के पेंट ब्रश का उपयोग करें और प्लैनेरियन को दो मिनट के लिए कंटेनर में समाधान की आदत बनाने की अनुमति दें।अनुसंधान प्लैनेरियन ब्रश पर स्थानांतरित करने के लिए और ध्यान से उन्हें मजबूर किए बिना जानवरों को उठाने के लिए अनुमति देगा। आदत अवधि के अंत में, ब्रश का उपयोग सावधानीपूर्वक तैयार लोकोमोटर वेग उत्तेजना पकवान के केंद्र में प्लैनेरियन को स्थानांतरित करने के लिए करें जिसमें आदत कंटेनर के समान समाधान होता है और कैमरा प्लानेरियन के आंदोलन के 10 से 11 मिनट रिकॉर्ड करने के लिए शुरू होता है। आदत अवधि के अंत में वापसी के प्रभावों का परीक्षण करने के लिए, केवल वसंत पानी युक्त पांच सेंटीमीटर पकवान में प्लैनेरियन कुल्ला।ताजे वसंत पानी वाले तैयार लोकोमोटर वेग डिश के केंद्र में कीड़ा स्थानांतरित करने से पहले और 10 से 11 मिनट के आंदोलन को रिकॉर्ड करने के लिए कैमरा शुरू करें। कैमरा सेटअप प्लानेरियन और ग्रिड पेपर के स्पष्ट दृश्य की अनुमति देता है और प्रयोग की अवधि के लिए जानवर की प्रगति का सटीक आकलन करने की अनुमति देता है। डेटा संग्रह में ग्रिड लाइनों की कुल संख्या के साथ-साथ प्रयोग के प्रति मिनट पार की गई लाइनों की संचयी कुल संख्या शामिल होनी चाहिए ।प्रत्येक परीक्षण से परिणामों को मानकीकृत करने के लिए, प्लानेरियन लोकोमोटर वेग रन की गणना की जा सकती है और साजिश रची जा सकती है क्योंकि बक्से की संख्या मिलान नियंत्रण कीड़ा की प्रगति के सापेक्ष पार हो गई है। एक बेंचमार्क के रूप में, वसंत पानी में प्लैनेरियन आमतौर पर तीन मिनट में लगभग 25 बक्से को कवर करते हैं। ब्याज के परीक्षण यौगिकों के जवाब में प्लैनेरियन गतिशीलता निर्धारित करने के लिए परीक्षण अभिकर्षक सांद्रता की एक श्रृंखला की जांच की जा सकती है।जैव मॉड्यूलिंग उत्पाद की जांच किए जाने के बाद वसंत जल नियंत्रण के सापेक्ष वसंत जल में पार की गई ग्रिड लाइनों की संख्या को निर्धारित करके निकासी डेटा का आकलन किया जा सकता है । स्प्रिंग वॉटर कंट्रोल प्लानेरियन प्रयोग की अवधि के लिए ग्रिड लाइनों पर चलते हैं। कई बार हालांकि, परीक्षण प्लानरियंस व्यवहार के साथ निबंध के दौरान ग्रिड लाइनों को पार करना बंद कर देते हैं जो उत्पाद का परीक्षण करने के लिए विशेषता हैं।इससे पता चलता है कि विश्लेषण की एक अलग विधि की आवश्यकता हो सकती है। इस तरह के उदाहरणों को ट्रैक किया जा सकता है और डेटा को एक विशेष अभिकर्चि एकाग्रता के संपर्क में आने वाले जानवरों की कुल संख्या के प्रतिशत के रूप में चित्रित किया जा सकता है। प्लैनेरियन को संभालना आवश्यक है ताकि व्यंजनों के बीच स्थानांतरण के दौरान उन्हें नुकसान न पहुंचे।एक प्राकृतिक उत्पाद की विभिन्न सांद्रता के प्रभावों का निर्धारण करने के बाद, प्रारंभिक परिणामों में किसी भी गतिशील परिवर्तन का निरीक्षण करने के लिए जैविक मार्ग संशोधक जोड़ा जा सकता है। ज्ञात औषधीय एजेंटों का उपयोग करके उत्तेजना और वापसी के लिए परीक्षण करने के लिए प्लानेरियन लोकोमोटर वेग टेस्ट का उपयोग किया गया था। हमने प्राकृतिक उत्पादों के साथ इन अवधारणाओं का अध्ययन करने के लिए प्रणाली को अनुकूलित किया।

Research

JoVE Journal

Biochemistry

A Rapid Laser Probing Method Facilitates the Non-invasive and Contact-free Determination of Leaf Thermal Properties

एक रैपिड लेजर जांच विधि पत्ता तापीय गुणों की गैर-आक्रामक और संपर्क मुक्त निर्धारण की सुविधा

Plants can produce valuable substances such as secondary metabolites and recombinant proteins. The purification of the latter from plant biomass can be ...

Preparation of Giant Vesicles Encapsulating Microspheres by Centrifugation of a Water-in-oil Emulsion

एक पानी में तेल पायस की centrifugation द्वारा विशालकाय Vesicles encapsulating microspheres की तैयारी

The constructive biology and the synthetic biology approach to creating artificial life involve the bottom-up assembly of biological or nonbiological ...

Assay for Phosphorylation and Microtubule Binding Along with Localization of Tau Protein in Colorectal Cancer Cells

फास्फारिलीकरण के लिए परख और कोलोरेक्टल कैंसर की कोशिकाओं में ताऊ प्रोटीन के स्थानीयकरण के साथ बाध्यकारी Microtubule

The microtubule-associated protein tau is a neuronal protein that localizes mostly in axons. Generally tau is essential for normal neuronal functioning ...

A High-Throughput Luciferase Assay to Evaluate Proteolysis of the Single-Turnover Protease PCSK9

एक उच्च प्रवाह Luciferase परख के प्रोटियोलिसिस का मूल्यांकन करने के लिए एकल कारोबार छेड़ने PCSK9

Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 (PCSK9) is a single-turnover protease which regulates serum low-density lipoprotein (LDL) levels and, ...

A Customizable Approach for the Enzymatic Production and Purification of Diterpenoid Natural Products

एंजाइमी उत्पादन और Diterpenoid प्राकृतिक उत्पादों के शोधन के लिए एक अनुकूलन दृष्टिकोण

Diterpenoids form a diverse class of small molecule natural products that are widely distributed across the kingdoms of life and have critical biological ...

A Semi-High-Throughput Adaptation of the NADH-Coupled ATPase Assay for Screening Small Molecule Inhibitors

स्क्रीनिंग छोटे अणु अवरोधकों के लिए NADH-युग्मित ATPase परख के एक अर्द्ध उच्च Throughput अनुकूलन

ATPase enzymes utilize the free energy stored in adenosine triphosphate to catalyze a wide variety of endergonic biochemical processes in vivo that would ...

Labelling and Visualization of Mitochondrial Genome Expression Products in Baker's Yeast Saccharomyces cerevisiae

Labelling and Visualization of Mitochondrial Genome Expression Products in Baker's Yeast Saccharomyces cerevisiae

बेकर के खमीर सैचरोमाइसेस सेरेविसिया में माइटोकॉन्ड्रियल जीनोम अभिव्यक्ति उत्पादों की लेबलिंग और विज़ुअलाइज़ेशन

Mitochondria are essential organelles of eukaryotic cells capable of aerobic respiration. They contain circular genome and gene expression apparatus. A ...

Motility of Single Molecules and Clusters of Bi-Directional Kinesin-5 Cin8 Purified from S. cerevisiae Cells

Motility of Single Molecules and Clusters of Bi-Directional Kinesin-5 Cin8 Purified from S. cerevisiae Cells

एकल अणुओं की गतिशीलता और द्वि-दिशात्मक किनेसिन -5 Cin8 के समूहों को एस सेरेविसिया कोशिकाओं से शुद्ध किया गया

The mitotic bipolar kinesin-5 motors perform essential functions in spindle dynamics. These motors exhibit a homo-tetrameric structure with two pairs of ...

Reconstitution of Septin Assembly at Membranes to Study Biophysical Properties and Functions

बायोफिजिकल गुणों और कार्यों का अध्ययन करने के लिए झिल्ली में सेप्टिन असेंबली का पुनर्गठन

Most cells can sense and change their shape to carry out fundamental cell processes. In many eukaryotes, the septin cytoskeleton is an integral component ...

Shotgun Lipidomics of Rodent Tissues

कृंतक ऊतकों के शॉटगन लिपिडोमिक्स

Lipids play a vital role as essential components of all prokaryotic and eukaryotic cells. Constant technological improvements in mass spectrometry have ...