Name: a planarian motility assay to gauge the biomodulating properties of natural products
Uploaded: 2020-05-30T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Planarian Motility Assay to Gauge the Biomodulating Properties of Natural Products at JoVE.com

저자는 기관 발전의 사무실을 인정하고자, 이 작업을 지원하기 위해 출판 보조금모리스빌 대학 재단뿐만 아니라 SUNY 모리스빌대학에서 학부 연구의 지속적인 지원과 지원을 위한 SUNY 모리스빌 대학 과학 기술 입학 프로그램 (CSTEP). 우리는 또한 설명 된 기술에 대한 유용한 의견에 대한 소피아 허첸스에게 감사드립니다.

1. 플래너리안 축산
<ol><li>생물학적 공급 회사에서 구입한 평면인을 사용하거나 필요한 경우 야생에서 잡힐 수 있습니다. 이 프로토콜에 사용되는 플래니언은 공급 목록에 나열된 두게시아 티그리나입니다. 이 종은 지라디아 티그리나(31)라고도합니다. 다른 수중 평면 종도 허용2,,3. 참고: 설명된 프로토콜은 생물학적 ...

<ol>
	<li>Moustakas, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guarana+provides+additional+stimulation+over+caffeine+alone+in+the+planarian+model.">Guarana provides additional stimulation over caffeine alone in the planarian model.</a> PloS One. 10 (4), 0123310 (2015).</li><li>Raffa, R. B., Valdez, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cocaine+withdrawal+in+Planaria.">Cocaine withdrawal in Planaria.</a> European Journal of Pharmacology. 430 (1), 143-145 (2001).</li><li>Raffa, R. B., Holland, L. J., Schulingkamp, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+assessment+of+dopamine+D2+antagonist+activity+using+invertebrate+(Planaria)+locomotion+as+a+functional+endpoint.">Quantitative assessment of dopamine D2 antagonist activity using invertebrate (Planaria) locomotion as a functional endpoint.</a> Journal of Pharmacology and Toxicological Methods. 45 (3), 223-226 (2001).</li><li>Thum&#233;, I. S., Frizzo, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sertraline+induces+toxicity+and+behavioral+alternations+in+planarians.">Sertraline induces toxicity and behavioral alternations in planarians.</a> Biomedical Research International. 2017, 5792621 (2017).</li><li>Aggarwal, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+a+novel+allosteric+modulator+of+the+human+dopamine+transporter.">Identification of a novel allosteric modulator of the human dopamine transporter.</a> ACS Chemical Neuroscience. 10 (8), 3718-3730 (2019).</li><li>Zhang, C., Tallarida, C. S., Raffa, R. B., Rawls, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sucrose+produces+withdrawal+and+dompamine-sensitive+reinforcing+effects+in+planarians.">Sucrose produces withdrawal and dompamine-sensitive reinforcing effects in planarians.</a> Physiology &amp; Behavior. , 8-13 (2013).</li><li>Zewde, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PLDT+(planarian+light/dark+test):+an+invertebrate+assay+to+quantify+defensive+responding+and+study+anxiety-like+effects.">PLDT (planarian light/dark test): an invertebrate assay to quantify defensive responding and study anxiety-like effects.</a> Journal of Neuroscience Methods. 293, 284-288 (2018).</li><li>Risse, B., Otto, N., Berh, D., Jiang, X., Kl&#228;mbt, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FIM+Imaging+and+FIMtrack:+two+new+tools+allowing+high-throughput+and+cost+effective+locomotion+analysis.">FIM Imaging and FIMtrack: two new tools allowing high-throughput and cost effective locomotion analysis.</a> Journal of Visualized Experiments. (94), e52207 (2014).</li><li>Inoue, T., Hoshino, H., Yamashita, T., Shimoyama, S., Agata, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Planarian+shows+decision-making+behavior+in+response+to+multiple+stimuli+by+integrative+brain+function.">Planarian shows decision-making behavior in response to multiple stimuli by integrative brain function.</a> Zoological Letters. 1, 7 (2015).</li><li>Hastrom, D., Cochet-Escartin, O., Zhang, S., Khuu, C., Collins, E. M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Freshwater+planarians+as+an+alternative+animal+model+for+neurotoxicology.">Freshwater planarians as an alternative animal model for neurotoxicology.</a> Toxicological Sciences. 147 (1), 270-285 (2015).</li><li>Risse, B., Berh, D., Otto, N., Kl&#228;mbt, C., Jiang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FIMtrack:+an+open+source+tracking+and+locomotion+analysis+software+for+small+animals.">FIMtrack: an open source tracking and locomotion analysis software for small animals.</a> PLoS One Computational Biology. 13 (5), 100553 (2017).</li><li>Pag&#225;n, O. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Planaria:+an+animal+model+that+integrates+development,+regeneration+and+pharmacology.">Planaria: an animal model that integrates development, regeneration and pharmacology.</a> International Journal of Developmental Biology. 61, 519-529 (2017).</li><li>Palladini, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+pharmacological+study+of+cocaine+activity+in+planaria.">A pharmacological study of cocaine activity in planaria.</a> Comparative Biochemistry and Physiology. 115 (1), 41-45 (1996).</li><li>Buttarelli, F. R., Pellicano, C., Pontieri, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuropharmacology+and+behavior+in+planarians:+translation+to+mammals.">Neuropharmacology and behavior in planarians: translation to mammals.</a> Comparative Biochemistry and Physiology Part C. Toxicology &amp; Pharmacology. 147 (4), 399-408 (2008).</li><li>Nishimura, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+glutamic+acid+decarboxylase+gene+and+distribution+of+GABAergeric+nervous+system+in+the+planarian+Dugesia+japonica.">Identification of glutamic acid decarboxylase gene and distribution of GABAergeric nervous system in the planarian Dugesia japonica.</a> Neuroscience. 153 (4), 1103-1114 (2008).</li><li>Raffa, R. B., Rawls, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> A model for drug action and abuse. , (2008).</li><li>Hall, F., Morita, M., Best, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=neoplastic+transformation+in+the+planarian:+I+cocarcinogenesis+and+histopathology.">neoplastic transformation in the planarian: I cocarcinogenesis and histopathology.</a> The Journal of Experimental Zoology. 240 (2), 211-227 (1986).</li><li>Voura, E. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Planarians+as+models+of+cadmium-induced+neoplasia+provide+measurable+benchmarks+for+mechanistic+studies.">Planarians as models of cadmium-induced neoplasia provide measurable benchmarks for mechanistic studies.</a> Ecotoxicology and Environmental Safety. 142, 544-554 (2017).</li><li>Van Roten, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+carcinogenic+trigger+to+study+the+function+of+tumor+suppressor+genes+in+Schmedtea+mediterranea.">A carcinogenic trigger to study the function of tumor suppressor genes in Schmedtea mediterranea.</a> Disease Models and Mechanisms. 11 (9), 032573 (2018).</li><li>Mason, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemo-klino-kinesis+in+planarian+food+location.">Chemo-klino-kinesis in planarian food location.</a> Animal Behaviour. 23 (2), 460-469 (1975).</li><li>Van Huizen, A. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Weak+magnetic+fields+alter+stem+cell-mediated+growth.">Weak magnetic fields alter stem cell-mediated growth.</a> Science Advances. 5 (1), 7201 (2019).</li><li>Brown, H. M., Ogden, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+electrical+response+of+the+planarian+ocellus.">The electrical response of the planarian ocellus.</a> Journal of General Physiology. 51 (2), 255-260 (1968).</li><li>Inoue, T., Yamashita, T., Agata, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thermosensory+signaling+by+TRPM+is+processed+by+brain+serotonergic+neurons+to+produce+planarian+thermotaxis.">Thermosensory signaling by TRPM is processed by brain serotonergic neurons to produce planarian thermotaxis.</a> The Journal of Neuroscience. 34 (47), 15701-15714 (2014).</li><li>Byrne, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+ethanol+on+negative+phototaxis+and+motility+in+brown+planarians+(Dugesia+tigrina).">Effects of ethanol on negative phototaxis and motility in brown planarians (Dugesia tigrina).</a> Neuroscience Letters. 685, 102-108 (2018).</li><li>de Sousa, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcriptomic+analysis+of+planarians+under+simulated+microgravity+or+8g+demonstrates+that+alteration+of+gravity+induces+genomic+and+cellular+alterations+that+could+facilitate+tumoral+transformation.">Transcriptomic analysis of planarians under simulated microgravity or 8g demonstrates that alteration of gravity induces genomic and cellular alterations that could facilitate tumoral transformation.</a> International Journal of Molecular Sciences. 20 (3), 720 (2019).</li><li>Best, J. B., Rubinstein, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maze+learning+and+associated+behavior+in+planaria.">Maze learning and associated behavior in planaria.</a> Journal of Comparative and Physiological Psychology. 55, 560-566 (1962).</li><li>Shomrat, T., Levin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+automated+training+paradigm+reveals+long-term+memory+in+planarians+and+its+persistence+through+head+regeneration.">An automated training paradigm reveals long-term memory in planarians and its persistence through head regeneration.</a> The Journal Experimental Biology. 216, 3799-3810 (2013).</li><li>Robarts-Galbraith, R. H., Newmark, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+organ+trail:+insights+into+organ+regeneration+in+the+planarian.">On the organ trail: insights into organ regeneration in the planarian.</a> Current Opinion in Genetics &amp; Development. 32, 37-46 (2015).</li><li>Ivancovic, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Model+systems+for+regeneration:+planarians.">Model systems for regeneration: planarians.</a> Development. 146 (17), 167684 (2019).</li><li>Herath, S., Lobo, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cross-inhibition+of+Turing+patterns+explains+the+self-organized+regulatory+mechanism+of+planarian+fission.">Cross-inhibition of Turing patterns explains the self-organized regulatory mechanism of planarian fission.</a> Journal of Theoretical Biology. 485, 110042 (2019).</li><li>Itoh, M. T., Shinozawa, T., Sumi, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circadian+rhythms+of+melatonin-synthesizing+enzyme+activities+and+melatonin+levels+in+planarians.">Circadian rhythms of melatonin-synthesizing enzyme activities and melatonin levels in planarians.</a> Brain Research. 830 (1), 165-173 (1999).</li><li>Itoh, M. T., Igarashi, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circadian+rhythm+of+serotonin+levels+in+planarians.">Circadian rhythm of serotonin levels in planarians.</a> Neuroreports. 11 (3), 473-476 (2000).</li><li>Hinrichsen, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photosensitivity+and+motility+in+planarian+Schmedtea+mediterranea+vary+diurnally.">Photosensitivity and motility in planarian Schmedtea mediterranea vary diurnally.</a> Chronobiology International. 36 (12), 1789-1793 (2019).</li><li>Raffa, R. B., Desai, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Description+and+quantification+of+cocaine+withdrawal+signs+in+planaria.">Description and quantification of cocaine withdrawal signs in planaria.</a> Brain Research. 1032 (1-2), 200-202 (2005).</li><li>Pag&#225;n, O. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+cembranoid+from+tobacco+prevents+the+expression+of+induced+withdrawal+behavior+in+planarian+worms.">A cembranoid from tobacco prevents the expression of induced withdrawal behavior in planarian worms.</a> European Journal of Pharmacology. 615 (1-3), 118-124 (2009).</li><li>Rawls, S. M., Patil, T., Yuvasheva, E., Raffa, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=First+evidence+that+drugs+of+abuse+produce+behavioral+sensitization+and+cross-sensitization+in+planarians.">First evidence that drugs of abuse produce behavioral sensitization and cross-sensitization in planarians.</a> Behavioural Pharmacology. 21 (4), 301-313 (2010).</li><li>Venturini, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+pharmacological+study+of+dopaminergic+receptors+in+planaria.">A pharmacological study of dopaminergic receptors in planaria.</a> Neuropharmacology. 28 (12), 1377-1382 (1989).</li><li>Ouyang, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+effects+of+Spenda,+Equal+and+sucrose:+Clues+from+planarians+on+sweeteners.">Behavioral effects of Spenda, Equal and sucrose: Clues from planarians on sweeteners.</a> Neuroscience Letters. 636, 213-217 (2017).</li><li>Pag&#225;n, O. R., Montgomery, E., Deats, S., Bach, D., Baker, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+of+nicotine-induced,+curare-sensitive,+behavior+in+planarians.">Evidence of nicotine-induced, curare-sensitive, behavior in planarians.</a> Neurochemical Research. 40 (10), 2087-2090 (2015).</li><li>Shibata, N., Agata, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RNA+interference+in+planarians:+feeding+and+injection+of+synthetic+dsRNA.">RNA interference in planarians: feeding and injection of synthetic dsRNA.</a> Methods in Molecular Biology. 1774, 455-466 (2018).</li><li>Pag&#225;n, O. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversal+of+cocaine-induced+planarian+behavior+by+parthenolide+and+related+sesquiterpene+lactones.">Reversal of cocaine-induced planarian behavior by parthenolide and related sesquiterpene lactones.</a> Pharmacology Biochemistry and Behavior. 89 (2), 160-170 (2008).</li><li>Vouga, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stereochemistry+and+neuropharmacology+of+a+'bath+salt'+cathinone:+S-enantiomer+of+mephedrone+reduces+cocaine-induced+reward+and+withdrawal+in+invertebrates.">Stereochemistry and neuropharmacology of a 'bath salt' cathinone: S-enantiomer of mephedrone reduces cocaine-induced reward and withdrawal in invertebrates.</a> Neuropharmacology. 91, 109-116 (2015).</li><li>Chan, J. D., Marchant, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacological+and+functional+genetic+assays+to+manipulate+regeneration+of+the+planarian+Dugesia+japonica.">Pharmacological and functional genetic assays to manipulate regeneration of the planarian Dugesia japonica.</a> Journal of Visualized Experiments. (54), e3058 (2011).</li></ol>

간단하고 접근 가능한 평면 운동성 분석은 천연 제품의 자극제 및 철수 효과를 결정하기 위해 설명됩니다. 행동 모델로서 는 다양한 실험자 간의 관찰을 표준화하기 위해 모든 동작의 점수 매기기 동작과 명확한 정의를 위한 엄격한 프로토콜을 가질 필요가 있습니다. 제시된 아이디어는 이것이 어떻게 달성될 수 있는지에 대한 시연을 제공합니다. 이 프로토콜을 사용하는 각 실험실은 테스트 중?...

설명된 프로토콜은 천연 물질의 생체 변조 효과를 평가하는 수단을 제공하기 위해 평면 운동성을 사용합니다. 이러한 물질이 각성제로서 기능하는지, 그리고 측정 가능한 철수 동작1과연관되었는지 여부를 결정하기 위해 특별히 조정되었습니다. 이 분석, 평면 운동 속도 (pLmV) 테스트로 알려진, 먼저 알려진 약리학에이전트를테스트하는 데 사용되었다2,3. 이 평면도 기반 분석의 적용은 이후 인기가 성장하고 천연 제품이외의물질에 관심이 다른 실험실에 의해 채택되었다4,5. 이 분석의 경우, 플라나리안은 용존된 바이오 모둘레이터를 함유한 샘물 또는 샘물을 포함하는 페트리 접시에 배치됩니다. 접시 자체가 그래프 용지에 배치되기 때문에 용기에 대해 이동할 때 시간이 지남에 따라 동물이 교차하는 그리드 라인의 수를 사용하여 각 조건에서 이동 속도를 결정할 수 있습니다. 조건부 장소 선호도 테스트(CPP)라고 도는 빛/어두운 시험은, 평면도 모니터링을 주제로 한 또 다른 변형이며, 동물이 반응하고 어두운 환경으로 얼마나 빨리 이동하고 있는지평가한다 6,,7. 평면 운동의 비디오 추적은 또한컴퓨터프로그램 및 질량 중심 (COM)을 사용하여 분석 할 수 있습니다8,9,,10,,11.
이러한 연구를 위한 동물 모델로 평면을 사용하면 실험자가 분석 환경을 쉽게 제어할 수 있다는 점에서 다른 동물에 비해 몇 가지 이점이 있습니다. 구체적으로, 실험 전에 기획자를 굶주리면 결과를 혼동할 수 있는 다른 영양 또는 약리학 제에 대한 노출을 방지할 수 있으며, 조사 중인 특정 바이오 조절기는 단순히 배양물에 직접 첨가하여 노출을 표준화함으로써 planarians에 도입될 수 있다. 기획자는 '고원' 동물을 연상시키는 신경계와 신경전달물질을 가지고 있기 때문에, 신경근육 자극에 대한 이 동물의 생리학 및 실험반응은 다른 유기체12,,13,,14,,15,16과생물학적으로 관련이 있는 것으로 간주됩니다., 또한, 평면은 실험실에서 유지하기 위해 상대적으로 저렴하고 간단하기 때문에, 그들은 많은 조사자에 대한 접근 가능한 생물학적 모델을 제공합니다.
실험동물로서, 플래나리안은 광범위한 연구에 적합합니다. 예를 들어, 우리 그룹뿐만 아니라 다른 조사자들은 planarians를 사용하여 종양 발생17,,18,,19를연구합니다. Planarians는 또한 화학, 열, 중력, 전기, 사진 및 다른 분석 시스템의 기초를 형성 한 자기 자극에 대한 반응 행동의 호스트를 전시한다. 이러한 효과 중 일부는 이러한 동물에서 학습 및 메모리를 연구 하는 데 사용 되었습니다20,,21,,22,,23,,24,,25,,26,,27. 현재 문헌에서 평면 모델의 주요 사용은 신폭발이라고 불리는 평면 만능 줄기 세포의 활성과 재생28,,29,,30에서의역할에 초점을 맞추고 있다. 따라서, 여기에 설명된 모델을 채택하면 다른 플라나리안 기반 의 아세법을 사용하여 천연 제품 및 기타 바이오 변조기가 유기체에 미치는 영향에 대한 광범위한 이해를 제공하는 추가 연구를 가능하게 합니다.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Bottled Water - 1 Gal.</td>
			<td>Poland Spring</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Spring water for planarian culture and to prepare solutions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brown Planaria (Dugesia tigrina)</td>
			<td>Carolina Biological Supply Company</td>
			<td>132954</td>
			<td>Brown planaria living (other species are acceptable)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flat Paintbrush</td>
			<td>Royal Crafter&#39;s Choice</td>
			<td>9159</td>
			<td>Flat watercolor paintbrushes for cleaning planarian culture containers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Petri Dish - 10 cm</td>
			<td>Kimax</td>
			<td>N/A</td>
			<td>10 cm diameter (glass) Petri dishes for pLmV assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Petri Dish - 5 cm</td>
			<td>Kimax</td>
			<td>N/A</td>
			<td>5 cm and Petri dishes for rinsing planarians during withdrawal experiments and for stimulant habituation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Grid Paper</td>
			<td>Any</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Standard 0.5 cm grid paper for pLmV assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>iPEVO Visualizer (software)</td>
			<td>iPEVO</td>
			<td>https://www.ipevo.com/software/visualizer</td>
			<td>Document camera software for video capture and recording</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metalware Set with Support Stand and Retort Ring</td>
			<td>Any</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Standard chemistry lab ring stand to hold a cell phone camera if used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Organic Egg</td>
			<td>Any</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Organic egg or beef liver for feeding planarains</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polycarbonate Bottle w/ Screw-on Cap - 10 mL</td>
			<td>Beckman</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Plastic vials to hold 5 to 10 mL volumes for stimulant habituation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Round Storage Container - 10 cm</td>
			<td>Ziploc</td>
			<td>N/A</td>
			<td>10 cm Round food storage containers for approximately 90 planarians or fewer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Round Water Paint Brush</td>
			<td>LOEW-Cornell</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Small round watercolor paint brushes (numbers 3 to 6) - soft</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transfer Pipette</td>
			<td>Any</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Wide bore (5 mL) plastic transfer pipettes to move planarians</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>USB Document Camera</td>
			<td>iPEVO</td>
			<td>CDVU-06IP</td>
			<td>Document camera (or other camera or cell phone camera)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a planarian motility assay to gauge the biomodulating properties of natural products

비기생 평면을 사용하는 간단하고 제어 가능한 수단인 Dugesia tigrina는천연 제품의 자극제 및 철수 특성을 연구하기 위해 자유로운 살아있는 수생 플랫웜입니다. 평면 생리학의 독특한 양상에서 혜택을 실험 적인 분석 상처 치유에 연구에 적용 되었습니다., 재생, 그리고 종양 발생. 또한, 기획자는 다양한 환경 자극에 민감성을 나타내고 조건부 응답을 학습하고 개발할 수 있기 때문에 학습과 기억을 검토하는 행동 연구에 사용할 수 있습니다. Planarians는 신경 근육 생물 조절기의 효력을 검토하는 연구 결과에 가능한 신경 전달물질 시스템을 사용하는 기본적인 양측 대칭 및 중앙 신경계를 가지고 있습니다. 따라서, 동물 성 운동과 운동성을 모니터링하는 실험 시스템이 개발되어 약물 중독과 철수를 검사합니다. 평면 운동성은 자극의 효과를 모니터링하기 위해 민감하고 쉽게 표준화된 운동성 분석 시스템의 잠재력을 제공하므로, 평면 운동 속도(pLmV) 테스트는 동물에 의해 교차된 그리드 라인의 수를 측정하여 평면주의에 의한 자극및 철수 행동을 모니터링하도록 조정되었습니다. 여기서, 기술과 응용 프로그램은 입증및 설명된다.

실험이 시작되기 전에 pLmV 분석 작업을 실행하기 위한 작업 영역을 설정하고 준비해야 합니다. 여기에는 습관 용기의 준비, 필요한 경우 헹구는 용기(철수 실험용), 적층 그리드 용지 위에 페트리 접시, 제대로 배치된카메라(그림 1)가포함됩니다. 모든 비디오를 촬영하면 공통 데이터 시트를 사용하여 조사관 간의 데이터 수집 및 프레젠테이션을 표준화하는 것이<strong class="xf...

Watch this Scientific Journal Video about A Planarian Motility Assay to Gauge the Biomodulating Properties of Natural Products at JoVE.com

A Planarian Motility Assay to Gauge the Biomodulating Properties of Natural Products

플라니안 운동성은 만천성에서 동물의 움직임에 비해 천연물의 자극제 및 철수 특성을 측정하는 데 사용됩니다.

천연 물의 생물 조절 특성을 측정하는 플래니언 모틸리티 분석

A straightforward, controllable means of using the non-parasitic planarian, Dugesia tigrina, a free-living aquatic flatworm, to study the stimulant and ...

Planarian Locomotor 속도 테스트는 운동성에 영향을 미칠 수 있는 다양한 생물학적 수정 제에 대한 자극제 및 가능한 철수 효과를 신속하게 평가하기위한 수단입니다. 이 에세이는 쉽게 제어되며 가장 기본적인 연구 환경에서도 신뢰할 수 있는 행동 데이터를 생성하는 간단하고 접근 가능한 방법을 제공합니다. planarian 신경계는 중앙 집중식 초보적 인 뇌, 양측 대칭 및 유사 신경 전달 물질 시스템을 가지고 있기 때문에, 이러한 유기체를 사용하여 행동 연구는 가능한 척추 동물 반응에 전임상 통찰력을 제공합니다.실험은 생리학적 경로 수정자, 약물 또는 유전자 변형 된 planarians에 의해 더 영향을 받아 관련 생물학적 메커니즘에 대한 통찰력을 제공 할 수 있습니다. 컨테이너 간의 전송이 스트레스를 받지 않도록 평면을 가지고 실험실 구성원 간의 그리드 라인 곡선을 표준화하는 것이 중요합니다. 이 동작 에세이 실험에서 일관된 결과를 얻을 수 있는 가장 좋은 방법은 숙련된 사용자가 이를 수행하는 방법을 보는 것입니다.평면 문화를 설정 한 후, 다진 유기농 삶은 계란 또는 혼합 유기농 쇠고기 간의 정기적 인 일주일에 두 번 정기적으로 벌레 광고 리비타를 공급 1 ~ 2 시간 동안. 먹이후, 용기에서 더러운 물을 제거하고 평평한 수채화 페인트 브러시를 사용하여 음식 파편과 점액을 용기에 따라 종이 타월로 옮겼습니다. 신선한 샘물과 부드러운 소용돌이 또는 동요를 사용하여 평면을 빼내고 벌레를 깨끗한 용기로 제거하십시오.새로운 접시로 의전을 용이하게하고 조심스럽게 전송 물을 decant 이전하기 위해 이전 용기에 부착 남아있는 모든 평면도아래에 넓은 보어 파이펫 팁을 밀어 넣습니다. 그런 다음 새로운 용기에 새 용기에 있는 평면을 신선한 샘물로 덮습니다. Planarian Locomotor 속도 테스트를 수행하기 위해 먼저 5~10일 의 굶주려 있는 평면도가 완전하고 색소된 머리와 꼬리로 완전히 형성되도록 하십시오.플래너가 준비되면 10센티미터 직경의 페트리 접시를 실험군당 0.5센티미터 곱으로 미리 적층된 격자 용지 한 장에 넣고 대조군에 대한 순수하지 않은 샘물 20밀리리터 또는 각 요리에 적합한 천연물을 함유한 20밀리리터의 봄물을 첨가한다. 준비된 운동 속도 자극 접시 위에 카메라를 배치하고 실험 화합물의 적절한 농도를 포함하는 순수한 샘물 또는 샘물의 5~10밀리리터를 적절히 크기의 습관용기에 넣습니다. 다음으로, 작은 깨끗한 수채화 페인트 브러시를 사용하여 양문화 용기에서 준비된 습관 용기로 한 마리의 평면을 부드럽게 옮기고 planarian이 용기의 용액에 2 분 동안 습관화 할 수 있도록합니다.연구를 통해 기획자들은 브러시로 이동하고 동물을 강요하지 않고 조심스럽게 들어올릴 수 있습니다. 습관기간이 끝나면 브러시를 사용하여 기획관을 상습 용기와 동일한 용액을 포함하는 준비된 운동 속도 자극 접시의 중심으로 평면을 조심스럽게 옮기고 카메라를 시작하여 10~11분의 무브먼트를 기록한다. 습관 기간이 끝날 때 철수의 효과를 테스트하려면, 만 샘물을 포함하는 5 센티미터 접시에 평면을 헹구는다.웜을 신선한 샘물이 들어있는 준비된 운동 속도 접시의 중심으로 옮기기 전에 카메라를 시작하여 10~11분의 움직임을 기록합니다. 카메라 설정을 사용하면 평면 및 그리드 용지를 명확하게 볼 수 있으며 실험 기간 동안 동물의 진행 상황을 정확하게 평가할 수 있습니다. 데이터 컬렉션에는 교차된 총 그리드 선 수와 실험의 분당 누적 총 선 수가 포함되어야 합니다.각 시험의 결과를 표준화하기 위해, 플라나리안 운동 속도 실행은 일치하는 제어 웜의 진행률에 따라 상자의 수가 교차함에 따라 계산하고 플롯할 수 있습니다. 벤치마크로, 샘물에서 플래너리는 일반적으로 3 분 안에 약 25 상자를 커버합니다. 다양한 시험 시약 농도를 검사하여 관심 있는 시험 화합물에 대응하여 평면 운동성을 결정할 수 있다.금단 데이터는 동물이 검사되는 바이오 변조 생성물에 습관화된 후 샘물 제어에 비해 샘물에서 교차하는 그리드 라인의 수를 정량화함으로써 평가될 수 있다. 스프링 워터 제어 평면은 실험 기간 동안 그리드 라인을 통해 이동합니다. 그러나 때때로, 시험 계획자는 테스트되는 제품에 대한 특징적인 행동으로 에세이 동안 그리드 라인을 교차 중지합니다.이는 다른 분석 방법이 필요할 수 있음을 시사합니다. 이러한 인스턴스는 추적될 수 있고 데이터는 특정 시약 농도에 노출된 총 동물 수의 백분율로 설명될 수 있다. 접시 간 이동 중에 손상되지 않도록 planarian을 처리하는 것이 필수적입니다.천연 제품의 다른 농도의 효과를 결정 한 후, 생물학적 경로 수정자는 초기 결과에 어떤 동적 변화를 관찰하기 위해 추가 될 수있다. Planarian Locomotor 속도 테스트는 알려진 약리학 에이전트를 사용하여 자극과 철수를 위해 테스트하는 데 사용되었습니다. 우리는 천연 제품으로 이러한 동일한 개념을 연구하기 위해 시스템을 조정했습니다.

Research

JoVE Journal

Biochemistry

A Rapid Laser Probing Method Facilitates the Non-invasive and Contact-free Determination of Leaf Thermal Properties

빠른 레이저 방법은 잎 열적 특성의 비 침습적과 연락이없는 결정을 촉진 프로빙

Plants can produce valuable substances such as secondary metabolites and recombinant proteins. The purification of the latter from plant biomass can be ...

연구

생화학

Preparation of Giant Vesicles Encapsulating Microspheres by Centrifugation of a Water-in-oil Emulsion

유 중수 에멀젼의 원심 분리에 의해 거 소포 캡슐화 미소 구의 제조

The constructive biology and the synthetic biology approach to creating artificial life involve the bottom-up assembly of biological or nonbiological ...

Assay for Phosphorylation and Microtubule Binding Along with Localization of Tau Protein in Colorectal Cancer Cells

인 산화 및 대 장 암 세포에 타우 단백질의 지역화 함께 Microtubule 바인딩 분석 결과

The microtubule-associated protein tau is a neuronal protein that localizes mostly in axons. Generally tau is essential for normal neuronal functioning ...

A High-Throughput Luciferase Assay to Evaluate Proteolysis of the Single-Turnover Protease PCSK9

단일-매출 Protease PCSK9의 베이스를 평가 하는 높은 처리량 Luciferase 분석 결과

Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 (PCSK9) is a single-turnover protease which regulates serum low-density lipoprotein (LDL) levels and, ...

A Customizable Approach for the Enzymatic Production and Purification of Diterpenoid Natural Products

디테르페노이드 천연제품의 효소 생산 및 정화를 위한 맞춤형 접근법

Diterpenoids form a diverse class of small molecule natural products that are widely distributed across the kingdoms of life and have critical biological ...

A Semi-High-Throughput Adaptation of the NADH-Coupled ATPase Assay for Screening Small Molecule Inhibitors

소분자 억제제 스크리닝을 위한 NADH 결합 ATPase 분석의 반 높은 처리량 적응

ATPase enzymes utilize the free energy stored in adenosine triphosphate to catalyze a wide variety of endergonic biochemical processes in vivo that would ...

Labelling and Visualization of Mitochondrial Genome Expression Products in Baker's Yeast Saccharomyces cerevisiae

Labelling and Visualization of Mitochondrial Genome Expression Products in Baker's Yeast Saccharomyces cerevisiae

베이커효모사카로미세스 세레비시아에 미토콘드리아 게놈 발현 제품의 라벨링 및 시각화

Mitochondria are essential organelles of eukaryotic cells capable of aerobic respiration. They contain circular genome and gene expression apparatus. A ...

Motility of Single Molecules and Clusters of Bi-Directional Kinesin-5 Cin8 Purified from S. cerevisiae Cells

Motility of Single Molecules and Clusters of Bi-Directional Kinesin-5 Cin8 Purified from S. cerevisiae Cells

S. cerevisiae 세포로부터 정제된 양방향 Kinesin-5 Cin8의 단일 분자 및 클러스터의 이동성

The mitotic bipolar kinesin-5 motors perform essential functions in spindle dynamics. These motors exhibit a homo-tetrameric structure with two pairs of ...

Reconstitution of Septin Assembly at Membranes to Study Biophysical Properties and Functions

생체 물리학 적 특성과 기능을 연구하기 위해 멤브레인에서 Septin 어셈블리의 재구성

Most cells can sense and change their shape to carry out fundamental cell processes. In many eukaryotes, the septin cytoskeleton is an integral component ...

Shotgun Lipidomics of Rodent Tissues

설치류 조직의 산탄총 지질체

Lipids play a vital role as essential components of all prokaryotic and eukaryotic cells. Constant technological improvements in mass spectrometry have ...