Name: a planarian motility assay to gauge the biomodulating properties of natural products
Uploaded: 2020-05-30T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Planarian Motility Assay to Gauge the Biomodulating Properties of Natural Products at JoVE.com

Yazarlar Kurumsal İlerleme ofis kabul etmek istiyorum, ve Morrisville College Vakfı bu çalışmayı desteklemek için bir yayın hibe yanı sıra SUNY Morrisville Collegiate Bilim ve Teknoloji Giriş Programı (CSTEP) onların devam eden yardım ve SUNY Morrisville lisans araştırma desteği için. Ayrıca Sophia Hutchens'a açıklanan teknik hakkında yararlı yorumları için teşekkür ederiz.

1. Planarya yetiştiriciliği
<ol><li>Bir biyolojik tedarik şirketinden satın alınan veya gerekirse vahşi yakalanmış planarians kullanın. Bu protokolde kullanılan planarians Dugesia tigrina, tedarik listesinde listelenen vardır. Bu tür aynı zamanda Girardia tigrina31olarak adlandırılır. Diğer su planer türleri de kabul edilebilir2,3. NOT: Açıklanan protokol, biyolojik tedarik şirketinden satın al?...

<ol>
	<li>Moustakas, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guarana+provides+additional+stimulation+over+caffeine+alone+in+the+planarian+model.">Guarana provides additional stimulation over caffeine alone in the planarian model.</a> PloS One. 10 (4), 0123310 (2015).</li><li>Raffa, R. B., Valdez, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cocaine+withdrawal+in+Planaria.">Cocaine withdrawal in Planaria.</a> European Journal of Pharmacology. 430 (1), 143-145 (2001).</li><li>Raffa, R. B., Holland, L. J., Schulingkamp, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+assessment+of+dopamine+D2+antagonist+activity+using+invertebrate+(Planaria)+locomotion+as+a+functional+endpoint.">Quantitative assessment of dopamine D2 antagonist activity using invertebrate (Planaria) locomotion as a functional endpoint.</a> Journal of Pharmacology and Toxicological Methods. 45 (3), 223-226 (2001).</li><li>Thum&#233;, I. S., Frizzo, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sertraline+induces+toxicity+and+behavioral+alternations+in+planarians.">Sertraline induces toxicity and behavioral alternations in planarians.</a> Biomedical Research International. 2017, 5792621 (2017).</li><li>Aggarwal, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+a+novel+allosteric+modulator+of+the+human+dopamine+transporter.">Identification of a novel allosteric modulator of the human dopamine transporter.</a> ACS Chemical Neuroscience. 10 (8), 3718-3730 (2019).</li><li>Zhang, C., Tallarida, C. S., Raffa, R. B., Rawls, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sucrose+produces+withdrawal+and+dompamine-sensitive+reinforcing+effects+in+planarians.">Sucrose produces withdrawal and dompamine-sensitive reinforcing effects in planarians.</a> Physiology &amp; Behavior. , 8-13 (2013).</li><li>Zewde, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PLDT+(planarian+light/dark+test):+an+invertebrate+assay+to+quantify+defensive+responding+and+study+anxiety-like+effects.">PLDT (planarian light/dark test): an invertebrate assay to quantify defensive responding and study anxiety-like effects.</a> Journal of Neuroscience Methods. 293, 284-288 (2018).</li><li>Risse, B., Otto, N., Berh, D., Jiang, X., Kl&#228;mbt, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FIM+Imaging+and+FIMtrack:+two+new+tools+allowing+high-throughput+and+cost+effective+locomotion+analysis.">FIM Imaging and FIMtrack: two new tools allowing high-throughput and cost effective locomotion analysis.</a> Journal of Visualized Experiments. (94), e52207 (2014).</li><li>Inoue, T., Hoshino, H., Yamashita, T., Shimoyama, S., Agata, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Planarian+shows+decision-making+behavior+in+response+to+multiple+stimuli+by+integrative+brain+function.">Planarian shows decision-making behavior in response to multiple stimuli by integrative brain function.</a> Zoological Letters. 1, 7 (2015).</li><li>Hastrom, D., Cochet-Escartin, O., Zhang, S., Khuu, C., Collins, E. M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Freshwater+planarians+as+an+alternative+animal+model+for+neurotoxicology.">Freshwater planarians as an alternative animal model for neurotoxicology.</a> Toxicological Sciences. 147 (1), 270-285 (2015).</li><li>Risse, B., Berh, D., Otto, N., Kl&#228;mbt, C., Jiang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FIMtrack:+an+open+source+tracking+and+locomotion+analysis+software+for+small+animals.">FIMtrack: an open source tracking and locomotion analysis software for small animals.</a> PLoS One Computational Biology. 13 (5), 100553 (2017).</li><li>Pag&#225;n, O. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Planaria:+an+animal+model+that+integrates+development,+regeneration+and+pharmacology.">Planaria: an animal model that integrates development, regeneration and pharmacology.</a> International Journal of Developmental Biology. 61, 519-529 (2017).</li><li>Palladini, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+pharmacological+study+of+cocaine+activity+in+planaria.">A pharmacological study of cocaine activity in planaria.</a> Comparative Biochemistry and Physiology. 115 (1), 41-45 (1996).</li><li>Buttarelli, F. R., Pellicano, C., Pontieri, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuropharmacology+and+behavior+in+planarians:+translation+to+mammals.">Neuropharmacology and behavior in planarians: translation to mammals.</a> Comparative Biochemistry and Physiology Part C. Toxicology &amp; Pharmacology. 147 (4), 399-408 (2008).</li><li>Nishimura, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+glutamic+acid+decarboxylase+gene+and+distribution+of+GABAergeric+nervous+system+in+the+planarian+Dugesia+japonica.">Identification of glutamic acid decarboxylase gene and distribution of GABAergeric nervous system in the planarian Dugesia japonica.</a> Neuroscience. 153 (4), 1103-1114 (2008).</li><li>Raffa, R. B., Rawls, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> A model for drug action and abuse. , (2008).</li><li>Hall, F., Morita, M., Best, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=neoplastic+transformation+in+the+planarian:+I+cocarcinogenesis+and+histopathology.">neoplastic transformation in the planarian: I cocarcinogenesis and histopathology.</a> The Journal of Experimental Zoology. 240 (2), 211-227 (1986).</li><li>Voura, E. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Planarians+as+models+of+cadmium-induced+neoplasia+provide+measurable+benchmarks+for+mechanistic+studies.">Planarians as models of cadmium-induced neoplasia provide measurable benchmarks for mechanistic studies.</a> Ecotoxicology and Environmental Safety. 142, 544-554 (2017).</li><li>Van Roten, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+carcinogenic+trigger+to+study+the+function+of+tumor+suppressor+genes+in+Schmedtea+mediterranea.">A carcinogenic trigger to study the function of tumor suppressor genes in Schmedtea mediterranea.</a> Disease Models and Mechanisms. 11 (9), 032573 (2018).</li><li>Mason, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemo-klino-kinesis+in+planarian+food+location.">Chemo-klino-kinesis in planarian food location.</a> Animal Behaviour. 23 (2), 460-469 (1975).</li><li>Van Huizen, A. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Weak+magnetic+fields+alter+stem+cell-mediated+growth.">Weak magnetic fields alter stem cell-mediated growth.</a> Science Advances. 5 (1), 7201 (2019).</li><li>Brown, H. M., Ogden, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+electrical+response+of+the+planarian+ocellus.">The electrical response of the planarian ocellus.</a> Journal of General Physiology. 51 (2), 255-260 (1968).</li><li>Inoue, T., Yamashita, T., Agata, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thermosensory+signaling+by+TRPM+is+processed+by+brain+serotonergic+neurons+to+produce+planarian+thermotaxis.">Thermosensory signaling by TRPM is processed by brain serotonergic neurons to produce planarian thermotaxis.</a> The Journal of Neuroscience. 34 (47), 15701-15714 (2014).</li><li>Byrne, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+ethanol+on+negative+phototaxis+and+motility+in+brown+planarians+(Dugesia+tigrina).">Effects of ethanol on negative phototaxis and motility in brown planarians (Dugesia tigrina).</a> Neuroscience Letters. 685, 102-108 (2018).</li><li>de Sousa, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcriptomic+analysis+of+planarians+under+simulated+microgravity+or+8g+demonstrates+that+alteration+of+gravity+induces+genomic+and+cellular+alterations+that+could+facilitate+tumoral+transformation.">Transcriptomic analysis of planarians under simulated microgravity or 8g demonstrates that alteration of gravity induces genomic and cellular alterations that could facilitate tumoral transformation.</a> International Journal of Molecular Sciences. 20 (3), 720 (2019).</li><li>Best, J. B., Rubinstein, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maze+learning+and+associated+behavior+in+planaria.">Maze learning and associated behavior in planaria.</a> Journal of Comparative and Physiological Psychology. 55, 560-566 (1962).</li><li>Shomrat, T., Levin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+automated+training+paradigm+reveals+long-term+memory+in+planarians+and+its+persistence+through+head+regeneration.">An automated training paradigm reveals long-term memory in planarians and its persistence through head regeneration.</a> The Journal Experimental Biology. 216, 3799-3810 (2013).</li><li>Robarts-Galbraith, R. H., Newmark, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+organ+trail:+insights+into+organ+regeneration+in+the+planarian.">On the organ trail: insights into organ regeneration in the planarian.</a> Current Opinion in Genetics &amp; Development. 32, 37-46 (2015).</li><li>Ivancovic, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Model+systems+for+regeneration:+planarians.">Model systems for regeneration: planarians.</a> Development. 146 (17), 167684 (2019).</li><li>Herath, S., Lobo, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cross-inhibition+of+Turing+patterns+explains+the+self-organized+regulatory+mechanism+of+planarian+fission.">Cross-inhibition of Turing patterns explains the self-organized regulatory mechanism of planarian fission.</a> Journal of Theoretical Biology. 485, 110042 (2019).</li><li>Itoh, M. T., Shinozawa, T., Sumi, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circadian+rhythms+of+melatonin-synthesizing+enzyme+activities+and+melatonin+levels+in+planarians.">Circadian rhythms of melatonin-synthesizing enzyme activities and melatonin levels in planarians.</a> Brain Research. 830 (1), 165-173 (1999).</li><li>Itoh, M. T., Igarashi, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circadian+rhythm+of+serotonin+levels+in+planarians.">Circadian rhythm of serotonin levels in planarians.</a> Neuroreports. 11 (3), 473-476 (2000).</li><li>Hinrichsen, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photosensitivity+and+motility+in+planarian+Schmedtea+mediterranea+vary+diurnally.">Photosensitivity and motility in planarian Schmedtea mediterranea vary diurnally.</a> Chronobiology International. 36 (12), 1789-1793 (2019).</li><li>Raffa, R. B., Desai, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Description+and+quantification+of+cocaine+withdrawal+signs+in+planaria.">Description and quantification of cocaine withdrawal signs in planaria.</a> Brain Research. 1032 (1-2), 200-202 (2005).</li><li>Pag&#225;n, O. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+cembranoid+from+tobacco+prevents+the+expression+of+induced+withdrawal+behavior+in+planarian+worms.">A cembranoid from tobacco prevents the expression of induced withdrawal behavior in planarian worms.</a> European Journal of Pharmacology. 615 (1-3), 118-124 (2009).</li><li>Rawls, S. M., Patil, T., Yuvasheva, E., Raffa, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=First+evidence+that+drugs+of+abuse+produce+behavioral+sensitization+and+cross-sensitization+in+planarians.">First evidence that drugs of abuse produce behavioral sensitization and cross-sensitization in planarians.</a> Behavioural Pharmacology. 21 (4), 301-313 (2010).</li><li>Venturini, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+pharmacological+study+of+dopaminergic+receptors+in+planaria.">A pharmacological study of dopaminergic receptors in planaria.</a> Neuropharmacology. 28 (12), 1377-1382 (1989).</li><li>Ouyang, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+effects+of+Spenda,+Equal+and+sucrose:+Clues+from+planarians+on+sweeteners.">Behavioral effects of Spenda, Equal and sucrose: Clues from planarians on sweeteners.</a> Neuroscience Letters. 636, 213-217 (2017).</li><li>Pag&#225;n, O. R., Montgomery, E., Deats, S., Bach, D., Baker, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+of+nicotine-induced,+curare-sensitive,+behavior+in+planarians.">Evidence of nicotine-induced, curare-sensitive, behavior in planarians.</a> Neurochemical Research. 40 (10), 2087-2090 (2015).</li><li>Shibata, N., Agata, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RNA+interference+in+planarians:+feeding+and+injection+of+synthetic+dsRNA.">RNA interference in planarians: feeding and injection of synthetic dsRNA.</a> Methods in Molecular Biology. 1774, 455-466 (2018).</li><li>Pag&#225;n, O. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversal+of+cocaine-induced+planarian+behavior+by+parthenolide+and+related+sesquiterpene+lactones.">Reversal of cocaine-induced planarian behavior by parthenolide and related sesquiterpene lactones.</a> Pharmacology Biochemistry and Behavior. 89 (2), 160-170 (2008).</li><li>Vouga, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stereochemistry+and+neuropharmacology+of+a+'bath+salt'+cathinone:+S-enantiomer+of+mephedrone+reduces+cocaine-induced+reward+and+withdrawal+in+invertebrates.">Stereochemistry and neuropharmacology of a 'bath salt' cathinone: S-enantiomer of mephedrone reduces cocaine-induced reward and withdrawal in invertebrates.</a> Neuropharmacology. 91, 109-116 (2015).</li><li>Chan, J. D., Marchant, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacological+and+functional+genetic+assays+to+manipulate+regeneration+of+the+planarian+Dugesia+japonica.">Pharmacological and functional genetic assays to manipulate regeneration of the planarian Dugesia japonica.</a> Journal of Visualized Experiments. (54), e3058 (2011).</li></ol>

Basit ve erişilebilir planarian hareketlilik tetki, doğal ürünlerin uyarıcı ve yoksunluk etkilerini belirlemek için açıklanmıştır. Davranışmodeli olarak, farklı deneyciler arasındaki gözlemleri standartlaştırmak için puanlama hareketi ve herhangi bir davranışın net tanımları için sıkı protokollere sahip olmak gerekir. Sunulan fikirler, bunun nasıl sağlanabileceğinin bir göstergesidir. Bu protokolü kullanan her laboratuvar, sunulan bilgileri test edilen ürünün etkilerine uyacak şekilde...

Açıklanan protokol, doğal maddelerin biyomodülatör etkilerini değerlendirmek için planer hareketlilik kullanır. Özellikle bu maddelerin uyarıcı olarak işlev olup olmadığını belirlemek için uyarlanmıştır, ve daha sonra ölçülebilir bir çekilme davranışı ile ilişkili olup olmadığını1. Planer lokomotor hız (pLmV) testi olarak bilinen bu test, ilk olarak bilinen farmakolojik ajanların test inde kullanıldı2,3. Bu planarian hareketlilik tabanlı test uygulaması beri popülaritesi büyüdü ve doğal ürünler 4 dışındaki maddeler ile ilgilenen farklı laboratuvarlar tarafından kabul edilmiştir4,5. Bu tisalim için, bir planarian bir çözünmüş biyomodülatör içeren kaynak suyu veya kaynak suyu içeren bir Petri kabına yerleştirilir. Yemeğin kendisi grafik kağıda yerleştirildiğinden, her durumdaki hareket oranını belirlemek için kabın üzerinde hareket ederken hayvanın zamanla kesiştisi ızgara çizgilerinin sayısı kullanılabilir. Işık / karanlık testi, aksi takdirde koşullu yer tercihi testi (CPP) olarak anılacaktır, planarian hareketlilik izleme teması başka bir varyasyon, ve hayvanların ne kadar hızlı tepki ve karanlık bir ortama göç değerlendirir6,7. Planer hareketlerin video takibi de bilgisayar programları ve kitle merkezi (COM) izleme8,9,10,11kullanılarak analiz edilebilir.
Bu tür çalışmalar için bir hayvan modeli olarak planarian kullanarak deneyci kolayca deneme ortamı kontrol edebilirsiniz diğer hayvanlarüzerinde çeşitli avantajlar sunuyor. Özellikle, deney öncesi planerlerin açlıktan ölmeleri, sonuçları bozabilecek diğer beslenme veya farmakolojik ajanlara maruz kalmalarını engelleyebilir ve araştırma altındaki spesifik biyomodülatör, sadece doğrudan kültür suyuna ekleyerek plancılara tanıtılabilir ve böylelikle maruziyeti standartlaştırabilir. Planarians 'yüksek derecede' hayvanları anımsatan bir sinir sistemi ve nörotransmitterler olduğundan, nöromüsküler uyaranlara bu hayvanların fizyolojisi ve deneysel tepkileri biyolojik olarak diğer organizmalar için ilgili olarak kabul edilir12,13,14,15,16.16 Ayrıca, planarians nispeten ucuz ve laboratuvarda korumak için basit olduğundan, birçok araştırmacı için erişilebilir bir biyolojik model sunuyoruz.
Deneysel bir hayvan olarak, planarians çalışmalar geniş bir yelpazede uygundur. Örneğin, grubumuzun yanı sıra diğer araştırmacılar tümörigenez17,18,,19çalışma planarians kullanın. Planarianlar ayrıca diğer istibak sistemlerinin temelini oluşturan kimyasal, termal, yerçekimsel, elektriksel, fotoğraf ve manyetik uyaranlara tepki davranışları sergilerler. Bu etkilerden bazıları bu hayvanlarda öğrenme ve hafıza yı incelemek için kullanılmıştır20,21,22,23,24,25, 26,,27.27 Şu anda literatürde planer modelin birincil kullanımı planer pluripotent kök hücrelerin aktivitesi üzerinde duruluyor, neoblastlar denilen, ve rejenerasyon rolleri28,29,30. Böylece, burada açıklanan modelin benimsenmesi, doğal ürünlerin ve diğer biyomodülatörlerin organizmayı nasıl etkilediğine daha geniş bir anlayış sağlamak için diğer planer tabanlı tahlilleri kullanarak daha fazla çalışma yapılmasına olanak sağlar.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Bottled Water - 1 Gal.</td>
			<td>Poland Spring</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Spring water for planarian culture and to prepare solutions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brown Planaria (Dugesia tigrina)</td>
			<td>Carolina Biological Supply Company</td>
			<td>132954</td>
			<td>Brown planaria living (other species are acceptable)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flat Paintbrush</td>
			<td>Royal Crafter&#39;s Choice</td>
			<td>9159</td>
			<td>Flat watercolor paintbrushes for cleaning planarian culture containers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Petri Dish - 10 cm</td>
			<td>Kimax</td>
			<td>N/A</td>
			<td>10 cm diameter (glass) Petri dishes for pLmV assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Petri Dish - 5 cm</td>
			<td>Kimax</td>
			<td>N/A</td>
			<td>5 cm and Petri dishes for rinsing planarians during withdrawal experiments and for stimulant habituation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Grid Paper</td>
			<td>Any</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Standard 0.5 cm grid paper for pLmV assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>iPEVO Visualizer (software)</td>
			<td>iPEVO</td>
			<td>https://www.ipevo.com/software/visualizer</td>
			<td>Document camera software for video capture and recording</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metalware Set with Support Stand and Retort Ring</td>
			<td>Any</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Standard chemistry lab ring stand to hold a cell phone camera if used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Organic Egg</td>
			<td>Any</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Organic egg or beef liver for feeding planarains</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polycarbonate Bottle w/ Screw-on Cap - 10 mL</td>
			<td>Beckman</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Plastic vials to hold 5 to 10 mL volumes for stimulant habituation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Round Storage Container - 10 cm</td>
			<td>Ziploc</td>
			<td>N/A</td>
			<td>10 cm Round food storage containers for approximately 90 planarians or fewer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Round Water Paint Brush</td>
			<td>LOEW-Cornell</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Small round watercolor paint brushes (numbers 3 to 6) - soft</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transfer Pipette</td>
			<td>Any</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Wide bore (5 mL) plastic transfer pipettes to move planarians</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>USB Document Camera</td>
			<td>iPEVO</td>
			<td>CDVU-06IP</td>
			<td>Document camera (or other camera or cell phone camera)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a planarian motility assay to gauge the biomodulating properties of natural products

Olmayan parazit planarian kullanarak basit, kontrol edilebilir bir araç, Dugesia tigrina, serbest yaşayan bir su yassı solucan, doğal ürünlerin uyarıcı ve çekilme özelliklerini incelemek için açıklanmıştır. Planer fizyolojinin benzersiz yönlerinden yararlanan deneysel tahliller yara iyileşmesi, rejenerasyon ve tümörigenez üzerine çalışmalara uygulanmıştır. Buna ek olarak, plancılar çeşitli çevresel uyaranlara duyarlılık sergiledikleri ve koşullu tepkileri öğrenme ve geliştirme yeteneğine sahip oldukları için, öğrenme ve hafızayı inceleyen davranış salitalatlarında kullanılabilirler. Planerler temel bir ikili simetri ve nörotransmitter sistemleri nöromüsküler biyomodülatörlerin etkilerini inceleyen çalışmalara uygun kullanan merkezi bir sinir sistemi sahip. Sonuç olarak, madde bağımlılığı ve geri çekilmeyi incelemek için planer hareketi ve hareketliliği izleyen deneysel sistemler geliştirilmiştir. Planer hareketlilik uyaranların etkisini izlemek için hassas, kolayca standartlaştırılmış bir hareketlilik testi potansiyeli sunduğundan, planarian lokomotor hız (pLmV) testi, hayvanların zaman içinde kesiştikleri ızgara çizgilerinin sayısının belirlenmesi yoluyla planerlerin hem uyarlanma hem de geri çekilme davranışlarını izlemek üzere uyarlanmıştır. Burada teknik ve uygulaması gösterilmiştir ve açıklanır.

PLmV testini çalıştırmak için çalışma alanının kurulumu ve hazırlanması, deneme başlamadan önce tamamlanmalıdır. Buna alışma kabının hazırlanması, gerekirse durulayın kabı (çekilme deneyleri için), lamine ızgara kağıdı nın üzerine Petri kabı ve düzgün bir şekilde yerleştirilmiş kamera(Şekil 1)dahildir. Tüm videolar çekildikten sonra, araştırmacılar arasında veri toplama ve sunum(Şekil 2 ve Şekil 2 Eki)</stro...

Watch this Scientific Journal Video about A Planarian Motility Assay to Gauge the Biomodulating Properties of Natural Products at JoVE.com

A Planarian Motility Assay to Gauge the Biomodulating Properties of Natural Products

Planer hareketliliği, hayvanların sadece kaynak suyundaki hareketi ile karşılaştırıldığında doğal ürünlerin uyarıcı ve geri çekilme özelliklerini ölçmek için kullanılır.

Doğal Ürünlerin Biyomodülasyon Özelliklerini Ölçmek için Bir Planarian Motilite Tsay

A straightforward, controllable means of using the non-parasitic planarian, Dugesia tigrina, a free-living aquatic flatworm, to study the stimulant and ...

Planarian Lokomotor Hız Testi, hareketliliği etkileyebilecek çeşitli biyolojik modifiye edici ajanlar için uyarıcı ve olası yoksunluk etkilerini hızlı bir şekilde değerlendirmek için bir araçtır. Bu kompozisyon kolayca kontrol edilir ve hatta en temel araştırma ortamlarında güvenilir davranışsal veri oluşturmak için basit ve erişilebilir bir yöntem sağlar. Planer sinir sistemi merkezi bir ilkel beyin, ikili simetri ve benzer nörotransmitter sistemleri olduğundan, bu organizmaları kullanarak davranışsal çalışmalar olası omurgalı yanıtları içine preklinik anlayışlar sunuyoruz.Deneyler daha fizyolojik yol değiştiriciler, ilaçlar ve hatta genetik olarak değiştirilmiş planarians ilişkili biyolojik mekanizmalar hakkında fikir sağlamak için etkilenebilir. Kapsayıcılar arasındaki aktarımların onları strese sokmayacak şekilde planarian olması ve laboratuvar üyeleri arasındaki ızgara çizgi eğrilerini standartlaştırması önemlidir. Bu davranış deneme deneme tutarlı sonuçlar elde etmek için en iyi yolu, deneyimli kullanıcıların bunları nasıl gerçekleştirdiğini görerek.Bir planer kültür kurduktan sonra, bir ila iki saat boyunca doğranmış organik haşlanmış yumurta veya harmanlanmış organik sığır karaciğeri düzenli olarak haftada iki kez program solucanlar reklam libitum beslemek. Beslendikten sonra, konteyner herhangi bir kirlenmiş su kaldırmak ve bir kağıt havlu için konteyner yapıştırıcı herhangi bir gıda enkaz ve balçık aktarmak için düz bir suluboya boya fırçası kullanın. Planerleri yerinden çıkarmak ve solucanları temiz bir kap içine çıkarmak için taze kaynak suyu ve nazik dönen veya ajitasyon kullanın.Yeni tabağa geçişlerini kolaylaştırmak ve transfer suyunu dikkatlice çıkarmak için eski konteynere bağlı kalan planerlerin altına geniş delikli pipet ucunu kaydırın. Daha sonra, taze kaynak suyu ile yeni kapta planerler kapağı. Planarian Lokomotor Hız Testi gerçekleştirmek için, ilk beş ila 10 gün açlıktan planarians tam ve pigmentli kafaları ve kuyrukları ile oluşan olduğundan emin olun.Plancılar hazır sayılsalar, 10 santimetre çapındaki Petri kabını, deney grubu başına 0,5 santimetre karelik bir parça önceden lamine ızgara kağıdına yerleştirin ve kontrol grubu için 20 mililitre katkısız kaynak suyu veya her çanağa test edilen doğal ürünün uygun konsantrasyonunu içeren 20 mililitre kaynak suyu ekleyin. Hazırlanan lokomotor hız stimülasyon kabının üzerine bir kamera yerleştirin ve uygun büyüklükteki bir alışma kabına deneysel bileşiğin uygun konsantrasyonunu içeren beş ila 10 mililitre katkısız kaynak suyu veya kaynak suyu ekleyin. Daha sonra, kültür kabından hazırlanan alışkanlık kabına bir planarian'ı nazikçe aktarmak ve planacının iki dakika boyunca kabın içinde çözeltiye alışmasını sağlamak için küçük bir temiz suluboya boya fırçası kullanın.Araştırma planarians fırça üzerine taşımak ve dikkatle onları zorlamadan hayvanları kaldırmak için izin verecektir. Alışma süresinin sonunda, planarian dikkatle hazırlanmış lokomotor hız stimülasyon çanak merkezine habituation konteyner aynı çözüm içeren merkezi için planarian aktarmak için fırça kullanın ve planarian hareket 10 ila 11 dakika kaydetmek için kamera başlar. Alışma süresinin sonunda geri çekilmenin etkilerini test etmek için, planarian'ı sadece kaynak suyu içeren beş santimetrelik bir tabakta durulayın.Solucanı taze kaynak suyu içeren hazırlanan lokomotor hız kabının merkezine aktarmadan önce kamerayı çalıştırarak 10 ila 11 dakikalık hareket kaydedin. Kamera kurulumu planarian ve ızgara kağıt net bir görünüm sağlar ve deney süresince hayvanın ilerleme doğru bir değerlendirme sağlar. Veri toplama, kesilen toplam ızgara çizgisi sayısının yanı sıra denemenin dakika başına geçen toplam satır sayısını içermelidir.Her denemenin sonuçlarını standartlaştırmak için, planer lokomotor hız çalışır hesaplanabilir ve eşleşen kontrol solucanı ilerleme göre kutu sayısı geçti olarak çizilebilir. Bir kriter olarak, kaynak suyu planarians genellikle üç dakika içinde yaklaşık 25 kutu kapsar. Test reaktif konsantrasyonları bir dizi ilgi test bileşikleri yanıt olarak planarian hareketlilik belirlemek için incelenebilir.Para çekme verileri, incelenmekte olan biyo modüle üründe hayvanlar alışkanlık haline getirildikten sonra kaynak suyu kontrolüne göre kaynak suyunda geçen ızgara hatlarının sayısı nın ölçülmesi ile değerlendirilebilir. Bahar suyu kontrol planerleri deney süresince ızgara hatları üzerinde hareket eder. Ancak zaman zaman, test planerleri test edilen ürün için karakteristik olan davranışları ile deneme sırasında ızgara hatları geçiş durdurmak.Bu, farklı bir çözümleme yöntemi nin gerekli olabileceğini düşündürmektedir. Bu tür örnekler izlenebilir ve veriler belirli bir reaktif konsantrasyonuna maruz kalan toplam hayvan sayısının yüzdesi olarak gösterilebilir. Bu yemekler arasında transfer sırasında zarar görmez, böylece planarian işlemek için gereklidir.Doğal bir ürünün farklı konsantrasyonlarının etkileri belirlendikten sonra, biyolojik yol değiştiriciler ilk sonuçlarda herhangi bir dinamik değişiklikleri gözlemlemek için eklenebilir. Planarian Lokomotor Hız Testi bilinen farmakolojik ajanlar kullanılarak stimülasyon ve çekilme için test etmek için kullanılmıştır. Sistemi aynı kavramları doğal ürünlerle incelemek üzere uyarladık.

Research

JoVE Journal

Biochemistry

A Rapid Laser Probing Method Facilitates the Non-invasive and Contact-free Determination of Leaf Thermal Properties

Bir Rapid Lazer Yöntemi Yaprak Termal Özelliklerinin non-invazif ve İletişim serbest Tayini kolaylaştırır Probing

Plants can produce valuable substances such as secondary metabolites and recombinant proteins. The purification of the latter from plant biomass can be ...

Preparation of Giant Vesicles Encapsulating Microspheres by Centrifugation of a Water-in-oil Emulsion

bir su-içinde-yağ emülsiyonu santrifüj Dev veziküller Kapsüllenen Mikrokürelerin hazırlanması

The constructive biology and the synthetic biology approach to creating artificial life involve the bottom-up assembly of biological or nonbiological ...

Assay for Phosphorylation and Microtubule Binding Along with Localization of Tau Protein in Colorectal Cancer Cells

Tahlil fosforilasyon ve yerelleştirme kolorektal kanser hücrelerinin Tau proteinin birlikte Mikrotubul bağlama için

The microtubule-associated protein tau is a neuronal protein that localizes mostly in axons. Generally tau is essential for normal neuronal functioning ...

A High-Throughput Luciferase Assay to Evaluate Proteolysis of the Single-Turnover Protease PCSK9

Tek-ciro proteaz PCSK9 proteolizis değerlendirmek için bir yüksek-den geçerek Luciferase tahlil

Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 (PCSK9) is a single-turnover protease which regulates serum low-density lipoprotein (LDL) levels and, ...

A Customizable Approach for the Enzymatic Production and Purification of Diterpenoid Natural Products

Diterpenoid Doğal Ürünlerin Enzimatik Üretimi ve Saflaştırılması için Özelleştirilebilir Bir Yaklaşım

Diterpenoids form a diverse class of small molecule natural products that are widely distributed across the kingdoms of life and have critical biological ...

A Semi-High-Throughput Adaptation of the NADH-Coupled ATPase Assay for Screening Small Molecule Inhibitors

Küçük Molekül Inhibitörlerinin Taranması için NADH-Coupled ATPase Tsay'ın Yarı-Yüksek İş-İşLenme Adaptasyonu

ATPase enzymes utilize the free energy stored in adenosine triphosphate to catalyze a wide variety of endergonic biochemical processes in vivo that would ...

Labelling and Visualization of Mitochondrial Genome Expression Products in Baker's Yeast Saccharomyces cerevisiae

Labelling and Visualization of Mitochondrial Genome Expression Products in Baker's Yeast Saccharomyces cerevisiae

Fırıncı Maya saccharomyces cerevisiae Mitokondriyal Genom İfade Ürünlerinin Etiketlenmesi ve Görselleştirilmesi

Mitochondria are essential organelles of eukaryotic cells capable of aerobic respiration. They contain circular genome and gene expression apparatus. A ...

Motility of Single Molecules and Clusters of Bi-Directional Kinesin-5 Cin8 Purified from S. cerevisiae Cells

Motility of Single Molecules and Clusters of Bi-Directional Kinesin-5 Cin8 Purified from S. cerevisiae Cells

Tek Moleküllerin Motilitesi ve S. cerevisiae Hücrelerinden Saflaştırılmış Çift Yönlü Kinesin-5 Cin8 Kümeleri

The mitotic bipolar kinesin-5 motors perform essential functions in spindle dynamics. These motors exhibit a homo-tetrameric structure with two pairs of ...

Reconstitution of Septin Assembly at Membranes to Study Biophysical Properties and Functions

Biyofiziksel Özellikleri ve İşlevleri İncelemek için Membranlarda Septin Düzeneğinin Yeniden Sulandırılması

Most cells can sense and change their shape to carry out fundamental cell processes. In many eukaryotes, the septin cytoskeleton is an integral component ...

Shotgun Lipidomics of Rodent Tissues

Kemirgen Dokularının Av Tüfeği Lipidomikleri

Lipids play a vital role as essential components of all prokaryotic and eukaryotic cells. Constant technological improvements in mass spectrometry have ...