Name: quantifying tissue-specific proteostatic decline in caenorhabditis elegans
Uploaded: 2021-09-07T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Quantifying Tissue-Specific Proteostatic Decline in Caenorhabditis elegans at JoVE.com

نود أن نشكر الأعضاء السابقين والحاليين في مختبر سامويلسون على مساعدتهم في صقل هذه الطريقة و/ أو المناقشة التي ساعدت على تطوير هذه المخطوطة. تم دعم الأبحاث التي تم الإبلاغ عنها في هذا المنشور من قبل المعهد الوطني للشيخوخة للمعاهد الوطنية للصحة تحت أرقام الجوائز RF1AG062593 وR21AG064519. المحتوى هو فقط مسؤولية المؤلفين ولا يمثل بالضرورة وجهات النظر الرسمية للمعاهد الوطنية للصحة. لم يكن للممولين أي دور في تصميم الدراسة أو جمع البيانات وتحليلها أو قرار نشر المخطوطة أو إعدادها.

1. إعداد الكواشف
<ol><li>اختر الجينات ذات الأهمية التي سيتم تعطيلها عن طريق RNAi القائم على التغذية. شراء مخزونات من HT115 E. القولونية التي تحتوي على استنساخ RNAi منالفائدة 20. بدلا من ذلك، subclone cDNA من الجين من الفائدة في موقع متعدد النسيلة من البلازميد L4440. ملاحظة: لمنع تدهور dsRNA داخ...

وتتميز الشيخوخة من قبل انخفاض تدريجي في البروتيوستاسيس. يتم الحفاظ على البروتيوستازي من خلال نظام معقد، شبكة بروتيوستاتيكي، للتحكم المنسق والديناميكي والمستجيب للإجهاد في طي البروتين وتدهوره وترجمته. لماذا يفشل البروتيوستاسي في سياق الشيخوخة غير مفهومة بشكل جيد ، ولكن epigenome المتحللة ، ...

البروتين التوازن (بروتيوستسيس) يعرف بأنه القدرة الخلوية للحفاظ على وظيفة مناسبة وقابلة للطي من البروتيوم. التحدي الكامن في البروتيوستاسيس هو ضمان طي جميع البروتينات بشكل صحيح والحفاظ عليها في تشكيل أصلي ، والذي يتم تضخيمه بشكل أكبر من خلال الطبيعة المتنوعة لحجم البروتين ، وتكوين الأحماض الأمينية ، والتكوين الهيكلي ، والاستقرار ، والدوران ، والتعبير ، والتجزيء دون الخلوي ، والتعديلات1. يتم الحفاظ على بروتيوستسيس من خلال العمل المنسق لشبكة بروتيوستاتيكي كبيرة، تتكون من ما يقرب من 2000 البروتينات الفريدة، والتي تنظم التوليف السليم، للطي، والاتجار، وتدهور داخل البروتيوم2،3. مكونات حصان العمل من شبكة بروتيوستاتيكي هي تسع عائلات رئيسية من المرافقين الجزيئية4. كل نوع من الأنسجة والخلايا يستخدم بشكل تفضيلي مجموعات فرعية محددة من المرافقين الجزيئية، ويفترض أن يتماشى مع مطالب مختلفة من البروتيوم متميزة5.
إحدى السمات المميزة للشيخوخة الطبيعية للكائنات الحية هي الانخفاض التدريجي وانهيار داء البروتيستاسيس الخلوي ، والذي يعتقد أنه أساس أساسي لظهور وتطور عدد متزايد من الأمراض المرتبطة بالعمر. على سبيل المثال، مرض الزهايمر، مرض باركنسون، مرض هنتنغتون، والتصلب الجانبي الضموري (ALS) تشترك في سمة مشتركة: في كل حالة من مظاهر التجدد العصبي مدفوعة التعديلات الوراثية التي تهيئ بروتين متحولة لتجميع (اميلويد-β/تاو، α-سينوكلين، HTT، FUS/TBD-43/SOD-1، على التوالي)6و7و8و9و10 . أثناء الشيخوخة ، تنخفض سلامة الشبكة البروتيوستيكية وعدم قابليتها للانحلال ، مما يؤدي إلى تراكم المجاميع البروتيوتوكسية التي تؤدي إلى خلل وظيفي في الخلايا وتجدد الأعصاب. من الجدير بالذكر أن أمراض تشكيل البروتين ليست فريدة من نوعها للخلايا العصبية ، وتحدث عبر أنسجة متعددة ، كما أبرزها مرض السكري من النوع الثاني ، والمايلوما المتعددة ، والتليف الكيسي11،12،13،14. ولذلك، فإن توضيح الآليات القادرة على الحفاظ على البروتيوستاسي سيسهل تطوير التدخلات المستهدفة لعلاج المرض وتعزيز الشيخوخة الصحية.
التربة الصغيرة nematode Caenorhabditis elegans (C. elegans) كان له دور فعال في اكتشاف الجينات وتوضيح المسارات التي تغير البروتيوستاسي. يتم الحفاظ على العديد من مكونات الشبكة البروتيوستاتيكية ومسارات نقل الإشارات التي تنظم البروتيوستازي تطوريا. وعلاوة على ذلك، قللت سي إليغانز من التعقيد والتكرار مقارنة بالنظم الفقارية، مما جعلها أكثر قابلية للتحليل الجيني واكتشاف الجينات. وتشمل المزايا الإضافية ل C. elegans التي أدت إلى استخدامه على نطاق واسع كنظام نموذجي لدراسة داء البروتيوستاسي: الجينوم الوراثي والوظيفي القوي ، ودورة حياة قصيرة (3 أيام) والعمر (3 أسابيع) ، والجينوم المدمج والشروح جيدا ، وتوافر مجموعة واسعة من المسوخ الوراثية ، وسهولة تصور التغيرات الخاصة بالأنسجة في بيولوجيا الخلايا باستخدام المراسلين الفلوريين.
يمكن قياس الاضمحلال التدريجي للبروتيوستاسي أثناء الشيخوخة بسهولة في C. elegans. أظهر مختبر موريموتو لأول مرة أن توسع البوليglutamine تنصهر إلى البروتين الفلوري الأصفر(polyQ::YFP)يمكن استخدامها لقياس الانخفاض البروتيوستاتيكي في C. elegans خلال الشيخوخة15،16،17،18. YFP الانصهار إلى 35 يكرر الجلوتامين أو أكثر نتيجة في تشكيل المرتبطة بالعمر من بؤر الفلورسنت جنبا إلى جنب مع علامات علم الأمراض الخلوية. وتجدر الإشارة إلى أن هذه المجموعة من توسع الجلوتامين تعكس طول المسالك البوليغلوتامين من بروتين هنتنغتين الذي يبدأ فيه رصد أمراض مرض هنتنغتون في البشر (عادة >35 CAG يكرر)19. وقد استخدمت سلالات مع التعبير عن polyQ::YFP داخل العضلات, الأمعاء, أو الخلايا العصبية للتأكد من أن الانخفاض المرتبط بالعمر من البروتيوستاسي يحدث عبر أنواع مختلفة من الخلايا والأنسجة. العضلات محددة polyQ::YFP التعبير (أي unc-54p::Q35::YFP)كان المراسل الأكثر استخداما على نطاق واسع الأنسجة محددة, كما تراكم بؤر الفلورسنت من السهل تحديد كميا خلال الأيام القليلة الأولى من مرحلة البلوغ باستخدام المجهر تشريح الفلورسنت بسيطة (الشكل 1A-1B). بالإضافة إلى ذلك ، تصبح الحيوانات مشلولة خلال منتصف العمر ، حيث ينهار البروتيوم داخل العضلات بسبب التأثير البروتيوتوكسي للمراسل(الشكل 1C). وبالمثل، يمكن أن يتبع الانخفاض المرتبط بالعمر في البروتيوستاسيس العصبي(rgef-1p::Q40::YFP)عن طريق التحديد الكمي المباشر لل البؤر / التكوين الكلي والانخفاضات المرتبطة بالعمر في الانحناءات المنسقة للجسم بعد وضع الحيوانات في السائل(الشكل 2).
هنا، نقدم بروتوكول مفصل حول كيفية قياس التقدم المعتمد على العمر من تراكم البروتين الكلي والسمية البروتوتوكسية المرتبطة الناجمة عن التعبير عن البوليغلوتامين يكرر داخل الأنسجة العصبية والعضلات في C. elegans. نحن نقدم أمثلة على النتائج النموذجية التي تم إنشاؤها باستخدام هذه السلالات والأساليب. علاوة على ذلك ، نظهر كيف استخدمنا هذه الأساليب لدراسة التنظيم النسخي للشبكة البروتيوستاتيكية. نناقش طرقا إضافية يمكن من خلالها دمج هؤلاء المراسلين بسهولة مع الكواشف الموجودة الأخرى أو تكييفها لشاشات أكبر.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>24 Well Culture Plates</td>
			<td>Greiner Bio-One</td>
			<td>#662102</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2 mL 96-well plates</td>
			<td>Greiner Bio-One</td>
			<td>#780286</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>600 &#181;L 96-well plates</td>
			<td>Greiner Bio-One</td>
			<td>#786261</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96-pin plate replicator</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>250520</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Air-permeable plate seal</td>
			<td>VWR</td>
			<td>60941-086</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>bacteriological agar</td>
			<td>Affymetrix/USB</td>
			<td>10906</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>bacto-peptone</td>
			<td>VWR</td>
			<td>90000-368</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C. elegans RNAi clone library in HT115 bacteria- Ahringer</td>
			<td>Source Bioscience</td>
			<td>C. elegans RNAi Collection (Ahringer)</td>
			<td>See also Kamath et. al, Nature 2003.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C. elegans RNAi clone library in HT115 bacteria- Vidal</td>
			<td>Source Bioscience</td>
			<td>C. elegans ORF-RNAi Resource (Vidal)</td>
			<td>See also Rual et. al, Genome Research 2004. This library is also available from Dharmacon.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FuDR (5-Fluoro-2&#39;-deoxyuridine)</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td>L16497</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass microscope cover slips</td>
			<td>VWR</td>
			<td>48404-455</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass microscope slides</td>
			<td>VWR</td>
			<td>160004-422</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IPTG (isopropyl beta-D-1-thigalactopyranoside)</td>
			<td>Gold Bio</td>
			<td>12481C100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Retangular non-treated single-well plate, 128x86mm</td>
			<td>Thermo-Fisher</td>
			<td>242811</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Azide, CAS #26628-22-8</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S2002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zeiss Axio Imager M2m microscope with AxioVision v4.8.2.0 software</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>unknown</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zeiss StemiSV11 M2 Bio Quad microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>unknown</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

quantifying tissue-specific proteostatic decline in caenorhabditis elegans

القدرة على الحفاظ على وظيفة سليمة وقابلة للطي من البروتيوم (البروتين التوازن) تنخفض خلال الشيخوخة العادية، مما يسهل ظهور عدد متزايد من الأمراض المرتبطة بالعمر. على سبيل المثال، البروتينات مع توسعات البوليغلوتامين عرضة للتراكم، كما يتضح من بروتين هنتنغتين وما يصاحبه من بداية مرض هنتنغتون. وقد درس على نطاق واسع تدهور المرتبطة بالعمر من البروتيوم من خلال استخدام elegans Caenorhabditis المعدلة وراثيا التعبير عن polyQ يكرر تنصهر إلى بروتين الفلورسنت الأصفر (YFP). هذا النموذج الحيواني المعدل وراثيا polyQ::YFP يسهل القياس الكمي المباشر للانخفاض المرتبط بالعمر من البروتيوم من خلال تصوير التكوين التدريجي لل البؤر الفلورية (أي مجاميع البروتين) وظهور عيوب الحركة اللاحقة التي تتطور نتيجة لانهيار البروتيوم. علاوة على ذلك ، يمكن أن يكون التعبير عن المتحول متعدد التخصصات: YFP مدفوعا بجهات مروجة خاصة بالأنسجة ، مما يسمح بتقييم البروتيوستاسي عبر الأنسجة في سياق كائن حي متعدد الخلايا سليم. هذا النموذج قابل للغاية للتحليل الجيني ، وبالتالي توفير نهج لتحديد حجم الشيخوخة التي تكمل اختبارات العمر. نحن نصف كيفية قياس بدقة متعدد الأضلاع::تشكيل بؤر YFP داخل الخلايا العصبية أو عضلة جدار الجسم أثناء الشيخوخة، وظهور العيوب السلوكية اللاحقة. بعد ذلك، نسلط الضوء على كيفية تكييف هذه النهج مع الإنتاجية العالية، والتطبيقات المستقبلية المحتملة باستخدام استراتيجيات ناشئة أخرى للتحليل الجيني C. elegans.

في C. elegans، كان نموذج تكرار البوليglutamine مفيدا لتحديد الجينات التي تنظم الشبكة البروتيوستاتيكية. على سبيل المثال، أظهرنا سابقا أن كيناز البروتين التفاعل homeodomain (hpk-1)، وهو عامل مساعد النسخ، ويؤثر على البروتيوستاسيس أثناء الشيخوخة من خلال تنظيم التعبير عن autophagy والمرافقين الجزيئية<su...

Watch this Scientific Journal Video about Quantifying Tissue-Specific Proteostatic Decline in Caenorhabditis elegans at JoVE.com

Quantifying Tissue-Specific Proteostatic Decline in Caenorhabditis elegans

انخفاض بروتيوستاتيكي هو السمة المميزة للشيخوخة، وتسهيل ظهور الأمراض العصبية. نحن الخطوط العريضة لبروتوكول لقياس قياس كميا proteostasis في اثنين من مختلف الأنسجة Elegans Caenorhabditis من خلال التعبير heterologous من polyglutamine يكرر تنصهر لمراسل الفلورسنت. يسمح هذا النموذج بسرعة في التحليل الجيني في الجسم الحي للبروتيوستاسي.

قياس الانخفاض البروتيني البروتيوستيكي الخاص بالأنسجة في إليجانات Caenorhabditis

The ability to maintain proper function and folding of the proteome (protein homeostasis) declines during normal aging, facilitating the onset of a ...

استخدام التعبير عن الأنسجة محددة من مراسل الفلورسنت polyglutamine في C.elegans مهم لأنه يسمح باكتشاف وتوصيف المنظمين البروتيوستاسي في سياق كائن حي متعدد الخلايا سليمة. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها تسمح بالتصور والتقدير الكمي للانخفاض المرتبط بالعمر في البروتيوستاسيس الخلوي في الجسم الحي ، وهو أمر ضروري للحصول على رؤية ميكانيكية أعمق في كيفية الحفاظ على الكائنات الحية للطي المناسب ووظيفة البروتيوم وآثار الشيخوخة. إن توضيح الآليات القادرة على الحفاظ على داء البروتيوستاسي سيسهل تطوير التدخلات المستهدفة لعلاج الأمراض المرتبطة بالشيخوخة التي يتعرض فيها البروتيوستاسي للخطر وتعزيز الشيخوخة الصحية.انهيار البروتيوستاسي هو مشكلة عيادة ضخمة ، لأنه يكمن وراء تطور أمراض طي البروتين ، بما في ذلك مرض الزهايمر ، باركنسون ، مرض هنتنغتون ، والتصلب الجانبي الضموري. ابدأ باستخدام لوحات بيتري قطرها 6 سنتيمترات لإعداد خمس لوحات أجار لكل حالة اختبار. للتجارب مع RNAI، حث إنتاج dsRNA في تحويل HT115 E.coli واستخدام أجار RNAI.استخدم OP50 E.coli على أجار NGM القياسي للتجارب بدون RNAi. تنمو ثقافات الإشريكية القولونية بين عشية وضحاها عند 37 درجة مئوية بينما تهتز عند 220 دورة في الدقيقة. في اليوم التالي، بيليه البكتيريا عن طريق الطرد المركزي في 2، 400 G لمدة 15 إلى 20 دقيقة، ثم يستنشق supernatant وإعادة تعليق بيليه في عشر حجم بدءا من رطل.Aliquot 200 ميكرولتر من البكتيريا المركزة لكل لوحة والسماح للوحات مفتوحة لتجف في بيئة نظيفة حتى تم امتصاص جميع السائل. لمزامنة C.Elegans مع علاج الهيبوكلوريت ، اغسل هيرمافروديت gravid مرتين مع المخزن المؤقت M9 ، ثم قم بنقلها إلى أنبوب جديد واحتضانها في 5 ملليلتر من محلول الهيبوكلوريت لمدة خمس دقائق ، وهزها كل دقيقة. بعد الحضانة، تدور أسفل الحيوانات وغسلها ثلاث مرات مع المخزن المؤقت M9.السماح للأجنة بالفقس في أنابيب بين عشية وضحاها في 3 ملليلتر من محلول M9 مع دوران عند 20 درجة مئوية. حساب كثافة الحيوانات L1 عن طريق إسقاط 10 ميكرولتر من محلول L1 ثلاث مرات على لوحة 6 سم والعد عدد الحيوانات L1. بشكل دوري، اخلطي حلول L1 لمنع الحيوانات من الاستقرار.البذور 50 L1 واحد على كل لوحة، عد وتسجيل عدد المصنفين، ونقل لوحات إلى حاضنة 20 درجة مئوية. بدلا من ذلك، لمزامنة الحيوانات عن طريق وضع البيض، ضع خمسة إلى عشرة بالغة صغيرة ومرشدة على كل طبق لمدة أربع إلى ست ساعات والسماح لهم بوضع البيض حتى يكون هناك ما يقرب من 50 بيضة لكل طبق. إزالة جميع البالغين gravid ونقل لوحات مع البيض إلى حاضنة 20 درجة مئوية.زراعة الحيوانات حتى المرحلة L4، والتي سوف تستغرق ما يقرب من 40 ساعة في 20 درجة مئوية. ثم أضف 50 ميكرولتر من 160 مرة FUDR. لقياس الانخفاض في النتوءات في الأنسجة العضلية، اختر 20 حيوانا ووضعها على شريحة مجهر مع وسادة agarose 3٪ وقطلة 5 ميكرولتر من 10 ملليمولار من الصوديوم azide.بعد أن يتم شل حركة جميع الديدان ، صور الأجسام الكاملة للحيوانات باستخدام عدسة تكبير 10 X. استخدم فلتر FITC أو YFP ونفس التعرض لكل. عند الانتهاء، تجاهل الشرائح.عد عدد بؤر في عضلات جدار الجسم من الحيوان كله. البؤر هي إشارات أكثر إشراقا تتخللها التي يمكن تمييزها عن إشارة قابلة للذوبان باهتة في الخلفية. في أيام التسجيل ، انظر إلى اللوحات مع الحيوانات وسجل عدد الحيوانات المشلولة ، ثم قم بإزالة الحيوانات المشلولة من الطبق.عند الانتهاء من التجربة، وحساب معدل الشلل لكل حالة ورسم تطور الشلل. لقياس الانخفاض في البروتيوستازي في الأنسجة العصبية ، قم بتركيب الديدان على شريحة كما هو موضح سابقا واأخذ صور Z stack لرأس الحيوانات على مجهر مركب باستخدام عدسة تكبير 40 X. تجاهل الشرائح بعد التصوير.بعد الحصول على الصور، تسطيح مداخن Z واستخدامها لتحديد عدد البؤر في الخلايا العصبية الموجودة على منطقة حلقة العصب. رسم تطور تراكم بؤر YFP من الأيام 4 و 6 و 8 و 10. في اليوم الثاني من مرحلة البلوغ، اختر 10 متزامنة من الطبق ووضعها على قطرة 10 ميكرولتر من المخزن المؤقت M9 على شريحة المجهر.كرر هذه الخطوة أربع مرات على الأقل للحصول على عينة من 40 حيوانا أو أكثر. يسجل الفيديو حركة الحيوانات لمدة 30 ثانية على مجهر ستيريو مع كاميرا قادرة على الفيديو. مرة واحدة يتم تسجيل جميع أشرطة الفيديو مع الحيوانات التي سيتم تحليلها، وتشغيل الفيديو وتسجيل الانحناءات الجسم من كل.رسم عدد الانحناءات الجسم لكل في الرسم البياني العمود، حيث تمثل كل نقطة عدد الانحناءات الجسم في 30 ثانية على محور Y والظروف المختلفة التي تم اختبارها على محور X. كان نموذج تكرار البوليغلوتامين مفيدا في تحديد الجينات التي تنظم الشبكة البروتيوستاتيكية. ينتج عن تعبير متعدد العضلات-YFP تراكم بؤر فلورية يسهل تحديدها كميا تحت مجهر تشريح فلوري بسيط.تصبح الحيوانات مشلولة خلال منتصف العمر ، حيث ينهار البروتيوم داخل العضلات بسبب التأثير البروتيوكسي للمراسل. يمكن متابعة الانخفاض المرتبط بالعمر في البروتيستاسيس العصبي من خلال التحديد الكمي المباشر للتشكيل الكلي والانخفاضات في الانحناءات المنسقة للجسم بعد وضع الحيوانات في السائل. وقد استخدمت هذه الطريقة لإظهار أن مجال هونو التفاعل بين كيناز البروتين، وهو عامل مساعد النسخ، يؤثر على البروتيوستاسي أثناء الشيخوخة من خلال تنظيم التعبير عن autophagy والمرافقين الجزيئية.فقدان HPK-1 يزيد من عدد المجاميع Q35-YFP التي تتراكم أثناء الشيخوخة. وعرضت التحكم ما متوسطه 18 تجميعا، في حين أظهرت الحيوانات المعالجة من نوع HPK1 null mutant وHPK1 RNAi ما متوسطه 28 و26 تجميعا على التوالي. بحلول اليوم الثامن من مرحلة البلوغ، أصيب 77 إلى 78٪ من الحيوانات الناقصة HPK1 بالشلل، مقارنة ب 50٪ فقط من السيطرة.بالإضافة إلى ذلك ، تم إثبات الإفراط في التعبير عن HPK1 لتنظيم تكوين البروتين الكلي وحماية الحيوانات القديمة من الشلل المرتبط ب Q35-YFP أثناء الشيخوخة. تقيس هذه الطريقة الانخفاض العام للبروتيوم داخل نوع الخلية. توجد العديد من الطرق لتقييم التغيرات في مكونات محددة من الشبكة البروستاتا.معا، فإنها توفر صورة شاملة. انخفاض البروتيوستاسي هو السمة المميزة للشيخوخة. ويسمح هذا النهج للباحثين بتحديد هذا الانخفاض كميا.عندما يقترن التحليل الجيني، انها أداة قوية للاكتشاف.

Research

JoVE Journal

Biology

Quantifying Tissue-Specific Proteostatic Decline in Caenorhabditis elegans

Isolation and In vitro Activation of Caenorhabditis elegans Sperm

Isolation and In vitro Activation of Caenorhabditis elegans Sperm

والعزلة في المختبر تفعيل انواع معينة ايليجانس الحيوانات المنوية

Males and hermaphrodites are the two naturally found sexual forms in the nematode C. elegans. The amoeboid sperm are produced by both males and ...

Solid Plate-based Dietary Restriction in Caenorhabditis elegans

Solid Plate-based Dietary Restriction in Caenorhabditis elegans

اللوحة الصلبة المستندة إلى تقييد الغذائية في انواع معينة ايليجانس</em

Reduction of food intake without malnutrition or starvation is known to increase lifespan and delay the onset of various age-related diseases in a wide ...

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

الوقت الفاصل بين مرحلة التطور الجنيني المبكر من الميكروسكوب في انواع معينة ايليجانس

Caenorhabditis elegans has often been used as a model system in studies of early developmental processes.  The transparency of the 
embryos, the genetic ...

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

الأساسية<em&gt; Caenorhabditis ايليجانس</em&gt; طرق: التزامن والمراقبة

Research into the molecular and developmental biology of the nematode Caenorhabditis elegans was begun in the early seventies by Sydney Brenner and it has ...

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

استخراج البروستاجلاندين والتحليل في<em&gt; انواع معينة ايليجانس</em

Caenorhabditis elegans is emerging as a powerful animal model to study the biology of lipids1-9. Prostaglandins are an important class of eicosanoids, ...

Dietary Supplementation of Polyunsaturated Fatty Acids in Caenorhabditis elegans

Dietary Supplementation of Polyunsaturated Fatty Acids in Caenorhabditis elegans

مكملات غذائية من الأحماض الدهنية غير المشبعة في<em&gt; انواع معينة ايليجانس</em

Fatty acids are essential for numerous cellular functions. They serve as efficient energy storage molecules, make up the hydrophobic core of membranes, ...

Cultivation of Caenorhabditis elegans in Three Dimensions in the Laboratory

Cultivation of Caenorhabditis elegans in Three Dimensions in the Laboratory

زراعة<em&gt; انواع معينة ايليجانس</em&gt; في ثلاثة أبعاد في المختبر

The use of genetic model organisms such as Caenorhabditis elegans has led to seminal discoveries in biology over the last five decades. Most of what we ...

Combined Nucleotide and Protein Extractions in Caenorhabditis elegans

Combined Nucleotide and Protein Extractions in Caenorhabditis elegans

الجمع بين النوكليوتيدات والاستخراج البروتين في ايليجانس كاينورهابديتيس

A single biological sample holds a plethora of information, and it is now common practice to simultaneously investigate several macromolecules to capture ...

Measurement of Oxygen Consumption Rates in Intact Caenorhabditis elegans

Measurement of Oxygen Consumption Rates in Intact Caenorhabditis elegans

قياس معدلات استهلاك الأوكسجين في سليمة ايليجانس كاينورهابديتيس

Optimal mitochondrial function is critical for healthy cellular activity, particularly in cells that have high energy demands like those in the nervous ...

Using Caenorhabditis elegans to Screen for Tissue-Specific Chaperone Interactions

Using Caenorhabditis elegans to Screen for Tissue-Specific Chaperone Interactions

استخدام Elegans Caenorhabditis إلى الشاشة لتفاعلات Chaperone الأنسجة محددة

Correct folding and assembly of proteins and protein complexes are essential for cellular function. Cells employ quality control pathways that correct, ...