Name: quantifying tissue-specific proteostatic decline in caenorhabditis elegans
Uploaded: 2021-09-07T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Quantifying Tissue-Specific Proteostatic Decline in Caenorhabditis elegans at JoVE.com

ברצוננו להודות לחברי מעבדת סמואלסון בעבר ובהווה על עזרתם בחידוד שיטה זו ו/או דיון שסייעו בפיתוח כתב יד זה. מחקר שדווח בפרסום זה נתמך על ידי המכון הלאומי להזדקנות המכונים הלאומיים לבריאות תחת מספרי פרס RF1AG062593 ו- R21AG064519. התוכן הוא באחריות המחברים בלבד ואינו מייצג בהכרח את הדעות הרשמיות של המכונים הלאומיים לבריאות. למממנים לא היה כל תפקיד בעיצוב מחקר, איסוף וניתוח נתונים, החלטה לפרסם או הכנת כתב היד.

1. הכנת ריאגנטים
<ol><li>בחר גנים מעניינים להיות מומת באמצעות RNAi מבוסס האכלה. רכישת מניות של HT115 E. coli המכיל את שיבוט RNAi של ריבית20. לחלופין, תת-תבודד את ה-CDNA של הגן המעניין לאתר הרב-תכליתי של הפלסמיד L4440. הערה: כדי למנוע השפלה של dsRNA בתוך החיידקים, השתמש בזן HT115. זהו זן E. coli חס...

ההזדקנות מאופיינת בירידה הדרגתית בפרוטוסטזיס. פרוטאוסטזיס מתוחזקת על ידי מערכת מורכבת, הרשת הפרוטאוסטקטית, לשליטה מתואמת, דינמית, מגיבה ללחץ של קיפול חלבונים, השפלה ותרגום. מדוע פרוטאוסטזיס נכשל במהלך ההזדקנות אינו מובן היטב, אך אפיגנום מתפורר, ירידה בזינוק בתגובות הלחץ, ואובדן צליבה מפצ...

הומאוסטזיס חלבון (פרוטאוסטזיס) מוגדר כיכולת התאית לשמור על תפקוד תקין וקיפול הפרוטאום. האתגר המובנה בפרוטוסטזיס הוא להבטיח שכל החלבונים מקופלים ומתוחזקים כראוי בקונפורמציה מקומית, המוגברת עוד יותר על ידי האופי המגוון של גודל החלבון, הרכב חומצות האמינו, קונפורמציה מבנית, יציבות, מחזור, ביטוי, מידור תת-תאי ושינויים1. Proteostasis נשמר באמצעות פעולה מתואמת של רשת פרוטאוסטטיקה גדולה, המורכבת מכ -2000 חלבונים ייחודיים, המסדירים סינתזה נכונה, קיפול, סחר והשפלה בתוך הפרוטאום2,3. רכיבי סוס העבודה של הרשת הפרוטאוסטאטית הם תשע משפחות עיקריות שלמלווים מולקולריים 4. כל רקמה וסוג תא מעדיף להשתמש בתת-קבוצות ספציפיות של מלווים מולקולריים, ככל הנראה בקנה אחד עם הדרישות השונות של פרוטאומים נפרדים5.
סימן היכר אחד של הזדקנות אורגניזמית נורמלית הוא הירידה המתקדמת והתמוטטות הפרוטאוסטזיס התאי, אשר נחשב כבסיס להתפרצות והתקדמות של מספר גדל והולך של מחלות הקשורות לגיל. לדוגמה, מחלת אלצהיימר, פרקינסון, מחלת הנטינגטון וטרשת אמיוטרופית לרוחב (ALS) חולקות מאפיין משותף: בכל מקרה ביטוי של ניוון עצבי מונע על ידי שינויים גנטיים הנטיות חלבון מוטנטי לצבירה (עמילואיד-β/טאו, α-סינוקלין, HTT, FUS/TBD-43/SOD-1, בהתאמה)6,7,8,9,10 . במהלך ההזדקנות, השלמות וחוסר ההגבלות של הרשת הפרוטאוסטקטית יורדת, מה שגורם להצטברות של אגרגטים פרוטאוטוקסיים הגורמים לתפקוד לקוי של התאים ולדגנרציה עצבית. ראוי לציין, מחלות קונפורמציה חלבון אינם ייחודיים נוירונים, להתרחש על פני רקמות מרובות, כפי מודגש על ידי סוכרת מסוג II, מיאלומה נפוצה, סיסטיק פיברוזיס11,12,13,14. לכן, מנגנונים מובהרים המסוגלים לשמר פרוטאוסטזיס יקלו על פיתוח התערבויות ממוקדות לטיפול במחלות ולקדם הזדקנות בריאה.
אלגנס האדמה הקטנה Nematode Caenorhabditis (C. elegans) סייעה בגילוי גנים ובמסלולים מבהירים המשנים פרוטאוסטזיס. רכיבים רבים של הרשת הפרוטאוסטקטית ומסלולי התמרת האות המווסתים את הפרוטאוסטזיס נשמרים מבחינה אבולוציונית. יתר על כן, C. elegans הפחיתה את המורכבות והיתירות ביחס למערכות בעלי חוליות, מה שהופך אותה למקובלת יותר לניתוח גנטי ולגילוי גנים. יתרונות נוספים של C. elegans שהובילו אותו להיות בשימוש נרחב כמערכת מודל לחקר פרוטאוסטזיס כוללים: גנומיקה גנטית ותפקודית רבת עוצמה, מחזור חיים קצר (3 ימים) ותוחלת חיים (3 שבועות), גנום קומפקטי ומובהר היטב, הזמינות של מגוון רחב של מוטציות גנטיות, ואת הקלות של הדמיית שינויים ספציפיים לרקמות בביולוגיה של התא באמצעות כתבים פלואורסצנטיים.
ניתן לכמת בקלות את הריקבון המתקדם של פרוטאוסטזיס במהלך ההזדקנות ב- C. elegans. מעבדת מורימוטו הוכיחה לראשונה כי הרחבת פוליגלוטמין התמזגה לחלבון פלואורסצנטי צהוב (polyQ::YFP) יכולה לשמש לכימות ירידה פרוטאוסטקטית ב- C. elegans במהלך הזדקנות15,16,17,18. היתוך YFP ל-35 חזרות על גלוטמין או יותר גורמות להיווצרות הקשורה לגיל של מוקדי פלורסנט יחד עם סימנים לפתולוגיה תאית. ראוי לציין, טווח זה של הרחבת גלוטמין משקף את אורך מערכת הפוליגלוטמין של חלבון הנטינגטון שבו הפתולוגיה של מחלת הנטינגטון מתחילה להיות נצפתה בבני אדם (בדרך כלל >35 CAG חוזר)19. זנים עם ביטוי של polyQ::YFP בתוך תאים שריריים, מעיים או תאי עצב נוצלו כדי לאשר כי הירידה הקשורה לגיל של פרוטאוסטזיס מתרחשת על פני סוגי תאים ורקמות שונים. ביטוי YFP ספציפי לשרירים (כלומר, unc-54p::Q35::YFP) היה הכתב הספציפי לרקמות הנפוץ ביותר, שכן קל לכמת מוקדי פלורסנט מצטברים בימים הראשונים של הבגרות באמצעות מיקרוסקופ פשוט של ניתוח פלואורסצנטי (איור 1A-1B). בנוסף, בעלי חיים הופכים משותקים במהלך אמצע החיים, כמו פרוטאום בתוך השריר מתמוטט בשל ההשפעה הפרוטאוטוקסית של הכתב (איור 1C). באופן דומה, ניתן לעקוב אחר הירידה הקשורה לגיל בפרוטוסטזיס העצבי (rgef-1p::Q40::YFP) על ידי כימות ישיר של היווצרות מוקדים/צבירה וירידות הקשורות לגיל בכיפופי גוף מתואמים לאחר הצבת בעלי חיים בנוזל (איור 2).
כאן, אנו מציגים פרוטוקול מפורט על איך למדוד את ההתקדמות תלוית הגיל של הצטברות צבירה חלבון ואת proteotoxicity הקשורים המושרה על ידי הביטוי של פוליגלוטמין חוזר בתוך רקמת נוירונים ושרירים C. elegans. אנו מספקים דוגמאות לתוצאות אופייניות שנוצרו באמצעות זנים ושיטות אלה. יתר על כן, אנו מראים כיצד השתמשנו בשיטות אלה כדי ללמוד רגולציה תמלול של הרשת proteostatic. אנו דנים בדרכים נוספות שבהן ניתן לשלב כתבים אלה בקלות עם ריאגנטים קיימים אחרים או להתאים אותם למסכים גדולים יותר.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>24 Well Culture Plates</td>
			<td>Greiner Bio-One</td>
			<td>#662102</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2 mL 96-well plates</td>
			<td>Greiner Bio-One</td>
			<td>#780286</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>600 &#181;L 96-well plates</td>
			<td>Greiner Bio-One</td>
			<td>#786261</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96-pin plate replicator</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>250520</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Air-permeable plate seal</td>
			<td>VWR</td>
			<td>60941-086</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>bacteriological agar</td>
			<td>Affymetrix/USB</td>
			<td>10906</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>bacto-peptone</td>
			<td>VWR</td>
			<td>90000-368</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C. elegans RNAi clone library in HT115 bacteria- Ahringer</td>
			<td>Source Bioscience</td>
			<td>C. elegans RNAi Collection (Ahringer)</td>
			<td>See also Kamath et. al, Nature 2003.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C. elegans RNAi clone library in HT115 bacteria- Vidal</td>
			<td>Source Bioscience</td>
			<td>C. elegans ORF-RNAi Resource (Vidal)</td>
			<td>See also Rual et. al, Genome Research 2004. This library is also available from Dharmacon.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FuDR (5-Fluoro-2&#39;-deoxyuridine)</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td>L16497</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass microscope cover slips</td>
			<td>VWR</td>
			<td>48404-455</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass microscope slides</td>
			<td>VWR</td>
			<td>160004-422</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IPTG (isopropyl beta-D-1-thigalactopyranoside)</td>
			<td>Gold Bio</td>
			<td>12481C100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Retangular non-treated single-well plate, 128x86mm</td>
			<td>Thermo-Fisher</td>
			<td>242811</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Azide, CAS #26628-22-8</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S2002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zeiss Axio Imager M2m microscope with AxioVision v4.8.2.0 software</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>unknown</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zeiss StemiSV11 M2 Bio Quad microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>unknown</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

quantifying tissue-specific proteostatic decline in caenorhabditis elegans

היכולת לשמור על תפקוד תקין וקיפול הפרוטאום (הומיאוסטזיס חלבון) יורדת במהלך ההזדקנות הרגילה, מה שמקל על תחילתן של מספר גדל והולך של מחלות הקשורות לגיל. לדוגמה, חלבונים עם הרחבות פוליגלוטמין נוטים לצבירה, כפי שמדגים את חלבון הנטטין ואת התפרצות במקביל של מחלת הנטינגטון. ההידרדרות הקשורה לגיל של הפרוטאום נחקרה בהרחבה באמצעות אלגנים מהונדסים של Caenorhabditis המבטאים חזרות polyQ הותכו לחלבון פלואורסצנטי צהוב (YFP). מודל זה של בעלי חיים מהונדסים מסייע לכימות ישיר של הירידה הקשורה לגיל של הפרוטאום באמצעות הדמיית היווצרות מתקדמת של מוקדי פלורסנט (כלומר, אגרגטים של חלבונים) והתפרצות מאוחרת יותר של פגמים בקטר המתפתחים כתוצאה מקריסת הפרוטאום. יתר על כן, הביטוי של polyQ::YFP transgene יכול להיות מונע על ידי מקדמים ספציפיים לרקמות, המאפשר הערכה של פרוטאוסטזיס על פני רקמות בהקשר של אורגניזם רב תאי שלם. מודל זה נוח מאוד לניתוח גנטי, ובכך מספק גישה לכימות ההזדקנות המשלימה לבדיקות תוחלת חיים. אנו מתארים כיצד למדוד במדויק polyQ::YFP היווצרות מוקדים בתוך נוירונים או שריר דופן הגוף במהלך ההזדקנות, ואת תחילתו של פגמים התנהגותיים הבאים. לאחר מכן, אנו מדגישים כיצד ניתן להתאים גישות אלה לתפוקה גבוהה יותר, ויישומים עתידיים פוטנציאליים באמצעות אסטרטגיות מתפתחות אחרות לניתוח גנטי C. elegans.

ב C. elegans, מודל חוזר פוליגלוטמין כבר אינסטרומנטלי לזיהוי של גנים המסדירים את הרשת הפרוטאוסטלית. לדוגמה, הראינו בעבר כי הומיודומיין אינטראקציה חלבון קינאז (HPK-1),קופקטור תמלול, משפיע על פרוטאוסטזיס במהלך ההזדקנות על ידי ויסות הביטוי של autophagy ומלוויםמולקולריים 31. מצאנו כ...

Watch this Scientific Journal Video about Quantifying Tissue-Specific Proteostatic Decline in Caenorhabditis elegans at JoVE.com

Quantifying Tissue-Specific Proteostatic Decline in Caenorhabditis elegans

ירידה פרוטאוסטלית היא סימן היכר של הזדקנות, להקל על תחילת מחלות ניווניות. אנו מתארים פרוטוקול כדי למדוד באופן כנותב פרוטאוסטזיס בשתי רקמות אלגנים שונים Caenorhabditis באמצעות ביטוי הטרולוגי של פוליגלוטמין חוזר התמזג לכתב פלואורסצנטי. מודל זה מאפשר ניתוח גנטי מהיר של פרוטאוסטזיס.

כימות ירידה פרוטאוסטטית ספציפית לרקמות ב elegans Caenorhabditis

The ability to maintain proper function and folding of the proteome (protein homeostasis) declines during normal aging, facilitating the onset of a ...

השימוש בביטוי ספציפי לרקמות של כתב פלואורסצנטי פוליגלוטמין ב C.elegans הוא משמעותי כי זה מאפשר גילוי ואפיון של רגולטורים פרוטאוסטזיס בהקשר של אורגניזם רב תאי שלם. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שהיא מאפשרת הדמיה וכימות של הירידה הקשורה לגיל בפרוטוסטזיס התאי ב vivo, אשר חיוני כדי לקבל תובנה מכניסטית עמוקה יותר על איך אורגניזמים לשמור על קיפול ותפקוד נאותים של הפרוטאום ואת ההשפעות של ההזדקנות. מנגנוני פיגור המסוגלים לשמר פרוטאוסטזיס יקלו על פיתוח התערבויות ממוקדות לטיפול במחלות הקשורות להזדקנות שבהן פרוטאוסטזיס נפגע ולקדם הזדקנות בריאה.קריסת פרוטאוסטזיס היא בעיה מסיבית במרפאה, שכן היא עומדת בבסיס ההתפתחות של מחלות תיעולים בחלבון, כולל אלצהיימר, פרקינסון, מחלת הנטינגטון וטרשת אמיוטרופית לרוחב. התחילו בשימוש בלוחות פטרי בקוטר 6 ס"מ להכנת חמש צלחות אגר לכל מצב בדיקה. לניסויים עם RNAi, לגרום לייצור dsRNA ב HT115 E.coli השתנה ולהשתמש אגר RNAi.השתמש OP50 E.coli על אגר NGM סטנדרטי לניסויים ללא RNAi. לגדל את תרביות E.coli לילה ב 37 מעלות צלזיוס תוך רועד ב 220 סל"ד. למחרת, גלולה החיידקים על ידי centrifugation ב 2, 400 G במשך 15 עד 20 דקות, ולאחר מכן לשאוף supernatant ולהשעות מחדש את הכדור בעשירית של נפח ההתחלה של lb.Aliquot 200 מיקרוליטרים של חיידקים מרוכזים לכל צלחת ולאפשר לוחות פתוחים להתייבש בסביבה נקייה עד כל הנוזל נספג. כדי לסנכרן את C.Elegans עם טיפול hypochlorite, לשטוף הרמפרודיטים gravid פעמיים עם חוצץ M9, ולאחר מכן להעביר אותם צינור טרי ודגרה ב 5 מיליליטר של פתרון hypochlorite במשך חמש דקות, מנענע אותם כל דקה. לאחר הדגירה, לסובב את החיות ולשטוף אותם שלוש פעמים עם חוצץ M9.אפשר לעוברים לבקוע בצינורות במהלך הלילה ב 3 מיליליטר של פתרון M9 עם סיבוב ב 20 מעלות צלזיוס. לחשב את הצפיפות של בעלי חיים L1 על ידי הפלת 10 microliters של פתרון L1 שלוש פעמים על צלחת 6 ס"מ וספירת מספר בעלי החיים L1. מעת לעת, מערבבים את פתרונות L1 כדי למנוע מבעלי החיים להתיישב.זרע 50 L1 בעלי חיים אחד על כל צלחת, לספור ולתעד את המספר זרעים, ולהעביר את הצלחות לחממה 20 מעלות צלזיוס. לחלופין, כדי לסנכרן בעלי חיים באמצעות מטיל ביצים, מניחים חמישה עד עשרה בעלי חיים בוגרים צעירים וgravid על כל צלחת במשך ארבע עד שש שעות ולאפשר להם להטיל ביצים עד שיש כ 50 ביצים לכל צלחת. מוציאים את כל המבוגרים הגרביד ומעבירים את הצלחות עם הביצים לאינקובטור של 20 מעלות צלזיוס.לגדל את החיות עד שלב L4, אשר ייקח כ 40 שעות ב 20 מעלות צלזיוס. לאחר מכן הוסף 50 מיקרוליטרים של פי 160 FUDR. כדי למדוד ירידה בפרוטוסטזיס ברקמת השריר, בחר 20 בעלי חיים והרכב אותם על שקופית מיקרוסקופ עם כרית אגרוז 3% וירידה של 5 מיקרוליטר של 10 מילימילימטר נתרן אזיד.לאחר שכל התולעים משותקות, צלם את כל גופם של בעלי החיים באמצעות עדשת הגדלה של 10 X. השתמש במסנן FITC או YFP ובאותה חשיפה עבור כל בעל חיים. בסיום, מחק את השקופיות.תספור את מספר המוקדים בשרירי דופן הגוף של החיה כולה. המוקדים הם אותות מנוקבים בהירים יותר שניתן להבדיל בין האות המסיס בעמעום ברקע. בימי הניקוד, הביטו בלוחות עם בעלי החיים ותיעדו את מספר בעלי החיים המשותקים, ואז הסירו בעלי חיים משותקים מהצלחת.בסיום הניסוי, לחשב את קצב השיתוק עבור כל תנאי להתוות את התקדמות השיתוק. כדי למדוד ירידה בפרוטוסטזיס ברקמה העצבית, הר את התולעים בשקופית כפי שתואר בעבר וקח תמונות מחסנית Z של ראש החיות על מיקרוסקופ מורכב באמצעות עדשת הגדלה של 40 X. השלך את השקופיות לאחר ההדמיה.לאחר רכישת התמונות, לשטח את ערימות Z ולהשתמש בהם כדי לכמת את מספר המוקדים בתאי עצב הממוקמים על אזור טבעת העצבים. התווה את ההתקדמות של הצטברות מוקדי YFP מימים 4, 6, 8 ו -10. ביום השני לבגרות, בחר 10 בעלי חיים מסונכרנים מהצלחת והנח אותם על טיפה של 10 מיקרוליטר של חוצץ M9 במגלשת מיקרוסקופ.חזור על שלב זה לפחות ארבע פעמים כדי לקבל מדגם של 40 בעלי חיים או יותר. וידאו להקליט את התנועה של בעלי החיים לתקופה של 30 שניות על מיקרוסקופ סטריאו עם מצלמה מסוגל וידאו. לאחר כל קטעי וידאו עם בעלי החיים להיות מנותח מוקלטים, להפעיל את הווידאו ולהבקיע את כיפופי הגוף של כל חיה.התווה את מספר כיפופי הגוף עבור כל חיה בגרף עמודות, כאשר כל נקודה מייצגת את מספר כיפופי הגוף ב-30 שניות על ציר ה-Y ואת התנאים השונים שנבדקו בציר X. מודל החזרה של פוליגלוטמין סייע בזיהוי גנים המסדירים את הרשת הפרוטאוסטלית. ביטוי polyQ-YFP ספציפי לשרירים גורם להצטברות של מוקדי פלורסנט שקל לכמת תחת מיקרוסקופ ניתוח פלואורסצנטי פשוט.בעלי החיים הופכים משותקים במהלך אמצע החיים, כמו פרוטאום בתוך השריר מתמוטט בשל ההשפעה הפרוטאוטוקסית של הכתב. הירידה הקשורה לגיל בפרוטוסטזיס העצבי יכולה להיות מלווה בכימות ישיר של היווצרות מצטברת וירידות בכיפופי גוף מתואמים לאחר הצבת בעלי חיים בנוזל. שיטה זו שימשה כדי להראות כי הדומיין ההומיאו אינטראקציה חלבון קינאז, קופקטור תמלול, משפיע proteostasis במהלך ההזדקנות על ידי ויסות הביטוי של autophagy ומלווים מולקולריים.אובדן HPK-1 מגדיל את מספר אגרגטים Q35-YFP המצטברים במהלך ההזדקנות. חיות בקרה הציגו בממוצע 18 אגרגטים, בעוד המוטציה האפסית HPK1 ו- HPK1 RNAi שטופלו בבעלי חיים הציגו בממוצע 28 ו -26 אגרגטים, בהתאמה. ביום השמיני לבגרות, 77 עד 78% מבעלי החיים הלקויים HPK1 היו משותקים, לעומת 50% בלבד מהבקרה.בנוסף, ביטוי יתר של HPK1 הוכח כדי לווסת היווצרות צבירה של חלבון ולהגן על בעלי חיים מזדקנים מפני שיתוק הקשור Q35-YFP במהלך ההזדקנות. שיטה זו מודדת ירידה כללית של הפרוטאום בתוך סוג תא. קיימות שיטות רבות להערכת שינויים ברכיבים ספציפיים של רשת הערמונית.יחד, הם מספקים תמונה מקיפה. ירידה בפרוטוסטזיס היא סימן היכר של הזדקנות. גישה זו מאפשרת לחוקרים לכמת ירידה זו.בשילוב עם ניתוח גנטי, זה כלי רב עוצמה לגילוי.

Research

JoVE Journal

Biology

Quantifying Tissue-Specific Proteostatic Decline in Caenorhabditis elegans

Isolation and In vitro Activation of Caenorhabditis elegans Sperm

Isolation and In vitro Activation of Caenorhabditis elegans Sperm

בידוד במבחנה הפעלת Caenorhabditis elegans זרע

Males and hermaphrodites are the two naturally found sexual forms in the nematode C. elegans. The amoeboid sperm are produced by both males and ...

Solid Plate-based Dietary Restriction in Caenorhabditis elegans

Solid Plate-based Dietary Restriction in Caenorhabditis elegans

Solid פלייט מבוססי הגבלת תזונתיים ב Caenorhabditis elegans</em

Reduction of food intake without malnutrition or starvation is known to increase lifespan and delay the onset of various age-related diseases in a wide ...

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

זמן לשגות מיקרוסקופית של העובר בשלב מוקדם Caenorhabditis elegans

Caenorhabditis elegans has often been used as a model system in studies of early developmental processes.  The transparency of the 
embryos, the genetic ...

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

בסיסי<em&gt; Caenorhabditis elegans</em&gt; שיטות: סנכרון תצפית

Research into the molecular and developmental biology of the nematode Caenorhabditis elegans was begun in the early seventies by Sydney Brenner and it has ...

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

הפקה וניתוח בפרוסטגלנדין<em&gt; Elegans Caenorhabditis</em

Caenorhabditis elegans is emerging as a powerful animal model to study the biology of lipids1-9. Prostaglandins are an important class of eicosanoids, ...

Dietary Supplementation of Polyunsaturated Fatty Acids in Caenorhabditis elegans

Dietary Supplementation of Polyunsaturated Fatty Acids in Caenorhabditis elegans

תוספת תזונתית של חומצות שומן רב בלתי רוויות ב<em&gt; Elegans Caenorhabditis</em

Fatty acids are essential for numerous cellular functions. They serve as efficient energy storage molecules, make up the hydrophobic core of membranes, ...

Cultivation of Caenorhabditis elegans in Three Dimensions in the Laboratory

Cultivation of Caenorhabditis elegans in Three Dimensions in the Laboratory

טיפוח<em&gt; Elegans Caenorhabditis</em&gt; ב בשלושה ממדים במעבדה

The use of genetic model organisms such as Caenorhabditis elegans has led to seminal discoveries in biology over the last five decades. Most of what we ...

Combined Nucleotide and Protein Extractions in Caenorhabditis elegans

Combined Nucleotide and Protein Extractions in Caenorhabditis elegans

משולב נוקלאוטיד שיחולץ חלבון ב Caenorhabditis elegans

A single biological sample holds a plethora of information, and it is now common practice to simultaneously investigate several macromolecules to capture ...

Measurement of Oxygen Consumption Rates in Intact Caenorhabditis elegans

Measurement of Oxygen Consumption Rates in Intact Caenorhabditis elegans

מדידה של קצב הצריכה של חמצן בשלם Caenorhabditis elegans

Optimal mitochondrial function is critical for healthy cellular activity, particularly in cells that have high energy demands like those in the nervous ...

Using Caenorhabditis elegans to Screen for Tissue-Specific Chaperone Interactions

Using Caenorhabditis elegans to Screen for Tissue-Specific Chaperone Interactions

שימוש באלגנים של Caenorhabditis למסך עבור אינטראקציות ממלווים ספציפיות לרקמות

Correct folding and assembly of proteins and protein complexes are essential for cellular function. Cells employ quality control pathways that correct, ...