Name: optimization of the cuff technique for murine heart transplantation
Uploaded: 2020-06-26T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Optimization of the Cuff Technique for Murine Heart Transplantation at JoVE.com

עבודה זו הייתה נתמכת על ידי פרויקט מחקר משותף של החינוך הפרובינציאלי פוג'יין (WKJ2016-2-20), הקרן הלאומית למדע הטבע של סין (81771271 ו 81800664), המפתח הלאומי R & D תוכנית של סין (2018YFA0108304) ואת החינוך ואת פרויקט המחקר המדעי למורים צעירים ובגיל העמידה במחוז פוג'יין (JAT170714), מדעי הטבע הקרן של הונאן פרובינציה של סין (50842 RS2013).

בעלי חיים (BALB/c, C57BL/6, זכר, 8-12 שבועות) שוכנו במתקן ספציפי הפתוגן ללא מעבדה במרכז בעלי חיים של אוניברסיטת ש'יאמן. C57BL/6 משמש כנמען ו-BALB/c משמש כתורם. כל ההליכים מתבצעים בהתאם להנחיות הוועדה לטיפול בבעלי חיים מוסדיים ולשימוש (IACUC).
הערה: סט של כלי מיקרו כירורגי, כולל מספריים מיקרו, מלק...

<ol>
	<li>Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+transplantation+in+congenic+strains+of+mice.">Heart transplantation in congenic strains of mice.</a> Transplantation Proceedings. 5 (1), 733-735 (1973).</li><li>Que, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prolonged+cold+ischemia+time+in+mouse+heart+transplantation+using+supercooling+preservation.">Prolonged cold ischemia time in mouse heart transplantation using supercooling preservation.</a> Transplantation. , (2019).</li><li>Wang, C. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Suppression+of+murine+cardiac+allograft+arteriopathy+by+long-term+blockade+of+CD40-CD154+interactions.">Suppression of murine cardiac allograft arteriopathy by long-term blockade of CD40-CD154 interactions.</a> Circulation. 105 (13), 1609-1614 (2002).</li><li>Hasegawa, T., Visovatti, S. H., Hyman, M. C., Hayasaki, T., Pinsky, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterotopic+vascularized+murine+cardiac+transplantation+to+study+graft+arteriopathy.">Heterotopic vascularized murine cardiac transplantation to study graft arteriopathy.</a> Nature Protocols. 2 (3), 471-480 (2007).</li><li>Chen, Z. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+technique+of+cervical+heterotopic+heart+transplantation+in+mice.">A technique of cervical heterotopic heart transplantation in mice.</a> Transplantation. 52 (6), 1099-1101 (1991).</li><li>Matsuura, A., Abe, T., Yasuura, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simplified+mouse+cervical+heart+transplantation+using+a+cuff+technique.">Simplified mouse cervical heart transplantation using a cuff technique.</a> Transplantation. 51 (4), 896-898 (1991).</li><li>Wang, Q., Liu, Y., Li, X. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simplified+technique+for+heterotopic+vascularized+cervical+heart+transplantation+in+mice.">Simplified technique for heterotopic vascularized cervical heart transplantation in mice.</a> Microsurgery. 25 (1), 76-79 (2005).</li><li>Li, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+technique+for+lung+retransplantation+in+the+mouse.">Surgical technique for lung retransplantation in the mouse.</a> Journal of Thoracic Disease. 5 (3), 321-325 (2013).</li><li>Kamada, N., Calne, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+surgical+experience+with+five+hundred+thirty+liver+transplants+in+the+rat.">A surgical experience with five hundred thirty liver transplants in the rat.</a> Surgery. 93 (1), 64-69 (1983).</li><li>Chen, H., Zhang, Y., Zheng, D., Praseedom, R. K., Dong, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+kidney+transplantation+in+mice:+technique+using+cuff+for+renal+vein+anastomosis.">Orthotopic kidney transplantation in mice: technique using cuff for renal vein anastomosis.</a> PLoS One. 8 (10), 77278 (2013).</li><li>Miller, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+restoration+of+transplantation+tolerance+after+acute+rejection.">Spontaneous restoration of transplantation tolerance after acute rejection.</a> Nature Communications. 6, 7566 (2015).</li><li>Lin, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overexpression+of+Jagged-1+combined+with+blockade+of+CD40+pathway+prolongs+allograft+survival.">Overexpression of Jagged-1 combined with blockade of CD40 pathway prolongs allograft survival.</a> Immunology and Cell Biology. 93 (2), 213-217 (2015).</li><li>Xie, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combined+costimulation+blockade+inhibits+accelerated+rejection+mediated+by+alloantigen-primed+memory+T+cells+in+mice.">Combined costimulation blockade inhibits accelerated rejection mediated by alloantigen-primed memory T cells in mice.</a> Immunological Investigations. 38 (7), 639-651 (2009).</li><li>Shao, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combination+of+monoclonal+antibodies+with+DST+inhibits+accelerated+rejection+mediated+by+memory+T+cells+to+induce+long-lived+heart+allograft+acceptance+in+mice.">Combination of monoclonal antibodies with DST inhibits accelerated rejection mediated by memory T cells to induce long-lived heart allograft acceptance in mice.</a> Immunology Letters. 138 (2), 122-128 (2011).</li><li>Dai, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blockade+of+CD27/CD70+pathway+to+reduce+the+generation+of+memory+T+cells+and+markedly+prolong+the+survival+of+heart+allografts+in+presensitized+mice.">Blockade of CD27/CD70 pathway to reduce the generation of memory T cells and markedly prolong the survival of heart allografts in presensitized mice.</a> Transplant Immunology. 24 (4), 195-202 (2011).</li><li>Yan, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+accelerated+rejection+mediated+by+alloreactive+CD4(+)+memory+T+cells+and+prolonged+allograft+survival+by+arsenic+trioxide.">Inhibition of accelerated rejection mediated by alloreactive CD4(+) memory T cells and prolonged allograft survival by arsenic trioxide.</a> Immunological Investigations. 42 (5), 438-454 (2013).</li><li>Yan, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibiting+accelerated+rejection+mediated+by+alloreactive+CD4(+)+memory+T+cells+and+prolonging+allograft+survival+by+1alpha,25-dihydroxyvitamin+D(3)+in+nude+mice.">Inhibiting accelerated rejection mediated by alloreactive CD4(+) memory T cells and prolonging allograft survival by 1alpha,25-dihydroxyvitamin D(3) in nude mice.</a> Immunology Letters. 149 (1-2), 54-61 (2013).</li><li>Lin, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arsenic+trioxide+is+a+novel+agent+for+combination+therapy+to+prolong+heart+allograft+survival+in+allo-primed+T+cells+transferred+mice.">Arsenic trioxide is a novel agent for combination therapy to prolong heart allograft survival in allo-primed T cells transferred mice.</a> Transplant Immunology. 25 (4), 194-201 (2011).</li><li>Shao, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CD44/CD70+blockade+and+anti-CD154/LFA-1+treatment+synergistically+suppress+accelerated+rejection+and+prolong+cardiac+allograft+survival+in+mice.">CD44/CD70 blockade and anti-CD154/LFA-1 treatment synergistically suppress accelerated rejection and prolong cardiac allograft survival in mice.</a> Scandinavian Journal of Immunology. 74 (5), 430-437 (2011).</li><li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+highly+reproducible+cervical+cuff+technique+for+rat-to-mouse+heterotopic+heart+xenotransplantation.">A highly reproducible cervical cuff technique for rat-to-mouse heterotopic heart xenotransplantation.</a> Xenotransplantation. , (2017).</li><li>Oberhuber, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+cervical+heart+transplantation+model+using+a+modified+cuff+technique.">Murine cervical heart transplantation model using a modified cuff technique.</a> Journal of Visualized Experiments. (92), e50753 (2014).</li><li>Blanchard, J. M., Pollak, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Techniques+for+perfusion+and+storage+of+heterotopic+heart+transplants+in+mice.">Techniques for perfusion and storage of heterotopic heart transplants in mice.</a> Microsurgery. 6 (3), 169-174 (1985).</li><li>Felix, N. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=H2-DMalpha(-/-)+mice+show+the+importance+of+major+histocompatibility+complex-bound+peptide+in+cardiac+allograft+rejection.">H2-DMalpha(-/-) mice show the importance of major histocompatibility complex-bound peptide in cardiac allograft rejection.</a> Journal of Experimental Medicine. 192 (1), 31-40 (2000).</li><li>Tomita, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+technique+of+heterotopic+cervical+heart+transplantation+in+mice.">Improved technique of heterotopic cervical heart transplantation in mice.</a> Transplantation. 64 (11), 1598-1601 (1997).</li><li>Niimi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+technique+for+heterotopic+cardiac+transplantation+in+mice:+experience+of+3000+operations+by+one+surgeon.">The technique for heterotopic cardiac transplantation in mice: experience of 3000 operations by one surgeon.</a> Journal of Heart and Lung Transplantation. 20 (10), 1123-1128 (2001).</li><li>Wang, K., Zhang, N., Li, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+technique+of+mouse+heterotopic+heart+graft+retransplantation.">Improved technique of mouse heterotopic heart graft retransplantation.</a> Microsurgery. 26 (3), 200-202 (2006).</li><li>Plenter, R. J., Grazia, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+heterotopic+heart+transplant+technique.">Murine heterotopic heart transplant technique.</a> Journal of Visualized Experiments. (89), (2014).</li><li>Ratschiller, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterotopic+Cervical+Heart+Transplantation+in+Mice.">Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (102), e52907 (2015).</li><li>Zhou, Y., Gu, X., Xiang, J., Qian, S., Chen, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparative+study+on+suture+versus+cuff+anastomosis+in+mouse+cervical+cardiac+transplant.">A comparative study on suture versus cuff anastomosis in mouse cervical cardiac transplant.</a> Experimental and Clinical Transplantation. 8 (3), 245-249 (2010).</li><li>Fukunaga, N., Bissoondath, V., Rao, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Submandibular+Gland-preserving+Technique+for+Heterotopic+Cervical+Heart+Transplantation+in+Mice.">Submandibular Gland-preserving Technique for Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice.</a> Transplantation. 102 (11), 464-465 (2018).</li></ol>

מודלים של השתלת לב העכבר הם כלים חשובים למחקר אימונולוגיה של ההשתלה, כמו כלים וחומרים להערכת מנגנונים החיסונית של מודל זה ומספר רב של עכברים ששונו גנים זמינים. עם זאת, אתגרים טכניים מיקרו כירורגי, כגון כלים תפר ו eversion, הוגבלה השימוש הנרחב שלה. במחקר הנוכחי, חקרנו אתגרים טכניים הליבה מסוימים...

הקמת עכבר הטרופית הלב השתלת דרך החיבור מקצה לקצה בתוך הבטן ב 1973 היה אבן דרך מרכזית במחקר אימונולוגיה השתלת בסיסי1. מודל זה סיפק כלי חשוב ותקף לניתוח מנגנונים של איסכמיה reperfusion פציעה2, דחייה חיסונית, וסובלנות3,4. עם זאת, את האופי המורכב וגוזלת זמן של הניתוח, כמו גם את הפוטנציאל של זיהומים יכול לגרום הידבקות חמורה בבטן periאופרטיבית ותגובות דלקתיות, וכתוצאה מכך יעילות נמוכה עבור השתלת המודל לב הטרופית.
שיטת השתלת לב הטרופית של הרחם תוארה לראשונה על ידי חן ב 19915. במודל זה, וריד הצוואר החיצוני של המטופל מגיע לעורק הריאתי של השתל והעורק הראשי ממוקם במצב של העורקים העולה. היתרונות העיקריים של שיטה זו הם הנוחות של ניטור והפחתת הטראומה למטופל. באותה שנה תיאר מטסוורה טכניקה משופרת, שבה הסתיים העורק החיצוני של הווריד והעורק הראשי, והוא היה מקובע על מיכל טפלון ומתוקן עם ליגטורה ממשי6. חלק מהחוקרים גם תיקנו את השרוול לעורק הריאתי הימני בלב התורם לפני שהכנסת את השרוול לווריד העורק החיצוני של הנמען7. עד כה, טכניקת השרוול הוחל נרחב במודלים השתלת כלי דם שונים, כולל אלה עבור ריאה8, כבד9, ואת הכליה10 השתלת.
עד היום, ישנם מספר קשיים הקשורים טכניקת השרוול. לדוגמה, העורק הראשי קשה לעבור את השרוול בגלל האלסטיות הנוספות, וכתוצאה מכך הרקמה מרפרף הפוך. מכאן, תרגול נוסף ומיקרוקטור מיקרו-כירורגי עשויים להידרש להשלמת שלב זה. בנוסף, ההכנה של כלי הצוואר הצווארי יכולה להימשך עד 25 דקות.
כדי לפתור בעיות אלה, אנו מציגים את טכניקת הצינור הפנימי, אשר מבוסס על טכניקת השרוול וכולל תיקון השרוול על הווריד וריד הצוואר החיצוני באמצעות צינור העורק הפנימי כדי לסייע עם לציון של הקיר כלי. בנוסף, עם הכשרה פשוטה, ההכנה של המטופל מצטמצמת ל-15.5 דקות. טכניקה זו מפחיתה את מורכבות הפעולה ואינה דורשת פרקטיקה נוספת או שימוש במקצר כלי דם. זה יכול להיות מיושם בכל מחקר החיסונית השתלת, במיוחד עבור אימות העמידות החיסונית של צד שלישי במהלכו המקבל מקבל שני אלושתלים לב, אחד בתוך הבטן והשני בצוואר11. כמו כן, אנו ממליצים על שיתוף פעולה בין שני מנתחים מיומנים להקמת מודל זה, כאשר מנתח אחד מכין את בעל החיים של המטופל ואת הקציר והשתלת הלב התורם. שיתוף פעולה כזה יכול לקצר את זמן הפעולה ל -25 דקות. באמצעות הליך ממוטב זה, הקמנו syngeneic, allogeneic12,13,14,15,16,17,18,19, ועכבר xenogeneic מודלים לב השתלת20.
הרציונל לפיתוח טכניקת הצינורית הפנימית היה להקטין את זמן הפעולה להקמת מודל להשתלת לב העכבר עם שיעור הצלחה גבוה. אופטימיזציה של המודל הלב צוואר הרחם מקלה על רכישת שיעורי הצלחה גבוהה בתקופה קצרה של ניתוח זמן לעומת תפר המסורתית הטכניקה השרוול21. עוד, מודל שיתוף הפעולה יכול להקטין עוד יותר את זמן האיסכמי החם של הלב התורם לעומת ניתוחים שבוצעו עם אופרטור יחיד.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Artery cuff</td>
			<td>Self-made</td>
			<td></td>
			<td>Polyamide tube. diameter: 0.55 mm,length: 1.0 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Artery inner tube</td>
			<td>Self-made</td>
			<td></td>
			<td>Polyamide tube. Diameter: 0.28mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro curved forceps</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory</td>
			<td>WA3050</td>
			<td>1/8 arc, 0.3-mm tip without a hook</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro needle holders</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory</td>
			<td>WA2050</td>
			<td>0.2-mm tip</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro scissors</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory</td>
			<td>WA1050</td>
			<td>Straight, blade length: 10 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro straight forceps</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory</td>
			<td>WA3060</td>
			<td>0.15-mm tip without a hook</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scanlan Vascu-Statt Bulldog Clamps</td>
			<td>Scanlan International Inc</td>
			<td>1001-531</td>
			<td>Clamping pressure 20&#8211;25 grams</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vein cuff</td>
			<td>Self-made</td>
			<td></td>
			<td>Polyamide tube. diameter: 0.9 mm,length: 1.2 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vein inner tube</td>
			<td>Self-made</td>
			<td></td>
			<td>Polyamide tube. Diameter: 0.6 mm</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

optimization of the cuff technique for murine heart transplantation

השתלת לב מוריין בוצעה במשך יותר מ 40 שנים. עם התקדמויות בניתוח מיקרו, טכניקות חדשות מסוימות שימשו כדי לשפר את יעילות כירורגית. במעבדה שלנו, אנחנו ממוטבים את טכניקת הרכיסה עם שני צעדים עיקריים. ראשית, השתמשנו בטכניקת הצינורית הפנימית כדי להכניס צינורית פנימית זמנית לתוך הווריד החיצוני של עורק הצוואר ולכלי הדם של עורקי העורק כדי להקל על הספינה על השרוול. שנית, אנו ביצעו השתלת לב הטרוסקסואלים מלאה דרך שיתוף פעולה של שני מנתחים מנוסים. שינויים אלה הפחיתו ביעילות את זמן הפעולה ל-25 דקות, עם שיעור הצלחה של 95%. בדוח זה, אנו מתארים הליכים אלה בפירוט ומספקים וידאו משלים. אנו מאמינים כי דו ח זה על טכניקת השרוול המשופר תציע הדרכה מעשית עבור השתלת הטרופית לב מורטין ולשפר את השירות של מודל זה העכבר עבור מחקר בסיסי.

זמן ניתוח כירורגי
לאחר אימון, מנתח מיומן יכול בהצלחה לבצע את הפעולה בתוך 35 דקות באמצעות טכניקת הצינור הפנימי, שבו כ-15.5 דקות נדרשות להכנה לנמען, 10.9 דקות נדרשות עבור הכנה לתורמים, ו-4.4 דקות נדרשות עבור האנסטוזות לב התורם. הזמן הקר והחם של איסכמיה (מהכנת התורם להשתלת הלב...

Watch this Scientific Journal Video about Optimization of the Cuff Technique for Murine Heart Transplantation at JoVE.com

Optimization of the Cuff Technique for Murine Heart Transplantation

אנו מציגים גישה הצינור הפנימי לטכניקת השרוול של העכבר צוואר הרחם הטרוסקסואלים השתלת לב כדי לעזור אוורט הספינה על השרוול. שיתוף פעולה בין שני מנתחים. מנוסים מקצר את זמן הפעולה

אופטימיזציה של טכניקת השרוול עבור השתלת לב מוריין

Murine cardiac transplantation has been performed for more than 40 years. With advancements in microsurgery, certain new techniques have been used to ...

שלום לכולם. שמי הוא ד"ר Zhongquan Qi.It ידוע כי טכניקת האזיקים שימשה השתלת לב מאז 1991. אמנם היו התקדמות גדולה בניתוחים רפואיים ואת הטכניקה הכירורגית החדשה, יש עדיין כמה קשיים המבוססים על טכניקת חפתים.זה סוג של חשיפה, שבו הם מראים לך חצי טכניקה אופטימלית, אשר יכול באופן משמעותי שווה את היעילות הכירורגית. ההליכים העיקריים הם החדרת צינור באופן זמני לתוך מגן הקרב. ההוכחה קראה את ISO כמעט חצי.החדרת טכניקת הצינור. מנתח מיומן יכול לבצע את הניתוח תוך 35 דקות עם 95% אחוזי הצלחה. אז הם יכולים להעסיק את מודול ניתוח מנתח תרמי, אשר משפר עוד יותר את היעילות של הניתוח מראה skeptimic וזמן הניתוח יקוצר על 35 דקות.תודה. וזה שקושר את המתכון וקילומטרים עם פנטוברביטל. השתמש קוצץ מכני אטראומטי כדי להסיר את השיער באזור צוואר הרחם מאוחר יותר הימני.השתמש במוליך קצה כותנה סטרילי כדי לנגב את האזור הכירורגי עם חיטוי יוד ואחריו 70%אתנול. מקם את העכבר במיקום supine על פלטפורמת הפעולה. מכסים את העכבר עם גזה סטרילית.השתמש במספריים עיניים כדי לבצע חתך רוחבי מהקו התחתון שליש NACMEC למפרק עצם הבריח הימני הכתף. בודד את וריד הג'ונגולר החיצוני הימני עם מדפים מעוקלים זעירים כדי לחשוף מספיק אורך. חותכים את הבראנץ' באמצעות קרישת אלקטרו.ולאתר את הספינה בדיסטו ולהשתמש בתפר 6 2 06. מהדקים את וריד הג'ונגלר החיצוני באופן פרוקסימל באמצעות מהדק אבקה. ואז לתרגם את הווריד קרוב קשר באמצעות מספריים מיקרו.לשטוף את לומן כלי עם 100 יחידות למיליליטר 02 ארבעה הפרין מעלות צלזיוס בולט כדי להסיר כל דם שיורית. משוך את וריד הג'ונגלר החיצוני דרך וריד הובנה קאווה באמצעות מדפים ישרים זעירים. הכנס את הצינור הפנימי של וריד לתוך לומן כמו סטנט מעל קיר כלי השיט מעל העקומה עם מדפים ישר מיקרו.תקן את אנדותל הפאסו המרגיז בקצה הפרוקסימלי של העקומה באמצעות תפר היקפי של 8 עד 06. השתמש מדפים ישר מיקרו כדי למשוך את הצינור הפנימי ורידים מכלי הווריד. בצע ניתוח קהה עם מלקחיים מיקרו כדי לבודד את העורק הראשי הנכון, סמוך לקצה הפנימי של sternocleidomastoid.מהדק את עורק העורק הימני באופן פרוקסימילי באמצעות מהדק בבקוק. אתר את העורק הראשי בצורה חדה באמצעות תפר של 6 עד 06. ולהשתמש במספריים זעירים כדי לבצע את עורק התרדמה באופן פרוקסימילי ללקירה.לשטוף את העורק הראשי עם 100 יחידות למיליליטר 02 ארבעה צלזיוס הפרין בולט כדי להסיר כל דם שיורית. מעבירים את העורק הראשי דרך עקומת העורק ומכניסים את הצינור הפנימי של העורק לתוך כלי העורק באמצעות מטלות מיקרו ישרות. כוון לכלי השיט מעל העקומה באמצעות ממטרים ישרים זעירים.תקן את אנדותל ההפוכה באמצעות תפר היקפי של 8 עד 06. משיכת הקצה הפנימי של העורק מכלי העורק עם מדפים ישרים זעירים. הרדמה והזיהום שלה זהים לנמען.הפוך חתך קו אמצע הבטן עם מספריים עיניים ולחשוף את חלל הבטן. השתמש במדפים עקומת מיקרו כדי לחשוף את וינה קאווה נחות. ואז להזריק דרך הווריד 200 microliter של 100 יחידות למיליליטר 02 ארבעה צלזיוס מעלות הפרין בולט לכל 20 גרם של משקל גוף דרך הווריד הווריד הנחות.בצע כריתת חזה עם מספריים עיניים. חותכים את הצלעות דרך הצבעים רומיטה חתכים אור בית רם. לפלוט את קיר החזה האחורי כלפי חוץ כדי לחשוף את חלל בית החזה.תן את התימוס עם מלקחיים זעירים. חשוף את העורקים ולאחר מכן שפע 200 microliter של 100 יחידות למיליליטר 02 ארבעה צלזיוס מעלות הפרין בולט העורק הכלילי דרך קשת העורקים. השתמש במספריים זעירים כדי לשנות את בית ההידור העולה בתחילת קשת בית הדם.חוצים את עורק הריאה בתחילת שני הענפים העיקריים עם מספריים זעירים. אתר את vena cava מעולה ו vena קאווה נחות בערך באמצעות תפר שש עד 02 ולהשתמש מספריים מיקרו כדי לשנות את תזקיק ורידים כדי קשירה. אתר את ורידי הריאה יחד באופן היקפי באמצעות שישה בודדים, עד 06 תפר וחותכים את ענפי ורידים distally כדי קשירה באמצעות מספריים מיקרו.הסר את שתל הלב מן הרקמות הרכות שמסביב. מקם את לב התורם במהופך לאזור הצוואר הימני של המטופל. הזן את עורק הריאה של לב התורם ללולאה של 6 עד 06 עם מדפים ישרים זעירים.לעטוף את לומן כלי סביב vena cava ולאחר מכן להדק את לולאת תפר שש עד 06 סביב העגל כדי לכופף את מפרק הכלי. בצע anastomosis של בית הישוריים של השתל ועקומת העורק. שחררו את וריד הצוואר הגושי ואחריו עורק הצוואר הגושי.שמור על הכלי מחובר ומעוות ולהבטיח כי זרימת הדם היא ללא הפרעה. הגדר את שתל הלב החולף לחלל התת עורי ולאחר מכן תפר את החתך. להקליט את הזמן לקצב סינוס נורמלי ושמירה על קצב סינוס נורמלי לפחות חמש דקות לאחר שחרור מהדק כדי לפקח על פונקציית השתל שלאחר הניתוח.מניחים את הנמען לבד על שמיכה אחת עד שהנמען מתעורר מהרדמה. יחד, למרות הניתוח שלנו משתמש בטכניקות חפתים שדווחו, הקמנו את טכניקת הליבה הפנימית המבוססת על זה. להפחית את הקושי בניתוח ולקצר את זמן anastomosis על ידי טכניקת אופטימיזציה.הצעתי את המוטו של שילוב הניתוח הכפול כדי לשפר עוד יותר את יעילות הניתוח המוצג בשרטוט. וזמן הניתוח יקוצר ל-25 דקות. MHC מלא לא תואם לב ALLOgraft BALBC ניתן לדחות עם שמונה ימים לאחר ההשתלה לתוך עכברים נמען C57BL6.השתלות לב סינגניות המשמשות במחקר שלנו שרדו יותר מ -100 ימים למעט מקרה נדיר אחד עקב ירידה במשקל של 15% בהשוואה למשקל תקין לפני הניתוח. היסטופטולוגיה של allograft ביום השביעי חשף תכונות אופייניות של דחייה חריפה, כולל חדירה תאית כבדה עם נמק רקמות. שתלים סינגניים קרובים לנורמליים ללא עדות לנמק מיוציט או חדירת תאים דלקתיים.100 ימים לאחר השתלת לב סינגנטית, אנדותל כלי הדם של אתר anastomosis ניתן לאסוף מוכתם על ידי immunofluorescent. בניתוח זה, לא נצפו שום ניתוק סלידה מקיר כלי הדם, פקקת או עיבוי של האנטימה. הדמיה מיקרוסקופית אלקטרו גילתה כי אנדותל חלקה היווצרות קרום אורך רגיל עם תאי אנדותל מסודרים בצורה מסודרת וצמודה ללא מעים ברורים על פני השטח.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Murine Model of CD40-activation of B cells

דגם Murine של הפעלת-CD40 בתאי B

Research on B cells has shown that CD40 activation improves their antigen presentation capacity. When stimulated with interleukin-4 and CD40 ligand ...

Isolation and Transplantation of Different Aged Murine Thymic Grafts.

בידוד והשתלה של שתלי הרתי Murine בני שונים.

The mechanisms that regulate the efficacy of thymic selection remain ill-defined. The method presented here allows in vivo analyses of the development and ...

Automated Cell Enrichment of Cytomegalovirus-specific T cells for Clinical Applications using the Cytokine-capture System

העשרת תא אוטומטית של ציטומגלווירוס ספציפי תאי T ליישומים קליניים באמצעות מערכת ציטוקין ללכוד

The adoptive transfer of pathogen-specific T cells can be used to prevent and treat opportunistic infections such as cytomegalovirus (CMV) infection ...

Flow Cytometry-based Assay for the Monitoring of NK Cell Functions

Flow Cytometry מבוסס Assay עבור הניטור של פונקציות תא NK

Natural killer (NK) cells are an important part of the human tumor immune surveillance system. NK cells are able to distinguish between healthy and ...

Optimization of a Quantitative Micro-neutralization Assay

אופטימיזציה של Assay כמותי מיקרו-נטרול

The micro-neutralization (MN) assay is a standard technique for measuring the infectivity of the influenza virus and the inhibition of virus replication. ...

Murine Full-thickness Skin Transplantation

השתלת עור בעובי מלא Murine

Murine full-thickness skin transplantation is a well-established in vivo model to study alloimmune response and graft rejection. Despite its limited ...