Name: optimization of the cuff technique for murine heart transplantation
Uploaded: 2020-06-26T13:00:00
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この研究は、福建省保健教育共同研究プロジェクト(WKJ2016-2-20)、中国国立自然科学財団(81771271および81800664)、中国国家主要研究開発プログラム(2018YFA0108)によって支援されました 304)と福建省の若年・中年教師のための教育科学研究プロジェクト(JAT170714)、中国湖南省自然科学財団(2019JJ50842)、湖南省の湖西若手才能(2019RS2013)。

動物(BALB/c、C57BL/6、オス、8-12週)は、厦門大学実験動物センターの特定の病原体のない施設に収容されています。C57BL/6は受領者として使用され、BALB/cはドナーとして使用される。すべての手順は、制度的動物管理使用委員会(IACUC)のガイドラインに従って行われます。
注:マイクロシザー、マイクロストレート鉗子、マイクロ湾曲鉗子およびマイクロ針のホールダーを含む?...

<ol>
	<li>Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+transplantation+in+congenic+strains+of+mice.">Heart transplantation in congenic strains of mice.</a> Transplantation Proceedings. 5 (1), 733-735 (1973).</li><li>Que, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prolonged+cold+ischemia+time+in+mouse+heart+transplantation+using+supercooling+preservation.">Prolonged cold ischemia time in mouse heart transplantation using supercooling preservation.</a> Transplantation. , (2019).</li><li>Wang, C. 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K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simplified+technique+for+heterotopic+vascularized+cervical+heart+transplantation+in+mice.">Simplified technique for heterotopic vascularized cervical heart transplantation in mice.</a> Microsurgery. 25 (1), 76-79 (2005).</li><li>Li, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+technique+for+lung+retransplantation+in+the+mouse.">Surgical technique for lung retransplantation in the mouse.</a> Journal of Thoracic Disease. 5 (3), 321-325 (2013).</li><li>Kamada, N., Calne, R. 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L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+restoration+of+transplantation+tolerance+after+acute+rejection.">Spontaneous restoration of transplantation tolerance after acute rejection.</a> Nature Communications. 6, 7566 (2015).</li><li>Lin, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overexpression+of+Jagged-1+combined+with+blockade+of+CD40+pathway+prolongs+allograft+survival.">Overexpression of Jagged-1 combined with blockade of CD40 pathway prolongs allograft survival.</a> Immunology and Cell Biology. 93 (2), 213-217 (2015).</li><li>Xie, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combined+costimulation+blockade+inhibits+accelerated+rejection+mediated+by+alloantigen-primed+memory+T+cells+in+mice.">Combined costimulation blockade inhibits accelerated rejection mediated by alloantigen-primed memory T cells in mice.</a> Immunological Investigations. 38 (7), 639-651 (2009).</li><li>Shao, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combination+of+monoclonal+antibodies+with+DST+inhibits+accelerated+rejection+mediated+by+memory+T+cells+to+induce+long-lived+heart+allograft+acceptance+in+mice.">Combination of monoclonal antibodies with DST inhibits accelerated rejection mediated by memory T cells to induce long-lived heart allograft acceptance in mice.</a> Immunology Letters. 138 (2), 122-128 (2011).</li><li>Dai, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blockade+of+CD27/CD70+pathway+to+reduce+the+generation+of+memory+T+cells+and+markedly+prolong+the+survival+of+heart+allografts+in+presensitized+mice.">Blockade of CD27/CD70 pathway to reduce the generation of memory T cells and markedly prolong the survival of heart allografts in presensitized mice.</a> Transplant Immunology. 24 (4), 195-202 (2011).</li><li>Yan, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+accelerated+rejection+mediated+by+alloreactive+CD4(+)+memory+T+cells+and+prolonged+allograft+survival+by+arsenic+trioxide.">Inhibition of accelerated rejection mediated by alloreactive CD4(+) memory T cells and prolonged allograft survival by arsenic trioxide.</a> Immunological Investigations. 42 (5), 438-454 (2013).</li><li>Yan, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibiting+accelerated+rejection+mediated+by+alloreactive+CD4(+)+memory+T+cells+and+prolonging+allograft+survival+by+1alpha,25-dihydroxyvitamin+D(3)+in+nude+mice.">Inhibiting accelerated rejection mediated by alloreactive CD4(+) memory T cells and prolonging allograft survival by 1alpha,25-dihydroxyvitamin D(3) in nude mice.</a> Immunology Letters. 149 (1-2), 54-61 (2013).</li><li>Lin, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arsenic+trioxide+is+a+novel+agent+for+combination+therapy+to+prolong+heart+allograft+survival+in+allo-primed+T+cells+transferred+mice.">Arsenic trioxide is a novel agent for combination therapy to prolong heart allograft survival in allo-primed T cells transferred mice.</a> Transplant Immunology. 25 (4), 194-201 (2011).</li><li>Shao, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CD44/CD70+blockade+and+anti-CD154/LFA-1+treatment+synergistically+suppress+accelerated+rejection+and+prolong+cardiac+allograft+survival+in+mice.">CD44/CD70 blockade and anti-CD154/LFA-1 treatment synergistically suppress accelerated rejection and prolong cardiac allograft survival in mice.</a> Scandinavian Journal of Immunology. 74 (5), 430-437 (2011).</li><li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+highly+reproducible+cervical+cuff+technique+for+rat-to-mouse+heterotopic+heart+xenotransplantation.">A highly reproducible cervical cuff technique for rat-to-mouse heterotopic heart xenotransplantation.</a> Xenotransplantation. , (2017).</li><li>Oberhuber, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+cervical+heart+transplantation+model+using+a+modified+cuff+technique.">Murine cervical heart transplantation model using a modified cuff technique.</a> Journal of Visualized Experiments. (92), e50753 (2014).</li><li>Blanchard, J. M., Pollak, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Techniques+for+perfusion+and+storage+of+heterotopic+heart+transplants+in+mice.">Techniques for perfusion and storage of heterotopic heart transplants in mice.</a> Microsurgery. 6 (3), 169-174 (1985).</li><li>Felix, N. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=H2-DMalpha(-/-)+mice+show+the+importance+of+major+histocompatibility+complex-bound+peptide+in+cardiac+allograft+rejection.">H2-DMalpha(-/-) mice show the importance of major histocompatibility complex-bound peptide in cardiac allograft rejection.</a> Journal of Experimental Medicine. 192 (1), 31-40 (2000).</li><li>Tomita, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+technique+of+heterotopic+cervical+heart+transplantation+in+mice.">Improved technique of heterotopic cervical heart transplantation in mice.</a> Transplantation. 64 (11), 1598-1601 (1997).</li><li>Niimi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+technique+for+heterotopic+cardiac+transplantation+in+mice:+experience+of+3000+operations+by+one+surgeon.">The technique for heterotopic cardiac transplantation in mice: experience of 3000 operations by one surgeon.</a> Journal of Heart and Lung Transplantation. 20 (10), 1123-1128 (2001).</li><li>Wang, K., Zhang, N., Li, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+technique+of+mouse+heterotopic+heart+graft+retransplantation.">Improved technique of mouse heterotopic heart graft retransplantation.</a> Microsurgery. 26 (3), 200-202 (2006).</li><li>Plenter, R. J., Grazia, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+heterotopic+heart+transplant+technique.">Murine heterotopic heart transplant technique.</a> Journal of Visualized Experiments. (89), (2014).</li><li>Ratschiller, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterotopic+Cervical+Heart+Transplantation+in+Mice.">Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (102), e52907 (2015).</li><li>Zhou, Y., Gu, X., Xiang, J., Qian, S., Chen, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparative+study+on+suture+versus+cuff+anastomosis+in+mouse+cervical+cardiac+transplant.">A comparative study on suture versus cuff anastomosis in mouse cervical cardiac transplant.</a> Experimental and Clinical Transplantation. 8 (3), 245-249 (2010).</li><li>Fukunaga, N., Bissoondath, V., Rao, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Submandibular+Gland-preserving+Technique+for+Heterotopic+Cervical+Heart+Transplantation+in+Mice.">Submandibular Gland-preserving Technique for Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice.</a> Transplantation. 102 (11), 464-465 (2018).</li></ol>

マウスの心臓移植モデルは、このモデルの免疫機構を評価するためのツールや材料や多数の遺伝子改変マウスが利用可能な移植免疫学研究のための重要なツールです。しかし、血管縫合や脳の流れなどの微小外科的技術的課題は、その広範な使用を制限している。本研究では、マウスの心臓移植に関する特定の技術的課題を調査し、良好な成果を得ています。プロトコルの重要なステップは?...

1973年に腹部内のエンドツーエンド吻当を介したマウス異所性心臓移植の確立は、基礎移植免疫学研究1における大きなマイルストーンであった。このモデルは、虚血再灌流傷害2、免疫不全、および許容範囲33、44のメカニズムを分析するための重要かつ有効なツールを提供した。しかし、複雑で時間のかかる手術の性質と感染症の可能性は、重度の周術期腹部癒着および炎症反応をもたらし、異所性心臓移植モデルの効率が低い結果をもたらす。
子宮頸部異所性心臓移植技術は、1991年5年に陳によって最初に記述された。このモデルでは、レシピエントの外部頸静脈は移植片の肺動脈に吻着され、頸動脈は上昇大動脈に吻着される。この方法の主な利点は、モニタリングの利便性とレシピエントへの外傷の軽減である。同年、松浦は改良された技術を説明し、外的頸静脈と頸動脈の末端をテフロンカフ上にエバートし、周縁絹合字6で固定した。一部の研究者はまた、レシピエント7の外部頸静脈に袖口を挿入する前に、ドナー心臓の右肺動脈にカフを固定した。これまでカフ技術は、肺8、肝臓9、腎10移植を含む様々な血管ペディクル移植モデルに広く適用されてきた。
現在までに、カフ技術に関連するいくつかの困難があります。例えば、頸動脈は、追加の弾力性のためにカフ上にエバーリングすることが困難であり、その結果、組織は後方に反転する。したがって、このステップを完了するには、追加の練習と微小拡張器が必要な場合があります。さらに、子宮頸部の容器の準備は25分までかかる場合がある。
これらの問題を解決するために、カフ技術に基づく内側チューブ技術を導入し、血管壁の発流に役立つ内側のチューブを使用して外部頸静脈および頸動脈のカフを固定することを含む。また、簡単なトレーニングでは、受講者の準備は15.5分に短縮されます。この技術は、操作の複雑さを軽減し、追加の練習や血管拡張器の使用を必要としません。すべての移植免疫研究において適用することができ、特にレシピエントが2つの心臓同種移植片を受け取る第三者の免疫寛容を検証するために、1つは腹部内、もう1つは頸部11に適用できる。また、2人の熟練した外科医の間で協力してこのモデルを確立し、一方の外科医がレシピエント動物を準備し、もう1人の外科医がドナー心臓を収穫して移植することを推奨する。このようなコラボレーションにより、操作時間を25分に短縮できます。この最適化された手順を使用して、我々は、同種異系、同種異,系12、13、14、15、16、17、18、19、,13,および異種マウス心臓移植モデル20を確立しました。14,15,16,17,1819
内部チューブ技術の開発の根拠は、マウス心臓移植モデルの確立のための運転時間を高い成功率で短縮することであった。子宮頸部心臓移植モデルの最適化は、従来の縫合糸およびカフ技術21と比較して、短期間の手術時間における高い成功率の獲得を促進する。また、協調モデルは、単一のオペレータで行われる手術と比較して、ドナー心臓の温かい虚血時間をさらに短縮することができる。

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Artery cuff</td>
			<td>Self-made</td>
			<td></td>
			<td>Polyamide tube. diameter: 0.55 mm,length: 1.0 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Artery inner tube</td>
			<td>Self-made</td>
			<td></td>
			<td>Polyamide tube. Diameter: 0.28mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro curved forceps</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory</td>
			<td>WA3050</td>
			<td>1/8 arc, 0.3-mm tip without a hook</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro needle holders</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory</td>
			<td>WA2050</td>
			<td>0.2-mm tip</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro scissors</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory</td>
			<td>WA1050</td>
			<td>Straight, blade length: 10 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro straight forceps</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory</td>
			<td>WA3060</td>
			<td>0.15-mm tip without a hook</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scanlan Vascu-Statt Bulldog Clamps</td>
			<td>Scanlan International Inc</td>
			<td>1001-531</td>
			<td>Clamping pressure 20&#8211;25 grams</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vein cuff</td>
			<td>Self-made</td>
			<td></td>
			<td>Polyamide tube. diameter: 0.9 mm,length: 1.2 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vein inner tube</td>
			<td>Self-made</td>
			<td></td>
			<td>Polyamide tube. Diameter: 0.6 mm</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

optimization of the cuff technique for murine heart transplantation

マウス心臓移植は40年以上行われてきた。マイクロサージャストの進歩に伴い、外科的効率を向上させるために特定の新しい技術が使用されています。私たちの研究室では、2つの主要なステップでカフテクニックを最適化しました。まず、内部管技術を用いて、外的頸静脈および頸動脈血管に一時的な内管を挿入し、カフ上の血管の切開を容易にした。第2に、2人の経験豊富な外科医の協力を通じて、完全な異所性心臓移植を行った。これらの変更により、運用時間が25分に短縮され、成功率は95%となりました。このレポートでは、これらの手順を詳細に説明し、補足ビデオを提供します。この改善されたカフ技術に関するレポートは、マウス異所性心臓移植のための実用的なガイダンスを提供し、基礎研究のためのこのマウスモデルの有用性を高めると信じています。

手術時間
訓練後、熟練した外科医は、受け手の準備に約15.5分、ドナーの準備に10.9分、ドナー心臓のアナストモーセに4.4分が必要である内管技術を使用して35分以内に手術を正常に行うことができる。冷温および温かい虚血時間(ドナー剤調製から心臓移植まで)は、内管技術および縫合技術を伴わないカフ技術を用いた操作に比べ15.3分に短縮される(表</...

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Optimization of the Cuff Technique for Murine Heart Transplantation

マウス子宮頸部異所性心臓移植のためのカフ技術にインナーチューブアプローチを導入し、カフ上の血管をエバートするのに役立ちます。我々は、2人の経験豊富な外科医間の協力が著しく手術時間を短縮することを発見した。

マウスの心臓移植のためのカフ技術の最適化

Murine cardiac transplantation has been performed for more than 40 years. With advancements in microsurgery, certain new techniques have been used to ...

みなさん。私の名前は博士中泉Qi.それはカフ技術が1991年以来心臓移植として使用されていることを広く知られています。医療外科手術と新しい外科技術には大きな進歩がありましたが、カフ技術に基づく困難はまだあります。これは、外科的効率に大きく等しいオプティモティックハーフテクニックを示す発表の一形態です。主な手順は、そのチューブに一時的にバイザーに挿入することです。証明はISOのほぼ半分を読みました。チューブテクニックを挿入します。熟練した外科医は、95%の成功率で35分以内に手術を行うことができます。その後、彼らはさらにステプシミックで示す操作の効率を向上させる熱外科医手術モジュールを採用することができ、操作時間は約35分に短縮されます。ありがとうございました。そして、それはペントバルビタールとレシピとマイルを結びつけるものです。外傷性の機械的なバリカンを使用して、右側の後の子宮頸部で毛髪を除去します。滅菌綿の先端アプリケーターを使用して、ヨウ素消毒剤で手術領域を拭き、その後70%エタノールを使用します。操作プラットフォームの上のsupineの位置にマウスを置きます。無菌ガーゼでマウスを覆います。眼科用はさみを使用して、下1つのNACMECラインから右肩鎖骨関節への横断切開を行います。右の外的な角静脈をマイクロ湾曲した鉗子で分離し、十分な長さを露出させる。電気凝固を介してブランチを切断します。そして、ディストで容器を見つけて、6 2 0 6縫合糸を使用します。粉末クランプを使用して、外部のジングラー静脈を近位でクランプします。そして、マイクロハサミを使用して、合字に近い静脈を翻訳します。容器のルーメンを1ミリリットル当たり100単位で洗浄し、ヘパリンを4度ほど顕著に洗い、残留血液を除去します。マイクロストレート鉗子を使用して、静脈カバを通して外部ユングラー静脈を引っ張ります。静脈の内側のチューブをステントとして管腔に挿入し、マイクロストレート鉗子でカーブ上の船壁を越えます。周縁8~06縫合を用いて、曲線の近位端で刺激性ファソ内皮を固定します。静脈容器から静脈の内管を引き出すためにマイクロストレート鉗子を使用しなさい。右頸動脈を分離するために、胸部腫の内縁に隣接して、マイクロ鉗子で鈍い解剖を行う。バブコッククランプを使用して、右頸動脈を近位でクランプします。6~06縫合を使用して頸動脈を遠回しに見つけます。そして、マイクロハサミを使用して、頸動脈を合字に近似して転行する。軟状動脈を1ミリリットル当たり100単位で洗浄し、摂氏4度ヘパリンを4度分から除去し、残留血液を除去します。頸動脈を動脈曲線を通り抜け、マイクロストレート鉗子を用いて動脈内管を動脈血管に挿入する。マイクロストレート鉗子を使用して曲線上の容器を目指します。逆ファシリティ内皮を周回8~06縫合を使用して固定します。マイクロストレート鉗子で動脈血管から動脈の内側の先端を引き出す。麻酔とその感染は、レシピエントと同じです。眼科はさみで腹部中線切開を行い、腹腔を露出させる。マイクロカーブ鉗子を使用して、下の大静脈を露出させます。そして、下の大静脈を通して20グラムの体重当たり20グラム当たり4摂氏1度ヘパリンは、ミリリットル当たり100単位の200マイクロリットルを静脈内に注入する。眼科はさみで回視術を行います。パレットロミータ腋窩光切開部を通して肋骨を切断します。胸壁の前部を外側に回し、胸腔を露出させる。胸腺をマイクロ鉗子で物品切りする。大動脈を露出し、その後、大動脈弓を通して冠状動脈に顕著な02摂氏4度ヘパリンあたり100単位の200マイクロリットルを多量にします。マイクロハサミを使用して、大動脈弓の始めに上昇大動脈をトランセクトします。マイクロはさみで2つの主要な枝の始まりの肺動脈を移す。上の大静脈と下の大静脈を見つけると、およそ6〜02縫合を使用し、合字に静脈蒸留物をトランセクトするマイクロハサミを使用しています。肺静脈を1つの6を使用して周方向に、06縫合糸に一緒に見つけ、マイクロハサミを使用して結紮に遠位静脈枝を切断する。周囲の軟部組織から心臓移植片を取り除きます。ドナーの心臓を、受取人の右首領域に逆さまに置きます。ドナー心臓の肺動脈をマイクロストレート鉗子で6~06ループに入力する。船のルーメンを大静脈の周りに巻き付け、ふくらはぎの周りの6〜06縫合ループを締めて容器の関節を曲げる。移植片および動脈曲線の大動脈の吻眼を行う。凝集した頸静脈を解放し、続いて頸動脈を束にする。血管を結合してねじった状態に保ち、血流が妨げられないようにします。通過する心臓移植片を皮下腔にセットし、切開を縫合する。クランプ解放後少なくとも5分間は正常な正常な正常なしなじりリズムまでの時間と正常な正常なしなじりのリズムの保存を記録し、術後の移植機能を監視する。受信者が麻酔から目を覚ますまで、受取人を1つの毛布の上に一人で置きます。まとめると、私たちの手術は報告されているカフ技術を使用していますが、これに基づいて内部コア技術を確立しました。手術の難易度を減らし、最適化技術により吻合時間を短縮します。我々は、模式に示す操作の効率をさらに向上させるための二重手術組み込みモットーを提案した。そして、操作時間は約25分に短縮されます。完全にMHCの不一致BALBC同種移植片心臓は、C57BL6レシピエントマウスへの移植後8日間で拒絶することができる。私たちの研究で使用される同種の心臓移植は、手術前の正常体重と比較して15%の体重減少による1つのまれな症例を除いて100日以上生き残った。7日目の同種移植片の組織病理学は、組織壊死を伴う重い細胞浸潤を含む急性拒絶反応の典型的な特徴を明らかにした。異質移植片は、筋細胞壊死または炎症性細胞浸潤の証拠を有しない正常に近い。共遺伝的心臓移植の100日後、吻当部位の血管内皮を免疫蛍光により採取し、染色することができる。この分析では、血管壁の嫌いな鳴き声、血栓症またはインティマの肥厚は観察されなかった。電気顕微鏡イメージングは、滑らかな内皮と定期的な縦地殻形成が、表面に明らかな堆積物を持たないきれいに密接に配置されていることを明らかにした。

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Murine Model of CD40-activation of B cells

B細胞のCD40 -活性化のモデルマウス

Research on B cells has shown that CD40 activation improves their antigen presentation capacity. When stimulated with interleukin-4 and CD40 ligand ...

Isolation and Transplantation of Different Aged Murine Thymic Grafts.

単離と異なる高齢マウス胸腺移植片の移植。

The mechanisms that regulate the efficacy of thymic selection remain ill-defined. The method presented here allows in vivo analyses of the development and ...

Automated Cell Enrichment of Cytomegalovirus-specific T cells for Clinical Applications using the Cytokine-capture System

サイトカインキャプチャシステムを用いた臨床応用のためのサイトメガロウイルス特異的T細胞の自動化された細胞濃縮

The adoptive transfer of pathogen-specific T cells can be used to prevent and treat opportunistic infections such as cytomegalovirus (CMV) infection ...

Flow Cytometry-based Assay for the Monitoring of NK Cell Functions

NK細胞の機能を監視するためのサイトメトリーに基づくアッセイを流します

Natural killer (NK) cells are an important part of the human tumor immune surveillance system. NK cells are able to distinguish between healthy and ...

Optimization of a Quantitative Micro-neutralization Assay

定量的マイクロ中和アッセイの最適化

The micro-neutralization (MN) assay is a standard technique for measuring the infectivity of the influenza virus and the inhibition of virus replication. ...

Murine Full-thickness Skin Transplantation

マウス全層皮膚移植

Murine full-thickness skin transplantation is a well-established in vivo model to study alloimmune response and graft rejection. Despite its limited ...