Name: optimization of the cuff technique for murine heart transplantation
Uploaded: 2020-06-26T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Optimization of the Cuff Technique for Murine Heart Transplantation at JoVE.com

Эта работа была поддержана Fujian провинциального образования здравоохранения Совместный исследовательский проект (WKJ2016-2-20), Национальный фонд естественных наук Китая (81771271 и 81800664), Национальная программа ключевых НИОКР Китая (2018YFA010 8304) и Образовательный и Научно-исследовательский проект для учителей молодого и среднего возраста в провинции Фуцзянь (JAT170714), Фонд естественных наук китайской провинции Хунань (2019JJ50842) и Huxiang Молодые таланты провинции Хунань (2019RS2013).

Звери (BALB/c, C57BL/6, мужчина, 8-12 недель) размещаются в конкретном объекте, свободном от патогенов, в Центре лабораторных исследований Сямэньского университета. C57BL/6 используется в качестве реципиента, а BALB/c используется в качестве донора. Все процедуры выполняются в соответствии с руководя...

<ol>
	<li>Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+transplantation+in+congenic+strains+of+mice.">Heart transplantation in congenic strains of mice.</a> Transplantation Proceedings. 5 (1), 733-735 (1973).</li><li>Que, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prolonged+cold+ischemia+time+in+mouse+heart+transplantation+using+supercooling+preservation.">Prolonged cold ischemia time in mouse heart transplantation using supercooling preservation.</a> Transplantation. , (2019).</li><li>Wang, C. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Suppression+of+murine+cardiac+allograft+arteriopathy+by+long-term+blockade+of+CD40-CD154+interactions.">Suppression of murine cardiac allograft arteriopathy by long-term blockade of CD40-CD154 interactions.</a> Circulation. 105 (13), 1609-1614 (2002).</li><li>Hasegawa, T., Visovatti, S. H., Hyman, M. C., Hayasaki, T., Pinsky, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterotopic+vascularized+murine+cardiac+transplantation+to+study+graft+arteriopathy.">Heterotopic vascularized murine cardiac transplantation to study graft arteriopathy.</a> Nature Protocols. 2 (3), 471-480 (2007).</li><li>Chen, Z. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+technique+of+cervical+heterotopic+heart+transplantation+in+mice.">A technique of cervical heterotopic heart transplantation in mice.</a> Transplantation. 52 (6), 1099-1101 (1991).</li><li>Matsuura, A., Abe, T., Yasuura, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simplified+mouse+cervical+heart+transplantation+using+a+cuff+technique.">Simplified mouse cervical heart transplantation using a cuff technique.</a> Transplantation. 51 (4), 896-898 (1991).</li><li>Wang, Q., Liu, Y., Li, X. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simplified+technique+for+heterotopic+vascularized+cervical+heart+transplantation+in+mice.">Simplified technique for heterotopic vascularized cervical heart transplantation in mice.</a> Microsurgery. 25 (1), 76-79 (2005).</li><li>Li, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+technique+for+lung+retransplantation+in+the+mouse.">Surgical technique for lung retransplantation in the mouse.</a> Journal of Thoracic Disease. 5 (3), 321-325 (2013).</li><li>Kamada, N., Calne, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+surgical+experience+with+five+hundred+thirty+liver+transplants+in+the+rat.">A surgical experience with five hundred thirty liver transplants in the rat.</a> Surgery. 93 (1), 64-69 (1983).</li><li>Chen, H., Zhang, Y., Zheng, D., Praseedom, R. K., Dong, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+kidney+transplantation+in+mice:+technique+using+cuff+for+renal+vein+anastomosis.">Orthotopic kidney transplantation in mice: technique using cuff for renal vein anastomosis.</a> PLoS One. 8 (10), 77278 (2013).</li><li>Miller, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+restoration+of+transplantation+tolerance+after+acute+rejection.">Spontaneous restoration of transplantation tolerance after acute rejection.</a> Nature Communications. 6, 7566 (2015).</li><li>Lin, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overexpression+of+Jagged-1+combined+with+blockade+of+CD40+pathway+prolongs+allograft+survival.">Overexpression of Jagged-1 combined with blockade of CD40 pathway prolongs allograft survival.</a> Immunology and Cell Biology. 93 (2), 213-217 (2015).</li><li>Xie, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combined+costimulation+blockade+inhibits+accelerated+rejection+mediated+by+alloantigen-primed+memory+T+cells+in+mice.">Combined costimulation blockade inhibits accelerated rejection mediated by alloantigen-primed memory T cells in mice.</a> Immunological Investigations. 38 (7), 639-651 (2009).</li><li>Shao, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combination+of+monoclonal+antibodies+with+DST+inhibits+accelerated+rejection+mediated+by+memory+T+cells+to+induce+long-lived+heart+allograft+acceptance+in+mice.">Combination of monoclonal antibodies with DST inhibits accelerated rejection mediated by memory T cells to induce long-lived heart allograft acceptance in mice.</a> Immunology Letters. 138 (2), 122-128 (2011).</li><li>Dai, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blockade+of+CD27/CD70+pathway+to+reduce+the+generation+of+memory+T+cells+and+markedly+prolong+the+survival+of+heart+allografts+in+presensitized+mice.">Blockade of CD27/CD70 pathway to reduce the generation of memory T cells and markedly prolong the survival of heart allografts in presensitized mice.</a> Transplant Immunology. 24 (4), 195-202 (2011).</li><li>Yan, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+accelerated+rejection+mediated+by+alloreactive+CD4(+)+memory+T+cells+and+prolonged+allograft+survival+by+arsenic+trioxide.">Inhibition of accelerated rejection mediated by alloreactive CD4(+) memory T cells and prolonged allograft survival by arsenic trioxide.</a> Immunological Investigations. 42 (5), 438-454 (2013).</li><li>Yan, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibiting+accelerated+rejection+mediated+by+alloreactive+CD4(+)+memory+T+cells+and+prolonging+allograft+survival+by+1alpha,25-dihydroxyvitamin+D(3)+in+nude+mice.">Inhibiting accelerated rejection mediated by alloreactive CD4(+) memory T cells and prolonging allograft survival by 1alpha,25-dihydroxyvitamin D(3) in nude mice.</a> Immunology Letters. 149 (1-2), 54-61 (2013).</li><li>Lin, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arsenic+trioxide+is+a+novel+agent+for+combination+therapy+to+prolong+heart+allograft+survival+in+allo-primed+T+cells+transferred+mice.">Arsenic trioxide is a novel agent for combination therapy to prolong heart allograft survival in allo-primed T cells transferred mice.</a> Transplant Immunology. 25 (4), 194-201 (2011).</li><li>Shao, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CD44/CD70+blockade+and+anti-CD154/LFA-1+treatment+synergistically+suppress+accelerated+rejection+and+prolong+cardiac+allograft+survival+in+mice.">CD44/CD70 blockade and anti-CD154/LFA-1 treatment synergistically suppress accelerated rejection and prolong cardiac allograft survival in mice.</a> Scandinavian Journal of Immunology. 74 (5), 430-437 (2011).</li><li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+highly+reproducible+cervical+cuff+technique+for+rat-to-mouse+heterotopic+heart+xenotransplantation.">A highly reproducible cervical cuff technique for rat-to-mouse heterotopic heart xenotransplantation.</a> Xenotransplantation. , (2017).</li><li>Oberhuber, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+cervical+heart+transplantation+model+using+a+modified+cuff+technique.">Murine cervical heart transplantation model using a modified cuff technique.</a> Journal of Visualized Experiments. (92), e50753 (2014).</li><li>Blanchard, J. M., Pollak, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Techniques+for+perfusion+and+storage+of+heterotopic+heart+transplants+in+mice.">Techniques for perfusion and storage of heterotopic heart transplants in mice.</a> Microsurgery. 6 (3), 169-174 (1985).</li><li>Felix, N. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=H2-DMalpha(-/-)+mice+show+the+importance+of+major+histocompatibility+complex-bound+peptide+in+cardiac+allograft+rejection.">H2-DMalpha(-/-) mice show the importance of major histocompatibility complex-bound peptide in cardiac allograft rejection.</a> Journal of Experimental Medicine. 192 (1), 31-40 (2000).</li><li>Tomita, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+technique+of+heterotopic+cervical+heart+transplantation+in+mice.">Improved technique of heterotopic cervical heart transplantation in mice.</a> Transplantation. 64 (11), 1598-1601 (1997).</li><li>Niimi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+technique+for+heterotopic+cardiac+transplantation+in+mice:+experience+of+3000+operations+by+one+surgeon.">The technique for heterotopic cardiac transplantation in mice: experience of 3000 operations by one surgeon.</a> Journal of Heart and Lung Transplantation. 20 (10), 1123-1128 (2001).</li><li>Wang, K., Zhang, N., Li, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+technique+of+mouse+heterotopic+heart+graft+retransplantation.">Improved technique of mouse heterotopic heart graft retransplantation.</a> Microsurgery. 26 (3), 200-202 (2006).</li><li>Plenter, R. J., Grazia, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+heterotopic+heart+transplant+technique.">Murine heterotopic heart transplant technique.</a> Journal of Visualized Experiments. (89), (2014).</li><li>Ratschiller, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterotopic+Cervical+Heart+Transplantation+in+Mice.">Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (102), e52907 (2015).</li><li>Zhou, Y., Gu, X., Xiang, J., Qian, S., Chen, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparative+study+on+suture+versus+cuff+anastomosis+in+mouse+cervical+cardiac+transplant.">A comparative study on suture versus cuff anastomosis in mouse cervical cardiac transplant.</a> Experimental and Clinical Transplantation. 8 (3), 245-249 (2010).</li><li>Fukunaga, N., Bissoondath, V., Rao, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Submandibular+Gland-preserving+Technique+for+Heterotopic+Cervical+Heart+Transplantation+in+Mice.">Submandibular Gland-preserving Technique for Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice.</a> Transplantation. 102 (11), 464-465 (2018).</li></ol>

Модели пересадки сердца мышей являются важными инструментами для исследования иммунологии трансплантации, так как имеются инструменты и материалы для оценки иммунных механизмов этой модели и большого количества генно-модифицированных мышей. Однако микрохирургические технические п...

Создание мыши гетеротопной трансплантации сердца через сквозной анастомоз в брюшной полости в 1973 году был важной вехой в основных исследований иммунологии трансплантации1. Эта модель предоставила важный и действенный инструмент для анализа механизмов травмы ишемии реперфузии2,иммунологического отторжения и толерантности3,4. Тем не менее, сложный и трудоемкий характер операции, а также потенциал для инфекций может привести к тяжелым периоперационным брюшным спайкам и воспалительным реакциям, что приводит к низкой эффективности для гетеротопной модели трансплантации сердца.
Техника трансплантации шейного церемии была впервые описана Чэнем в 19915. В этой модели внешняя яремная вена получателя анастомозирована к легочной артерии трансплантата, а сонная артерия анастомозирована восходящей аортой. Основными преимуществами этого метода являются удобство мониторинга и уменьшение травмы реципиента. В том же году Мацуура описал усовершенствованный метод, в котором конец внешней яремной вены и сонной артерии были когда-либо над тефлоновой манжетой и закреплены окружной шелковой лигатурой6. Некоторые исследователи также фиксированной манжеты право легочной артерии в донорской сердце, прежде чем вставить манжету во внешнюю яремную вену реципиента7. До сих пор, манжеты техника была широко применена в различных сосудистых моделей пересадки педикул, в том числе для легких8,печени9, и почечной10 трансплантации.
На сегодняшний день существует ряд трудностей, связанных с техникой манжеты. Например, сонная артерия трудно evert над манжетой из-за дополнительной эластичности, в результате чего ткань листать назад. Таким образом, для завершения этого шага может потребоваться дополнительная практика и микрохирургический расширитель. Кроме того, приготовление сосуда шейки матки может занять до 25 минут.
Для решения этих проблем, мы вводим внутреннюю технику трубки, которая основана на технике манжеты и включает в себя фиксацию манжеты на внешней яремной вены и сонной артерии с помощью внутренней трубки, чтобы помочь с эверсией стенки сосуда. Кроме того, при простом обучении подготовка получателя сокращается до 15,5 минут. Этот метод снижает сложность операции и не требует дополнительной практики или использования сосудистого расширителя. Он может быть применен во всех трансплантации иммунных исследований, особенно для проверки третьей стороне иммунной толерантности, во время которой реципиент получает два сердечных аллотрансплантатов, один в брюшной полости, а другой в шее11. Мы также рекомендуем сотрудничество между двумя квалифицированными хирургами, чтобы установить эту модель, с одним хирургом подготовки реципиента животных, а другой уборки и имплантации донорского сердца. Такое сотрудничество может сократить время работы до 25 минут. Используя эту оптимизированную процедуру, мы создали сингенные, аллогенные12,13, 14,,15, 1615,,17,18,19, и ксеногенные модели трансплантации сердца мыши20.16
Обоснованием для развития внутренней техники трубки было сокращение времени работы для создания модели пересадки сердца мыши с высоким уровнем успеха. Оптимизация модели трансплантации шейного сердца облегчает приобретение высоких показателей успеха в короткий период времени операции по сравнению с традиционной техникой шов и манжеты21. Кроме того, модель сотрудничества может еще больше сократить теплое ишемическое время донорского сердца по сравнению с операциями, выполняемыми с одним оператором.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Artery cuff</td>
			<td>Self-made</td>
			<td></td>
			<td>Polyamide tube. diameter: 0.55 mm,length: 1.0 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Artery inner tube</td>
			<td>Self-made</td>
			<td></td>
			<td>Polyamide tube. Diameter: 0.28mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro curved forceps</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory</td>
			<td>WA3050</td>
			<td>1/8 arc, 0.3-mm tip without a hook</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro needle holders</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory</td>
			<td>WA2050</td>
			<td>0.2-mm tip</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro scissors</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory</td>
			<td>WA1050</td>
			<td>Straight, blade length: 10 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro straight forceps</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory</td>
			<td>WA3060</td>
			<td>0.15-mm tip without a hook</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scanlan Vascu-Statt Bulldog Clamps</td>
			<td>Scanlan International Inc</td>
			<td>1001-531</td>
			<td>Clamping pressure 20&#8211;25 grams</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vein cuff</td>
			<td>Self-made</td>
			<td></td>
			<td>Polyamide tube. diameter: 0.9 mm,length: 1.2 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vein inner tube</td>
			<td>Self-made</td>
			<td></td>
			<td>Polyamide tube. Diameter: 0.6 mm</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

optimization of the cuff technique for murine heart transplantation

Муринная пересадка сердца проводится уже более 40 лет. С достижениями в микрохирургии, некоторые новые методы были использованы для повышения хирургической эффективности. В нашей лаборатории мы оптимизировали технику манжеты с двумя основными шагами. Во-первых, мы использовали внутреннюю технику трубки, чтобы вставить временную внутреннюю трубку во внешнюю яремную вену и кровеносный сосуд сонной артерии, чтобы облегчить eversion сосуда над манжетой. Во-вторых, мы провели полную гетеротопическую трансплантацию сердца в сотрудничестве с двумя опытными хирургами. Эти изменения эффективно сократили время работы до 25 минут, с показателем успеха 95%. В этом докладе мы подробно описываем эти процедуры и предоставляем дополнительное видео. Мы считаем, что этот доклад об улучшенной технике манжеты будет предлагать практические рекомендации для гетеротопной трансплантации сердца и повысит полезность этой модели мыши для фундаментальных исследований.

Время хирургической операции
После тренировки, опытный хирург может успешно выполнить операцию в течение 35 минут с помощью внутренней техники трубки, в которой примерно 15,5 минут требуется для подготовки реципиента, 10,9 минут требуется для подготовки донора, и 4,4...

Watch this Scientific Journal Video about Optimization of the Cuff Technique for Murine Heart Transplantation at JoVE.com

Optimization of the Cuff Technique for Murine Heart Transplantation

Мы вводим внутренний подход трубки к технике манжеты для мыши шейки гетеротопной трансплантации сердца, чтобы помочь evert сосуд над манжетой. Мы обнаружили, что сотрудничество между двумя опытными хирургами заметно сокращает время операции.

Оптимизация техники манжет для трансплантации сердца Мурина

Murine cardiac transplantation has been performed for more than 40 years. With advancements in microsurgery, certain new techniques have been used to ...

Привет, все. Меня зовут д-р Чжунцюань Ци.Это широко известно, что манжеты техника была использована в качестве сердечной трансплантации с 1991 года. Хотя были большие успехи в медицинской хирургии и новой хирургической техники, Есть еще некоторые трудности, основанные на манжеты техники.Это форма открытия, где они покажут вам оптимическую половину техники, которая может значительно равняться хирургической эффективности. Основными процедурами является временное вставки в эту трубку в козырек. Доказательство читать ISO почти половина.Вставка техники трубки. Квалифицированный хирург может выполнить операцию в течение 35 минут с 95%успеха. Затем они могут использовать тепловой хирург операции модуль, который еще больше повышает эффективность операции, показывая в skeptimic и время работы будет сокращено примерно до 35 минут.Спасибо. И это связывает рецепт и мили с пентобарбиталом. Используйте атрауматические механические клиперы для удаления волос в правой области шейки матки.Используйте стерильный хлопчатобумажный наконечник аппликатор для протрите хирургической области с йодом антисептик следуют 70% этанола. Поместите мышь в положение лежа на платформе операции. Накройте мышь стерильной марлей.Используйте офтальмологические ножницы, чтобы сделать поперечный разрез от нижней трети линии NACMEC к правому плечу ключицы сустава. Изолировать правую внешнюю джунглевую вену с микро изогнутыми типсами, чтобы разоблачить достаточно длины. Отрежьте бранчи с помощью электрокоагуляции.И найти судно на disto и с помощью шести 2 0 шесть швов. Зажим внешней джунглярной вены проксимально с помощью порохового зажима. А затем перевести вену непосредственно на лигатуру с помощью микро-ножницы.Вымойте люмен сосуда с 100 единиц на миллилитр 02 четыре степени Цельсия гепарина заметным для удаления любой остаточной крови. Потяните внешнюю вену джунглара через вену с помощью микро прямых типсов. Вставьте внутреннюю трубку вены в люмен в качестве стента и над стенкой сосуда над кривой с микро прямыми типсами.Исправить раздражающий эндотелий Фасо в проксимальной конце кривой с помощью окружного 8 до 06 шва. Используйте микро прямые типсы, чтобы вывести внутреннюю трубку вены из сосуда вены. Выполните тупое вскрытие с помощью микро-типсов, чтобы изолировать правую сонную артерию, прилегающую к внутреннему краю стерноклидомастоида.Зажим правой сонной артерии проксимально с помощью зажима бэбка. Найдите сонной артерии distally с помощью 6 до 06 шва. И использовать микро-ножницы для сделки сонной артерии проксимально лигатуры.Вымойте сонную артерию 100 единицами на миллилитр 02 четыре гепарина по Цельсию, чтобы удалить остаточную кровь. Пройдите через сонную артерию через кривую артерии и вставьте внутреннюю трубку артерии в сосуд артерии с помощью микро прямых типсов. Цель для судна над кривой с помощью микро прямых типсов.Исправить перевернутый поверхностный эндотелий с помощью окружного 8 до 06 шва. Свясть внутреннюю кончик артерии из сосуда артерии с микро прямыми типсами. Анестезия и ее инфекция такие же, как и у реципиента.Сделайте разрез брюшной средней линии с помощью офтальмологических ножниц и разоблачите брюшную полость. Используйте микро кривые типсы, чтобы разоблачить нижняя кава вены. А затем внутривенно вводят 200 микролитров по 100 единиц на миллилитр 02 четыре градуса Цельсия гепарина на 20 грамм массы тела через нижняя вена кавы.Выполните торакотомию с помощью офтальмологических ножниц. Отрежьте ребра через палитры Ромита подмышки легкие разрезы. Flav передней стенки грудной клетки наружу, чтобы разоблачить грудной полости.Акцизный тимус с микро-типсами. Разоблачить аорту, а затем обильные 200 микролитр 100 единиц на миллилитр 02 четыре степени Цельсия гепарина заметным для коронарной артерии через аортальной арки. Используйте микро-ножницы, чтобы перерезать восходящую аорту в начале аортальной арки.Перерезать легочную артерию в начале двух основных ветвей с помощью микро ножниц. Найдите превосходную каву вены и нижняя кава вены примерно с помощью шва от 6 до 02 и используйте микро-ножницы, чтобы перерезать дистиллят вены к лигатуре. Найдите легочные вены вместе окружно, используя один шесть, до 06 шва и отрезать ветви вены distally к лигатуре с помощью микро-ножницы.Удалите пересадку сердца из окружающих мягких тканей. Поместите донорское сердце вверх дном в правую область шеи реципиента. Вввесть легочную артерию донорского сердца в петлю от 6 до 06 с микро прямыми типсами.Оберните люмен сосуда вокруг полой вены, а затем затяните 6 до 06 швов петли вокруг теленка, чтобы согнуть сосуд сустава. Выполните анатомоз аорты трансплантата и кривой артерии. Отпустите слипаемую яремную вену с последующим слипаемой яремной артерией.Держите сосуд вместе и витой и убедитесь, что кровоток беспрепятственно. Установите проходящего трансплантата сердца в подкожное пространство, а затем шов разреза. Запись времени, чтобы нормальный ритм пазухи и сохранение нормального ритма пазухи, по крайней мере пять минут после освобождения зажима для мониторинга послеоперационной функции трансплантата.Поместите получателя в одиночку на одно одеяло, пока получатель не проснется от наркоза. Взятые вместе, хотя наша операция использует манжеты методы, которые были зарегистрированы, мы создали внутренний метод ядра на основе этого. Уменьшите сложность операции и сократите время анатомоза за счет оптимизации техники.Мы предложили девиз двойной хирургии для дальнейшего повышения эффективности операции показано в схеме. А время работы будет сокращено примерно до 25 минут. Полностью MHC несовместимые BALBC алотрансплантат сердце может быть отклонено через восемь дней после трансплантации в C57BL6 реципиента мышей.Сингенеические пересадки сердца, используемые в наших исследованиях, пережили более 100 дней, за исключением одного редкого случая из-за 15%-ной потери веса по сравнению с нормальным весом перед операцией. Гистопатология алотрансплантата на седьмой день выявила характерные черты острого отторжения, в том числе тяжелый клеточный инфильтрат с некрозом тканей. Сингенные трансплантаты близки к норме без каких-либо признаков некроза миоцитов или инфильтрации воспалительных клеток.Через 100 дней после сингенетической пересадки сердца, сосудистый эндотелий участка анатомоза может быть собран и окрашен иммунофлуоресцентным. В этом анализе не наблюдалось прочь захлестнуло сосудистую стенку, тромбоз или утолщение инима. Электроскопическая визуализация показала, что гладкий эндотелий и регулярное образование продольной коры с эндотелиальными клетками расположены аккуратно и тесно без каких-либо очевидных отложений на поверхности.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Murine Model of CD40-activation of B cells

Мышиной модели CD40-активации В-клеток

Research on B cells has shown that CD40 activation improves their antigen presentation capacity. When stimulated with interleukin-4 and CD40 ligand ...

Isolation and Transplantation of Different Aged Murine Thymic Grafts.

Выделение и Трансплантация различных престарелых мышиных тимуса трансплантатов.

The mechanisms that regulate the efficacy of thymic selection remain ill-defined. The method presented here allows in vivo analyses of the development and ...

Automated Cell Enrichment of Cytomegalovirus-specific T cells for Clinical Applications using the Cytokine-capture System

Автоматизированная Обогащение Ячейка Цитомегаловирус-специфические Т-клетки для клинического применения с использованием системы цитокинов захвата

The adoptive transfer of pathogen-specific T cells can be used to prevent and treat opportunistic infections such as cytomegalovirus (CMV) infection ...

Flow Cytometry-based Assay for the Monitoring of NK Cell Functions

Проточной цитометрии на основе анализа на мониторинге NK клеточных функций

Natural killer (NK) cells are an important part of the human tumor immune surveillance system. NK cells are able to distinguish between healthy and ...

Optimization of a Quantitative Micro-neutralization Assay

Оптимизация количественного микро-анализ нейтрализации

The micro-neutralization (MN) assay is a standard technique for measuring the infectivity of the influenza virus and the inhibition of virus replication. ...

Murine Full-thickness Skin Transplantation

Мышиные Полная толщина кожи Трансплантация

Murine full-thickness skin transplantation is a well-established in vivo model to study alloimmune response and graft rejection. Despite its limited ...