Name: lineage tracing and clonal analysis in developing cerebral cortex using mosaic analysis with double markers (madm)
Uploaded: 2020-05-08T14:30:00
Duration: 9 min 25 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Lineage Tracing and Clonal Analysis in Developing Cerebral Cortex Using Mosaic Analysis with Double Markers MADM at JoVE.com

Мы благодарим всех членов лаборатории Hippenmeyer за обсуждение, Биоизмовывания фонда, фонда науки о жизни, и доклинических средств в IST Австрии за техническую поддержку. Эта работа была поддержана институциональными фондами IST Austria; Р.Б. получил поддержку от Австрийского научного фонда (FWF) Лиз-Мейтнер программы (M 2416); N.A получил поддержку от Австрийского научного фонда (FWF) Firnberg-Programm (T 1031); ГК получила поддержку от исследовательской и инновационной программы Европейского союза «Горизонт 2020» в рамках соглашения о предоставлении гранта «Мария Склодовская-Кюри» No 754411 в качестве аспиранта ISTplus; А.Х. получил поддержку от ЗAW DOC (докторская стипендия Австрийской академии наук). Это исследование было также поддержано Европейским исследовательским советом (ERC) в рамках исследовательской и инновационной программы Европейского союза Horizon 2020 (соглашение о предоставлении грантов No 725780 LinPro) S.H.

Авторам нечего раскрывать.

Описан метод использования MADM для отслеживания клеточной линии отдельных RGPs in vivo в развивающемся неокортексе. В сочетании с TM-индуцируемым CreERT2,события MADM могут быть точно приурочены, обеспечивая высоко качественное и количественное визуальное считывание моделей деления стволовых клеток на уровне одной клетки. По титрая дозы TM доставлены, в идеальной ситуации в среднем менее одного клона на корковое полушарие может быть получено, обеспечивая адекватное пространственное разделение однозначно различать отдельных клонов. Поддерживая целостность тканей, этот метод также фиксирует важную информацию о положении, морфологии и абсолютных числах клеток. Кассеты MADM на Chr. 117,11,12,46,56,57,на Chr. 751, и оригинальный MADM на Rosa2647,53,,59 были использованы в исследованиях анализа клонала MADM. Высокое разрешение отдельных клеток обеспечивает беспрецедентное понимание как морфологии и клональной связи клеток дочери и позволяет живое изображение размножающихся стволовых клеток и новых клонов46,52.
Кесарево сечение и воспитание щенков для анализа клонов в послеродовой временной точки является необходимым и важным шагом в протоколе. В зависимости от состояния здоровья беременной плотины, обработанной ТМ, может быть необязательно проводить кесарево сечение. Тем не менее, повышение щенков с приемной матерью по-прежнему требуется, потому что TM-обработанные матери могут возникнуть проблемы с кормления. Не было отмечено никаких различий в необходимости создания различных драйверов CreERT2. Обе линии MADM и приемные матери поддерживаются на выкрытом фоне CD-1. Если кесарево сечение не является необходимым, ТМ-обработанных беременных плотины, используемые для создания экспериментальных щенков могут быть повторно использованы для дополнительных экспериментальных разведения в соответствии с принципами 3R (обратите внимание, что это может быть сделано только в том случае, если животных экспериментальных лицензий одобрить эту практику). Приемные матери могут быть использованы для воспитания щенков в течение 2 дней после родов, но более высокие показатели успеха наблюдались, когда приемные матери рожают в тот же день, как экспериментальные мыши, которые должны быть воспитаны. Поэтому важно установить приуроченные спаривания для приемных матерей параллельно с экспериментальными спариваниями в шаге 1.1. Поддержание аналогичного номера помета, как помет первоначальной приемной матери может улучшить выживаемость воспитательных щенков, и, следовательно, удаление некоторых из всех оригинальных помет может быть необходимо. Дополнительные шаги, которые могут улучшить воспитание включает в себя потирая перчатки экспериментатора с мусором и пищей (чтобы удалить запах перчаток); потирая щенков нежно после кесарева сечения с фрагментами загрязненного помета и гнезда приемной матери; и размещение щенков в тесном контакте с щенками приемной матери до их размещения в клетке для приемных мышей.
Как и в других методах отслеживания линий, основанных на репортерах, при выборе оптимального драйвера CreERT2 для клональных экспериментов MADM необходимо тщательно учитывать. Во-первых, промоутер используется должны выразить рекомбинации как временно, так и пространственно в популяции прародителей интересов. Поиск этого промоутера может быть сложной задачей, потому что некоторые промоутеры могут изменить шаблоны выражения или замолчать на разных стадиях развития. Для улучшения специфичности типа клеток были использованы несколько рекомбиназу, каждая из которых была создана отдельными промоутерами. Когда одна или обе рекомбины выражены в одной клетке, это маркирует клетку и ее потомство с флуоресцентным репортером74,,75,,76,77. Таким образом, важно выбрать драйвер CreERT2, который специфичен для популяции анализируемых прародителей.
Наиболее важным шагом в этом методе является идентификация клона, поскольку все клетки должны быть получены однозначно из одного события рекомбинации (шаг 8.1). Титрация концентрации ТМ обеспечивает менее одного скопления красных/зеленых клеток на полушарие мозга и максимизирует вероятность анализа одного клона (шаг 2.2)7,11. Клоны должны быть отброшены, если соседние кластеры ячеек происходят в пределах 500 мкм от интересующего клона. Поэтому важно изучить несколько разделов до и после появления клона, чтобы убедиться, что поблизости нет дополнительных событий рекомбинации. Из-за более слабого сигнала фторфоров, необходимо выполнять иммуногистохимию для eGFP и tdT в эмбриональных клонах (см. раздел 6). Это рекомендуется только для взрослых клонов, если дополнительные антигены будут колебелированные. При клонах изображений важно захватить всю ширину коры, где находится клон (т.е. от пиальной поверхности до мозоли корпуса; см. шаг 8.4), чтобы не пропустить ни одной клетки. Это также облегчает выравнивание изображения во время обработки изображений (раздел 9). Раздел 8 протокола требует перевернутого конфокального микроскопа, но может быть адаптирован в зависимости от доступной установки микроскопа. Эпифлуоресценция микроскопия может быть использована, но конфокальная микроскопия рекомендуется, потому что это приводит к снижению светового загрязнения из-за пределов фокус-плоскости. Важно также, чтобы интенсивность и увеличение лазера корректировались таким образом, чтобы можно было однозначно определить зеленые, красные и желтые клетки. Независимо от настройки, рекомендуется использовать цель, по крайней мере 20x, чтобы обеспечить полное пространственное разделение близко расположенных клеток. В дополнение к записи корковой глубины всех клеток (шаг 8.6), корковые области, где находятся клоны, должны быть идентифицированы с помощью атласа мозга, такого как атлас мозга Аллена или других стереотакксических карт координат. Парадигма именования файлов также должна быть принята, чтобы убедиться, что изображения клонов легко идентифицировать. Следующая информация может быть включена в файл именования: уникальный идентификатор изображения, дата изображение было принято, генотип животного, возраст индукции, возраст анализа, номер изображения по отношению к остальным изображениям из того же клона.
Введение мутации дистальной к одной кассете MADM отчетливо позволяет генерации генетических мозаик71 и позволяет вскрытие молекулярных регуляторов линии и типа клеток разнообразия на уровне клональногоуровня 7,11,46,62. Чтобы создать генетическую мозаику с MADM, кассеты MADM должны быть мейотически связаны с той же хромосомой, что и ген, представляющий интерес (см. рисунок 2 для схемы размножения). Это ограничивает текущий клональный анализ с MADM генами, расположенными на Chr. 751, Chr. 1146, Chr. 1251, и Chr. 6 дистальный к Rosa26 локус47. В будущих исследованиях будут использованы кассеты MADM, ориентированные на любую хромосому, что позволит провести мозаичный анализ практически всех генов генома мыши на уровне клона.
Наконец, MADM не ограничивается анализом клеток-предшественников в развивающемся неокортексе. Изучение многих ниш стволовых клеток может извлечь выгоду из способности решать пространственно-временной договоренности клонально связанных клеток. Применяя МАДМ к другим регионам мозга, заболеваемости (например, рак), или в других тканях47,50,5151,52,53,54,55,56,57,58,59,исследования показали, линии отношения в клонов, полученных из различных классов прагенитора и стволовых клеток (см. таблицу 1 для текущего списка MADM исследований). Еще одно интересное будущее приложение MADM заключается в том, чтобы объединить его с дополнительными функциональными или субклеточными репортерами, что увеличит степень информации, которая может быть получена от клонов.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1 mL tuberculin syringe (Omnifix Luer Lock)</td>
			<td>Braun</td>
			<td>9204512N</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1,4-diazabicyclooctane (DABCO)</td>
			<td>Roth</td>
			<td>0718.2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 mL Syringe (Omnifix Luer Lock)</td>
			<td>Braun</td>
			<td>8508429N</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 mL conical centrifuge</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>65.554.502</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24 multi-well dishes</td>
			<td>Roth/Greiner Bio-one</td>
			<td>CE56.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>27- gauge x 3/4 needle (Sterican)</td>
			<td>Braun</td>
			<td>16010256E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corn oil</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C8267-500ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverslips (24 x 60 mm #1)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific (Menzel)</td>
			<td>15747592</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryostat Cryostar NX70</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>957000H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dako Pen (Wax marker)</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>S200230-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI (4&#39;,6-Diamidino-2-Phenylindole, Dihydrochloride)</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>D1306</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable microtome blade (MX35 Ultra)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>705830</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine Forceps (Dumont #5)</td>
			<td>Fine Science Tools (FST)</td>
			<td>11254-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass anti-roll plate</td>
			<td>Histocom</td>
			<td>M 449980</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycerol</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G5516</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LSM 800 Confocal</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mounting medium</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>25 mg/mL DAPCO, 6 g Glycerol, 2.4 g Mowiol 4-88, 6 mL dH2O, 12 mL 0.2 M Tris-HCl (pH 8.5)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mowiol 4-88</td>
			<td>Roth</td>
			<td>0713.2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal donkey serum</td>
			<td>Innovative Research</td>
			<td>IGDNSER100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>441244-1KG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peristaltic pump 323E/D 400RPM</td>
			<td>Watson-Marlow</td>
			<td>036.3124.00A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S8501-5KG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Superfrost plus glass slides</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>J1800AMNT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tamoxifen</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T5648</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Embedding mold T-12 (22mm square)</td>
			<td>Polysciences Inc.</td>
			<td>18986-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue-Tek O.C.T</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>4583</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T8787-250ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trizma hydrochloride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>93363</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tween-20</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P9416-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Software and Plugins:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fiji</td>
			<td>1.52p</td>
			<td><a href="http://fiji.sc/" target="_blank">Fiji</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MultiStackReg</td>
			<td>1.45</td>
			<td><a href="http://bradbusse.net/sciencedownloads.html" target="_blank">Download link</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TurboReg</td>
			<td></td>
			<td><a href="http://bigwww.epfl.ch/thevenaz/turboreg/" target="_blank">EPFL Bioimaging</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zen Blue</td>
			<td>2.6</td>
			<td><a href="http://www.zeiss.com/microscopy/en_us/products/microscope-software/zen.html#introduction" target="_blank">Zeiss</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Experimental Models: Organisms/Strains:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse: Emx1-CreER</td>
			<td>The Jackson Laboratory</td>
			<td>JAX:027784</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse: MADM-11-GT</td>
			<td>The Jackson Laboratory</td>
			<td>JAX:013749</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse: MADM-11-TG</td>
			<td>The Jackson Laboratory</td>
			<td>JAX:013751</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Primary antibodies:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chicken anti-GFP 1:500</td>
			<td>Aves Labs</td>
			<td>GFP-1020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti-tdTomato 1:500</td>
			<td>Sicgen Antibodies</td>
			<td>AB8181-200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit anti-RFP 1:500</td>
			<td>MBL</td>
			<td>PM005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Secondary antibodies:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Donkey Anti-Chicken Alexa Fluor 488 1:500</td>
			<td>Jackson Immuno Research</td>
			<td>715-475-150</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Donkey Anti-Goat Cy3 1:500</td>
			<td>Jackson Immuno Research</td>
			<td>705-165-147</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Donkey Anti-Rabbit Cy3 1:500</td>
			<td>Jackson Immuno Research</td>
			<td>711-165-152</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

lineage tracing and clonal analysis in developing cerebral cortex using mosaic analysis with double markers (madm)

Начиная с ограниченного пула прародителей, кора головного мозга млекопитающих образует высокоорганизованные функциональные нейронные цепи. Тем не менее, основные клеточные и молекулярные механизмы, регулирующие линейные переходы нервных стволовых клеток (НСЦ) и возможное производство нейронов и глии в развивающемся нейроэпителии, остаются неясными. Методы отслеживания шаблонов деления NSC и картирования линии клонально связанных клеток значительно продвинулись вперед. Тем не менее, многие современные методы отслеживания линий страдают от отсутствия клеточного разрешения судьбы клеток потомства, что имеет важное значение для расшифровки моделей деления клеток-предшественников. Представлен протокол с использованием мозаичного анализа с двойными маркерами (MADM) для выполнения клонального анализа in vivo. MADM одновременно манипулирует отдельными клетками-предшественниками и визуализирует точные модели деления и прогрессии линии при беспрецедентном разрешении одной клетки. МАДМ основе межхромомономных рекомбинации событий во время G2-X фазы митоза, вместе с временно неуступчивой CreERT2, предоставить точную информацию о датах рождения клонов и их разделения моделей. Таким образом, отслеживание линии MADM обеспечивает беспрецедентные качественные и количественные оптические считывание режима пролиферации прародителей стволовых клеток на уровне одной клетки. MADM также позволяет изучить механизмы и функциональные требования генов-кандидатов в прогрессировании линии NSC. Этот метод уникален тем, что сравнительный анализ контроля и мутантных субклонов может быть выполнен в той же среде ткани in vivo. Здесь протокол подробно описан, и продемонстрированы экспериментальные парадигмы для использования MADM для клонального анализа и отслеживания линий в развивающейся коре головного мозга. Важно отметить, что этот протокол может быть адаптирован для выполнения клонального анализа MADM в любой нише стволовой клетки, до тех пор, пока присутствует драйвер CreERT2.

Watch this Scientific Journal Video about Lineage Tracing and Clonal Analysis in Developing Cerebral Cortex Using Mosaic Analysis with Double Markers MADM at JoVE.com

Lineage Tracing and Clonal Analysis in Developing Cerebral Cortex Using Mosaic Analysis with Double Markers MADM

Представлен протокол для отслеживания линий и функционального генетического анализа генов-кандидатов на уровне одной клетки с использованием мозаичного анализа с двойными маркерами (MADM). Клональный анализ MADM обеспечивает количественную основу для измерения пролиферативного поведения, клеточного выхода и родовых отношений отдельных прародителей и их клеток дочери.

Отслеживание линий и клональный анализ при разработке коры головного мозга с использованием мозаичного анализа с двойными маркерами (MADM)

Beginning from a limited pool of progenitors, the mammalian cerebral cortex forms highly organized functional neural circuits. However, the underlying ...

Мозаичный анализ с помощью технологии Double Markers является мощным методом, который может предоставить высококоличеную информацию о поведении пролиферации и выводах погребов отдельных стволовых клеток. Уникальной особенностью этой техники, является то, что она позволяет отслеживания линии и функционального генетического анализа генов-кандидатов на уровне одной клетки.demontrating к процедуре будет, Кармен Streicher, ваш техник, Николь Amberge, пост-док, Gisselle Cheung, пост-док и Энди Хансен, аспирант из моей лаборатории. Для того чтобы навести события рекомбинации MADM в экспериментальных мышах, используйте шприц 1ml оборудованный с иглой 25 датчика для того чтобы поставить одиночную впрыску Tamoxifen Intraperitoneal в timed к супоросой запруде. От клонального анализа MADM до постнатальных точек времени. В эмбриональные дни с 18 до 19, поместите беременную мышь в положение на спине и дезинфицировать мех с 70%этанола. Сделайте небольшой разрез на коже в нижней части живота над маткой и сделать второй разрез через мышцы и брюшной мышечной стенки, чтобы выявить брюшной полости. Используйте ножницы, чтобы отделить матку от окружающих тканей и поместить неповрежденную матку в перчатку с теплой водой. Затем используйте тонкие ножницы и пальцы, чтобы тщательно открыть стенки матки, чтобы освободить эмбрионы. Очистите щенков мягко нажав сундуки время от времени, чтобы начать дыхание перед передачей пренатальных животных приемной матери. Для сбора нервной MADM Клон Ткань место анестезированные животные в положении на спине на перфузии хирургии лоток и дезинфицировать мех с 70% этанола. Используйте ножницы и типсы, чтобы сделать один разрез через кожу и один разрез через мышечный слой. Когда грудной полости видна, нюхать и поднимать диафрагму, чтобы выявить сердце и тщательно обрезать и приколоть грудную клетку к хирургической tray.insert иглы подключен к перистальтической трубки насоса заполнены PBS в левом нижнем желудочков сердца и использовать небольшие ножницы Iris, чтобы сделать разрез в задней части правого атриума. Perfuse сердечно-сосудистой системы с PBS следуют сразу же перфузии со свежеприготовленным ледяным холодом 4%paraformaldehyde в PBS. Когда перфузия завершена, удалить мозг через тщательное вскрытие и место собранного органа, по крайней мере в пять раз объем мозга свежих 4%paraformaldehyde ночь на 4

Research

JoVE Journal

Biology

Lineage Tracing and Clonal Analysis in Developing Cerebral Cortex Using Mosaic Analysis with Double Markers (MADM)

A Neuronal and Astrocyte Co-Culture Assay for High Content Analysis of Neurotoxicity

Нейронов и астроцитов сотрудничеству культуры Пробирной высоких Анализ содержания Нейротоксичность

High Content Analysis (HCA) assays combine cells and detection reagents with automated imaging and powerful image analysis algorithms, allowing ...

Analysis of DNA Double-strand Break (DSB) Repair in Mammalian Cells

Analysis of DNA Double-strand Break DSB Repair in Mammalian Cells

Анализ ДНК двухцепочечной Break (DSB) Ремонт в клетках млекопитающих

DNA double-strand breaks are the most dangerous DNA lesions that may lead to massive loss of genetic information and cell death.  Cells repair DSBs using ...

Phenotypic Analysis and Isolation of Murine Hematopoietic Stem Cells and Lineage-committed Progenitors

Фенотипический анализ и выделение мышей гемопоэтических стволовых клеток и Lineage, совершенных прародителей

The bone marrow is the principal site where HSCs and more mature blood cells lineage progenitors reside and differentiate in an adult organism. HSCs ...

Fruit Volatile Analysis Using an Electronic Nose

Фруктовые летучие анализ с помощью электронного носа

Numerous and diverse physiological changes occur during fruit ripening, including the development of a specific volatile blend that characterizes fruit ...

Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

Визуализации и анализа молекул мРНК с помощью флуоресцентной<em&gt; В Ситу</em&gt; Гибридизация в<em&gt; Saccharomyces CEREVISIAE</em

The Fluorescence in situ Hybridization (FISH) method allows one to detect nucleic acids in the native cellular environment. Here we provide a protocol for ...

Rapid and Efficient Zebrafish Genotyping Using PCR with High-resolution Melt Analysis

Быстрое и эффективное данио рерио Генотипирование Использование ПЦР с высоким разрешением расплава анализа

Zebrafish is a powerful vertebrate model system for studying development, modeling disease, and performing drug screening. Recently a variety of genetic ...

Analysis of Autophagy in Penicillium chrysogenum by Using Starvation Pads in Combination With Fluorescence Microscopy

Analysis of Autophagy in Penicillium chrysogenum by Using Starvation Pads in Combination With Fluorescence Microscopy

Анализ аутофагии в<em&gt; Пеницилл золотистый</em&gt; С помощью голодания колодки в сочетании с флуоресцентной микроскопии

The study of cellular quality control systems has emerged as a highly dynamic and relevant field of contemporary research. It has become clear that cells ...

Open-source Single-particle Analysis for Super-resolution Microscopy with VirusMapper

С открытым исходным кодом Анализ Одночастичного для супер-разрешение микроскопии с VirusMapper

Super-resolution fluorescence microscopy is currently revolutionizing cell biology research. Its capacity to break the resolution limit of around 300 nm ...

Laboratory Protocol for Genetic Gut Content Analyses of Aquatic Macroinvertebrates Using Group-specific rDNA Primers

Лаборатория протокол для генетических кишки содержание анализа водных макробеспозвоночных использование конкретных групп рДНК грунтовки

Analyzing food webs is essential for a better understanding of ecosystems. For example, food web interactions can undergo severe changes caused by the ...

LDL Cholesterol Uptake Assay Using Live Cell Imaging Analysis with Cell Health Monitoring

LDL холестерина поглощения Assay с использованием живой клетки изображений анализ с ячейкой мониторинг состояния

The regulation of LDL cholesterol uptake through LDLR-mediated endocytosis is an important area of study in various major pathologies including metabolic ...