Name: modeling age-associated neurodegenerative diseases in caenorhabditis elegans
Uploaded: 2020-08-15T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Modeling Age-Associated Neurodegenerative Diseases in Caenorhabditis elegans at JoVE.com

نشكر تشانيوتاكيس م. وكوناكيس ك. لتسجيل الفيديو وتحريره. يتم تمويل شركة K.P. من منحة من المؤسسة اليونانية للبحث والابتكار والأمانة العامة للبحوث والتكنولوجيا (GSRT). يتم تمويل N.T. من خلال منح من مجلس البحوث الأوروبي (ERC - GA695190 - MANNA) ، وبرامج إطار عمل المفوضية الأوروبية ، ووزارة التعليم اليونانية.

1. موت الخلايا النخرية الناجم عن القنوات الأيونية المفرطة
ملاحظة: كسب من وظيفة الطفرات في الأسرة الجينية من degenerins، بما في ذلك mec-4 و deg-3 من بين أمور أخرى، والنتائج في توليد القنوات الأيونية مفرطة النشاط مما يؤدي إلى موت الخلايا النخرية من الخلايا العصبية مستقبلات الل?...

<ol>
	<li>Nikoletopoulou, V., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Necrotic+cell+death+in+Caenorhabditis+elegans.">Necrotic cell death in Caenorhabditis elegans.</a> Methods in Enzymology. 545, 127-155 (2014).</li><li>Syntichaki, P., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+biochemistry+of+neuronal+necrosis:+rogue+biology.">The biochemistry of neuronal necrosis: rogue biology.</a> Nature Reviews Neuroscience. 4 (8), 672-684 (2003).</li><li>Syntichaki, P., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+models+of+mechanotransduction:+the+nematode+Caenorhabditis+elegans.">Genetic models of mechanotransduction: the nematode Caenorhabditis elegans.</a> Physiological Reviews. 84 (4), 1097-1153 (2004).</li><li>Berkowitz, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+a+C.+elegans+dopamine+neuron+degeneration+assay+for+the+validation+of+potential+Parkinson's+disease+genes.">Application of a C. elegans dopamine neuron degeneration assay for the validation of potential Parkinson's disease genes.</a> Journal of Visualized Experiments. (17), (2008).</li><li>Brignull, H. R., Moore, F. E., Tang, S. J., Morimoto, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polyglutamine+proteins+at+the+pathogenic+threshold+display+neuron-specific+aggregation+in+a+pan-neuronal+Caenorhabditis+elegans+model.">Polyglutamine proteins at the pathogenic threshold display neuron-specific aggregation in a pan-neuronal Caenorhabditis elegans model.</a> Journal of Neuroscience. 26 (29), 7597-7606 (2006).</li><li>Gidalevitz, T., Ben-Zvi, A., Ho, K. H., Brignull, H. R., Morimoto, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+disruption+of+cellular+protein+folding+in+models+of+polyglutamine+diseases.">Progressive disruption of cellular protein folding in models of polyglutamine diseases.</a> Science. 311 (5766), 1471-1474 (2006).</li><li>Gitler, A. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Parkinson's+disease+protein+alpha-synuclein+disrupts+cellular+Rab+homeostasis.">The Parkinson's disease protein alpha-synuclein disrupts cellular Rab homeostasis.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 105 (1), 145-150 (2008).</li><li>Klaips, C. L., Jayaraj, G. G., Hartl, F. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathways+of+cellular+proteostasis+in+aging+and+disease.">Pathways of cellular proteostasis in aging and disease.</a> Journal of Cell Biology. 217 (1), 51-63 (2018).</li><li>Labbadia, J., Morimoto, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+biology+of+proteostasis+in+aging+and+disease.">The biology of proteostasis in aging and disease.</a> Annual Review of Biochemistry. 84, 435-464 (2015).</li><li>Tucci, M. L., Harrington, A. J., Caldwell, G. A., Caldwell, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+dopamine+neuron+degeneration+in+Caenorhabditis+elegans.">Modeling dopamine neuron degeneration in Caenorhabditis elegans.</a> Methods in Molecular Biology. 793, 129-148 (2011).</li><li>Kourtis, N., Nikoletopoulou, V., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+heat-shock+proteins+protect+from+heat-stroke-associated+neurodegeneration.">Small heat-shock proteins protect from heat-stroke-associated neurodegeneration.</a> Nature. 490 (7419), 213-218 (2012).</li><li>Kourtis, N., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+heat+shock+proteins+and+neurodegeneration:+recent+developments.">Small heat shock proteins and neurodegeneration: recent developments.</a> BioMolecular Concepts. 9 (1), 94-102 (2018).</li><li>Kumsta, C., Chang, J. T., Schmalz, J., Hansen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hormetic+heat+stress+and+HSF-1+induce+autophagy+to+improve+survival+and+proteostasis+in+C.+elegans.">Hormetic heat stress and HSF-1 induce autophagy to improve survival and proteostasis in C. elegans.</a> Nature Communications. 8, 14337 (2017).</li><li>Schindelin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fiji:+an+open-source+platform+for+biological-image+analysis.">Fiji: an open-source platform for biological-image analysis.</a> Nature Methods. 9 (7), 676-682 (2012).</li><li>Palikaras, K., Lionaki, E., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coordination+of+mitophagy+and+mitochondrial+biogenesis+during+ageing+in+C.+elegans.">Coordination of mitophagy and mitochondrial biogenesis during ageing in C. elegans.</a> Nature. 521 (7553), 525-528 (2015).</li><li>Samara, C., Syntichaki, P., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autophagy+is+required+for+necrotic+cell+death+in+Caenorhabditis+elegans.">Autophagy is required for necrotic cell death in Caenorhabditis elegans.</a> Cell Death and Differentiation. 15 (1), 105-112 (2008).</li></ol>

هنا ، نقدم ونصف منهجيات يمكن الوصول إليها على نطاق واسع للنمو ، والتزامن والفحص المجهري لبعض نماذج C. elegans متعددة الاستخدامات التي تحقق في التنكس العصبي المعتمد على العمر. على وجه الخصوص، نحن تقييم وتشريح الأسس الخلوية والجزيئية من العمر المرتبطة انهيار الخلايا العصبية باستخدام فرط ت...

على مدى العقدين الماضيين، وقد استخدمت على نطاق واسع C. elegans ككائن حي نموذجي للتحقيق في الآليات الجزيئية لوفيات الخلايا النخرية. C. elegans يقدم نظام عصبي بشكل استثنائي يتميز بشكل جيد ورسم الخرائط، وهيكل الجسم شفافة وذخيرة متنوعة من الأساليب الوراثية والتصوير لرصد في وظيفة الخلية الجسم الحي والبقاء على قيد الحياة طوال الشيخوخة. وهكذا، تم بالفعل تطوير العديد من النماذج الجينية C. elegans من التنكس العصبي لتقييم صلاحية الخلايا العصبية. على وجه الخصوص، نماذج النيماتودا الموصوفة جيدا والمستخدمة تشمل النخر الناجم عن قناة الأيونات فرط النشاط1،2،3 وموت الخلايا الناجمة عن زيادة تجميع البروتين4،5،6،7،8،9،10 والسكتة الدماغية الحرارة11،12، من بين أمور أخرى.
التعرض على المدى القصير لدرجات حرارة شبه قاتلة منحت المقاومة ضد موت الخلايا النخرية، الناجمة عن الإجهاد الحراري اللاحقة سواء في الديدان الخيطية والخلايا العصبية الثديية11. ومن المثير للاهتمام أن الشرط المسبق اليومي للنيماتودا في درجة حرارة مرتفعة خفيفة يحمي من التنكس العصبي ، والذي تسببه محفزات متنوعة ، مثل عدم التوازن الأيوني (على سبيل المثال ، mec-4 (u231) و / أو deg-3 (u662)) وتجميع البروتين (على سبيل المثال ، α-synuclein و polyQ40)11،13.
هنا، نحن وصف منهجيات متعددة الاستخدامات باستخدام C. elegans لرصد وتقييم التنكس العصبي المعتمد على العمر في النماذج الراسخة من الأمراض البشرية، مثل موت الخلايا الناجمة عن السمية، ومرض باركنسون وهنتنغتون. وعلاوة على ذلك، فإننا نؤكد على الدور العصبي الحماية من الحرارة المسبقة في عدة نماذج من تنكس الأعصاب. وسيؤدي الجمع بين هذه التقنيات والشاشات الوراثية و/أو العقاقيرية إلى تحديد وتوصيف خواص حفّاضات موت الخلايا الجديدة، مع الاهتمام العلاجي المحتمل.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Agar</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>5040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agarose</td>
			<td>Biozym</td>
			<td>8,40,004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AM101: rmsIs110[prgef-1Q40::YFP]</td>
			<td>Caenorhabditis Genetics Center (CGC)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium chloride dehydrate (CaCl2&#8729;2H2O)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C5080</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cholesterol</td>
			<td>SERVA Electrophoresis</td>
			<td>17101.01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>deg-3(u662)V or deg-3(d)</td>
			<td>Caenorhabditis Genetics Center (CGC)</td>
			<td></td>
			<td>Maintain animals at 20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DIC microscope (Nomarsky)</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>Axio Vert A1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting stereomicroscope</td>
			<td>Nikon Corporation</td>
			<td></td>
			<td>SMZ645</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epifluorescence microscope</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td>EVOS Cell Imaging Systems</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Escherichia coli OP50 strain</td>
			<td>Caenorhabditis Genetics Center (CGC)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Greiner Petri dishes (60 mm x 15 mm)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P5237</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>image analysis software</td>
			<td>Fiji</td>
			<td></td>
			<td>https://fiji.sc</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1,37,010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>K2HPO4</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1,04,873</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium sulfate (MgSO4)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M7506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mec-4(u231)X or mec-4(d)</td>
			<td>Caenorhabditis Genetics Center (CGC)</td>
			<td></td>
			<td>Maintain animals at 20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope slides (75 mm x 25 mm x 1 mm)</td>
			<td>Marienfeld, Lauda-Koenigshofen</td>
			<td>10 006 12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope cover glass (18 mm x 18 mm)</td>
			<td>Marienfeld, Lauda-Koenigshofen</td>
			<td>01 010 30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsoft Office 2011 Excel software package</td>
			<td>Microsoft Corporation, Redmond, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na2HPO4</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1,06,586</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nematode growth medium (NGM) agar plates</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nystatin stock solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>N3503</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peptone</td>
			<td>BD, Bacto</td>
			<td>211677</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride (NaCl)</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1,06,40,41,000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard equipment for preparing agar plates (autoclave, Petri dishes, etc.)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard equipment for maintaining worms (platinum wire pick, incubators, etc.)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>statistical analysis software</td>
			<td>GraphPad Software Inc., San Diego, USA</td>
			<td></td>
			<td>GraphPad Prism software package</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Streptomycin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S6501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tetramisole hydrochloride</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>L9756</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UA44: Is[baIn1; pdat-1&#945;-syn, pdat-1GFP]</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Upon request: G. Caldwell (University of Alabama, Tuscaloosa AL)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

modeling age-associated neurodegenerative diseases in caenorhabditis elegans

أصبحت مكافحة الأمراض العصبية البشرية وإدارة تأثيرها الاجتماعي والاقتصادي المتفشي أولوية عالمية. وعلى الرغم من آثارها الضارة على نوعية حياة الإنسان ونظام الرعاية الصحية، فإن غالبية الاضطرابات العصبية البشرية لا تزال غير قابلة للشفاء ولا يمكن الوقاية منها. ولذلك، فإن تطوير تدخلات علاجية جديدة لمكافحة هذه الأمراض أصبح أمرا ملحا. التدهور المرتبط بالعمر في الدوائر العصبية والوظيفة يتم الحفاظ عليه تطوريا في الكائنات الحية المتنوعة مثل الدودة المنخفضة Caenorhabditis elegans والبشر ، مما يدل على أوجه التشابه في الآليات الخلوية والجزيئية الأساسية. C. elegans هو نموذج وراثي مرن للغاية، والذي يوفر نظامًا عصبيًا يتميز جيدًا وشفافية الجسم وذخيرة متنوعة من التقنيات الجينية والتصويرية لتقييم نشاط الخلايا العصبية ومراقبة الجودة أثناء الشيخوخة. هنا، نقدم ونصف المنهجيات التي تستخدم بعض نماذج الديدان الخيطية متعددة الاستخدامات، بما في ذلك النخر الناجم عن القناة الأيونية (على سبيل المثال، deg-3(d) و mec-4(d)) وتجميع البروتين (على سبيل المثال، α-syunclein و Poly-glutamate) -الناجم عن السمية العصبية، لرصد وتشريح الأسس الخلوية والجزيئية للانهيار العصبي المرتبط بالعمر. وسيؤدي الجمع بين هذه النماذج العصبية الحيوانية، إلى جانب الشاشات الوراثية والدوائية لمُعَدِّات موت الخلايا إلى فهم غير مسبوق للانهيار المرتبط بالعمر لوظيفة الخلايا العصبية، وسوف يوفر رؤى حاسمة ذات صلة واسعة بصحة الإنسان ونوعية الحياة.

موت الخلايا النخرية الناجمة عن القنوات الأيونية شديدة النشاط باستخدام الإجراءات المعروضة هنا، تم احتضان الأجنة المتحولة mec-4 (u231) و deg-3u662) لمدة 25 دقيقة عند 34 درجة مئوية أو الاحتفاظ بها عند درجة الحرارة القياسية البالغة 20 درجة مئوية. عند الفقس ، تم تحديد عدد جثث الخلايا ا?...

Watch this Scientific Journal Video about Modeling Age-Associated Neurodegenerative Diseases in Caenorhabditis elegans at JoVE.com

Modeling Age-Associated Neurodegenerative Diseases in Caenorhabditis elegans

هنا ، نقدم ونصف منهجيات يمكن الوصول إليها على نطاق واسع باستخدام بعض نماذج الديدان الخيطية متعددة الاستخدامات ، بما في ذلك النخر الناجم عن القناة الأيونية المفرطة التنشيط وتكسية الأعصاب الناتجة عن البروتين ، لرصد وتشريح الأسس الخلوية والجزيئية للأمراض العصبية المرتبطة بالعمر.

النمذجة العمر المرتبطة الأمراض العصبية في Caenorhabditis elegans

Battling human neurodegenerative pathologies and managing their pervasive socioeconomic impact is becoming a global priority. Notwithstanding their ...

على مدى العقود الماضية، تم تمديد عمر الإنسان، بسبب التحسينات في مستويات المعيشة والتقدم في العلوم الطبية. العمر هو أكبر عامل خطر للعديد من الأمراض التي تهدد الحياة، بما في ذلك الاضطرابات العصبية، مثل مرض الزهايمر وباركنسون وهنتنغتون. هنا، ونحن نبرهن على منهجيات استخدام بعض نماذج طريقة جديدة متعددة الاستخدامات، بما في ذلك فرط نشط أيون قناة الناجمة عن نخر ومجاميع البروتين يدفع السمية العصبية، لرصد وتشريح الآلية الجزيئية الخلوية من الضمور العصبي.ذروة اليرقات صحية من جعل أربعة وجعل ثلاثة نيماتويد نيوتن على نعمة نمو لوحة وسائل الإعلام، غربلة مع E.Coli باستخدام تشريح المجهر ستيريو. مكان عشرة وأربعة الديدان الخيطية، لوحة الانزيم الطفيلية وتنمو لهم في درجة الحرارة القياسية، من 20 درجة مئوية. بعد خمسة أيام، وغسل لوحة مع 1 مل و 9 العازلة وجمع الحيوانات في أنبوب 1.5 مل.جهاز طرد مركزي في 30،000 غرام لمدة 30 ثانية وإزالة فائقة. إضافة 0.5 مل من محلول الطلاء. يتم تخزين محلول الطلاء في درجة حرارة الغرفة.دوامة ومراقبة دورية حتى أنها قد حلت جميع. تجنب الطلاء لفترات أطول من خمس دقائق. جهاز طرد مركزي في 10،000 غرام لمدة 30 ثانية وإزالة فائقة.غسل مرتين لوحة مع 1 مل وتسعة مخازن. جهاز طرد مركزي في 10000 غرام لمدة 30 ثانية وإزالة فائقة. بعد الغسيل، resuspend البيض في 200 ميكروليترس M9 العازلة واحتضان لهم لمدة 25 دقيقة، في 34 درجة مئوية في حمام مائي.الحفاظ على مجموعة منفصلة من البيض في 20 درجة مئوية. الماصات 100 ميكرولترات تحتوي على السيطرة أو الحرارة صدمة معالجة البيض ووضعها على غير المصنف 10 GN لوحة. كل لوحة تحتوي على ما لا يقل عن 100 إلى 200 بيضة.احتضان البيض في 20 درجة مئوية حتى الفقس. استخدام و M9 العازلة لغسل لوحات وجمع الحياة L1 والنيماتودا في 1.5 مل أنبوب. جهاز طرد مركزي عند 10,000 غرام لمدة 30 ثانية.إزالة ناظر والحفاظ على لوحة. إضافة 100 ميكرولترات من 20 ملليمولار M9 levangial العازلة ل التخدير من النيماتويدات. Pipette 10 ميكرولترات من M9 levangial العازلة، التي تحتوي على ساعة L1 وجبل لهم في 2٪ agar-ls مكان بقعة بلطف coverlip على الجزء العلوي من العينة.مراقبة مشاهدة باستخدام المجهر DIC. مسح انحطاط من الخلايا العصبية مستقبلات 630 عن طريق عد الخلايا مع مظهر الظاهرية النموذجية المميزة التي تساعد على أن الديدان الخيطية. تزامن الديدان الخيطية عن طريق اختيار ونقل 15 إلى 20 يرقات L4 من كل في سلالة على البكتيريا أولا C ثم لوحات المعدلة وراثيا.احتضان والسماح للنيماتودا أن تنمو في درجة حرارة قياسية من 20 درجة مئوية. أداء الشروط المسبقة اليومية لمدة 30 دقيقة عن طريق نقل لوحات في حاضنة تعيين في 34 درجة مئوية. ثم العودة الديدان الخيطية المسبقة مرة أخرى في درجة الحرارة القياسية من 20 درجة مئوية.إضافة 10 ميكرولترات من 20 ملليمولار M9 levangial انخفاض العازلة في وسط بقعة أجار-ls. اختيار الديدان الخيطية المعدلة وراثيا كل منها ونقلها في M9 levangial قطرة. مكان 20 إلى 30 الديدان الخيطية لكل قطرة.ضع زلة غطاء بلطف في الجزء العلوي من العينة. ختم زلة الغطاء مع طلاء الأظافر للحفاظ على الرطوبة طوال عملية التصوير. باستخدام مجهر الفلوريسين جنبا إلى جنب مع الكاميرا، والكشف عن والتقاط الصور دراستك من منطقة الرأس في 20 × التكبير.رصد سبعة أيام من الديدان الخيطية المعدلة وراثيا للوفاة الخلايا العصبية الدوبامين. قياس المجاميع policul العصبية في المنطقة الرأس من الحيوانات المعدلة وراثيا أيام أربعة من العمر التعبير عن 240 الانصهار مع الناس الحية. موت الخلايا النخرية الناجمة عن القنوات الأيونية مفرطة النشاط هو الأكثر في الديدان الخيطية التي لديها البيض المسبق الصدمة الحرارية السابقة.الصدمة الحرارية المسبقة، وتعزيز التنبؤ ضد ألفا سينوكلين الناجمة موت الخلايا في هيرمافروديت البالغ من العمر سبعة أيام ويقلل من المجاميع بروتين Q40 في المنطقة الرأس من البالغين من العمر أربعة أيام. الشيخوخة هو نتيجة للضرر الناجم عن انحطاط تدريجي للدوسط الخلوية والأنسجة. وبالتالي فهم التلاعب بالسن المرتبطة كسر الخلايا العصبية أسفل هي أعلى الأولويات الأماكن.ويمكن أن تؤدي التقنيات المعروضة إلى جانب علم الوراثة والشاشات الدوائية إلى إخطار بمُنَحَّثات موت الخلايا الطبيعية ذات الاهتمام العلاجي المحتمل.

Research

JoVE Journal

Biology

Modeling Age-Associated Neurodegenerative Diseases in Caenorhabditis elegans

Interview: Protein Folding and Studies of Neurodegenerative Diseases

مقابلة : طي البروتين ودراسات أمراض الاعصاب

In this interview, Dr. Lindquist describes relationships between protein folding, prion diseases and neurodegenerative disorders. The problem of the ...

The Production of C. elegans Transgenes via Recombineering with the galK Selectable Marker

The Production of C. elegans Transgenes via Recombineering with the galK Selectable Marker

لإنتاج C. ايليجانس الجينات المحورة عبر Recombineering مع galK إختيار ماركر

The creation of transgenic animals is widely utilized in C. elegans research including the use of GFP fusion proteins to study the regulation and ...

Isolation and In vitro Activation of Caenorhabditis elegans Sperm

Isolation and In vitro Activation of Caenorhabditis elegans Sperm

والعزلة في المختبر تفعيل انواع معينة ايليجانس الحيوانات المنوية

Males and hermaphrodites are the two naturally found sexual forms in the nematode C. elegans. The amoeboid sperm are produced by both males and ...

Solid Plate-based Dietary Restriction in Caenorhabditis elegans

Solid Plate-based Dietary Restriction in Caenorhabditis elegans

اللوحة الصلبة المستندة إلى تقييد الغذائية في انواع معينة ايليجانس</em

Reduction of food intake without malnutrition or starvation is known to increase lifespan and delay the onset of various age-related diseases in a wide ...

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

الوقت الفاصل بين مرحلة التطور الجنيني المبكر من الميكروسكوب في انواع معينة ايليجانس

Caenorhabditis elegans has often been used as a model system in studies of early developmental processes.  The transparency of the 
embryos, the genetic ...

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

الأساسية<em&gt; Caenorhabditis ايليجانس</em&gt; طرق: التزامن والمراقبة

Research into the molecular and developmental biology of the nematode Caenorhabditis elegans was begun in the early seventies by Sydney Brenner and it has ...

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

استخراج البروستاجلاندين والتحليل في<em&gt; انواع معينة ايليجانس</em

Caenorhabditis elegans is emerging as a powerful animal model to study the biology of lipids1-9. Prostaglandins are an important class of eicosanoids, ...

Cultivation of Caenorhabditis elegans in Three Dimensions in the Laboratory

Cultivation of Caenorhabditis elegans in Three Dimensions in the Laboratory

زراعة<em&gt; انواع معينة ايليجانس</em&gt; في ثلاثة أبعاد في المختبر

The use of genetic model organisms such as Caenorhabditis elegans has led to seminal discoveries in biology over the last five decades. Most of what we ...

Methods to Study Changes in Inherent Protein Aggregation with Age in Caenorhabditis elegans

Methods to Study Changes in Inherent Protein Aggregation with Age in Caenorhabditis elegans

أساليب "دراسة التغيرات" في "تجميع البروتين الأصيل" مع التقدم في السن في ايليجانس كاينورهابديتيس

In the last decades, the prevalence of neurodegenerative disorders, such as Alzheimer's disease (AD) and Parkinson's disease (PD), has grown. These ...

Measurement of Oxygen Consumption Rates in Intact Caenorhabditis elegans

Measurement of Oxygen Consumption Rates in Intact Caenorhabditis elegans

قياس معدلات استهلاك الأوكسجين في سليمة ايليجانس كاينورهابديتيس

Optimal mitochondrial function is critical for healthy cellular activity, particularly in cells that have high energy demands like those in the nervous ...