Name: modeling age-associated neurodegenerative diseases in caenorhabditis elegans
Uploaded: 2020-08-15T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Modeling Age-Associated Neurodegenerative Diseases in Caenorhabditis elegans at JoVE.com

Vi takker Chaniotakis M. og Kounakis K. for videooptagelse og redigering. K.P. finansieres af et tilskud fra Den Hellenske Fond for Forskning og Innovation (HFRI) og Generalsekretariatet for Forskning og Teknologi (GSRT). N.T. finansieres af tilskud fra Det Europæiske Forskningsråd (ERC – GA695190 – MANNA), Europa-Kommissionens rammeprogrammer og det græske undervisningsministerium.

1. Nekrotisk celledød-induceret af hyperaktive ion kanaler
BEMÆRK: Gain-of-function mutationer i genfamilien af degeneriner, herunder mec-4 og deg-3 blandt andre, resulterer i generation af hyperaktive ion kanaler udløser nekrotisk celledød af seks touch receptor neuroner kræves for mechanosensation i orme3. Nekrose fremkaldt af afvigende stimulation af degeneriner viser flere mekanistiske og morfologiske ligheder med excitotoxicity hos pattedyr. Ve...

<ol>
	<li>Nikoletopoulou, V., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Necrotic+cell+death+in+Caenorhabditis+elegans.">Necrotic cell death in Caenorhabditis elegans.</a> Methods in Enzymology. 545, 127-155 (2014).</li><li>Syntichaki, P., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+biochemistry+of+neuronal+necrosis:+rogue+biology.">The biochemistry of neuronal necrosis: rogue biology.</a> Nature Reviews Neuroscience. 4 (8), 672-684 (2003).</li><li>Syntichaki, P., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+models+of+mechanotransduction:+the+nematode+Caenorhabditis+elegans.">Genetic models of mechanotransduction: the nematode Caenorhabditis elegans.</a> Physiological Reviews. 84 (4), 1097-1153 (2004).</li><li>Berkowitz, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+a+C.+elegans+dopamine+neuron+degeneration+assay+for+the+validation+of+potential+Parkinson's+disease+genes.">Application of a C. elegans dopamine neuron degeneration assay for the validation of potential Parkinson's disease genes.</a> Journal of Visualized Experiments. (17), (2008).</li><li>Brignull, H. R., Moore, F. E., Tang, S. J., Morimoto, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polyglutamine+proteins+at+the+pathogenic+threshold+display+neuron-specific+aggregation+in+a+pan-neuronal+Caenorhabditis+elegans+model.">Polyglutamine proteins at the pathogenic threshold display neuron-specific aggregation in a pan-neuronal Caenorhabditis elegans model.</a> Journal of Neuroscience. 26 (29), 7597-7606 (2006).</li><li>Gidalevitz, T., Ben-Zvi, A., Ho, K. H., Brignull, H. R., Morimoto, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+disruption+of+cellular+protein+folding+in+models+of+polyglutamine+diseases.">Progressive disruption of cellular protein folding in models of polyglutamine diseases.</a> Science. 311 (5766), 1471-1474 (2006).</li><li>Gitler, A. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Parkinson's+disease+protein+alpha-synuclein+disrupts+cellular+Rab+homeostasis.">The Parkinson's disease protein alpha-synuclein disrupts cellular Rab homeostasis.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 105 (1), 145-150 (2008).</li><li>Klaips, C. L., Jayaraj, G. G., Hartl, F. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathways+of+cellular+proteostasis+in+aging+and+disease.">Pathways of cellular proteostasis in aging and disease.</a> Journal of Cell Biology. 217 (1), 51-63 (2018).</li><li>Labbadia, J., Morimoto, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+biology+of+proteostasis+in+aging+and+disease.">The biology of proteostasis in aging and disease.</a> Annual Review of Biochemistry. 84, 435-464 (2015).</li><li>Tucci, M. L., Harrington, A. J., Caldwell, G. A., Caldwell, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+dopamine+neuron+degeneration+in+Caenorhabditis+elegans.">Modeling dopamine neuron degeneration in Caenorhabditis elegans.</a> Methods in Molecular Biology. 793, 129-148 (2011).</li><li>Kourtis, N., Nikoletopoulou, V., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+heat-shock+proteins+protect+from+heat-stroke-associated+neurodegeneration.">Small heat-shock proteins protect from heat-stroke-associated neurodegeneration.</a> Nature. 490 (7419), 213-218 (2012).</li><li>Kourtis, N., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+heat+shock+proteins+and+neurodegeneration:+recent+developments.">Small heat shock proteins and neurodegeneration: recent developments.</a> BioMolecular Concepts. 9 (1), 94-102 (2018).</li><li>Kumsta, C., Chang, J. T., Schmalz, J., Hansen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hormetic+heat+stress+and+HSF-1+induce+autophagy+to+improve+survival+and+proteostasis+in+C.+elegans.">Hormetic heat stress and HSF-1 induce autophagy to improve survival and proteostasis in C. elegans.</a> Nature Communications. 8, 14337 (2017).</li><li>Schindelin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fiji:+an+open-source+platform+for+biological-image+analysis.">Fiji: an open-source platform for biological-image analysis.</a> Nature Methods. 9 (7), 676-682 (2012).</li><li>Palikaras, K., Lionaki, E., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coordination+of+mitophagy+and+mitochondrial+biogenesis+during+ageing+in+C.+elegans.">Coordination of mitophagy and mitochondrial biogenesis during ageing in C. elegans.</a> Nature. 521 (7553), 525-528 (2015).</li><li>Samara, C., Syntichaki, P., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autophagy+is+required+for+necrotic+cell+death+in+Caenorhabditis+elegans.">Autophagy is required for necrotic cell death in Caenorhabditis elegans.</a> Cell Death and Differentiation. 15 (1), 105-112 (2008).</li></ol>

Her introducerer og beskriver vi bredt tilgængelige metoder til vækst, synkronisering og mikroskopisk undersøgelse af nogle alsidige C. elegans modeller, der undersøger aldersafhængig neurodegeneration. Vi vurderer og dissekerer især det cellulære og molekylære fundament af aldersrelateret neuronal nedbrydning ved hjælp af hyperaktiveret ionkanalinduceret nekrose og proteinaggregatinduceret neurotoksicitet1,,2,3</sup...

I løbet af de sidste to årtier har C. elegans været meget anvendt som en model organisme til at undersøge de molekylære mekanismer af nekrotisk celledød. C. elegans tilbyder en usædvanlig godt karakteriseret og kortlagt nervesystem, gennemsigtig kropsstruktur og et varieret repertoire af genetiske og billeddannelse metoder til at overvåge in vivo cellulære funktion og overlevelse gennem hele aldring. Således, flere C. elegans genetiske modeller af neurodegeneration er allerede blevet udviklet til at vurdere neuronal levedygtighed. Især godt beskrevet og brugt nematode modeller omfatter hyperaktive ion kanal-induceret nekrose1,,2,3 ogcelledød udløst af øget protein aggregering4,,5,6,7,8,9,10 og hedeslag11,12, blandt andre.8
Kortvarig udsættelse for subfartale temperaturer gav resistens mod nekrotisk celledød, udløst af en efterfølgende varmestress både hos nematoder og pattedyr neuroner11. Interessant nok beskytter daglig forkonditionering af nematoder ved en mild forhøjet temperatur mod neurodegeneration, som er forårsaget af forskellige stimuli, såsom ioniske ubalance (f.eks. mec-4(u231) og/eller deg-3(u662)) og proteinaggregering (f.eks. α-synuclein og polyQ40)11,13.
Her beskriver vi alsidige metoder ved hjælp af C. elegans til at overvåge og evaluere aldersafhængig neurodegeneration i veletablerede modeller af sygdomme hos mennesker, såsom excitotoxicity-udløst celledød, Parkinsons og Huntingtons Sygdom. Desuden understreger vi den neuroprotektive rolle varmeforkonditionering i flere modeller af neurodegeneration. En kombination af disse teknikker sammen med genetiske og/eller farmakologiske skærme vil resultere i identifikation og karakterisering af nye celledødsmodulatorer med potentiel terapeutisk interesse.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Agar</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>5040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agarose</td>
			<td>Biozym</td>
			<td>8,40,004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AM101: rmsIs110[prgef-1Q40::YFP]</td>
			<td>Caenorhabditis Genetics Center (CGC)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium chloride dehydrate (CaCl2&#8729;2H2O)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C5080</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cholesterol</td>
			<td>SERVA Electrophoresis</td>
			<td>17101.01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>deg-3(u662)V or deg-3(d)</td>
			<td>Caenorhabditis Genetics Center (CGC)</td>
			<td></td>
			<td>Maintain animals at 20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DIC microscope (Nomarsky)</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>Axio Vert A1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting stereomicroscope</td>
			<td>Nikon Corporation</td>
			<td></td>
			<td>SMZ645</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epifluorescence microscope</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td>EVOS Cell Imaging Systems</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Escherichia coli OP50 strain</td>
			<td>Caenorhabditis Genetics Center (CGC)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Greiner Petri dishes (60 mm x 15 mm)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P5237</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>image analysis software</td>
			<td>Fiji</td>
			<td></td>
			<td>https://fiji.sc</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1,37,010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>K2HPO4</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1,04,873</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium sulfate (MgSO4)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M7506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mec-4(u231)X or mec-4(d)</td>
			<td>Caenorhabditis Genetics Center (CGC)</td>
			<td></td>
			<td>Maintain animals at 20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope slides (75 mm x 25 mm x 1 mm)</td>
			<td>Marienfeld, Lauda-Koenigshofen</td>
			<td>10 006 12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope cover glass (18 mm x 18 mm)</td>
			<td>Marienfeld, Lauda-Koenigshofen</td>
			<td>01 010 30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsoft Office 2011 Excel software package</td>
			<td>Microsoft Corporation, Redmond, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na2HPO4</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1,06,586</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nematode growth medium (NGM) agar plates</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nystatin stock solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>N3503</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peptone</td>
			<td>BD, Bacto</td>
			<td>211677</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride (NaCl)</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1,06,40,41,000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard equipment for preparing agar plates (autoclave, Petri dishes, etc.)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard equipment for maintaining worms (platinum wire pick, incubators, etc.)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>statistical analysis software</td>
			<td>GraphPad Software Inc., San Diego, USA</td>
			<td></td>
			<td>GraphPad Prism software package</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Streptomycin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S6501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tetramisole hydrochloride</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>L9756</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UA44: Is[baIn1; pdat-1&#945;-syn, pdat-1GFP]</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Upon request: G. Caldwell (University of Alabama, Tuscaloosa AL)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

modeling age-associated neurodegenerative diseases in caenorhabditis elegans

Bekæmpelse af menneskelige neurodegenerative patologier og styring af deres gennemgribende socioøkonomiske virkninger er ved at blive en global prioritet. På trods af deres skadelige virkninger på menneskers livskvalitet og sundhedssystemet er størstedelen af de menneskelige neurodegenerative lidelser stadig uhelbredelige og ikke-forebyggelige. Derfor er udviklingen af nye terapeutiske indgreb mod sådanne sygdomme ved at blive en presserende presserende. Aldersrelateret forringelse af neuronal kredsløb og funktion er evolutionært bevaret i organismer så forskellige som den ringe orm Caenorhabditis elegans og mennesker, der betyder ligheder i de underliggende cellulære og molekylære mekanismer. C. elegans er en meget formbar genetisk model, som tilbyder et velcertet nervesystem, kropsgennemsigtighed og et varieret repertoire af genetiske og billeddannelsesteknikker til vurdering af neuronal aktivitet og kvalitetskontrol under aldring. Her introducerer og beskriver vi metoder, der anvender nogle alsidige nematodemodeller, herunder hyperaktiveret ionkanalinduceret nekrose (f.eks. deg-3(d) og mec-4(d)) og proteinaggregat (f.eks. α-syunclein og poly-glutamat)-induceret neurotoksicitet, til at overvåge og dissekere det cellulære og molekylære fundament af aldersrelateret neuronal nedbrydning. En kombination af disse dyreneurodegenerationsmodeller vil sammen med genetiske og farmakologiske skærme for celledødsmodulatorer føre til en hidtil uset forståelse af aldersrelateret nedbrydning af neuronal funktion og vil give kritisk indsigt med bred relevans for menneskers sundhed og livskvalitet.

Nekrotisk celledød-induceret af hyperaktive ion kanaler Ved hjælp af de procedurer, der præsenteres her, blev mec-4(u231) og deg-3u662) mutantembryoner enten inkuberet i 25 min ved 34 °C eller opbevaret ved standardtemperaturen på 20 °C. Ved udklækning blev antallet af neuronale cellelige lig bestemt i L1 larve fase af begge grupper. Nekrotisk celledød formindskes i nematoder, der udklækkes af varmechokkonditionerede æg (Figur 1A-1B</st...

Watch this Scientific Journal Video about Modeling Age-Associated Neurodegenerative Diseases in Caenorhabditis elegans at JoVE.com

Modeling Age-Associated Neurodegenerative Diseases in Caenorhabditis elegans

Her introducerer og beskriver vi bredt tilgængelige metoder ved hjælp af nogle alsidige nematodemodeller, herunder hyperaktiverede ionkanalinducerede nekrose og proteinaggregat-induceret neurotoksicitet, til at overvåge og dissekere de cellulære og molekylære fundamenter af aldersrelaterede neurodegenerative sygdomme.

Modellering Alders-associerede neurodegenerative sygdomme i Caenorhabditis elegans

Battling human neurodegenerative pathologies and managing their pervasive socioeconomic impact is becoming a global priority. Notwithstanding their ...

I løbet af de seneste årtier er menneskets levetid forlænget på grund af forbedringer i levestandarden og fremskridt inden for lægevidenskaben. Alder er den største risikofaktor for mange livstruende sygdomme, herunder neurodegenerative lidelser, såsom Alzheimers, Parkinsons og Huntingtons Sygdom. Her demonstrerer vi metoder, der udnytter nogle alsidige nye metodemodeller, herunder hyperaktiv ionkanal induceret nekrose og protein aggregater inducerer neurotoksicitet, at overvåge og dissekere den cellulære molekylære mekanisme neuraldegeneration.Peak sunde larver af gøre fire og gøre tre Newton nematoder på nematode vækst medier plade, sigtning med E.Coli ved hjælp af dissekere stereomikroskop. Placer ti og fire nematoder, parasitære enzym plade og dyrke dem ved standardtemperaturen, på 20 grader celsius. Fem dage senere vaskes pladen med 1 ml og 9 buffer, og dyrene opsamls i 1,5 ml rør.Centrifuge ved 30,000 g i 30 sekunder og fjern supernatanten. Tilsæt 0,5 ml platingopløsning. Platingopløsning opbevares ved stuetemperatur.Vortex og overvåge med jævne mellemrum, indtil de alle er opløst. Undgå plettering i perioder længere end fem minutter. Centrifuge ved 10,000 g i 30 sekunder og fjern supernatanten.Vask dobbelt paletten med 1 ml og ni buffere. Centrifuge ved 10000 g i 30 sekunder og fjern supernatanten. Efter vask, resuspend æggene i 200 mikroliter M9 buffer og inkubere dem i 25 minutter, ved 34 grader Celsius i et vandbad.Opretholde en separat gruppe af æg ved 20 grader Celsius. Pipette 100 mikroliter indeholdende kontrol- eller varmechokbehandlede æg og placere dem på unseeded 10 GN plade. Hver plade indeholder mindst 100 til 200 æg.Inkuber æggene ved 20 grader celsius indtil udklækning. Brug og M9 buffer til at vaske plader og indsamle L1 liv og nematoder i 1,5 ml rør. Centrifuge ved 10.000 g i 30 sekunder.Fjern supernatant og holde paletten. Tilføj 100 mikroliter af 20 millimolar M9 levangial buffer at bedøve nematoder. Pipette 10 mikroliter af M9 levangial buffer, der indeholder L1 ur og montere dem i 2%agar-ls stedet sted forsigtigt en coverslip på toppen af prøven.Overhold uret ved hjælp af DIC-mikroskopi. Scanning degeneration af de 630 receptor neuroner ved at tælle celler med en karakteristisk virtuel hjulpet udseende af denne nematode. Synkroniser nematoder ved at vælge og overføre 15 til 20 L4 larver af hver i stamme på første bakterier C derefter GM plader.Inkuber og lad nematoder til at vokse ved standardtemperaturen på 20 grader Celsius. Udfør daglig forkonditionering i 30 minutter ved at overføre pladerne i en inkubator, der er indstillet til 34 grader Celsius. Derefter returneres de forkonditionerede nematoder tilbage ved standardtemperaturen på 20 grader Celsius.Tilføj 10 mikroliter af 20 millimolar M9 levangial buffer drop i midten af agar-ls stedet. Vælg de respektive transgene nematoder og overføre dem i M9 levangial drop. Placer 20 til 30 nematoder per dråbe.Læg forsigtigt dækslet på toppen af prøven. Seal dækslet slip med neglelak for at bevare luftfugtigheden i hele billedbehandlingsprocessen. Brug en fluorescens mikroskop kombineret med et kamera, opdage og fange din undersøgelse billeder af hovedet regionen på 20 x forstørrelse.Monitor syv dage med transgene nematoder for dopaminerge neuronal celledød. Mål neuronal policul aggregater i hovedet region af fire dage gamle transgene dyr, der udtrykker 240 fusion med levende mennesker. Nekrotisk celledød induceret en hyperaktiv ion kanaler er den vigtigste i nematoder, der har tidligere varmechok forudsætning æg.Varmechok forkonditionering, fremme en forudsigelse mod alpha-synuclein induceret celledød i syv-dages gamle voksne hermafrodit og nedsætter Q40 protein aggregater i hovedet region af fire dage gamle voksne. Aldring er en konsekvens af skader forårsaget af gradvis degeneration af cellulære og væv homøostase. Således forståelse af at manipulere aldersrelaterede neuronal nedbryde er top steder prioriteter.De præsenterede teknikker kombineret med genetik og farmakologiske skærme kan føre til en anmeldelse af normale celledødsmodulatorer med potentiel terapeutisk interesse.

Research

JoVE Journal

Biology

Modeling Age-Associated Neurodegenerative Diseases in Caenorhabditis elegans

Interview: Protein Folding and Studies of Neurodegenerative Diseases

In this interview, Dr. Lindquist describes relationships between protein folding, prion diseases and neurodegenerative disorders. The problem of the ...

The Production of C. elegans Transgenes via Recombineering with the galK Selectable Marker

The Production of C. elegans Transgenes via Recombineering with the galK Selectable Marker

The creation of transgenic animals is widely utilized in C. elegans research including the use of GFP fusion proteins to study the regulation and ...

Isolation and In vitro Activation of Caenorhabditis elegans Sperm

Isolation and In vitro Activation of Caenorhabditis elegans Sperm

Males and hermaphrodites are the two naturally found sexual forms in the nematode C. elegans. The amoeboid sperm are produced by both males and ...

Solid Plate-based Dietary Restriction in Caenorhabditis elegans

Solid Plate-based Dietary Restriction in Caenorhabditis elegans

Reduction of food intake without malnutrition or starvation is known to increase lifespan and delay the onset of various age-related diseases in a wide ...

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

Caenorhabditis elegans has often been used as a model system in studies of early developmental processes.  The transparency of the 
embryos, the genetic ...

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

Grundlæggende<em&gt; Caenorhabditis elegans</em&gt; Metoder: Synkronisering og Observation

Research into the molecular and developmental biology of the nematode Caenorhabditis elegans was begun in the early seventies by Sydney Brenner and it has ...

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

Prostaglandin Udvinding og Analyse i<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

Caenorhabditis elegans is emerging as a powerful animal model to study the biology of lipids1-9. Prostaglandins are an important class of eicosanoids, ...

Cultivation of Caenorhabditis elegans in Three Dimensions in the Laboratory

Cultivation of Caenorhabditis elegans in Three Dimensions in the Laboratory

dyrkning af<em&gt; Caenorhabditis elegans</em&gt; I tre dimensioner i laboratoriet

The use of genetic model organisms such as Caenorhabditis elegans has led to seminal discoveries in biology over the last five decades. Most of what we ...

Methods to Study Changes in Inherent Protein Aggregation with Age in Caenorhabditis elegans

Methods to Study Changes in Inherent Protein Aggregation with Age in Caenorhabditis elegans

Metoder til undersøgelse ændringer i iboende Protein sammenlægning med alder i Caenorhabditis elegans

In the last decades, the prevalence of neurodegenerative disorders, such as Alzheimer's disease (AD) and Parkinson's disease (PD), has grown. These ...

Measurement of Oxygen Consumption Rates in Intact Caenorhabditis elegans

Measurement of Oxygen Consumption Rates in Intact Caenorhabditis elegans

Måling af ilt forbrug satser i intakt Caenorhabditis elegans

Optimal mitochondrial function is critical for healthy cellular activity, particularly in cells that have high energy demands like those in the nervous ...