Name: modeling age-associated neurodegenerative diseases in caenorhabditis elegans
Uploaded: 2020-08-15T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Modeling Age-Associated Neurodegenerative Diseases in Caenorhabditis elegans at JoVE.com

Vi takker Chaniotakis M. og Kounakis K. for videoopptak og redigering. K.P. er finansiert av et stipend fra Hellenic Foundation for Research and Innovation (HFRI) og General Sekretariatet for forskning og teknologi (GSRT). N.T. er finansiert av tilskudd fra Det europeiske forskningsrådet (ERC – GA695190 – MANNA), Eu-kommisjonens rammeprogrammer og det greske kunnskapsdepartementet.

1. Nekrotiske celledødsindusert av hyperaktive iionkanaler
MERK: Gain-of-function mutasjoner i genfamilien av degeneriner, inkludert mec-4 og deg-3 blant andre, resulterer i generering av hyperaktive ionkanaler utløser nekrotisk celledød av seks berøringsreseptornevroner som kreves for mekanosensasjon i ormer3. Nekrose indusert av avvikende stimulering av degeneriner viser flere mekanistiske og morfologiske likheter med ekssantoxicity hos pattedyr. V...

<ol>
	<li>Nikoletopoulou, V., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Necrotic+cell+death+in+Caenorhabditis+elegans.">Necrotic cell death in Caenorhabditis elegans.</a> Methods in Enzymology. 545, 127-155 (2014).</li><li>Syntichaki, P., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+biochemistry+of+neuronal+necrosis:+rogue+biology.">The biochemistry of neuronal necrosis: rogue biology.</a> Nature Reviews Neuroscience. 4 (8), 672-684 (2003).</li><li>Syntichaki, P., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+models+of+mechanotransduction:+the+nematode+Caenorhabditis+elegans.">Genetic models of mechanotransduction: the nematode Caenorhabditis elegans.</a> Physiological Reviews. 84 (4), 1097-1153 (2004).</li><li>Berkowitz, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+a+C.+elegans+dopamine+neuron+degeneration+assay+for+the+validation+of+potential+Parkinson's+disease+genes.">Application of a C. elegans dopamine neuron degeneration assay for the validation of potential Parkinson's disease genes.</a> Journal of Visualized Experiments. (17), (2008).</li><li>Brignull, H. R., Moore, F. E., Tang, S. J., Morimoto, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polyglutamine+proteins+at+the+pathogenic+threshold+display+neuron-specific+aggregation+in+a+pan-neuronal+Caenorhabditis+elegans+model.">Polyglutamine proteins at the pathogenic threshold display neuron-specific aggregation in a pan-neuronal Caenorhabditis elegans model.</a> Journal of Neuroscience. 26 (29), 7597-7606 (2006).</li><li>Gidalevitz, T., Ben-Zvi, A., Ho, K. H., Brignull, H. R., Morimoto, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+disruption+of+cellular+protein+folding+in+models+of+polyglutamine+diseases.">Progressive disruption of cellular protein folding in models of polyglutamine diseases.</a> Science. 311 (5766), 1471-1474 (2006).</li><li>Gitler, A. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Parkinson's+disease+protein+alpha-synuclein+disrupts+cellular+Rab+homeostasis.">The Parkinson's disease protein alpha-synuclein disrupts cellular Rab homeostasis.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 105 (1), 145-150 (2008).</li><li>Klaips, C. L., Jayaraj, G. G., Hartl, F. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathways+of+cellular+proteostasis+in+aging+and+disease.">Pathways of cellular proteostasis in aging and disease.</a> Journal of Cell Biology. 217 (1), 51-63 (2018).</li><li>Labbadia, J., Morimoto, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+biology+of+proteostasis+in+aging+and+disease.">The biology of proteostasis in aging and disease.</a> Annual Review of Biochemistry. 84, 435-464 (2015).</li><li>Tucci, M. L., Harrington, A. J., Caldwell, G. A., Caldwell, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+dopamine+neuron+degeneration+in+Caenorhabditis+elegans.">Modeling dopamine neuron degeneration in Caenorhabditis elegans.</a> Methods in Molecular Biology. 793, 129-148 (2011).</li><li>Kourtis, N., Nikoletopoulou, V., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+heat-shock+proteins+protect+from+heat-stroke-associated+neurodegeneration.">Small heat-shock proteins protect from heat-stroke-associated neurodegeneration.</a> Nature. 490 (7419), 213-218 (2012).</li><li>Kourtis, N., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+heat+shock+proteins+and+neurodegeneration:+recent+developments.">Small heat shock proteins and neurodegeneration: recent developments.</a> BioMolecular Concepts. 9 (1), 94-102 (2018).</li><li>Kumsta, C., Chang, J. T., Schmalz, J., Hansen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hormetic+heat+stress+and+HSF-1+induce+autophagy+to+improve+survival+and+proteostasis+in+C.+elegans.">Hormetic heat stress and HSF-1 induce autophagy to improve survival and proteostasis in C. elegans.</a> Nature Communications. 8, 14337 (2017).</li><li>Schindelin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fiji:+an+open-source+platform+for+biological-image+analysis.">Fiji: an open-source platform for biological-image analysis.</a> Nature Methods. 9 (7), 676-682 (2012).</li><li>Palikaras, K., Lionaki, E., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coordination+of+mitophagy+and+mitochondrial+biogenesis+during+ageing+in+C.+elegans.">Coordination of mitophagy and mitochondrial biogenesis during ageing in C. elegans.</a> Nature. 521 (7553), 525-528 (2015).</li><li>Samara, C., Syntichaki, P., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autophagy+is+required+for+necrotic+cell+death+in+Caenorhabditis+elegans.">Autophagy is required for necrotic cell death in Caenorhabditis elegans.</a> Cell Death and Differentiation. 15 (1), 105-112 (2008).</li></ol>

Her introduserer og beskriver vi allment tilgjengelige metoder for vekst, synkronisering og mikroskopisk undersøkelse av noen allsidige C. elegans-modeller som undersøker aldersavhengig nevrodegenerasjon. Spesielt vurderer og dissekere cellulære og molekylære understøtter av aldersrelatert nevronal sammenbrudd ved hjelp av hyperaktivert i hovedsako-indusert nekrose og proteinaggregatindusert nevrotoksisitet1,,,2,3, 4</su...

I løpet av de siste to tiårene har C. elegans blitt mye brukt som modellorganisme for å undersøke molekylære mekanismer for nekrotisk celledød. C. elegans tilbyr et eksepsjonelt godt karakterisert og kartlagt nervesystem, gjennomsiktig kroppsstruktur og et variert repertoar av genetiske og bildemetoder for å overvåke in vivo cellulær funksjon og overlevelse gjennom aldring. Dermed har flere C. elegans genetiske modeller av nevrodegenerasjon allerede blitt utviklet for å vurdere nevronal levedyktighet. Spesielt, godt beskrevet og brukt nematode modeller inkluderer hyperaktiv ion kanal-indusert nekrose1,2,3 og celledød utløst av økt protein aggregering4,5,6,7,8,9,10 og heteslag11,12, blant andre.,
Kortsiktig eksponering for sub-dødelige temperaturer overdro motstand mot nekrotisk celledød, utløst av et påfølgende varmestress både i nematoder og pattedyrnevroner11. Interessant, daglig preconditioning av nematoder ved en mild forhøyet temperatur beskytter mot neurodegenerasjon, som er påført av ulike stimuli, som ionisk ubalanse (f.eks mec-4 (u231) og / eller deg-3 (u662)) og protein aggregering (f.eks α-synuclein og polyQ40)11,13.
Her beskriver vi allsidige metoder ved hjelp av C. elegans for å overvåke og evaluere aldersavhengig nevrodegenerasjon i veletablerte modeller av menneskelige sykdommer, som ekssiertoksisitetsutløst celledød, Parkinsons og Huntingtons sykdom. Videre understreker vi den nevrobeskyttende rollen som varmeforutsigelse i flere modeller av nevrodegenerasjon. En kombinasjon av disse teknikkene sammen med genetiske og/eller farmakologiske skjermer vil resultere i identifisering og karakterisering av nye celledødsmodulatorer, med potensiell terapeutisk interesse.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Agar</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>5040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agarose</td>
			<td>Biozym</td>
			<td>8,40,004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AM101: rmsIs110[prgef-1Q40::YFP]</td>
			<td>Caenorhabditis Genetics Center (CGC)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium chloride dehydrate (CaCl2&#8729;2H2O)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C5080</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cholesterol</td>
			<td>SERVA Electrophoresis</td>
			<td>17101.01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>deg-3(u662)V or deg-3(d)</td>
			<td>Caenorhabditis Genetics Center (CGC)</td>
			<td></td>
			<td>Maintain animals at 20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DIC microscope (Nomarsky)</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>Axio Vert A1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting stereomicroscope</td>
			<td>Nikon Corporation</td>
			<td></td>
			<td>SMZ645</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epifluorescence microscope</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td>EVOS Cell Imaging Systems</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Escherichia coli OP50 strain</td>
			<td>Caenorhabditis Genetics Center (CGC)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Greiner Petri dishes (60 mm x 15 mm)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P5237</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>image analysis software</td>
			<td>Fiji</td>
			<td></td>
			<td>https://fiji.sc</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1,37,010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>K2HPO4</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1,04,873</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium sulfate (MgSO4)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M7506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mec-4(u231)X or mec-4(d)</td>
			<td>Caenorhabditis Genetics Center (CGC)</td>
			<td></td>
			<td>Maintain animals at 20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope slides (75 mm x 25 mm x 1 mm)</td>
			<td>Marienfeld, Lauda-Koenigshofen</td>
			<td>10 006 12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope cover glass (18 mm x 18 mm)</td>
			<td>Marienfeld, Lauda-Koenigshofen</td>
			<td>01 010 30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsoft Office 2011 Excel software package</td>
			<td>Microsoft Corporation, Redmond, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na2HPO4</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1,06,586</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nematode growth medium (NGM) agar plates</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nystatin stock solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>N3503</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peptone</td>
			<td>BD, Bacto</td>
			<td>211677</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride (NaCl)</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1,06,40,41,000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard equipment for preparing agar plates (autoclave, Petri dishes, etc.)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard equipment for maintaining worms (platinum wire pick, incubators, etc.)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>statistical analysis software</td>
			<td>GraphPad Software Inc., San Diego, USA</td>
			<td></td>
			<td>GraphPad Prism software package</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Streptomycin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S6501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tetramisole hydrochloride</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>L9756</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UA44: Is[baIn1; pdat-1&#945;-syn, pdat-1GFP]</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Upon request: G. Caldwell (University of Alabama, Tuscaloosa AL)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

modeling age-associated neurodegenerative diseases in caenorhabditis elegans

Bekjempelse av menneskelige nevrodegenerative patologier og håndtering av deres gjennomgripende sosioøkonomiske innvirkning blir en global prioritet. Til tross for deres skadelige effekter på menneskets livskvalitet og helsevesenet, forblir de fleste menneskelige nevrodegenerative lidelser fortsatt uhelbredelige og ikke-forebyggelige. Derfor blir utviklingen av nye terapeutiske intervensjoner mot slike sykdommer en presserende haster. Aldersrelatert forverring av nevronale kretser og funksjon er evolusjonært bevart i organismer så forskjellige som den ydmyke ormen Caenorhabditis elegans og mennesker, noe som betyr likheter i de underliggende cellulære og molekylære mekanismer. C. elegans er en svært formbar genetisk modell, som tilbyr et godt preget nervesystem, kroppsåpenhet og et variert repertoar av genetiske og bildeteknikker for å vurdere nevronal aktivitet og kvalitetskontroll under aldring. Her introduserer og beskriver vi metoder som bruker noen allsidige nematodemodeller, inkludert hyperaktivert ionkanalindusert nekrose (f.eks. deg-3(d) og mec-4(d)) og proteinaggregat (f.eks. α-syunclein og polyglutmat)-indusert nevrotoksisitet, for å overvåke og dissekere cellulære og molekylære understøtter av aldersrelatert nevronal sammenbrudd. En kombinasjon av disse dyrenevrodeeration modeller, sammen med genetiske og farmakologiske skjermer for celle død modulatorer vil føre til en enestående forståelse av aldersrelatert sammenbrudd av nevronal funksjon og vil gi kritisk innsikt med bred relevans for menneskers helse og livskvalitet.

Nekrotisk celledød-indusert av hyperaktive ionkanaler Ved hjelp av prosedyrene som presenteres her, ble mec-4(u231) og deg-3u662) muterte embryoer enten inkubert i 25 min ved 34 °C eller oppbevares ved standardtemperatur på 20 °C. Ved klekking ble antall nevronale cellelik bestemt på L1 larvalstadiet i begge gruppene. Nekrotisk celledød reduseres i nematoder som klekkes fra varmesjokkpreparerte egg (Figur 1A-1B).
<p class="jove...

Watch this Scientific Journal Video about Modeling Age-Associated Neurodegenerative Diseases in Caenorhabditis elegans at JoVE.com

Modeling Age-Associated Neurodegenerative Diseases in Caenorhabditis elegans

Her introduserer og beskriver vi allment tilgjengelige metoder som bruker noen allsidige nematodemodeller, inkludert hyperaktivert iionkanalindusert nekrose og proteinaggregatindusert nevrotoksisitet, for å overvåke og dissekere cellulære og molekylære understøttelse av aldersrelaterte nevrodegenerative sykdommer.

Modellering Alder-Assosiert Neurodegenerative Sykdommer i Caenorhabditis elegans

Battling human neurodegenerative pathologies and managing their pervasive socioeconomic impact is becoming a global priority. Notwithstanding their ...

I løpet av de siste tiårene er menneskelig levetid utvidet, på grunn av forbedringer i levestandard og fremskritt i medisinsk vitenskap. Alder er den største risikofaktoren for mange livstruende sykdommer, inkludert nevrodegenerative lidelser, som Alzheimers, Parkinsons og Huntington sykdom. Her demonstrerer vi metoder ved hjelp av noen allsidige nye metodemodeller, inkludert hyperaktiv ionkanalindusert nekrose og proteinaggregater induserer nevrotoksisitet, for å overvåke og dissekere den cellulære molekylære mekanismen for neural degenerasjon.Topp sunne larver av gjør fire og lage tre Newton nematoder på nematode vekst media plate, sikter med E.Coli ved hjelp av dissekere stereomikroskop. Plasser ti og fire nematoder, parasittiske enzymplate og vokse dem ved standardtemperatur, på 20 grader celsius. Fem dager senere vasker du platen med 1 ml og 9 buffer og samler dyrene i 1,5 ml rør.Sentrifuge ved 30 000 g i 30 sekunder og fjern supernatanten. Tilsett 0,5 ml platingløsning. Plating løsning lagres ved romtemperatur.Vortex og overvåk med jevne mellomrom til de alle er oppløst. Unngå plating i perioder lenger enn fem minutter. Sentrifuge ved 10 000 g i 30 sekunder og fjern supernatanten.Vask dobbelt så høy palett med 1 ml og ni buffere. Sentrifuge ved 10000 g i 30 sekunder og fjern supernatanten. Etter vask, resuspend eggene i 200 mikroliter M9 buffer og inkubere dem i 25 minutter, ved 34 grader Celsius i et vannbad.Oppretthold en egen gruppe egg ved 20 grader Celsius. Pipette 100 mikroliter som inneholder kontroll eller varmesjokkbehandlet egg og plasser dem på usette 10 GN plate. Hver tallerken inneholder minst 100 til 200 egg.Inkuber eggene ved 20 grader celsius til klekking. Bruk og M9 buffer til å vaske plater og samle L1 levetid og nematoder i 1,5 ml rør. Sentrifuge ved 10, 000 g i 30 sekunder.Fjern det overnaturlige og hold paletten. Tilsett 100 mikroliter på 20 millimolar M9 levangial buffer for å bedøve nematodene. Pipette 10 mikroliter m9 levangial buffer, som inneholder L1 klokke og montere dem i 2% agar-ls spot sted forsiktig en coverslip på toppen av prøven.Vær oppmerksom på klokken ved hjelp av DIC-mikroskopien. Skanning av degenerasjon av 630 reseptornevroner ved å telle celler med et karakteristisk virtuelt hjulpet utseende av nematoden. Synkroniser nematoder ved å velge og overføre 15 til 20 L4 larver av hver i belastning på først bakterier C deretter GM plater.Inkuber og la nematodene vokse ved standardtemperaturen på 20 grader Celsius. Utfør daglig forutsetning i 30 minutter ved å overføre platene i en inkubator satt til 34 grader Celsius. Deretter returnerer de antatte nematodene tilbake ved standardtemperaturen på 20 grader Celsius.Tilsett 10 mikroliter på 20 millimolar M9 levangial buffer drop i midten av agar-ls spot. Velg de respektive transgene nematodene og overfør dem i M9 levangial drop. Plasser 20 til 30 nematoder per dråpe.Plasser forsiktig dekselet slip på toppen av prøven. Forsegle dekselet slip med neglelakk for å bevare fuktighet gjennom hele bildebehandlingsprosessen. Bruk et fluorescensmikroskop kombinert med et kamera, oppdag og ta studiebilder av hodeområdet ved 20 x forstørrelse.Overvåk syv dager med transgene nematoder for dopaminerg nevronal celledød. Mål de nevronale policul aggregatene i hoderegionen på fire dager gamle transgene dyr som uttrykker 240 fusjon med levende mennesker. Nekrotisk celledød indusert en hyperaktiv iionkanaler er den viktigste i nematoder som har tidligere varmesjokk forutsetningsegg.Varme sjokk forutsetning, fremme en prediksjon mot alfa-synuclein indusert celledød i syv-dagers gammel voksen hermafroditt og reduserer Q40 protein aggregater i hodet regionen av fire dager gamle voksne. Aldring er en konsekvens av skade forårsaket av gradvis degenerasjon av cellulær og vev homeostase. Dermed er forståelsen av manipulering av aldersrelatert nevronal bryte ned de viktigste stedene prioriteringer.De presenterte teknikkene kombinert med genetikk og farmakologiske skjermer kan føre til en melding om normale celledødsmodulatorer med potensiell terapeutisk interesse.

Research

JoVE Journal

Biology

Modeling Age-Associated Neurodegenerative Diseases in Caenorhabditis elegans

Interview: Protein Folding and Studies of Neurodegenerative Diseases

In this interview, Dr. Lindquist describes relationships between protein folding, prion diseases and neurodegenerative disorders. The problem of the ...

The Production of C. elegans Transgenes via Recombineering with the galK Selectable Marker

The Production of C. elegans Transgenes via Recombineering with the galK Selectable Marker

The creation of transgenic animals is widely utilized in C. elegans research including the use of GFP fusion proteins to study the regulation and ...

Isolation and In vitro Activation of Caenorhabditis elegans Sperm

Isolation and In vitro Activation of Caenorhabditis elegans Sperm

Males and hermaphrodites are the two naturally found sexual forms in the nematode C. elegans. The amoeboid sperm are produced by both males and ...

Solid Plate-based Dietary Restriction in Caenorhabditis elegans

Solid Plate-based Dietary Restriction in Caenorhabditis elegans

Reduction of food intake without malnutrition or starvation is known to increase lifespan and delay the onset of various age-related diseases in a wide ...

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

Caenorhabditis elegans has often been used as a model system in studies of early developmental processes.  The transparency of the 
embryos, the genetic ...

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

Grunnleggende<em&gt; Caenorhabditis elegans</em&gt; Metoder: Synkronisering og observasjon

Research into the molecular and developmental biology of the nematode Caenorhabditis elegans was begun in the early seventies by Sydney Brenner and it has ...

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

Prostaglandin Utvinning og analyse i<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

Caenorhabditis elegans is emerging as a powerful animal model to study the biology of lipids1-9. Prostaglandins are an important class of eicosanoids, ...

Cultivation of Caenorhabditis elegans in Three Dimensions in the Laboratory

Cultivation of Caenorhabditis elegans in Three Dimensions in the Laboratory

dyrking av<em&gt; Caenorhabditis elegans</em&gt; I tre dimensjoner i laboratoriet

The use of genetic model organisms such as Caenorhabditis elegans has led to seminal discoveries in biology over the last five decades. Most of what we ...

Methods to Study Changes in Inherent Protein Aggregation with Age in Caenorhabditis elegans

Methods to Study Changes in Inherent Protein Aggregation with Age in Caenorhabditis elegans

Metoder for å studere endringer i iboende Protein samling med alder i Caenorhabditis elegans

In the last decades, the prevalence of neurodegenerative disorders, such as Alzheimer's disease (AD) and Parkinson's disease (PD), has grown. These ...

Measurement of Oxygen Consumption Rates in Intact Caenorhabditis elegans

Measurement of Oxygen Consumption Rates in Intact Caenorhabditis elegans

Måling av oksygen inntak priser på intakt Caenorhabditis elegans

Optimal mitochondrial function is critical for healthy cellular activity, particularly in cells that have high energy demands like those in the nervous ...