Name: modeling age-associated neurodegenerative diseases in caenorhabditis elegans
Uploaded: 2020-08-15T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Modeling Age-Associated Neurodegenerative Diseases in Caenorhabditis elegans at JoVE.com

Vi tackar Chaniotakis M. och Kounakis K. för videoinspelning och redigering. K.P. finansieras genom ett bidrag från Hellenic Foundation for Research and Innovation (HFRI) och Generalsekretariatet för forskning och teknik (GSRT). N.T. finansieras genom bidrag från Europeiska forskningsrådet (ERC – GA695190 – MANNA), Europeiska kommissionens ramprogram och det grekiska utbildningsministeriet.

1. Nekrotisk celldödsinducerad av hyperaktiva jonkanaler
OBS: Gain-of-function mutationer i genfamiljen av degeneriner, inklusive mec-4 och deg-3 bland andra, resulterar i generering av hyperaktiva jonkanaler utlöser nekrotisk cell död av sex touch receptor nervceller som krävs för mekanosensation i maskar3. Nekros framkallas av avvikande stimulering av degenerins visar flera mekanistiska och morfologiska likheter med excitotoxicitet hos däggdjur. ...

<ol>
	<li>Nikoletopoulou, V., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Necrotic+cell+death+in+Caenorhabditis+elegans.">Necrotic cell death in Caenorhabditis elegans.</a> Methods in Enzymology. 545, 127-155 (2014).</li><li>Syntichaki, P., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+biochemistry+of+neuronal+necrosis:+rogue+biology.">The biochemistry of neuronal necrosis: rogue biology.</a> Nature Reviews Neuroscience. 4 (8), 672-684 (2003).</li><li>Syntichaki, P., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+models+of+mechanotransduction:+the+nematode+Caenorhabditis+elegans.">Genetic models of mechanotransduction: the nematode Caenorhabditis elegans.</a> Physiological Reviews. 84 (4), 1097-1153 (2004).</li><li>Berkowitz, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+a+C.+elegans+dopamine+neuron+degeneration+assay+for+the+validation+of+potential+Parkinson's+disease+genes.">Application of a C. elegans dopamine neuron degeneration assay for the validation of potential Parkinson's disease genes.</a> Journal of Visualized Experiments. (17), (2008).</li><li>Brignull, H. R., Moore, F. E., Tang, S. J., Morimoto, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polyglutamine+proteins+at+the+pathogenic+threshold+display+neuron-specific+aggregation+in+a+pan-neuronal+Caenorhabditis+elegans+model.">Polyglutamine proteins at the pathogenic threshold display neuron-specific aggregation in a pan-neuronal Caenorhabditis elegans model.</a> Journal of Neuroscience. 26 (29), 7597-7606 (2006).</li><li>Gidalevitz, T., Ben-Zvi, A., Ho, K. H., Brignull, H. R., Morimoto, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+disruption+of+cellular+protein+folding+in+models+of+polyglutamine+diseases.">Progressive disruption of cellular protein folding in models of polyglutamine diseases.</a> Science. 311 (5766), 1471-1474 (2006).</li><li>Gitler, A. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Parkinson's+disease+protein+alpha-synuclein+disrupts+cellular+Rab+homeostasis.">The Parkinson's disease protein alpha-synuclein disrupts cellular Rab homeostasis.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 105 (1), 145-150 (2008).</li><li>Klaips, C. L., Jayaraj, G. G., Hartl, F. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathways+of+cellular+proteostasis+in+aging+and+disease.">Pathways of cellular proteostasis in aging and disease.</a> Journal of Cell Biology. 217 (1), 51-63 (2018).</li><li>Labbadia, J., Morimoto, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+biology+of+proteostasis+in+aging+and+disease.">The biology of proteostasis in aging and disease.</a> Annual Review of Biochemistry. 84, 435-464 (2015).</li><li>Tucci, M. L., Harrington, A. J., Caldwell, G. A., Caldwell, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+dopamine+neuron+degeneration+in+Caenorhabditis+elegans.">Modeling dopamine neuron degeneration in Caenorhabditis elegans.</a> Methods in Molecular Biology. 793, 129-148 (2011).</li><li>Kourtis, N., Nikoletopoulou, V., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+heat-shock+proteins+protect+from+heat-stroke-associated+neurodegeneration.">Small heat-shock proteins protect from heat-stroke-associated neurodegeneration.</a> Nature. 490 (7419), 213-218 (2012).</li><li>Kourtis, N., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+heat+shock+proteins+and+neurodegeneration:+recent+developments.">Small heat shock proteins and neurodegeneration: recent developments.</a> BioMolecular Concepts. 9 (1), 94-102 (2018).</li><li>Kumsta, C., Chang, J. T., Schmalz, J., Hansen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hormetic+heat+stress+and+HSF-1+induce+autophagy+to+improve+survival+and+proteostasis+in+C.+elegans.">Hormetic heat stress and HSF-1 induce autophagy to improve survival and proteostasis in C. elegans.</a> Nature Communications. 8, 14337 (2017).</li><li>Schindelin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fiji:+an+open-source+platform+for+biological-image+analysis.">Fiji: an open-source platform for biological-image analysis.</a> Nature Methods. 9 (7), 676-682 (2012).</li><li>Palikaras, K., Lionaki, E., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coordination+of+mitophagy+and+mitochondrial+biogenesis+during+ageing+in+C.+elegans.">Coordination of mitophagy and mitochondrial biogenesis during ageing in C. elegans.</a> Nature. 521 (7553), 525-528 (2015).</li><li>Samara, C., Syntichaki, P., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autophagy+is+required+for+necrotic+cell+death+in+Caenorhabditis+elegans.">Autophagy is required for necrotic cell death in Caenorhabditis elegans.</a> Cell Death and Differentiation. 15 (1), 105-112 (2008).</li></ol>

Här introducerar och beskriver vi allmänt tillgängliga metoder för tillväxt, synkronisering och mikroskopisk undersökning av några mångsidiga C. elegans-modeller som undersöker åldersberoende neurodegeneration. Särskilt bedömer och dissekerar vi de cellulära och molekylära underbyggnaderna av åldersrelaterad neuronal nedbrytning genom att använda hyperaktiverad jonkanalinducerad nekros och proteinaggregatinducerad neurotoxicitet1,2,<sup c...

Under de senaste två decennierna har C. elegans använts i stor utsträckning som en modell organism för att undersöka de molekylära mekanismerna för nekrotisk celldöd. C. elegans erbjuder ett exceptionellt väl karakteriserat och kartlagt nervsystem, transparent kroppsstruktur och en mångsidig repertoar av genetiska metoder och avbildningsmetoder för att övervaka in vivo cellulär funktion och överlevnad under hela åldrandet. Således har flera C. elegans genetiska modeller av neurodegeneration redan utvecklats för att bedöma neuronal lönsamhet. I synnerhet, väl beskrivna och används nematod modeller inkluderar hyperaktiv jon kanal-inducerad nekros1,2,3 och celldöd utlöses av ökad protein aggregering4,5,6,77,8,9,10 och värmeslag11,12, bland andra.
Kortvarig exponering för sub-dödliga temperaturer gav resistens mot nekrotisk celldöd, utlöses av en efterföljande värmestress både i nematoder och däggdjursneuron11. Intressant, daglig förkonditionering av nematoder vid en mild förhöjd temperatur skyddar mot neurodegeneration, som orsakas av olika stimuli, såsom jonisk obalans (t.ex. mec-4(u231) och/eller deg-3(u662)) och proteinaggregering (t.ex. α-synuclein och polyQ40)11,13.
Här beskriver vi mångsidiga metoder som använder C. elegans för att övervaka och utvärdera åldersberoende neurodegeneration i väletablerade modeller av mänskliga sjukdomar, såsom excitotoxicitet-utlöst celldöd, Parkinsons och Huntingtons sjukdom. Dessutom understryker vi den nervskyddande roll värmekonditionering i flera modeller av neurodegeneration. En kombination av dessa tekniker tillsammans med genetiska och/eller farmakologiska skärmar kommer att resultera i identifiering och karakterisering av nya celldödsmodulatorer, med potentiellt terapeutiskt intresse.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Agar</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>5040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agarose</td>
			<td>Biozym</td>
			<td>8,40,004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AM101: rmsIs110[prgef-1Q40::YFP]</td>
			<td>Caenorhabditis Genetics Center (CGC)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium chloride dehydrate (CaCl2&#8729;2H2O)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C5080</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cholesterol</td>
			<td>SERVA Electrophoresis</td>
			<td>17101.01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>deg-3(u662)V or deg-3(d)</td>
			<td>Caenorhabditis Genetics Center (CGC)</td>
			<td></td>
			<td>Maintain animals at 20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DIC microscope (Nomarsky)</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>Axio Vert A1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting stereomicroscope</td>
			<td>Nikon Corporation</td>
			<td></td>
			<td>SMZ645</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epifluorescence microscope</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td>EVOS Cell Imaging Systems</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Escherichia coli OP50 strain</td>
			<td>Caenorhabditis Genetics Center (CGC)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Greiner Petri dishes (60 mm x 15 mm)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P5237</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>image analysis software</td>
			<td>Fiji</td>
			<td></td>
			<td>https://fiji.sc</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1,37,010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>K2HPO4</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1,04,873</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium sulfate (MgSO4)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M7506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mec-4(u231)X or mec-4(d)</td>
			<td>Caenorhabditis Genetics Center (CGC)</td>
			<td></td>
			<td>Maintain animals at 20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope slides (75 mm x 25 mm x 1 mm)</td>
			<td>Marienfeld, Lauda-Koenigshofen</td>
			<td>10 006 12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope cover glass (18 mm x 18 mm)</td>
			<td>Marienfeld, Lauda-Koenigshofen</td>
			<td>01 010 30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsoft Office 2011 Excel software package</td>
			<td>Microsoft Corporation, Redmond, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na2HPO4</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1,06,586</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nematode growth medium (NGM) agar plates</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nystatin stock solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>N3503</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peptone</td>
			<td>BD, Bacto</td>
			<td>211677</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride (NaCl)</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1,06,40,41,000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard equipment for preparing agar plates (autoclave, Petri dishes, etc.)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard equipment for maintaining worms (platinum wire pick, incubators, etc.)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>statistical analysis software</td>
			<td>GraphPad Software Inc., San Diego, USA</td>
			<td></td>
			<td>GraphPad Prism software package</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Streptomycin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S6501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tetramisole hydrochloride</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>L9756</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UA44: Is[baIn1; pdat-1&#945;-syn, pdat-1GFP]</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Upon request: G. Caldwell (University of Alabama, Tuscaloosa AL)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

modeling age-associated neurodegenerative diseases in caenorhabditis elegans

Att bekämpa mänskliga neurodegenerativa patologier och hantera deras genomgripande socioekonomiska effekter håller på att bli en global prioritet. Trots deras skadliga effekter på människors livskvalitet och hälso- och sjukvårdssystemet är majoriteten av de mänskliga neurodegenerativa sjukdomarna fortfarande obotliga och kan inte förebyggas. Därför blir utvecklingen av nya terapeutiska interventioner mot sådana sjukdomar en brådskande brådska. Åldersassocierad försämring av neuronala kretsar och funktion är evolutionärt bevaras i organismer så olika som den ringa masken Caenorhabditis elegans och människor, vilket innebär likheter i de underliggande cellulära och molekylära mekanismer. C. elegans är en mycket formbar genetisk modell, som erbjuder ett väl karakteriserat nervsystem, kroppstransparens och en mångsidig repertoar av genetiska och bildframställningstekniker för att bedöma neuronal aktivitet och kvalitetskontroll under åldrandet. Här introducerar och beskriver vi metoder som använder några mångsidiga nematodmodeller, inklusive hyperaktiverad jonkanalinducerad nekros (t.ex. deg-3(d) och mec-4(d)) och proteinaggregat (t.ex. α-syunclein och polyglutamat)-inducerad neurotoxicitet, för att övervaka och dissekera den cellulära och cellulära underbyggnad av åldersrelaterad neuronal nedbrytning. En kombination av dessa djurneurindegenerationsmodeller, tillsammans med genetiska och farmakologiska skärmar för celldödsmodulatorer, kommer att leda till en aldrig tidigare skådad förståelse av åldersrelaterad nedbrytning av neuronal funktion och kommer att ge kritiska insikter med bred relevans för människors hälsa och livskvalitet.

Nekrotisk celldöd-inducerad av hyperaktiva jonkanaler Med hjälp av de förfaranden som presenteras här inkuberades muterade embryon antingen mec-4(u231) och deg-3u662) i 25 minuter vid 34 °C eller hölls vid standardtemperaturen på 20 °C. Vid kläckning fastställdes antalet neuronala celllik vid L1 larvstadiet i båda grupperna. Nematoder som kläckts från värmechockkonditionerade ägg (figur 1A-1B).
...

Watch this Scientific Journal Video about Modeling Age-Associated Neurodegenerative Diseases in Caenorhabditis elegans at JoVE.com

Modeling Age-Associated Neurodegenerative Diseases in Caenorhabditis elegans

Här introducerar och beskriver vi allmänt tillgängliga metoder som använder några mångsidiga nematodmodeller, inklusive hyperaktiverad jonkanalinducerad nekros och proteinaggregerad neurotoxicitet, för att övervaka och dissekera de cellulära och molekylära underbyggnaderna av ålderssasocierade neurodegenerativa sjukdomar.

Modellering Åldersassocierade neurodegenerativa sjukdomar i Caenorhabditis elegans

Battling human neurodegenerative pathologies and managing their pervasive socioeconomic impact is becoming a global priority. Notwithstanding their ...

Under de senaste decennierna, människans livslängd är förlängas, på grund av förbättringar i levnadsstandard och framsteg inom medicinsk vetenskap. Ålder är den största riskfaktorn för många livshotande sjukdomar, inklusive neurodegenerativa sjukdomar, såsom Alzheimers, Parkinsons och Huntingtons sjukdom. Här visar vi metoder utnyttja några mångsidiga nya metod modeller, inklusive hyper-aktiv jonkanal inducerad nekros och protein aggregat inducerar neurotoxicitet, att övervaka och dissekera cellulära molekylära mekanismen för neural degeneration.Peak hälsosamma larver av göra fyra och göra tre Newton nematoder på nematod tillväxt medieplattan, siktning med E.Coli med dissekera stereo mikroskop. Placera tio och fyra nematoder, parasitisk enzymplatta och odla dem vid standardtemperaturen, av 20 grader celsius. Fem dagar senare, tvätta plattan med 1 mL och 9 buffert och samla djuren i 1.5mL rör.Centrifugera vid 30, 000 g i 30 sekunder och ta bort supernatanten. Tillsätt 0,5 mL pläteringslösning. Bordläggningslösningen förvaras i rumstemperatur.Vortex och övervaka periodiskt tills de alla har upplösts. Undvik plätering under perioder som är längre än fem minuter. Centrifugera vid 10, 000 g i 30 sekunder och ta bort supernatanten.Tvätta två gånger paletten med 1 mL och nio buffertar. Centrifugera vid 10000 g i 30 sekunder och ta bort supernatanten. Efter tvätt, resuspend äggen i 200 mikroliter M9 buffert och inkubera dem i 25 minuter, vid 34 grader Celsius i ett vattenbad.Underhåll en separat grupp av ägg vid 20 grader Celsius. Pipett 100 mikroliter innehållande kontroll- eller värmechockbehandlade ägg och placera dem på oseedad 10 GN-platta. Varje tallrik innehåller minst 100 till 200 ägg.Ruva äggen på 20 grader celsius tills kläckning. Använd och M9 buffert för att tvätta plattor och samla L1 liv och nematoder i 1,5 ml rör. Centrifug vid 10, 000 g i 30 sekunder.Ta bort supernatanten och behåll paletten. Tillsätt 100 mikroliter på 20 millimolar M9 levangial buffert för att söva nematoderna. Pipett 10 mikroliter av M9 levangial buffert, innehållande L1 klocka och montera dem i 2%agar-ls plats plats försiktigt en coverslip på toppen av provet.Observera klocka med hjälp av DIC-mikroskopin. Scanning degeneration av de 630 receptorn nervceller genom att räkna celler med en karakteristisk virtuella aided utseende som nematoden. Synkronisera nematoder genom att välja och överföra 15 till 20 L4 larver av varje i stam på för det första bakterier C sedan GM plattor.Inkubera och låt nematoderna växa vid standardtemperaturen på 20 grader Celsius. Utför daglig prekonditionering i 30 minuter genom att överföra plattorna i en inkubator inställd på 34 grader Celsius. Sedan tillbaka de förutsättningsförutställda nematoderna tillbaka vid standardtemperaturen på 20 grader Celsius.Tillsätt 10 mikroliter på 20 millimolar M9 levangial buffert droppe i mitten av agar-ls plats. Plocka respektive transgena nematoder och överföra dem i M9 levangial droppe. Placera 20 till 30 nematoder per droppe.Placera försiktigt täcksli på provets ovantill. Täta täckslien med nagellack för att bevara luftfuktigheten under hela bildtagningsprocessen. Med hjälp av ett fluorescensmikroskop kombinerat med en kamera, upptäcka och fånga dina studiebilder av huvudregionen vid 20 x förstoring.Övervaka sju dagar av transgena nematoder för dopaminerga neuronal celldöd. Mät neuronala policul aggregat i huvudet regionen fyra dagar gamla transgena djur uttrycker 240 fusion med levande människor. Necrotic celldöd inducerad en hyperaktiv jonkanaler är den viktigaste i nematoder som har tidigare värme chock precondition ägg.Värme chock förutsättningsbestämning, främja en förutsägelse mot alfa-synuclein inducerad celldöd i sju dagar gamla vuxna hermafrodit och minskar Q40 protein aggregat i huvudet regionen fyra dagar gamla vuxna. Åldrande är en följd av skador som orsakas av gradvis degeneration av cellulära och vävnad homeostas. Således förståelse för att manipulera åldersrelaterade neuronal bryta ner är topplaceringar prioriteringar.De presenterade teknikerna i kombination med genetik och farmakologiska skärmar skulle kunna leda till en anmälan av normala celldödsmodulatorer med potentiella terapeutiska intresse.

Research

JoVE Journal

Biology

Modeling Age-Associated Neurodegenerative Diseases in Caenorhabditis elegans

Interview: Protein Folding and Studies of Neurodegenerative Diseases

Intervju: Protein Folding och studier av neurodegenerativa sjukdomar

In this interview, Dr. Lindquist describes relationships between protein folding, prion diseases and neurodegenerative disorders. The problem of the ...

The Production of C. elegans Transgenes via Recombineering with the galK Selectable Marker

The Production of C. elegans Transgenes via Recombineering with the galK Selectable Marker

Produktionen av C. elegans Transgener via Recombineering med GalK Markör

The creation of transgenic animals is widely utilized in C. elegans research including the use of GFP fusion proteins to study the regulation and ...

Isolation and In vitro Activation of Caenorhabditis elegans Sperm

Isolation and In vitro Activation of Caenorhabditis elegans Sperm

Isolering och In vitro Aktivering av Caenorhabditis elegans Spermier

Males and hermaphrodites are the two naturally found sexual forms in the nematode C. elegans. The amoeboid sperm are produced by both males and ...

Solid Plate-based Dietary Restriction in Caenorhabditis elegans

Solid Plate-based Dietary Restriction in Caenorhabditis elegans

Solid Plate-baserade dietrestriktioner i Caenorhabditis elegans</em

Reduction of food intake without malnutrition or starvation is known to increase lifespan and delay the onset of various age-related diseases in a wide ...

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

Time-lapse Mikroskopi av tidig embryogenesen i Caenorhabditis elegans

Caenorhabditis elegans has often been used as a model system in studies of early developmental processes.  The transparency of the 
embryos, the genetic ...

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

Basisk<em&gt; Caenorhabditis elegans</em&gt; Metoder: Synkronisering och miljöövervakning

Research into the molecular and developmental biology of the nematode Caenorhabditis elegans was begun in the early seventies by Sydney Brenner and it has ...

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

Prostaglandin Extraktion och analys i<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

Caenorhabditis elegans is emerging as a powerful animal model to study the biology of lipids1-9. Prostaglandins are an important class of eicosanoids, ...

Cultivation of Caenorhabditis elegans in Three Dimensions in the Laboratory

Cultivation of Caenorhabditis elegans in Three Dimensions in the Laboratory

odling av<em&gt; Caenorhabditis elegans</em&gt; I tre dimensioner i laboratoriet

The use of genetic model organisms such as Caenorhabditis elegans has led to seminal discoveries in biology over the last five decades. Most of what we ...

Methods to Study Changes in Inherent Protein Aggregation with Age in Caenorhabditis elegans

Methods to Study Changes in Inherent Protein Aggregation with Age in Caenorhabditis elegans

Metoder för att studera förändringar i inneboende Protein aggregering med åldern i Caenorhabditis elegans

In the last decades, the prevalence of neurodegenerative disorders, such as Alzheimer's disease (AD) and Parkinson's disease (PD), has grown. These ...

Measurement of Oxygen Consumption Rates in Intact Caenorhabditis elegans

Measurement of Oxygen Consumption Rates in Intact Caenorhabditis elegans

Mätning av syre förbrukning i intakt Caenorhabditis elegans

Optimal mitochondrial function is critical for healthy cellular activity, particularly in cells that have high energy demands like those in the nervous ...