Name: assessment of de novo protein synthesis rates in caenorhabditis elegans
Uploaded: 2020-09-12T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Assessment of de novo Protein Synthesis Rates in Caenorhabditis elegans at JoVE.com

Vi takker Chaniotakis M. og Kounakis K. for videoopptak og redigering. K.P. finansieres av et stipend fra Hellenic Foundation for Research and Innovation (HFRI) og Generalsekretariatet for forskning og teknologi (GSRT). N.T. er finansiert av tilskudd fra Det europeiske forskningsrådet (ERC – GA695190 – MANNA), Europakommisjonens rammeprogrammer og det greske kunnskapsdepartementet.

MERK: Både transkripsjons- og translasjonelle fusjoner med fluoroforer kan brukes til å evaluere de novo proteinoversettelse i flere vev. Proteinsyntese priser kan vurderes for flere protein familier som lokalisert i ulike cellulære rom, inkludert cytoplasma, mitokondrier og kjerne7. Følgende stammer brukes til å overvåke globale og nevronale proteinsynteserater, N2; Ex[pife-2GFP, pRF4], ife-2 (ok306); Ex[pife-2GFP, pRF4], N2...

<ol>
	<li>Syntichaki, P., Troulinaki, K., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=eIF4E+function+in+somatic+cells+modulates+ageing+in+Caenorhabditis+elegans.">eIF4E function in somatic cells modulates ageing in Caenorhabditis elegans.</a> Nature. 445 (7130), 922-926 (2007).</li><li>Charmpilas, N., Daskalaki, I., Papandreou, M. E., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein+synthesis+as+an+integral+quality+control+mechanism+during+ageing.">Protein synthesis as an integral quality control mechanism during ageing.</a> Ageing Research Reviews. 23, 75-89 (2015).</li><li>Li, G. W., Burkhardt, D., Gross, C., Weissman, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantifying+absolute+protein+synthesis+rates+reveals+principles+underlying+allocation+of+cellular+resources.">Quantifying absolute protein synthesis rates reveals principles underlying allocation of cellular resources.</a> Cell. 157 (3), 624-635 (2014).</li><li>Dermit, M., Dodel, M., Mardakheh, F. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+monitoring+and+measurement+of+protein+translation+in+time+and+space.">Methods for monitoring and measurement of protein translation in time and space.</a> Molecular Biosystems. 13 (12), 2477-2488 (2017).</li><li>Iwasaki, S., Ingolia, N. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Growing+Toolbox+for+Protein+Synthesis+Studies.">The Growing Toolbox for Protein Synthesis Studies.</a> Trends in Biochemical Sciences. 42 (8), 612-624 (2017).</li><li>Corsi, A. K., Wightman, B., Chalfie, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Transparent+Window+into+Biology:+A+Primer+on+Caenorhabditis+elegans.">A Transparent Window into Biology: A Primer on Caenorhabditis elegans.</a> Genetics. 200 (2), 387-407 (2015).</li><li>Kourtis, N., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-specific+monitoring+of+protein+synthesis+in+vivo.">Cell-specific monitoring of protein synthesis in vivo.</a> PLoS One. 4 (2), 4547 (2009).</li><li>Parker, R., Sheth, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=P+bodies+and+the+control+of+mRNA+translation+and+degradation.">P bodies and the control of mRNA translation and degradation.</a> Molecular Cell. 25 (5), 635-646 (2007).</li><li>Rieckher, M., Markaki, M., Princz, A., Schumacher, B., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maintenance+of+Proteostasis+by+P+Body-Mediated+Regulation+of+eIF4E+Availability+during+Aging+in+Caenorhabditis+elegans.">Maintenance of Proteostasis by P Body-Mediated Regulation of eIF4E Availability during Aging in Caenorhabditis elegans.</a> Cell Reports. 25 (1), 199-211 (2018).</li><li>Reits, E. A., Neefjes, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+fixed+to+FRAP:+measuring+protein+mobility+and+activity+in+living+cells.">From fixed to FRAP: measuring protein mobility and activity in living cells.</a> Nature Cell Biology. 3 (6), 145-147 (2001).</li><li>Keith, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Graded+Proteasome+Dysfunction+in+Caenorhabditis+elegans+Activates+an+Adaptive+Response+Involving+the+Conserved+SKN-1+and+ELT-2+Transcription+Factors+and+the+Autophagy-Lysosome+Pathway.">Graded Proteasome Dysfunction in Caenorhabditis elegans Activates an Adaptive Response Involving the Conserved SKN-1 and ELT-2 Transcription Factors and the Autophagy-Lysosome Pathway.</a> PLoS Genetics. 12 (2), 1005823 (2016).</li><li>Kumsta, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+autophagy+receptor+p62/SQST-1+promotes+proteostasis+and+longevity+in+C.+elegans+by+inducing+autophagy.">The autophagy receptor p62/SQST-1 promotes proteostasis and longevity in C. elegans by inducing autophagy.</a> Nature Communications. 10 (1), 5648 (2019).</li><li>Gregersen, N., Bolund, L., Bross, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein+misfolding,+aggregation,+and+degradation+in+disease.">Protein misfolding, aggregation, and degradation in disease.</a> Molecular Biotechnology. 31 (2), 141-150 (2005).</li></ol>

Proteinsyntesemodulasjon er avgjørende for organismes homeostase. Under aldring er global så vel som spesifikk proteinsyntese perturbed. Nyere studier viser det faktum at protein oversettelse balanse direkte styrer senescence og aldring er ikke bare et biprodukt av aldringsprosessen. Spesielt kjernekomponenter i oversettelsesmaskineriet som eukaryotisk initieringsfaktor 4E (eIF4E), som letter mRNA-capping under oversettelsesinitiering, og dermed frekvensen av cap-avhengig proteinoversettelse, induserer oksidativt stres...

Proteinsyntese og nedbrytning er avgjørende for organismes homeostase. En rekke aldersrelaterte sykdommer er instigated av defekt proteinproduksjon1,2. For å måle globale proteinoversettelsesrater er det biokjemiske teknikker som ribosomal profilering, som innebærer dyp sekvensering av ribosombeskyttede mRNA-fragmenter for å overvåke uttrykk samt ny proteinsyntese3. Denne metoden, foruten å være en indirekte avlesning av translasjonelle priser, da økt RNA-tilknytning til ribosomer ikke nødvendigvis betyr økt oversettelse, har tekniske ulemper, for eksempel høye kostnader og et krav om en stor mengde startmateriale. På den annen side tillater proteomikkbaserte metoder direkte proteinkvantifisering ved puls metabolsk profilering etterfulgt av massespektrometrianalyse4,5. Dette er imidlertid en semi-kvantitativ tilnærming med begrenset temporal oppløsning som ikke lett kan brukes in vivo. Videre kan merking av proteinet være ulikt fordelt i dyr / vev av interesse. Viktigere, begge disse metodene kan skjule vevsspesifikke eller cellespesifikke variasjoner i proteinoversettelsesrater hos henholdsvis hele dyr eller vev.
Caenorhabditis elegans er en brukervennlig modell organisme som kan dyrkes i stort antall6. I tillegg, sin genetiske mottagelse og åpenhet tillate levende imaging in vivo. Denne protokollen beskriver metodikken for å oppdage proteinsyntesehastigheter ved hjelp av fluorescensgjenoppretting etter fotografering (FRAP). Vi drar nytte av det transgene uttrykket av fluorescerende proteiner, enten i hele organismen eller i spesifikke vev / celler. Transgene dyr kan enten uttrykke GFP ved hjelp av promoter av et gen, som er mye / globalt uttrykt eller en vevsspesifikk promotor for å målrette bestemte celletyper. Denne teknikken kan utvides til en bestemt promotor for å undersøke proteinsynteserater av et bestemt protein.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Agar</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>5040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agarose</td>
			<td>Biozym</td>
			<td>8,40,004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agarose pads 2%</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium chloride dehydrate (CaCl2&#8729;2H2O)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C5080</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cholesterol</td>
			<td>SERVA Electrophoresis</td>
			<td>17101.01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cycloheximide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C-7698</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting stereomicroscope</td>
			<td>Nikon Corporation</td>
			<td></td>
			<td>SMZ645</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>edc-3(ok1427);Ex[punc-119GFP, pRF4]</td>
			<td>Tavernarakis lab</td>
			<td></td>
			<td>Maintain animals at 20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epifluorescence microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>Axio Imager Z2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Escherichia coli OP50 strain</td>
			<td>Caenorhabditis Genetics Center (CGC)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence dissecting stereomicroscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>SteREO Lumar V12</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Greiner Petri dishes (60 x 15 mm)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P5237</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ife-2(ok306);Ex[pife-2GFP, pRF4]</td>
			<td>Tavernarakis lab</td>
			<td></td>
			<td>Maintain animals at 20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>image analysis software</td>
			<td>Fiji</td>
			<td></td>
			<td>https://fiji.sc</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1,37,010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>K2HPO4</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1,04,873</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LB liquid medium</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>M9 buffer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium sulfate (MgSO4)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M7506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope slides (75 x 25 x 1 mm)</td>
			<td>Marienfeld, Lauda-Koenigshofen</td>
			<td>10 006 12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsoft Office 2011 Excel software package</td>
			<td>Microsoft Corporation, Redmond, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N2;Ex[pife-2GFP; pRF4]</td>
			<td>Tavernarakis lab</td>
			<td></td>
			<td>Maintain animals at 20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N2;Ex[psod-3GFP; pRF4]</td>
			<td>Tavernarakis lab</td>
			<td></td>
			<td>Maintain animals at 20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N2;Ex[punc-119GFP; pRF4]</td>
			<td>Tavernarakis lab</td>
			<td></td>
			<td>Maintain animals at 20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na2HPO4</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1,06,586</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nematode growth medium (NGM) agar plates</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nystatin stock solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>N3503</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peptone</td>
			<td>BD, Bacto</td>
			<td>211677</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride (NaCl)</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1,06,40,41,000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard equipment for preparing agar plates (autoclave, Petri dishes, etc.)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard equipment for maintaining worms (platinum wire pick, incubators, etc.).</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>statistical analysis software</td>
			<td>GraphPad Software Inc., San Diego, USA</td>
			<td></td>
			<td>GraphPad Prism software package</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Streptomycin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S6501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UV Crosslinker</td>
			<td>Vilber Lourmat BIO-LINK BLX 254</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Worm pick</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assessment of de novo protein synthesis rates in caenorhabditis elegans

Opprettholde en sunn proteome er avgjørende for celle og organisme homeostase. Perturbasjon av balansen mellom proteinoversettelseskontroll og nedbrytning instigates en rekke aldersrelaterte sykdommer. Nedgang av proteostase kvalitetskontroll mekanismer er et kjennetegn på aldring. Biokjemiske metoder for å oppdage de novo proteinsyntese er fortsatt begrenset, har flere ulemper og kan ikke utføres i levende celler eller dyr. Caenorhabditis elegans, å være gjennomsiktig og lett genetisk modifisert, er en utmerket modell for å overvåke proteinsyntese priser ved hjelp av bildeteknikker. Her introduserer og beskriver vi en metode for å måle de novo proteinsyntese in vivo ved hjelp av fluorescensgjenvinning etter fotografering (FRAP). Transgene dyr som uttrykker fluorescerende proteiner i bestemte celler eller vev bestråles av en kraftig lyskilde som resulterer i fluorescens fotobleaching. I sin tur betyr vurdering av fluorescensutvinning ny proteinsyntese i celler og/eller vev av interesse. Derfor kan kombinasjonen av transgene nematoder, genetiske og/eller farmakologiske inngrep sammen med levende avbildning av proteinsynteserater kaste lys over mekanismer som medierer aldersavhengig proteostasekollaps.

Ved hjelp av prosedyren som presenteres her, ble villtype og muterte transgene nematoder som uttrykker følgende somatiske reportere, pife-2GFP, psod-3GFP og punc-119GFP, brukt til å vurdere proteinsyntesehastigheter i henhold til de respektive protokollene.ife- Spesielt ble villtype og ife-2 muterte ormer som uttrykker cytoplasmatisk GFP gjennom hele somatiske vev ved hjelp av ife-2-arrangøren sammenli...

Watch this Scientific Journal Video about Assessment of de novo Protein Synthesis Rates in Caenorhabditis elegans at JoVE.com

Assessment of de novo Protein Synthesis Rates in Caenorhabditis elegans

Her introduserer og beskriver vi en ikke-radioaktiv og ikke-invasiv metode for å vurdere de novo proteinsyntese in vivo, ved hjelp av nematoden Caenorhabditis elegans og fluorescens utvinning etter fotobleaching (FRAP). Denne metoden kan kombineres med genetiske og/eller farmakologiske skjermer for å identifisere nye modulatorer av proteinsyntese.

Vurdering av de novo proteinsyntese priser i caenorhabditt elegans

Maintaining a healthy proteome is essential for cell and organismal homeostasis. Perturbation of the balance between protein translational control and ...

Frekvensen av proteinsyntese er perturbed under sykdom og aldring. Fluorescens utvinning etter fotobleaching, eller FRAP, tillater måling av frekvensen av proteinsyntese in vivo. Vi bruker gjennomsiktige C.elegans ormer, som uttrykker GFP, som en modell for å overvåke den nye proteinsyntesen etter fotobleaching.Vi gir praktiske retningslinjer for å måle fluorescens utvinning ved hjelp av transgene ormer, som uttrykker GFP under ulike arrangører, enten mye uttrykt eller i bestemte celler eller vev. Denne metoden tilbyr også proteinsyntesehastighetsovervåking i sanntid. Bruk et dissekeringsteromicroscope for å vurdere utviklingsstadier og vekst av villtype og muterte transgene nematoder.Velg 10 L4 larver av villtype og muterte transgene dyr som bærer den ønskede fluorescerende reporteren på nematodevekstmedieplater seeded med E.coli. Inkuber og vokse nematodene ved standardtemperaturen på 20 grader Celsius. Fire dager senere inneholder platen en blandet populasjon av transgene ormer.Velg og overfør 15 L4 larver av hver stamme på nyseedede OP50 NGM-plater. Utfør FRAP-analyse, og overvåk proteinsyntesefrekvensen på dag én av voksenlivet. Neste dag, forberede og bruke cycloheximide-inneholdende NGM plater som en positiv kontroll.Drep bakterier ved å utsette de seedede NGM-platene i 15 minutter med UV-lys. Tilsett cykloheximid på toppen av bakterielle seedede plater også 500 mikrogram per ml endelig konsentrasjon i agarvolumet. La platene tørke.Overfør transgene nematoder som uttrykker GFP på kjøretøy og cykloheximidholdige plater. Inkuber dyr i to timer ved standardtemperaturen på 20 grader Celsius. Velg og overfør en-dags voksne transgene dyr til individuelle NGM plater seeded med en 20 mikroliter OP50 dråpe i sentrum.Fjern lokket og plasser hver plate under et objektivt objektiv på 20H av et epifluorescerende mikroskop. Fokuser og ta et referansebilde før fotobleaching. Photobleach hver prøve i 10 minutter.Ta et bilde etter fotografering. Hold dyr i individuelle NGM plater, og la dem gjenopprette. Bilde og registrere utvinningen av hver fluorescerende reporter hver time i minst seks timer på et epifluorescerende stereomikroskop.Forbered 2% agarose pads, og legg til 10 mikroliter slipp av M9 buffer i midten av agarose pad. Overfør fem transgene nematoder som uttrykker pannevronal cytoplasmatisk GFP til en dråpe M9-buffer. Bruk et øyenvippe til å spre væsken.Dyr viser reduserte bevegelser innen to minutter på grunn av M9 absorbans i agaren. Endre nematodes posisjon ved hjelp av øyenvippeplukken. Plasser prøven på 40H objektivobjektiv av et epifluorescerende mikroskop uten å bruke en dekselslipp.Fokuser og ta et referansebilde. Photobleach et målrettet interesseområde i 90 sekunder. Ta et bilde etter fotografering.Legg til en 10 mikroliter dråpe M9-buffer på fotobleached nematoder. La dyrene komme seg i fem minutter. Bruk øyenvippeplukken eller en pipette til å overføre nematodene til individuelle NGM-plater seeded med 20 mikroliter OP50-dråpe i midten.Ta et bilde av hver prøve hver time under et epifluorescerende stereomikroskop. Wild-type og fe-2 mutant ormer som uttrykker cytoplasmatisk GFP gjennom sitt somatiske vev ved hjelp av fe-2 arrangøren ble sammenlignet før, umiddelbart etter fotobleaching, og fem timer etter utvinning. Ville dyr fullt restituert mens fe-2 mutanter hadde minis utvinning kapasitet.Dermed vilt type ormer initiere normal proteinsyntese etter fotobleaching, mens ormer mangler mRNA oversettelse initiering faktor fe-2 er ikke i stand til å gjøre det, noe som indikerer at frekvensen av fluorescerende utvinning illustrerer frekvensen av proteinsyntese in vivo. Cykloheximid, en bestemt hemmer av mRNA oversettelse kan brukes som en positiv kontroll for protein oversettelse hemming. Faktisk gjenoppretter cykloheximidbehandlede transgene dyr som uttrykker cytoplasmatisk GFP under promotoren ikke sin fluorescens ved fotografering.mRNA behandlingsorganer påvirker frekvensen av proteinoversettelse. Wild-type og edc-3 mutant nematoder som uttrykker GFP pan-neuronally ble undersøkt for deres utvinning kapasitet ved målrettet fotobleaching på hodet regionen. Fluorescerende utvinning er mye langsommere i edc-3-mangelfulle dyr sammenlignet med vill-type ormer.Proteinsyntesemodulasjon er avgjørende for organismes homeostase. Under aldring er global så vel som spesifikk proteinsyntese perturbed. Proteinoversettelsesbalanse styrer direkte senescence og aldring.Spesielt, kjernekomponenter i oversettelse maskiner samt P-body interagerende komponenter akselerere aldringsprosessen. Perturbasjon av oversettelse initiering avtar aldring. Derfor er måling av globale proteinsynteserater fra FRAP en direkte avlesning av aldringsprosessen.

Research

JoVE Journal

Biology

Assessment of de novo Protein Synthesis Rates in Caenorhabditis elegans

Osmotic Avoidance in Caenorhabditis elegans: Synaptic Function of Two Genes, Orthologues of Human NRXN1 and NLGN1, as Candidates for Autism

Osmotic Avoidance in Caenorhabditis elegans: Synaptic Function of Two Genes, Orthologues of Human NRXN1 and NLGN1, as Candidates for Autism

Neurexins and neuroligins are cell adhesion molecules present in excitatory and inhibitory synapses, and they are required for correct neuron network ...

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

Caenorhabditis elegans has often been used as a model system in studies of early developmental processes.  The transparency of the 
embryos, the genetic ...

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

Grunnleggende<em&gt; Caenorhabditis elegans</em&gt; Metoder: Synkronisering og observasjon

Research into the molecular and developmental biology of the nematode Caenorhabditis elegans was begun in the early seventies by Sydney Brenner and it has ...

Biochemical and High Throughput Microscopic Assessment of Fat Mass in Caenorhabditis Elegans

Biochemical and High Throughput Microscopic Assessment of Fat Mass in Caenorhabditis Elegans

Biokjemiske og høy gjennomstrømning mikroskopisk vurdering av fettmasse i<em&gt; Caenorhabditis Elegans</em

The nematode C. elegans has emerged as an important  model for the study of conserved genetic pathways regulating fat metabolism as  it relates to human ...

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

Prostaglandin Utvinning og analyse i<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

Caenorhabditis elegans is emerging as a powerful animal model to study the biology of lipids1-9. Prostaglandins are an important class of eicosanoids, ...

Protein WISDOM: A Workbench for In silico De novo Design of BioMolecules

Protein WISDOM: A Workbench for In silico De novo Design of BioMolecules

Protein visdom; Workbench for<em&gt; I silikon</em&gt;<em&gt; De novo</em&gt; Design av biomolekyler

The aim of de novo protein design is to find the amino acid sequences that will fold into a desired 3-dimensional structure with improvements in specific ...

Using Caenorhabditis elegans as a Model System to Study Protein Homeostasis in a Multicellular Organism

Using Caenorhabditis elegans as a Model System to Study Protein Homeostasis in a Multicellular Organism

The folding and assembly of proteins is essential for protein function, the long-term health of the cell, and longevity of the organism. Historically, the ...

Methods to Study Changes in Inherent Protein Aggregation with Age in Caenorhabditis elegans

Methods to Study Changes in Inherent Protein Aggregation with Age in Caenorhabditis elegans

Metoder for å studere endringer i iboende Protein samling med alder i Caenorhabditis elegans

In the last decades, the prevalence of neurodegenerative disorders, such as Alzheimer's disease (AD) and Parkinson's disease (PD), has grown. These ...

De Novo Generation of Somatic Stem Cells by YAP/TAZ

De Novo Generation of Somatic Stem Cells by YAP/TAZ

De Novo Generasjon av somatiske stamceller ved YAP/TAZ

Here we present protocols to isolate primary differentiated cells and turn them into stem/progenitor cells (SCs) of the same lineage by transient ...

Detecting Protein Subcellular Localization by Green Fluorescence Protein Tagging and 4',6-Diamidino-2-phenylindole Staining in Caenorhabditis elegans

Detecting Protein Subcellular Localization by Green Fluorescence Protein Tagging and 4',6-Diamidino-2-phenylindole Staining in Caenorhabditis elegans

Oppdage Protein Subcellular lokalisering av Green fluorescens Protein merking og 4', 6-Diamidino-2-phenylindole farging i Caenorhabditis elegans