Name: assessment of de novo protein synthesis rates in caenorhabditis elegans
Uploaded: 2020-09-12T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Assessment of de novo Protein Synthesis Rates in Caenorhabditis elegans at JoVE.com

Мы благодарим Чаниотакиса М. и Кунакиса К. за видеозапись и редактирование. К.П. финансируется за счет гранта Греческого фонда исследований и инноваций (HFRI) и Генерального секретариата по исследованиям и технологиям (GSRT). N.T. финансируется за счет грантов Европейского исследовательского совета (ERC - GA695190 - MANNA), Рамочной программы Европейской комиссии и Министерства образования Греции.

ПРИМЕЧАНИЕ: Как транскрипционные, так и трансляционные синтезы флюорофоров могут быть использованы для оценки перевода белка de novo в нескольких тканях. Скорость синтеза белка может быть оценена для нескольких белковых семейств, локализованных в различных клеточных отсеках, включая ци?...

<ol>
	<li>Syntichaki, P., Troulinaki, K., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=eIF4E+function+in+somatic+cells+modulates+ageing+in+Caenorhabditis+elegans.">eIF4E function in somatic cells modulates ageing in Caenorhabditis elegans.</a> Nature. 445 (7130), 922-926 (2007).</li><li>Charmpilas, N., Daskalaki, I., Papandreou, M. E., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein+synthesis+as+an+integral+quality+control+mechanism+during+ageing.">Protein synthesis as an integral quality control mechanism during ageing.</a> Ageing Research Reviews. 23, 75-89 (2015).</li><li>Li, G. W., Burkhardt, D., Gross, C., Weissman, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantifying+absolute+protein+synthesis+rates+reveals+principles+underlying+allocation+of+cellular+resources.">Quantifying absolute protein synthesis rates reveals principles underlying allocation of cellular resources.</a> Cell. 157 (3), 624-635 (2014).</li><li>Dermit, M., Dodel, M., Mardakheh, F. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+monitoring+and+measurement+of+protein+translation+in+time+and+space.">Methods for monitoring and measurement of protein translation in time and space.</a> Molecular Biosystems. 13 (12), 2477-2488 (2017).</li><li>Iwasaki, S., Ingolia, N. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Growing+Toolbox+for+Protein+Synthesis+Studies.">The Growing Toolbox for Protein Synthesis Studies.</a> Trends in Biochemical Sciences. 42 (8), 612-624 (2017).</li><li>Corsi, A. K., Wightman, B., Chalfie, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Transparent+Window+into+Biology:+A+Primer+on+Caenorhabditis+elegans.">A Transparent Window into Biology: A Primer on Caenorhabditis elegans.</a> Genetics. 200 (2), 387-407 (2015).</li><li>Kourtis, N., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-specific+monitoring+of+protein+synthesis+in+vivo.">Cell-specific monitoring of protein synthesis in vivo.</a> PLoS One. 4 (2), 4547 (2009).</li><li>Parker, R., Sheth, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=P+bodies+and+the+control+of+mRNA+translation+and+degradation.">P bodies and the control of mRNA translation and degradation.</a> Molecular Cell. 25 (5), 635-646 (2007).</li><li>Rieckher, M., Markaki, M., Princz, A., Schumacher, B., Tavernarakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maintenance+of+Proteostasis+by+P+Body-Mediated+Regulation+of+eIF4E+Availability+during+Aging+in+Caenorhabditis+elegans.">Maintenance of Proteostasis by P Body-Mediated Regulation of eIF4E Availability during Aging in Caenorhabditis elegans.</a> Cell Reports. 25 (1), 199-211 (2018).</li><li>Reits, E. A., Neefjes, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+fixed+to+FRAP:+measuring+protein+mobility+and+activity+in+living+cells.">From fixed to FRAP: measuring protein mobility and activity in living cells.</a> Nature Cell Biology. 3 (6), 145-147 (2001).</li><li>Keith, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Graded+Proteasome+Dysfunction+in+Caenorhabditis+elegans+Activates+an+Adaptive+Response+Involving+the+Conserved+SKN-1+and+ELT-2+Transcription+Factors+and+the+Autophagy-Lysosome+Pathway.">Graded Proteasome Dysfunction in Caenorhabditis elegans Activates an Adaptive Response Involving the Conserved SKN-1 and ELT-2 Transcription Factors and the Autophagy-Lysosome Pathway.</a> PLoS Genetics. 12 (2), 1005823 (2016).</li><li>Kumsta, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+autophagy+receptor+p62/SQST-1+promotes+proteostasis+and+longevity+in+C.+elegans+by+inducing+autophagy.">The autophagy receptor p62/SQST-1 promotes proteostasis and longevity in C. elegans by inducing autophagy.</a> Nature Communications. 10 (1), 5648 (2019).</li><li>Gregersen, N., Bolund, L., Bross, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein+misfolding,+aggregation,+and+degradation+in+disease.">Protein misfolding, aggregation, and degradation in disease.</a> Molecular Biotechnology. 31 (2), 141-150 (2005).</li></ol>

Модуляция синтеза белка имеет важное значение для организма гомеостаза. Во время старения, глобальный, а также специфический синтез белка возмущен. Недавние исследования показывают тот факт, что баланс перевода белка непосредственно контролирует старение и старение не просто побочны...

Синтез и деградация белка имеет важное значение для организма гомеостаза. Множество возрастных заболеваний вызваны дефектным производством белка1,,2. Для того, чтобы измерить глобальные темпы перевода белка, Существуют биохимические методы, такие как рибосомное профилирование, которое включает в себя глубокое секвенирование рибосомно-защищенных фрагментов мРНК для мониторинга экспрессии, а такжесинтеза нового белка 3. Этот метод, помимо того, что он является косвенным считыванием переводческих ставок, поскольку увеличение ассоциации РНК с рибосомами не обязательно означает увеличение перевода, имеет технические недостатки, такие, как высокая стоимость и требование большого количества исходного материала. С другой стороны, методы, основанные на протеомике, позволяют напрямую количественно оценить белок путем метаболического профилирования импульса, за которымследует анализ масс-спектрометрии 4,,5. Однако это полуколичеспособный подход с ограниченным временным разрешением, который не может быть легко использован in vivo. Кроме того, маркировка белка может быть неравномерно распределена в животных / тканей, представляющих интерес. Важно отметить, что оба эти метода могут скрывать специфические или клеточные изменения в ставках перевода белка у целых животных или тканей, соответственно.
Caenorhabditis elegans является простой в использовании модель организма, который может быть выращен в больших количествах6. Кроме того, его генетическая подмена и прозрачность позволяют живую визуализацию в vivo. Этот протокол описывает методологию обнаружения показателей синтеза белка с помощью восстановления флуоресценции после фотоблейлинга (FRAP). Мы пользуемся трансгенной экспрессией флуоресцентных белков, либо во всем организме, либо в определенных тканях/клетках. Трансгенные животные могут либо выразить GFP с помощью промоутера гена, который широко / глобально выражается или ткани конкретных промоутер для целевых конкретных типов клеток. Этот метод может быть распространен на конкретного промоутера для изучения темпов синтеза белка конкретного белка.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Agar</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>5040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agarose</td>
			<td>Biozym</td>
			<td>8,40,004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agarose pads 2%</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium chloride dehydrate (CaCl2&#8729;2H2O)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C5080</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cholesterol</td>
			<td>SERVA Electrophoresis</td>
			<td>17101.01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cycloheximide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C-7698</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting stereomicroscope</td>
			<td>Nikon Corporation</td>
			<td></td>
			<td>SMZ645</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>edc-3(ok1427);Ex[punc-119GFP, pRF4]</td>
			<td>Tavernarakis lab</td>
			<td></td>
			<td>Maintain animals at 20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epifluorescence microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>Axio Imager Z2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Escherichia coli OP50 strain</td>
			<td>Caenorhabditis Genetics Center (CGC)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence dissecting stereomicroscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>SteREO Lumar V12</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Greiner Petri dishes (60 x 15 mm)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P5237</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ife-2(ok306);Ex[pife-2GFP, pRF4]</td>
			<td>Tavernarakis lab</td>
			<td></td>
			<td>Maintain animals at 20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>image analysis software</td>
			<td>Fiji</td>
			<td></td>
			<td>https://fiji.sc</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1,37,010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>K2HPO4</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1,04,873</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LB liquid medium</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>M9 buffer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium sulfate (MgSO4)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M7506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope slides (75 x 25 x 1 mm)</td>
			<td>Marienfeld, Lauda-Koenigshofen</td>
			<td>10 006 12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsoft Office 2011 Excel software package</td>
			<td>Microsoft Corporation, Redmond, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N2;Ex[pife-2GFP; pRF4]</td>
			<td>Tavernarakis lab</td>
			<td></td>
			<td>Maintain animals at 20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N2;Ex[psod-3GFP; pRF4]</td>
			<td>Tavernarakis lab</td>
			<td></td>
			<td>Maintain animals at 20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N2;Ex[punc-119GFP; pRF4]</td>
			<td>Tavernarakis lab</td>
			<td></td>
			<td>Maintain animals at 20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na2HPO4</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1,06,586</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nematode growth medium (NGM) agar plates</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nystatin stock solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>N3503</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peptone</td>
			<td>BD, Bacto</td>
			<td>211677</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride (NaCl)</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1,06,40,41,000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard equipment for preparing agar plates (autoclave, Petri dishes, etc.)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard equipment for maintaining worms (platinum wire pick, incubators, etc.).</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>statistical analysis software</td>
			<td>GraphPad Software Inc., San Diego, USA</td>
			<td></td>
			<td>GraphPad Prism software package</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Streptomycin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S6501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UV Crosslinker</td>
			<td>Vilber Lourmat BIO-LINK BLX 254</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Worm pick</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assessment of de novo protein synthesis rates in caenorhabditis elegans

Поддержание здорового протеома имеет важное значение для клеток и организма гомеостаза. Возмущение баланса между белково-трансляционным контролем и деградацией провоцирует множество возрастных заболеваний. Снижение механизмов контроля качества протеостаза является отличительной чертой старения. Биохимические методы обнаружения синтеза белка de novo по-прежнему ограничены, имеют ряд недостатков и не могут быть выполнены в живых клетках или животных. Caenorhabditis elegans, будучи прозрачным и легко генетически модифицированных, является отличной моделью для мониторинга темпов синтеза белка с помощью методов визуализации. Здесь мы представляем и описываем метод измерения синтеза белка de novo in vivo с использованием восстановления флуоресценции после фотоотливания (FRAP). Трансгенные животные, выражаюющие флуоресцентные белки в определенных клетках или тканях, облучаются мощным источником света, что приводит к фотоотбелу флуоресценции. В свою очередь, оценка восстановления флуоресценции означает новый синтез белка в клетках и/или тканях, представляющих интерес. Таким образом, сочетание трансгенных нематод, генетических и/или фармакологических вмешательств вместе с живой визуализацией скорости синтеза белка может пролить свет на механизмы, ососредуемые возрастной крах протеостаза.

Используя представленную здесь процедуру, для оценки скорости синтеза белка в соответствии с соответствующими протоколами использовались трансгенные нематоды дикого типа и мутантные нематоды, выражают следующие соматические репортеры, pife-2GFP, psod-3</s...

Watch this Scientific Journal Video about Assessment of de novo Protein Synthesis Rates in Caenorhabditis elegans at JoVE.com

Assessment of de novo Protein Synthesis Rates in Caenorhabditis elegans

Здесь мы вводим и описываем нерадиоактивный и неинвазивный метод оценки синтеза белка de novo in vivo, используя нематоды caenorhabditis elegans и восстановление флуоресценции после фотоблейлинга (FRAP). Этот метод можно комбинировать с генетическими и/или фармакологическими экранами для выявления новых модуляторов синтеза белка.

Оценка показателей синтеза белка de novo в Caenorhabditis elegans

Maintaining a healthy proteome is essential for cell and organismal homeostasis. Perturbation of the balance between protein translational control and ...

Скорость синтеза белка возмущена во время болезни и старения. Восстановление флуоресценции после фотоблейлинга, или FRAP, позволяет измерять скорость синтеза белка in vivo. Мы используем прозрачных червей C.elegans, которые выражают GFP, в качестве модели для мониторинга синтеза нового белка после фотоотливания.Мы предоставляем практические рекомендации для измерения восстановления флуоресценции с помощью трансгенных червей, которые выражают GFP под различными промоутерами, либо широко выражены или в конкретных клетках или тканях. Кроме того, этот метод предлагает мониторинг скорости синтеза белка в режиме реального времени. Используйте рассечение стереомикроскопа для оценки стадий развития и роста диких и мутантных трансгенных нематод.Выберите 10 L4 личинок дикого типа и мутант трансгенных животных, несущих желаемого флуоресцентного репортера на нематод роста медиа пластин, посеянных с E.coli. Инкубировать и выращивать нематод при стандартной температуре 20 градусов по Цельсию. Четыре дня спустя, пластина содержит смешанную популяцию трансгенных червей.Выберите и перенесите 15 личинок L4 каждой деформации на свежесеянные пластины OP50 NGM. Выполните анализ FRAP и следите за скоростью синтеза белка в первый день взрослой жизни. На следующий день подготовьтесь и используйте циклохэксимидсодержащие NGM пластины в качестве положительного контроля.Убейте бактерии, подвергая семенами NGM пластин в течение 15 минут с ультрафиолетовым светом. Добавить циклохексимид на верхней части бактериальных семян пластин слишком 500 микрограмм на мл конечной концентрации в объеме агара. Дайте тарелкам высохнуть.Передача трансгенных нематод, выражающих GFP на транспортном средстве и циклохексимидсодержащих пластин. Инкубировать животных в течение двух часов при стандартной температуре 20 градусов по Цельсию. Выберите и перенесите однодневных взрослых трансгенных животных на отдельные ngM пластины, посеянные с 20 микролитров OP50 падение в центре.Снимите крышку и поместите каждую пластину под объектив 20H объективного эпифлуоресцентного микроскопа. Сосредоточьтесь и захватит эталонное изображение перед фотоотчетом. Photobleach каждый образец в течение 10 минут.Захват изображения после фотоотчета. Храните животных в отдельных пластинах NGM, и пусть они восстанавливаются. Изображение и записывать восстановление каждого флуоресцентного репортера каждый час, по крайней мере шесть часов в эпифлюоресцентный стереомикроскоп.Подготовка 2%agarose колодки, и добавить 10 микролитров падение M9 буфера в центре агарозы площадку. Перенесите пять трансгенных нематод, выражаюющих пан-нейронную цитоплазмическую GFP, в каплю буфера M9. Используйте ресницы для распространения жидкости.Звери отображают уменьшенные движения в течение двух минут из-за поглощения M9 в агар. Измените положение нематод с помощью выбора ресниц. Поместите образец на объектив 40H объективного эпифлуоресцентного микроскопа без использования крышки скольжения.Сосредоточьтесь и захватит эталонное изображение. Photobleach целевой области интереса в течение 90 секунд. Захват изображения после фотоотчета.Добавьте 10 микролитров капли буфера M9 на фотоотлитных нематод. Пусть животные, чтобы восстановить в течение пяти минут. Используйте ресницы забрать или пипетки для передачи нематод на отдельные пластины NGM посеяны с 20 микролитров OP50 падение в центре.Захват изображения каждого образца каждый час под эпифлюоресцентным стереомикроскопом. Дикие и фе-2 мутантных червей, выражаюющих цитоплазмические GFP на протяжении всей их соматических тканей с помощью fe-2 промоутер были сравнены раньше, сразу после фотоотверга, и пять часов после восстановления. Дикие животные полностью выздоровели, в то время как мутанты fe-2 имели способность к восстановлению мини.Таким образом, черви дикого типа инициируют нормальный синтез белка после фотоблейбинга, в то время как черви, не имеющие фактора инициирования перевода мРНК fe-2, не в состоянии сделать это, указывая, что скорость восстановления флуоресцентных иллюстрирует скорость синтеза белка in vivo. Циклохексимид, специфический ингибитор перевода мРНК, может быть использован в качестве положительного контроля для ингибирования перевода белка. Действительно, циклохексимид-обработанные трансгенные животные, выражаюющие цитоплазмический GFP под промоутером, не восстанавливают свою флуоресценцию при фотоблехинге.органы обработки мРНК влияют на скорость перевода белка. Дикий тип и edc-3 мутант нематод, выражаюющих GFP пан-нейронально были рассмотрены на их способность к восстановлению на целевых photobleaching в области головы. Флуоресцентное восстановление гораздо медленнее у эдк-3-дефицитных животных по сравнению с дикими червями.Модуляция синтеза белка имеет важное значение для организма гомеостаза. Во время старения, глобальный, а также специфический синтез белка возмущен. Баланс перевода белка непосредственно контролирует старение и старение.В частности, основные компоненты механизма перевода, а также взаимодействующие компоненты P-тела ускоряют процесс старения. Возмущение инициации перевода замедляет старение. Таким образом, измерение глобальных скоростей синтеза белка FRAP является прямым считыванием процесса старения.

Research

JoVE Journal

Biology

Assessment of de novo Protein Synthesis Rates in Caenorhabditis elegans

Osmotic Avoidance in Caenorhabditis elegans: Synaptic Function of Two Genes, Orthologues of Human NRXN1 and NLGN1, as Candidates for Autism

Osmotic Avoidance in Caenorhabditis elegans: Synaptic Function of Two Genes, Orthologues of Human NRXN1 and NLGN1, as Candidates for Autism

Осмотическое избежании в Caenorhabditis Элеганс: Synaptic функции двух генов, ортологов прав NRXN1 И NLGN1, В качестве кандидатов на аутизм

Neurexins and neuroligins are cell adhesion molecules present in excitatory and inhibitory synapses, and they are required for correct neuron network ...

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

Покадровый Микроскопия раннего эмбриогенеза в Caenorhabditis Элеганс

Caenorhabditis elegans has often been used as a model system in studies of early developmental processes.  The transparency of the 
embryos, the genetic ...

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

Основной<em&gt; Caenorhabditis Элеганс</em&gt; Методы синхронизации и наблюдения

Research into the molecular and developmental biology of the nematode Caenorhabditis elegans was begun in the early seventies by Sydney Brenner and it has ...

Biochemical and High Throughput Microscopic Assessment of Fat Mass in Caenorhabditis Elegans

Biochemical and High Throughput Microscopic Assessment of Fat Mass in Caenorhabditis Elegans

Биохимические и высокая пропускная способность Микроскопическая оценка жировой массы в<em&gt; Caenorhabditis Элеганс</em

The nematode C. elegans has emerged as an important  model for the study of conserved genetic pathways regulating fat metabolism as  it relates to human ...

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

Добыча простагландинов и анализа в<em&gt; Caenorhabditis Элеганс</em

Caenorhabditis elegans is emerging as a powerful animal model to study the biology of lipids1-9. Prostaglandins are an important class of eicosanoids, ...

Protein WISDOM: A Workbench for In silico De novo Design of BioMolecules

Protein WISDOM: A Workbench for In silico De novo Design of BioMolecules

Белки МУДРОСТЬ Workbench для<em&gt; В кремнии</em&gt;<em&gt; De Novo</em&gt; Дизайн биомолекул

The aim of de novo protein design is to find the amino acid sequences that will fold into a desired 3-dimensional structure with improvements in specific ...

Using Caenorhabditis elegans as a Model System to Study Protein Homeostasis in a Multicellular Organism

Using Caenorhabditis elegans as a Model System to Study Protein Homeostasis in a Multicellular Organism

The folding and assembly of proteins is essential for protein function, the long-term health of the cell, and longevity of the organism. Historically, the ...

Methods to Study Changes in Inherent Protein Aggregation with Age in Caenorhabditis elegans

Methods to Study Changes in Inherent Protein Aggregation with Age in Caenorhabditis elegans

Методы для изучения изменений в присущих агрегации белков с возрастом у нематоды Caenorhabditis elegans

In the last decades, the prevalence of neurodegenerative disorders, such as Alzheimer's disease (AD) and Parkinson's disease (PD), has grown. These ...

De Novo Generation of Somatic Stem Cells by YAP/TAZ

De Novo Generation of Somatic Stem Cells by YAP/TAZ

De Novo Поколение соматических стволовых клеток, YAP/TAZ

Here we present protocols to isolate primary differentiated cells and turn them into stem/progenitor cells (SCs) of the same lineage by transient ...

Detecting Protein Subcellular Localization by Green Fluorescence Protein Tagging and 4',6-Diamidino-2-phenylindole Staining in Caenorhabditis elegans

Detecting Protein Subcellular Localization by Green Fluorescence Protein Tagging and 4',6-Diamidino-2-phenylindole Staining in Caenorhabditis elegans

Определение белка субцеллюлярные локализации зеленый флуоресценции белков пометки и 4', 6-Diamidino-2-phenylindole окрашивание Caenorhabditis elegans