Name: in vivo targeting of neural progenitor cells in ferret neocortex by in utero electroporation
Uploaded: 2020-05-06T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Targeting of Neural Progenitor Cells in Ferret Neocortex by In Utero Electroporation at JoVE.com

نحن ممتنون لخدمات ومرافق معهد ماكس بلانك لبيولوجيا الخلايا الجزيئية وعلم الوراثة على الدعم المتميز المقدم ، ولا سيما الفريق بأكمله من الخدمات الطبية الحيوية (BMS) لتربية ممتازة من النمس وJ. Peychl وفريقه من مرفق المجهر الخفيفة. ونحن ممتنون بشكل خاص لكرينت ريبي وآنا فايفر من إدارة المباني للدعم البيطري الاستثنائي ولي شينغ من مجموعة هوتنر للمساعدة في العمليات الجراحية النمس.

تم إجراء جميع الإجراءات التجريبية بالاتفاق مع التشريعات الألمانية لرعاية الحيوان بعد موافقة Landesdirektion Sachsen (تراخيص TVV 2/2015 و TVV 21/2017).
1- الاستعداد للكهربة في الرحم
<ol><li>إعداد خليط الحمض النووي. في هذا البروتوكول يتم استخدام تركيز نهائي من 1 ميكروغرام/ميكرولتر من pGFP. حل الحمض الن...

في كهربائي الرحم في النمس هو تقنية هامة، مع مزايا وعيوب فيما يتعلق بطرق أخرى. هناك خطوات حاسمة والقيود على هذا الأسلوب، فضلا عن التعديلات المحتملة والتطبيقات المستقبلية أن نضع في اعتبارنا.
منذ العمل الرائد من فيكتور بوريل وزملاؤه على التلاعب الجيني من النمس النمس بعد الولا...

القشرة الجديدة هي الورقة الخارجية للدماغ النخاعي الثديي ومقعد الوظائف المعرفية العليا1,2,3,4,5. من أجل تحقيق تلاعب وراثي حاد في القشرة الثديية في الجسم الحي خلال التطور الجنيني ، تم استكشاف طريقتين مختلفتين: العدوى الفيروسية6 وفي الإلكتروبورات الرحمية7. كلتا الطريقتين تسمحان باستهداف الخلايا القشرية الجديدة بكفاءة ولكنها تعاني من بعض القيود. الميزة الرئيسية في الإلكتروبورات الرحمية مقارنة بالعدوى الفيروسية هي القدرة على تحقيق خصوصية المكان داخل القشرة الجديدة ، والتي تتحقق من خلال تنظيم اتجاه المجال الكهربائي.
منذ أن تبين لأول مرة الكهربائي لتسهيل دخول الحمض النووي إلى الخلايا في المختبر8، فقد تم تطبيقه على تسليم الحمض النووي إلى مختلف الفقاريات في الجسم الحي. في علم الأعصاب التنموي، في كهربائي الرحم من الماوس نيوكورتيكس ذكرت لأول مرة في 20019،10. هذه الطريقة تتكون من حقن خليط الحمض النووي في البطين الجانبي للدماغ الجنيني وتطبيق لاحق من المجال الكهربائي باستخدام أقطاب الملاقط، والذي يسمح الدقة المكانية7،11. في الرحم الكهربائي ومنذ ذلك الحين تم تطبيقها لتقديم الأحماض النووية من أجل التعامل مع التعبير عن الجينات الذاتية أو مُضافة خارج الرحم في الماوس نيوكورتيكس. وقد أحرز تقدم هام في الآونة الأخيرة من خلال تطبيق منهجية تحرير الجينوم CRISPR/Cas9 بوساطة عبر في الإلكتروبور في الفيرريكتيكس الماوس لأداء (1) اضطراب الجينات في الخلايا العصبية ما بعد الديمومتوية12,13 والخلايا السلف العصبي14, و (2) الجينوم15 و epigenome16 التحرير.
بعد وقت قصير جدا من التقرير الأول في الماوس، في كهربائي الرحم تم تطبيقها على الجرثان الجنينية17،18. ظلت غير القوارض تحديا حتى الأول في كهربائي الرحم من النمس, آكلة اللحوم الصغيرة, وذكرت في 201219,20. ومنذ ذلك الحين، في الكهربائي الرحمي من النمس وقد طبقت لدراسة آليات تطوير القشرة الجديدة من خلال وضع العلامات على السلف العصبية والخلايا العصبية20،21،22،23، التلاعب في التعبير عن الجينات الذاتية ، بما في ذلك استخدام CRISPR / Cas9 التكنولوجيا24، وتقديم الجينات خارج الرحم21،22،25، بما في ذلك الجينات البشريةالمحددة 26. وعلاوة على ذلك، في كهربائي الرحم من النمس وقد استخدمت لمعالجة ملامح التنمية في القشرة البشرية في الظروف المرضية27،28.
في سياق تطور القشرة الجديدة ، تعود مزايا استخدام النمس ككائن حي نموذجي مقارنة بالفئران إلى حقيقة أن النمس تُلخي بشكل أفضل سلسلة من الميزات الشبيهة بالبشر. على المستوى التشريحي، تظهر النمس نمطاً مميزًا للطي القشري، والذي هو موجود أيضًا في الإنسان ومعظم الرئيسيات الأخرى، ولكنه غائب تمامًا في الفئران أو الفئران4،29،30،31. على مستوى النسيج النمس اثنين من مناطق فرعية فرعية متميزة، ويشار إلى المناطق الفرعية البطينية الداخلية والخارجية (ISVZ وOSVZ، على التوالي)32،33، مفصولة طبقة الألياف الداخلية23. يتم أيضا تقاسم هذه الميزات مع الرئيسيات، بما في ذلك البشر، ولكن ليس مع الفئران34. وSSVZ وOSVZ في النمس والبشر هي المأهولة مع خلايا السلف العصبية وفيرة، في حين أن المنطقة دون البطينية (SVZ) من الفئران تحتوي فقط على السلف العصبية21،32،35،36. على المستوى الخلوي، تظهر النمس نسبة عالية من نوع فرعي من السلف العصبية المشار إليها باسم glia القاعدية أو الخارجية شعاعي (bRG أو oRG، على التوالي)، والتي تعتبر مفيدة للتوسع التطوري للcorcortex الثدييات34،37،38. bRG وبالتالي وفيرة للغاية في الجنينية النمس النمس النضر ، لكنها نادرة جدا في الماوس الجنيني35،36. وعلاوة على ذلك، يظهر bRG النمس التجانس المورفولوجية مماثلة لتلك التي من bRG الإنسان، متفوقة بكثير على الماوس bRG21. وأخيرا، على المستوى الجزيئي، وتطوير النمس القشرة الجديدة يظهر أنماط التعبير الجيني مشابهة جدا لتلك التي من العصر الجديد الإنسان الجنيني، والتي يفترض أن السيطرة على تطوير للطي القشرية، من بين أمور أخرى39.
الخصائص البيولوجية والجزيئية الخلية من bRG النمس جعلها تكاثرية للغاية، على غرار bRG الإنسان. وهذا يؤدي إلى زيادة إنتاج الخلايا العصبية وتطوير34neocortex موسعة ومعقدة للغاية . هذه الخصائص تجعل النمس كائنات نموذجية ممتازة لدراسة السمات الشبيهة بالبشر من التنمية القشرة الجديدة التي لا يمكن نمذجة في الفئران26،40. للاستفادة الكاملة من النمس ككائن حي نموذجي تم تطوير الطريقة المقدمة. وهو يتألف من كهربائي الرحم من الأجنة النمس E33 مع plasmid التعبير عن GFP (pGFP) تحت سيطرة المروج في كل مكان، CAG. ويمكن بعد ذلك تحليل الأجنة الكهربائية الجنينية أو بعد الولادة. من أجل تقليل عدد الحيوانات التي تم التضحية بها ، يتم تعقيم النمس الإناث (جيلس) عن طريق استئصال الرحم ويتم التبرع بها لاعتمادها كحيوانات أليفة. إذا تم حصاد الأجنة المستهدفة في مراحل جنينية ، يتم إجراء عملية جراحية ثانية وإزالة الأجنة عن طريق عملية قيصرية ، في حين أن الجيل يتم استئصال الرحم. إذا تم تحليل الأجنة المستهدفة في مراحل ما بعد الولادة ، يتم استئصال الجيل بعد فتومة الجراء أو التضحية بها. وبالتالي ، يتم تقديم بروتوكول لاستئصال الرحم من جيلس أيضا.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>1ml syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>309628</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 Vicryl suture</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>V392ZG</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aluminium spray</td>
			<td>cp-pharma</td>
			<td>98017</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amoxicilin+clavulanic acid (Synulox RTU)</td>
			<td>WDT</td>
			<td>6301</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cappilary holder</td>
			<td>WPI</td>
			<td>MPH6S12</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dexpanthenol Ointment solution</td>
			<td>Bayer</td>
			<td>6029009.00.00</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drape sheet 45x75cm</td>
			<td>Hartmann</td>
			<td>2513052</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrode Tweezer, platinum plated 5mm</td>
			<td>BTX</td>
			<td>45-0489</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electroporator</td>
			<td>BTX</td>
			<td>ECM830</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fast Green</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>F7258-25G</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ferret Mustela putorius furo</td>
			<td>Marshall</td>
			<td>NA</td>
			<td>Experimental organism</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fiber optic light source</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>KL1500LCD</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Allgaier instrumente</td>
			<td>08-033-130</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps 3C-SA</td>
			<td>Rubis Tech</td>
			<td>3C-SA</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps 55</td>
			<td>Dumostar</td>
			<td>11295-51</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps 5-SA</td>
			<td>Rubis Tech</td>
			<td>5-SA</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze swabs large</td>
			<td>Hartmann</td>
			<td>401723</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze swabs small</td>
			<td>Hartmann</td>
			<td>401721</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GFAP antibody</td>
			<td>Dako</td>
			<td>Z0334</td>
			<td>Antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GFP antibody</td>
			<td>Aves labs</td>
			<td>GFP1020</td>
			<td>Antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass cappilaries (Borosilicate glass with filament, OD:1.2mm, ID: 0.69mm, 10cm length)</td>
			<td>Sutter Instrument</td>
			<td>BF120-69-10</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>Bela-pharm</td>
			<td>K4011-02</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heat pad</td>
			<td>Hans Dinslage</td>
			<td>Sanitas SHK18</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iodine (Betadine solution 100 mg/ml)</td>
			<td>Meda</td>
			<td>997437</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isofluran</td>
			<td>CP</td>
			<td>21311</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Loading tips 20&#181;l</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>#5242 956.003</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metamizol</td>
			<td>WDT</td>
			<td>99012</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum dissecting scissors</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>BC600R</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipette puller</td>
			<td>Sutter Instrument</td>
			<td>Model P-97</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pCAGGS-GFP</td>
			<td>NA</td>
			<td>NA</td>
			<td>From Kalebic et al., eLife, 2018</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PCNA antibody</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>CBL407</td>
			<td>Antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pH3 antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab10543</td>
			<td>Antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>294200104</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shaver</td>
			<td>Braun</td>
			<td>EP100</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sox2 antibody</td>
			<td>R+D Systems</td>
			<td>AF2018</td>
			<td>Antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical clamp 13cm</td>
			<td>WDT</td>
			<td>27080</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical double spoon (Williger)</td>
			<td>WDT</td>
			<td>27232</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical drape</td>
			<td>WDT</td>
			<td>28800</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical scissors small</td>
			<td>FST</td>
			<td>14090-09</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suturing needle holder</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>BM149R</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tbr2 antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab23345</td>
			<td>Antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transfer pipette 3ml</td>
			<td>Fischer scientific</td>
			<td>13439108</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water bath</td>
			<td>Julabo</td>
			<td>TW2</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vivo targeting of neural progenitor cells in ferret neocortex by in utero electroporation

التلاعب في التعبير الجيني في الجسم الحي أثناء التطور الجنيني هو الطريقة المفضلة عند تحليل دور الجينات الفردية أثناء تطور الثدييات. في كهربائي الرحم هو تقنية رئيسية لتلاعب التعبير الجيني في الدماغ الثديي الجنيني في الجسم الحي. يتم تقديم بروتوكول لكهربية الرحم من القشرة الجديدة الجنينية من النمس، آكلة اللحوم الصغيرة، هنا. يتم استخدام النمس بشكل متزايد كنموذج لتطوير القشرة الجديدة ، لأن القشرة الجديدة يعرض سلسلة من الميزات التشريحية والهلوسية والخلوية والجزيئية الموجودة أيضًا في الرئيسيات البشرية وغير البشرية ، ولكنها غائبة في نماذج القوارض ، مثل الفئران أو الفئران. في الرحم الكهربائي تم تنفيذها في يوم الجنين (E) 33، مرحلة منتصف النشأة في النمس. في الإلكتروبور الرحمي يستهدف الخلايا السلف العصبية بطانة البطينين الجانبي للدماغ. أثناء تكوين الخلايا العصبية، هذه الخلايا السلف تؤدي إلى جميع أنواع الخلايا العصبية الأخرى. يُظهر هذا العمل النتائج والتحليلات التمثيلية في E37، ويوم ما بعد الولادة (P) 1، و P16، بما يعادل 4 و9 و24 يوماً بعد الحمل الكهربائي الرحمي، على التوالي. في المراحل السابقة، وذرية الخلايا المستهدفة يتكون أساسا من مختلف الأنواع الفرعية السلف العصبي، في حين أن في المراحل اللاحقة معظم الخلايا المسماة هي الخلايا العصبية ما بعد التورم. وهكذا، في كهربائي الرحم تمكن من دراسة تأثير التلاعب الجيني على السمات الخلوية والجزيئية لأنواع مختلفة من الخلايا العصبية. من خلال تأثيره على مجموعات الخلايا المختلفة، في القطب الرحمي يمكن أيضا أن تستخدم للتلاعب في الخصائص النسيجية والتشريحية من النمس القشرة الجديدة. الأهم من ذلك ، كل هذه الآثار حادة ويتم تنفيذها مع خصوصية اصمية يحددها المستخدم.

في الصعق الكهربائي الرحمي للنمس في E33 أدى إلى استهداف الخلايا السلف العصبية بطانة سطح البطين من القشرة الجديدة الجنينية (الشكل 1). وتسمى هذه الخلايا السلف apical وهي تكاثرية للغاية، مما يؤدي إلى جميع أنواع الخلايا الأخرى أثناء التنمية. عند التقسيم غير المتماثل، ولدت السلفة apica...

Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Targeting of Neural Progenitor Cells in Ferret Neocortex by In Utero Electroporation at JoVE.com

In Vivo Targeting of Neural Progenitor Cells in Ferret Neocortex by In Utero Electroporation

هنا هو بروتوكول لأداء التلاعب الجيني في الدماغ النمس الجنيني باستخدام في كهربائي الرحم. هذه الطريقة تسمح لاستهداف الخلايا السلف العصبي في القشرة العصبية في الجسم الحي.

في فيتفو استهداف الخلايا السلف العصبية في النمس نيوكورتكس من قبل في الكهربائية الرحمية

Manipulation of gene expression in vivo during embryonic development is the method of choice when analyzing the role of individual genes during mammalian ...

هذا البروتوكول يسمح لنا بإجراء التلاعب الجيني في الجسم الحي في نموذج حيواني رئيسي يسمح لنا بدراسة توسع وطى القشرة الجديدة النامية. الميزة الرئيسية لهذه الطريقة هي في استخدام خصوصية مكانية وزمنية عالية في استهداف الخلايا الجذعية العصبية التي هي نوع الخلية الرئيسية لتنمية الدماغ. قبل البدء في الإجراء، سحب الشعيرات الدموية الزجاجية على سحب ماصة صغيرة واستخدام ملقط لقطع الجزء من الشعرية لضبط قطر طرف شعري.في اليوم الجنيني 33، إضافة التركيز المناسب من الحمض النووي في برنامج تلفزيوني، تستكمل مع 0.1٪ الأخضر سريع مع خلط لطيف، ووضع 3 ساعة صيام، تخدير، نمس الإناث الحوامل على طاولة عملية مع وسادة الحرارة. تأكد من المستوى المناسب من التخش عن طريق لمس الجلد حول العين وقرص الجلد بين أصابع قدم الثاني والثالث أو الثالث والرابع لكلا الطرفين الخلفيين. يمكن أن يسبب ايزوفلوران آثار ضارة, بما في ذلك الغثيان والدوخة.عند التعامل مع ايزوفلوران في شكل سائل، واستخدام معدات الحماية. أثناء الجراحة، استخدم العبوات المناسبة لالتقاط الغاز. حقن الحيوان تحت الجلد مع المسكنات والمضادات الحيوية والجلوكوز، ووضع مرهم على عيون الحيوان.استخدام مقصات لحلاقة البطن، وتنظيف الجلد المكشوفة مع محلول الماء والصابون واليود. ثم جفف الجلد بمسحات الشاش وتطهيرها بالكحول واليود الدعك. في الإلكتروبور الرحمي، ضع ستارة معقمة على الحيوان واستخدم مشرطًا لعمل شق جلدي يبلغ طوله حوالي 5 سنتيمترات في ألبا linea.استخدام مقص لقطع من خلال طبقة العضلات ووضع مسحات الشاش حول موقع شق. الرطب الشاش مع برنامج تلفزيوني ووضع الرحم على مسحات. باستخدام ماصة مع طرف طويل، تحميل واحدة من الشعيرات الدموية الزجاجية المسحوبة مع 5 ميكرولترات من محلول الحمض النووي لكل جنين ليتم حقنه.إرفاق الشعيرية محملة إلى حامل وربط الجانب الآخر من حامل إلى أنبوب وساعة. حدد موقع رأس الجنين الأول ووضع مصدر ضوء الألياف البصرية بجوار الرأس. باستخدام القزحية المصطبغة كنقطة مرجعية ، اختراق الجلد والجمجمة والأنسجة الدماغية مع غيض من الشعرية الزجاجية واستخدام الأنابيب الفم لتسهيل تسليم 3-5 ميكرولترات من محلول الحقن في البطين من واحد من نصفي الكرة الدماغية.لأن الحل المحقون يحتوي على 0.1٪ أخضر سريع، فإن الحقنة الناجحة ستؤدي إلى تلطيخ أخضر داكن للبطين المحقون، والذي سيكون مرئيًا الآن كبنية على شكل كلية. بعد الحقن ، ضع أقطاب الملاقط على الرحم فوق رأس الجنين مع القطب الإيجابي فوق المنطقة التي سيتم استهدافها والقطب السلبي تحت المنطقة المحقونة. تعيين طول النبض من الأقطاب الكهربائية إلى 50 مللي ثانية، والجهد نبض إلى 100 فولت، وفترة النبض إلى ثانية واحدة، وعدد النبضات إلى خمسة.عندما تم تعيين كل من المعلمات، اضغط نبض"وإسقاط بسرعة عدة قطرات من برنامج تلفزيوني دافئ على الجنين الكهربائي. عندما تكون جميع الأجنة الكهربية ، عد الرحم إلى تجويف الصفاق واستخدم خياطة 4-0 لإغلاق طبقة العضلات مع البريتوني. أغلق الجلد بطريقة مماثلة وغطي الجرح برذاذ الألمنيوم.ثم إعادة الحيوان إلى قفصه مع مصدر الحرارة والمراقبة حتى إعادة شغل كامل. بعد أربعة أيام من الكهربة في اليوم الجنيني 37، معظم الخلايا المستهدفة وذريتها لا تزال في المناطق الجرثومية ونادرا ما لوحظت الخلايا أكثر بallyallyally داخل لوحة القشرية. يمكن فحص هوية السلف عن طريق الفلوروس المناعي لعلامات خلايا الدراجات ، مثل PCNA ، في حين يمكن عرض مجموعة فرعية من السلف الذين يخضعون للتصلب بواسطة علامات مثل فوسفو-هيستون 3.في اليوم التالي للولادة صفر، بعد ثمانية أيام من الصعق الكهربائي، انتشرت ذرية الخلايا المستهدفة إلى جميع الطبقات النسيجية. باستخدام مزيج من علامات عامل النسخ ، يمكن الكشف عن مجموعات مختلفة من السلف القاعدي. على سبيل المثال، Sox2 هو علامة على الخلايا السلف التكاثري، بما في ذلك glia شعاعي القاعدي.وتي مربع بروتين الدماغ 2 هو علامة على السلف القاعدية العصبية، والتي هي أساسا ذرية وسيطة. بحلول يوم ما بعد الولادة 16، توقف غالبية الخلايا المستهدفة عن الانقسام والتفريق إلى الخلايا العصبية والغليا، مع النمس بعد الولادة يوم 16 نيوكورتيكس عرض نمط طي مميزة. في كهربائي الرحم من الأجنة النمس هو وسيلة قوية للغاية لدراسة وظيفة الجينات.وقد سمح لنا بدراسة الجينات التي تورطت في توسع القشرة الجديدة في التطور، بما في ذلك الجينات البشرية الخاصة. وباستخدام هذه الطريقة القوية، تمكنا بالفعل من معرفة السمات الرئيسية لكيفية عمل التوسع التطوري للكورتكس الجديد البشري على الأرجح.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Combining Behavioral Endocrinology and Experimental Economics: Testosterone and Social Decision Making

الجمع بين السلوكية الغدد الصماء والاقتصاد التجريبي : التيستوستيرون والاجتماعي اتخاذ القرار

Behavioral endocrinological research in humans as well as in animals suggests that testosterone plays a key role in social interactions. Studies in ...

In utero Electroporation followed by Primary Neuronal Culture for Studying Gene Function in Subset of Cortical Neurons

In utero Electroporation followed by Primary Neuronal Culture for Studying Gene Function in Subset of Cortical Neurons

في الرحم بعد Electroporation للثقافة متعلق بالخلايا العصبية الأولية لدراسة وظائف الجينات في مجموعة فرعية من العصبونات القشرية

In vitro study of primary neuronal cultures allows for quantitative analyses of neurite outgrowth. In order to study how genetic alterations affect ...

Time-lapse Live Imaging of Clonally Related Neural Progenitor Cells in the Developing Zebrafish Forebrain

الوقت الفاصل بين التصوير حية من خلايا ذات صلة Clonally السلف العصبية في الدماغ المقدم اسماك الزرد النامية

Precise patterns of division, migration and differentiation of neural progenitor cells are crucial for proper brain development and function1,2. To ...

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

ترنسفكأيشن من خلايا الشبكية بواسطة الماوس العقدة في الجسم الحي Electroporation

The targeting and refinement of RGC projections to the midbrain is a popular and powerful model system for studying how precise patterns of neural ...

Live-cell Imaging of Sensory Organ Precursor Cells in Intact Drosophila Pupae

Live-cell Imaging of Sensory Organ Precursor Cells in Intact Drosophila Pupae

تعيش خلية التصوير الحسي للخلايا السليمة في الجهاز السلائف ذبابة الفاكهة شرانق

Since the discovery of Green Fluorescent Protein (GFP), there has been a revolutionary change in the use of live-cell imaging as a tool for understanding ...

Mouse in Utero Electroporation: Controlled Spatiotemporal Gene Transfection

Mouse in Utero Electroporation: Controlled Spatiotemporal Gene Transfection

فأر في الرحم Electroporation : الشواهد ترنسفكأيشن جين Spatiotemporal

In order to understand the function of genes expressed in specific region of the developing brain, including signaling molecules and axon guidance ...

Functional Neuroimaging Using Ultrasonic Blood-brain Barrier Disruption and Manganese-enhanced MRI

تصوير الأعصاب وظيفية عن طريق الموجات فوق الصوتية تعطيل حاجز الدم في الدماغ والتصوير بالرنين المغناطيسي المنغنيز معززة لل

Although mice are the dominant model system for studying the genetic and molecular underpinnings of neuroscience, functional neuroimaging in mice remains ...

Expansion of Embryonic and Adult Neural Stem Cells by In Utero Electroporation or Viral Stereotaxic Injection

Expansion of Embryonic and Adult Neural Stem Cells by In Utero Electroporation or Viral Stereotaxic Injection

توسيع الجنينية والكبار الخلايا الجذعية العصبية من قبل<em&gt; في الرحم</em&gt; الصعق الكهربائي أو حقن التجسيمي الفيروسية

Somatic stem cells can divide to generate additional stem cells (expansion) or more differentiated cell types (differentiation), which is fundamental for ...

Generation of Topically Transgenic Rats by In utero Electroporation and In vivo Bioluminescence Screening

Generation of Topically Transgenic Rats by In utero Electroporation and In vivo Bioluminescence Screening

جيل من الفئران المعدلة وراثيا من قبل موضعيا<em&gt; في الرحم</em&gt; التثقيب الكهربائي و<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; ضوء بارد الفرز

 In utero electroporation (IUE) is a technique which allows genetic modification of cells in the brain for investigating neuronal development. So far, the ...

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

متزامنة<em&gt; فيفو السابقين</em&gt; اختبار وظيفي اثنين من شبكية العين من قبل<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; نظام مخطط كهربية

An In vivo electroretinogram (ERG) signal is composed of several overlapping components originating from different retinal cell types, as well as noise ...