Name: in vivo targeting of neural progenitor cells in ferret neocortex by in utero electroporation
Uploaded: 2020-05-06T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Targeting of Neural Progenitor Cells in Ferret Neocortex by In Utero Electroporation at JoVE.com

Vi er taknemmelige for de tjenester og faciliteter max Planck Institute of Molecular Cell Biology and Genetics for den fremragende støtte, især hele holdet af Biomedical services (BMS) for den fremragende ment af fritter og J. Peychl og hans team af Light Mikroskopi Facility. Vi er især taknemmelige for Katrin Reppe og Anna Pfeffer fra BMS for ekstraordinær veterinær støtte og Lei Xing fra Huttner-gruppen for at hjælpe med ildeoperationer.

Alle forsøgsprocedurer blev gennemført efter aftale med den tyske dyrevelfærdslovgivning efter godkendelse fra Landesdirektion Sachsen (licenser TVV 2/2015 og TVV 21/2017).
1. Forberedelse til in utero elektroporation
<ol><li>Forbered DNA-blandingen. I denne protokol anvendes en endelig koncentration på 1 μg/μL pGFP. Opløs DNA i PBS og supplere med 0,1% Fast Green for at lette visualisering. Når den er forberedt, blandes DNA-blandingen ved at pipettere op og ned flere gange eller ved...

I livmoder elektroporation i ilder er en vigtig teknik, med fordele og ulemper med hensyn til andre metoder. Der er kritiske trin og begrænsninger for denne metode, samt potentielle ændringer og fremtidige applikationer til at huske på.
Siden det banebrydende arbejde Victor Borrell og kolleger om genetisk manipulation af postnatal ilder neocortex via elektroporation eller viral injektion35,42,43, i...

Den neocortex er det ydre ark af pattedyr cerebrum og sæde for højere kognitive funktioner1,,2,,3,,4,5. For at opnå en akut genetisk manipulation i pattedyr neocortex in vivo under embryonale udvikling, to forskellige metoder er blevet undersøgt: virusinfektion6 og i livmoderen elektroporation7. Begge metoder tillader effektiv målretning af neokortikale celler, men lider af nogle begrænsninger. Den største fordel ved in utero elektroporation i forhold til virusinfektion er evnen til at opnå rumlig specificitet inden for neocortex, som opnås ved at regulere retningen af det elektriske felt.
Da elektroporation først blev vist sig at lette indtræden af DNA i cellerne in vitro8, er det blevet anvendt til at levere DNA i forskellige hvirveldyr in vivo. I udviklingsmæssige neurovidenskab, i livmoderen elektroporation af musen neocortex blev først rapporteret i 20019,10. Denne metode består af en injektion af DNA-blandingen i den laterale hjertekammer af embryonale hjernen og efterfølgende anvendelse af det elektriske felt ved hjælp af pincet elektroder, som giver rumlig præcision7,11. I livmoderen elektroporation er siden blevet anvendt til at levere nukleinsyrer for at manipulere udtrykket af endogene eller ektopisk tilsat gener i musen neocortex. Der er for nylig gjort vigtige fremskridt ved at anvende metoden til CRISPR/Cas9-medieret genomredigering via in utero elektroporation i musens neocortex for at udføre (1) genafbrydelse i postmitotiske neuroner12,,13 og neurale progenitorceller14og (2) genom15 og epigenome16 redigering.
Meget snart efter den første rapport i mus, i livmoderen elektroporation blev anvendt på embryonale rotte neocortex17,18. Ikke-gnavere forblev en udfordring, indtil den første in utero elektroporation af fritter, en lille kødædende, blev rapporteret i 201219,20. Siden da er der i utero-elektroporation af fritter blevet anvendt til at undersøge mekanismerne i neocortexudvikling ved at mærke neurale forfædre og neuroner20,21,22,23, der manipulerer ekspressionen af endogene gener, herunder brugen af CRISPR/Cas9-teknologi24, og ved at levere ektopiske gener21,22,25, herunder humanspecifikke gener26. Desuden er der i utero-elektroporation af fritter blevet brugt til at håndtere funktioner i menneskets neocortexudvikling under patologiskeforhold 27,28.
I forbindelse med neocortex udvikling, fordelene ved at bruge fritter som en model organisme i forhold til mus skyldes det faktum, at fritter bedre opsummere en række menneskelignende funktioner. På det anatomiske niveau udviser fritter et karakteristisk mønster af kortikal foldning, som også er til stede i menneskelige og de fleste andre primater, men er helt fraværende hos mus eller rotter4,,29,30,31. På histologisk niveau fritter har to forskellige subventrikulære germinal zoner, benævnt de indre og ydre subventrikulære zoner (ISVZ og OSVZ, henholdsvis)32,33, adskilt af den indre fiber lag23. Disse funktioner deles også med primater, herunder mennesker, men ikke med mus34. ISVZ og OSVZ i fritter og mennesker er befolket med rigelige neurale progenitor celler, mens den subventricular zone (SVZ) af mus indeholder kun sparsomme neurale forfædre21,,32,35,36. På celleniveau udviser fritter en høj andel af en undertype af neurale progenitorer benævnt henholdsvis basale eller ydre radiale glia (bRG eller oRG), som anses for medvirkende til den evolutionære udvidelse af pattedyrets neocortex34,37,38. bRG er derfor meget rigelige i fosterets og embryonale ilder neocortex, men de er meget sjældne i embryonale mus neocortex35,36. Endvidere, fritte bRG viser morfologisk heterogenitet svarende til human bRG, langt bedre end mus bRG21. Endelig, på et molekylært niveau, udvikle ferret neocortex viser genekspression mønstre meget lig dem af føtale menneskelige neocortex, som formodes at kontrollere udviklingen af kortikale foldning, blandt andet39.
De cellebiologiske og molekylære egenskaber af ilder bRG gør dem meget prolifererende, svarende til humane bRG. Dette resulterer i en øget produktion af neuroner og udvikling af en udvidet og meget kompleks neocortex34. Disse egenskaber gør fritter fremragende model organismer til at studere menneskelignende træk ved neocortex udvikling, der ikke kan modelleres i mus26,40. For at drage fuld fordel af ilderen som modelorganisme blev den præsenterede metode udviklet. Den består af i utero elektroporation af E33 fritte embryoner med en plasmid udtrykke GFP (pGFP) under kontrol af en allestedsnærværende promotor, CAG. De elektroporerede embryoner kan derefter analyseres embryonisk eller postnatalt. For at reducere antallet af ofrede dyr, er hun fritter (jills) steriliseret af hysterektomi og doneret til vedtagelse som kæledyr. Hvis de målrettede embryoner høstes på embryonale stadier, en anden operation udføres, og embryonerne fjernes af en kejsersnit, mens jills er hysterectomized. Hvis de målrettede embryoner analyseres på postnatal stadier, jills er hysterectomized efter hvalpene er blevet vænnet eller ofret. Derfor er en protokol for hysterektomi af jills også præsenteret.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>1ml syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>309628</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 Vicryl suture</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>V392ZG</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aluminium spray</td>
			<td>cp-pharma</td>
			<td>98017</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amoxicilin+clavulanic acid (Synulox RTU)</td>
			<td>WDT</td>
			<td>6301</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cappilary holder</td>
			<td>WPI</td>
			<td>MPH6S12</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dexpanthenol Ointment solution</td>
			<td>Bayer</td>
			<td>6029009.00.00</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drape sheet 45x75cm</td>
			<td>Hartmann</td>
			<td>2513052</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrode Tweezer, platinum plated 5mm</td>
			<td>BTX</td>
			<td>45-0489</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electroporator</td>
			<td>BTX</td>
			<td>ECM830</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fast Green</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>F7258-25G</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ferret Mustela putorius furo</td>
			<td>Marshall</td>
			<td>NA</td>
			<td>Experimental organism</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fiber optic light source</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>KL1500LCD</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Allgaier instrumente</td>
			<td>08-033-130</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps 3C-SA</td>
			<td>Rubis Tech</td>
			<td>3C-SA</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps 55</td>
			<td>Dumostar</td>
			<td>11295-51</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps 5-SA</td>
			<td>Rubis Tech</td>
			<td>5-SA</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze swabs large</td>
			<td>Hartmann</td>
			<td>401723</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze swabs small</td>
			<td>Hartmann</td>
			<td>401721</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GFAP antibody</td>
			<td>Dako</td>
			<td>Z0334</td>
			<td>Antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GFP antibody</td>
			<td>Aves labs</td>
			<td>GFP1020</td>
			<td>Antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass cappilaries (Borosilicate glass with filament, OD:1.2mm, ID: 0.69mm, 10cm length)</td>
			<td>Sutter Instrument</td>
			<td>BF120-69-10</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>Bela-pharm</td>
			<td>K4011-02</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heat pad</td>
			<td>Hans Dinslage</td>
			<td>Sanitas SHK18</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iodine (Betadine solution 100 mg/ml)</td>
			<td>Meda</td>
			<td>997437</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isofluran</td>
			<td>CP</td>
			<td>21311</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Loading tips 20&#181;l</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>#5242 956.003</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metamizol</td>
			<td>WDT</td>
			<td>99012</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum dissecting scissors</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>BC600R</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipette puller</td>
			<td>Sutter Instrument</td>
			<td>Model P-97</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pCAGGS-GFP</td>
			<td>NA</td>
			<td>NA</td>
			<td>From Kalebic et al., eLife, 2018</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PCNA antibody</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>CBL407</td>
			<td>Antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pH3 antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab10543</td>
			<td>Antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>294200104</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shaver</td>
			<td>Braun</td>
			<td>EP100</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sox2 antibody</td>
			<td>R+D Systems</td>
			<td>AF2018</td>
			<td>Antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical clamp 13cm</td>
			<td>WDT</td>
			<td>27080</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical double spoon (Williger)</td>
			<td>WDT</td>
			<td>27232</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical drape</td>
			<td>WDT</td>
			<td>28800</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical scissors small</td>
			<td>FST</td>
			<td>14090-09</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suturing needle holder</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>BM149R</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tbr2 antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab23345</td>
			<td>Antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transfer pipette 3ml</td>
			<td>Fischer scientific</td>
			<td>13439108</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water bath</td>
			<td>Julabo</td>
			<td>TW2</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vivo targeting of neural progenitor cells in ferret neocortex by in utero electroporation

Manipulation af genekspression in vivo under embryonal udvikling er den foretrukne metode, når man analyserer de enkelte geners rolle under pattedyrs udvikling. I livmoderen elektroporation er en vigtig teknik til manipulation af genekspression i embryonale pattedyr hjernen in vivo. En protokol for in utero elektroporation af embryonale neocortex af fritter, en lille kødædende, præsenteres her. Ilderen bliver i stigende grad brugt som model for neocortex udvikling, fordi dens neocortex udviser en række anatomiske, histologiske, cellulære og molekylære træk, der også er til stede i menneskelige og ikke-menneskelige primater, men fraværende i gnavere modeller, såsom mus eller rotte. Ved utero elektroporation blev udført på embryonale dage (E) 33, en midneurogenesis fase i ilder. I livmoderen elektroporation mål neurale progenitor celler foring de laterale ventrikler i hjernen. Under neurogenese, disse stamcelleceller giver anledning til alle andre neurale celletyper. Dette værk viser repræsentative resultater og analyser på E37, postnatal dag (P) 1 og P16, svarende til henholdsvis 4, 9 og 24 dage efter in utero elektroporation. På tidligere stadier, afkommet af målrettede celler består hovedsageligt af forskellige neurale progenitor undertyper, mens der på senere stadier mest mærkede celler er postmitotiske neuroner. Således, i livmoderen elektroporation gør det muligt at studere effekten af genetisk manipulation på de cellulære og molekylære funktioner i forskellige typer af neurale celler. Gennem sin virkning på forskellige cellepopulationer, i livmoderen elektroporation kan også bruges til manipulation af histologiske og anatomiske træk ved ilder neocortex. Vigtigere, alle disse virkninger er akutte og udføres med en spatiotemporal specificitet bestemt af brugeren.

I livmoderelektæration af fritter ved E33 resulterede i målretning af de neurale progenitorceller foring ventrikulære overfladen af embryonale neocortex (Figur 1). Disse celler kaldes apikale forfædre og er meget proliferative, hvilket giver anledning til alle andre celletyper under udviklingen. Efter asymmetrisk opdeling genererede apikale progenitorer en anden apinisk stamfader og en mere differentieret celle, typisk en basal stamfader (BP), som delaminerede fra ventrikulær overflade....

Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Targeting of Neural Progenitor Cells in Ferret Neocortex by In Utero Electroporation at JoVE.com

In Vivo Targeting of Neural Progenitor Cells in Ferret Neocortex by In Utero Electroporation

Præsenteret her er en protokol til at udføre genetisk manipulation i embryonale ilder hjernen ved hjælp af i livmoderen elektroporation. Denne metode giver mulighed for målretning af neurale progenitor celler i neocortex in vivo.

I Vivo Målretning af neurale progenitor celler i Ferret Neocortex ved In Utero Electroporation

Manipulation of gene expression in vivo during embryonic development is the method of choice when analyzing the role of individual genes during mammalian ...

Denne protokol giver os mulighed for at udføre en genetisk manipulation in vivo i en vigtig dyremodel, der giver os mulighed for at studere udvidelse og foldning af en udviklende neocortex. Den største fordel ved denne metode er at bruge høj rumlig og tidsmæssig specificitet i at målrette de neurale stamceller, der er den vigtigste celletype for hjernens udvikling. Før proceduren påbegyndes, skal du trække glaskapillærer på en mikropipettetræker og bruge kraftbevilelser til at afskære den distale del af kapillæren for at justere kapillærspidsens diameter.På embryonal dag 33, tilsæt passende koncentration af DNA i PBS, suppleret med 0,1% Hurtig Grøn med blid blanding, og placere en 3-timers fastende, bedøvet, gravid kvindelig ilder på en operation bordet med en varmepude. Bekræft det passende niveau af sedation ved at røre den periokulære hud og klemme huden mellem den anden og tredje eller tredje og fjerde tæer af begge bagben. Isofluran kan forårsage bivirkninger, herunder kvalme og svimmelhed.Ved håndtering af isofluran i flydende form skal du bruge beskyttelsesudstyret. Under operationen, bruge passende beholdere til at fange gassen. Injicer dyret subkutende med smertestillende, antibiotikum og glukose, og placer salve på dyrets øjne.Brug klippere til at barbere maven, og rense den eksponerede hud med vand, sæbe og jod opløsning. Tør derefter huden med gazesvaberprøver og desinficere med alkohol og jod scrubs. For i livmoder elektroporation, placere en steril drapere over dyret og bruge en skalpel til at gøre en ca 5-centimeter hud snit på linea alba.Brug saks til at skære gennem muskellaget og placere gaze svaberprøver omkring indsnit site. Våd gaze med PBS og placere livmoderen på podning. Ved hjælp af en pipette med en lang spids, belastning en af de trak glas kapillærer med 5 mikroliter af DNA-opløsning pr embryo, der skal injiceres.Fastgør den indlæste kapillær til en holder og tilslut den anden side af holderen til et rør og et mundstykke. Find hovedet af det første foster og placere en fiberoptisk lyskilde ved siden af hovedet. Brug pigmenteret iris som referencepunkt, trænge ind i huden, kraniet, og cerebrale væv med spidsen af glasset kapillær og bruge munden pipettering at lette leveringen af 3-5 mikroliter af injektionsopløsningen i hjertekammer af en af de cerebrale halvkugler.Fordi den injicerede opløsning indeholder 0,1% Fast Green, en vellykket injektion vil resultere i en mørk grøn farvning af den injicerede hjertekammer, som nu vil være synlig som en nyre-formet struktur. Efter injektionen skal pincetelektroderne på livmoderen over embryonets hoved med den positive pol over det område, der skal målrettes, og den negative pol under det injicerede område. Indstil pulslængden på elektroporatet til 50 millisekunder, pulsspændingen til 100 volt, pulsintervallet til et sekund og antallet af impulser til fem.Når alle parametrene er indstillet, skal du trykke på Pulse"og hurtigt tabe flere dråber varm PBS på det elektroporerede embryo. Når alle embryoner er blevet elektroporeret, returnere livmoderen til bughulen og bruge en 4-0 sutur til at lukke muskellaget med bughinden. Luk huden på samme måde og dække såret med aluminium spray.Derefter returnere dyret til sit bur med en varmekilde og overvågning, indtil fuld recumbency. Fire dage efter elektroporation på embryonal dag 37, de fleste af de målrettede celler og deres afkom er stadig i de spirende zoner og cellerne er sjældent observeret yderligere basalt i kortikale plade. Stamfaderidentiteten kan undersøges ved immunfluorest for markører for cykelceller, såsom PCNA, mens en undergruppe af stamfader, der gennemgår mitose, kan vises ved hjælp af markører som fosfor-histon 3.På postnatal dag nul, otte dage efter elektroporation, afkom af de målrettede celler spredt sig til alle de histologiske lag. Ved hjælp af en kombination af transskriptionsfaktor markører, forskellige basal stamfader populationer kan afsløres. For eksempel, Sox2 er en markør for proliferative progenitor celler, herunder basal radial glia.Og T-box hjerneprotein 2 er en markør for neurogene basale forfædre, som hovedsageligt er mellemliggende forfædre. Ved postnatal dag 16, et flertal af de målrettede celler stoppe dividere og differentiere i neuroner og glia, med ilder postnatal dag 16 neocortex udviser den karakteristiske folde mønster. Inutero elektroporation af ilder embryoner er en ekstremt kraftfuld metode til at studere funktionen af gener.Det har givet os mulighed for at studere gener, der har været involveret i udvidelsen af neocortex i evolution, herunder menneskespecifikke gener. Og ved hjælp af denne kraftfulde metode, har vi faktisk været i stand til at finde ud af de vigtigste elementer i, hvordan den evolutionære udvidelse af den menneskelige neocortex sandsynligvis arbejdede.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Combining Behavioral Endocrinology and Experimental Economics: Testosterone and Social Decision Making

Behavioral endocrinological research in humans as well as in animals suggests that testosterone plays a key role in social interactions. Studies in ...

In utero Electroporation followed by Primary Neuronal Culture for Studying Gene Function in Subset of Cortical Neurons

In utero Electroporation followed by Primary Neuronal Culture for Studying Gene Function in Subset of Cortical Neurons

In vitro study of primary neuronal cultures allows for quantitative analyses of neurite outgrowth. In order to study how genetic alterations affect ...

Time-lapse Live Imaging of Clonally Related Neural Progenitor Cells in the Developing Zebrafish Forebrain

Precise patterns of division, migration and differentiation of neural progenitor cells are crucial for proper brain development and function1,2. To ...

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

The targeting and refinement of RGC projections to the midbrain is a popular and powerful model system for studying how precise patterns of neural ...

Live-cell Imaging of Sensory Organ Precursor Cells in Intact Drosophila Pupae

Live-cell Imaging of Sensory Organ Precursor Cells in Intact Drosophila Pupae

Since the discovery of Green Fluorescent Protein (GFP), there has been a revolutionary change in the use of live-cell imaging as a tool for understanding ...

Mouse in Utero Electroporation: Controlled Spatiotemporal Gene Transfection

Mouse in Utero Electroporation: Controlled Spatiotemporal Gene Transfection

In order to understand the function of genes expressed in specific region of the developing brain, including signaling molecules and axon guidance ...

Functional Neuroimaging Using Ultrasonic Blood-brain Barrier Disruption and Manganese-enhanced MRI

Funktionel Neuroimaging Med Ultrasonic blod-hjerne barrieren forstyrrelser og mangan-forstærket MRI

Although mice are the dominant model system for studying the genetic and molecular underpinnings of neuroscience, functional neuroimaging in mice remains ...

Expansion of Embryonic and Adult Neural Stem Cells by In Utero Electroporation or Viral Stereotaxic Injection

Expansion of Embryonic and Adult Neural Stem Cells by In Utero Electroporation or Viral Stereotaxic Injection

Ekspansion af embryoniske og voksne neurale stamceller ved<em&gt; In Utero</em&gt; Elektroporering eller viral stereotaktisk injektion

Somatic stem cells can divide to generate additional stem cells (expansion) or more differentiated cell types (differentiation), which is fundamental for ...

Generation of Topically Transgenic Rats by In utero Electroporation and In vivo Bioluminescence Screening

Generation of Topically Transgenic Rats by In utero Electroporation and In vivo Bioluminescence Screening

Generering af Topisk Transgene rotter ved<em&gt; In Utero</em&gt; Elektroporation og<em&gt; In vivo</em&gt; Bioluminescens Screening

 In utero electroporation (IUE) is a technique which allows genetic modification of cells in the brain for investigating neuronal development. So far, the ...

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

Samtidige<em&gt; Ex vivo</em&gt; Functional Test af to nethinder af<em&gt; In vivo</em&gt; Elektroretinogrammet System

An In vivo electroretinogram (ERG) signal is composed of several overlapping components originating from different retinal cell types, as well as noise ...