Name: in vivo targeting of neural progenitor cells in ferret neocortex by in utero electroporation
Uploaded: 2020-05-06T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Targeting of Neural Progenitor Cells in Ferret Neocortex by In Utero Electroporation at JoVE.com

우리는 페렛과 J. Peychl및 빛 현미경 시설의 그의 팀을 위해 생물 의학 서비스 (BMS)의 전체 팀을 제공하는 뛰어난 지원을 위한 분자 세포 생물학 및 유전학의 막스 플랑크 연구소의 서비스 및 시설에 감사드립니다. 우리는 특히 뛰어난 수의학 지원에 대한 BMS에서 카트린 Reppe와 안나 Pfeffer와 페렛 수술을 지원하기위한 헛너 그룹에서 레이 Xing에 감사드립니다.

모든 실험 절차는 Landesdirektion Sachsen (라이센스 TVV 2/2015 및 TVV 21/2017)의 승인 후 독일 동물 복지 법규와 합의하여 수행되었습니다.
1. 자궁 전기 기화 준비
<ol><li>DNA 혼합물을 준비합니다. 이 프로토콜에서 pGFP의 1 μg/μL의 최종 농도가 사용된다. PBS에 DNA를 용해하고 시각화를 용이하게하기 위해 0.1 % 빠른 녹색으로 보충하십시오. 일단 준비되면, 위아래로 여러 번 피펫또는 손가?...

페렛의 자궁 전기포화는 다른 방법에 대하여 장점과 단점을 갖는 중요한 기술이다. 이 방법에는 중요한 단계와 제한사항뿐만 아니라 잠재적 수정 및 향후 응용 프로그램을 염두에 두어야 합니다.
전기기또는,바이러스주사(35,42, 43)를통해 산후 페렛 신생아의 유전자 조작에 대한 빅터 보렐과 동료들의 선구적인 작업 이후, 페렛은 유...

신피질은 포유류 뇌의 외부 시트와 더 높은 인지 기능1,,2,,3,,4,,5의시트이다. 배아 발달 중 생체 내에서 포유류 신피질에서 급성 유전적 조작을 달성하기 위해 바이러스 감염6 및 자궁전기기전7의두 가지 방법이 탐구되었다. 두 방법 모두 신구 세포의 효율적인 타겟팅을 허용하지만 몇 가지 제한으로 고통받습니다. 바이러스 감염에 비해 자궁 전기 포기의 주요 장점은 전기장의 방향을 조절하여 달성되는 신피질 내의 공간 특이성을 달성 할 수있는 능력입니다.
전기기는 시험관내 8에서세포로 DNA의 입력을 용이하게 하기 위해 처음 표시되었기 때문에, 생체 내에서 다양한 척추동물로 DNA를 전달하기 위해 적용되었다. 발달 신경과학에서, 마우스 신피질의 자궁 전기포기에서 2001년9,,10에서처음 보고되었다. 이 방법은 배아 뇌의 측면 심실에 DNA 혼합물을 주입하고 공간 정밀도7,,11을허용하는 트위저 전극을 사용하여 전기장의 후속 적용으로 구성된다. 자궁에서 전기화는 마우스 신피질에 내인성 또는 외토적으로 추가된 유전자의 발현을 조작하기 위해 핵산을 전달하기 위해 적용되었다. 중요한 진전은 최근에 마우스 신피질에서 자궁 전기화에서 CRISPR/Cas9 매개 게놈 편집의 방법론을 적용하여 (1) 후미토성뉴런(12,,13 및 신경 전구 세포14)및 (2) 게놈15 및 후성 유전체16 편집에서 유전자 중단을 수행하였다.
마우스에서 첫 번째 보고 후 곧, 자궁 에서 전기기화배쥐신피질(17,18)에18적용되었다. 비 설치류는 2012년19일,20일,20일, 작은 육식신페레의 자궁 전기기화에서 최초로 보고되기 전까지는어려움을유지했다. 그,이후, 페렛의 자궁 전기포기는 신경 전구및 뉴런(20,21,,22,,23)을라벨링하여 신피질 개발의 메커니즘을 연구하기 위해 적용되었으며, CRISPR/Cas9기술(24)의사용을 포함한 내인성 유전자의 발현을 조작하고, 자궁 내피유전자(21,22, 25)및 자궁내피유전자 를2121,22,25,인간 유전자를 전달함으로써26.26 더욱이, 페렛의 자궁 전기포공은 병리학적조건(27,,28)에서인간 신피질 발달의 특징을 해결하기 위해 사용되어 왔다.
신피질 발달의 맥락에서, 페렛을 마우스에 비해 모델 유기체로 사용하는 장점은 페렛이 인간과 같은 일련의 특징을 더 잘 재구성하기 때문입니다. 해부학 적 수준에서, 페렛은 인간및 대부분의 다른 영장류에도 존재하지만, 쥐 또는쥐에완전히 결석피질 접이식의 특징적인 패턴을 나타낸다4,29,,30,,31. 조직학적 수준에서 페렛은 내부 및 외부 지하 영역(ISVZ 및 OSVZ)으로 지칭되는 두 개의 뚜렷한 심실 발아 영역을 가지며,32,,33,내부섬유층(23)에의해 분리된다. 이러한 특징은 또한 인간을 포함하여 영장류와 공유되지만 마우스(34)는공유되지 않습니다. 페렛과 인간에서 ISVZ와 OSVZ는 풍부한 신경 전구 세포로 채워지며, 마우스의 하위 원반 영역 (SVZ)은 스파스 신경전구만 포함하는반면,32,,35,,36. 세포 수준에서, 페렛은,포유류 신피질34,,37,38의진화적 확장을 위한 도구로 간주되는 기저 또는 외부 방사형 glia(bRG 또는 oRG)라고 불리는 신경 전구체의 하위 형의 높은 비율을 나타낸다. bRG는 태아 인간 및 배아 페렛 신피질에서 이렇게 높게 풍부하지만 배아 마우스신피질(35,,36)에서는매우 드물다. 더욱이, 페렛 bRG는 마우스bRG(21)보다훨씬 우수한 인간 bRG와 유사한 형태학적 이질성을 나타낸다. 마지막으로, 분자 수준에서, 페렛 네오피질개발은 피질 접이식의 발달을 조절할 것으로 추정되는 태아 인간 신피질의 유전자 발현 패턴을 매우 유사하다는 것을나타낸다( 39).
페렛 bRG의 세포 생물학적 및 분자 특성은 인간 bRG와 유사한 매우 증식성 렌더링합니다. 이것은 확장되고 매우 복잡한 신피질34의뉴런 생산 및 개발의 증가 생산 결과. 이러한 특성은 페렛이마우스(26,,40)에서모델링할 수 없는 신피질 발달의 인간과 같은 특징을 연구하기 위한 우수한 모델 유기체를 만든다. 페렛을 모델 유기체로서 최대한 활용하기 위해 제시된 방법이 개발되었다. 그것은 유비쿼터스 프로모터, CAG의 통제하에 GFP (pGFP)를 표현하는 플라스미드를 가진 E33 페렛 배아의 자궁 전기화로 이루어져 있습니다. 전극배는 배아 또는 후산적으로 분석될 수 있다. 희생된 동물의 수를 줄이기 위해 여성 페렛(질)은 자군 절제술에 의해 살균되어 애완동물로 입양하도록 기부됩니다. 표적 배아가 배아 단계에서 수확되는 경우, 두 번째 수술이 수행되고 태아는 제왕 절개에 의해 제거되는 반면 질은 히스테리화됩니다. 표적 배아가 산후 단계에서 분석되는 경우, 새끼가 짜거나 희생된 후 질은 히스테리화됩니다. 따라서, 질의 자군 절제술에 대한 프로토콜도 제시된다.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>1ml syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>309628</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 Vicryl suture</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>V392ZG</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aluminium spray</td>
			<td>cp-pharma</td>
			<td>98017</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amoxicilin+clavulanic acid (Synulox RTU)</td>
			<td>WDT</td>
			<td>6301</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cappilary holder</td>
			<td>WPI</td>
			<td>MPH6S12</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dexpanthenol Ointment solution</td>
			<td>Bayer</td>
			<td>6029009.00.00</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drape sheet 45x75cm</td>
			<td>Hartmann</td>
			<td>2513052</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrode Tweezer, platinum plated 5mm</td>
			<td>BTX</td>
			<td>45-0489</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electroporator</td>
			<td>BTX</td>
			<td>ECM830</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fast Green</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>F7258-25G</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ferret Mustela putorius furo</td>
			<td>Marshall</td>
			<td>NA</td>
			<td>Experimental organism</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fiber optic light source</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>KL1500LCD</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Allgaier instrumente</td>
			<td>08-033-130</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps 3C-SA</td>
			<td>Rubis Tech</td>
			<td>3C-SA</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps 55</td>
			<td>Dumostar</td>
			<td>11295-51</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps 5-SA</td>
			<td>Rubis Tech</td>
			<td>5-SA</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze swabs large</td>
			<td>Hartmann</td>
			<td>401723</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze swabs small</td>
			<td>Hartmann</td>
			<td>401721</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GFAP antibody</td>
			<td>Dako</td>
			<td>Z0334</td>
			<td>Antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GFP antibody</td>
			<td>Aves labs</td>
			<td>GFP1020</td>
			<td>Antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass cappilaries (Borosilicate glass with filament, OD:1.2mm, ID: 0.69mm, 10cm length)</td>
			<td>Sutter Instrument</td>
			<td>BF120-69-10</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>Bela-pharm</td>
			<td>K4011-02</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heat pad</td>
			<td>Hans Dinslage</td>
			<td>Sanitas SHK18</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iodine (Betadine solution 100 mg/ml)</td>
			<td>Meda</td>
			<td>997437</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isofluran</td>
			<td>CP</td>
			<td>21311</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Loading tips 20&#181;l</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>#5242 956.003</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metamizol</td>
			<td>WDT</td>
			<td>99012</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum dissecting scissors</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>BC600R</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipette puller</td>
			<td>Sutter Instrument</td>
			<td>Model P-97</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pCAGGS-GFP</td>
			<td>NA</td>
			<td>NA</td>
			<td>From Kalebic et al., eLife, 2018</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PCNA antibody</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>CBL407</td>
			<td>Antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pH3 antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab10543</td>
			<td>Antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>294200104</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shaver</td>
			<td>Braun</td>
			<td>EP100</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sox2 antibody</td>
			<td>R+D Systems</td>
			<td>AF2018</td>
			<td>Antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical clamp 13cm</td>
			<td>WDT</td>
			<td>27080</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical double spoon (Williger)</td>
			<td>WDT</td>
			<td>27232</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical drape</td>
			<td>WDT</td>
			<td>28800</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical scissors small</td>
			<td>FST</td>
			<td>14090-09</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suturing needle holder</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>BM149R</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tbr2 antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab23345</td>
			<td>Antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transfer pipette 3ml</td>
			<td>Fischer scientific</td>
			<td>13439108</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water bath</td>
			<td>Julabo</td>
			<td>TW2</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vivo targeting of neural progenitor cells in ferret neocortex by in utero electroporation

배아 발달 중 생체 내에서 유전자 발현의 조작은 포유류 발달 중 개별 유전자의 역할을 분석할 때 선택하는 방법입니다. 자궁에서 전기화는 생체 내에서 배아 포유류 뇌에서 유전자 발현의 조작을 위한 핵심 기술이다. 페렛의 배아 신피질의 자궁 전포화, 작은 육식 생물에 대한 프로토콜이 여기에 제시된다. 페렛은 신피질 발달을 위한 모델로 점점 더 이용되고 있습니다, 그것의 신피질은 인간과 비인간적인 영장류에 또한 존재하는 해부학, 조직학, 세포 및 분자 특징의 시리즈를 전시하기 때문에, 마우스 또는 쥐와 같은 설치류 모형에 없습니다. 자궁에서 전기기는 배아일(E) 33, 페렛의 중증 신경 발생 단계에서 수행되었다. 자궁 전기기는 뇌의 측면 심실을 안감 신경 전구 세포를 대상으로합니다. 신경 발생 하는 동안, 이러한 전조 세포 다른 모든 신경 세포 유형을 발생. 본 작품은 E37, 산후일(P) 1 및 P16에서 의대표적인 결과 및 분석을 나타내며, 자궁 전기기화에서 각각 4, 9, 24일에 대응하는 것을 나타낸다. 초기 단계에서, 표적으로 한 세포의 자손은 각종 신경 선조 아형의 주로 이루어져 있는 반면, 나중에 대부분의 표지된 세포는 포스트 미토틱 뉴런입니다. 따라서, 자궁 에서 전기화는 다양한 유형의 신경 세포의 세포 및 분자 특징에 대한 유전 조작의 효과에 대한 연구를 가능하게한다. 다양한 세포 집단에 미치는 영향을 통해 자궁 전기 기화에서도 페렛 신피질의 조직학적 및 해부학적 특징을 조작하는 데 사용할 수 있습니다. 중요 한 것은, 이러한 모든 효과 급성 및 사용자에 의해 결정 된 지 각 측성 특이성으로 수행.

E33에서 페렛의 자궁 전기포공에서 배아 네오피질의 심실 표면을 일렬로 세우는 신경 전구 세포의 표적화(도1). 이 세포는 apical 선조에게 불리고 발달 도중 그밖 모든 세포 모형을 초래하는 높게 증식합니다. 비대칭 분열시, apical 전구는 또 다른 정포 선조와 더 분화된 세포, 일반적으로 심실 표면에서 분리된 기저 선조(BP)를 생성했습니다. BP는 보조 발아 영역인 SVZ로 마이그?...

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In Vivo Targeting of Neural Progenitor Cells in Ferret Neocortex by In Utero Electroporation

여기에 제시된 자궁 전기화에서 사용하는 배아 페렛 뇌에서 유전자 조작을 수행하는 프로토콜이 있다. 이 방법은 생체 내의 신피질에서 신경 전구 세포를 표적으로 하는 것을 허용합니다.

자궁 에서 뇌포화에 의해 페렛 신피질에서 신경 전구 세포의 생체 포팅

Manipulation of gene expression in vivo during embryonic development is the method of choice when analyzing the role of individual genes during mammalian ...

이 프로토콜은 우리가 개발 중인 신피질의 확장 및 접이식을 연구할 수 있는 중요한 동물 모형에 있는 생체내 유전 조작을 능력을 발휘할 수 있게 합니다. 이 방법의 주요 장점은 뇌 발달을위한 핵심 세포 유형인 신경 줄기 세포를 대상으로 높은 공간 및 현세적 특이성을 사용하는 것입니다. 절차를 시작하기 전에, 마이크로 파이펫 풀러에 유리 모세 혈관을 당기고 모세관팁의 직경을 조정하기 위해 모세관의 탈부분을 잘라 집게를 사용합니다.배아 당일 33일에는 PBS에서 DNA의 적절한 농도를 추가하여 부드러운 혼합으로 0.1%의 패스트 그린을 보충하고, 3시간 금식, 마취, 임신한 여성 페렛을 열패드가 있는 수술 대에 놓습니다. 관동맥 피부를 만지고 두 번째와 세 번째 또는 세 번째 및 네 번째 발가락 사이의 피부를 꼬집어 두 뒷사지의 적절한 수준의 침전을 확인하십시오. 이소플루란은 메스꺼움과 현기증을 포함한 부작용을 일으킬 수 있습니다.액체 형태로 이소플루란을 취급할 때는 보호 장비를 사용하십시오. 수술 중에 적절한 캐니스터를 사용하여 가스를 포획하십시오. 진통제, 항생제 및 포도당으로 동물을 피하시키고 동물의 눈에 연고를 놓습니다.클리퍼를 사용하여 복부를 면도하고 노출 된 피부를 물, 비누 및 요오드 용액으로 청소하십시오. 그런 다음 거즈 면봉으로 피부를 건조시키고 알코올과 요오드 스크럽으로 소독하십시오. 자궁 전기포이션의 경우, 동물 위에 멸균 드레이프를 놓고 메스를 사용하여 리나 알바에서 약 5센티미터의 피부 절개를 합니다.가위를 사용하여 근육 층을 잘라 절개 부위 주위에 거즈 면봉을 놓습니다. 거즈를 PBS로 적시고 자궁을 면봉에 놓습니다. 긴 팁이 있는 파이펫을 사용하여, 주입될 태아 당 DNA 용액 5 마이크로리터를 가진 당겨진 유리 모세혈관 중 하나를 적재한다.로드된 모세관을 홀더에 부착하고 홀더의 다른 면을 튜브와 마우스피스에 연결합니다. 첫 번째 배아의 머리를 찾아 머리 옆에 광섬유 광원을 놓습니다. 안료 홍채를 기준점으로 사용하여, 유리 모세관의 끝으로 피부, 두개골 및 뇌 조직을 관통하고 구강 파이프팅을 사용하여 주사 용액의 3-5 마이크로리터를 대뇌 반구 중 하나의 심실로 전달합니다.주입된 용액에는 0.1%의 빠른 녹색이 포함되어 있기 때문에 성공적인 주사로 인해 주입된 심실의 짙은 녹색 얼룩이 발생하여 이제 신장 모양구조로 볼 수 있습니다. 주사 후, 주사 부위 아래에 표적화될 영역 위에 양성 극을 가진 배아의 머리 위에 자궁위에 트위저 전극을 놓는다. 전극의 펄스 길이를 50밀리초로 설정하고, 펄스 전압을 100볼트로, 펄스 간격을 1초로, 펄스 수를 5초로 설정합니다.모든 매개 변수가 설정되면 Pulse를 누르고 따뜻한 PBS 를 전자화 배아에 여러 방울 빠르게 떨어 뜨립니다. 모든 배아가 전소되면 자궁을 복막 구멍으로 돌려보내 4-0 봉합사를 사용하여 복막으로 근육 층을 닫습니다. 비슷한 방식으로 피부를 닫고 알루미늄 스프레이로 상처를 덮습니다.그런 다음 동물을 열원으로 케이지로 돌려보내고 완전한 재수질까지 모니터링합니다. 배아 일 37에서 전기 화 후 4 일, 표적 된 세포와 그들의 자손의 대부분은 여전히 발아 영역에 있으며 세포는 피질 플레이트 내에서 더 유저로 더 관찰되지 않습니다. 전구 체형은 PCNA와 같은 사이클링 세포의 마커에 대한 면역 불면에 의해 검사될 수 있지만, 미토시스를 겪고 있는 전조의 하위 집합은 인-히스톤 3와 같은 마커에 의해 표시될 수 있다.산후 날 0에서, 전기 기화 후 8 일, 표적 세포의 자손은 모든 조직학적 층으로 확산. 전사 인자 마커의 조합을 사용하여, 다른 기저 전구 체 집단이 드러날 수 있다. 예를 들어, Sox2는 기저 방사형 신경교를 포함하는 증식 선조 세포의 마커입니다.그리고 T 박스 뇌 단백질 2 신경 질 기저 선조의 마커, 주로 중간 선조. 산후 날(16)에 의해, 표적 세포의 대다수는 세포와 glia로 분할하고 분화하는 것을 중단하고, 페렛 산후 날 16 의 특징적인 접이식 패턴을 전시하는 신피질. 페렛 배아의 자궁 전기화는 유전자의 기능을 연구하는 매우 강력한 방법입니다.그것은 우리가 인간 특정 유전자를 포함하여 진화에 있는 신피질의 확장에 연루된 유전자를 공부하는 것을 허용했습니다. 그리고 이 강력한 방법을 사용하여, 우리는 실제로 인간 신피질의 진화확장이 어떻게 작동했는지에 대한 주요 특징을 알아낼 수 있었습니다.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Combining Behavioral Endocrinology and Experimental Economics: Testosterone and Social Decision Making

행동 내분비학 및 실험 경제학을 결합 : 테스토 스 테론과 사회 의사 결정

Behavioral endocrinological research in humans as well as in animals suggests that testosterone plays a key role in social interactions. Studies in ...

연구

신경과학

In utero Electroporation followed by Primary Neuronal Culture for Studying Gene Function in Subset of Cortical Neurons

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utero에서 Electroporation은 두피 뉴런의 하위 집합의 유전자 기능을 학습에 대한 기본의 연결을 문화 뒤에

In vitro study of primary neuronal cultures allows for quantitative analyses of neurite outgrowth. In order to study how genetic alterations affect ...

Time-lapse Live Imaging of Clonally Related Neural Progenitor Cells in the Developing Zebrafish Forebrain

개발 Zebrafish Forebrain에 Clonally 관련 신경 전구 세포의 시간 경과 라이브 영상

Precise patterns of division, migration and differentiation of neural progenitor cells are crucial for proper brain development and function1,2. To ...

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

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마우스 망막 신경절 세포 Transfection로 생체내에 Electroporation

The targeting and refinement of RGC projections to the midbrain is a popular and powerful model system for studying how precise patterns of neural ...

Live-cell Imaging of Sensory Organ Precursor Cells in Intact Drosophila Pupae

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손상의 감각 오르간 전구체 세포 라이브 셀 이미징 Drosophila Pupae

Since the discovery of Green Fluorescent Protein (GFP), there has been a revolutionary change in the use of live-cell imaging as a tool for understanding ...

Mouse in Utero Electroporation: Controlled Spatiotemporal Gene Transfection

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마우스 Utero에 Electroporation : 통제 Spatiotemporal 진 Transfection

In order to understand the function of genes expressed in specific region of the developing brain, including signaling molecules and axon guidance ...

Functional Neuroimaging Using Ultrasonic Blood-brain Barrier Disruption and Manganese-enhanced MRI

초음파 혈액 - 뇌 장벽 파괴 및 망간 향상된 MRI를 사용하여 기능성 Neuroimaging

Although mice are the dominant model system for studying the genetic and molecular underpinnings of neuroscience, functional neuroimaging in mice remains ...

Expansion of Embryonic and Adult Neural Stem Cells by In Utero Electroporation or Viral Stereotaxic Injection

Expansion of Embryonic and Adult Neural Stem Cells by In Utero Electroporation or Viral Stereotaxic Injection

의 배아와 성인 신경 줄기 세포의 확장<em&gt; 자궁에</em&gt; Electroporation 또는 바이러스 성 Stereotaxic 주입

Somatic stem cells can divide to generate additional stem cells (expansion) or more differentiated cell types (differentiation), which is fundamental for ...

Generation of Topically Transgenic Rats by In utero Electroporation and In vivo Bioluminescence Screening

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몸에 붙이기 형질 전환 쥐의 발생에 의해<em&gt; 자궁 내</em&gt; 일렉트로 및<em&gt; 생체 내</em&gt; 생물 발광 상영

 In utero electroporation (IUE) is a technique which allows genetic modification of cells in the brain for investigating neuronal development. So far, the ...

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

동시<em&gt; 생체</em두 망막의&gt; 기능 테스트로<em&gt; 생체</em&gt; 전위도 시스템

An In vivo electroretinogram (ERG) signal is composed of several overlapping components originating from different retinal cell types, as well as noise ...