Name: in vivo targeting of neural progenitor cells in ferret neocortex by in utero electroporation
Uploaded: 2020-05-06T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Targeting of Neural Progenitor Cells in Ferret Neocortex by In Utero Electroporation at JoVE.com

Vi er takknemlige for tjenestene og fasilitetene til Max Planck Institute of Molecular Cell Biology and Genetics for den enestående støtten som tilbys, spesielt hele teamet av Biomedical services (BMS) for det utmerkede husdyrholdet til ildere og J. Peychl og hans team av Light Microscopy Facility. Vi er spesielt takknemlige til Katrin Reppe og Anna Pfeffer fra BMS for eksepsjonell veterinærstøtte og Lei Xing fra Huttner-gruppen for å bistå med ilderoperasjoner.

Alle eksperimentelle prosedyrer ble utført i samsvar med den tyske dyrevelferdslovgivningen etter godkjenning av Landesdirektion Sachsen (lisenser TVV 2/2015 og TVV 21/2017).
1. Forberedelse til in utero elektroporasjon
<ol><li>Forbered DNA-blandingen. I denne protokollen brukes en endelig konsentrasjon på 1 μg/μL pGFP. Oppløs DNA i PBS og supplere med 0,1% Fast Green for å lette visualiseringen. Når den er klargjort, bland DNA-blandingen ved å pipering opp og ned flere ganger eller ...

In utero elektroporasjon i ilder er en viktig teknikk, med fordeler og ulemper med hensyn til andre metoder. Det er kritiske trinn og begrensninger for denne metoden, samt potensielle endringer og fremtidige programmer å huske på.
Siden det banebrytende arbeidet til Victor Borrell og kolleger om genetisk manipulering av postnatal ilder neocortex via elektroporasjon eller viral injeksjon35,42,43, har...

Neocortex er det ytre arket av pattedyr cerebrum og setet for høyere kognitive funksjoner1,,2,,3,,4,,5. For å oppnå en akutt genetisk manipulasjon i pattedyr neocortex in vivo under embryonal utvikling, to forskjellige metoder har blitt utforsket: virusinfeksjon6 og in utero elektroporasjon7. Begge metodene tillater effektiv målretting av neokortikale celler, men lider av noen begrensninger. Den største fordelen med in utero elektroporasjon sammenlignet med virusinfeksjon er evnen til å oppnå romlig spesifisitet innen neocortex, som oppnås ved å regulere retningen av det elektriske feltet.
Siden elektroporasjon først ble vist å lette inntreden av DNA i cellene in vitro8,har det blitt brukt til å levere DNA i ulike virveldyr in vivo. I utviklingsnevrovitenskap ble in utero elektroporasjon av musen neocortex først rapportert i 20019,10. Denne metoden består av en injeksjon av DNA-blandingen i den laterale ventrikkelen i den embryonale hjernen og påfølgende påføring av det elektriske feltet ved hjelp av pinsettelektroder, noe som tillater romlig presisjon7,11. In utero elektroporasjon har siden blitt brukt til å levere nukleinsyrer for å manipulere uttrykket av endogene eller ektopisk tilsatt gener i musen neocortex. Viktige fremskritt har blitt gjort nylig ved å anvende metodikken til CRISPR / Cas9-mediert genomredigering via in utero elektroporasjon i musen neocortex å utføre (1) genavbrudd i postmitotiske nevroner12,,13 og nevrale stamceller14,og (2) genom15 og epigenome16 redigering.
Kort tid etter den første rapporten i musen ble in utero elektroporasjon påført den embryonale rotte neocortex17,18. Ikke-gnagere forble en utfordring til den første in utero elektroporasjon av ilder, en liten kjøtteter, ble rapportert i 201219,20. Siden da har det blitt brukt in utero elektroporasjon av ildere for å studere mekanismene for neocortex utvikling ved å merke nevrale stamceller og nevroner20,21,22,23, manipulere uttrykket av endogene gener, inkludert bruk av CRISPR / Cas9 teknologi24, og ved å levere ektopiske gener21,22,25, inkludert menneskespesifikke gener26. Videre har in utero elektroporering av ildere blitt brukt til å ta opp trekk ved menneskelig neocortex utvikling i patologiske forhold27,28.
I sammenheng med neocortex utvikling, fordelene ved å bruke ilder som modell organisme sammenlignet med mus skyldes det faktum at ildere bedre rekapulere en rekke menneskelignende funksjoner. På anatomisk nivå viser ildere et karakteristisk mønster av kortikal folding, som også er tilstede i menneskelige og de fleste andre primater, men er helt fraværende hos mus eller rotter4,29,30,31. På histologisk nivå ildere har to forskjellige subventrikulære germinal soner, referert til som indre og ytre subventrikulære soner (ISVZ og OSVZ, henholdsvis)32,33, atskilt av indre fiber lag23. Disse funksjonene deles også med primater, inkludert mennesker, men ikke med mus34. ISVZ og OSVZ hos ildere og mennesker er befolket med rikelig nevrale stamceller, mens subventrikulær sone (SVZ) av mus inneholder bare sparsommerale forfedre21,,32,,35,,36. På cellenivå viser ildere en høy andel av en undertype av nevrale stamfarer referert til som basal eller ytre radial glia (henholdsvis bRG eller oRG), som anses som medvirkende for den evolusjonære utvidelsen av pattedyret neocortex34,37,38. bRG er derfor svært rikelig i fosterets menneskelige og embryonale ilder neocortex, men de er svært sjeldne i embryonal mus neocortex35,36. Videre viser ilder bRG morfologisk heterogenitet som ligner på menneskelig bRG, langt bedre enn mus bRG21. Til slutt, på molekylært nivå, viser utvikling av ilder neocortex genuttrykksmønstre som ligner på fosterets humane neocortex, som antas å kontrollere utviklingen av kortikal folding, blant annet39.
Cellebiologiske og molekylære egenskaper av ilder bRG gjør dem svært proliferative, lik menneskelig bRG. Dette resulterer i økt produksjon av nevroner og utvikling av en utvidet og svært kompleks neocortex34. Disse egenskapene gjør ildere gode modellorganismer for å studere menneskelignende egenskaper av neocortex utvikling som ikke kan modelleres hos mus26,40. For å dra full nytte av ilderen som modellorganisme ble den presenterte metoden utviklet. Den består av i utero elektroporasjon av E33 ilder embryoer med en plasmid uttrykker GFP (pGFP) under kontroll av en allestedsnærværende promotor, CAG. De elektroporerte embryoene kan deretter analyseres embryonalt eller postnatalt. For å redusere antall ofret dyr, kvinnelige ildere (jills) steriliseres av hysterektomi og donert for adopsjon som kjæledyr. Hvis de målrettede embryoene høstes på embryonale stadier, utføres en ny operasjon og embryoene fjernes av en keisersnitt, mens jills er hysterektomiisert. Hvis de målrettede embryoene analyseres på postnatale stadier, blir jills hysterektomiisert etter at valpene har blitt avvent eller ofret. Derfor presenteres også en protokoll for hysterektomi av jills.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>1ml syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>309628</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 Vicryl suture</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>V392ZG</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aluminium spray</td>
			<td>cp-pharma</td>
			<td>98017</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amoxicilin+clavulanic acid (Synulox RTU)</td>
			<td>WDT</td>
			<td>6301</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cappilary holder</td>
			<td>WPI</td>
			<td>MPH6S12</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dexpanthenol Ointment solution</td>
			<td>Bayer</td>
			<td>6029009.00.00</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drape sheet 45x75cm</td>
			<td>Hartmann</td>
			<td>2513052</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrode Tweezer, platinum plated 5mm</td>
			<td>BTX</td>
			<td>45-0489</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electroporator</td>
			<td>BTX</td>
			<td>ECM830</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fast Green</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>F7258-25G</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ferret Mustela putorius furo</td>
			<td>Marshall</td>
			<td>NA</td>
			<td>Experimental organism</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fiber optic light source</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>KL1500LCD</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Allgaier instrumente</td>
			<td>08-033-130</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps 3C-SA</td>
			<td>Rubis Tech</td>
			<td>3C-SA</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps 55</td>
			<td>Dumostar</td>
			<td>11295-51</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps 5-SA</td>
			<td>Rubis Tech</td>
			<td>5-SA</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze swabs large</td>
			<td>Hartmann</td>
			<td>401723</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze swabs small</td>
			<td>Hartmann</td>
			<td>401721</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GFAP antibody</td>
			<td>Dako</td>
			<td>Z0334</td>
			<td>Antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GFP antibody</td>
			<td>Aves labs</td>
			<td>GFP1020</td>
			<td>Antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass cappilaries (Borosilicate glass with filament, OD:1.2mm, ID: 0.69mm, 10cm length)</td>
			<td>Sutter Instrument</td>
			<td>BF120-69-10</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>Bela-pharm</td>
			<td>K4011-02</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heat pad</td>
			<td>Hans Dinslage</td>
			<td>Sanitas SHK18</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iodine (Betadine solution 100 mg/ml)</td>
			<td>Meda</td>
			<td>997437</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isofluran</td>
			<td>CP</td>
			<td>21311</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Loading tips 20&#181;l</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>#5242 956.003</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metamizol</td>
			<td>WDT</td>
			<td>99012</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum dissecting scissors</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>BC600R</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipette puller</td>
			<td>Sutter Instrument</td>
			<td>Model P-97</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pCAGGS-GFP</td>
			<td>NA</td>
			<td>NA</td>
			<td>From Kalebic et al., eLife, 2018</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PCNA antibody</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>CBL407</td>
			<td>Antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pH3 antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab10543</td>
			<td>Antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>294200104</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shaver</td>
			<td>Braun</td>
			<td>EP100</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sox2 antibody</td>
			<td>R+D Systems</td>
			<td>AF2018</td>
			<td>Antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical clamp 13cm</td>
			<td>WDT</td>
			<td>27080</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical double spoon (Williger)</td>
			<td>WDT</td>
			<td>27232</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical drape</td>
			<td>WDT</td>
			<td>28800</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical scissors small</td>
			<td>FST</td>
			<td>14090-09</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suturing needle holder</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>BM149R</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tbr2 antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab23345</td>
			<td>Antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transfer pipette 3ml</td>
			<td>Fischer scientific</td>
			<td>13439108</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water bath</td>
			<td>Julabo</td>
			<td>TW2</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vivo targeting of neural progenitor cells in ferret neocortex by in utero electroporation

Manipulering av genuttrykk in vivo under embryonisk utvikling er den metoden for valg når man analyserer rollen til individuelle gener under pattedyrutvikling. In utero elektroporasjon er en viktig teknikk for manipulering av genuttrykk i den embryonale pattedyrhjernen in vivo. En protokoll for in utero elektroporasjon av embryonale neocortex av ilder, en liten kjøtteter, presenteres her. Ilderen blir i økende grad brukt som modell for neocortex utvikling, fordi neocortex viser en rekke anatomiske, histologiske, cellulære og molekylære egenskaper som også er tilstede i menneskelige og ikke-menneskelige primater, men fraværende i gnagermodeller, for eksempel mus eller rotte. In utero elektroporasjon ble utført på embryonisk dag (E) 33, et midneurogenesestadium i ilder. In utero elektroporasjon retter seg mot nevrale stamceller som fôrer hjernens laterale ventrikler. Under nevrogenese gir disse stamcellene opphav til alle andre nevrale celletyper. Dette arbeidet viser representative resultater og analyser på henholdsvis E37, postnatal dag (P) 1 og P16, tilsvarende henholdsvis 4, 9 og 24 dager etter in uteroelektroporasjon. I tidligere stadier består avkom av målrettede celler hovedsakelig av ulike nevrale stamceller, mens de fleste merkede celler i senere stadier er postmitotiske nevroner. Dermed muliggjør in utero elektroporasjon studiet av effekten av genetisk manipulasjon på cellulære og molekylære egenskaper ved ulike typer nevrale celler. Gjennom sin effekt på ulike cellepopulasjoner kan in utero elektroporasjon også brukes til manipulering av histologiske og anatomiske egenskaper i den ilderne neocortex. Viktigere, alle disse effektene er akutte og utføres med en spatiotemporal spesifisitet bestemmes av brukeren.

In utero elektroporasjon av ildere ved E33 resulterte i målretting av nevrale stamceller som fôrer ventrikulær overflate av embryonale neocortex (figur 1). Disse cellene kalles apical stamfar og er svært proliferative, noe som gir opphav til alle andre celletyper under utvikling. Ved asymmetrisk divisjon genererte a apiske forfedre en annen apical stamfar og en mer differensiert celle, vanligvis en basal stamfar (BP), som delaminerte fra ventrikulær overflate. BPs migrerte inn i den sek...

Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Targeting of Neural Progenitor Cells in Ferret Neocortex by In Utero Electroporation at JoVE.com

In Vivo Targeting of Neural Progenitor Cells in Ferret Neocortex by In Utero Electroporation

Presentert her er en protokoll for å utføre genetisk manipulasjon i den embryonale ilderhjernen ved hjelp av utero elektroporasjon. Denne metoden gjør det mulig å målrette mot nevrale stamceller i neocortex in vivo.

In Vivo Målretting av Nevrale stamceller i Ferret Neocortex av In Utero Electroporation

Manipulation of gene expression in vivo during embryonic development is the method of choice when analyzing the role of individual genes during mammalian ...

Denne protokollen tillater oss å utføre en genetisk manipulasjon in vivo i en viktig dyremodell som tillater oss å studere utvidelsen og folding av en utviklende neocortex. Den største fordelen med denne metoden er å bruke høy romlig og timelig spesifisitet i å målrette de nevrale stamcellene som er nøkkelcelletypen for hjerneutvikling. Før du begynner prosedyren, trekk glasskapillærer på en mikropipettetrekker og bruk tang til å kutte av den distale delen av kapillæren for å justere diameteren på kapillærspissen.På embryonisk dag 33, tilsett riktig konsentrasjon av DNA i PBS, supplert med 0,1% Fast Green med mild blanding, og plasser en 3-timers fastet, bedøvet, gravid kvinnelig ilder på et operasjonsbord med en varmepute. Bekreft riktig nivå av sedasjon ved å berøre den periocular huden og klemme huden mellom andre og tredje eller tredje og fjerde tærne på begge baklemmer. Isofluran kan forårsake bivirkninger, inkludert kvalme og svimmelhet.Bruk verneutstyret ved håndtering av isofluran i flytende form. Under operasjonen, bruk passende beholdere for å fange gassen. Injiser dyret subkutant med smertestillende, antibiotika og glukose, og legg salve på dyrets øyne.Bruk klippere til å barbere magen, og rengjør den eksponerte huden med en vann-, såpe- og jodoppløsning. Tørk deretter huden med gasbindvattpinner og desinfiser med alkohol og jodskrubb. For in utero elektroporasjon, plasser en steril drapering over dyret og bruk en skalpell for å lage et ca 5-centimeter hud snitt på linea alba.Bruk saks for å skjære gjennom muskellaget og plassere gasbind vattpinner rundt snittstedet. Våt gasbind med PBS og plasser livmoren på vattpinnene. Bruk en pipette med en lang spiss, legg i en av de trukket glasskapillærer med 5 mikroliter DNA-løsning per embryo som skal injiseres.Fest den ladde kapillæren til en holder og koble den andre siden av holderen til et rør og et munnstykke. Finn hodet til det første embryoet og plasser en fiberoptisk lyskilde ved siden av hodet. Bruk pigmentert iris som referansepunkt, trenge inn i huden, skallen og hjernevevet med spissen av glasskapillæren og bruk munnpipettering for å lette leveringen av 3-5 mikroliter av injeksjonsoppløsningen i ventrikkelen på en av de cerebrale halvkulene.Fordi den injiserte oppløsningen inneholder 0,1% Fast Green, vil en vellykket injeksjon resultere i en mørk grønn farging av injisert ventrikkel, som nå vil være synlig som en nyreformet struktur. Etter injeksjonen, plasser pinsettelektrodene på livmoren over embryoets hode med den positive stangen over området som skal målrettes og den negative polen under det injiserte området. Sett pulslengden på elektroporatet til 50 millisekunder, pulsspenningen til 100 volt, pulsintervallet til ett sekund, og antall pulser til fem.Når alle parametrene er satt, trykk Pulse"og slipp raskt flere dråper varm PBS på det elektroporerte embryoet. Når alle embryoene er elektroporert, returnere livmoren til bukhinnen og bruk en 4-0 sutur for å lukke muskellaget med bukhinnen. Lukk huden på en lignende måte og dekk såret med aluminiumspray.Deretter returnerer du dyret til buret med en varmekilde og overvåker til full recumbency. Fire dager etter elektroporasjon på embryonisk dag 37, er de fleste av de målrettede cellene og deres avkom fortsatt i germinal sonene, og cellene observeres sjelden ytterligere basalt innenfor kortikalplaten. Stamfaridentiteten kan undersøkes ved immunsvikt for markører av sykkelceller, som PCNA, mens en undergruppe av stamfar som gjennomgår mitose kan vises av markører som fosfo-histone 3.På postnatal dag null, åtte dager etter elektroporasjon, spredte avkom av de målrettede cellene seg til alle histologiske lag. Ved hjelp av en kombinasjon av transkripsjonsfaktormarkører kan forskjellige basale stamcellepopulasjoner avsløres. For eksempel er Sox2 en markør for proliferative stamceller, inkludert basal radial glia.Og T-box hjerneprotein 2 er en markør for nevrogene basalstamfarer, som hovedsakelig er mellomliggende forfedre. Ved postnatal dag 16 slutter et flertall av de målrettede cellene å dele seg og differensiere seg i nevroner og glia, med ilder postnatal dag 16 neocortex som viser det karakteristiske foldemønsteret. In utero elektroporasjon av ilderembryoer er en ekstremt kraftig metode for å studere geners funksjon.Det har gjort det mulig for oss å studere gener som har vært innblandet i utvidelsen av neocortex i evolusjon, inkludert menneskespesifikke gener. Og ved hjelp av denne kraftige metoden har vi faktisk vært i stand til å finne ut viktige funksjoner i hvordan den evolusjonære utvidelsen av den menneskelige neocortex sannsynligvis fungerte.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Combining Behavioral Endocrinology and Experimental Economics: Testosterone and Social Decision Making

Behavioral endocrinological research in humans as well as in animals suggests that testosterone plays a key role in social interactions. Studies in ...

In utero Electroporation followed by Primary Neuronal Culture for Studying Gene Function in Subset of Cortical Neurons

In utero Electroporation followed by Primary Neuronal Culture for Studying Gene Function in Subset of Cortical Neurons

In vitro study of primary neuronal cultures allows for quantitative analyses of neurite outgrowth. In order to study how genetic alterations affect ...

Time-lapse Live Imaging of Clonally Related Neural Progenitor Cells in the Developing Zebrafish Forebrain

Precise patterns of division, migration and differentiation of neural progenitor cells are crucial for proper brain development and function1,2. To ...

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

The targeting and refinement of RGC projections to the midbrain is a popular and powerful model system for studying how precise patterns of neural ...

Live-cell Imaging of Sensory Organ Precursor Cells in Intact Drosophila Pupae

Live-cell Imaging of Sensory Organ Precursor Cells in Intact Drosophila Pupae

Since the discovery of Green Fluorescent Protein (GFP), there has been a revolutionary change in the use of live-cell imaging as a tool for understanding ...

Mouse in Utero Electroporation: Controlled Spatiotemporal Gene Transfection

Mouse in Utero Electroporation: Controlled Spatiotemporal Gene Transfection

In order to understand the function of genes expressed in specific region of the developing brain, including signaling molecules and axon guidance ...

Functional Neuroimaging Using Ultrasonic Blood-brain Barrier Disruption and Manganese-enhanced MRI

Funksjonell Bildediagnostiske Bruke Ultrasonic blod-hjerne barrieren avbrudd og mangan forbedret MR

Although mice are the dominant model system for studying the genetic and molecular underpinnings of neuroscience, functional neuroimaging in mice remains ...

Expansion of Embryonic and Adult Neural Stem Cells by In Utero Electroporation or Viral Stereotaxic Injection

Expansion of Embryonic and Adult Neural Stem Cells by In Utero Electroporation or Viral Stereotaxic Injection

Utvidelse av embryonale og voksne nevrale stamceller ved<em&gt; In Utero</em&gt; Electroporation eller Viral stereotaksiske Injection

Somatic stem cells can divide to generate additional stem cells (expansion) or more differentiated cell types (differentiation), which is fundamental for ...

Generation of Topically Transgenic Rats by In utero Electroporation and In vivo Bioluminescence Screening

Generation of Topically Transgenic Rats by In utero Electroporation and In vivo Bioluminescence Screening

Generering av Topically Transgene Rats etter<em&gt; I utero</em&gt; Electroporation og<em&gt; In vivo</em&gt; Bioluminesens Screening

 In utero electroporation (IUE) is a technique which allows genetic modification of cells in the brain for investigating neuronal development. So far, the ...

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

Samtidig<em&gt; Ex vivo</em&gt; Funksjonell testing av to netthinne etter<em&gt; In vivo</em&gt; Elektroretinogrammet System

An In vivo electroretinogram (ERG) signal is composed of several overlapping components originating from different retinal cell types, as well as noise ...