Name: in vivo targeting of neural progenitor cells in ferret neocortex by in utero electroporation
Uploaded: 2020-05-06T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Targeting of Neural Progenitor Cells in Ferret Neocortex by In Utero Electroporation at JoVE.com

Vi är tacksamma för de tjänster och faciliteter som max Planck Institutet för molekylär cellbiologi och genetik för enastående stöd, särskilt hela teamet av biomedicinska tjänster (BMS) för utmärkt djurhållning av illrar och J. Peychl och hans team av Light Microscopy Facility. Vi är särskilt tacksamma mot Katrin Reppe och Anna Pfeffer från BMS för exceptionellt veterinärstöd och Lei Xing från Huttner-gruppen för att de hjälper till med illern.

Alla experimentella förfaranden genomfördes i samförstånd med den tyska djurskyddslagstiftningen efter godkännande av Landesdirektion Sachsen (licenser TVV 2/2015 och TVV 21/2017).
1. Förberedelse för in utero elektroporation
<ol><li>Förbered DNA-blandningen. I detta protokoll används en slutlig koncentration av 1 μg/μL av pGFP. Lös DNA i PBS och komplettera med 0,1% Fast Green för att underlätta visualisering. När du har förberett, blanda DNA-blandningen genom pipettering up...

In utero elektroporation i illern är en viktig teknik, med fördelar och nackdelar med avseende på andra metoder. Det finns kritiska steg och begränsningar för den här metoden, samt potentiella modifieringar och framtida program att tänka på.
Sedan Victor Borrells och kollegors banbrytande arbete med genetisk manipulering av den postnatala illern neocortex via elektroporation eller viral injektion35,42,<sup class="xre...

Neocortex är det yttre arket av däggdjurshjärnan och sätet för högre kognitivafunktioner 1,2,3,4,5. För att uppnå en akut genetisk manipulation i däggdjurs neocortex in vivo under den embryonala utvecklingen har man utforskat två olika metoder: virusinfektion6 och in utero electroporation7. Båda metoderna möjliggör effektiv inriktning av neokortikala celler men lider av vissa begränsningar. Den stora fördelen med in utero elektroporation jämfört med virusinfektion är förmågan att uppnå rumslig specificitet inom neocortex, vilket uppnås genom att reglera riktningen för det elektriska fältet.
Sedan electroporation visades först för att underlätta inresa av DNA i cellerna in vitro8, har det tillämpats för att leverera DNA i olika ryggradsdjur in vivo. I utvecklingsneurovetenskap, in utero elektroporation av musen neocortex rapporterades först i 20019,10. Denna metod består av en injektion av DNA-blandningen i den laterala ventrikeln i den embryonala hjärnan och efterföljande tillämpning av det elektriska fältet med hjälp av pincettelektroder, som tillåter rumslig precision7,11. In utero elektroporation har sedan dess tillämpats för att leverera nukleinsyror för att manipulera uttrycket av endogena eller ectopically lagt gener i musen neocortex. Viktiga framsteg har gjorts nyligen genom att tillämpa metodiken för CRISPR/Cas9-medierad genomredigering via in utero elektroporation i musen neocortex att utföra (1) gen störningar i postmitotiska nervceller12,13 och neurala provigare celler14, och (2) arvsmassan15 och epigenome16 redigering.
Mycket snart efter den första rapporten i mus, in utero elektroporation tillämpades på den embryonala råttan neocortex17,18. Icke-gnagare förblev en utmaning tills den första in utero elektroporation av illrar, en liten köttätare, rapporterades i 201219,20. Sedan dess har in utero elektroporation av illrar tillämpats för att studera mekanismerna för neocortex utveckling genom märkning neurala stamceller och nervceller20,21,22,23, manipulera uttryck av endogena gener, inklusive användning av CRISPR/Cas9 teknik 24 , och genom att leverera ektopiska gener21,22,25, inklusive human-specifika gener26.26 Vidare har in utero elektroporation av illrar använts för att ta itu med funktioner i mänskliga neocortex utveckling i patologiska förhållanden27,28.
I samband med neocortex utveckling beror fördelarna med att använda illrar som modellorganism jämfört med möss på att illrar bättre rekapitulerar en rad människoliknande drag. På anatomisk nivå uppvisar illrar ett karakteristiskt mönster av kortikala vikning, som också förekommer i mänskliga och de flesta andra primater, men är helt frånvarande hos möss eller råttor4,29,30,31. På den histologiska nivån har illrar två distinkta subventrikulära germinalzoner, benämnda de inre och yttre subventrikulära zonerna (ISVZ respektive OSVZ)32,33, åtskilda av det inre fiberskiktet23. Dessa funktioner delas också med primater, inklusive människor, men inte med möss34. ISVZEN och OSVZ iller och människor befolkas med överflödande neurala progenitorceller, eftersom subventricular zonplanerar (SVZ) av möss innehåller endast glesa neurala progenitors21,32,35,36. På cellnivå uppvisar illrar en hög andel av en subtyp av neurala föregångare som kallas basala eller yttre radiella glia (bRG eller oRG, respektive), som bedöms som instrumentella för den evolutionära expansionen av däggdjurs neocortex34,37,38. bRG är därför mycket riklig i fostrets mänskliga och embryonala iller neocortex, men de är mycket sällsynta i den embryonala musen neocortex35,36. Vidare visar iller bRG morfologiska heterogenitet liknande den hos mänskliga bRG, vida överlägsen mus bRG21. Slutligen, på molekylär nivå, utveckla iller neocortex visar genuttryck mönster mycket lik de av fetala mänskliga neocortex, som antas styra utvecklingen av när vikning, bland annat39.
Cellbiologiska och molekylära egenskaper hos illerbRG gör dem mycket proliferativa, liknande mänskliga bRG. Detta resulterar i en ökad produktion av nervceller och utveckling av en utökad och mycket komplex neocortex34. Dessa egenskaper gör illrar utmärkta modellorganismer för att studera människoliknande drag av neocortexutveckling som inte kan modelleras hos möss26,40. För att dra full nytta av illern som en modell organismen den presenterade metoden utvecklades. Den består av in utero-elektroporation av E33-illerembryon med en plasmid som uttrycker GFP (pGFP) under kontroll av en allestädes närvarande promotor, CAG. De elektroporerade embryona kan sedan analyseras embryonalt eller postnatally. För att minska antalet offrade djur, är hona illrar (jills) steriliseras av hysterektomi och doneras för antagande som husdjur. Om de riktade embryona skördas på embryonala stadier utförs en andra operation och embryona avlägsnas genom ett kejsarsnitt, medan jills är hysterektomiserade. Om de riktade embryona analyseras i postnatala stadier hysterektomiseras jills efter att ungarna har avvanda eller offrats. Därav presenteras också ett protokoll för hysterektomi av jills.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>1ml syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>309628</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 Vicryl suture</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>V392ZG</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aluminium spray</td>
			<td>cp-pharma</td>
			<td>98017</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amoxicilin+clavulanic acid (Synulox RTU)</td>
			<td>WDT</td>
			<td>6301</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cappilary holder</td>
			<td>WPI</td>
			<td>MPH6S12</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dexpanthenol Ointment solution</td>
			<td>Bayer</td>
			<td>6029009.00.00</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drape sheet 45x75cm</td>
			<td>Hartmann</td>
			<td>2513052</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrode Tweezer, platinum plated 5mm</td>
			<td>BTX</td>
			<td>45-0489</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electroporator</td>
			<td>BTX</td>
			<td>ECM830</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fast Green</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>F7258-25G</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ferret Mustela putorius furo</td>
			<td>Marshall</td>
			<td>NA</td>
			<td>Experimental organism</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fiber optic light source</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>KL1500LCD</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Allgaier instrumente</td>
			<td>08-033-130</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps 3C-SA</td>
			<td>Rubis Tech</td>
			<td>3C-SA</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps 55</td>
			<td>Dumostar</td>
			<td>11295-51</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps 5-SA</td>
			<td>Rubis Tech</td>
			<td>5-SA</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze swabs large</td>
			<td>Hartmann</td>
			<td>401723</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze swabs small</td>
			<td>Hartmann</td>
			<td>401721</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GFAP antibody</td>
			<td>Dako</td>
			<td>Z0334</td>
			<td>Antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GFP antibody</td>
			<td>Aves labs</td>
			<td>GFP1020</td>
			<td>Antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass cappilaries (Borosilicate glass with filament, OD:1.2mm, ID: 0.69mm, 10cm length)</td>
			<td>Sutter Instrument</td>
			<td>BF120-69-10</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>Bela-pharm</td>
			<td>K4011-02</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heat pad</td>
			<td>Hans Dinslage</td>
			<td>Sanitas SHK18</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iodine (Betadine solution 100 mg/ml)</td>
			<td>Meda</td>
			<td>997437</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isofluran</td>
			<td>CP</td>
			<td>21311</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Loading tips 20&#181;l</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>#5242 956.003</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metamizol</td>
			<td>WDT</td>
			<td>99012</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum dissecting scissors</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>BC600R</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipette puller</td>
			<td>Sutter Instrument</td>
			<td>Model P-97</td>
			<td>Electroporation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pCAGGS-GFP</td>
			<td>NA</td>
			<td>NA</td>
			<td>From Kalebic et al., eLife, 2018</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PCNA antibody</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>CBL407</td>
			<td>Antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pH3 antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab10543</td>
			<td>Antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>294200104</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shaver</td>
			<td>Braun</td>
			<td>EP100</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sox2 antibody</td>
			<td>R+D Systems</td>
			<td>AF2018</td>
			<td>Antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical clamp 13cm</td>
			<td>WDT</td>
			<td>27080</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical double spoon (Williger)</td>
			<td>WDT</td>
			<td>27232</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical drape</td>
			<td>WDT</td>
			<td>28800</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical scissors small</td>
			<td>FST</td>
			<td>14090-09</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suturing needle holder</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>BM149R</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tbr2 antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab23345</td>
			<td>Antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transfer pipette 3ml</td>
			<td>Fischer scientific</td>
			<td>13439108</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water bath</td>
			<td>Julabo</td>
			<td>TW2</td>
			<td>Surgery</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vivo targeting of neural progenitor cells in ferret neocortex by in utero electroporation

Manipulering av genuttryck in vivo under embryonal utveckling är metod för val vid analys av enskilda geners roll under däggdjursutvecklingen. In utero elektroporation är en nyckelteknik för manipulering av genuttryck i den embryonala däggdjurs hjärnan in vivo. Ett protokoll för in utero elektroporation av den embryonala neocortex av illrar, en liten köttätare, presenteras här. Illern används alltmer som modell för neocortex utveckling, eftersom dess neocortex uppvisar en serie anatomiska, histologiska, cellulära och molekylära funktioner som också finns i mänskliga och icke-mänskliga primater, men frånvarande i gnagare modeller, såsom mus eller råtta. In utero elektroporation utfördes på embryonala dag (E) 33, en midneurogenesis skede i illern. In utero elektroporation mål neurala stamceller foder laterala ventriklarna i hjärnan. Under neurogenes ger dessa progenitorceller upphov till alla andra neurala celltyper. Detta arbete visar representativa resultat och analyser vid E37, postnatal dag (P) 1, och P16, motsvarande 4, 9, och 24 dagar efter in utero elektroporation, respektive. I tidigare skeden består avkomman av riktade celler huvudsakligen av olika neurala progenitor subtyper, medan i senare skeden mest märkta celler är postmitotiska nervceller. Således, in utero elektroporation möjliggör studiet av effekten av genetisk manipulation på cellulära och molekylära funktioner i olika typer av neurala celler. Genom sin effekt på olika cellpopulationer kan in utero-elektroporation också användas för manipulering av histologiska och anatomiska drag hos illerns neocortex. Viktigt, alla dessa effekter är akuta och utförs med en spatiotemporal specificitet bestäms av användaren.

In utero elektroporation av illrar vid E33 resulterade i inriktning av de neurala stamcellerna som kantar ventrikulära ytan av den embryonala neocortex (Figur 1). Dessa celler kallas apikala progenitorer och är mycket proliferativa, vilket ger upphov till alla andra celltyper under utveckling. Vid asymmetrisk uppdelning genererade apikala stamfader en annan apikal stamfader och en mer differentierad cell, typiskt en basal stamfader (BP), som delaminated från ventrikulära ytan. BPs migrer...

Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Targeting of Neural Progenitor Cells in Ferret Neocortex by In Utero Electroporation at JoVE.com

In Vivo Targeting of Neural Progenitor Cells in Ferret Neocortex by In Utero Electroporation

Presenteras här är ett protokoll för att utföra genetisk manipulation i embryonala iller hjärnan med hjälp av in utero elektroporation. Denna metod möjliggör inriktning av neurala stamceller i neocortex in vivo.

In Vivo Inriktning av neurala progenitorceller i Iller Neocortex av In Utero Electroporation

Manipulation of gene expression in vivo during embryonic development is the method of choice when analyzing the role of individual genes during mammalian ...

Detta protokoll gör det möjligt för oss att utföra en genetisk manipulation in vivo i en viktig djurmodell som tillåter oss att studera expansion och vikning av en utvecklande neocortex. Den största fördelen med denna metod är att använda hög rumslig och tidsmässig specificitet i inriktning på de neurala stamceller som är den viktigaste celltypen för hjärnans utveckling. Innan du börjar förfarandet, dra glas kapillärer på en mikro pipett puller och använda forceps för att skära av den distala delen av kapillären att justera diametern på kapillärspetsen.På embryonal dag 33, tillsätt lämplig koncentration av DNA i PBS, kompletterad med 0,1%Fast Green med skonsam blandning, och placera en 3-timmars fastad, sövd, gravid honarett på ett operationsbord med en värmedyna. Bekräfta lämplig nivå av sedering genom att vidröra den periokulära huden och nypa huden mellan andra och tredje eller tredje och fjärde tårna i båda bakbenen. Isofluran kan orsaka negativa effekter, inklusive illamående och yrsel.Vid hantering av isofluran i flytande form, använd skyddsutrustningen. Under operationen, använd lämpliga behållare för att fånga upp gasen. Injicera djuret subkutant med smärtstillande, antibiotika och glukos, och placera salva på djurets ögon.Använd clippers att raka buken, och rengöra den exponerade huden med ett vatten, tvål, och jod lösning. Torka sedan huden med gaskompresser och desinficera med alkohol och jodscrubs. För in utero elektroporation, placera en steril drapera över djuret och använda en skalpell för att göra en cirka 5-centimeter hud snitt vid linea alba.Använd sax för att skära igenom muskelskiktet och placera gaskompresser runt snittstället. Blöt gasbindet med PBS och placera livmodern på svabbarna. Med hjälp av en pipett med lång spets, ladda en av de dragna glaskambillärerna med 5 mikroliter DNA-lösning per embryo som ska injiceras.Fäst den belastade kapillären på en hållare och anslut hållarens andra sida till ett rör och ett munstycke. Lokalisera huvudet av det första embryot och placera en fiberoptisk ljuskälla bredvid huvudet. Med hjälp av pigmenterad iris som referenspunkt, penetrera huden, skallen, och cerebral vävnad med spetsen av glaset kapillär och använda munnen pipettering för att underlätta leveransen av 3-5 mikroliter av injektionslösningen i ventrikeln på en av cerebrala halvklot.Eftersom den injicerade lösningen innehåller 0,1%Fast Green, kommer en lyckad injektion att resultera i en mörkgrön färgning av den injicerade ventrikeln, som nu kommer att synas som en njurformad struktur. Efter injektionen, placera pincettelektroderna på livmodern ovanför embryots huvud med den positiva polen ovanför det område som ska riktas och den negativa polen under det injicerade området. Ställ in pulslängden på elektroporatet till 50 millisekunder, pulsspänningen till 100 volt, pulsintervallet till en sekund och antalet pulser till fem.När alla parametrar har ställts in, tryck Puls "och snabbt släppa flera droppar av varma PBS på det elektroporerade embryot. När alla embryon har elektroporerats, återgå livmodern till bukhinnan hålighet och använda en 4-0 sutur för att stänga muskelskiktet med bukhinnan. Stäng huden på ett liknande sätt och täck såret med aluminiumspray.Sedan tillbaka djuret till sin bur med en värmekälla och övervakning tills full recumbency. Fyra dagar efter elektroporation på embryonala dag 37, de flesta av de riktade celler och deras avkomma är fortfarande i de germinal zoner och cellerna sällan observeras ytterligare basalt inom kortikala plattan. Den progenitor identitet kan undersökas genom immunofluoresens för markörer av cykling celler, såsom PCNA, medan en delmängd av progenitorer som genomgår mitos kan visas med markörer såsom phospho-histone 3.Vid postnatala dag noll, åtta dagar efter elektroporation, sprider sig avkomman av de riktade cellerna till alla histologiska lager. Med hjälp av en kombination av transkriptionsfaktor markörer, kan olika basala stamceller befolkningar avslöjas. Till exempel är Sox2 en markör för proliferativ progenitor celler, inklusive basala radiella glia.Och T-box hjärnan protein 2 är en markör för neurogena basala stamceller, som huvudsakligen är mellanliggande progenitorer. Genom postnatala dag 16, en majoritet av de riktade cellerna sluta dela och differentiera till nervceller och glia, med iller postnatala dag 16 neocortex uppvisar den karakteristiska vikning mönster. In utero-elektroporation av illerembryon är en extremt kraftfull metod för att studera genernas funktion.Det har gjort det möjligt för oss att studera gener som har varit inblandade i expansionen av neocortex i evolutionen, inklusive människospecifika gener. Och med hjälp av denna kraftfulla metod har vi verkligen kunnat ta reda på viktiga inslag i hur den evolutionära expansionen av den mänskliga neocortex sannolikt fungerade.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Combining Behavioral Endocrinology and Experimental Economics: Testosterone and Social Decision Making

Kombinera Behavioral Endokrinologi och experimentell ekonomi: Testosteron och sociala beslutsfattande

Behavioral endocrinological research in humans as well as in animals suggests that testosterone plays a key role in social interactions. Studies in ...

In utero Electroporation followed by Primary Neuronal Culture for Studying Gene Function in Subset of Cortical Neurons

In utero Electroporation followed by Primary Neuronal Culture for Studying Gene Function in Subset of Cortical Neurons

I livmodern elektroporation följt av primär Neuronala Kultur för att studera geners funktion i Delmängd av kortikal Neuroner

In vitro study of primary neuronal cultures allows for quantitative analyses of neurite outgrowth. In order to study how genetic alterations affect ...

Time-lapse Live Imaging of Clonally Related Neural Progenitor Cells in the Developing Zebrafish Forebrain

Time-lapse Live avbildning av kloner som är närbesläktade neurala stamceller i utvecklingsländerna Zebrafish framhjärnan

Precise patterns of division, migration and differentiation of neural progenitor cells are crucial for proper brain development and function1,2. To ...

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation

Transfektion av Mouse retinal ganglion celler genom att In vivo Elektroporation

The targeting and refinement of RGC projections to the midbrain is a popular and powerful model system for studying how precise patterns of neural ...

Live-cell Imaging of Sensory Organ Precursor Cells in Intact Drosophila Pupae

Live-cell Imaging of Sensory Organ Precursor Cells in Intact Drosophila Pupae

Live-cell imaging av sensoriska celler orgel Precursor i intakt Drosophila Puppor

Since the discovery of Green Fluorescent Protein (GFP), there has been a revolutionary change in the use of live-cell imaging as a tool for understanding ...

Mouse in Utero Electroporation: Controlled Spatiotemporal Gene Transfection

Mouse in Utero Electroporation: Controlled Spatiotemporal Gene Transfection

Mus I livmodern Elektroporation: Kontrollerad Spatiotemporal Gene Transfektion

In order to understand the function of genes expressed in specific region of the developing brain, including signaling molecules and axon guidance ...

Functional Neuroimaging Using Ultrasonic Blood-brain Barrier Disruption and Manganese-enhanced MRI

Funktionell hjärnavbildning med ultraljud Blod-hjärnbarriären störningar och mangan-förstärkt MRT

Although mice are the dominant model system for studying the genetic and molecular underpinnings of neuroscience, functional neuroimaging in mice remains ...

Expansion of Embryonic and Adult Neural Stem Cells by In Utero Electroporation or Viral Stereotaxic Injection

Expansion of Embryonic and Adult Neural Stem Cells by In Utero Electroporation or Viral Stereotaxic Injection

Utbyggnad av embryonala och vuxna neurala stamceller genom<em&gt; I Utero</em&gt; Elektroporering eller viral stereotaxisk injektion

Somatic stem cells can divide to generate additional stem cells (expansion) or more differentiated cell types (differentiation), which is fundamental for ...

Generation of Topically Transgenic Rats by In utero Electroporation and In vivo Bioluminescence Screening

Generation of Topically Transgenic Rats by In utero Electroporation and In vivo Bioluminescence Screening

Generering av Lokalt Transgena råttor genom<em&gt; I livmodern</em&gt; Elektroporering och<em&gt; In vivo</em&gt; Bioluminescence Screening

 In utero electroporation (IUE) is a technique which allows genetic modification of cells in the brain for investigating neuronal development. So far, the ...

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

Samtidig<em&gt; Ex vivo</em&gt; Funktionstest av två näthinnor efter<em&gt; In vivo</em&gt; Elektroretinogram System

An In vivo electroretinogram (ERG) signal is composed of several overlapping components originating from different retinal cell types, as well as noise ...