Name: vascular casting of adult and early postnatal mouse lungs for micro-ct imaging
Uploaded: 2020-06-20T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Vascular Casting of Adult and Early Postnatal Mouse Lungs for Micro-CT Imaging at JoVE.com

وقد تم دعم هذا البحث جزئيا من قبل برنامج البحوث داخل الثقافات (DIR HL-006247). نود أن نشكر مرفق التصوير بالماوس NIH على التوجيه في الحصول على الصور وتحليلها.

وقد تمت الموافقة على جميع الأساليب المذكورة هنا من قبل لجنة رعاية الحيوان واستخدامه (ACUC) من المعهد الوطني للرئة القلب والدم.
1- الإعداد
<ol><li>حقن intraperitoneally الماوس مع الهيبارين (1 وحدة / ز وزن الجسم الماوس) والسماح لها ambulate لمدة 2 دقيقة.</li>
	<li>القتل الرحيم الحيوان في غرفة CO2.<...

يتم تنفيذ هذه الطريقة بشكل صحيح ، وتسفر عن صور مذهلة لشبكات الشرايين الرئوية ، مما يسمح بالمقارنة والتجريب في نماذج القوارض. العديد من الخطوات الحاسمة على طول الطريق ضمان النجاح. أولاً، يجب على المحققين تهشيع الحيوان في المرحلة التحضيرية لمنع جلطات الدم من التشكل في الأوعية الدموية الرئو...

التركيز من هذه التقنية هو تصور بنية الشرايين الرئوية باستخدام مركب البوليمر القائم في الفئران. في حين تم تنفيذ أعمال واسعة النطاق على الأسرة الأوعية الدموية الجهازية مثل الدماغ والقلب والكلى1،2،3،4،5، تتوفر معلومات أقل فيما يتعلق بإعداد وملء شبكة الشرايين الرئوية. الهدف من هذه الدراسة، لذلك، هو التوسع في العمل السابق6،,7،,8 وتقديم مرجع مفصل مكتوب وبصري يمكن للمحققين متابعته بسهولة لإنتاج صور عالية الدقة لشجرة الشرايين الرئوية.
في حين توجد العديد من الطرق لوضع العلامات وتصوير الأوعية الدموية الرئة, مثل التصوير بالرنين المغناطيسي, صدى القلب, أو CT angiography9,10, العديد من هذه الطرائق تفشل في ملء و / أو التقاط الأوعية الصغيرة بشكل كاف, الحد من نطاق ما يمكن دراسته. توفر أساليب مثل اقسام المسلسل وإعادة الاعمار دقة عالية ولكن الوقت / العمالة الكثيفة11،12،13. سلامة الأنسجة اللينة المحيطة للخطر في صب التآكل التقليدية10،13،14،15،16. حتى عمر الحيوان وحجمه يصبحان عاملين عند محاولة إدخال قسطرة أو عدم وجود القرار. تقنية حقن البوليمر، من ناحية أخرى، يملأ الشرايين إلى مستوى الشعيرات الدموية وعندما يقترن μCT، ويسمح لقرار لا مثيل لها5. وقد تم بنجاح إلقاء عينات من الرئتين الماوس لا تتجاوز سن 14 يوم بعد الولادةومعالجتها في غضون ساعات. ويمكن إعادة النظر في هذه إلى أجل غير مسمى، أو حتى إرسالها لإعداد الأنسجة النسيجية / المجهر الإلكتروني (EM) دون المساس الأنسجة الرخوة الموجودة17. القيود الرئيسية لهذا الأسلوب هي التكلفة مقدما من معدات / برامج CT، والتحديات مع مراقبة بدقة الضغط داخل الأوعية الدموية، وعدم القدرة على الحصول على البيانات طوليا في نفس الحيوان.
هذه الورقة يبني على العمل القائم لتحسين تقنية حقن الشريان الرئوي ودفع العمر / حجم الحدود ذات الصلة وصولا الى اليوم بعد الولادة 1 (P1) لتحقيق نتائج مذهلة. وهو مفيد للغاية للفرق التي ترغب في دراسة شبكات الأوعية الدموية الشريانية. وبناءً على ذلك، فإننا نقدم إرشادات جديدة لوضع القسطرة/تثبيتها، وزيادة التحكم في معدل التعبئة/الحجم، وتسليط الضوء على المزالق البارزة لزيادة نجاح الصب. ثم يمكن استخدام اللقيم الناتجة عن ذلك في التوصيف والتحليل المورفولوجي في المستقبل. ولعل الأهم من ذلك، أن هذا هو أول مظاهرة بصرية، على حد علمنا، التي تسير في المستخدم من خلال هذا الإجراء المعقد.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:829px;" width="828">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">1cc syringe</td>
			<td style="width:135px;">Becton Dickinson</td>
			<td style="width:117px;">309659</td>
			<td style="width:346px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">20ml Glass Scintillation Vials</td>
			<td style="width:135px;">Fisher</td>
			<td>03-340-25P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">30G Needle</td>
			<td style="width:135px;">Becton Dickinson</td>
			<td style="width:117px;">305106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">50mL conical tubes</td>
			<td style="width:135px;">Cornin</td>
			<td style="width:117px;">352098</td>
			<td>For sample Storage and scanning</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">60cc syringe</td>
			<td style="width:135px;">Becton Dickinson</td>
			<td style="width:117px;">309653</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">7-0 silk suture</td>
			<td style="width:135px;">Teleflex</td>
			<td style="width:117px;">103-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Analyze 12.0 Software</td>
			<td style="width:135px;">AnalyzeDirect Inc.</td>
			<td style="width:117px;">N/A</td>
			<td>Primary Software</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Amira 6.7 Software</td>
			<td style="width:135px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:117px;">N/A</td>
			<td>Alternative Sofware</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">CeramaCut Scissors 9cm</td>
			<td style="width:135px;">Fine Science tools</td>
			<td style="width:117px;">14958-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Ceramic Coated Curved Forceps</td>
			<td style="width:135px;">Fine Science tools</td>
			<td style="width:117px;">11272-50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:231px;">CO2 Tank</td>
			<td style="width:135px;">Robert&#39;s Oxygen Co.</td>
			<td style="width:117px;">n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Dual syringe pump</td>
			<td style="width:135px;">Cole Parmer</td>
			<td style="width:117px;">EW-74900-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Dumont Mini-Forceps</td>
			<td style="width:135px;">Fine Science tools</td>
			<td style="width:117px;">11200-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Ethanol</td>
			<td style="width:135px;">Pharmco</td>
			<td style="width:117px;">111000200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:231px;">Formalin</td>
			<td style="width:135px;">Sigma - Life Sciences</td>
			<td style="width:117px;">HT501128</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Gauze</td>
			<td style="width:135px;">Covidien</td>
			<td style="width:117px;">441215</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:22px;width:231px;">Hemostat</td>
			<td style="width:135px;">Fine Science tools</td>
			<td style="width:117px;">13013-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:231px;">Heparin (1000USP Units/ml)</td>
			<td style="width:135px;">Hospira</td>
			<td style="width:117px;">NDC 0409-2720-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:231px;">Horos Software</td>
			<td style="width:135px;">Horos Project</td>
			<td style="width:117px;">N/A</td>
			<td>Alternative Sofware</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">induction chamber</td>
			<td style="width:135px;">n/a</td>
			<td style="width:117px;">n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Kimwipe</td>
			<td style="width:135px;">Fisher</td>
			<td style="width:117px;">06-666</td>
			<td>fiber optic cleaning wipe</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Labelling Tape</td>
			<td style="width:135px;">Fisher</td>
			<td style="width:117px;">15966</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Magnetic Base</td>
			<td style="width:135px;">Kanetec</td>
			<td style="width:117px;">N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Micro-CT system</td>
			<td style="width:135px;">SkyScan&#160;</td>
			<td style="width:117px;">1172</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Microfil (Polymer Compound)</td>
			<td style="width:135px;">Flowech Inc.</td>
			<td style="width:117px;">Kit B - MV-122</td>
			<td>8 oz. of MV compound; 8 oz. of diluent; MV-Curing Agent</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Micromanipulator</td>
			<td style="width:135px;">Stoelting</td>
			<td style="width:117px;">56131</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Monoject 1/2 ml Insulin Syringe</td>
			<td style="width:135px;">Covidien</td>
			<td style="width:117px;">1188528012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Octagon Forceps Straight Teeth</td>
			<td style="width:135px;">Fine Science tools</td>
			<td style="width:117px;">11042-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:231px;">Parafilm</td>
			<td style="width:135px;">Bemis company, Inc.</td>
			<td style="width:117px;">#PM999</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">PE-10 tubing</td>
			<td style="width:135px;">Instech</td>
			<td style="width:117px;">BTPE-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Phospahte buffered Saline</td>
			<td style="width:135px;">BioRad</td>
			<td style="width:117px;">#161-0780</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Ring Stand</td>
			<td style="width:135px;">Fisher</td>
			<td style="width:117px;">S13747</td>
			<td>Height 24in.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Sodium Nitroprusside</td>
			<td style="width:135px;">sigma</td>
			<td style="width:117px;">71778-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Steel Plate</td>
			<td style="width:135px;">N/A</td>
			<td style="width:117px;">N/A</td>
			<td>16 x 16 in. area, 1/16 in thick</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;width:231px;">Straight Spring Scissors</td>
			<td style="width:135px;">Fine Science tools</td>
			<td style="width:117px;">15000-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:231px;">SURFLO 24G Teflon I.V. Catheter</td>
			<td style="width:135px;">Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td style="width:117px;">360103</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Surgical Board</td>
			<td style="width:135px;">Fisher</td>
			<td>12-587-20</td>
			<td>This is a converted slide holder</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Universal 3-prong clamp</td>
			<td style="width:135px;">Fisher</td>
			<td style="width:117px;">S24280</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Winged Inf. Set 25X3/4, 12&#34; Tubing</td>
			<td style="width:135px;">Nipro</td>
			<td style="width:117px;">PR25G19</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Zeiss Stemi-508 Dissection Scope</td>
			<td style="width:135px;">Zeiss</td>
			<td style="width:117px;">n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

vascular casting of adult and early postnatal mouse lungs for micro-ct imaging

تشكل الأوعية الدموية شبكات معقدة في الفضاء ثلاثي الأبعاد. وبالتالي، من الصعب أن نقدر بصريا كيف تتفاعل الشبكات الوعائية والتصرف من خلال مراقبة سطح الأنسجة. توفر هذه الطريقة وسيلة لتصور بنية الأوعية الدموية ثلاثية الأبعاد المعقدة للرئة.
لتحقيق ذلك، يتم إدخال قسطرة في الشريان الرئوي ويتم في وقت واحد مسح الأوعية الدموية من الدم ومتوسع كيميائيا للحد من المقاومة. ثم يتم تضخيم الرئتين من خلال القصبة الهوائية في ضغط قياسي ويتم غرس مركب البوليمر في سرير الأوعية الدموية بمعدل تدفق قياسي. بمجرد ملء الشبكة الشريانية بأكملها والسماح للعلاج ، يمكن تصور الأوعية الدموية الرئة مباشرة أو صورة على ماسح ضوئي ميكرو CT (μCT).
عند تنفيذها بنجاح، يمكن للمرء أن نقدر شبكة الشرايين الرئوية في الفئران تتراوح بين أوائل سن ما بعد الولادة للبالغين. بالإضافة إلى ذلك، في حين أظهرت في السرير الشرياني الرئوي، يمكن تطبيق هذه الطريقة على أي سرير الأوعية الدموية مع وضع القسطرة الأمثل ونقاط النهاية.

سوف يلقي ناجحة يحمل ملء موحدة من شبكة الشرايين الرئوية بأكملها. ونحن نبرهن على ذلك في الفئران C57Bl/6J تتراوح في العمر: P90 يوم ما بعد الولادة (الشكل 4A) ، P30 (الشكل 4B) P7 (الشكل 4C) ، P1 (الشكل 4D). من خلال التحكم في معدل ال...

Watch this Scientific Journal Video about Vascular Casting of Adult and Early Postnatal Mouse Lungs for Micro-CT Imaging at JoVE.com

Vascular Casting of Adult and Early Postnatal Mouse Lungs for Micro-CT Imaging

والهدف من هذه التقنية هو تصور الجسم الحي السابق لشبكات الشرايين الرئوية للفئران المبكرة بعد الولادة والفئران البالغة من خلال تضخم الرئة وحقن مركب قائم على البوليمرات غير الشفافة لاسلكيًا عبر الشريان الرئوي. كما تناقش التطبيقات المحتملة للأنسجة المصبوبة.

الصب الوعائي لرئتي فأرة ما بعد الولادة المبكرة للتصوير المقطعي المجهري

Blood vessels form intricate networks in 3-dimensional space. Consequently, it is difficult to visually appreciate how vascular networks interact and ...

يعطي هذا البروتوكول إرشادات دقيقة خطوة بخطوة لصب الأوعية الدموية الشريانية الرئوية في كل من فئران البالغين وفيما بعد الولادة المبكرة. هذه التقنية تمكن المستخدمين من إلقاء كامل شبكة الأوعية الدموية للتصور من خلال مجموعة متنوعة من الأساليب، بما في ذلك الأشعة المقطعية الدقيقة، مع الحفاظ على سلامة الأنسجة الرخوة. هذه التقنية مفيدة بشكل خاص للنظر في مورفولوجيا الأوعية الدموية الرئوية والهندسة المعمارية ، ولكن يمكن تكييفها بسهولة لاستهداف الأسرة الوعائية الأخرى.مثل العديد من العمليات الجراحية والتشريح ، لا يوجد بديل عن تصور الإجراء في الواقع ، وقد يستفيد المشاهدون من رؤية بعض المناورات الأكثر تحديًا التي يتم تنفيذها. مرة واحدة في عملية xiphoid هو مكشوف، فهم بلطف ورفع القفص الصدري. جعل بعناية شق في الآن المكشوفة، والحجاب شبه شفافة.سوف تنهار الرئة بشكل واضح، وتتراجع عن الحجاب الحاجز. بعد تعريض الرئة والقصبة الهوائية، خيط 15 سم من أنابيب PE10 على محور إبرة قياس 30. واربط هذه الوحدة بحقنة مليلتر واحدة تحتوي على 10 إلى 4 قنينة الصوديوم في برنامج تلفزيونيتقدم المكبس إلى رئيس الأنابيب حتى تم تطهير كل من الهواء. كبديل فعال للنص، اختراق قمة القلب على جانب واحد، وتمرير نصائح من ملقط منحنية من خلال العضلات، والخروج من الجانب الآخر من الأنسجة. استوعب أحد طرفي طول 10 سنتيمترات من 7-0 حرير، واسحب ما يقرب من سنتيمترين من خلال الأنسجة.بعد سحب قبالة خياطة، واستخدام ثمانية سنتيمترات المتبقية من خياطة لسحب القلب caudally. وشرّف نهاية الغرزة إلى اللوحة الجراحية ربط نصائح من ملقط منحنية تحت كل من الشريان الأورطي التصاعدي وجذع الشريان الرئوي.وسحب طول ثلاثة سنتيمترات من 7-0 الحرير مرة أخرى من خلال فتح لخلق خياطة فضفاضة رمية واحدة. استخدم المقص لإجراء شق من ملليمتر إلى ملليمترين باتجاه قمة القلب، واختراق البطين الأيمن ذو الجدران الرقيقة. وإدخال الأنابيب المُعَدّة في البطين الأيمن، والنهوض بالقسطرة برفق إلى جذع الشريان الرئوي شبه الشفاف، ورقي الجدران.تحقق بصرياً من أن القسطرة لم تتقدم في الفروع الرئوية اليسرى أو اليمنى، ولا تُثبِت نقطة فرع الشريان الرئوي. الشريط الجزء من أنابيب اشرطة إلى المجلس الجراحي، وتشديد بلطف خياطة فضفاضة حول كل من السفن كبيرة. قطع قطعة من خياطة ثمانية سنتيمترات لإعادة القلب إلى وضعية الراحة الطبيعية.وقصة أوراكل اليسار من القلب للسماح للثقب للخروج من الأوعية الدموية. ثم، استخدام مضخة حقنة، لبث نيتروبيوسسايد الصوديوم في معدل تدفق 0.5 مل/دقيقة إلى كل من تدفق الدم، وإلى أقصى حد تمدد الأوعية الدموية، حتى perfusate يعمل واضحة. لبناء وحدة تضخم الرئة، وقطع البلاستيك مرنة 24 قياس القسطرة الوريدية من الحوض والاتصال بإبرة مجموعة ضخ فراشة.أرفق هذه الوحدة بالـ(ستوكوك) وأرفق الـ(ستوكوك) بحقنة مفتوحة بـ50 ملليلتر بعد تحميل الحقنة مع formalin و فتيلة القسطرة ، مع stopcock مغلقة ، ضع الحقنة في موقف حلقة ، إلى النقطة التي يكون فيها الغضروف المفصلي 20 سنتيمترًا فوق القصبة الهوائية. ضع خياطة فضفاضتين ، وبصرف النظر عن اثنين إلى أربعة ملليمترات ، أقل شأنًا من الغضروف المكروق ، واستخدم المقص لإجراء شق صغير في الرباط الزدري ، متفوقًا على الغرز.أدخل القسطرة في الفتحة، وتقدم الطرف إلى ما وراء الغرزين الفضفاضين. تشديد الغرز حول القصبة الهوائية، وفتح stopcock للسماح للفورمين لدخول الرئتين عن طريق الجاذبية. انتظر خمس دقائق حتى تنتفخ الرئتين بشكل كامل.إذا كانت الرئتين تلتصق القفص الصدري أثناء التضخم، استخدم ملقطًا غير مُبَرَّحًا لفهم الجزء الخارجي من القفص الصدري، وتحريك الأضلاع في جميع الاتجاهات للمساعدة في تحرير الفصوص دون إجراء اتصال مباشر مع الرئتين. بعد خمس دقائق، تراجع القسطرة وراء أول خياطة وligate. ثم تراجع القسطرة وراء خياطة الثانية وligate.يجب أن تكون الرئتين الآن مضخمة في حالة مغلقة مضغوطة. لإلقاء الأوعية الدموية، تحميل ملليلتر واحد من محلول 8-1-1 من البوليمر وكيل علاج في حقنة ملليلتر واحد. وأدخل بعناية المكبس.مع حقنة مقلوب، والاكتئاب المكبس لإزالة الهواء، والسماح لتشكيل الغضروف المفصلي في غيض من الحقنة. إزالة حقنة nitroprusside الصوديوم من محور الإبرة، والتنقيط برنامج تلفزيوني إضافة في المحور، لإنشاء الغضروف المفصلي. انضم إلى حقنة مركب البوليمر إلى المحور، وابدأ ضخ في 0.02 ملليمتر في الدقيقة.مراقبة المجمع كما يتحرك بحرية من خلال الأنابيب، مشيرا إلى حجم الحقنة كما يدخل جذع الشريان الرئوي. مواصلة الإسراف حتى يتم ملء جميع الفصوص تماما، وصولا الى أصغر وعاء. وقف المضخة، ومرة أخرى، لاحظ حجم الحقنة.تغطية الرئتين مع مسح تنظيف الألياف البصرية، وتطبيق برنامج تلفزيوني بتحرر. السماح للعينة للجلوس دون عائق لمدة 30 إلى 40 دقيقة في درجة حرارة الغرفة. مرة واحدة يتم الشفاء من مركب البوليمر وتصلب، وقطع الأطراف ونصف أقل من الماوس.ووضع الرأس والصدر في 50 ملليلتر مخروطي شغلها 10٪ buffered formalin، بين عشية وضحاها. في صباح اليوم التالي، فهم القصبة الهوائية لفصل بلطف وحدة القلب والرئة من القفص الصدري المتبقية والصدر. ضع كتلة الأنسجة المحصودة في قارورة متألقة مملوءة بالفورمينين.سوف يؤدي نجاح المدلى بها في ملء موحدة من شبكة الشرايين الرئوية بأكملها. إذا كان هناك تلف في الرئة أو الرئة المسالك الهوائية، فإن التسريبات الصغيرة تمنع الرئتين من الضغط. يمكن أن تنشأ الحشوة غير المكتملة أو غير المكتملة من قفل هوائي نتيجة إدخال الهواء إلى نظام الأوعية الدموية عن طريق القسطرة ، مما يمنع تدفق المصب للمجمع.يحدث Underfilling عندما يتم إدخال مركب صغير جدا في الأوعية الدموية. بدلا من ذلك، الملء الزائد، أو إدخال الكثير من مركب البوليمر بسرعة كبيرة جدا، يمكن أن يسبب تمزق الشرايين، أو، أكثر شيوعا، العبور الوريدي. يمكن أن يؤدي تقدم القسطرة إلى أسفل الجذع الرئوي إلى حدوث إسفين في أحد فروع الشريان الرئوي، مما يخلق خللًا في التدفق، ويتسبب في تعبئة أحد الجانبين أسرع من الآخر.أداء دقيق لهذه التقنية كما هو موضح، وذلك باستخدام الرصد المباشر المناسب لنقاط نهاية الأوعية الدموية، ومعدلات التسريب القياسية يمكن أن يؤدي إلى ملء الأمثل من الأوعية الدموية الرئوية. وعلاوة على ذلك، يمكن تكييف هذه التقنية مع الأوعية الدموية النظامية تسفر عن نتائج مواتية على قدم المساواة في الأسرة الوعائية الأخرى. بعد الصب، يمكن معالجة العينات لمسح التصوير المقطعي المحوسبة الدقيقة.بالنسبة للمعالجة اللاحقة، يمكن استخدام حزمة برامج تجارية لإنشاء حجم ثلاثي الأبعاد لشجرة الأوعية الدموية الرئوية. عند محاولة هذه التقنية للمرة الأولى، كن حذراً بشكل خاص حول الرئتين الهشة والشريان الرئوي. الأهم من ذلك، تجنب إدخال الهواء في الدائرة الوعائية.بعد نجاح المدلى بها، يمكن مسح عينة بواسطة الأشعة المقطعية الدقيقة، ويمكن استكشاف الأسئلة التي تنطوي على morphometry الأوعية الدموية والهندسة المعمارية.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Organotypic Slice Cultures for Studies of Postnatal Neurogenesis

الثقافات شريحة عضوي النمط لدراسات ما بعد الولادة تكوين الخلايا العصبية

Here we describe a technique for studying hippocampal postnatal neurogenesis in the rodent brain using the organotypic slice culture technique. This ...

Methods for Precisely Localized Transfer of Cells or DNA into Early Postimplantation Mouse Embryos

طرق لنقل المترجمة على وجه التحديد من الخلايا أو الحمض النووي في Postimplantation المبكر أجنة الفئران

Manipulation and culture of early mouse embryos is a powerful yet largely under-utilized technology enhancing the value of this model system. Conversely, ...

Assessment of Maternal Vascular Remodeling During Pregnancy in the Mouse Uterus

تقييم الأم الأوعية الدموية إعادة عرض أثناء الحمل في الرحم ماوس

The placenta mediates the exchange of factors such as gases and nutrients between mother and fetus and has specific demands for supply of blood from the ...

Loss- and Gain-of-function Approach to Investigate Early Cell Fate Determinants in Preimplantation Mouse Embryos

Loss- ونهج كسب من وظيفة إلى التحقيق في خلية المبكر مصير محددات في سابق للانغراس أجنة الفئران

 Gene silencing and overexpression techniques are instrumental for the identification of genes involved in embryonic development. Direct target gene ...

Imaging Cleared Embryonic and Postnatal Hearts at Single-cell Resolution

التصوير تطهيرها الجنينية وبعد الولادة قلوب في قرار وحيدة الخلية

Single clonal tracing and analysis at the whole-heart level can determine cardiac progenitor cell behavior and differentiation during cardiac development, ...

Analysis of Retinoic Acid-induced Neural Differentiation of Mouse Embryonic Stem Cells in Two and Three-dimensional Embryoid Bodies

تحليل الناجم عن حمض الريتينويك العصبية تمايز الخلايا الجذعية الجنينية الماوس في الهيئات مضغي اثنين وثلاثة الأبعاد

Mouse embryonic stem cells (ESCs) isolated from the inner mass of the blastocyst (typically at day E3.5), can be used as in vitro model system for ...

Live Imaging of Mouse Secondary Palate Fusion

تصوير لايف من ماوس الثانوي باليت فيوجن

The fusion of the secondary palatal shelves to form the intact secondary palate is a key process in mammalian development and its disruption can lead to ...

A Novel Use of Three-dimensional High-frequency Ultrasonography for Early Pregnancy Characterization in the Mouse

استخدام الموجات فوق الصوتية عالية التردد ثلاثي الأبعاد رواية لتوصيف الحمل المبكر في الماوس

High-frequency ultrasonography (HFUS) is a common method to non-invasively monitor the real-time development of the human fetus in utero. The mouse is ...

Visualization of Cellular Electrical Activity in Zebrafish Early Embryos and Tumors

التصور للنشاط الكهربائي الخلوية في الزرد الأجنة في وقت مبكر، والأورام

Bioelectricity, endogenous electrical signaling mediated by ion channels and pumps located on the cell membrane, plays important roles in signaling ...