Name: vascular casting of adult and early postnatal mouse lungs for micro-ct imaging
Uploaded: 2020-06-20T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Vascular Casting of Adult and Early Postnatal Mouse Lungs for Micro-CT Imaging at JoVE.com

Dit onderzoek werd mede ondersteund door het NHLBI Intramural Research Program (DIR HL-006247). We willen de NIH Mouse Imaging Facility bedanken voor de begeleiding bij het verwerven en analyseren van afbeeldingen.

Alle hier beschreven methoden zijn goedgekeurd door het Institutional Animal Care and Use Committee (ACUC) van het National Heart Lung and Blood Institute.
1. Voorbereiding
<ol><li>Injecteer de muis intraperitoneally met heparine (1 eenheid /g muis lichaamsgewicht) en laat het ambulate voor 2 min.</li>
	<li>Euthanaseren het dier in een CO2-kamer.</li>
	<li>Schik de muis in een supine positie op een chirurgische raad en zet alle vier de ledematen op het bord met tape. Gebruik vergr...

Deze methode wordt goed uitgevoerd en levert opvallende beelden op van longslagadernetwerken, waardoor vergelijking en experimenten in knaagdiermodellen mogelijk zijn. Verschillende kritische stappen onderweg zorgen voor succes. Eerst moeten onderzoekers het dier in de voorbereidende fase inbrengen om te voorkomen dat bloedstolsels zich vormen in de longvaatculatuur en kamers van het hart. Dit zorgt voor de volledige arteriële doorvoer van polymeer verbinding. Ten tweede, bij het doorboren van het middenrif en het verwi...

De focus van deze techniek is de visualisatie van longslagaderarchitectuur met behulp van een polymeer-gebaseerde verbinding in muizen. Terwijl uitgebreid werk is uitgevoerd op systemische vasculaire bedden zoals hersenen, hart, en nier1,,2,,3,,4,5, minder informatie beschikbaar is over de voorbereiding en vulling van het longslagadernetwerk. Het doel van deze studie is dan ook om uit te breiden naar eerder werk6,7,8 en een gedetailleerde schriftelijke en visuele referentie te geven die onderzoekers gemakkelijk kunnen volgen om beelden met hoge resolutie van de longslagaderboom te produceren.
Hoewel er tal van methoden bestaan voor etikettering en beeldvorming van de longvaatculatuur, zoals magnetische resonantiebeeldvorming, echocardiografie of CT-angiografie9,10, slagen veel van deze modaliteiten er niet in om de kleine vaten adequaat te vullen en/of vast te leggen, waardoor de reikwijdte van wat kan worden bestudeerd wordt beperkt. Methoden zoals seriële secties en reconstructie bieden een hoge resolutie, maar zijn tijd/arbeidsintensief11,12,13. De omliggende integriteit van weke delen wordt aangetast bij traditionele corrosieafgieten10,13,14,15,16. Zelfs dierlijke leeftijd en grootte worden factoren bij een poging om een katheter in te voeren of, de resolutie ontbreekt. De polymeerinjectietechniek daarentegen vult slagaders tot het capillaire niveau en zorgt in combinatie met μCT voor een ongeëvenaarde resolutie5. Monsters uit muizenlongen zo jong als postnatale dag 14 zijn met succes gegoten8 en verwerkt in een kwestie van uren. Deze kunnen voor onbepaalde tijd opnieuw worden gescand, of zelfs verzonden voor histologische voorbereiding / elektronenmicroscopie (EM) zonder afbreuk te doen aan het bestaande zachte weefsel17. De belangrijkste beperkingen van deze methode zijn de upfront kosten van CT-apparatuur / software, uitdagingen met nauwkeurige monitoring intravasculaire druk, en het onvermogen om gegevens te verwerven in de lengterichting in hetzelfde dier.
Dit papier bouwt voort op bestaand werk om de longslagader injectietechniek verder te optimaliseren en leeftijd/grootte gerelateerde grenzen te verleggen naar postnatale dag 1 (P1) om opvallende resultaten op te leveren. Het is vooral handig voor teams die arteriële vasculaire netwerken willen bestuderen. Daarom bieden we nieuwe richtlijnen voor katheterplaatsing/stabilisatie, meer controle over de vulsnelheid/-volume en wijzen we op opmerkelijke valkuilen voor meer castingsucces. Resulterende afgietsjts kan vervolgens worden gebruikt voor toekomstige karakterisering en morfologische analyse. Misschien nog belangrijker, dit is de eerste visuele demonstratie, voor zover wij weten, dat de gebruiker door deze ingewikkelde procedure leidt.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:829px;" width="828">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">1cc syringe</td>
			<td style="width:135px;">Becton Dickinson</td>
			<td style="width:117px;">309659</td>
			<td style="width:346px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">20ml Glass Scintillation Vials</td>
			<td style="width:135px;">Fisher</td>
			<td>03-340-25P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">30G Needle</td>
			<td style="width:135px;">Becton Dickinson</td>
			<td style="width:117px;">305106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">50mL conical tubes</td>
			<td style="width:135px;">Cornin</td>
			<td style="width:117px;">352098</td>
			<td>For sample Storage and scanning</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">60cc syringe</td>
			<td style="width:135px;">Becton Dickinson</td>
			<td style="width:117px;">309653</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">7-0 silk suture</td>
			<td style="width:135px;">Teleflex</td>
			<td style="width:117px;">103-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Analyze 12.0 Software</td>
			<td style="width:135px;">AnalyzeDirect Inc.</td>
			<td style="width:117px;">N/A</td>
			<td>Primary Software</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Amira 6.7 Software</td>
			<td style="width:135px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:117px;">N/A</td>
			<td>Alternative Sofware</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">CeramaCut Scissors 9cm</td>
			<td style="width:135px;">Fine Science tools</td>
			<td style="width:117px;">14958-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Ceramic Coated Curved Forceps</td>
			<td style="width:135px;">Fine Science tools</td>
			<td style="width:117px;">11272-50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:231px;">CO2 Tank</td>
			<td style="width:135px;">Robert&#39;s Oxygen Co.</td>
			<td style="width:117px;">n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Dual syringe pump</td>
			<td style="width:135px;">Cole Parmer</td>
			<td style="width:117px;">EW-74900-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Dumont Mini-Forceps</td>
			<td style="width:135px;">Fine Science tools</td>
			<td style="width:117px;">11200-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Ethanol</td>
			<td style="width:135px;">Pharmco</td>
			<td style="width:117px;">111000200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:231px;">Formalin</td>
			<td style="width:135px;">Sigma - Life Sciences</td>
			<td style="width:117px;">HT501128</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Gauze</td>
			<td style="width:135px;">Covidien</td>
			<td style="width:117px;">441215</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:22px;width:231px;">Hemostat</td>
			<td style="width:135px;">Fine Science tools</td>
			<td style="width:117px;">13013-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:231px;">Heparin (1000USP Units/ml)</td>
			<td style="width:135px;">Hospira</td>
			<td style="width:117px;">NDC 0409-2720-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:231px;">Horos Software</td>
			<td style="width:135px;">Horos Project</td>
			<td style="width:117px;">N/A</td>
			<td>Alternative Sofware</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">induction chamber</td>
			<td style="width:135px;">n/a</td>
			<td style="width:117px;">n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Kimwipe</td>
			<td style="width:135px;">Fisher</td>
			<td style="width:117px;">06-666</td>
			<td>fiber optic cleaning wipe</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Labelling Tape</td>
			<td style="width:135px;">Fisher</td>
			<td style="width:117px;">15966</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Magnetic Base</td>
			<td style="width:135px;">Kanetec</td>
			<td style="width:117px;">N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Micro-CT system</td>
			<td style="width:135px;">SkyScan&#160;</td>
			<td style="width:117px;">1172</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Microfil (Polymer Compound)</td>
			<td style="width:135px;">Flowech Inc.</td>
			<td style="width:117px;">Kit B - MV-122</td>
			<td>8 oz. of MV compound; 8 oz. of diluent; MV-Curing Agent</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Micromanipulator</td>
			<td style="width:135px;">Stoelting</td>
			<td style="width:117px;">56131</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Monoject 1/2 ml Insulin Syringe</td>
			<td style="width:135px;">Covidien</td>
			<td style="width:117px;">1188528012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Octagon Forceps Straight Teeth</td>
			<td style="width:135px;">Fine Science tools</td>
			<td style="width:117px;">11042-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:231px;">Parafilm</td>
			<td style="width:135px;">Bemis company, Inc.</td>
			<td style="width:117px;">#PM999</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">PE-10 tubing</td>
			<td style="width:135px;">Instech</td>
			<td style="width:117px;">BTPE-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Phospahte buffered Saline</td>
			<td style="width:135px;">BioRad</td>
			<td style="width:117px;">#161-0780</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Ring Stand</td>
			<td style="width:135px;">Fisher</td>
			<td style="width:117px;">S13747</td>
			<td>Height 24in.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Sodium Nitroprusside</td>
			<td style="width:135px;">sigma</td>
			<td style="width:117px;">71778-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Steel Plate</td>
			<td style="width:135px;">N/A</td>
			<td style="width:117px;">N/A</td>
			<td>16 x 16 in. area, 1/16 in thick</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;width:231px;">Straight Spring Scissors</td>
			<td style="width:135px;">Fine Science tools</td>
			<td style="width:117px;">15000-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:231px;">SURFLO 24G Teflon I.V. Catheter</td>
			<td style="width:135px;">Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td style="width:117px;">360103</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Surgical Board</td>
			<td style="width:135px;">Fisher</td>
			<td>12-587-20</td>
			<td>This is a converted slide holder</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Universal 3-prong clamp</td>
			<td style="width:135px;">Fisher</td>
			<td style="width:117px;">S24280</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Winged Inf. Set 25X3/4, 12&#34; Tubing</td>
			<td style="width:135px;">Nipro</td>
			<td style="width:117px;">PR25G19</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Zeiss Stemi-508 Dissection Scope</td>
			<td style="width:135px;">Zeiss</td>
			<td style="width:117px;">n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

vascular casting of adult and early postnatal mouse lungs for micro-ct imaging

Bloedvaten vormen ingewikkelde netwerken in de 3-dimensionale ruimte. Daarom is het moeilijk om visueel te begrijpen hoe vasculaire netwerken interageren en zich gedragen door het observeren van het oppervlak van een weefsel. Deze methode biedt een middel om de complexe 3-dimensionale vasculaire architectuur van de long te visualiseren.
Om dit te bereiken, wordt een katheter in gebracht in de longslagader en de vasculatuur wordt tegelijkertijd gespoeld van bloed en chemisch verwijd om weerstand te beperken. Longen worden vervolgens opgeblazen door de luchtpijp bij een standaard druk en het polymeer verbinding wordt toegediend in het vasculaire bed met een standaard stroomsnelheid. Zodra het volledige arteriële netwerk is gevuld en mag genezen, kan de longvaatculatuur direct worden gevisualiseerd of op een micro-CT -scanner (μCT) worden afgebeeld.
Wanneer met succes uitgevoerd, kan men waarderen de longslagader netwerk in muizen, variërend van vroege postnatale leeftijden tot volwassenen. Bovendien, terwijl aangetoond in het longslagaderlijk bed, kan deze methode worden toegepast op elk vaatbed met geoptimaliseerde katheter plaatsing en eindpunten.

Een succesvolle cast zal vertonen uniforme vulling van het gehele longslagadernetwerk. We tonen dit aan in C57Bl/6J muizen variërend in leeftijd: Postnatale dag P90 (Figuur 4A),P30 (Figuur 4B), P7 (Figuur 4C), en P1 (Figuur 4D). Door de snelheid van de stroom te regelen en de vulling in real-time visueel te monitoren, werden betrouwbare eindpunten van de meest desalisch...

Watch this Scientific Journal Video about Vascular Casting of Adult and Early Postnatal Mouse Lungs for Micro-CT Imaging at JoVE.com

Vascular Casting of Adult and Early Postnatal Mouse Lungs for Micro-CT Imaging

Het doel van deze techniek is ex vivo visualisatie van longslagaderlijke netwerken van vroege postnatale en volwassen muizen door middel van longinflatie en injectie van een radio-ondoorzichtige polymeer-gebaseerde verbinding via de longslagader. Mogelijke toepassingen voor gegoten weefsels worden ook besproken.

Vasculaire casting van volwassen en vroege postnatale muislongen voor micro-CT-beeldvorming

Blood vessels form intricate networks in 3-dimensional space. Consequently, it is difficult to visually appreciate how vascular networks interact and ...

Dit protocol geeft nauwkeurige, stapsgewijze richtlijnen voor het gieten van de longslagader vasculatuur in zowel volwassen als vroege postnatale muizen. Deze techniek stelt gebruikers in staat om het hele vasculaire netwerk volledig te casten voor visualisatie door een verscheidenheid aan methoden, waaronder micro-CT, met behoud van de integriteit van weke delen. Deze techniek is vooral handig voor het kijken naar long-vasculaire morfologie en architectuur, maar kan gemakkelijk worden aangepast voor de targeting van andere vasculaire bedden.Net als veel operaties en dissecties, er is geen substituut voor het daadwerkelijk visualiseren van een procedure, en kijkers kunnen profiteren van het zien van een aantal van de meer uitdagende manoeuvres worden uitgevoerd. Zodra het xiphoid proces is blootgesteld, voorzichtig grijpen en verheffen van de ribbenkast. Maak voorzichtig een incisie in het nu blootgestelde, semi-transparante middenrif.De longen zullen zichtbaar instorten, en terugtrekken uit de buurt van het middenrif. Na het blootstellen van de long en luchtpijp, draad 15 centimeter PE10 buizen op de naaf van een 30-gauge naald. En bevestig dit apparaat aan een spuit van 1 milliliter, met 10 aan de 4 molaire natrium nitroprusside, in PBS.Ga de zuiger naar de slang prime totdat alle van de lucht is gezuiverd. Als een effectief alternatief voor de tekst, penetreren de top van het hart aan de ene kant, en passeer de uiteinden van gebogen tangen door de spier, en de andere kant van het weefsel. Pak het ene uiteinde van een lengte van 10 centimeter van 7-0 zijde en trek ongeveer twee centimeter door het weefsel.Na het afbinden van de hechting, gebruik de resterende acht centimeter hechting om het hart caudally te trekken. En plak het einde van de hechting aan de chirurgische raad. Haak de uiteinden van gebogen tang onder zowel de opgaande aorta en longslagader stam.En trek een lengte van drie centimeter van 7-0 zijde terug door de opening om een single-throw losse hechting te creëren. Gebruik een schaar om een een-tot-twee-millimeter incisie te maken naar de top van het hart, het penetreren van de dunwandige rechter ventrikel. En introduceer de geprimede slang in de rechter ventrikel, voorzichtig het bevorderen van de katheter in de semi-transparante, dunwandige longslagader stam.Controleer visueel of de katheter niet in de linker- of rechter longtak is gevorderd en niet op het punt van de longslagadertak. Tape het distale gedeelte van de slang aan de chirurgische raad, en draai voorzichtig de losse hechting rond beide grote schepen. Snijd de acht centimeter stuk hechting om het hart terug te keren naar een natuurlijke rustpositie.En knip het linker orakel van het hart om het perfusaat in staat te stellen de vasculatuur te verlaten. Gebruik vervolgens een spuitpomp om de natrium nitroprusside in te spuiten met een stroomsnelheid van 0,5 ml/min om zowel het bloed te spoelen als de vaatculatuur maximaal te verwijden, totdat het perfusaat helder is. Om de longinflatie-eenheid te construeren, snijdt u de flexibele plastic 24-gauge intraveneuze katheter uit een bad en sluit u aan op de naald van een vlinderinfusieset.Bevestig dit apparaat aan de stopcock, en bevestig de stopcock aan een open 50-milliliter spuit. Na het laden van de spuit met formaline en priming de katheter, met de stopcock gesloten, plaats de spuit in een ring staan, tot het punt waarop de meniscus is 20 centimeter boven de luchtpijp. Plaats twee losse hechtingen, twee tot vier millimeter uit elkaar, inferieur aan het kraakbeen van cricoïde, en gebruik een schaar om een kleine incisie te maken in de cricothyroid ligament, superieur aan de hechtingen.Steek de katheter in de opening en zet de punt voorbij de twee losse hechtingen. Draai de hechtingen rond de luchtpijp aan en open de stopcock om de formaline door de zwaartekracht in de longen te laten komen. Wacht vijf minuten tot de longen volledig opblazen.Als de longen zich hechten aan de ribbenkast tijdens de inflatie, gebruik bot-getipt tangen om de buitenkant van de ribbenkast te grijpen, en beweeg de ribben in alle richtingen om te helpen bij het bevrijden van de lobben zonder direct contact met de longen. Trek na vijf minuten de katheter achter de eerste hechting en ligate in. Trek vervolgens de katheter achter de tweede hechting en ligate in.De longen moeten nu worden opgeblazen in een gesloten, onder druk staat. Om de vasculatuur te werpen, laadt u een milliliter van een 8-1-1-oplossing van polymeerverwijdend middel in een spuit van één milliliter. En steek voorzichtig de zuiger in.Met de spuit omgekeerd, druk de zuiger om de lucht te verwijderen, en om de vorming van een meniscus op het puntje van de spuit mogelijk te maken. Verwijder de natrium nitroprusside spuit uit de naaf van de naald, en druppel toevoeging PBS in de hub, om een meniscus te creëren. Sluit de polymeersamenstellingspuit aan bij de naaf en start de infusie op 0,02 millimeter per minuut.Controleer de verbinding als het beweegt vrij door de slang, wijzend op de spuit volume als het in de longslagader stam. Ga door met de overvloed totdat alle lobben volledig zijn gevuld, tot in het kleinste vat. Stop de pomp, en nogmaals, let nogmaals op de spuit volume.Bedek de longen met een glasvezel reinigingsdoek, en royaal van toepassing PBS. Laat het monster 30 tot 40 minuten ongestoord zitten bij kamertemperatuur. Zodra het polymeer verbinding is genezen en gehard, verbreken de ledematen en de onderste helft van de muis.En plaats het hoofd en de thorax in een 50-milliliter conische gevulde 10% gebufferde formaline, 's nachts. De volgende ochtend, pak de luchtpijp om voorzichtig te scheiden van het hart en de longen eenheid van de resterende ribbenkast en thorax. Plaats het geoogste weefselblok in een met formalin gevulde scintillatieblad.Een succesvolle cast zal resulteren in een uniforme vulling van het gehele longslagadernetwerk. Als er schade is aan de long- of long airways, zullen kleine lekken voorkomen dat de longen druk vasthouden. Fragmentarisch of onvolledig vullen kan ontstaan uit een luchtsluis als gevolg van lucht wordt geïntroduceerd in het vasculaire systeem via de katheter, blokkeren stroomafwaartse stroom van de verbinding.Ondervulling treedt op wanneer er te weinig verbinding in de vasculatuur wordt gebracht. Als alternatief kan overvulling, of de invoering van te veel polymeer verbinding te snel, kan leiden tot arteriële breuk, of, meer in het algemeen, veneuze doorvoer. Het bevorderen van de katheter te ver naar beneden de longstam kan leiden tot de tip te wig in een longslagader tak, het creëren van een onbalans in de stroom, en waardoor de ene kant sneller te vullen dan de andere.Zorgvuldige prestaties van de techniek zoals aangetoond, met behulp van de juiste directe monitoring van distale vasculatuur eindpunten, en standaard infusie tarieven kunnen resulteren in een optimale vulling van longva vasculatuur. Bovendien kan het aanpassen van deze techniek aan de systemische vasculatuur even gunstige resultaten opleveren in andere vaatbedden. Na het gieten kunnen monsters worden verwerkt voor het scannen van micro-computertomografie.Voor nabewerking kan een commercieel softwarepakket worden gebruikt om een 3D-volumeweergave van de long-vasculaire boom te genereren. Bij het proberen van deze techniek voor de eerste keer, vooral voorzichtig zijn rond de fragiele longen, en de longslagader. Belangrijker nog, vermijd de invoering van lucht in het vasculaire circuit.Na een succesvolle cast kan een monster worden gescand door micro-CT, en vragen met betrekking tot vasculaire morfometrie en architectuur kunnen worden onderzocht.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Organotypic Slice Cultures for Studies of Postnatal Neurogenesis

Organotypische Slice Culturen voor Studies van Postnatale Neurogenese

Here we describe a technique for studying hippocampal postnatal neurogenesis in the rodent brain using the organotypic slice culture technique. This ...

Methods for Precisely Localized Transfer of Cells or DNA into Early Postimplantation Mouse Embryos

Methoden voor Juist Gelokaliseerde Overdracht van cellen of DNA in Early postimplantatie muizenembryo&#39;s

Manipulation and culture of early mouse embryos is a powerful yet largely under-utilized technology enhancing the value of this model system. Conversely, ...

Assessment of Maternal Vascular Remodeling During Pregnancy in the Mouse Uterus

Beoordeling van de moeder Vasculaire Verbouwing tijdens de zwangerschap in de muis Baarmoeder

The placenta mediates the exchange of factors such as gases and nutrients between mother and fetus and has specific demands for supply of blood from the ...

Loss- and Gain-of-function Approach to Investigate Early Cell Fate Determinants in Preimplantation Mouse Embryos

Verlies- en Gain-of-function Aanpak Early Cell Fate Determinanten Onderzoek in Pre-implantatie muizenembryo&#39;s

 Gene silencing and overexpression techniques are instrumental for the identification of genes involved in embryonic development. Direct target gene ...

Imaging Cleared Embryonic and Postnatal Hearts at Single-cell Resolution

Imaging Ontruimde embryonale en postnatale Hearts bij Single-cell Resolution

Single clonal tracing and analysis at the whole-heart level can determine cardiac progenitor cell behavior and differentiation during cardiac development, ...

Analysis of Retinoic Acid-induced Neural Differentiation of Mouse Embryonic Stem Cells in Two and Three-dimensional Embryoid Bodies

Analyse van retinoïnezuur geïnduceerde neurale differentiatie van muis embryonale stamcellen in twee en drie-dimensionale embryoiden organen

Mouse embryonic stem cells (ESCs) isolated from the inner mass of the blastocyst (typically at day E3.5), can be used as in vitro model system for ...

Live Imaging of Mouse Secondary Palate Fusion

The fusion of the secondary palatal shelves to form the intact secondary palate is a key process in mammalian development and its disruption can lead to ...

A Novel Use of Three-dimensional High-frequency Ultrasonography for Early Pregnancy Characterization in the Mouse

Een roman gebruik van driedimensionale hoogfrequente Ultrasonografie voor vroege zwangerschap karakterisering in de muis

High-frequency ultrasonography (HFUS) is a common method to non-invasively monitor the real-time development of the human fetus in utero. The mouse is ...

Visualization of Cellular Electrical Activity in Zebrafish Early Embryos and Tumors

Visualisatie van cellulaire elektrische activiteit in de zebravis vroege embryo's en tumoren

Bioelectricity, endogenous electrical signaling mediated by ion channels and pumps located on the cell membrane, plays important roles in signaling ...

Whole-mount Confocal Microscopy for Adult Ear Skin: A Model System to Study Neuro-vascular Branching Morphogenesis and Immune Cell Distribution

Geheel-mount confocale microscopie voor volwassen oor huid: een modelsysteem om te studeren, Neuro-vasculaire vertakkende genuitdrukking en immuun cel distributie